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. Universidad San Francisco de Quito

Manual del Laboratorio de Biologa para Ingenieras

Segundo Semestre 2011- 2012

Autor:

UNIVERSIDAD SAN FRANCISCO DE QUITO

LABORATORIO DE BIOTECNOLOGA DE PLANTAS Semestre 2do, ao 2011-2012 Instructor: Juan Jos Guadalupe

E-mail: juan_jo89@hotmail.com

Horario: LMIJV 2:00-5:00 pm TEMAS A DESARROLLAR

No. 1 TEMA Influencia de la concentracin en la actividad de la amilasa

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Fotosntesis Seleccin Natural Huella Ecolgica Extraccin de ADN

El informe debe ser presentado al final de cada tema, luego que se haya tomado y procesado los datos.

UNIVERSIDAD SAN FRANCISCO DE QUITO LABORATORIO DE BIOLOGA PARA INGENIERAS PRCTICA No. 1 Influencia de la concentracin en la actividad de la amilasa Objetivo: Observar la accin de la enzima amilasa sobre el almidn a distintas concentraciones Visualizar el rompimiento del almidn mediante el marcador lugol

Introduccin: La amilasa se encuentra en la saliva de muchos animales, incluyendo seres humanos, que utilizan el almidn como fuente de alimento. El almidn es la principal reserva de carbohidratos de las plantas; ste es un polisacrido compuesto de un gran nmero de monmeros de glucosa unidos entre s. Por otra parte, la amilasa es la responsable de la digestin preliminar del almidn. En adicin, la amilasa rompe las cadenas de molculas de almidn para transformarlas en azucares simples, rompiendo los enlaces glucosdicos (1,4) del almidn. Ms an, la digestin de este polisacrido requiere otras enzimas presentes en el pncreas y en las secreciones intestinales. Para que se facilite observar el proceso de transformacin del almidn a maltosa se va a utilizar una solucin I2 KI (lugol). Al momento de la implementacin de esta solucin, se observar cambios en el almidn no as en la maltosa, el cambio que se produce es el viraje de color a prpura oscuro. La tasa de desvanecimiento del almidn con distintas concentraciones de amilasa permitir una medicin cuantitativa de la tasa de reaccin. Materiales: Tubos de ensayo 10 tubos de ensayo estndar Lpiz de cera Caja de muestra Agua destilada Vaso de precipitacin con agua destilada Cilindro graduado de 5mL Pipeta calibrada de 1mL 2 Pipetas calibradas de 5mL Pipetas Pasteur desechables Pera Solucin buffer pH= 6.8 Solucin Lugol (I2KI). Solucin de almidn 1% Solucin de amilasa 1%

Procedimiento
Preparar una disolucin de amilasa (tubo de ensayo set 1) a. Numerar 5 tubos de ensayo de 1 a 5 b. Usando los 5mL de la pipeta graduada, aada 5mL de agua destilada en cada tubo. c. Hacer varias disoluciones de la siguiente manera (use una probeta) Tubo1: aadir 5mL de amilasa y mezclar frotando el tubo entre sus manos (disolucin 1:1; 0.5% de amilasa) Tubo2: aadir 5mL de solucin de amilasa del tubo 1 y mezclar (disolucin 1:3; 0.25% de amilasa) Tubo3: aadir 5mL de solucin de amilasa del tubo 2 y mezclar (disolucin 1:7; 0.125% de amilasa) Tubo4: aadir 5mL de solucin de amilasa del tubo 3 y mezclar (disolucin 1:15; 0.063% de amilasa) Tubo5: aadir 5mL de solucin de amilasa del tubo 4 y mezclar (disolucin 1:31; 0.031% de amilasa) Lave correctamente la probeta 1. Preparar los tubos de ensayo (set 2) a. Numere un segundo set de cinco tubos de ensayo de 1 al 5. b. Comience con el tubo 5 del primer set, transfiera 2mL de la disolucin en el tubo 5 del segundo set. Use una pipeta de 5mL para hacer la transferencia. Lave la pipeta en agua destilada y repita el procedimiento para los tubos 4, 3 y 2 transfiriendo 2mL al tubo 4 del primer set al tubo 4 del segundo set y sucesivamente. c. Aadir 40 gotas de pH 6.8 de la solucin buffer a cada tubo in el segundo set, Mezclar los tubos adecuadamente entre sus manos y colocar los tubos a un lado. d. Usando el segundo set de tubos, proceda con la prueba empezando con el tubo 5 de este set (1) Utilice una pipeta limpia de 1mL y aada 1mL de la solucin de almidn 1% al tubo 5 y mezcle el tubo entre sus manos. Registrar el tiempo (se llamara tiempo 0) (2) Rpidamente remueva una gota de la mezcla a la pipeta Pasteur desechable, y aadir 1 gota de lugol en el primer compartimiento de la caja de muestra nombrada como tiempo 0. (3) Testear la reaccin de la mezcla en intervalos de tiempo de 10 segundos, cada tiempo usando un compartimiento de la caja de muestras. Contine hasta que el color azul desaparezca y el lugol contine de color amarrillo mbar (indicador de la digestin dl almidn). Registre el tiempo que tomo la digestin del almidn.

(4) Repetir los pasos 1-4 para las otras 4 concentraciones de los tubos 4,3,2 y 1 del set 2 de los tubos de ensayo) 2. Finalice creando la tabla de resultados en la cual se registrara los mismos, y establezca sus conclusiones as como tambin sus discusiones.

UNIVERSIDAD SAN FRANCISCO DE QUITO LABORATORIO DE BIOLOGIA PARA INGENIERAS PRCTICA No. 2 FOTOSNTESIS Objetivos Visualizar en tiempo real la produccin de oxigeno en hojas de espinaca Demostrar la importancia de la fuente de carbono y luz en las plantas la fotosntesis Introduccion
La fotosntesis es un proceso metablico cuyo objetivo es transformar la energa solar en energa qumica al formar carbohidratos. Los organismos fotosintticos, como plantas, algas y cianobacterias son llamados auttrofos ya que producen su propio alimento. En trminos generales el proceso involucra la liberacin de oxgeno, la utilizacin de dixido de carbono y luz para la sntesis de compuestos orgnicos: CO2 + H2O + LUZ C6H12O6 + H2O + O2

El proceso de fotosntesis se lleva a cabo en los cloroplastos, los cuales constan de una membrana externa, otra interna y una serie de sacos denominados tilacoides. El espacio que se encuentra al interior de este organelo est cubierto por un fluido denominado estroma. La fotosntesis consta de dos etapas. En la primera, denominada Etapa Lumnica, la cual se inicia cuando los pigmentos, que se encuentran en las membranas de los tilacoides, absorben diferentes longitudes de onda de la luz, desencadenando una secuencia de transporte de electrones, en cuyo proceso se sintetiza ATP (Adenosin Trifosfato) y se reduce NADP+ (Nicotiamida- Adenina Dinucleotido fosfato), formndose el NADPH, otro producto de la etapa lumnica es el oxgeno. En la segunda etapa, Fijacin del Carbono, se sintetizan glcidos a partir del CO2 junto con los productos de la etapa anterior. En esta etapa se realiza el Ciclo de Calvin. La enzima que interviene se denomina RuBisCO (Rubolosa bisfosfato carboxilasa-oxigenasa) y est encargadas de fijar el CO2 atmosfrico para producir gluccidos. El NADPH+ H+ acta como agente reductor en la fijacin de carbono para la formacin de hexosas, de esta manera al oxidarse (donar sus electrones al CO2) puede continuar el ciclo como NADP+

Tomado de: Curtis, Barnes, Schnek y Massarini. Biologa de Curtis. Sptima edicin. Editorial Mdica Panamericana. 2008.

La fotosntesis permiti la evolucin de la vida en la tierra convirtiendo la atmsfera anoxignica, permitiendo la aparicin de organismos que usan oxigeno para vivir. Objetivos Comprender la importancia del Carbono y la luz para el proceso de la Fotosntesis Visualizar la produccin de oxigeno producto de la fotosntesis de hojas de espinaca

Materiales

Agua Perforadora Hojas de espinaca Solucin de Bicarbonato de sodio 0.2M Pinzas Jeringa 10cm3 Fuente de Luz Soporte para tubos

Procedimiento Usando la perforadora hacer 20 discos de hoja de espinaca que previamente sumergidas en agua toda la noche (se usan las hojas ms oscuras) Dentro de la jeringa colocar los discos, con la ayuda de las pinzas llevar los disco al fondo de la jeringa Aadir el mbolo de la jeringa y empujar casi hasta llegar al fondo Tomar 10 cm3 de la solucin de bicarbonato de sodio

Tapando la punta de la jeringa con el dedo, usar el mbolo para sacar todo el aire de la jeringa y de los discos, en este paso los disco perdern su flotabilidad y caern al fondo de la jeringa Cuando todas las hojas hayan llegado al fondo expulsar la solucin de bicarbonato de sodio de la jeringa Absorber 10 cm3 de agua sin bicarbonato en la jeringa que contiene los discos Colocar la jeringa en el soporte para tubos sobre la fuente de luz y esperar a que 5 de los discos floten (debido a la produccin de oxgeno) por arriba de los 5 cm3 Llenar la tabla 1 que se presenta a continuacin

Tabla 1.Con Luz / Solucin de Bicarbonato Observaciones Con Luz / Sin Solucin de Bicarbonato Sin Luz / Solucin de Bicarbonato Sin Luz / Sin Solucin de Bicarbonato

UNIVERSIDAD SAN FRANCISCO DE QUITO LABORATORIO DE BIOLOGIA PARA INGENIERAS PRCTICA No. 3 SELECCIN NATURAL Objetivos Observar en un periodo corto de tiempo el proceso de evolucin mediante seleccin natural Conocer la importancia de la seleccin natural como un principio de la Evolucion

Introduccin Se sabe por el registro fsil que las especies cambian (evolucionan) a travs del tiempo. Darwin argument y ha sido subsecuentemente confirmado, que el principal mecanismo para el cambio evolutivo es el proceso de la seleccin natural. Dado que la teora de evolucin es el principio unificante ms importante en biologa, la importancia de entender la seleccin natural es obvia. El problema es que bajo la mayora de condiciones los procesos son relativamente lentos, y ocurren despus de varias generaciones. A excepcin de organismos como las bacterias, las cuales bajo presin de seleccin (antibiticos), pasan por procesos de adaptacin en poco tiempo gracias a tiempos cortos de generacin. As, en estos organismos se puede observar seleccin nicamente de aquellos que puedan tolerar los antibiticos Afortunadamente, con modelos de simulacin se puede estudiar la seleccin natural de manera fcil y rpida. Por muchos aos los bilogos han usado simulaciones como una herramienta para el entendimiento de los procesos ecolgicos y evolutivos. Estas simulaciones pueden ser extremadamente complejas y requieren el uso de una computadora, o pueden tomar la forma de juegos relativamente simples. En este laboratorio se propondr un juego que simula la interaccin entre predadores y presas en varias generaciones. Al final de este ejercicio se deber entender de mejor manera cmo la seleccin natural cambia el componente gentico en una poblacin. Factores importantes para que la seleccin natural ocurra Variabilidad: Los individuos dentro de una misma poblacin deben ser diferentes unos de otros. Estas diferencias pueden involucrar caractersticas como la resistencia al fro, la susceptibilidad a enfermedades, la eficiencia de fotosntesis, la habilidad de atraer parejas, para nombrar algunas. Heredabilidad: parte de la variabilidad entre individuos debe tener una base gentica. As, la descendencia se asemejar a los padres y tendr los mismos atributos. Reproduccin diferencial: Los individuos con ciertas caractersticas dejarn ms descendencia que otros. Puede ser porque sobreviven ms (animales ms rpidos son
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mejores escapando de predadores) o porque tienen un tasa de reproduccin ms alta (aves con plumajes ms coloridos podran atraer ms al sexo opuesto). Bajo estas condiciones las caractersticas de los individuos ms exitosos se volvern ms comunes en la poblacin. De hecho, el ambiente seleccionar a estas caractersticas sobre las dems. Este proceso de reproduccin diferencial de los individuos ms aptos en una poblacin es la seleccin natural. En esta simulacin se observar la evolucin por seleccin natural de dos caractersticas, camuflaje en una poblacin de presas y la agudeza visual en predadores. Cada individuo en la poblacin tiene un nmero que indica la efectividad de su camuflaje (en el caso de presas) o visin (en el caso de predadores). Durante la simulacin, los individuos que sobrevivan se reproducirn peridicamente. Como en la naturaleza, la descendencia es similar, pero no idntica, a sus padres. En esta simulacin, la seleccin resulta de la mortalidad diferencial; las presas con un camuflaje pobre son ms propensas a morir a manos de predadores y los predadores con poca agudeza visual son ms propensos a morir de hambre. Materiales Tablero del juego Fichas diferenciadas para predadores y presas Calculadora

Mtodos Inicialmente asegurarse de tener 16 fichas de predadores y 16 fichas de presas (cada ficha estar marcadas, segn la Tabla 1, con nmeros del 2 al 8 segn la agudeza visual de cada depredador o la capacidad de camuflaje de cada presa. Las piezas de los predadores tendrn tambin un nmero que indica la generacin a la que pertenecen) (Figura 1) Figura 1. Esquema de cmo debe ser una ficha de predador y de presa.

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0

Puntaje de agudeza visual Generacin

4
Presa

Puntaje de camuflaje

Predador

Preguntas Cul es el promedio de valores iniciales de camuflaje en la poblacin de presas? Cul es el promedio de valores iniciales de agudeza visual en la poblacin de predadores?

Una persona en cada grupo estar encargada de tomar los datos, otra persona se encargar de dictar la distribucin aleatoria de los mismos segn la tabla que se les entregar en clase. En la primera ronda se colocarn las fichas en el tablero segn la distribucin dictada por la persona encargada. Despus de que las fichas que representan a ambas poblaciones han sido situadas en el tablero, los predadores tendrn la oportunidad de comer y de reproducirse nicamente si existen presas en el mismo espacio (cuadro) con menor valor de camuflaje que la agudeza visual del predador. Despus de comer el predador se reproduce y la presa es eliminada del tablero. o Si existen dos predadores en el mismo espacio, el que tenga mayor agudeza visual comer. o Si hay dos presas, la que tenga peor camuflaje ser comida. o Un predador solo puede alimentarse de una presa, se alimenta y se reproduce. o Al alimentarse el predador se reproducir dando lugar a 2 descendientes, uno con un nmero mayor al del padre y el otro con un nmero menor. o Si existen presas an en el cuadro, la descendencia podr alimentarse y reproducirse en el mismo turno si su agudeza visual se lo permite. o Se debe marcar a cada descendiente con la ronda a la que pertenece. En la primera ronda los predadores que no han comido no morirn de hambre. Todas las presas que se encuentren vivas y que se encuentre solas en su sitio se reproducirn de igual manera dando lugar a un individuo con un puntaje mayor y a otro con un puntaje menor.

Segunda Ronda Quitar todas las fichas del tablero y posicionarlas nuevamente al azar, los predadores comen y se reproducen al igual que en la primera ronda pero los que nazcan llevarn el nmero 2 indicando que nacieron en la segunda ronda. Si al finalizar esto quedan predadores que no han comido, stos mueren y son retirados del tablero; as todos los predadores que queden en el tablero que tengan el nmero 0 (que indica que estuvieron desde el inicio) sern eliminados. Las presas se reproducen al igual que en la ronda anterior. Se toman los datos. Seguir con una tercera, cuarta y quinta ronda. Al final de cada ronda se deben calcular los promedios de agudeza visual para los predadores y de camuflaje para las presas y registrarlos en la Tabla 2. En la ltima ronda (quinta ronda) llenar la Tabla 3. Finalmente, graficar en las Figuras 3los datos obtenidos con el fin de comparar visualmente las poblaciones en las diferentes generaciones (rondas).

Preguntas: 1. Existi un aumento o una disminucin en la capacidad de camuflaje en las presas desde la generacin (ronda) 0 hasta la quinta generacin? A qu atribuye el cambio registrado? 2. Existi un aumento o una disminucin en la agudeza visual en los predadores desde la generacin (ronda) 0 hasta la quinta generacin? A qu atribuye el cambio registrado? 3. Cules son los factores de seleccin que actuaron en la evolucin de las poblaciones estudiadas?

Tablas Tabla 1. Distribucin inicial de frecuencias para las caractersticas en las poblaciones de predadores y presas
# de fichas presas 1 2 3 4 3 2 1 16 # de fichas predadores 1 2 3 4 3 2 1 16

Valores de camuflaje / visin Psimo 2 3 4 5 6 7 Excelente 8 Total # piezas:

Tabla 2 : Anotar el puntaje promedio y el nmero de individuos vivos al final de cada ronda
POBLACIN PRESAS Promedio # individuos camuflaje vivos 5.0 16 POBLACIN PREDADORES Promedio # individuos agudeza visual vivos 5.0 16

RONDA 0 1 2 3 4 5

Tabla 3.- Anotar los resultados finales de puntajes de presas y predadores en la quinta ronda y luego graficarlos en la Figura 3.
Puntaje 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 # Presa # Predadores

Figura 1. Distribucin inicial y final (Hacer) de los valores de camuflaje en las presas y de agudeza visual en los predadores

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Figura 3.- Comparacin del promedio de agudeza visual de predadores y de camuflaje de presas por generaciones y tamao de poblacin de predadores y presas

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UNIVERSIDAD SAN FRANCISCO DE QUITO LABORATORIO DE BIOLOGIA PARA INGENIERAS PRCTICA No. 4 Huella Ecolgica Objetivos Conocer el parmetro de huella ecolgica como un indicador del impacto del ser humano en su entorno Comprender la importancia de cambiar nuestro hbitos con el fin de preservar los recursos naturales Introduccin La comprensin de los impactos del crecimiento poblacional es uno de los desafos ambientales ms importantes a los que nos enfrentamos actualmente. Como se analizo durante la parte terica del curso, la discusin sobre si el crecimiento de la poblacin humana es un problema global, va mucho ms all del nmero de personas que cada ao se aaden a la poblacin humana del planeta. Adems del tamao de la poblacin, los impactos humanos estn fuertemente influidos por el acceso a la tecnologa y el nivel de riqueza. En este contexto, para evaluar la sustentabilidad de los patrones de consumo de recursos, es importante contar con herramientas que cuantifiquen el impacto ambiental de diferentes estilos de vida. En esta prctica se va a explorar una herramienta para clculo de huella ecolgica. Esta herramienta estima la cantidad de terreno que se necesita para producir toda la materia prima consumida por una persona especfica, junto con la cantidad de terreno que se necesita para eliminar o reciclar los desechos que produce. Generalmente las calculadoras de huella ecolgica (HE) proveen una huella total expresada en acres o hectreas, que se puede desglosar en cuatro categoras: alimentacin, bienes y servicios, vivienda, y movilidad). Sumando la HE de diferentes regiones, podemos hacernos una idea de cuan sostenibles son nuestros estilos de vida, en relacin con la cantidad de tierra biolgicamente productiva que existe en el planeta. De la misma manera podemos comparar las diferencias entre el tamao de la HE de varias regiones y explorar cuales son los aspectos de nuestro estilo de vida que ms contribuyen a nuestra HE.

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Mtodos

1.- Empieza calculando tu propia HE. Antes de comenzar el ejercicio, estima y anota cuntas hectreas de terreno crees que se requieren para sostener tu estilo de vida (1 ha = 10.000 m2). Recuerda que la cantidad de terreno biolgicamente productivo que existe en el planeta es de 1,82 ha/persona.

2.- Selecciona el lenguaje en el que quieres hacer la simulacin y elije el sistema mtrico internacional para las unidades de medida. En la parte inicial tendrs que responder algunas preguntas acerca de tu gnero y edad, y del tamao de la ciudad en la que vives. A continuacin, contestars 16 preguntas para la estimacin de tu HE bajo cuatro categoras (alimentacin, bienes y servicios, vivienda, y movilidad). Completa el ejercicio y anota cuntas hectreas mide tu HE?

2.1. Cuntas ha mide tu HE para cada categora? Categora Alimentacin Bienes y servicios Vivienda Movilidad Huella (ha) ecolgica

2.2.- Cmo se compara tu HE con la del promedio nacional para tu regin? 2.3. Cuntos planetas se necesitaran si es que todos los humanos tuvieran tu mismo estilo de vida? 3.- Ahora recalcula tu HE para determinar que variables son las que influyen ms significativamente sobre tu HE. Para hacerlo necesitars correr la modelacin varias veces, cambiando sistemticamente los valores de diferentes categoras. 3.1. Qu categoras o variables contribuyen mayormente a tu HE? 3.2. Siendo realista, qu cambios estaras dispuesto a hacer en tu estilo de vida para reducir el tamao de tu HE? 3.3. Crees que es posible vivir en el Ecuador un estilo de vida que requiera menos terreno que el promedio global de 1,82 ha/persona de terreno biolgicamente productivo?

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3.4. Qu cambios deberan darse para que esto pueda suceder? 4.- Buscando informacin relevante, calcula la HE para un individuo promedio de un pas desarrollado (e.g. Estados Unidos o Alemania) y de un pas menos desarrollado que el nuestro. Para hacerlo tendrs que hacer algunas suposiciones acerca de cmo vive un individuo promedio de esos pases.
Pas Desarrollado Pas Huella de Alimentacin (ha) Huella de Movilidad (ha) Huella de Vivienda (ha) Huella de Bienes y servicios (ha) Huella Total Pas menos desarrollado

4.1. En tu criterio, qu variables son las que ms contribuyen a las diferencias entre la HE de pases desarrollados vs pases en vas de desarrollo? 4.2. Crees que los pases con mayores HEs son necesariamente los pases donde mejor vie la gente? Porqu? 5.- Durante el laboratorio renete con un grupo de cinco estudiantes y, utilizando los datos de toda la clase, calcula el promedio y el rango de valores de HE para todo tu paralelo. 5.1. Cmo se compara este promedio con los de otros i) Ecuador, y ii) otros pases? 5.2. Coincidieron dentro de tu grupo las variables que ms contribuyen a la HE? Porqu? 6.- Discusin general 6.1. Qu opinin tienes acerca de este clculo? 6.2. Podemos realmente cambiar aspectos de nuestro comportamiento para reducir nuestra HE? Qu factores s y que factores no?

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6.3. Crees que necesariamente existe una correlacin entre la HE y el bienestar de los habitantes de un pas? En otras palabras, se puede tener un buen estndar de vida y al mismo tiempo tener una huella ecolgica pequea? O quizs lo que consideramos buen vivir est necesariamente ligado a grandes huellas ecolgicas y acelerada explotacin de recursos naturales? Discute estas preguntas en clase y en las conclusiones de tu informe.

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UNIVERSIDAD SAN FRANCISCO DE QUITO LABORATORIO DE BIOLOGIA PARA INGENIERAS PRCTICA No. 5 Extraccin de ADN PROTOCOLO CASERO PARA EXTRACCION DE ADN DE CEBOLLA

Objetivos Comprender la importancia de aislar material gentico de una clula como la premisa de la realizacin de estudios moleculares Conocer los principios bsicos de una metodolgica de extraccin de ADN casera

Introduccin El ADN es una molcula que se encuentra en todas las clulas de los seres vivos, sean estos procariotas o eucariotas. Es una molcula larga que forma una doble hlice, compuesta de subunidades llamadas nucletidos y cada nucletido consta de tres partes: un grupo fosfato, una azcar denominada desoxirribosa, y una de cuatro posibles bases nitrogenadas, que son adenina (A), guanina (G), timina (T) y citosina (C). El ADN es una molcula formada por dos hebras que se encuentran unidas por enlaces dbiles (puentes de hidrgeno) entre las bases nitrogenadas. Para entender la importancia del ADN, es necesario entender qu es un gen. Dentro de la cadena de ADN existen regiones que codifican o crean protenas y regiones que no, las regiones que codifican para hacer protenas se denominan genes. Dentro de una cadena de ADN, la secuencia de bases nitrogenadas puede variar de un individuo a otro, y es por esto que el cdigo de ADN es nico para cada individuo. Para entender mejor esto se puede hacer una analoga con las letras y el lenguaje; depende de la disposicin de las letras para formar palabras y dependiendo de la disposicin de las letras formarn diferentes palabras que tendrn diferentes significados. De manera similar, un gen debe tener las bases correctas en secuencia adecuada. As como afecto y efecto tienen diferentes significados y ofecto no significa nada, las distintas secuencias de las bases de ADN pueden codificar diferentes tipos de informacin formando diferentes tipos de caractersticas como el color de los ojos, tipo sanguneo, el color de las flores, forma de alas, entre muchas otras caractersticas. Siendo el ADN una molcula tan importante y tan llena de informacin, surgen diferentes usos en diversas reas como la medicina para el diagnstico de enfermedades, la ecologa para determinar la diversidad de una especie dentro de una poblacin, investigacin forense para identificacin de individuos de inters en investigaciones criminales, biotecnologa en tcnicas como ingeniera gentica, etc.

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Materiales Cebolla fresca Papaya Mortero Papel filtro de caf Pinza Tubo de vidrio largo con boca ancha

Reactivos Detergente/solucin de sal: o 20 ml detergente (para lavar ropa) o 20 g NaCl o 180 ml agua destilada 10 mL de jugo de papaya o (para que el jugo de papaya no est con impurezas es importante cernirlo con un papel filtro para caf) Solucin salina al 5% (NaCl) Metodologa. Macerar una porcin de cebolla en un mortero junto con 50 mL de detergente/solucin de sal Filtrar la mezcla con un filtro para caf y colocarla en un tubo de vidrio largo Colocar los 10 mL de jugo de papaya en el tubo de vidrio y mezclar suavemente Colocar 20 mL de etanol al 70% a temperatura de hielo y dejarlo reposar de 1 a 5 minutos, esto servir para separar el ADN del resto de compuestos. Pronto se podr observar que el ADN empieza a flotar entre la capa de etanol y la mezcla anterior. Para poder recuperar el ADN es necesario usar una pinza, para trasladarlo a un tubo eppendorf en donde se le agregara 1000 uL de Solucion salina al 5% para conservarlo.

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Anexo No. 1: Modelo del Informe de Laboratorio El informe debe constar de un mximo de 4 pginas y debe incluir: INTRODUCCIN Basado en informacin bibliogrfica especializada, indique el o los principios cientficos en que se fundamenta el tema de la prctica. Haga una reflexin sobre la importancia que tendra la prctica en trminos de aprendizaje, y aplicacin futura en la produccin o para estudiar y entender los fenmenos biolgicos de las plantas. Redactar en tiempo presente e impersonal y citar a los autores de la bibliografa consultada. METODOS Describir los procedimientos (a manera de prrafo) usados en la prctica. La descripcin del procedimiento se debe hacer en tiempo pasado e impersonal (ej. Se prepar). RESULTADOS Presentar los datos obtenidos en la prctica usando cuadros, tablas, figuras o fotos. Cada uno de stos debe estar identificado con un nmero en forma secuencial creciente, y un ttulo, por ejm: Cuadro No. 1.- Nmero de explantes brotados; Cuadro No. 2; ..... etc. Figura No. 1; Foto No. 1, etc. La informacin contenida en los cuadros, tablas, figuras o fotos debe ser descrita en forma concisa y usando el tiempo pasado, haciendo referencia al nmero del cuadro, figura, tabla o foto del (la) cual se est hablando. DISCUSIN Es la interpretacin de los resultados a la luz de los conocimientos cientficos vigentes. Se debe hacer uso extensivo de bibliografa especializada a la cual se debe tambin identificar por medio de una cita entre parntesis (Ejm. Arias, 1990). Escribir en tiempo presente e impersonal. CONCLUSIONES Citar los aspectos ms relevantes encontrados con la realizacin de la prctica y que merecieron especial atencin durante la discusin. Son sentencias cortas en tiempo presente. BIBLIOGRAFA Citar en orden alfabtico de autor los libros, artculos de revistas, o pginas web de donde se obtuvo la informacin usada para realizar el informe. Los datos a consignar son:

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