UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA Facultad de Ciencias de la Salud Escuela Profesional de Medicina Humana Ctedra de Fisiologa Humana-

IV Ciclo Prctica de Fisiologa Renal Pncreas Endocrino.Diabetes Mellitus. Dr. Carlos Ramrez Velasco Los investigadores expertos del Nacional Diabetes Group , la Organizacin Mundial de la Salud(WHO) y la asociacin Norteamericana para la Diabetes han propuesto los criterios diagnsticos para la Diabetes Mellitus desde el ao 2004 basados en las siguientes premisas: 1) El espectro de la glucosa plasmtica en ayunas, y la reaccin a una carga oral de glucosa varan entre las personas normales, y 2) la Diabetes Mellitus se define como un nivel de glicemia en el cual se producen complicaciones especficas de la Diabetes ms que como desviaciones a partir de una media basada en la poblacin.Por ejemplo, la prevalencia de retinopata en algunas personas empieza a manifestarse en un nivel de glucosa en ayunas de 116 mg% La Tolerancia a la glucosa se clasifica en tres categoras con base a las cifras de glucosa plasmtica en ayunas: 1.- La una cifra plasmtica en ayunas de glucosa(CPGA) menor de 100 mg% se considera normal 2.- Una CPGA de mayor de 100 mg% pero menor de 126 mg% se define como glucosa en ayunas alterada (GAA) 3.- Una CPGA de 126 mg% mas justifica establecer el diagnstico de Diabetes Mellitus. La CGA es equivalente a la tolerancia a la glucosa disminuda (TGD) que se define como las concentraciones de Glucosa de 140 a 200 mg% dos horas despus de recibir una carga oral de glucosa de 75gm.Las personas con glucosa en ayunas alterada o con tolerancia a la glucosa disminuida estn en riesgo sustancial de desarrollar Diabetes Mellitus tipo 2 (40% de riesgo durante los siguientes cinco aos) y enfermedad cardiovascular. Los criterios revisados de diagnostico de la DM resaltan que la glucosa plasmtica en ayunas es el mtodo mas fiable y cmodo de diagnostico de DM en sujetos asintomticos. Una concentracin de glucosa plasmtica mayor o igual a 200 mg% tomada al azar y acompaada de los sntomas clsicos DM. (Poliuria, polidipsia, y perdida de peso ) basta para el diagnostico de DM. La prueba de sobrecarga oral de glucosa, aunque sigue siendo un mtodo valido de diagnstico de DM, no se recomienda como parte de la atencin sistemtica. Estos criterios deben ser satisfechos para hacer el diagnstico de DM.y las anormalidades indicadoras de DM deben persistir en estudios repetidos antes de hacer el diagnstico definitivo DM a menos que se encuentren trastornos metablicos agudos concentraciones plasmticas de glucosa notablemente elevadas. Los criterios revisados permiten adems eliminar el diagnstico de DM en las situaciones en las que CPGA se normaliza.

CUADRO RESUMEN: Criterios para el diagnstico de la DM: Criterios Diagnsticos de la Diabetes Mellitus Sntomas de Diabetes mas concentracin de Glucosa sangunea al azar igual o mayor de 200 mg% Glucosa Plasmtica en ayunas igual mayor de 126 mg % Glucosa plasmtica a las 2 horas igual mayor 200 mg % durante una Prueba de Tolerancia a la Glucosa

.Se define como azar la extraccin de sangre sin tener en cuenta el tiempo transcurrido desde la ltima toma de alimento Se define como ayunas la ausencia de ingesta calrica durante al menos 8 hora La Prueba de Tolerancia a la glucosa debe realizarse con una carga de glucosa que contenga el equivalente a 75 gramos de glucosa anhidra disuelta en agua; no se recomienda en la prcti8ca clnica sistemtica. En ausencia de hiperglicemia inequvoca y descompensacin metablica aguda debern confirmarse estos criterios mediante repeticin de estos estudios en un da distinto. EJECUCION DE LA PRACTICA: En la prctica obtendremos una muestra despus de 8 horas de ayuno. Luego haremos ingerir oralmente una dosis de carga de 75 gm de glucosa disueltos en 350 ml de agua hervida y fra. Luego extraeremos muestras de sangre venosa cada 30 minutos, durante dos horas. Procederemos luego a realizar los dosajes de glucosa en las respectivas muestras . Emplearemos el mtodo enzimtico de la Glocosa oxidasa. FUNDAMENTO del METODO: Consiste en oxidar la glucosa hasta cido glucnico por medio de la enzima Glucosa oxidasa. El cido glucnico formado, en presencia del fenol y aminofenazona forma un complejo coloreado de quinona cuya intensidad de color es proporcional a la concentracin de glucosa en la muestra. El reactivo de Trabajo usado en el dosaje contiene la enzima ,el fenol , aminofenazona y Peroxidasa. EQUIPOS ,MATERIALES Y REACTIVOS: Espectrofotmetro y microcubetas descartables. Bao Mara elctrico de temp constante de 37C 04 Pipetas de 20 lambdas( 0.020 ml ) automticas. Pipetas de 2 ml de vidrio graduadas al dcimo. Tubos de prueba sin reborde de 12 x 75 ml. Gradillas para Bao Mara.

REACTIVOS: Reactivo Standard de Glucosa : 100 mg % Agua destilada Reactivo de Trabajo: Preparar 250 ml as: Agua destilada ..125 ml Aminofenazona AF ................. 12.5 ml Fenol (55mmol/Lt)..............12.5 ml Agua destil . .100 ml GOD/POD( Glucosa oxidasa, Peroxidasa) 0.75 ml) Mezclar por inversin suave .No agitar. Fechar. PROCEDIMIENTO: Seguir exactamente de acuerdo al cuadro siguiente: Carga Glucosa 75 gm

Tubo Standard Ayu Blank 100 mg% nas Agua destil (lambdas) 20 Standard 100 mg% ( lambdas) 20 Muestra de Ayunas ( lambdas) 20 Muestra de 30 min (lambdas) Muestra de 60 min (lambdas) Muestra de 90 min (lambdas) Muestra de 120 min (lambdas) Reactivo de Trabajo (ml) 2 2 2

30 60 90 120 min min min min

20 20 20 2 2 2 20 2

Mezclar suavemente, por rotacin. Incubar a 37C durante 10 minutos. Colocar Espectrofotmetro en 505 nm Insertar el tubo blank en el Espectrofotmetro y colocar Absorbancia en Cero Luego leer la Absorbancia del Standard. Anotar . Lectura absorbancia de tubos: Ayunas, 30, 60,90 y 120 minutos. Anotar las absorbancias de cada uno. CALCULOS: F ACTOR DE CALIBRACIN (F) = 100 Abs.Stand F F F F F x x x x x Abs. Ayunas Abs 30 min Abs 60 min Abs 90 min Abs 120 min = = = = = mg % ayunas mg % 30 min mg% 60 min mg% 90 min mg % 120 min

Con estos resultados empleando una grfica de ejes coordenados construir una curva de Tolerancia a la glucosa , en papel milimetrado, colocando en las abscisas los tiempos y en las ordenadas los valores de glucosa encontrados. Sealar con una flecha el momento de la carga de glucosa Interprete los resultados segn lo indicado en la introduccin de esta prctica. Referencias: National Diabetes Group USA -2004 WHO (World Health Organization) American Diabetes Association. Harrison:s Principios de Medicina Interna.16 ava Ed.