Conceptos Bsicos en Biotecnologa Moderna

Ingrid Schuler, Ph.D Unidad de Biotecnologa Vegetal Pontificia Universidad Javeriana

Curso Bsico Nivel I: Bioseguridad Alimentaria para el sector salud Junio 1 de 2005

Contenido
1. Historia de la Biotecnologa 2. Principios bsicos para la transformacin gentica utilizando la Biotecnologa Moderna 3. Aplicaciones de la biotecnologa moderna 4. Obtencin de Organismos Genticamente Modificados vs Convencionales

Toda aplicacin tecnolgica que utilice sistemas biolgicos y organismos vivos y sus derivados, para la creacin o modificacin de productos o procesos, para usos especficos (CDB)

...es BIOTECNOLOGA

La Biotecnologa comprende conocimientos de distintas reas de la ciencia

Inmunologa Biologa Celular y molecular y Virologa Bioqumica

Fisiologa Vegetal

Biotecnologa

Agricultura

Salud

Industria de alimentos

Conservacin del Medio ambiente

Biotecnologa Tradicional
8000 AC : Domesticacin

Fermentacin

Egipto: 2000-1800 AC

Biotecnologa Clsica

Regeneracin de Plantas

Transferencia de material gentico

Pomate: Planta estril G. Melchers, 1978

Papa

Tomate
Microinyeccin

Biotecnologa Moderna
Es la aplicacin de los avances cientficos con el fin de transferir genes de una especie a otra, para mejorar sus caractersticas o responder a necesidades especficas

Tecnologa del ADN recombinante (rADN)

Tecnologa de Genes

o 1980: Plantas transgnicas

Washington University in St. Louis (Missouri) University of Wisconsin
Rijksuniversiteit in Ghent (Belgium) Monsanto Company in St. Louis (Missouri)

o o o

Permite realizar cruces ms distantes No se inserta el total de los genes nicamente se insertan los genes seleccionados

Estructura y Composicin del DNA

GEN

Molcula de DNA Proteina

Etapas para la Transformacin Gentica

1. Identificacin del gen de inters 2. Construccin y clonacin del transgen 3. Transformacin 4. Seleccin de plantas transformadas 5. Regeneracin de plantas transformadas
(OGM)

Identificacin del Gen de Inters

Remocin del gen de inters

enzimas de restriccin

Estructura del Gen

Construccin del Transgen

Gen Marcador de seleccin: Resistencia a antibiticos

Gen de inters

Gen reportero

Kan

35S CaVM

Nos

GUS

Promotor Incia la transcirpcin Controla la expresin del gen

Gen de terminacin

CLONACIN del transgen

Promotor

Gen de inters

Terminador Orgen de replicacin

Sitio de clonado

Gen reportero GUS

Gen marcador de seleccin en bacterias

Plsmido Recombinante

Fuente: REDBIO-FAO

Transformacin por Biolstica

DNA
Partculas de oro o tungsteno

Gen insertado Cromosoma vegetal

Clula vegetal transformada

Fuente: Monsanto

Principios de la Transformacin por Biolstica

Agrobacterium tumefaciens
genes vir
bordes del T-ADN

Plsmido Ti

Cromosoma bacteriano
(no se transfiere)

T-ADN
Segmento que se transfiere

Transferencia del transgen a la planta

Plsmido

Transgen

Seleccin de Explantes Transformados

Deteccin por prueba histoqumica del gen GUS

Deteccin por Southern blot

Deteccin utilizando Microarreglos (Microarrays-microchips)

Inmunodeteccin

POSITIVO

NEGATIVO

Semilla o tejido vegetal macerada y puesta en contacto con solucin Buffer

Gene Check-Protena

Regeneracin de plantas

Estudios de Bioseguridad

Principales campos de Aplicacin de la Biotecnologa

Salud Humana y Animal

Sistema de diagnstico de enfermedades

Estudios de paternidad y medicina forense

Terapia gnica

Industria Farmacutica

Metabolitos secundarios a partir de plantas

Produccin de Vacunas

Industria y Alimentos

Produccin de
aditivos: ctricos Saborizantes Alcohol carburante Yogurt y quesos Detergentes: lipolasas para degradacin de cidos grasos

Medio Ambiente

Biorremediacin: bacterias-petrleo Manejo de residuos slidos:

degradacin

Biolixiviacin: recuperacin de metales

por solibilizacin

Diagnstico y deteccin calidad de sustancias: sustancias bioindicadores

Agricultura

Estudios de taxonoma y sistemtica

Sistemas de deteccin de virus en plantas

soya tolerante a glifosato, maz Bt y algodn Bt

Generaciones de Cultivos GM
1a Generacin: caractersticas agronmicas Agricultor 2a Generacin: caractersticas nutricionales Consumidor 3a Generacin : caractersticas procesamiento Industria

Algunos desarrollos

Los Cultivos Genticamente Modificados y Los obtenidos por Mtodos Convencionales

Hibridacin
(Cruzamiento)

Especie 1

Autofecundacin y seleccin

Especie 2

Hibrido nter-especfico

Del ancestro al cultivo

Transferencia de UN solo gen Hibridizacin de DOS genomas