Centro de Bachillerato Tecnolgico industrial y de Servicios 134

Materia: RTMB

MANUAL DE PRCTICAS DE LABORATORIO

Profra.: Q.B.P. Virginia Gmez Ruz Alumnos: Ayala Guzmn Ricardo Cotino Njera Sandra Paola Falcn Molina Jess Eduardo Godoy Rodrguez Didin Yamileth Hernndez Arana Eder Daniel Romn Villalobos Diana Nohem 2 semestre grupo: B Equipo:

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PRCTICA: EXTRACCIN SANGUNEA CON VACUTAINER

OBJETIVO GENERAL Obtener una muestra de sangre empleando el sistema Vacutainer (tcnica de extraccin sangunea) utilizando el material adecuado y haciendo uso correcto de los reactivos conforme a las normas de seguridad del laboratorio. OBJETIVOS ESPECFICOS Aprender a diferenciar los deferentes sitios de venopuncin para la extraccin sangunea.

Aprender a interpretar los resultados de la prctica de acuerdo al fundamento de la tcnica de extraccin sangunea con Vacutainer

Poner en prctica la NOM-166 (Organizacin y funcionamiento de los laboratorios clnicos) y la NOM-087 (Proteccin ambiental-salud ambiental-Residuos Peligrosos Biolgico Infecciosos- Clasificacin y especificaciones de manejo)

INTRODUCCIN Vacutainer TM es una marca comercial de Becton Dickinson and company para un tubo de ensayo especficamente diseado para la venopuncin. Fue desarrollado en 1947 por Joseph Kleiner. El sistema consiste en extraer sangre intravenosa al vacio y especficamente de la regin cubital del brazo. Se trata de un tubo de vidrio al vacio con un tapn de plstico blando, que permite que lo atraviese una aguja mediante una leve presin. Existen varios tipos de Vacutainer que se diferencian por el color de su tapn. Cada color de tapn indica el aditivo, o ausencia del mismo, contenido en el tubo. Por ejemplo, los tubos de color lila o violeta contienen EDTA; los de tapn azul celeste contiene citrato, etc. La ventaja del Vacutainer es que la persona que toma la muestra no entra en contacto con la aguja, evitando as el riesgo de contagio. PRINCIPIOS Primero se realiza la puncin con una aguja hipodrmica que se encuentra en un contenedor de plstico traslucido. La aguja tiene doble terminacin, la segunda aguja que es ms corta, se encuentra envuelta por razones de seguridad. Cuando el tubo del Vacutainer se empuja en el contenedor, la tapa de goma es perforada por la segunda aguja y la diferencia de presiones entre el volumen de sangre y el vacio del tubo provoca que la sangre atravieses la aguja para ser recolectada en el tubo. El tubo ya cargado puede retirarse y ser reemplazado por otro sin usar. Es importante quitar el tubo antes de extraer la aguja, ya que todava el tubo continuo succionando por vacio y provocara dolor al retirarse. Los tubos tienen tapas de colores distintos para categorizarlos, usualmente incluyen aditivos que se mezclan con la sangre cuando es extrada y la tapa del tubo indica de qu aditivo se trata.
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Las tapas son opacas para tubos con vacio normal. Las tapas traslucidas contienen un vacio menos para el mismo tamao de tubo, y se recargar con menor sangre debido a una menor succin, esto es ideal para venas de menor tamao. Como la succin de los tubos esta estandarizada, pueden provocar el colapso, de venas delicadas, como la de personas mayores. Para esos casos es mejor el uso de una jeringa. MATERIAL - Torniquete - Jabn antibacterial - Servitoallas, franela o maquitel - Bata - Etiquetas identificativas - Sistema Vacutainer (base, aguja, y tubo de tapn lila) - Algodn ( torundas con alcohol) REACTIVOS - EDTA: anticoagulante contenido en el tubo Vacutainer - Alcohol. PROCEDIMIENTO Preparar el material Identificar al paciente Explicar al paciente el procedimiento que vamos a realizar Lavado de manos con agua y jabn Colocarse los guantes desechables Colocar cmodamente al paciente para el procedimiento

 Colocar compresor (torniquete o ligadura) por encima del sitio de puncin, para producir ingurgitacin de la vena Seleccionar el vaso mediante el tacto, as determinaremos la profundidad, calibre, elasticidad, etc. Tambin se puede localizar la vena por inspeccin (color azulado) Desinfectar el punto de puncin con torundas impregnadas de alcohol de 70% Pinchar la piel y posteriormente la vena en direccin contraria al flujo sanguneo, con un ngulo entre 15 y 30 respecto a la piel, con el bisel de la aguja hacia arriba Colocar el tubo en el adaptador de vacio para recoger la sangre Retirar el torniquete Sacar el tubo Vacutainer del adaptador Presionar suavemente con una torunda en el rea de puncin y retirar la aguja Retirar el material usado Etiquetar la muestra Lavado de manos

RESULTADO La tcnica empleada fue el mtodo de extraccin sangunea con Vacutainer, obteniendo un total de seis muestras por equipo. La prctica se desarrollo por parejas, una vez que la profesora dio una explicacin sobre el procedimiento segn la tcnica en cada mesa o equipo.

El rea de trabajo con las condiciones de higiene y seguridad conforme a las normas 166 y 087, dio como resultado una buena organizacin y desarrollo pleno de la extraccin sangunea. Otro resultado importante de la prctica fue el aprendizaje sobre el manejo correcto de los materiales y procedimiento de la prctica, tales como la identificacin del sitio de venopuncin mediante el tacto y el manejo adecuado de la aguja para llevar a cabo la venopuncin.

OBSERVACIONES - Antes de iniciar la prctica las mesas se limpiaron y desinfectaron con una franela hmeda y cloro.

Lavado de manos antes de la extraccin.

Organizacin del material

- Se coloco el torniquete sobre la zona de puncin

- Detectar la vena

- Se limpia el sitio de puncin con una torunda y despus se pincha la piel con la aguja.

- Se meti el tubo en la base para recolectar la sangre y posteriormente ya recaudada la sangre se retiro el tubo.

- Se quito el torniquete, con una torunda se presiono suavemente y se retiro la aguja.

- Se depositaron las agujas y tubos en bolsas adecuadas. Y posteriormente se limpio nuevamente la mesa de trabajo.

DISCUSIN El sistema consiste en extraer sangre al vaco y especficamente de la regin cubital del brazo. Se trata de un tubo de vidrio con un tapn de plstico blando, que permite que lo atravieses una aguja mediante una leve presin. Existen varios tipos de Vacutainer que se diferencian por el color de su tapn. Cada color de tapn indica el aditivo, o ausencia del mismo contenido en el tubo. Por ejemplo, los tubos de tapn de color lila o violeta contienen EDTA; los de tapn celeste contienen citrato de sodio, etc. La ventaja del Vacutainer es que la persona que toma la muestra no entra en contacto con la aguja, evitando as el riesgo de contagio. Una desventaja de emplear el sistema Vacutainer, es que la succin de los tubos est estandarizada, llegando a provocar el colapso de venas delicadas, como la de personas mayores. El equipo nmero 9 alcanzo los objetivos planteados en la prctica Todos obtuvieron una muestra y aprendieron a aplicar el procedimiento de la tcnica de extraccin sangunea con Vacutainer siguiendo al pie de la letra las normas 166 y 087.

CONCLUSIN En el desarrollo de la prctica se empleo el sistema Vacutainer; una tcnica de extraccin sangunea. Antes, durante y despus de la extraccin se pusieron en prctica las normas 166 y 087 al portar una bata, al emplear el material correcto y hacer una buena disposicin de los desechos, as como tambin una limpieza adecuada del rea de trabajo. Se obtuvo un aprendizaje ptimo al conocer y tener un fundamento terico sobre la tcnica del uso del Vacutainer y de las normas antes mencionadas. Como resumen general de la prctica se aprendi el procedimiento para llevar a cabo la extraccin sangunea con el Vacutainer.

CUESTIONARIO 1. Qu es el Vacutainer y cuando fue desarrollado? Vacutainer TM una marca comercial de Becton, Dikinson and company para un tubo de ensayo especficamente diseado para la venopuncin, fue desarrollado en 1947 por Joseph Kleiner.

2. De dnde se extrae la sangre con el Vacutainer? Especficamente de la regin cubital del brazo.

3. Describe como es el Vacutainer Es un tubo de vidrio al vacio con tapn de plstico blando, que permite que lo atraviese una aguja mediante una leve presin.

4. Qu indica el color del tapn del Vacutainer? Cada color indica el aditivo, o ausencia del mismo contenido en el tubo.

5. Cul es la ventaja del Vacutainer? Evita el riesgo de contagio de la persona que toma la muestra, ya que no entra en contacto con la aguja.

6. Qu sustancias puede contener el tubo Vacutainer? Puede ser anticoagulantes (EDTA, citrato de sodio, heparina) o un gel con densidad intermedia entre las clulas y el plasma sanguneo.

7. Qu otros materiales son necesarios para realizar la extraccin sangunea con Vacutainer? El torniquete, el adaptador del tubo, aguja hipodrmica y torundas de alcohol.

8. Cul es una desventaja de emplear este mtodo? Puede provocar el colapso de venas delicadas, como la de personas mayores.

9. Qu sucede si se ocupa un tubo equivocado? Puede provocar reacciones adversas en la muestra de sangre, y ocasionar que no pueda ser utilizada luego para su procesamiento.

10.Qu se hace cuando un tubo no ha sido tratado con un agente coagulante? Se centrifuga, el lquido claro es el plasma que contiene plaquetas.

BIBLIOGRAFA http://.medicinapreventiva.com http://www.youtube.com/watch2v=1MmsxrwdA2n Hematologa 2009 El Servidor Espaa: SL

PRCTICA: GRUPOS SANGUNEOS

OBJETIVO GENERAL Realizar las pruebas de aglutinacin de los diferentes grupos sanguneos que existen para determinar el grupo sanguneo y el factor RH de cada compaero del saln. OBJETIVOS ESPECFICOS. - Tabular los datos y comparar la prevalencia que existe entre los grupos sanguneos y el factor RH de los compaeros del saln.

- Conocer nuestro grupo sanguneo por nosotros mismo.

- Analizar resultados de la prctica de acuerdo al fundamento de la clasificacin de los grupos sanguneos y determinacin del factor RH, mediante la aglutinacin.

INTRODUCCIN Un grupo sanguneo es una clasificacin de la sangre de acuerdo a las caractersticas presentes o no, en la superficie de los glbulos rojos y en el suero de la sangre. Las dos clasificaciones ms importantes para describir grupos sanguneos en humanos son los antgenos (el sistema ABO) y el factor RH. La sangre es un tejido liquido que est compuesto por diferentes tipos de clulas: glbulos blancos, plaquetas, as como de una sustancia intercelular que las transporta, denominada plasma. La sangre de todas las personas no es idntica. En la membrana celular de los glbulos rojos existen unas protenas, los aglutingenos, que impiden que la sangre de una persona pueda mezclarse con la de otra. A su vez, el plasma transporta unos anticuerpos, llamados aglutininas, que pueden reaccionar con los aglutingenos de los glbulos rojos de otras personas, dando lugar a su destruccin (hemlisis). Cuando las aglutininas de unas personas no reaccionan con los aglutingenos de los glbulos rojos de otra, se dice que sus sangres son compatibles y, por lo tanto es posible realizar una transfusin sangunea. En 1900, Karl Landsteiner descubri estos fenmenos y descubri los grupos sanguneos ms importantes, en dependencia del aglutingeno que tuviesen presente en la membrana de sus glbulos rojos, denominadas A (cuando fuese el aglutingeno A), B (cuando fuese el B), AB (cuando fuese AB) y O (cuando no tiene ningn aglutingeno). En general, un grupo sanguneo es cada uno de los diversos tipos en que se ha clasificado la sangre de las personas en relacin con la compatibilidad de los hemates y suero de otro individuo donador de sangre con los hemates y suero de otro individuo que la recibe. La determinacin de estos grupos sanguneos, que al principio se limitaban a las secciones de donantes y receptores para la transfusin sangunea, se ha extendido a la determinacin de la paternidad y a la identificacin en criminologa.

Estos grupos son cuatro, segn la clasificacin que hizo Landsteiner, y hoy universalmente son: O, A, B y AB MATERIAL 2 lancetas Frasco con torundas de alcohol 4 portaobjetos 4 gasas Etiquetas 4 aplicadores de madera Jabon antibacterial Franela Cubrebocas Servitoallas Bata

REACTIVOS

Anti-A, Anti-B, Anti-AB y Anti-D PROCEDIMIENTO Limpiar cuidadosamente la piel (dedo) en el sitio de puncin y a su alrededor con una torunda mojada en algn desinfectante, como alcohol de 70% Secar el area con una gasa estril seca.

 Puncionar con una lanceta estril o aguja desechable. El movimiento debe ser rpido y la puncin suficientemente profunda para asegurar que la sangre fluya libremente. La salida de la sangre puede facilitarse ejerciendo una suave presin en la cara lateral del dedo. A cierta distancia del sitio de puncin. La sangre deber fluir libremente. Si se ejerce demasiada presin se diluirn con los lquidos tisulares, lo que puede hacer inapropiada para su estudio. Descartar siempre la primera gota de sangre, limpindola con una gasa seca y dejar el sitio de puncin limpio y seco. Obtener la cantidad requerida de muestra, aspirando la sangre con pipeta o colocndola en un portaobjetos. Colocar una gota de sangre en cada portaobjetos, previamente limpios y marcados con el nombre para no confundirse Aada a la primera gota de sangre una gota de suero Anti-B, a la segunda, una gota de suero Anti-B, a la tercera una gota de suero Anti-AB, y la cuarta una gota de suero Anti-D o RH Con ayuda de un aplicador de madera, mezclar cada uno de ellos, (debe emplearse un segmento de aplicador para cada uno) Agite suavemente cada una de los portaobjetos con movimientos suaves y circulares de balanceo durante 30 segundos aproximadamente. Lea el resultado, si hay duda, dejar reposar el portaobjetos por un minuto aproximadamente y leer nuevamente hemoaglutinacin.

RESULTADO Nombre: Jess Eduardo Falcn Molina Edad: 15 aos. Sexo: Masculino

Fecha: 14-03-2011 Grupo Sanguneo: O Factor RH: positivo

La aglutinacin se present en el portaobjetos con la etiqueta ANTI-D determinando que el grupo sanguneo es O y el factor RH positivo.

Nombre: Ricardo Ayala Guzmn Edad: 16 aos. Sexo: Masculino

Fecha: 14-03-2011 Grupo Sanguneo: A Factor RH: positivo

La aglutinacin se present en el portaobjetos con la etiqueta ANTI-A determinando que el grupo sanguneo es A y el factor RH positivo.

Nombre: Sandra Paola Cotino Njera Edad: 15 aos. Sexo: Femenino

Fecha: 14-03-2011 Grupo Sanguneo: A Factor RH: positivo

La aglutinacin se present en el portaobjetos con la etiqueta ANTI-A determinando que el grupo sanguneo es A y el factor RH positivo.

Nombre: Didin Yamileth Godoy Rodrguez Edad: 15 aos. Sexo: Femenino

Fecha: 14-03-2011 Grupo Sanguneo: A Factor RH: positivo

La aglutinacin se present en el portaobjetos con la etiqueta ANTI-A determinando que el grupo sanguneo es A y el factor RH positivo.

Nombre: Diana Nohem Romn Villalobos Edad: 16 aos. Sexo: Femenino

Fecha: 14-03-2011 Grupo Sanguneo: O Factor RH: positivo

La aglutinacin se present en el portaobjetos con la etiqueta ANTI-D determinando que el grupo sanguneo es O y el factor RH positivo.

Nombre: Eder Daniel Hernndez Arana Edad: 16 aos. Sexo: Masculino

Fecha: 14-03-2011 Grupo Sanguneo: A Factor RH: positivo

La aglutinacin se present en el portaobjetos con la etiqueta ANTI-A determinando que el grupo sanguneo es A y el factor RH positivo.

A continuacin se muestra una grfica sobre el tipo de sangre y factor RH del saln.

30 25 20 15 10 5 0 "O" + "A" + "A" "B" +

OBSERVACIONES

- Antes de iniciar la prctica, las mesas se limpian con una franela hmeda y con cloro.

- Lavado de manos y organizacin del material.

- Limpieza de los portaobjetos y desinfeccin de los mismos.

- Desinfectar el rea y con una lanceta de punciona el rea eliminando la primera gota.

- Se coloco una gota de sangre en cada portaobjetos y se limpio el dedo.

- Se coloco una gota de cada reactivo en el portaobjetos (ANTI-A, ANTI-B, ANTI-D)

- Se mezcla la sangre y el reactivo con un aplicador y se espera la reaccin de aglutinacin.

DISCUSIN

Los grupos sanguneos son una clasificacin de los diversos tipos de sangre: A, B, AB, O aadiendo el factor RH.

La sangre es un tejido lquido que est compuesto por diferentes tipos de clulas, se dice que la sangre de los humanos no es la misma ya que en la membrana de los glbulos rojos existen caractersticas que las hacen nicas, dependiendo as, del grupo sanguneo y factor RH.

Con ayuda de los reactivos Anti-A, Anti-B y Anti-D se observ la reaccin de aglutinacin de la sangre, lo que permiti determinar el grupo sanguneo y el factor RH, al cual perteneca cada uno de los integrantes del equipo.

La clasificacin de la sangre en grupos sanguneos se estableci en 1900 por el cientfico Karl Lansteiner, que hoy en da se utiliza para investigaciones de criminologa, paternidad y para efectuar transfusiones sanguneas.

CONCLUSIN

La sangre de todos los seres humanos, a pesar de ser un tejido del cuerpo, no es la misma en cada individuo, ya que est constituida por glbulos rojos en los cuales se encuentran un conjunto de antgenos., lo que hace la diferencia de la sangre de varias personas.

En 1901, el sistema ABO fue descubierto por Karl Lansteiner, convirtindolo en el primer grupo sanguneo conocido; su nombre proviene de los tres tipos de grupos que se identifican, los del antgeno A, de antgeno B y de antgeno O.

Al trmino de la prctica en el laboratorio, se comprendi la diferencia de los tipos de sangre en cada alumno del saln, y el graficar los datos se estableci la prevalencia de cada grupo sanguneo y su factor RH.

Conocer nuestro grupo sanguneo y factor RH es muy importante, ya que cuando es necesario una transfusin de sangre en grupos incompatibles se puede provocar una reaccin inmunolgica que puede desembocar en hemlisis, anemia, fallo renal, shock o muerte.

CUESTIONARIO

1. Qu son los grupos sanguneos? Un grupo sanguneo es una clasificacin de la sangre de acuerdo con las caractersticas presentes o no en la superficie de los glbulos rojos y en el suero de la sangre.

2. Qu determina el factor RH? La existencia de un aglutingeno en los glbulos rojos en la sangre.

3. Para qu nos sirve conocer nuestro grupo sanguneo? Para poder donar o recibir transfusiones de sangre, se pueden realizar investigaciones en criminologa y para verificar la paternidad. 4. En qu ao y quin estableci la clasificacin de los grupos sanguneos? En 1901 por Karl Landsteiner

5. Cules son las clasificaciones ms importantes de los grupos sanguneos? A+, AB+, BO+, OAB+ y AB6. Qu es la aglutinacin? Cuando un antgeno particular reacciona con su anticuerpo especifico

7. Qu reactivos se emplearon en la prctica?

>Anti-A >Anti-B >Anti-D

8. Qu se encuentra en la membrana de los glbulos rojos? Unas protenas llamadas aglutingenos.

9. Qu es la hemlisis? Cuando un antgeno particular reacciona con su anticuerpo especfico.

BIBLIOGRAFA

http://www.semarnat.gob http://www.monografias.com/grupos-Sanguineos

Enciclopedia Encarta 2007 MICROSOFT OFFICE.

PRCTICA: SEPARACIN Y ENVASADO DE LOS RPBI

OBJETIVO GENERAL

Aprender a separar y envasar los residuos peligrosos biolgicoinfecciosos que se producen al desarrollar practicas escolares en el laboratorio de acuerdo a la NOM-087-ECOL-2007

OBJETIVOS ESPECFICOS

- Conocer la NOM-087-ECOL-2007, proteccin ambiental-salud ambiental. Residuos peligrosos biolgico- infecciosos, -clasificacin y especificaciones de manejo.

- Conocer e identificar los diferentes tipos de RPBI segn la NOM087-ECOL-2007 que se desechan en las prcticas escolares en el laboratorio.

- Emplear los recipientes o contenedores adecuados para un correcto envasado y posteriormente una adecuada clasificacin de los mismos.

INTRODUCCIN

Cuando se habla de RPBI, nos referimos a todo aquel residuo que contenga agentes biolgico- infecciosos que puedan causar algn dao a la salud, por lo que se deben establecer los procedimientos adecuados de manejo y tratamiento con respecto a la normatividad vigente.

Los residuos peligrosos biolgico- infecciosos (RPBI), son aquellos que se generan durante las actividades asistenciales a la salud de humanos o animales en los centros de salud, laboratorios clnicos o de investigacin, bioterios, centros de enseanza e investigacin, principalmente; que por el contenido de sus componentes puedan representar un riesgo para la salud y el ambiente.

Los RPBI representan un riesgo a la salud y al ambiente por sus caractersticas, ya que pueden contener agentes biolgico- infecciosos que se definen como cualquier organismo capaz de producir enfermedades cuando est presente en concentraciones suficientes (inculo), en un ambiente propicio (supervivencia), en un hospedero susceptible y en presencia de una va entrada.

La Ley General del Equilibrio Ecolgico y la Proteccin al Ambiente, define como residuo peligroso a todos aquellos residuos en cualquier estado fsico que por sus caractersticas corrosivas, reactivas, explosivas, toxicas, inflamables y biolgico- infecciosas, representan un peligro para el equilibrio ecolgico o el ambiente, mismos que sern manejado en trminos de la propia ley, su Reglamento y Normas Oficiales Mexicanas (NOM) que expida la Secretaria de Ambiente y Recursos Naturales (SEMARNAT). Sangre Cultivos y cepas de agentes infecciosos Patolgicos Muestra biolgica Residuos no anatomicos Objetos punzocortantes. MATERIAL -Lancetas -gasas -aplicadores de madera -algodones usados -bolsas rojas y negras PROCEDIMIENTO La recoleccin dentro de las instituciones se debe llevar a cado mediante el seguimiento de la NOM-087-SSA-2002, para lograr la estandarizacin del RPBI en todas las reas donde se generen.

 Cada rea debe especificar el RPBI que genera as como su clasificacin. TIPO DE RESIDUOS Sangre Cultivos y cepas de agentes infecciosos Patolgicos Lquidos Residuos no anatmicos Objeto punzocortante Slidos Lquidos Slidos Recipiente hermtico Bolsa de polietileno Recipiente hermtico Recipientes rgidos polipropileno Amarillo Rojo Rojo Rojo EDO. FSICO Lquidos Slidos Slidos ENVASADO Recipiente hermtico Bolsas de polietileno Bolsa de polietileno COLOR Rojo Rojo Amarillo

IDENTIFICACIN: cada rea de recoleccin debe contar con el material especifico para la identificacin de RPBI generado para ser recolectado

EQUIPO DE SEGURIDAD: la recoleccin se debe hacer con equipo lo suficientemente seguro como traje especial, guantes, cubrebocas y zapatos especiales para la proteccin del recolector.

RESULTADO Las lancetas se depositaron en el contenedor rojo.

Las gasas, algodones y aplicadores de madera con sangre seca, se colocaron en las bolsas de color negro y los portaobjetos, se lavaron y esterilizaron con cloro.

OBSERVACIONES - Se identifican todos los materiales que se ocuparon en la prctica grupos sanguneos

- Se separan de acorde a sus caractersticas.

- Despus de haber identificado el material, estos se dispusieron en el contenedor correcto.

- Los portaobjetos se esterilizaron al lavarlos con agua y cloro.

- Se limpio la mesa con una franela con agua y cloro.

DISCUSIN Al referirnos a los RPBI hablamos de aquellos residuos que contienen agentes biolgico- infecciosos. Durante la prctica se emplearon materiales punzocortantes (lancetas), torundas de alcohol al 70%, se ocuparon gasas, portaobjetos y aplicadores de madera. De acuerdo a la correcta clasificacin de los RPBI, las lancetas se depositaron en un bote de color rojo, segn lo seala la NOM-087-ECOL2002, y los materiales como torundas con alcohol, gasas y aplicadores de madera en una bolsa negra. Los portaobjetos, tambin considerados RPBI podan depositarse en el bote rojo o lavarlos con agua y cloro, para reutilizarlos. El propsito de la separacin y envasado de los RPBI es la correcta disposicin de los mismos, ocupados en la prctica anterior, (Grupos Sanguneos), para prevenir serios problemas a la salud humana y al medio ambiente, como lo maraca la NOM-087-ECOL-2002.

CONCLUSIN En esta prctica de Separacin y envasado de los Residuos Peligrosos Biolgico- Infecciosos se adquirieron conocimientos sobre la correcta clasificacin de los RPBI que producimos al realizar prcticas en el laboratorio con base en la NOM-087-ECOL-2002, as como los diferentes recipientes o contenedores que son necesarios para envasarlos. Con base en la NOM-087-ECOL-2002, los objetos punzocortantes fueron depositados en un contenedor de color rojo, mientras que las torundas con alcohol, gasas, aplicadores de madera, fueron colocados en la bolsa negra ya que no se consideran agentes biolgico- infecciosos. Una correcta disposicin de los RPBI previene serios problemas a la salud y al medio ambiente. CUESTIONARIO 1. Qu significan las siglas RPBI? Residuos Peligrosos Biologico- Infecciosos

2. Qu son los RPBI? Son aquellos materiales generados durante los servicios de atencin mdica que contengan agentes biolgico-infecciosos y que pueden causar efectos nocivos a la salud y al ambiente.

3. Cules son los diferentes RPBI? -Sangre -Cultivos y cepas de agentes infecciosos -Muestra biolgica -Residuos no anatmicos

-Objetos punzocortantes

4. Cmo se clasifican? -Residuos slidos en bolsa roja -Residuos lquidos en un contenedor hermtico rojo -Residuos patolgicos slidos en una bolsa amarilla -Residuos patolgicos lquidos en un contenedor hermtico amarillo -Residuos punzocortantes.

5. Qu evitamos al envasar y separar correctamente los RPBI? Efectos nocivos a la salud y al medio ambiente.

6. De qu materiales estn hechos los contenedores para el envasado de RPBI? Recipientes hermticos, bolsas de polietileno y recipientes rigidos de polipropileno.

7. Qu colores se emplean para su clasificacin? Rojo y amarillo.

8. Qu RPBI se generaron en la prctica? Objetos punzocortantes, residuos no anatmicos.

9. Cul es el objetivo de la NOM-087-ECOL-2002? Establece la clasificacin de los residuos peligrosos biolgicoinfecciosos as como las especificaciones para su manejo.

10.Qu materiales no se consideraron RPBI en la prctica? Algodones, gasas, aplicadores de madera.

BIBLIOGRAFA

NOM-087-ECOL-2002 http://es.escribd.com/doc/314998166 http://www.dgepi.salud.dog.mx

PRCTICA:

CLASIFICACIN DE LOS REACTIVOS

OBJETIVO GENERAL Identificar los diferentes reactivos que se manejen en un laboratorio, clasificarlas de acuerdo a su peligrosidad y conocer sus riesgos y precauciones para evitar daos a la salud.

OBJETIVOS ESPECIFICOS Identificar la informacin que contiene cada etiqueta de los reactivos que se emplean en el laboratorio (nombre, calidad de reactivo, formula, peso molecular, riqueza, impureza, pictograma, frase R y S). Clasificar los reactivos segn su peligrosidad (pictograma) en corrosivos, explosivos, inflamables, txicos, etc.

Conocer las medidas de seguridad y las precauciones que cada frasco reactivo brinda, para evitar un mal uso de este o dao irreversibles a la salud de quien los maneje.

INTRODUCCION

Un reactivo es, toda sustancia que interacta con otra en una reaccin qumica que da lugar a otra sustancia de propiedades, caractersticas y conformacin distinta, denominadas productos de reaccin o simplemente productos. Por tratarse de compuestos qumicos, los reactivos se pueden clasificar segn muchas variables: propiedades fsica-qumicas, reactividad en reacciones qumicas, caractersticas del uso del reactivo. Sin embargo, por tratarse del concepto de reactivo la clasificacin ms adecuada en este caso sera la de caractersticas de su uso, segn la cual se clasifican en el uso al que estn destinados los reactivos. Esta clasificacin viene dada en el envasado del reactivo, y depende del tratamiento que se le haya dado, de su riqueza, de su pureza que determina el uso qumico que se lo se va a poder dar, teniendo en cuenta la precisin, exactitud y el error absoluto que se ha de tener en la operacin qumica a realizar. As los reactivos se pueden clasificar en: PB: Destinados a bioqumica. PA: Destinados a aplicaciones analticas. QP: Qumicamente puro, desatinado a uso general en el laboratorio. DC: Destinados a las aplicaciones del anlisis clnico.

La pureza de los reactivos es fundamental para la exactitud que se obtiene en cualquier anlisis. En el laboratorio se dispone de distintos tipos de reactivos (slidos, lquidos o disoluciones preparadas) tal y como se comercializan.

MATERIAL

- Bata - Cubre bocas - Distintos frascos reactivos (corrosivos, inflamables, venenosos, etc.) PROCEDIMIENTO Todo envasado de reactivo debe llevar obligatoriamente, de manera legible e indeleble, una etiqueta bien visible que contenga las distintas indicaciones que se muestran en las siguientes figuras:

Los pictogramas, las frases de riesgo (frases R) y las frases de seguridad (frases S) aparecen en las etiquetas del producto informando sobre la peligrosidad del mismo.

 Frases R. Riesgos especficos atribuidos a las sustancias peligrosas:

R1. Explosivos en estado seco

R10. Inflamable R23. Txico por inhalacin R38. Irrita la piel Frases S. Consejos de prudencia relativos a las sustancias peligrosas.

S3. Consrvese en un lugar fresco S22. No respirar el polvo S29. No tirar los residuos por el desage S50. No mezclar con (especificar producto). MANEJO DE REACTIVOS Al trabajar con cualquier reactivo se deben tomar todas las precauciones necesarias para evitar la contaminacin accidental del mismo. Para ello han de seguirse las siguientes reglas:

Escoger el grado del reactivo apropiado para el trabajo a realizar, y siempre que sea posible, utilizar el frasco de menor tamao. Tapar inmediatamente el frasco una vez extrado el reactivo, para evitar posibles confusiones con otros frascos. Sujetar el tapn del frasco con los dedos; el tapn nunca debe dejarse sobre el puesto de trabajo. Evitar colocar los frascos destapados en lugares en que puedan ser salpicados por agua u otros lquidos. Nunca devolver al frasco original cualquier exceso de reactivo o de disolucin. Mantener limpios y ordenados los estantes de reactivos y las balanzas. Limpiar inmediatamente cualquier salpicadura. Rotular cualquier disolucin o frasco de reactivo cuya etiqueta original se haya deteriorado.

RESULTADO

CORROSIVAS

DAO

MEDIDAS DE SEGURIDAD
-Mantener los recipientes secos y alejados de los alimentos -mantener cerrados -Evitar el contacto con la piel -Evitar inhalar vapores -Evitar contacto con los ojos y la piel -Evitar ingerir -No ingerir -No inhalar -Evitar contacto -Ventilacin adecuada -Evitar contacto

PROTECCIN

PICTOGRAMA

-Acido Actico Glacial 100%

Irritacin de la piel

-Guantes -Cubre boca -Bata

-Formaldehido

-Dao a la salud

-Guantes -Cubre boca -Bata

-Acido Clorhdrico

-Severas quemaduras en todo el cuerpo -Cambio qumico violento -Daos a la Salud

-Guantes -Cubre boca -Bata -Guantes -Cubre boca -Bata -Guantes -Cubre boca -Bata

-Hidrxido de Sodio

-Perxido de hidrxido

-Uso exclusivo en el Laboratorio

VENENOSOS
-Azul de metileno -Wright

DAO
-Muy inflamable -Puede causar ceguera

MEDIDAS DE PROTECCIN SEGURIDAD

-Mantngase alejado de los nios -rea ventilada -Quitar ropa contaminada -Bata -Guantes -Guantes -Cubre boca -Bata -Guantes -Cubre boca -Bata

PICTOGRAMA

-Lquido de Hauen

INFLAMABLES
-Glicerol

DAO

MEDIDAS DE SEGURIDAD
-Consrvese en envase bien cerrado

PROTECCIN
-Guantes -Cubre boca -Bata -Lentes de seguridad -Guantes -Cubre boca -Bata

PICTOGRAMA

-Wright

-Puede ser fatal o causar ceguera si se ingiere -Produce vapores dainos -Si se ingiere causa ceguera o muerte -Provoca vmito

-Evitar inhalacin -rea ventilada -Mantener alejado del calor, chispas o flama -No deje que penetre en la piel, ojos y ropa. -Mantener alejado del calor, chispas o flama -Bien tapada - Evitar respirar el vapor y el contacto con ojos, piel y ropa. -No se exponga al calor, chispas o flama. -Evite respirar el vapor. -Consrvese en envase bien cerrado

-Giemsa

-Guantes -Cubre boca -Bata

-Acetona

-Guantes -Cubre boca -Bata -Guantes -Bata -Seguridad con careta -Extinguidor -Lentes de seguridad -Bata

-cido Actico -Fucsina fenicada en solucin

-Quemaduras graves

OBSERVACIONES

 Se limpio el rea de trabajo con una franela, agua y cloro al inicio y final de la prctica.

En cada mesa haban frascos con reactivos.

Identificamos las etiquetas y los clasificamos segn su smbolo de riesgo.

 Elaboramos tablas en las que sealamos el reactivo, su riesgo, precauciones, medidas de seguridad y pictogramas.

DISCUSION

Al trabajar con cualquier reactivo se deben tomar todas las precauciones necesarias para evitar la contaminacin ambiental del mismo. Para ello han de seguirse las siguientes reglas: Escoger el grado de reactivo apropiado para el trabajo a realizar, y siempre que sea posible, utilizar el frasco de menor tamao. Tapar inmediatamente el frasco una vez extrado el reactivo, para evitar posibles confusiones con otros frascos. Sujetar el tapn del frasco con los dedos; el tapon nunca debe dejarse sobre el puesto de trabajo. Evitar colocar los frascos destapados en lugares en que puedan ser salpicados por agua u otros lquidos. Nunca de devolver al frasco original cualquier exceso de reactivo o de solucin. Mantener limpios y ordenados los estantes de reactivos. Limpiar inmediatamente cualquier salpicadura.

Rotular cualquier disolucin o frasco de reactivo cuya etiqueta original se haya deteriorado. Tomar en cuenta las precauciones que el frasco de reactivo seale.

Emplear precaucin adecuada segn el reactivo para el cuidado de quien lo maneje.

CONCLUSIN

Un reactivo es, en qumica, toda sustancia que interacta con otra en una reaccin qumica que da lugar a otras sustancias de propiedades, caractersticas y conformacin distinta, denominadas productos de reaccin o simplemente productos. De acuerdo a su uso los reactivos se clasifican en: PB: Destinados a bioqumica. PA: Destinados a aplicaciones analticas. QP: Qumicamente puro, desatinado a uso general en el laboratorio. DC: Destinados a las aplicaciones del anlisis clnico.

Todo envase de reactivos debe llevar obligatoriamente, de manera legible e indeleble, una etiqueta bien visible que contenga las distintas indicaciones que sealen la indicaciones que sealen la informacin del mismo (nombre, calidad del reactivo, formula, peso molecular, riqueza, pureza, pictograma, frases R, frases S). Los pictogramas, las frases R de RIESGO y las frases S de SEGURIDAD aparecen en las etiquetas del producto informando sobre la peligrosidad del mismo. Los reactivos deben manejarse con precaucin siguiendo las medidas de seguridad que este seale para evitar daos a la salud de quien lo maneje.

CUESTIONARIO

1. Qu es un reactivo? Toda sustancia que interacta con otra en una reaccin qumica que da lugar a otras sustancias de propiedades, caractersticas y con formacin distinta. 2. Cmo se pueden clasificar los reactivos? - Propiedades fsico-qumicas - Reactividad en reacciones qumicas - Caractersticas del uso del reactivo 3. Cmo se pueden clasificar los reactivos segn su destino? PB: Destinadas a bioqumica PA: Destinados o aplicaciones analticas QP: Qumicamente puro DC: Destinados a las aplicaciones del anlisis clnico

4. Qu se debe hacer al trabajar con cualquier reactivo? Se debe tomar todas las precauciones necesarias para evitar la contaminacin accidental del mismo. Menciona algn paso para el cuidado de los reactivos: Tapar inmediatamente el frasco una vez extrado el reactivo, para evitar posibles confusiones 5. Qu debe de llevar todo envase de manera obligatoria? Una etiqueta de manera legible e indeleble 6. Qu datos contiene las etiquetas? Nombre, cantidad de reactivo, frmula, peso molecular, riqueza, impurezas, pictograma, y frases R y S. 7. Cul es el propsito de los pictogramas? Informar la peligrosidad del reactivo, que se almacena en el frasco. 8. Qu son las frases R y S? Las frases R: indican riesgos especficos atribuidos a las sustancias peligrosas. Las frases S: indican consejos de prudencia relativa a las sustancias peligrosas. Menciona alguna frase R: R1: Explosivo en estado seco R10: Inflamable

R23: Txico para inhalacin R38: Irrita la piel 9. Cules son los reactivos para anlisis? Son aquellos cuyo contenido en impurezas no rebasa el nmero mnimo de sustancias determinables por el mtodo que se utilice. 10. Cules son los reactivos especiales? Son reactivos con calidades especficas para algunas tcnicas analticas, como cromatografa lquida (HPLC), espectrofotometra (UV) BIBLIOGRAFA Anlisis qumico cuantitativo. Daniel C.Harris. Ed. Revert. 3 Edicin. Fundamentos de Qumica Analtica. Skoog, West, Holler y Crouch. Ed. Thomson. 8 Edicin.

PRCTICA: PREPARAR REACTIVOS Y ALMACENAR

OBJETIVO GENERAL Manejar reactivos para la preparacin de soluciones empleando material adecuado y aplicando la norma 005 (Condiciones de seguridad e higiene en los centros de trabajo para el manejo, transporte y almacenamiento de sustancias qumicas peligrosas). OBJETIVOS ESPECFICOS Emplear material volumtrico (pipeta, probeta, tubo de ensaye) de forma correcta para realizar las mediciones necesarias para la preparacin de las soluciones. Preparar hipoclorito de sodio al 10% (cloralex 10 ml disuelto en 90 ml de agua) solucin limpiadora que podemos emplear a lo largo de la prctica. Conocimiento de la NOM-005-STPS-1998 para el manejo de sustancias o reactivos los cuales se ocupan constantemente en las prcticas de laboratorio.

INTRODUCCIN

Un reactivo es, en qumica, toda sustancia que interacta con otra en una reaccin qumica que da lugar a otras sustancias de propiedades, caractersticas y con formacin distinta, denominadas productos de reaccin o simplemente productos. Por tratarse de compuestos qumicos, los reactivos se pueden clasificar segn muchas variables: propiedades fsico-qumicas, reactividad en reacciones qumicas, caractersticas del uso del reactivo. Tenemos que preparar unas soluciones de una determinada concentracin, para poder trabajar con ellas en el laboratorio: Preparacin de reactivos cuando la sustancia es un slido: Sabiendo la cantidad y concentracin que vamos a necesitar, calculamos la cantidad de reactivo que ser necesario. Una vez calculada, se pesa en la balanza.

Se trasvasa a un vaso de precipitado y se aade algo de agua destilada hasta su disolucin total. Luego se pasa aun matraz aforado.

Se lava el vaso de precipitado donde se realiz la disolucin con un poco de agua destilada y se aade al matraz aforado. Finalmente, se aade agua destilada hasta enrasar el matraz. Preparacin de reactivos cuando la sustancia est en disolucin: Se calcula la cantidad necesaria de disolucin concentrada.

Se mide la cantidad en una bureta, pipeta o probeta, y se pasa dicho volumen a un matraz aforado. Se lava el instrumento de medida con agua destilada y se incorpora al matraz aforado.

Aadir agua destilada hasta enrasar el matraz.

MATERIALES: - Probeta graduada - Pipeta volumtrica - Tubos de ensaye - Gradilla - Bulbo (perilla 5 ml)
REACTIVOS:

- Buffer - Colorante Giemsa - Hipoclorito de sodio (Cloralex) - Solucin concentrada PROCEDIMIENTO

-LUGOL

El lugol o solucin de lugol es una solucin de yodo molecular I 2 y yoduro de potasio KI en agua destilada. Fue preparada por primera vez en 1829 y nombrada en honor al mdico francs J.G.A. Lugol. Este producto se emplea frecuentemente como desinfectante y antisptico, para la desafectacin de agua en emergencias y como reactivo para la prueba del yodo en anlisis mdicos y de laboratorio. Tambin se ha usado para cubrir deficiencias de yodo, sin embargo, se prefiere el uso de yoduro de potasio puro debido a la ausencia de yodo ditomico, forma molecular cuyo consumo puede resultar toxico.

Preparacin del Lugol Yodo 1g Yoduro 2g potsico Agua destilada.. Se mezclan los tres y se filtra la disolucin.

300 ml

-HIPOCLORITO DE SODIO El ion hipoclorito, tambin llamado monoxoclorato (I) o monoxoclorato (1-), es una oxoanion con un tomo de cloro en estado de oxidacin +1, que tiene formula qumica CI- . Tambin hipoclorito es un componente qumico que tiene dicho ion. Los hipocloritos son sales derivados del acido hipocloroso, HClO. Los hipocloritos son por lo habitual bastante inestables. El hipoclorito se descompone bajo la luz solar, dando cloruros y oxgeno. Debido a su baja estabilidad, los hipocloritos son agentes oxidantes muy fuertes. Reaccionan con muchos compuestos orgnicos e inorgnicos.

Preparacin del Hipoclorito de Sodio El hipoclorito de sodio existe slido en forma de sal pentahidratada NaClO*5H2O y con 2.5 molculas de agua de hidratacin por molcula: NaOCl*2.5 H2O. La primera forma es la ms cmoda. A C se disuelven 29.3 g de la sal en 100 g de la sal en 100g de agua y a 23C ya son 94.2 g/100.

-ALCOHOL ACETONA La acetona o propanona es un compuesto qumico de formula qumica CH3(CO)CH3 del grupo de las cetonas que se encuentra naturalmente en el medio ambiente. A temperatura ambiente se presenta como un lquido incoloro de olor caracterstico. Se evapora fcilmente, es inflamable y es soluble en agua. La acetona sintetizada se usa en la fabricacin de plsticos, fibras, medicamentos y otros productos qumicos, asi como disolvente de otras sustancias qumicas. Preparacin del Alcohol Acetona Alcohol etlico (95%) ... 500 ml

Acetona 300 ml Mezcla los ingredientes respectivos de cada combinacin para su uso. RESULTADO Como sabemos un reactivo es aquella sustancia que interacta con otra en una reaccin qumica para dar lugar a otras sustancias de propiedades, caractersticas y conformacin distinta. Para la preparacin de las soluciones que desarrollamos en esta prctica fue necesario emplear materiales volumtricos. Por ejemplo: Para la preparacin del hipoclorito de sodio al 10% tenamos como reactivos al agua (90 ml) y la solucin cloralex (10 ml) y se emple la probeta para dar una graduacin a nuestra solucin. Pero en el caso de sustancias liquidas ms pequeas fue necesario el uso de la pipeta volumtrica y de tubos de ensaye para desarrollar la solucin. Por ejemplo: 1 ml de buffer al que se agregaron 2 gotas de reactivo concentrado (Giemsa) para formar otra solucin, la cual sera ocupada en la siguiente prctica (Frotis Sanguneo).

OBSERVACIONES - Identificar los materiales a emplear Identificar los reactivos a mezclar

- Preparamos al 10%

hipoclorito de sodio -Hicimos la mezcla de Buffer y Gremsa

Lavamos y revisamos el material Guardamos las soluciones empleado. limpiamos la mesa.

DISCUSIN El material volumtrico de laboratorio que se utiliza para la medida de los volmenes de los lquidos esta constituido por: matraces, pipetas, buretas y vasos de precipitado. La superficie interna del material utilizado para verter un volumen medido del lquido debe estar perfectamente limpio (se debe remojar antes de usarse en una solucin detergente para remover toda grasa o residuos qumicos, despus enjuagar y secar perfectamente) de forma que la pelcula del lquido no se interrumpa cuando el lquido se vierta.1

- La probeta se utiliza para medir volmenes superiores y ms rpidamente que las pipetas, aunque con menor precisin. (En esta prctica se empleo para mezclar 90 ml de agua y 10 ml de hipoclorito de sodio).

- Pipeta graduada es un utensilio que permite medir volmenes, estn diseadas para dispersar sustancias liquidas conocidas de un recipiente a otro (medimos 1 ml de buffer y lo vaciamos en un tubo de ensaye). - Tubo de ensaye son tubos de cristal tiles como recipientes de los reactivos lquidos o slidos (los empleamos para contener 1 ml de buffer y agregar 2 gotas de reactivo concentrado, para despus homogenizar). - La gradilla es utilizada para depositar en ellas los tubos de ensaye en el momento de realizar un experimento, pero tambin sirve para guardarlos.

CONCLUSIN A travs de esta prctica adquirimos conocimientos sobre la preparacin de algunas soluciones que fueron empleadas durante la prctica. Los materiales volumtricos tienen grabada una escala, casi siempre en mililitros o centmetros cbicos. Ambas partes corresponden a la milsima parte de un litro. En algunos materiales de medicin volumtrica el centmetro cbico se expresa as: CC. Los matraces y vasos de precipitado se utilizan para contener lquidos, mientras que las probetas, pipetas y buretas se usan para medir y transferir lquidos.2 Debido a que el agua y la mayora de los lquidos tienden a subir por las paredes de los recipientes forman un menisco que consiste en una curvatura de la superficie libre cerca de las paredes del recipiente. Por eso, una vez que se vierte el lquido en el recipiente este se coloca a la altura de los ojos y se considera el volumen que indica la parte inferior del menisco que puede ser cncavo o convexo3. Teniendo en mente el concepto de reactivo y solucin y un conocimiento sobre el manejo de material de laboratorio en base a un fundamento terico, se pueden preparar mezclas sencillas y tiles como el hipoclorito de sodio al 10% una solucin limpiadora.

Los materiales de laboratorio deben estar limpios para facilitar la medicin y preparacin de las sustancias, as como tambin este debe manejarse con cuidado para su conservacin. Los materiales volumtricos fueron la prueba, la pipeta y los tubos de ensaye, los cuales permitieron hacer una graduacin (medicin) de los reactivos lquidos y para homogenizar la mezcla (en el caso de los tubos de ensaye) y almacenarlos para su posterior uso. CUESTIONARIO 1. Cmo se prepara el lugol? Yodo Yoduro potsico Agua destilada.. 2. Cmo se prepara el hipoclorito de sodio? Mezclando: Hipoclorito de sodio............................ 10 ml Agua. 90 ml 3. Cmo se prepara el Alcohol Acetona? Alcohol etlico. 500 ml . Acetona 300 ml 4. Para qu se emplea el lugol? Se emplea como desinfectante y antisptico, para la desinfeccin del agua y como prueba de yodo en anlisis mdicos. 5. Para qu se utiliza la Acetona? Se usa en la fabricacin de plstico, fibras, medicamentos, y como disolvente de otras sustancias. 1g 2g 300

6. Qu son los hipocloritos? Son sales derivadas del cido hipocloroso, HClO. 7. Para qu se usan los hipocloritos? Debido a su baja estabilidad, los hipocloritos son agentes oxidantes muy fuertes. Sirven como soluciones limpiadoras y desinfectantes. 8. Qu materiales se emplean en esta prctica? Para la medicin, la probeta, la pipeta volumtrica (graduada), gradilla y tubos de ensaye. 9. Qu se hizo con el material despus de ocuparlo? Se limpi y lav para darle cuidado y mantenimiento, asi como tambin se limpi el rea de trabajo. 10.Qu es un reactivo? Es aquella sustancia que interacta con otra en una reaccin qumica para dar lugar a otras sustancias (producto) con caractersticas y conformacin distinta. BIBLIOGRAFA

Principios y Reacciones. W.L. Masterton y C.N. Hurley4a EdicinEditorial Thomson QUIMICAMartin S. Silberberg2a EdicinEditorial Mc Graw Hill

PRCTICA: FROTIS SANGUNEO

OBJETIVO GENERAL Realizar un frotas sanguneo con sangre del alumno, etiquetarlo y guardarlo para analizarlo ms adelante, con base a un fundamento terico y aplicando las normas correspondientes a la disposicin de sangre.

OBJETIVOS ESPECFICOS Conocer los pasos a seguir para realiza un correcto frotas sanguneo segn el fundamento terico. Conocer las propiedades de las diferentes tinciones usadas para realizar el frotas sanguneo (en este caso la tincin de Giemsa). Aplicar la norma 003 correspondiente a la correcta disposicin de la sangre, en este caso las medidas de seguridad que deben de tomarse para el cuidado personal.

INTRODUCCIN

Una extensin o frotas sanguneo consiste en recubrir parcialmente un portaobjetos con una gota de sangre, de tal manera que las clulas de esta se dispongan formando una sola capa de ellas. Esto puede hacerse manual o automtica mente. Lo ltimo se realiza mediante un aparato (esprnter) que centrifuga rpidamente el porta con la sangre depositada en su centro. Con este aparato se obtiene una frotas que presentan una distribucin celular muy homognea. PARTES DE UNA EXTENSIN: CABEZA: -Es la zona inicial de la extensin -Es la regin ms gruesa -En ella se encuentra una mayor proporcin de linfocitos, y los hemates forman aglomerados (pilas de monedas). CUERPO: -Es la zona media del frotas. -Su espesor es el apropiado -En ella existe una adecuada proporcin entre los distintos tipos de leucocitos. -Contiene la zona ideal de observacin, que corresponde a la porcin que limita con la cola. COLA: -Es la zona final de la extensin. -Suele tener un aspecto redondeado -Es la regin ms fina. -En ella se encuentra una mayor proporcin de leucocitos grandes (granulocitos y monocitos), y adems los hematres estn deformados y presentan una tonalidad uniforme. -En su porcin terminal suelen ser ms abundantes las plaquetas, sobre todo si son grandes. BORDES: -Contienen una mayor proporcin de leucocitos grandes. -Si estn deshilachados, en ellos las clulas son difciles de reconocer por estar deformados o destruidas.

 CARACTERSTICAS DE UNA BUENA EXTENSIN -La cabeza a de estar cerca de uno de los extremos del porta. -La cola debe estar cercana el otro extremo del porta, pero sin llegar a l. -El borde de la cola tiene que estar finalmente deshilachado. Este fino deshilacha miento recibe el nombre de Barbas. -Toda la extensin a de ser fina y homognea. -Los bordes laterales de la extensin deben de estar separados de los bordes del porta por 1 mm aprox. -Una extensin normal ha de tener una longitud de las partes del porta objetos. -El uso de los teidores automticos exige la realizacin de extensiones ms cortas que las consideradas normal mente como correctas (con una longitud de la mitad del porta objetos). TINCIN DE GIEMSA La tincin de giemsa es un mtodo habitual para el examen de frotis sanguneo, cortes histolgicos y otro tipo de muestras biolgicas. Este mtodo tiene utilidad sobre todo para poner de manifiesto las ricketsias localizadas dentro de la clula huspedes. La coloracin de giemsa se emplea tambin para teir frotas de sangre en el examen para protozoos. Se puede emplear, como variaciones, otras coloraciones como es la tcnica de citoconcentracion para paracitos sanguneos, la cual tiene un bajo costo y ofrece la posibilidad de aislar e identificar en el mismo sedimento el parasito principal, con excepcin de los trofozotos jvenes y el plasmodium falciparum.

Tambin se emplea la modificacin de wright. Este mtodo de tincin permite tambin la tincin diferencial de zonas con un alto contenido de ADN, y concretamente de uniones A-T. Esto permite distinguir perfectamente en microscopio ptico el ncleo celular, lo cromosomas durante la mitosis, y en algunos casos incluso el ADN mitocondrial (kinetoplasto de algunos protozoos como tripanosomas), los cromosomas pueden ser tratados con varios compuestos qumicos que producen la alternancia de bandas claras y obscuras a lo largo de los cromosomas. Cada cromosoma tiene un patrn de bandas caracterstico permitiendo que aberraciones estructurales como borrados duplicaciones o sutiles tras locaciones sean detectadas, al igual que permiten la identificacin de cromosomas marcadores. FUNDAMENTO: Estos organismos adquieren una coloracin diferencial y se ven dentro del citoplasma del ncleo husped. La tcnica de giemsa est formada por varios colorantes: Los tintes neutros utilizados, combinan el azul de metileno como tinte bsico y la cocina como tinte acido, lo que da una amplia gama de colores. El azul de metileno es un colorante metacromatico, de ah que muchas estructuras se tian de purpura y no de azul. El pH de la solucin de coloracin es crtico y se debe ajustar idealmente segn diversos fijadores. La gama del pH debe estar entre 6.4 y 6.9. MATERIAL - Tubos capilares - Tubos de ensaye - Pipetas Pasteur - Bulbo - Jeringas desechables 5 ml - Torniquete - Torundas con alcohol - Tubo con anticoagulante ESTA - Microscopio ptico REACTIVOS

- Colorante Piensa - Aceite de inmersin PROCEDIMIENTO MUESTRA: -Sangre capilar no anticoagulada o sangre venosa adecuadamente anticoagulada. La forma correcta de extraer sangre capilar es la siguiente: Elegir el tercer o cuarto dedo de una de las manos. Desinfectar el pulpejo del dedo seleccionado con un algodn embebido en un desinfectante apropiado. Dejar que el desinfectante se evapore. Con una lanceta, pinchar firme y rpidamente una cara lateral de este pulpejo. Tras lo anterior con un algodn seco retiramos la primera gota emitida, presionamos el extremo del dedo, al nivel del lado opuesto al de la puncin, hasta detener la cantidad de sangre deseada. Por ltimo tapamos el pulpejo con una tirita. La sangre venosa tiene que a ver sido extrada hace menos de tres horas ya que pasado este tiempo, producen unos cambios apreciables en las clulas, que se manifiestan al ser taidas. Una vez extradas la sangre venosa ha de ser anticoagulada con EDTA. Para realizar frotas sangunea no debe utilizarse sangre anticoagulada con heparina, ya esta agrega a la clula y producen un fondo azul en las extensiones de sangre teidas con el colorante Wright. TCNICA Con los dedos ndice y pulgar de una mano sujetar un extremo del porta normal (porta soporte), a nivel de sus bordes y situarlo sobre una mesa. Tambin puede apoyarse simplemente, el porta soporte sobre el extremo del dedo corazn de la mano que lo sujeta. De esta manera. El porta soporte forma un Angulo con la mesa.

 Con un capilar cargado mediante capilaridad de sangre, depositar una pequea gota de esta (de unos cinco microlitros) en la cara superior de este porta, a no menos de 2 cm. Del extremo opuesto al que agarra la mano. Colocar un extremo del porta esmerilado (porta difusor o extensor) un poco por delante de gota de sangre y formando un ngulo de 45 con el porta soporte. Es conveniente utilizar siempre el mismo porta extensor para adaptarlo a esta funcin. Desplazar suavemente hacia atrs, el porta extensor, hasta que alcance la gota de sangre. Dejar que la gota se extienda, por capilaridad, a lo largo del extremo del porta extensor que toca el porta soporte. Antes de que la sangre alcance los bordes de este extremo deslizar el porta extensor hacia delante con un movimiento firme y uniforme, y a una velocidad media. Este deslizamiento debe acabar, aproximadamente, a 1cm del extremo final del porta soporte con un movimiento de ascensin del porta extensor. Secar rpidamente la extensin agitndola al aire para que sus clulas no se distorsionen. Escribir el nombre del enfermo.

colocar en el una vez que se

Al

RESULTADO el porta objetos microscopio y ajust la vista, se

pudo observar en el primer frotis (teido con giemsa) los leucocitos y en el segundo frotis (teido con giemsa y buffer) se observaron los eritrocitos.

GRANULCITO BASFILO

MONOCITO

OBSERVACIONES - Se extrajo una muestra de sangre y se coloco una gota de sangre en el extremo del porta objetos ya etiquetado, con un tubo capilar.

Con otro porta objetos se hizo el barrido, a 45 de inclinacin.

Se dejo coloco minutos vaso de precipitado con

secar y se durante 3 en un metanol.

 Los frotis se llevaron al vertedero donde uno se tio con solucin concentrada y el otro con diluida.

Se espero 20 min. Para uno y para otro 25 min. Para otro frotis. Se enjuagaron para remover el colorante y se dejo secar. Se coloco una gota de aceite de inmersin al frotis y se observo en el microscopio.

 Se anotaron resultados. Se limpio la mesa de trabajo antes y despus de la prctica.

RESULTADO Una vez que los frotas ya estaban teidos con el colorante giemsa buffer, era tiempo de pasar a microscopio para observar dichos frotis. Se ajust el microscopio con el objetivo de inmersin 100 x, despus se agrego una gota de aceite a los frotis y se colocaron en la platina. A travs de los oculares se observaron las clulas que forman la sangre, como los eritrocitos, monocitos, neutrofilos, eosinofilos, etc.

DISCUSIN - Una extensin o frotis sangunea consiste en recubrir parcialmente un porta objetos con una gota de sangre de tal manera que las clulas de esta se dispongan formando una sola capa de ellas. - La extensin consta de 3 partes: la cabeza (zona inicial del frotis), el cuerpo (zona media del frotis) y la cola (zona final de la extensin). - Caractersticas que describen a una buena extensin: - -la cabeza ha de estar cerca de uno de los extremos - -toda extensin a de ser fina y homognea - -a de tener una longitud de del porta objetos. - La tincin giemsa es un mtodo habitual para el examen del frotis sanguneo, cortes histolgicos y otro tipo de muestras biolgicas. - Para realizar un frotis sanguneo hay que colocar una gota de sangre en el extremo del cubre objetos y con la ayuda del otro porta la sangre se extiende, a lo largo de este (se hace un barrido) se deja secar, y luego pasa por el metanol para ser teido con el colorante giemsa y ser observado en el microscopio.

CONCLUSIN Con ayuda de un frotis sanguneo y de la tensin con el colorante giemsa es posible identificar las clulas que conforman la sangre y las cuales pudieron ser observadas a travs de un microscopio ptico.

Despus de obtener una muestra de sangre se inicio con los barridos, y posteriormente se colocaron los frotis en metanol; en seguida se tieron con colorante giemsa y se dejo 20-25 min. Se enjuago y dejo secar. Los frotis de cada compaero se colocaron al microscopio y cada quien dibujo las clulas sanguneas que observo en sus frotis.

CUESTIONARIO 1. Qu es un frotas sanguneo? Consiste en recubrir parcialmente un porta objetos con una gota de sangre, para que las clulas se dispongan formando una sola capa. 2. Cules son las partes de una extensin? -cabeza -cuerpo -cola -bordes

3. Cules son las caractersticas del cuerpo? Es la zona media del frotis, su espesor es el apropiado, en ella existen una adecuada proporcin entre los distintos tipos de leucocitos y contienen la zona ideal de observacin. 4. Cules son las caractersticas de la cabeza? Es la parte inicial del frotis, es la regin ms gruesa se encuentra una mayor proporcin de linfocitos. 5. Cules son las caractersticas de la cola? Es la zona final de la extensin, suelen tener un aspecto redondeado, es la regin ms fina y se encuentra una mayor proporcin de leucocitos grandes. 6. Menciona dos caractersticas de una buena extensin: -la cabeza ha de estar cerca de uno de los extremos -toda la extensin ha de ser fina y homognea. 7. Qu es la tincin de giemsa? Es un mtodo habitual para el examen de frotis sanguneo cortes histolgicos y otro tipo de muestra biolgicas 8. Menciona algunas clulas sanguneas: Eritrocito, neutrofilo, basofilo etc. 9. Cunto tiempo se dejo el frotis en el metanol? Se dejo durante 3 min. 10.Cunto tiempo se dejaron los frotis con el colorante? 20 min. Con solucin concentrada. 25 min. Con solucin diluida. BIBLIOGRAFA Newland J. The peripheral blood smear. In: Goldman L, Ausiello D, eds. Cecil Medicine. 23rd ed. Philadelphia, Pa: Saunders Elsevier; 2007:chap 161.

PRCTICA: EXUDADO FARINGEO

OBJETIVO GENERAL Aprender a realizar un exudado farngeo empleando el material y tcnica adecuados, para despus realizar un frotis y teirlo con la tincin gran y poder ser observado al microscopio. OBJETIVO ESPECIFICO Conocer y poner en prctica la norma 005 relacionada al manejo de reactivos, en este caso lo necesario para desarrollar la tcnica de tincin de gram. Conocer el fundamente y tcnica de la tincin de gram para identificar las bacterias gram negativas (-) y gram positivo (+) segn la coloracin. Utilizar correctamente el microscopio para esta prctica se emplearan los oculares 100 x y se aadirn una gota de aceite de inmersin el frotis.

INTRODUCCIN

Un cultivo del exudado farngeo es una prueba que se realiza para encontrar una infeccin bacteriana o micotica (por hongos) en la garganta. Con un hisopo se toma una muestra de la garganta y se coloca en un cultivo que permite el desarrollo de las infecciones. Si se desarrolla una infeccin, el cultivo es positivo. El tipo de infeccin se determina utilizando un microscopio, pruebas qumicas o ambos. Los ejemplos de infecciones que podran encontrarse durante un cultivo del exudado farngeo incluyen: Candidans albicans: este hongo causa aftas, una infeccin de la boca y de la lengua y, en ocasiones, de la garganta. Estreptococo del grupo A: esta bacteria puede causar faringitis estreptoccica, escarlatina y fiebre reumtica. Neisseria meningiditis: esta bacteria puede causar meningitis. Es posible que se realice un exudado farngeo para: Encontrar la causa de un dolor de garganta. La mayora de las infecciones que provocan dolor de garganta son causadas por un virus. Un cultivo del exudado farngeo muestra la diferencia entre una infeccin bacteriana y una infeccin viral. Encontrar el organismo que est causando la infeccin puede guiar el tratamiento. Revisar a una persona que podra no tener algn sntoma de infeccin, pero que porta una bacteria que puede propagarse a otras personas. Esta persona se llama portadora. TINCIN DE GRAM La tincin de gram o coloracin de gram es un tipi de tincin diferencial empleado en microbiologa para la visualizacin de bacterias sobre todo en muestras clnicas. Debe su nombre al bacterilogo dans Christian-Gram.

La tincin de gram es usada para clasificar bacterias sobre la base de sus formas, tamaos, morfologas celulares y reaccin gram (color). A nivel de laboratorio es til como test para un rpido diagnostico presuntivo de agentes infecciosos, tanto en muestras como en cultivos en crecimiento, y adicionalmente sirve para valorar la calidad de la muestra clnica. Las bacterias se tien gram positivas (+), gram negativas (-) o no se tien debido a sus diferencias en la composicin de su pared y arquitectura celular. Las bacterias gram positivas se visualizan de color morado mientras que las bacterias gram negativas se visualizan de color rosa o rojo. Clsicamente los reactivos utilizados para la realizacin de la tincin de gram han sido en cristal violeta como colorante inicial, la solucin de lugol para acomplejar a este el alcohol y/o acetona para la decoloracin y la safrina o fucsina bsica como contra colorante. USO: En el anlisis de muestras clnicas suelen ser un estudio fundamental por cumplir varias funciones: -Identificacin preliminar de la bacteria causal de la infeccin. -Utilidad como control calidad del aislamiento bacteriano. (Los morfotipos de los microorganismos identificados en la tincin de gran debe corresponder con los aislamientos de bacterias, realizados en los cultivos. Si se observan mayor nmero de formas que las aisladas hay que considerar los medios de cultivos empleados as como el ambiente de incubacin). -importancia de la calidad de la muestra biolgica para el estudio, se valora con esto, el nmero de clulas inflamatorias (a mayor nmero de clulas inflamatorias ms probabilidad de que la flora sea presentativa del lugar de la infeccin) as como las clulas epiteliales. A partir de la tincin de gram pueden distinguirse varias formas distintas: -Los cocos de forma esfrica. Pueden presentarse aislados despus de la divisin celular (micrococos), por partes (diplococos), formando cadenas (estreptococos), o agruparse de manera irregular (estafilococos).

-Los bacilos poseen forma alargada. En general suele agruparse en forma de cadena (estreptobacilos) o empalizada. -Tambin pueden distinguirse los espirales, que se clasifican en espirilos si son de formas rgida o espiroquetas si son blandas y onduladas, si poseen forma de coma, - curvados, entonces se les llama vibriones. MATERIAL - Portaobjetos - Hisopos esterilizados - Abate lenguas - Gasas - Marcador permanente - Guantes - Frasco gotero color mbar - Bata. - Jabn antibacterial - Franela - Servitoallas.

REACTIVOS Lugol Alcohol acetona Safranina Cristal violeta

PROCEDIMIENTO
TCNICA PARA LA TOMA DE MUESTRA

1.- Solicite al paciente que incline la cabeza hacia atrs con la boca bien abierta. 2.-Bajar la lengua con un abate lenguas para poder ver bien en donde se frotar el hisopo. 2.- Frotar con un hisopo de algodn estril a lo largo de la parte posterior de la garganta, cerca de las amgdalas. 4.- El paciente debe contener las nauseas y evitar cerrar la boca mientras el hisopo toca el rea. 5.- Evitar el contacto con las paredes laterales de la cavidad oral. PARA EL FROTIS DEL MISMO 1.- Ya obtenida la muestra en el hisopo proceder a realizar la extensin de la muestra en un portaobjetos mediante movimientos giratorios obteniendo como producto un espiral en la parte media de este. 2.- Sellar, pasndolo por arriba a la llama del mechero. PARA LA TINCIN GRAM 1.- Teir utilizando una cantidad suficiente del colorante cristal violeta hasta cubrirlo por completo. Dejar actuar durante 1 min. A temperatura ambiente de 25 grados. 2.- Enjaguar con agua corriente por la parte superior del portaobjetos en forma vertical. 3.- Aplicar yodo durante 1 minuto ms. Proceder a lavar con agua. Dejar secar.

4.- Decolorar con alcohol-acetona durante 10 a 30 seg. Lavar con agua hasta que no escurra ms lquido azul, y dejar secar. 6.- Aplicar el colorante de contraste: safranina y dejar actuar otro minuto. Para observar al microscopio hacer a 100 x con aceite de inmersin. RESULTADO NOMBRE: Jess Eduardo Falcn Molina EDAD: 15 aos SEXO: Masculino TIPO DE ESTUDIO: Exudado Farngeo NOMBRE DE LA BACTERIA: Estreptococos FECHA: 2 de mayo del 2011 TINCION GRAM: Positiva (+)

OBSERVACIONES Se limpio la zona de trabajo antes y despus de realizar la prctica. Se realizo la tcnica para la toma de muestra.

Se preparo el frotis con la muestra. (haciendo movimientos circulares en el centro del porta.

Se dejo secar y se paso por el mechero tres veces para fijar.

 Primero se ti con el colorante cristal violeta durante 1 min. Despus se enjuago con agua. Se aplico durante 1 min. La solucin de lugol y se enjuago. Se aplico alcohol acetona en el frotis durante 15 seg. (10 10 segn el frotis). Por ltimo teimos con safranina durante 45 seg. A 1 minuto. Dejamos secar el frotis. Colocamos una gota de aceite de inmersin y observamos al microscopio. Anotamos resultados.

DISCUSIN Es posible que se realice un exudado farngeo para:

I.

II.

Encontrar la causa de un dolor de garganta. La mayora de las infecciones que provocan dolor de garganta son causadas por un virus. Revisar a una persona que no tiene ningn sntoma de infeccin pero que porta una bacteria que puede propagarse a otras personas. Esta persona se llama portadora. La tincin de Gram es usada para clasificar bacterias sobre la base de sus formas, tamaos, morfologas celulares y reaccin Gram (color). A nivel de laboratorio es til como test para un rpido diagnostico presuntivo de agentes infecciosos, tanto en muestras como en cultivos de crecimiento, adicional mente sirve para valorar la muestra clnica. Las bacterias se tien Gram positivas (+) color azul-morado y Gram negativas (-) de color rojizo.
GRAM (+) GRAM (-)

CONCLUSIN Para el frotis de exudado farngeo fue utilizada la tcnica de coloracin de Gram que es un tipo de tincin diferencial empleado para visualizar bacterias.

Las bacterias se tieron Gram positivas o gran negativas. A partir de esta se distinguieron formas como los estreptococos que son agrupaciones en cadena, y los estafilococos que son agrupaciones irregulares. Se adquiri conocimiento acerca de cmo obtener una muestra de las amgdalas, para as, efectuar el frotis y conocer las bacterias. Comprendimos que era necesario teir en frotis con distintos reactivos, cada uno teniendo un rango de tiempo para no afectar al mismo. Cada vez que se cambiaba el reactivo, se enjuagaba con mucho cuidado. Finalmente, observamos que el frotis en el microscopio a 100 x con aceite de inmersin e identificamos cuales eran las bacterias presentes en la garganta de cada compaero del equipo. CUESTIONARIO 1) Qu es un exudado farngeo? Es la prueba que se realiza para encontrar una infeccin bacteriana o micotica (por hongos) en la garganta. 2) Qu en la tincin de Gram? La tincin de Gram o coloracin de Gram es un tipo de tincin utilizado en microbiologa para la visualizacin de bacterias, sobre todo en muestras clnicas. 3) A quin se debe el nombre de tincin de Gram? Debe su nombre al Bacterilogo dans Christian Gram. 4) Para qu es utilizada la tincin de Gram? Es usada para clasificar bacterias sobre la base de sus formas, tamaos, morfologas celulares y reaccin Gram. 5) De qu forma se puede clasificar a la tincin de bacterias?

En tincin de Gram positiva (+) y tincin negativa (-). 6) De qu color se tie el frotis cuando en positivo? Azul-morado 7) De qu color se tie el frotis cuando es negativo? Rojo-rosa 8) Qu reactivos se utilizaron en la prctica? Cristal violeta Lugol Alcohol Safrina

9) Qu bacterias con ms comunes de detectar en un frotis de exudado farngeo? Estreptococo y estafilococos 10) Para qu sirve el flamear el frotis? Para la fijacin de las bacterias al portaobjetos. BIBLIOGRAFIA

Chernecky CC, Berger BJ, eds. (2004). Laboratory Tests and Diagnostic Procedures, 4th ed. Philadelphia: Saunders. Fischbach FT, Dunning MB III, eds. (2004). Manual of Laboratory and Diagnostic Tests, 7th ed. Philadelphia: Lippincott Williams and Wilkins.

PRCTICA: EXAMEN GENERAL DE ORINA

OBJETIVO GENERAL: Realizar un examen general de orina (exmenes fsico, qumico y microscpico) con base a un fundamento terico y observar los microorganismos presentes en la misma. OBJETIVOS ESPECFICOS: Conocer el propsito con el que se realiza la prueba de urianlisis y aprender la etapas en el que se realiza (exmenes fisco, qumico y microscpico) Tomar una muestra de orina correctamente en base a una tcnica, para su manejo, transporte, conservacin y desecho de la misma.

Analizar los resultados obtenidos y hacer un reporte sobre las observaciones de la prctica.

INTRODUCCIN Un urianlisis est constituido por un conjunto de pruebas que detectan y miden de manera semi-cuantitativa distintos componentes eliminados por la orina, incluyendo productos intermediarios del metabolismo, as como tambin, clulas, bacteria y fragmentos celulares. La orina es producida por los riones, localizados a ambos lados de la columna vertebral por debajo de la caja torcica. Los riones filtran productos de desecho y productos metablicos intermediarios eliminndolos de la sangre, a la vez que ayudan a regular la cantidad de agua del organismo; todo ello, conservando protenas, electrolitos y otros compuestos que el organismo puede reutilizar. Todo lo que no es necesario se elimina por la orina, siendo transportada desde los riones hasta la vejiga urinaria, y excretndose al exterior a travs de la uretra. La orina suele ser amarillenta y de color claro, pero cada vez que se orina, el color, la cantidad, la concentracin y el contenido de la orina pueden variar ligeramente debido a la variedad de constituyentes que en ella se encuentran. Son muchos los trastornos de salud que pueden detectarse de manera precoz a travs del hallazgo de anomalas en la orina. Entre estos hallazgos se incluyen la presencia de concentraciones elevadas de ciertos constituyentes que no se encuentran normalmente en orina en cantidades significativas como: glucosa, protenas, bilirrubina, clulas sanguneas (hemates y leucocitos), cristales y bacterias. Es posible que estas sustancias se hallen en orina porque se encuentran a concentraciones elevadas en la sangre y el organismo intenta disminuir los niveles sanguneos eliminndoles por la orina, o bien porque en la enfermedad renal, la capacidad de filtracin de los riones sea menos efectiva, o porque existe una infeccin bacteriana.

Un urianlisis completo consiste de tres fases diferenciales: 1.- UN EXAMEN FSICO: en el que se evala el aspecto de la orina (color, olor, transparencia, espuma, etc.) 2.- EXAMEN QUMICO: que evala el estado de 10 componentes con utilidad clnica para valorar restados de salud y de enfermedad, y 3.- EXAMEN MICROSCPICO: que identifica y cuenta el tipo de clulas, cilindros, cristales y otros componentes (bacterias, moco) que podran estar presentes en la orina. Normalmente, un urianlisis de rutina consiste en el examen fsico y qumico de la orina. Estas dos fases bien diferenciadas pueden completarse en unos pocos minutos en el laboratorio en la consulta del mdico. En caso de hallar alguna anomala en los exmenes fsico y qumico, se procede a un examen microscpico, que tambin puede realizar directamente si el mdico as lo requiere. MATERIALES: - Tubos de ensaye 13 x 100 - Gasas - Guantes - Cubre bocas - Portaobjetos - Cubreobjetos - Pipetas Pasteur desechables - Marcador permanente - Bata

- Centrifuga y microscopio

PROCEDIMIENTO TOMA DE MUESTRA: La mejor muestra es la primera de la maana porque es la ms concentrada y es la que con ms probabilidades detectara anomalas. Debido a la posibilidad de contaminar la orina con bacterias y clulas del tejido cutneo circundante durante el proceso de recogida de la orina (particularmente en las mujeres), es importante limpiar previamente la zona genital. Las mujeres deberan asearse de adelante hacia atrs, abriendo los labios vaginales; los hombre deberan limpiarse la punta del pene. Al empezar a orina debe dejarse caer un poco de orina en el sanitario y entonces proceder a recoger la orina en el contenedor que se le haya suministrado, eliminando el resto de la orina directamente al sanitario. Este tipo de recogida de orina se conoce como recogida de orina limpia. TCNICA DEL EXAMEN MICROCPICO: Para observar al microscopio ptico (sedimento urinario) es preferible centrifugar la muestra recogida con el fin de obtener sedimento urinario para el examen e identificacin microscpico: 1.- Mezclar perfectamente la muestra. 2.- Centrifugar a velocidad moderada durante tres minutos. 3.- Eliminar el lquido sobrenadante. 4.- Pasar una gota del sedimento a un portaobjetos y taparla con un cubre. 5.- Para el estudio de rutina utilizar luz central, amortiguada, lo que se logra con facilidad descendiendo el condensador de la mayora de los microscopios. La iluminacin oblicua, producida al ser oscilar ligeramente el espejo fuere del eje ptico, se puede utilizar para la identificacin de

elementos delicados, por ejemplo, cilindros hialinos (La iluminacin adecuada es crucial para obtener resultados exactos). 6.- Examinar toda la zona del cubre con lentes de bajo aumento (16 milmetros); de esta forma se identifican muy fcilmente los cilindros. 7.- Para detalles e identificacin de estructuras ms pequeas, por ejemplo, pus y clulas sanguneas, utilizar lentes de alto aumento (4 mm). RESULTADO Nombre del paciente: Ricardo Ayala Guzmn Edad: 16 aos Sexo: Masculino Tipo de estudio: Examen general de orina Fecha: 2 de junio de 2011 EXAMEN EXAMEN FSICO EXAMEN QUMICO MICROSCPICO Color: amarillenta -Densidad: 1.020 - cristales de oxolato de Aspecto: claro -PH: 5 calcio Sedimento: negativo -Leucocitos: negativo - fosfato Olor: agrio -Nitrito: negativo Espuma: muy poca -Protenas: negativo -Glucosa: negativo -Cuerpos cetricos: neg. -Urobilingeno: normal -Bilirrubina: +1 -Sangre y hemoglobina: negativo. Nombre del paciente: Jess Eduardo Falcn Molina Edad: 15 aos Sexo: Masculino Tipo de estudio: Examen general de orina Fecha: 2 de junio de 2011 EXAMEN EXAMEN FSICO EXAMEN QUMICO MICROSCPICO

Color: amarillenta Aspecto: claro Sedimento: negativo Olor: agrio Espuma: poca

-Densidad: 1.015 -PH: 6 -Leucocitos: negativo -Nitrito: negativo -Protenas: negativo -Glucosa: negativo -Cuerpos cetricos: neg. -Urobilingeno: normal -Bilirrubina: negativo -Sangre y hemoglobina: negativo. OBSERVACIONES

- cristales de oxolato de calcio - fosfato - cido rico - bacterias

Se limpi la mesa antes y despus de la Se analiz la muestra antes de iniciar la prctica. prctica.

Se procedi a realizar el examen fsico de Se realiz el examen qumico de la muestra. la muestra.

Se metieron dos tubos de ensaye a la Se decant la muestra para dejar el centrifuga con muestra. sedimento de la orina.

Se coloc una gota del sedimento en un Se anotaron los portaobjetos y se cubri con un cubre para observaciones. analizar en el microscopio.

resultados

de

las

DISCUSIN Un urianlisis completo consiste de tres fases diferenciadas: 1. examen fsico, en el que se evala el aspecto de la orina (color y transparencia); 2. examen qumico, que evala el estado de 9 componentes con utilidad clnica para valorar estados de salud y de enfermedad; y 3. examen microscpico, que identifica y cuenta el tipo de clulas, cilindros, cristales, y otros componentes (bacterias, moco) que podran estar presentes en orina. Normalmente, un urianlisis de rutina consiste en el examen fsico y qumico de la orina. Estas dos fases bien diferenciadas pueden completarse en unos pocos minutos en el laboratorio o en la consulta del mdico. En caso de hallar alguna anomala en los exmenes fsico o qumico, se procede a un examen microscpico, que tambin puede realizarse directamente si el mdico as lo requiere.

Cmo se obtiene la muestra para el anlisis? La muestra de orina para un urianlisis puede recogerse en cualquier momento del da. La mejor muestra es la primera de la maana porque es la ms concentrada y es la que con ms probabilidades detectar anomalas. Debido a la posibilidad de contaminar la orina con bacterias y clulas del tejido cutneo circundante durante el proceso de recogida de la orina (particularmente en las mujeres), es importante limpiar previamente la zona genital. Las mujeres deberan asearse de adelante hacia atrs, abriendo los labios vaginales; los hombres deberan limpiarse la punta del pene. Al empezar a orinar, debe dejarse caer un poco de orina en el sanitario y entonces proceder a recoger la orina en el contenedor que se le haya suministrado, eliminando el resto de la orina directamente al sanitario. Este tipo de recogida de orina se conoce como recogida limpia de orina. CONCLUSIN El urianlisis se utiliza como una herramienta de cribado y/o de diagnstico puesto que ayuda a detectar en orina sustancias o material celular asociados a distintas enfermedades metablicas y renales. Se solicita ampliamente y de manera rutinaria para detectar anomalas que posteriormente deberan de seguirse controlando. A menudo, sustancias como protenas o glucosa aparecen en la orina antes de que el paciente sea consciente de que puede presentar algn problema de salud. Se utiliza para detectar infecciones del tracto urinario (ITU) y otros trastornos del tracto urinario. En pacientes con enfermedades agudas o crnicas, como puede suceder en la enfermedad renal, el urianlisis puede solicitarse regularmente como una herramienta rpida para monitorizar la funcin del rgano, as como el estado de la enfermedad y la respuesta al tratamiento. Cundo se solicita? Se suele realizar un urianlisis de rutina al ingresar en un hospital. Tambin puede formar parte de un examen de salud, o de un control de embarazo, o puede realizarse junto con otras pruebas antes de una intervencin quirrgica. Se le realizar seguramente un urianlisis si usted consulta a su mdico por dolor abdominal, dolor de espalda, por micciones

(emisiones de orina) dolorosas o frecuentes, o por haber advertido la presencia de sangre en orina, siendo estos ltimos signos de ITU. Esta prueba tambin puede ser til para conocer si una determinada situacin est mejorando o empeorando. CUESTIONARIO 1. En qu consiste un urianlisis? Un urianlisis est constituido por un conjunto de pruebas que detectan y miden de manera semicuantitativa distintos componentes eliminados por la orina, incluyendo productos intermediarios del metabolismo as como tambin clulas, bacterias, y fragmentos celulares. 2. De cuantas fases consiste un examen general de orina? 1. examen fsico, en el que se evala el aspecto de la orina (color y transparencia); 2. examen qumico, que evala el estado de 9 componentes con utilidad clnica para valorar estados de salud y de enfermedad; y 3. examen microscpico, que identifica y cuenta el tipo de clulas, cilindros, cristales, y otros componentes (bacterias, moco) que podran estar presentes en orina. 3. Cmo se obtiene la muestra para el anlisis? La muestra de orina para un urianlisis puede recogerse en cualquier momento del da. La mejor muestra es la primera de la maana porque es la ms concentrada y es la que con ms probabilidades detectar anomalas. 4. Cul es la tcnica para recoger correctamente la muestra? Las mujeres deberan asearse de adelante hacia atrs, abriendo los labios vaginales; los hombres deberan limpiarse la punta del pene. Al empezar a orinar, debe dejarse caer un poco de orina en el sanitario y entonces proceder a recoger la orina en el contenedor que se le haya suministrado, eliminando el resto de la orina directamente al sanitario. 5. Cmo se utiliza esta prueba? El urianlisis se utiliza como una herramienta de cribado y/o de diagnstico puesto que ayuda a detectar en orina sustancias o material celular asociados a distintas enfermedades metablicas y renales.

6. Para qu se solicita este tipo de estudio al paciente? Se solicita ampliamente y de manera rutinaria para detectar anomalas que posteriormente deberan de seguirse controlando. Detectar infecciones del tracto urinario (ITU) y otros trastornos del tracto urinario. 7. Qu componentes de la orina se evalan en el examen qumico? - Densidad Cuerpos cetricos - PH Urobilingeno - Sangre y hemoglobina Bilirrubina - Leucocitos Protenas - Glucosa Nitrito 8. Qu materiales se ocuparan en la prctica? - Tubos de ensaye 13 x 100 - Gasas - Guantes - Cubre bocas - Portaobjetos - Cubreobjetos - Pipetas Pasteur desechables - Marcador permanente - Bata - Centrifuga y microscopio 9. Con qu objetivos se analiz la muestra? Con los objetivos 10x y 40x.

10. Cul es la funcin de los riones?

Los riones filtran productos de desecho y productos metablicos intermediarios eliminndolos de la sangre, a la vez que ayudan a regular la cantidad de agua del organismo; todo ello, conservando protenas, electrolitos y otros compuestos que el organismo puede reutilizar. BIBLIOGRAFA Graff, S.L. anlisis de Orina, Atlas Color. Editorial Mdica Panamericana. Argentina 1987. Serie Paltex. Manual de Tcnicas Bsicas para un laboratorio de Salud. O.P.S. 1983. Strasinger, S.K. Lquidos Corporales y Anlisis de Orina. Manual Moderno, Mxico 1991.

PRCTICA: EXAMEN COPROPARASITO CPICO

OBJETIVO GENERAL: Realizar un examen coproparasitoscpico por el mtodo directo (exmenes fsico y microscpico) para observar e identificar los microorganismos presentes en la muestra.

OBJETIVOS ESPECFICOS Conocer el propsito con el que se realiza un examen coproparasitoscpico y aprender la etapas en el que se realiza (exmenes fisco y microscpico). Tomar una muestra de copro correctamente en base a una tcnica, para su manejo, transporte, conservacin y desecho de la misma. Analizar los resultados obtenidos y hacer un reporte sobre las observaciones de la prctica.

INTRODUCCIN El examen coproparasitoscpico es uno de los estudios de laboratorio que se pueden hacer para analizar las heces fecales, en particular este estudio se utiliza para identificar anormalidades correspondientes a infecciones parasitarias. El tipo de muestra recogida depender de la especie y forma del parsito sospechado. El conocimiento del ciclo vital del parsito ayuda a determinar el tipo, cantidad y frecuencia de los especmenes necesarios para el diagnstico. Para el estudio se requiere que se recolecte una muestra de heces fecales en un frasco limpio de vidrio con tapa de rosca. No se deben mezclar las heces con orina o con ningn otro lquido como agua de la taza del bao. El estudio se puede hacer con una sola muestra de heces fecales (examen coproparasitoscpico simple), este estudio simple es suficiente cuando la evidencia es tal que con una sola muestra se logran identificar gran cantidad de parsitos. Sin embargo la mayor parte de las veces es mejor solicitar un examen coproparasitoscpico seriado que consiste en evaluar 3 muestras de heces fecales, una cada da. La muestra de heces fecales debe de recolectarse de preferencia en la maana unas horas o minutos antes de llevarla al laboratorio, y de no ser posible, en la noche anterior y refrigerarla en el recipiente en el que se recolecto. La cantidad de heces no debe de ser mucha, generalmente con una pequea muestra (100 grs.) es suficiente. El frasco debe cerrarse hermticamente y no exponerse a calor extremo. Las muestras no deben recogerse durante 1 semana si el paciente ha estado tomando materiales que dejan residuos cristalinos, como compuestos anti diarreicos, anticidos, bismuto y bario, Adems los laxantes a base de aceites, como la parafina, pueden interferir en los exmenes. Los antibiticos

y los medios de contraste pueden disminuir la cantidad de organismos, particularmente los protozoos, en las heces durante 2 a 3 semanas. El anlisis de las heces e hace primero de manera macroscpica, evaluando consistencia, color, aspecto, presencia de moco, sangre, parsitos, etc. Se toma la muestra, se mezcla con yodo de lugol y se observa al microscopio para la identificacin de clulas inflamatorias, presencia de glbulos rojos, y sobre todo para identificar huevos, quistes o parsitos microscpicos. Otra muestra se evala en fresco para identificar parsitos mviles. En caso de no identificar parsitos en el primer examen se debe examinar las muestras obtenidas cada 2 a 3 das. Muchas infecciones parasitarias pueden pasar inadvertidas, a menos que se estudien con tinciones permanentes especiales. MATERIALES: - Portaobjetos - Cubreobjetos - Guantes - Gasas - Cubre bocas - Tubos de ensaye de 13 x 100 - Aplicadores de madera - Pipetas Pasteur desechables - Marcador de aceite - Gradilla - Microscopio, horno

REACTIVOS: - 2 ml de solucin salina - Lugol PROCEDIMIENTO TOMA DE MUESTRA: La colecta de la materia fecal se puede verificar de tres diferentes maneras: A) La ms frecuente es la obtenida por expulsin natural. B) La segunda se puede obtener con purgantes. (En amibiasis intestinal crnica y estrongiloidosis.) C) La que se toma por medio de cucharilla recta. (En lactantes o en nios pequeos). Las muestras sern seriadas con un mnimo de tres, salvo otras indicaciones. Las heces deben de colectarse directamente en un recipiente limpio, seco de boca ancha y con tapa, o transferirlas al recipiente con un abatelengua. La cantidad de muestra necesaria para ser analizada, puede variar de acuerdo al tipo de examen; en general es suficiente una cantidad que vara entre 20 y 40 g (tamao de una nuez) o dos cucharadas de heces lquidas. TCNICA: 1.- Conservacin de materia fecal en solucin de formaldehido: a) Con un abatelenguas, colocar aproximadamente 5 g de materia fecal en el frasco de vidrio. b) Aadir 15 ml de solucin de formaldehido caliente y mezclar con el abatelenguas hasta obtener una suspensin homognea. c) Etiquetar el frasco, con el nombre del alumno, nmero de equipo y fecha. 2.- Coproparasitoscpico microscpico en fresco:

a) Colocar una gota de solucin NaCl al 0.85%, en un portaobjetos. b) Con un aplicador obtener aproximadamente 2 mg de la materia fecal y mezclarla en la gota de solucin salina. c) Hacer una suspensin uniforme y retirar los detritos macroscpicos. d) Colocar un cubreobjetos y hacer la observacin microscpica inmediatamente con los objetivos 10X y 40X. e) En otro portaobjetos colocar una gota de lugol y continuar como con la gota de solucin salina. 3.- Coproparasitoscpico por sedimentacin simple: a) Con un abatelenguas colocar aproximadamente 10 g de heces, en elfrasco de vidrio. b) Aadir 50 ml de agua de la llave. Hacer una suspensin homognea. c) Filtrar a travs de la gasa y recoger el filtrado en el tubo cnico. d) Dejar sedimentar durante 30 min. e) Decantar el sobrenadante. f) Con la pipeta Pasteur colocar una gota del sedimento en un portaobjetos. g) Si el sedimento es grueso aadir una gotita de solucin salina. h) Cubrir con una laminilla y observar en el microscopio con los objetivos 10X y 40X. i) Colocar una gota del sedimento en otro porta-objetos y teirla con lugol. j) Cubrirla con una laminilla y observar en el microscopio con los objetivos 10X y 40X.

RESULTADO Nombre del paciente: Jess Eduardo Falcn Molina Edad: 15 aos Sexo: Masculino Tipo de estudio: Examen coproparasitoscpico Fecha: 16 de mayo de 2011 EXAMEN FSICO Color: Caf oscuro Olor: Desagradable Consistencia: Dura Presencia de pus: Negativo Presencia de mucosa: Negativo Presencia de sangre: Negativo EXAMEN MICROSCPICO Se encontraron fibras vegetales, almidones, fibras musculares.

OBSERVACIONES
Se limpi la mesa antes y despus de la Se analiz la muestra antes de iniciar la prctica. prctica.

Se procedi a realizar el examen fsico de Se colocaron 2ml de solucin salina en un tubo de ensaye y se agreg un poco de la muestra. muestra con un aplicador.

La gradilla se meti al horno con los tubos Se coloc una gota de la muestra en un de ensaye. (muestra de copro con solucin porta y se cubri con un cubre, para salina) observar en el microscopio.

En otro porta se agreg un poco de Se anotaron los muestra y se aadieron dos gotas de lugol. observaciones. Y se observaron en el microscopio.

resultados

de

las

CONCLUSIN

El diagnstico de las parasitosis intestinales depende del hallazgo de huevos, larvas o adultos de helmintos y quistes o trofozotos de protozoos en heces, por lo tanto, la recoleccin y el manejo adecuado de las muestras fecales son indispensables para la identificacin correcta de los parsitos en el laboratorio. Son factores que interfieren con el examen de las heces, la ingestin de medicamentos previa a su recoleccin y las muestras viejas o conservadas de manera inadecuada. La cantidad de materia fecal suficiente para un examen rutinario, es una muestra del tamao de una nuez o de dos o tres cucharadas soperas. La materia fecal se deposita en un recipiente de boca ancha con tapa hermtica y limpia; no debe contaminarse con agua, orina o cualquier otro material extrao; no debe obtenerse de la taza del bao ni del suelo. En lactantes, la muestra se obtiene mediante la cucharilla rectal, si el examen requerido es el microscpico en fresco. Las muestras, deben ser etiquetadas con el nombre del paciente, nmero de muestra, fecha y hora de coleccin. Generalmente, se recomienda examinar tres muestras, en das sucesivos, durante un periodo de siete a diez das. Dependiendo de la consistencia de la materia fecal, se elige el procedimiento para la bsqueda de trofozotos, quistes, ooquistes, huevos o larvas (ver esquema). Si las heces son blandas, diarreicas y lquidas, deben examinarse dentro de las dos primeras horas de haber sido recolectadas; si esto no es posible, se adiciona una solucin conservadora, por ejemplo: alcohol de polivinilo (PVA), merthiolate-iodo-formol (MIF) o Schaudin. Las heces formadas pueden ser examinadas durante el mismo da de su coleccin; si no es posible, pueden ser refrigeradas durante 24-48 h o conservadas en solucin de formaldehido 10%.

DISCUSIN

El examen coproparasitoscpico es uno de los estudios de laboratorio que se pueden hacer para analizar las heces fecales, en particular este estudio se utiliza para identificar anormalidades correspondientes a infecciones parasitarias. El tipo de muestra recogida depender de la especie y forma del parsito sospechado. El conocimiento del ciclo vital del parsito ayuda a determinar el tipo, cantidad y frecuencia de los especmenes necesarios para el diagnstico. Para el estudio se requiere que se recolecte una muestra de heces fecales en un frasco limpio de vidrio con tapa de rosca. No se deben mezclar las heces con orina o con ningn otro lquido como agua de la taza del bao. Examen directo en fresco. Esta etapa, a su vez, se ha de realizar en dos tiempos: preparacin de la muestra a examinar y examen microscpico propiamente dicho. En la preparacin de la muestra debern tenerse siempre muy en cuenta las caractersticas organolpticas de las mismas. CUESTIONARIO 1. Cul es el examen de laboratorio de eleccin para la bsqueda de huevos, quistes o larvas en heces? Los exmenes de concentracin 2. Cul es el examen de laboratorio de eleccin para la bsqueda de trofozotos en heces? El examen en fresco 3. Cules son las indicaciones para el uso de la cucharilla rectal? En lactantes, la muestra se obtiene mediante la cucharilla rectal, si el examen requerido es el microscpico en fresco. Las muestras, deben ser etiquetadas con el nombre del paciente, nmero de muestra, fecha y hora de coleccin. Generalmente, se recomienda examinar tres muestras, en das sucesivos, durante un periodo de siete a diez das.

4. Cul es la funcin de las sustancias conservadoras como el alcohol polivinlico o el merthiolate-iodo-formol en los estudios coproparasitoscpicos? Si las heces son blandas, diarreicas y lquidas, deben examinarse dentro de las dos primeras horas de haber sido recolectadas; si esto no es posible, se adiciona una solucin conservadora. 5. Qu entiende por examen coproparasitoscpico cualitativo? Generalmente se analiza el color, olor y forma de las evacuaciones, adems se realizan pruebas de deteccin de sangre oculta en heces, presencia de comida no digerida, presencia de exceso de grasas fecales, presencia de glbulos blancos (signo de inflamacin), se cuantifica el grado de acidez y el contenido de agua de la evacuacin y se reporta la presencia de bacterias o parsitos (existe sin embargo una prueba especfica para la determinacin de parsitos, denominado examen coproparasitoscpico). 5. Cmo deben recolectarse las heces fecales? De preferencia en la maana unas horas o minutos antes de llevarla al laboratorio, y de no ser posible, en la noche anterior y refrigerarla en el recipiente en el que se recolect. 6. Qu cantidad de muestra es suficiente? Generalmente con una pequea muestra del tamao de una nuez. 7. Cmo se realiza el examen coproparasitoscpico? Se hace primero de manera macroscpica, evaluando consistencia, color aspecto, presencia de moco, sangre, etc. 8. Qu materiales fueron necesarios para la prctica? - Portaobjetos - Cubreobjetos - Guantes - Gasas - Cubre bocas - Tubos de ensaye de 13 x 100

- Aplicadores de madera - Pipetas Pasteur desechables - Marcador de aceite - Gradilla - Microscopio, horno 9. Qu reactivos se emplearon la prctica? - 2 ml de solucin salina - Lugol

10. Qu objetivos se utilizaron para observar en el microscopio? 10x y 40x.

BIBLIOGRAFA Manual de Prcticas de laboratorio de Anlisis Clnicos III, fue aprobado por la Academia Estatal de Anlisis Clnicos III, con la participacin de los profesores titulares de la materia: QFB. Isabel Ruiz Snchez, QFB. Emilia Elizabeth Bolio Salazar, QFB. Myrna Ftima Ramrez Garca y QFB. Alberto Rodrguez Moya. Supervisado por la Licda. Silvia Luz Lpez Alcaraz y Licda. Laura Araceli Jimnez Cobin. Vigente a partir de febrero de 2009.

PRCTICA:
CUANTIFICACIN DE HEMOBLOGINA

INTRODUCCIN La hemoglobina es una protena en los glbulos rojos que transporta oxigeno. Un examen sanguneo puede determinar qu tanta hemoglobina tiene uno en la sangre. El examen de hemoglobina casi siempre se hace como parte de un conteo sanguneo completo (CSC). La hemoglobina es el componente m importante de los glbulos rojos y est compuesto de una protena llamada hemo, que fija el oxigeno, para ser intercambiado en los pulmones por dixido de carbono. Una molcula de hemoglobina consta de dos pares de cadenas polipeptidicas (unin de aminocidos) globina y cuatros grupos prosticos HEM que contiene cada uno un tomo de Fe en estado ferroso. Las cadenas peptdicas que son iguales 2 a 2 adoptan una posicin helicoidal; lo que da a la molcula de hemoglobina una estructura esteroide. Cada punto HEM se localiza en una zona determinada de una de las cadenas polipptidos. Localizado cerca de la superficie de la molcula, el HEM se combina de forma reversible con una molcula de O2 de CO2. Este grupo HEM es el responsable del color rojo de la hemoglobina. La parte proteica o globina tiene cuatro cadenas polipeptdicas que se denominan con las letras , , y . Existe una cadena ms, la que est presente durante los tres primeros meses de vida. Se diferencian unas a otras en el nmero o posicin (de los aminocidos de los que estn compuestos). Por lo tanto existen varios tipos de hemoglobinas. Valores normales Los resultados normales varan, pero en general son: * Hombre: de 13.8 a 17.2 g/dL * Mujer: de 12.1 a 15.1 g/dL Nota: g/dL = gramos por decilitro. Nota: los rangos de los valores normales pueden variar ligeramente entre diferentes laboratorios. Hable con el mdico acerca del significado de los resultados especficos de su examen.

Significado de los resultados anormales Los niveles de hemoglobina por debajo de lo normal pueden deberse a: * Anemia (diversos tipos) * Sangrado * Destruccin de glbulos rojos * Leucemia * Desnutricin * Deficiencias nutricionales de hierro, folato, vitamina B12 y vitamina B6 * Sobrehidratacin Los niveles de hemoglobina por encima de lo normal pueden deberse a: * Cardiopata congnita * Cor pulmonale * Deshidratacin * Eritrocitosis * Niveles bajos de oxgeno en la sangre (hipoxia) * Fibrosis pulmonar * Policitemia vera MATERIALES: Tubos de ensaye de 13 x 100 Tubo con anticoagulante EDTA Adaptador de Vacutainer Agujas Torniquete Torundas con alcohol Pipeta de Shali Tubo de ltex con boquilla de 30 cm Pipeta automtica, espectrofotmetro y cubetas de 1.0 nm de paso de luz REACTIVOS: - Reactivo hemoglobina - Agua destilada - Anticoagulante EDTA

PROCEDIMIENTO PREPARACIN: Reactivo de trabajo (RT) - Para 5 ml..4.9 ml de agua destilada + 2 gotas de reactivo - Para 250 ml.245ml de agua destilada + 1 frasco de reactivo (5ml) Mezclar bien. Estabilidad: 2 meses en nevera 2-8C protegido de la luz. CONSERVACIN Y ESTABILIDAD: Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta del vial, cuando se mantienen los vieles bien cerrados a 2-8C protegidos de la luz y se evita la contaminacin durante su uso. No usar reactivos fuera de la fecha indicada. Indicadores de deterioro de los reactivos: - Presencia de partculas y turbidez - Absorbancia (A) del Blanco a 540 nm : 0.01 MATERIAL ADICIONAL: - Espectrofotmetro - Cubetas de 1.0 nm de paso de luz - Equipamiento habitual de laboratorio MUESTRAS: Sangre capilar o venosa. Usar anticoagulante como EDTA, heparina u oxalato. Estabilidad de la muestra: 1 semana a 2-8C. PROCEDIMIENTO: 1.- Condiciones del ensayo Longitud de onda..540 nm Cubeta.1 cm paso de luz Temperatura.....15-25C 2.- Ajustar el espectrofotmetro a cero frente a agua destilada 3.- Pipetear

a) MTODO MACRO RT (ml) Calibrador (l) Muestra (l) b) MTODO MICRO RT (ml) Calibrador (l) Muestra (l) Blanco 2.5 --Patrn 2.5 10 -Muestra 2.5 -10 Blanco 5.0 --Patrn 5.0 20 -Muestra 5.0 -20

4.- Mezclar en incubar 3 minutos a temperatura ambiente (15-25C) 5.- Leer la Absorbancia (A) del calibrador y la muestra frente al Blanco de reactivo CLCULOS - Con factor: (A)Muestra x 36.77 = g/dL de hemoglobina de la muestra - Con patrn: (A)Muestra x 15 (con. Patrn) = g/dL de hemoglobina de la muestra (A)Patrn CONTROL DE CALIDAD Cada laboratorio debe disponer de su propio control de calidad y establecer correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias. VALORES DE REFERENCIA Hombres 14-18 g/dL = 8.7-11.2 mmol/L Mujeres 12-16 g/dL = 7.5 9.9 mmol/L Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio establezca sus propios valores de referencia. CARACTERSTICAS DEL MTODO Rango de medida: Desde el lmite de deteccin de 0.1 g/dL hasta el limite de linealidad de 20 g/dL. Si la concentracin de la muestra es superior al lmite de linealidad, diluir con ClNa 9 g/dL y multiplicar el resultado final por dos.

PRECISIN: Intraserie (n=20) Media 8.00 15.2 SD (g/dL) 0.29 0.33 CV (%) 3.59 2.19 Sensibilidad analtica: 1 g/dL = 0.027 A RESULTADO Nombre: Godoy Rodrguez Didin Yamileth Edad: 15 aos Sexo: Femenino Tipo de estudio: Cuantificacin de hemoglobina Fecha: 23 de mayo de 2011 1.- Absorbancia: 0.25 (Pipeta de Shali) 2.- Absorbancia: 0.3 (Pipeta automtica) Patrn: 0.24 A x 15 (con. Patrn) g/dL de hemoglobina en la muestra P PIPETA DE SHALI 0.25 x 15 = 15.625 g/dL de hemoglobina en la muestra 0.24 0.3 0.24 PIPETA AUTOMTICA x 15 = 18.75 g/dL de hemoglobina en la muestra Interserie (n=20) 7.81 15.1 0.19 0.26 2.51 1.74

OBSERVACIONES

Se limpi la mesa antes y despus de la Se extrajo una muestra de sangre venosa prctica. por mtodo de Vacutainer.

La mitad del equipo tom 20l con la Se agregaron 4.9 ml de agua destilada en pipeta de shali y la otra con una pipeta cada tubo de ensaye + 2 gotas del reactivo hemoglobina. automtica.

Se vaci la solucin en la cubeta y se ley Se anotaron los en el espectrofotmetro. observaciones.

resultados

de

las

DISCUSIN

La hemoglobina es una protena que contiene hierro y que le otorga el color rojo a la sangre. Se encuentra en los glbulos rojos y es la encargada del transporte de oxgeno por la sangre desde los pulmones a los tejidos. La hemoglobina tambin transporta el dixido de carbono, que es el producto de desecho del proceso de produccin de energa, lo lleva a los pulmones desde donde es exhalado al aire. El anlisis de la hemoglobina se realiza normalmente en un estudio completo de hematimetra, con el recuento de glbulos rojos o hemates. Procedimiento de Obtencin 1. Para realizar este anlisis no se precisa estar en ayunas. 2. Se puede realizar la toma en un lugar apropiado (consulta, clnica, hospital) pero en ocasiones se realiza en el propio domicilio del paciente. 3. Para realizar la toma se precisa de localizar una vena apropiada y en general se utilizan las venas situadas en la flexura del codo. La persona encargada de tomar la muestra utilizar guantes sanitarios, una aguja (con una jeringa o tubo de extraccin). 4. Le pondr un tortor (cinta de goma-ltex) en el brazo para que las venas retengan ms sangre y aparezcan ms visibles y accesibles. 5. Limpiar la zona del pinchazo con un antisptico y mediante una palpacin localizar la vena apropiada y acceder a ella con la aguja. Le soltarn el tortor. 6. Cuando la sangre fluya por la aguja el sanitario realizar una aspiracin (mediante la jeringa o mediante la aplicacin de un tubo con vaco). 7. Si se requiere varias muestras para diferentes tipos de anlisis se le extraer ms o menos sangre o se aplicarn diferentes tubos de vaco. 8. Al terminar la toma, se extrae la aguja y se presiona la zona con una torunda de algodn o similar para favorecer la coagulacin y se le indicar que flexione el brazo y mantenga la zona presionada con un esparadrapo durante unas horas.

CONCLUSIN La hemoglobina es una protena que contiene hierro, torga el color rojo a la sangre.se encuentra en los glbulos rojos y es la encargada del transporte de oxigeno por la sangre desde los pulmones hasta los tejidos. Cuando el nivel de hemoglobina aparece por debajo de los niveles normales indica anemia que puede obedecer a diferentes causas: anemia primaria, cncer, embarazo, enfermedades renales o hemorragias. Si el nivel de hemoglobina es alto puede deberse a cardiopatas, deshidratacin o estancia en lugares de gran altitud. El diagnostico clnico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clnicos y de laboratorio. PRINCIPIO DEL MTODO La hemoglobina es oxidada por la accin del ferricianuro a metahemoglobina y mediante el cianuro se convierte en cianmetahemoglobina. La intensidad del solo formado es proporcional a la concentracin de hemoglobina presente en la muestra ensayada. REACTIVOS: Hemoglobin 50x Ferricianuro de potasio...0.60 mmol/L Cianuro de potasio.77 mmol/L Dihidrogeno fosfato de potasio..2 mmol/L

CLCULOS - Con factor: (A)Muestra x 36.77 = g/dL de hemoglobina de la muestra - Con patrn: (A)Muestra x 15 (con. Patrn) = g/dL de hemoglobina de la muestra (A)Patrn

CUESTIONARIO 1. Qu es la hemoglobina? Es una protena que contiene hierro y otorga el color rojo a la sangre. 2. Por qu compuestos se oxida la hemoglobina? Es oxidada por la accin del ferricianuro a metahemoglobina y mediante el cianuro se convierte en cianmetahemoglobina. 3. Cules son los clculos que se deben realizar para la cuantificacin de hemoglobina presente en una muestra de sangre? CLCULOS - Con factor: (A)Muestra x 36.77 = g/dL de hemoglobina de la muestra - Con patrn: (A)Muestra x 15 (con. Patrn) = g/dL de hemoglobina de la muestra (A)Patrn 4. Qu materiales se emplearon en la prctica? Tubos de ensaye de 13 x 100 Tubo con anticoagulante EDTA Adaptador de Vacutainer Agujas Torniquete Torundas con alcohol Pipeta de Shali Tubo de ltex con boquilla de 30 cm Pipeta automtica, espectrofotmetro y cubetas de 1.0 nm de paso de luz

5. Qu reactivos se utilizaron para el desarrollo de la prctica? - Reactivo hemoglobina - Agua destilada - Anticoagulante EDTA

6. Qu transporta la hemoglobina? La hemoglobina tambin transporta el dixido de carbono, que es el producto de desecho del proceso de produccin de energa, lo lleva a los pulmones desde donde es exhalado al aire. 7. Cul es la composicin del reactivo de trabajo? Reactivo de trabajo (RT) - Para 5 ml..4.9 ml de agua destilada + 2 gotas de reactivo - Para 250 ml.245ml de agua destilada + 1 frasco de reactivo (5ml) Mezclar bien. 8. Cmo se puede conservar el reactivo de trabajo? Estabilidad: 2 meses en nevera 2-8C protegido de la luz. 9. Cules son los valores de concentracin de hemoglobina en la sangre? VALORES DE REFERENCIA Hombres 14-18 g/dL = 8.7-11.2 mmol/L Mujeres 12-16 g/dL = 7.5 9.9 mmol/L 10. Cules son las condiciones del ensayo? 1.- Condiciones del ensayo Longitud de onda..540 nm Cubeta.1 cm paso de luz Temperatura.....15-25C BIBLIOGRAFA Nicoll D, McPhee SJ, Pignone M, et al (Eds): Pocket Guide to Diagnostic Tests, 3rd. McGraw-Hill, New York, NY, United States, 2001. Tietz NW (Ed): Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed. W. B. Saunders, Philadelphia, PA, 1995.