INFORMES Y PRACTICAS DE LABORATORIOS DE MICROBIOLOGIA.

DAYRA MARYORI SERRANO. LINA MARIA ACEVEDO RUIZ. ANGELY OSPINA OSPINA.

UNIVERSIDAD DE CALDAS

FACULTAD DE INGENIERIAS

PROGRAMA DE INGENIERIA DE ALIMENTOS

MANIZALES

01/12/2011

PRACTICA 2. EL MICROSCOPIO

INTRODUCCION. El desarrollo del microscopio, hace ms de 300 aos, mostr que la vida no est limitada a lo que se ve por observacin directa. Aquel invento permiti descubrir niveles de complejidad insospechados en los organismos vivos. Mediante el microscopio apareca un mundo nuevo que los cientficos de la poca no saban cmo interpretar. Los primeros, construidos en el siglo XVII, tenan una sola lente. Qu muestran los microscopios? El estudio de los sistemas biolgicos est limitado por el poder de resolucin de los instrumentos utilizados para su anlisis, es decir, su habilidad para distinguir dos objetos, ubicados muy prximos entre s, como entidades discretas. El ojo humano slo puede hacerlo con puntos separados por ms de 0,1 milmetros (100 micrones). La mayora de los microscopios pticos comunes poseen un poder de resolucin de 0,0002 milmetros (0,2 micrones), y esto permite no slo ver clulas, sino adems sus componentes macroestructurales. MARCO TEORICO. GRANDES PERSONAJES INFLUYENTES EN LA CREACION DEL MICROSCOPIO. Galileo Galilei fue un astrnomo, filsofo, matemtico y fsico italiano que estuvo relacionado estrechamente con la revolucin cientfica. Eminente hombre del Renacimiento, mostr inters por casi todas las ciencias y artes. Sus logros incluyen la mejora del telescopio, gran variedad de observaciones astronmicas. Segn los italianos fue l quien a mediados de 1610 cre el primer microscopio.

Zacharias Janssen Hay una leyenda que dice que Zacharias Janssen, durante su infancia, descubri el microscopio mientras jugaba con otro nio con lentes daadas en el taller de Hans Lippershey. Ellos sostenan dos lentes ante sus ojos en direccin a la veleta de la iglesia local y vean como sta pareca acercarse. Segn los holandeses fue l quien invento el primer microscopio. Robert Hooke Fue uno de los cientficos experimentales ms importantes de la historia de la ciencia, polemista incansable con un genio creativo de primer orden. Sus intereses abarcaron campos tan dispares como la biologa, la medicina, la cronometra,

la fsica planetaria, la mecnica de slidos deformables, la microscopa, la nutica y la arquitectura. En 1665 observ con un microscopio un delgado corte de corcho y not que el material era poroso, en su conjunto, formaban cavidades poco profundas a modo de celditas a las que llam clulas. Se trataba de la primera observacin de clulas muertas. Unos aos ms tarde Marcello Malpighi Anatomista y bilogo italiano, observ clulas vivas. Fue el primero en estudiar tejidos vivos al microscopio. Anton van Leeuwenhoek Fue el primero en realizar importantes observaciones con microscopios fabricados por s mismo. Desde 1674 hasta su muerte realiz numerosos descubrimientos. Introdujo mejoras en la fabricacin de microscopios y fue el precursor de la biologa experimental, la biologa celular y la microbiologa. Describi por primera vez protozoos, bacterias, espermatozoides y glbulos rojos. El microscopista Leeuwenhoek, sin ninguna preparacin cientfica, puede considerarse el fundador de la bacteriologa Ernst Karl Abbe Fue un fsico, estadstico, ptico, empresario y reformador social alemn. Junto con Carl Zeiss y Otto Schottsent las bases de la ptica moderna, desarroll numerosos instrumentos pticos y contribuy a la fama mundial de la empresa Carl Zeiss. Public su teora del microscopio y, por encargo de Carl Zeiss, mejor la microscopa de inmersin sustituyendo el agua por aceite de cedro, lo que permite obtener aumentos de 2000. A principios de los aos 1930 se haba alcanzado el lmite terico para los microscopios pticos, no consiguiendo stos aumentos superiores a 500X o 1000X. Sin embargo, exista un deseo cientfico de observar los detalles de estructuras celulares (ncleo, mitocondria, etc.).

Max Knoll y Ernst Ruska El microscopio electrnico de transmisin (TEM) fue el primer tipo de microscopio electrnico desarrollado. Utiliza un haz de electrones en lugar de luz para enfocar la muestra consiguiendo aumentos de 100.000X. Fue desarrollada en Alemania en1931. Posteriormente, en 1942 se desarrolla el microscopio electrnico de barrido (SEM).

MATERIALES Microscopio Asas bacteriolgicas Cajas de Petri Portaobjetos Cubreobjetos Una palabra impresa Un corcho Sulfato de Cobre Un cabello

PROCEDIMIENTOS.

Enciende el iluminador Coloque al centro el objeto y coloque sus ojos tan cerca posible sea del lente Ahora enfoque con los tornillos hasta que se vea bien la imagen

IMGENES: Corcho: esta imagen la obtuvimos a un lente de 100X

Sulfato de cobre: esta imagen la obtuvimos en un lente de 100X

Letra: esta imagen la obtuvimos en un lente de 100X

Cabello humano: esta imagen la obtuvimos en un lente de 40X

CONCLUCIONES: Una de las conclusiones ms importantes en el trabajo de la microscopia es que gracias a estos aparatos podemos apreciar ms de cerca las estructuras de ciertos elementos que a simple vista no se pueden ver

PREGUNTAS PARA CONSULTAR.

Cmo influye el aceite de inmersin en el poder de resolucin? El aceite de inmersin tiene un ndice de refraccin similar a la del vidrio, esto consigue una mayor resolucin. Al aumentar el ndice de refraccin, aumenta la curvatura de la luz que incide sobre la muestra y entran mayor cantidad de rayos en la lente y por tanto aumenta la resolucin del microscopio.

Por qu los microscopios tienen un filtro azul para la fuente de luz? En diversas partes del recorrido de haz luminoso, aunque en la mayora de los casos se sitan entre la fuente luminosa y el condensador. Tienen por finalidad modificar la longitud de onda de la luz que ilumina el objeto a observar. Por ejemplo, cuando se utiliza Son estructuras transparentes (de vidrio, plstico o gelatina) coloreadas que se localizan luz artificial es necesario emplear filtros azules pues modifican el color ligeramente amarillento que poseen los rayos luminosos que emite las lmparas elctricas, transformndolos en rayos de luz blanca. Este color de luz es ms aceptada por la retina y en las prepa raciones histolgicas coloreadas mejora facilita la rendicin de color de las estructuras celulares o tisulares examinadas. Caractersticas principales del microscopio ptico, microscopia de fluorescencia y microscopia de campo oscuro. Dibuje y explique cada una de las partes. MICROSCOPIO OPTICO. Un microscopio ptico es un microscopio basado en lentes pticos. Tambin se le conoce como microscopio de luz, (que utiliza luz o "fotones") o microscopio de campo claro. El desarrollo de este aparato suele asociarse con los trabajos de Anton van Leeuwenhoek. Los microscopios de Leeuwenhoek constaban de una nica lente pequea y convexa, montada sobre una plancha, con un mecanismo para sujetar el material que se iba a examinar (la muestra o espcimen). Este uso de una nica lente convexa se conoce como microscopio simple, en el que se incluye la lupa, entre otros aparatos pticos.

MICROSCOPIO DE FLUORESCENCIA. El microscopio de fluorescencia es una variacin del microscopio de luz ultravioleta en el que los objetos son iluminados por rayos de una determinada

longitud de onda. La imagen observada es el resultado de la radiacin electromagntica emitida por las molculas que han absorbido la excitacin primaria y remitido una luz con mayor longitud de onda. Para dejar pasar slo la emisin secundaria deseada, se deben colocar filtros apropiados debajo del condensador y encima del objetivo. Se usa para detectar sustancias con auto fluorescencia (vitamina A) o sustancias marcadas con fluorocromos. MICROSCOPIO DE CAMPO OSCURO. El microscopio de campo oscuro utiliza un haz enfocado de luz muy intensa en forma de un cono hueco concentrado sobre el espcimen. El objeto iluminado dispersa la luz y se hace as visible contra el fondo oscuro que tiene detrs, como las partculas de polvo iluminadas por un rayo de sol que se cuela en una habitacin cerrada. Por ello las porciones transparentes del espcimen quedan oscuras, mientras que las superficies y partculas se ven brillantes, por la luz que reciben y dispersan en todas las direcciones, incluida la del eje ptico que conecta el espcimen con la pupila del observador. Esta forma de iluminacin se utiliza para analizar elementos biolgicos transparentes y sin Pigmentar, invisibles con iluminacin normal, sin fijar la muestra, es decir, sin matarla. Tambin es bastante utilizado en la observacin de muestras metalogrficas para la observacin de detalles en superficies con alta reflectancia.

En qu consiste la microscopia confocal? Dibuje y explique las partes de este nuevo tipo de microscopia La Microscopa Confocal es una tecnologa que permite observaciones a una resolucin mayor que la que se puede lograr con la microscopa ptica convencional. Emplea un sistema lser que aplica el haz de luz en forma de barrido, en una pequea parte del espcimen. El laser aplicado a una longitud de onda determinada en la muestra, hace que molculas excitadas de la misma, emitan fluorescencia a una longitud de onda mayor a la aplicada. La fluorescencia en una muestra puede ser debida a molculas que se encuentran de forma natural (auto fluorescencia como en el caso de la clorofila) o puede ser producida por molculas aplicadas artificialmente a la muestra llamadas fluorocromos. Hay una gran cantidad de fluorocromos especficos en el mercado usados para diferentes estructuras celulares y para diferente emisin de fluorescencia. El uso de varias combinaciones de laser capaces de detectar y producir fluorescencia a diferentes longitudes de onda, permite un escaneo de la muestra en un amplio rango del espectro de luz, permitiendo la observacin de estructuras teidas con tal detalle como no se puede lograr con tcnicas convencionales. Debido a que penetra fcilmente la muestra, el microscopio confocal logra imgenes en diferentes planos focales que ligados a un programa de computo, puede reproducir una imagen tridimensional del material observado.

Las siguientes caractersticas han hecho de la microscopia con focal una de las herramientas de trabajo predilectas por cientficos de las ciencias biolgicas mdicas y de materiales de todo el mundo: Alta sensibilidad en la observacin. Especificidad en la emisin de la fluorescencia. Mayor Resolucin. Tridimensionalidad de las imgenes.

En qu consiste la microscopia de sonda de barrido? En los microscopios de sonda de barrido se utiliza una sonda que recorre la superficie de una muestra, proporcionando una imagen tridimensional de la red de tomos o molculas que la componen. La sonda es una afiliada punta de metal que puede tener un grosor de un solo tomo en su extremo. Un tipo importante de microscopio de sonda de barrido es el microscopio de tnel de barrido (siglas en ingles de Scanning Tunelling Microscope, STM) desarrollado en 1981. Otro tipo de microscopio de sonda de barrido es el microscopio de fuerza atmica (Atomic Force Microscope, AFM), que no emplea la corriente de efecto tnel y que por lo tanto puede utilizarse tambin en materiales conductores.

Microscopio de campo oscuro

PRACTICA 3 ESTERILIZACION.

INTRODUCCION. La esterilizacin significa la eliminacin de toda forma de vida de un medio o material, lo que se lleva a cabo generalmente por medios fsicos, por ejemplo, filtracin, o por muerte de los organismos por calor, productos qumicos u otra va. Esta definicin excluye por lo tanto cualquier tcnica que resulte solamente en un dao a los microorganismos o atenuacin de la actividad de cualquier tipo. En la esterilizacin se halla prdida de la viabilidad o capacidad de reproduccin de microorganismos. Su margen de seguridad se expresa como una funcin de probabilidad. Debe alcanzarse, al menos, la probabilidad de solo un microorganismo Sobreviviente en 1 milln.

MARCO TEORICO. FORMAS DE ESTERILIZACION. METODOS FISICOS Calor hmedo Destruye los microorganismos por coagulacin de sus protenas celulares. El principal mtodo de esterilizacin que emplea calor hmedo es la esterilizacin por vapor a presin. Existen otros mtodos de descontaminacin que emplean este tipo de calor los cuales, aunque no permiten la destruccin total de los microorganismos, disminuyen la carga microbiana que posee un material. Entre estos mtodos podemos citar: Tindalizacin (esterilizacin fraccionada) Agua hirviendo Pasteurizacin Olla de presin

Esterilizacin por vapor a presin La esterilizacin por vapor a presin se lleva a cabo en una autoclave. Estos equipos emplean vapor de agua saturado, a una presin de 15 libras lo que permite que la cmara alcance una temperatura de 121C. El tiempo de esterilizacin usualmente es de 15 minutos, sin embargo, en algunas

oportunidades, dadas las caractersticas del material, es necesario variar el tiempo de esterilizacin.

Calor seco La esterilizacin por calor seco produce la destruccin de los microorganismos por oxidacin de sus componentes celulares. ste es un proceso menos eficiente que la esterilizacin por calor hmedo, porque los microorganismos mueren con mayor rapidez cuando se encuentran en presencia de agua, ya que ste permite que se altere con mayor facilidad la configuracin de sus protenas y proporciona un medio para distribuir el calor uniformemente en toda la cmara interna del equipo de esterilizacin. Por esta razn, para lograr la esterilizacin del material empleando el calor seco, se deben aplicar temperaturas ms altas durante mayor tiempo. La esterilizacin por calor seco se puede realizar por varios mtodos: Aire caliente Llama directa Incineracin Aire caliente Aire caliente Es uno de los mtodos de esterilizacin por calor seco ms utilizados. Este proceso se lleva a cabo en hornos especiales que permiten la distribucin uniforme del calor en su interior, donde el material se expone a temperaturas de aproximadamente 170C durante 2 horas. El tiempo de esterilizacin se debe determinar para cada tipo de material, por ejemplo en el caso de materiales muy resistentes al calor, se pueden usar temperaturas ms altas por tiempos ms cortos. Entre las ventajas de este mtodo de esterilizacin estn que no deja residuos, y es un mtodo rpido y econmico. Adems permite la esterilizacin de materiales no miscibles con el agua como es el caso de polvos, aceites y grasas. Su principal desventaja es que slo debe emplearse para esterilizar materiales termoestables. Para controlar este proceso de esterilizacin se utilizan indicadores fsicos tales como los termmetros, los cuales permiten medir la uniformidad de la temperatura de la cmara interna del horno, indicadores qumicos como las cintas adhesivas e indicadores biolgicos como las esporas de Bacillus subtilis. Este mtodo se emplea para la esterilizacin de material de vidrio, instrumentos quirrgicos, agujas de metal, materiales no miscibles con el agua, etc.

Llama directa Consiste en colocar el material directamente al fuego hasta que ste se ponga al rojo vivo. De esta forma se queman los contaminantes hasta reducirlos a cenizas.

Su eficacia depende de la calidad de la llama. Es un procedimiento muy sencillo que se realiza de rutina en los laboratorios de microbiologa para esterilizar el asa o el filamento con la llama del mechero. Cuando se realiza este procedimiento se debe evitar la formacin de aerosoles (pequeas gotas liberadas al aire) que podran contaminar el ambiente. Incineracin El material a esterilizar se coloca en cmaras especiales que alcanzan elevadas temperaturas. Con este mtodo se queman los contaminantes hasta reducirlos a cenizas. Es una forma efectiva de esterilizar el material contaminado a descartar tales como bolsas, papel, uniformes desechables, cadveres de animales, etc. Calor rojo Los instrumentos tales como las asas, alambres de siembra y barrillas secas se esterilizan calentndolas en la llama del mechero bunsen hasta que se pongan color rojo MATERIALES Pipetas Cajas de petri Tubos de ensayo Papel kraf Mechero bunsen Autoclave Horno Asas PROCEDIMENTOS.

Los mtodos de esterilizacin pueden ser de 3 tipos: Por destruccin total de microorganismos; Por muerte o inactivacin; y Por eliminacin con medios fsicos. Por destruccin total se entiende un proceso muy violento, que casi siempre implica calentamiento apreciable del material, como ocurre con la aplicacin de una llama, que es lo que hacemos en el laboratorio cuando flameamos un ansa de platino o las bocas de tubo de ensayo o erlenmeyers. Otra manera de destruir contaminantes es con el uso de poderosos agentes oxidantes. Por supuesto sta metodologa, aunque es efectiva, est muy restringida en su empleo. La muerte o inactivacin significa la eliminacin de microorganismos sin que exista necesariamente desintegracin de las clulas. Se puede efectuar por calentamiento, seco o hmedo, por radiaciones o por agentes qumicos. El calor hmedo, generalmente en forma de vapor bajo presin, es muy til y de gran valor

en la esterilizacin en el laboratorio, que se efecta en autoclave, o en la industria cuando se esterilizan los medios de cultivo y los equipos de fermentacin. En el caso de los autoclaves, se pueden alcanzar presiones de 1 a 3 atmsferas. En escala grande el equipo de produccin es esterilizado con vapor saturado bajo presin, y la presin requerida debe ser alcanzada en todas las partes del equipo y el aire debe ser purgado totalmente del sistema (como ocurre tambin en el caso de los autoclaves) porque la transferencia de calor disminuye mucho en ese caso. Despus de la esterilizacin se mantienen las condiciones aspticas, haciendo pasar vapor por las vlvulas y sellos. La eliminacin fsica est restringida a la esterilizacin de gases lquidos, y es fundamentalmente llevada a cabo por filtracin mediante filtros absolutos o filtros fibrosos. Los filtros absolutos son de materiales cermicos, de vidrio o de metal sinterizado con poros tan pequeos que la penetracin de los microorganismos no es posible. Los filtros fibrosos no son absolutos y el material filtrante puede ser lana de vidrio, amianto y esteres de celulosa, siendo las fibras de un dimetro variable de 0.5 a 15 micrones.

PREGUNTAS PARA CONSULTAR.

Cuntos tipos de esterilizacin por calor existen? Calor rojo Calor seco Calor hmedo

Qu es la esterilizacin? La esterilizacin es un mtodo del control del crecimiento microbiano que involucra la eliminacin de todas las formas de vida, incluidos virus y esporas. Es un trmino absoluto que implica la prdida de la viabilidad mediante la destruccin de todos los microorganismos contenidos en un objeto, rea especfica o sustancia, acondicionando de tal modo la posterior propagacin o contaminacin a otros objetos o al medio ambiente.

Cmo funciona un autoclave porttil vertical? Consta de un recipiente de aluminio similar a una olla de presin de aproximadamente 35 cm de dimetro y 30 cm de altura. La tapa es separada y se adhiere por medio de armellas al borde superior del recipiente, y est provista de

un manmetro y una vlvula de seguridad. El agua destilada se coloca en el fondo hasta un nivel inferior al soporte de la base, sobre el que se coloca una olla en el interior, dentro de la cual se insertan las vasijas que se va a esterilizar. Segn el tipo y el volumen de los frascos que se utilicen, se pude esterilizar unos 3 o 4 litros de medio. La fuente de calor, que puede ser una hornilla a gas o elctrica, regula la presin

Cmo funciona un autoclave horizontal? Consta de un cilindro horizontal de pared simple o doble, con una compuerta de cierre hermtico que tolera presiones de vapor de agua de por lo menos 30 lbs.pulg2. Su efectividad se basa en el hecho de que a mayor presin, mayor es la temperatura de ebullicin del agua. Tiene una caldera propia o conexin a vapor de agua de una central. Cuando la presin aumenta a 2 atmosferas (15 lbs.) La temperatura llega a 121.6C; no hay organismo que tolere esta temperatura por 15 minutos. El tiempo es el factor que permite que el calor penetre y se absorba. Este mtodo es excelente para esterilizar medios en frascos, pero si el volumen es mayor que un litro, deber aumentarse el tiempo de operacin. Debe observarse que la temperatura llegue a 121C, lo cual no sucede con la presin de 15 lbs. Si la evacuacin del aire inicialmente encerrado es inadecuada.
Cuales son diferentes agentes qumicos para el control microbiano?

Algunos de los factores que deben tenerse en consideracin al hacer seleccin de un agente qumico antimicrobiano par su aplicacin prctica son: Naturaleza del material que se va a tratar. Un agente qumico usado para desinfectar utensilios contaminados puede ser muy poco satisfactorio para la aplicacin sobre la piel es decir puede daar seriamente las clulas de los tejidos en consecuencia, las sustancias seleccionadas debe ser compatible con el material al cual se aplica. Tipo de microorganismo. No todos lo microorganismos son iguales susceptibles a la accin inhibidora o mortfera de un agente qumico especifico. Por ellos debe saberse que el agente seleccionado es efectivo contra el tipo de microorganismo que hay que destruir. Condiciones ambientales los factores de temperatura, pH, tiempo, concentracin y presencia de materiales orgnicos extraos, puede tener influencia sobre la casa y la efectividad de la destruccin microbiana. El uso con xito de un agente microbiano requiere en la influencia de estas condiciones sobre el agente determinado, de manera que pueda ser empleada bajo las condiciones favorables. PRINCIPALES GRUPOS DE AGENTES QUIMICOS ANTIMICROBIANO

Algunos de los principales grupos de agentes antimicrobianos son: Fenol y compuestos fenolicos Alcoholes Halgenos y sus compuestos Metales pesados y sus compuestos Detergentes Alcoholes FENOLES Y COMPUESTOS FENOLICOS: la actividad de los compuestos revolicos frente a los microorganismos depende de la clase de compuestos utilizados. El fenol adsorbe la materia orgnica en el caso de que est presente y reduce la concentracin apropiada para distribuir los microorganismos. El fenol es una sustancia corrosiva y muy toxica para los tejidos vivos. Sobre las clulas bacterianas acta desnaturalizando y coagulando las protenas, o formacin de albuminatos insolubles. Presenta excelente propiedades conservadoras emplendose para este fin en preparacin biolgica y laboratorios, a concentraciones de 0.5%. Efectivamente, los compuestos fenolicos, a elevadas concentraciones actan sobre el microorganismo por la desnaturalizacin de las protenas celulares pero, a concentraciones ms bajas rompen la pared celular solida constituyentes externas. Generalmente, los fenoles son eficaces frente a bacterias gram positivas y gram negativas, asi como contra la tuberculosis, aunque algunos homlogos superiores pueden ser pocos efectivos. ALCOHOLES: la actividad antimicrobiana de los alcoholes aumenta en funcin de su peso molecular y de la longitud de la cadena. Los alcoholes etlicos e isopropilicos de una cadena mas corta son los ms frecuentemente utilizados como desinfectantes. Son efectivos en la desinfeccin de la piel, volatilizndose rpidamente y dejndolo seca, casi de forma instantnea. Esto constituye una ventaja en ocasiones, pero en otras es un inconveniente al no permitir una accin antibacteriana duradera; por ello, a veces se adiciona a las soluciones alcohlicas otros germicidas. Actan por desnaturalizacin de protenas bacterianas, considerndose esencialmente la presencia de agua para destruir los agentes infectivos; la mezcla ptima seria la correspondiente a un alcohol de 60-70%. HAMOGENOS Y SUS COMPUESTOS: la familia de los halgenos consta de cuatro elementos flor, cloro, bromo e yodo. El bromo y el yodo son los ms utilizados como agentes antimicrobianos.

Yodo es uno de los ms antiguos y ms eficaces agentes germicidas. El yodo puro es solo ligeramente solubles en agua pero fcilmente soluble en alcoholes y el soluciones acuosas de yoduro sodioco o potsico. El yodo se usa tradicionalmente como germicida en una forma que se conoce como tritura de yodo, tambin se utiliza en forma de yodoforos, mezcla de yodo con agentes activo de superficie que acta como portadores y solubilisadores de yodo. El yodo es un agente altamente afectivo y es nico en cuanto a su efectividad contar todas las clases de bacterias, esporas, hongos y virus. Las soluciones de yodo son atizadas para la desinfeccin de la piel. Los yodoforos son complejos de yodo elemental con agentes surfactates o humectantes no inicos. Poseen las caractersticas generales del yodo. Tienen baja presin vapor y menos productos txicos irritantes. Tambin su olor es ms discreto, su aplica para desinfectar la piel. CLORO: se usa como desinfectante desde hace muchos aos y su papel ms importante lo juega en el tratamiento de las aguas de abastecimiento de poblaciones y piscinas. El gas cloro reacciona con el agua para formar acido hipocloroso. HIPOCLORITOS: el hipoclorito clcico (polvo blanqueador) se prepara dejando que reacciones el gas de cloro con cal muerta, y bien en estado slido o en suspensin acuosa. La solucin de hipoclorito sdico se obtiene Poe electrolisis en frio de una dilucin de sal comn y por reaccin entre el polvo blanqueador y el carbonato sdico.la estabilidad de la solucin de hipoclorito estn influidas por la temperatura, concentracin, y pH. METALES PESADOS Y SUS COMPUESTOS: todas las sales en solucin son en cierto grado de germicidas, dependiendo de esta accin de su concentracin. En general las sales de los metales pesados son mas toxicas que las de los dems metales. Las sales principales usadas como desinfectantes son las de mercurio, cobre y plata que a altas concentraciones, son coagulantes proteicos a concentraciones ms bajas de los que se utiliza, son similares a los desinfectantes qumicos que se unen a los grupos sulfhdricos de las enzimas celulares.

DETERGENTES: los agentes rebajan la tensin superficial o agentes humectantes empleados primordialmente para limpiar superficies, se llaman detergentes, el

jabn es un ejemplo funciona bien con aguas duras por esta razn se han desarrollado nuevos y ms eficientes agentes. ALDEHIDOS: el glutaraldehido y formaldehido son dos compuestos de la clase aldehdos que tiene varias aplicaciones para controlar a los microorganismos. Glutaraldehidos presentan un amplio espectro de la actividad antimicrobiana. Es efectiva contra bacterias vegetativas, hongos, esporas de bacterianas, fngicas y virus. Se usa para esterilizar instrumentos con lentes y otros, sin embargo, se necesita una grande exposicin para lograr la esterilizacin. Formaldehidos es un gas estable eleva concentraciones a temperaturas ambiente, se polimeriza formando una sustancia solo a l polmero importantes es el paraformaldehido, un slido incoloro que al calentar rpidamente libera formaldehido. QUIMIOESTERILIZANTES GASEOSOS: actualmente se fabrica una gran variedad de productos con materiales que no pueden ser esterilizados mediante el uso de altas temperaturas o de estabilizantes qumicos lquidos. Oxido de etileno. Es un liquido a temperatura por debajo de 10.8 C. por encima de esta temperatura se evapora rpidamente, los vapores de oxido de etileno en aire son inflamables, aun en baja concentracin.

PRACTICA 4

TINCIONES BACTERIANAS PREPARACION Y FIJACION DE FROTIS BACTERIOLOGICO

INTRODUCCIN Se denomina frotis a la extensin que se realiza sobre un portaobjetos de una muestra o cultivo con objeto de separar lo ms posible los microorganismos, ya que si aparecen agrupados en la preparacin es muy difcil obtener una imagen clara y ntida. Este frotis debe ser posteriormente fijado al vidrio del portaobjetos para poder aplicar los mtodos habituales de tincin que permiten la observacin al microscopio de las bacterias sin que la muestra sea arrastrada en los sucesivos lavados. La fijacin de una extensin bacteriana hace que las bacterias queden inactivadas y adheridas al vidrio alterando lo menos posible la morfologa y bacteriana y las posibles agrupaciones de clulas que pudiera haber. Para tener una diferenciacin optima cuando hacemos microscopia, utilizamos la tincin porque esta aparte de diferenciar si son gram positivas o gram negativas por sus respectivos colores nos da una idea de la morfologa celular de cada microorganismo. MARCO TEORICO TINCIN Y COLORANTES: Una tcnica auxiliar en microscopio para mejorar el contraste en la imagen vista al microscopio. En bioqumica, esto implica agregar un colorante especfico (ADN, protenas, lpidos, carbohidratos, etc.) a un sustrato para cualificar o cuantificar la presencia de un determinado compuesto. Esto es similar al marcado fluorescente. Las tinciones y colorantes se usan con frecuencia en biologa y en medicina para destacar estructuras en tejidos biolgicos para observacin, a menudo con la ayuda de diferentes tipos de microscopios.

OBJETIVOS Diferenciar las bacterias gram positivas de las gram negativas Por medio de la tincin de las clulas, diferenciar su morfologa Observar las endosporas, y comparar las distintas morfologas de cada clula.

MATERIALES: Placas Lugol Alcohol(acetona) Safranina Cristal violeta Microscopio mechero PROCEDIMIENTO: Cubrimos la placa con cristal violeta durante un minuto, luego de que pase el minuto la lavamos con agua para eliminar el exceso de colorante, luego cubrimos la placa con lugol por un minuto despus de pasado el minuto volvemos a lavar la placa con agua. Cubrimos la placa con alcohol cetona por 30 segundos, lavar con abundante agua para eliminar el exceso del disolvente, cubrir la placa con safranina por un minuto, lavar de nuevo con agua para eliminar el colorante, luego se lleva en el mechero sin dejarla mucho el tiempo al fuego por que se pueden quemar las clulas para evaporar el agua. Por ltimo observamos en el microscopio y dibujamos la morfologa de los distintos tipos de bacterias. RESULTADOS: Ya hecho el procedimiento, al ver en el microscopio los resultados que obtuvimos fueron clulas con una morfologa ms fcil de diferenciar y ya podemos saber sin son gram positivas o gram negativas. CONCLUCIONES: Una de las conclusiones ms importantes es que la tincin bacteriana de gram es de gran uso en el laboratorio ya que nos ayuda diferenciar a simple vista en el microscopio la morfologa celular de cada bacteria. Otra de las conclusiones es que gracias a esta tincin podemos saber cmo estn constituidas las paredes de las bacterias.

DIBUJOS: Agar TSA:

Agar sangre:

Agar EMB (eosina azul de metileno):

Agar saburaud:

Caldo trioglicato:

Caldo lactosado:

Caldo carne cocida:

PREGUNTAS PARA CONSULTAR Para qu son importantes las coloraciones bacterianas en el laboratorio? Para diferenciar las bacterias gram positivas de las gram negativas, y aparte diferenciar la morfologa celular. Existe alguna relacin entre el tipo de morfologa y la tincin de gram? Si por que referencias a la morfologa celular bacteriana (cocos, bacilos, etc.) se basan justamente en la tincin de GRAM, as podemos diferenciar su forma. Qu diferencia estructural hay entre bacterias gram negativas y gram positivas? Diferencias entre Gram Positiva y Gram Negativa: Tanto las bateras gram positivas como las gram negativas pueden presentar una capa superficial cristalina denominada capa S. En las bacterias gram negativas, la capa S esta unida directamente a la membrana externa. En las bacterias gram positivas, la capa S est unida a la membrana externa. En las bacterias gram positivas, la capa S est unida a la capa de pptidoglicano. Dibuje una pared de un bacteria gram positiva y de una bacteria gram negativa BCTERIA GRAM NEGATIVA:

BACTERIA GRAM POSITIVA:

Porque es necesario que la muestra no hierva durante la tincin con carbn fuscina? Cuando se hace una tinc cido resistente se usa fucsina inicialmente para colorear la muestra esta solo se flamea al mechero por 5 minutos hasta emisin de vapores, esto es suficiente para que la carbol fucsina penetre adecuadamente al bacilo y se fije adecuadamente a sus lpidos. Si la fucsina hierve la pared de los bacilos se pueden destruir y colorearse mal.

La tincin de Ziehl-Neelsen es especfica para que microorganismos? Sirve para identificar los microorganismos patgenos.

PRACTICA 5 MEDIOS DE CULTIVO: SU IMPORTANCIA, USO Y PREPARACION

INTRODUCCIN Uno de los sistemas ms importantes para la identificacin de microorganismos es observar su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio. El material alimenticio en el que crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de los microorganismos es el Cultivo. Se han preparado ms de 10.000 medios de cultivo diferentes. Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura, grado de humedad y presin de oxgeno adecuado, as como un grado correcto de acidez o alcalinidad. Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo microorganismo contaminante.

MARCO TEORICO FROTIS: Se denomina frotis a la extensin que se realiza sobre un portaobjetos de una muestra o cultivo con objeto de separar lo ms posible los microorganismos, ya que si aparecen agrupados en la preparacin es muy difcil obtener una imagen clara y ntida. Este frotis debe ser posteriormente fijado al vidrio del portaobjetos para poder aplicar los mtodos habituales de tincin que permiten la observacin al microscopio de las bacterias sin que la muestra sea arrastrada en los sucesivos lavados. La fijacin de una extensin bacteriana hace que las bacterias queden inactivadas y adheridas al vidrio alterando lo menos posible la morfologa y bacteriana y las posibles agrupaciones de clulas que pudiera haber.

OBJETIVOS Preparar los diferentes medios de cultivos: agar y caldos. Preparar varios agares, de materiales sintticos. Preparar varios caldos, para el cultivo microbiano

MATERIALES: Para preparar el agar utilizamos los siguientes materiales. Los diferentes agares que utilizamos en la prctica, en este caso vienen en polvo para su posterior preparacin. agua destilada estril. Elementos de vidrio, donde se prepara el agar. Autoclave, para la esterilizacin.

MTODOS: Seguir las recomendaciones exigidas en la casa respectiva. Usar un hidratante, en este caso agua destilada. Adicionar solamente los componentes determinados por la casa comercial. En la hidratacin del medio, usar solamente elementos de vidrio totalmente limpios. Pesar exactamente las cantidades indicadas. Vaciar el medio de cultivo pesado previamente en un baln o matraz, y agregar la cantidad necesaria de agua, agitando manualmente. y procurando que no quede muestras del medio en las paredes del recipiente. La mezcla obtenida se lleva a una estufa elctrica hasta la ebullicin, y que el medio quede totalmente transparente. En general los medios se esterilizan en autoclave a 15 libras de presin, a 121 grados centgrados, por 15 minutos. Para envasar los medios de cultivo en los tubos de ensayo o en caja de petri estriles, se har lo ms cerca posible a la llama. Los medios se dejan solidificar o endurecer. Luego se realizara control de esterilizacin en la incubadora por 24 horas a 37 grados centgrados. Los medios de cultivo que no se utilicen inmediatamente se llevaran a la nevera. RESULTADOS Los resultados que observamos, fueron que los medios que utilizamos se solidificaron perfectamente y que se dio un buen manejo de estos.

INTERPRETACIN Los agares se solidificaron por la presencia de colgeno en las algas rojas. La preparacin del agar como base las algas rojas es ideal por que soportan un rango optimo de temperatura para su reproduccin.

DIBUJOS

AGAR TSA (Trpticasa de soya): Es un medio de uso general que permite el crecimiento tanto de microorganismos exigentes como no exigentes, que incluyen bacterias aerobias y anaerobias, aunque no es medio de eleccin para anaerobios. Permite visualizar reacciones hemolticas que producen muchas especies bacterianas.

AGAR SANGRE: El agar sangre aporta muchos factores de enriquecimiento. Se usa tambin para ver la capacidad hemoltica de los microorganismos patgenos (que es un factor de virulencia).

AGAR EMB (Eosina azul de metileno): el agar eosina azul de metileno se utiliza para el aislamiento y diferenciacin de entero bacilos gram negativos.

AGAR SABURAUD: Medio utilizado para el aislamiento, identificacin y conservacin de hongos patgenos y saprfitos. Tambin es til para el cultivo de levaduras.

CALDO TRIOGLICATO: Contiene 0,075 % de agar para evitar que las corrientes de conveccin transporten el oxgeno de la superficie a toda la masa del caldo. El cido Tiogliclico acta como agente reductor, disminuyendo aun ms el potencial de xido-reduccin del medio.

CALDO LACTOSADO: El Caldo Lactosado es utilizado para el cultivo de Salmonella y organismos coliformes en agua, productos lcteos, alimentos y productos farmacuticos.

CALDO CARNE COCIDA:

CONCLUSIONES: Una de las conclusiones ms importantes es que para la preparacin de los medios de cultivos es necesario la buena preparacin y la innocuidad de ellos, para poder que los microorganismos tengan un buen desarrollo. La preparacin artificial de los agares nos hace tener una forma artificial donde no necesitamos esperar que se d el medio perfecto si no que nosotros en el laboratorio los podemos preparar. La buena conservacin de los medios de cultivos es vital para poder, tener vivo el microorganismo sin ser necesario volver a cultivar el microorganismo.

PREGUNTAS PARA CONSULTAR.

Cules son los medios sintticos? Puede ser una simple solucin de sales con una fuente de carbono o puede contener muchos compuestos orgnicos. describa los medios naturales? Son aquellas que existen como tales en la naturaleza, por ejemplo, agua, suero, Papa, huevos, leche, sangre, tierra, etc. Cules son las propiedades de los medios de cultivos? Propiedades fsicas: MEDIOS DE CULTIVO LQUIDO: son los que estn presentes en este estado, por esta razn se llaman caldos. MEDIOS DE CULTIVOS SLIDOS: se preparan a partir de un medio liquido agregndole un agente solidificante. MEDIOS DE CULTIVOS SEMISLIDOS: se prepara a partir de un medio de cultivo liquido, agregndole a este un agente solidificante en menor proporcin que el medio solido. Segn su utilizacin: MEDIOS COMUNES: son aquellos que poseen los componentes mnimos para que se pueda producir el crecimiento microbiano que no necesiten enriquecimientos especiales.

MEDIOS DE ENRIQUECIMIENTO: son aquellos que adems de contener las sustancias normales, incorporan una serie de factores indispensables para el crecimiento de microorganismos exigentes. MEDIOS SELECTIVOS: son utilizados para favorecer el crecimiento de ciertas bacterias contenidas en una poblacin polibacteriana. MEDIOS INHIBIDORES: cuando las sustancias aadidas en un medio de cultivo selectivo impiden totalmente el crecimiento de una poblacin microbiana. MEDIOS DIFERENCIALES: se utilizan para poner en evidencia caractersticas bioqumicas que ayuden a diferenciar el gnero o especie. Medios de identificacin: son destinados a comprobar una cualidad especfica que puede servirnos para reconocer la identidad de un microorganismo. MEDIOS DE MULTIPLICACIN: sirve para tener una cantidad de clulas a partir de un microorganismo aislado. MEDIOS DE CONSERVACIN: se utiliza para mantener una cepa que por diversas razones nos interesa tener. Se pueden conservar de tres formas: a) Haciendo pases peridicos de placa a placa b) Media liofilizacin de una suspensin bacteriana. c) Congelando las muestras en leche estril al 0.1% Medios de transporte: se utilizan para el transporte de muestras clnicas que no se pueden sembrar inmediatamente.

Segn su composicin: Segn las sustancias que entren a formar parte en su composicin, los medios de cultivo pueden ser clasificados en: MEDIOS COMPLEJOS: se preparan a partir de tejidos animales y rara vez de tejidos vegetales, su composicin no es exactamente definida y por consiguiente no es rigurosamente constante. MEDIOS SINTTICOS: son aquellos que en su composicin contiene sustancias qumicamente conocidas, y son disueltas en agua destilada.

MEDIOS SEMISINTETICOS: el gran numero de factores exigidos para ciertos grmenes hace que fabricacin de ciertos medios sean demasiados caros, por eso se combinan los componente de un medio natural y sinttico, para que el microorganismo crezca. Segn su origen: NATURALES: se pueden preparar a partir de sustancias de origen animal o vegetal. SINTTICOS: son los medios que tiene una composicin qumica definida cualitativa y cuantitativamente, se cultiva para obtener resultados reproducibles. SEMISINTETICOS: son los sintticos a los que se les aaden factores de crecimiento bajo una forma de extractos orgnicos complejos, como por ejemplo los extractos de levadura. Cmo se puede usar un cultivo de enriquecimiento, para aislar bacterias capaces de degradar pesticidas y otros residuos peligrosos? Se puede usar, ponindole los componentes que tienen los pesticidas, sabiendo que los microorganismos no tienen otra cosa para subsistir, comienzan a degradar lo que tiene el medio.

Ejercicio Una caja de petri corriente contiene 20 ml de agar. Calcule segn la siguiente formula la cantidad necesaria para preparar 75 cajas. Prepare 5% en exceso.

Componentes Trpticasa Fitona NaCl K2H2PO4 Glucosa Agar

Cantidad 17g 3g 5g 2.5g 2.5g 15g

DESARROLLO

1caja 75 cajas 1500 ml X

20 ml X 100% 5%

= 20ml x 75 cajas 1 caja = 1500ml x 5% 100%

= 1500 ml

= 75 ml

1500+75= 1575 Para preparar 75 cajas de petri con 5% de exceso se necesitan 1575 ml de agar

PRACTICA 6 METODOS DE SIEMBRA

INTRODUCCIN Basados en los estudios y las practicas del laboratorio, dimos un vistazo al mundo de la microbiologa, queremos resaltar esta prctica, porque es de mucha importancia determinar qu tipo de organismo puede crecer dependiendo de las condiciones que se le ofrece a las muestras para que los microorganismos crecieran all, los distintos tipos de microorganismos en el medio de cultivo nos hace tener un panorama ms claro de que metabolismo puede tener el microorganismo y saber las condiciones para que este crezca y tenga un buen desarrollo y, por ende tener un mejor estudio de l,, esta prctica est basada en el cultivo de de microorganismos en dos medios, dichos medios en este caso estn discriminados por sus propiedades fsica y proteicas, en el caso del agar este es un medio de cultivo obtenido de las paredes celulares de las algas rojas, el cual es un excelente medio de cultivo por sus diversos componentes multivitaminicos, el otro medio es un medio liquido llamado caldo en el cual es un fermentado con clulas activadora que ayudan al desarrollo del microorganismo, es ideal para bacterias cuyo metabolismo es fermentativo.

MARCO TEORICO El metabolismo microbiano es el conjunto de procesos por los cuales un microorganismos obtiene la energa y los nutrientes (carbono, por ejemplo) que necesita para vivir y reproducirse. Los microorganismos utilizan numerosos tipos de estrategias metablicas distintas y las especies pueden a menudo distinguirse en base a estas estrategias. Las caractersticas metablicas especficas de un microorganismo constituyen el principal criterio para determinar su papel ecolgico, su responsabilidad en los ciclo biogeoqumicos y su utilidad en los procesos industriales. Los microorganismos utilizan la energa obtenida de la glucosa(ATP), para llevar la degradacin de la misma, las reacciones ms comunes para la degradacin del ATP son de carcter fermentativo que se da en los microorganismo anaerobios, y la glicolisis pasando por la fosforilacion oxidativa terminando en el ciclo de krebs que se la hacen los microorganismos aerobios.

OBJETIVOS Ver los diferentes medios de cultivos. Diferenciar el caldo del agar y ver que clases de microorganismo se pueden generar disponindole las condiciones adecuadas. Diferenciar bacterias gram positivas y gram negativas mediante la tincin de gram. Determinar que caractersticas morfolgicas tiene cada colonia de microorganismos.

MATERIALES Los materiales usados para esta prctica fueron: Medios de cultivos lquidos en este caso caldos nutritivos medios de cultivo slidos agar. Asas redondas Tubos de ensayo Caja con medios de cultivo (caja de petri). Las muestras que vamos a cultivar: Materia fecal de mamfero, raspado de piel, materia fecal de equino, frotis de garganta, aire libre 30, pulpa de caf.

PROCEDIMIENTO Siembra por agotamiento en la caja de petri: para esta siembra utilizamos asas en aro, la utilizamos para no romper el agar y hacer una buena sembr, lo utilizamos para el aislamiento y observacin de colonias bacterianas. En caldos: solo introducimos la muestra hasta la mitad del tubo de ensayo y la disolvemos. En el caso de la siembra de materia fecal de mamfero que se disperso en el agar EMB se toma una caja de petri la cual se sostiene con la mano izquierda y con la derecha se toma la asa, siempre muy cercano del mechero para evitar la contaminacin del medio, la muestra se tomo y se sembr en el agar en forma de

siembra por agotamiento en la superficie del agar, los resultados que obtuvimos de esta siembra son el crecimiento de la escherichia coli, este microorganismo tiene un metabolismo fermentativo de lo cual podemos decir es capaz de procesar la lactosa que tiene presente el medio. Tambin sembramos la materia fecal en un caldo, este llamado carne cocida aunque fueron diferentes las condiciones en las que sembramos las muestra y obtuvieron diferentes caractersticas morfolgicas de la colonia esto nos muestra que la escherichia coli puede crecer en cualquier medio si se le dan las condiciones adecuadas. Para la siembra del raspado de piel, se tomo la muestra de la mano o antebrazo los cuales fueron raspados con un bistur previamente esterilizado en el mechero, despus se froto el bistur en el agar TSA, de este esperamos encontrar bacterias de toda clase porque esperamos el crecimiento de microorganismos exigentes y no exigentes, lo cual lo hace un excelente medio con todos los nutrientes para el crecimiento de varias colonias de microorganismos. Para el frotis de garganta utilizamos el agar sangre porque lo que esperamos que crezcan son microorganismos hemolticos, los cuales consumen los grupos hemos de los glbulos rojos que estn presentes en la sangre. El agar saboraud da las condiciones suficientes y nutritivas para que crezcan hongos, por eso el procedimiento que se hizo fue fcil. Solo se dejo la caja de petri al aire libre por 30 minutos en una mesa, ya pasados los 30 minutos se volvi a tapar la caja. Generalmente en el agar PDA esperamos que crezcan hongos o levaduras por su alto contenido de almidn, en este caso crecieron levaduras que se obtuvieron de la muestra que fue pulpa de caf. En los diferentes caldos encontramos distintos resultados: Este es el ejemplo del caldo trioglicato y caldo lactosado. En el caldo trioglicato sembramos materia fecal de equino, la siembra de este fue diluida en el caldo y luego de la dilucin tapamos la muestra, el resultado de esta son bacterias anaerobias ya que le dieron las condiciones al medio para que se desarrollaran, lo que podemos ver es que las bacterias que no soportaba la presencia de oxigeno anaerobias estrictas sus colonias las formaron abajo, y las bacterias que podan soportar hasta un 8% de oxigeno pero bien pueden vivir sin l quedaron arriba, el tapn de cera se corri debido a la presencia de azufre, como producto del metabolismo corri el tapn.

En el caso del caldo lactosado sembramos materia fecal de equino, vimos que el medio paso de tener un color rojo a tener un color amarillo plido debido a que los microorganismos presente fermentaron la lactosa presente en el medio.

INTERPRETACIN

Para poder ver qu tipo de microorganismos eran y diferenciar la morfologa de la colonia y de la clula hicimos microscopia de ah obtuvimos uno resultados: En los agares, seleccionamos colonias a las cuales le hicimos una descripcin morfolgica, y para hacerle una descripcin a la morfologa celular hicimos una tincin de gram. En cambio para los caldos solo hicimos la descripcin del cambio del medio y lo que paso en el medio, a estos caldos tambin para distinguir la morfologa le hicimos una tincin de gram. AGAR TSA (trptico de soya): Los resultados de obtuvimos de este fueron colonia de color 1 DIBUJOS: Bacterias gram positivas obtenidas de los cultivos de la echerichia coli

CONCLUSIONES: Una de las conclusiones ms importantes que obtuvimos del cultivo y posterior observacin de la colonia que crecieron en los deferentes agares, que la obtencin de bacterias es un proceso complejo en el que se necesita especial cuidado

PREGUNTAS PARA CONSULTAR.

Para qu sirve en trabajar en microbiologa con diversos mtodos de siembra? Sirve para identificar los microorganismos e identificar su crecimiento, en sustancias alimenticias artificiales preparadas en laboratorio.

en el estudio de la motilidad bacteriana que tipo de siembra se emplea? Se emplea siembra por agotamiento

que tipos de asas se usan para los diferentes tipos de siembra? Se utilizan asas redondas y asas rectas

como se diferencias en el microscopio los staphylococcus albus, streptococcus pyogenes, staphylococcus aureus? Los staphylococcus albus son microorganismos gran positivos cuya forma es un diplococo. El streptococcus pyogenes es una bacteria gran positiva cuya forma es de streptococcus esto quiere decir que es en forma de cadena. El staphylococcus aureus es un microorganismo gran positivo, pero cuando pero las clulas ms viejas son gram negativas su forma es de un staphylococcus tetrado por su forma de racimos de uvas.

enuncie los postulados de koch? 1- El agente debe estar presente en cada caso de la enfermedad y ausente en los sanos. 2- El agente no debe aparecer en otras enfermedades. 3- El agente ha de ser aislado en un cultivo puro a partir de las lesiones de la enfermedad.

4- El agente ha de provocar la enfermedad en un animal susceptible de ser inoculado. 5- El agente ha de ser aislado de nuevo en las lesiones de los animales en experimentacin. cules son los pasos para obtener un cultivo axenico, a partir de un cultivo puro? La obtencin de un cultivo axnico a partir de un puro consiste en dos etapas: La primera, hay que esterilizar todos los materiales para eliminar todos los microorganismos presentes en ellos. La segunda, hay que aislar y cultivar un solo microorganismo, para producir un clon de descendiente. Diga dos tcnicas de laboratorio para cultivar bateras anaerbicas. JARRA ANAEROBIOSIS: Las jarras para anaerobiosis se emplean principalmente para cultivos en placas. La atmsfera anaerobia en el interior de estas jarras se puede conseguir. TCNICA DE EVACUACIN/REEMPLAZO: En este procedimiento se precisa primero crear el vaco mediante una bomba de vaco y una vez hecho esto se introducir la mezcla gaseosa que nos permite controlar si se ha producido o no la atmsfera anaerobia.

BOLSAS DE ANAEROBIOSIS: Consiste en una bolsa plstica transparente, gas impermeable, un indicador de anaerobiosis (azul de metileno o resarzurina) y un sobre generador de anaerobiosis igual al utilizado para las jarras. Una o dos placas de Petri pueden introducirse antes de sellar la bolsa. Este sistema tiene las ventajas de su economa y practicidad, adems de poder observar directamente si existe crecimiento en las placas de Petri sin abrir el sistema. cmo se aplica la ley de liebig en los medios de cultivo? Este concepto de cultivos, donde se encontr que el aumento de la cantidad de nutrientes ms abundante no haca aumentar el crecimiento de los microorganismos. Slo mediante el aumento de la cantidad del nutriente limitante (el ms escaso) se poda mejorar el crecimiento de una planta o cultivo.

Qu es fontica o clasificacin por dendogramas en microbiologa? Es una clasificacin en forma de rbol que muestra los resultados del anlisis de una bacteria.