REGULACIN DE LA SINTESIS ENZIMTICA

Con respecto a la actividad enzimtica ya hemos vistos distintos mecanismos regulatorios Cules son? La regulacin Alostrica Los zimgenos Todos esos son mecanismos que permiten regular la actividad enzimtica. Cuando hablamos de regulacin de la sntesis enzimtica nos referimos a regular la velocidad de produccin de la enzima. Otros llaman regulacin gentica. Porque? Porque obviamente como la mayora de las enzimas son protenas, esas protenas tienen que estar codificadas por un gen, porque se trata de regular la expresin del gen y con ellos entonces estamos regulando la velocidad de sntesis de la enzima. Por ejemplo. Resulta que la sntesis del Hemo utiliza como sustrato Glicina y Succinil CoA. Entonces hablando de la ruta de sntesis del Hemo, estos dos sustratos se condensan y producen un compuesto que se llama el Delta-aminolevulinato (es un cido). La enzima responsable de eso es Delta-aminolevulinato sintasa. A partir del Delta-aminolevulinato se producen una serie de metablicos y finalmente llegamos al producto final de la ruta metablica, es el Hemo. Entonces resulta que cuando en la clula hay un exceso del Hemo, el por un mecanismo alostrico inhibe la actividad de la Delta-aminolevulinato sintasa Ah estamos regulando la actividad enzimtica, por un mecanismo alostrico. Pero resulta que cuando hay demasiado Hemo, que est ocurriendo con el gen que permite la sntesis enzimtica. Resulta qe yo tengo aqu un gen que prolifica para una protena conocida con el nombre de Aporrepresor y lo voy a llamar el Gen para el represor. Este gen para el represor interacta con un gen operador, y este gen operador es quien regula la expresin de unos genes que vamos a llamar Genes estructurales. Resulta que estos genes estructurales son responsables de la sntesis de las enzimas que tienen que ver con la biosntesis del Gen del hemo (en este caso) y una de estas va a ser la Delta-aminolevulinato sintasa. Entonces que pasa? Que este gen para el represor codifca por una protena que se llama el Aporrepresor, pero resulta que el Aporrepresor solito es inactivo; para que el pueda ser Activo necesita de un Correpresor, y ese Correpresor es precisamente el producto final de la Va metablica, que en este ejemplo es el Hemo. entonces que pasa cuando los niveles del Hemo aumentan? Que el Hemo actuando como Correpresor se une al Aporrepresor y producen entonces un Represor Activo. El Represor Activo interacta con el Gen operador y lo bloquea; al bloquear al Gen operador, como el gen operador gobierna, la expresin de estos genes estructurales no se podrn expresar, y en consecuencia el nivel Delta-aminolevulinato sintasa van a caer, disminuyendo la actividad de

sntesis del Hemo. Se esta regulando la velocidad de sntesis de la enzima, que es distinto e regular la actividad enzimtica. Resulta que en la sntesis de regulacin de una ruta metablica pueden existir diferentes mecanismos, por ejemplo En la biosntesis de Hemo, coexiste este mecanismo de regulacin gentica con la regulacin alostrica, que es regulacin de la actividad enzimtica. Entonces, en la regulacin de una misma va metablica pueden coexistir distintos mecanismos regulatorios..

Resulta que dentro de los mecanismos que permiten regular la actividad enzimtica, hay uno solamente importante que no hemos estudiado.

Regulacin Covalente de la actividad enzimtica Resulta que la regulacin covalente de la actividad enzimtica consiste en lo siguiente La visin de un grupo a la enzima mediante un enlace covalente induce en ella un cambio conformacional, y ese cambio conformacional que la enzima sufre puede inducir a su activacin o a su inactivacin. As que no siempre la modificacin covalente lleva a la activacin, sino tambin a la inactivacin dependiendo del sistema enzimtico. Pero en eso consiste la regulacin covalente de la actividad enzimtica!

Vamos a mirar como opera este mecanismo en lo que tiene que ver con la regulacin de la velocidad del proceso de glucogenognesis y glucogenlisis, dos procesos del metabolismo intermediario importantes. La Glucogenognesis se define como la sntesis de glucgeno a partir de glucosa. La Glucogenolisis se define como la degradacin del glucgeno para producir en algunos casos Glucosa libre, y en otros casos Glucosa-6P.

"Seguramente desayunamos en nuestra dieta hidratos de carbonos representados como fcula, como almidn. La principal ingesta de hidratos de carbono en los seres humanos es el Almidn (papa, yuca, ame, arroz, etc.), cuando ingerimos eso se convierte en Glucosa, a nivel intestinal absorbemos grandes cantidades de Glucosa, inicialmente la Glucosa alcanza la sangre mesentrica, luego va a la Vena Porta ("Quienes forman a la Vena Porta? La esplnica y mesentricas inferiores") y entonces la Sangre Portal lleva los nutrientes inicialmente al Hgado, gran cantidad de glucosa que se esta absorbiendo impacta primero el Hgado. Que hace el hgado? Viene y Fosforila la glucosa estimulando el proceso de la Glucogenognesis para tratar de almacenar en forma de glucgeno la mayor parte de la

glucosa que estamos absorbiendo, contribuyendo con ello a la normalizacin de la Glicemia, postprandial (postprandial: despus de comer) A nivel de los msculos esquelticos; cuando esta activo ese proceso, cuando el musculo esta en estado de reposo hay bastante glucosa, hay bastante ATP en el musculo y almacena glucosa, estimulando su proceso de glucogenognesis a nivel muscular. Pero como no comemos constantemente, entonces sus tejidos de la economa corporal estn consumiendo glucosa permanentemente, en la medida que se consuma la glucosa, la cifra plasmtica de glucosa empieza a disminuir, y cando eso ocurre, de una manera hormonal se estimulara en el hgado la glucogenolisis, para que el glucgeno que estaba almacenado en el hgado se degrade, se convierta en glucosa libre y se aporte al torrente sanguneo para llevarlo a todos los tejidos de la economa corporal. Mientras el proceso de glucogenogenesis heptica esta activado la glucogenolisis heptica tienen que estar inhibida, y esto se consigue con estos mecanismos regulatorios.

Hablemos primero de la Glucogenolisis La enzima reguladora de la velocidad de la Glucogenolisis hepticas llama Glucgeno fosforilasa. Y la que regula el proceso de la Glucogenogenesis heptica se llama Glucgeno Sintasa Porque? Porque tambin hay Glucgeno Sintasa muscular Cuando yo tienda a un estado de Hipoglucemia, resulta que la hipoglucemia se constituye en el principal estimulo a la clula alfa-delta nucleasa para que ella secrete una hormona de tipo peptidiico llamada Glucagn, es una hormona de tipo peptidico, tiene 29 residuos aminoacdicos y se secreta en respuesta al estado de Hipoglucemia. Cuando yo tiendo a hacer hipoglucemia, el pncreas secreta Glucagn. Las Hormonas de tipo peptdico que clase de reflectores tienen? Reflectores membranales, son protenas integrales de membrana Entonces qu ocurre? Que en la membrana del hepatocito se presentan una protena con caractersticas de reflector para el Glucagn, Los reflectores membranales para hormonas de tipo peptdico de que tipo son? metabotropo Que quiree decir eso? que esos reflectores estn acoplados a protenas G (Heterotrimricas) de tal manera que este reflector esta acoplado a una protena G Heterotrimerica, esa protena G tiene subunidades alfa, beta y gamma. Normalmente cuando el reflector esta inactivo, esta subunidad alfa de la proteina G heterotrimerica est copada a e est unida a GDP cuando esta inactivo, en el momento en el que el glucagon interacta con el, el reflector sufre un cambio de conformacion y hace que se cambie la subunidad alfa de la protena G GDP por GTP cuando esa subunidad alfa intercambia

GDP por GTP entonces ella se separa de la beta y la gamma y ahora esta subunidad alfa unida a GTP activa una protena receptora de membrana que en este caso se llama adenilatociclasa todo esto es traduccin de seales de de la biologa del semestre pasado si o no. Esto es una traduccin de sea de quien del glucagon entonces activado la adenilatociclasa que ocurre en esta clula se elevan los niveles de AMP cclico.Y el AMP cclico que es? Un segundo mensajero es el mensajero intracelular de la accin que el glucagon va a desencadenar en esa celular heptica es un segundo mensajero entonces este AMP cclico que hace? Activa una protenquinasa cuya activacin es dependiente de la elevacin de AMP cclico esta proteinquinasa se activa y activar esa proteinquinasa se dispara una cascada de quinasas de activacin esa cascada de quinasa de activacin en ultima instancia van a llevar a cabo a que la glucogenofosforilaza estatica se estimule se active y si la glucgenofosforilaza se activa cual es la consecuencia? Que se estimula la velocidad del proceso sobre la glucogenolisis heptica vamos a ver como hace esa proteinquinasa. Entonces esa proteinquinasa activada que hace lo q hace es lo siguiente se dirige de un sistema llamado fosforilazaquinasa que estaba inactivo pase a su forma activa fosforilazaquinasa activa pero que es lo q hace la proteinquinasa para que el sistema de fosforilazaquinasa pase de forma inactiva a activa lo que hace es esto:resulta que esto esta formado por subunidades alfa gamma y beta y delta y de cada una igual alfa 4 delta 4 gamma 4 y beta 4 las unidades catalticas de esta enzima alfa beta y gamma son de tipo q?regulador ,entonces lo que esta proteinquinasa hace es supnganse ustedes que esta fuese la secuencia polipeptidica que corresponden a las subunidades alfa y esta la secuencia polipeptidica que corresponden a las subunidades beta en estas unidades alfa y beta hay residuos de serina la serina es una aminocido hidroxilado en su cadena lateral tiene un grupo hidroxilo que vendra siendo esto. Entonces lo que esta proteinquinasa hace es FOSFORILAR sea adicionar un grupo fosfato donado por quien? Por el ATP a estos residuos de serina presente en las subunidades alfa y beta de fosforilazaquinasa que es lo q esta haciendo entonces? induciendo una MODIFICACION COVALENTE de la adicin de que de grupo fosfato lo cual hace que ocurra la activacin parcial del sistema fosforilazaquinasa esta claro. Pasando de forma inactiva a que a forma inactiva parcialmente por que parcialmente por que resulta que en el 100% de activacin se necesita que esta subunidad delta supngase q esta es la subunidad delta fije calcio por que la subunidad delta del sistema enzimtico es una protena similar a la calmodulina la calmodulina es una protena fijadora de calcio entonces cuando la subunidad delta fija calcio y las alfa y la beta son modificada covalentemente el sistema de fosforilzaquinasa queda activado en el 100% en ese caso la modificacin covalente a que llevo a la activacin en ese caso Vamos a ver qu pasa entonces ahora cuando este resulta oxidado entonces la fosforilazaquinasa una vez desactivada que hace? Hace que glucgenofosforilaza que estaba inactiva pase a su forma activa glucogenofosforilaza activa pero que es lo que hace esta fosforilazaquinasa para activar a la enzima reguladora que es la glucogenofosforilaza resulta que se sabe que eso es un dmero y entonces si se es el extremo amino se sabe que en posicin 14 hay una serina entonces lo que pasa es que esta fosforilazaquinasa induce la modificacin covalente de estos residuos de serina por adicin de grupo que fosfato en donde en la glucogenofosforilaza entonces cuando eso residuos de serina son modificado covalentemente glucgeno fosforilaza pasa de forma inactiva a forma activa activado la

glocogenofosforilaza se estimulara en el hgado el proceso de glucgenolisis el glucgeno se degrada se convierte en glucosa libre y la glicemia se normaliza. Pero que ocurre en algn momento fisiolgico que ahorita vamos a ver estos sistema pasan de forma activa a forma inactiva y cuando pasara de formas activas a formas inactivas veamos cuando resulten desfosforilados el sistema que las desfosforila entonces quien desfosforila esto las fosfoproteinfosfatasas son las que desfosforilan esto sistema pasndolas de formas activas a formas inactivas pero resulta que esas fosfoproteinfosfatasas tiene un inhibidor una protena inhibidora que se llama asi el inhibidor 1 desfosfoprotienfosfatasa y resulta que ese inhibidor 1 de fosfoproteinfosfatasa existe en dos formas una sin fosfato y otra fosforilada entonces esto existe asi en dos formas una sin fosfato y otra con fosfato la modificacin covalente de el induce al cambio conformacional y por eso cambie de rectngulo, esta claro, quien hace posible este cambio los hace posible la misma proteinquinasas que resulto activada cuando el nivel intrapatositario de AMP cclico aumento, entonces esta proteinquinasa favorece la forma fosforilada del inhibidor 1 llamado fosfoproteinfosfatasa para mantener inhibida a esta porque la forma fosforilada de esta protena ejerce mayor efecto inhibitorio sobre la fosfoproteinfosfatasa que la forma desfosforilada entonces mira lo que esta haciendo una misma seal intracelular que es la elevacin de AMP cclico por un lado esta permitiendo la activacin de esta quinasas y por el otro lado manteniendo la forma fosforilada del inhibidor para mantenerlo bloqueado esto favoreciendo que proceso en el hgado el proceso de la glucgenolisis heptica en ese momento en que mi organismo tiende hacer que? Hipoglucemia y cuando se estar dando ese proceso? Entre las comidas y durante el ayuno nocturno normal porque usted dormido no come sin embargo su glicemia es normal gracias a la induccin de ese proceso que se llama glucgenolisis heptica en algn momento que ya vamos a ver cual es este inhibidor debe pasar de forma con fosfato a forma sin fosfato y eso paradjicamente lo hacen las fosfoproteinfosfatasa sea que la desfosforilazion de este inhibidor lo hace la misma enzima que el tiene inhibida eso parecera un contra sentido pero por que es posible eso vamos a ver. Resulta que inteligentemente la protena inhibidora de la fosfoproteinfosfatasa no se fosforila sobre residuos de serina como lo hicieron estas si no sobe residuos de treonina que es un residuo amonoacidico distinto lo cual permite entonces que la enzima que esta inhibida fuera desfosforilada por que el no fosforila sobre residuos de serina si no sobre residuo de trionina entonces esto seria lo que esta pasando cuando yo tiendo a un estado de hipoglucemia vamos a ver en ese momento que esta pasando con el proceso de glucgenogenesis heptica en ese mismo momento en que la glucgenolisis heptica esta activada. Resulta entonces que la enzima que regula la velocidad de la glucgenognesis se llama glucgeno sintasa la gucogenosinta es un tetrmero simple alfa4 entonces ella tambin existe en dos formas una sin fosfato y otra con fosfato la glucgenosintasa bueno entonces quien estimula este cambio lo estimulan distintas proteinquinasas entre esos esta y esta independientemente de esta tambin es capaz de hacerlo y hay otras mas proteinquinasas dependiente de calcio y calmodulina la proten hay varias proteinquinasas q son capaces de hacer esto que pasa entonces que cuando glucogenosistasa resulta modificada covalentemente glucogenosintasa pasa de forma activa a inactiva entonces aqu la modificacin covalente que produjo INACTIVACION y pro eso dice que la modificacin covalente puede conducir a la activacin o a la inactivacin entonces es claro que cuando este

sistema esta activado esta inhibida y por lo tanto el proceso de la glucogenogenesis heptica tiene que estar inactiva en esos hepatocitos que est mostrando que pasara entonces cuando esto se desfosforile y pierda el fosfato pasara de forma inactiva que es esto a forma activa q es esto u quien ara eso la fosfoproteinfosfatasa entonces mira el sistema completo ahora el estado de hipoglucemia condujo a que el pncreas aumentara la secrecin de glucagon que estimula el receptor activa adenilato ciclasa eleva los niveles de AMPciclico y activa la proteinquinasa esta proteinquinasa por un lado favorece la forma fosforilada del inhibidor para mantener inhibida a esta y a esta otra y por el otro lado activa la fosforilasaquinasa la glucogenofosforilasa y favorece la glucogenolisis heptica pero tiene inhibido el proceso de que? De la glucogenogenesis hepatica lo tiene inhibido. Entonces que pasa ahora cuando viene esto y ahora el estado ya no es de hipoglucemia si no de hiperglucemia que ahora la hiperglucemia se constituye en el principal estimulador para que secrete insulina y entonces la relacin plasmtica se invierte ahora domina la insulina al glucagon entonces que hace la insulina, la insulina tambin tiene receptores en el hgado al unirse este receptor por estimulacin de los sustratos para receptor insulinico conduce primero a que se active una fosfodiesterasa que hace que el AMPciclico se degrade a 5 AMP que ya no es segundo mensajero entonces esta proteinquinasa pasa de forma activa a forma que inactiva y por otro lado la misma insulina a travez de su mecanismo molecular estimula a la fosfoproteinfosfatasas entonces estos sistemas pasan de forma activa a inactiva y este deja de estar fosforilado tambin entonces quien de activa la glucogenogenesis y se inhibe la glucogenolisis heptica entonces mira como un mecanismo de regulacin enzimtica covalente permite regular la velocidades de los procesos claves del metabolismo intermediario Ahora si ustedes miran y analiza en el libro le van a decir que tanto la glucgenofosforilasa como la glucgenosintasa tambin son alostericas entonces coexisten los dos mecanismos el mecanismo alosterico y el mecanismo por regulacin covalente obviamente que el mecanismo alosterico es un mecanismo primitivo comparado con este proceso que es mucho mas elaborado es un mecanismo que inhibe pero que si lo leen lo van a encontrar y entonces eso es un ejemplo que les e traido para mostrar lo que es la regulacin covalente de actividad enzimtica pero este mecanismo se cumple con muchos mas mecanismo enzimticos esta claro eso lo vamos a ver cuando estemos viendo metabolismo intermediario entonces esta claro que no siempre la modificacin covalente es de activacin si no que puede ser tambin de inactivacin . Gluconeogenesis es otra va metablica diferente. Las familias que desfosforilan se conocen con este nombre fosfoproteinfosfatasa este esta fosforilado con los residuos de treonina lo q ella hace es romper el enlace y liberar el fosfato pasndolo de forma fosoforilada a forma desfosforilada cuando eso pasa seca el efecto inhibitorio sobre ellas y al estimularse la fosfoproteinfosfatasa esto sistema pasan de forma inactiva haciendo que en ese hepatocito se frene el proceso de glucogenolisis para darle paso al proceso de glucgenogenesis mientras q en un hepatocito este activo el proceso de glucogenogenesis simultneamente va a estar inactivado el proceso de glucogenolisis y mientras este estimulado el proceso de glucgenolisis estar inactivado el de glucgenogenesis y todo eso esta controlado como fisiolgicamente hablando ?LAS

HORMONAS INSULINA Y GLUCAGON entonces de que depende q en el hgado se active la glucogenolisis de la relacin insulina plasmtica de glucagon cuando el glucagon domina estimula la glucogenolisis cuando la insulina domina estimula la glucogenogenesis eso esta controlado hormonalmente. Son distinto los mecanismo que permiten regular la actividad enzimtica siendo lo mas importante la regulacin covalente enzimtica, la alosterica enzimtica la regulacin por cimgenos y tambin existe otra que se llama regulacin por producto que es lo que voy a explicar ahora. Voy a colocar un ejemplo la reaccin de fosforilacion de la glucosa ya les haba explicado q una vez la glucosa difunde un tejidos lo primero que le va a ocurrir es su fosforilacion con q objetivo??impedir que la glucosa pueda escapar al torrente sanguneo y obligarla a ser metabolizada por q los esteres fosfato de monosacridos son permeable a la membrana celular eso esta explicado desde la segunda clase o primera y eso lo hace la glucoquinasa y hexoquinasa ,la hexoquinasa es inhibida por el producto de su reaccin eso quere decir que cuando en la clula hay altas concentraciones de glucosa 6-fosfato la actividad de la hexoquinasa cae lo q se llama inhibicin por producto pero q busca la clula con eso fisiolgicamente hablando lo q hace esto es una clula aqu hay gran cantidad de glucosa 6fosfato la activida de la hexoquinasa cae es inhibida por el producto fisiolgicamente que eslo q busca el mecanismo? Es ahorra su nivel de fosfato inorgnico por q cada vez que la hexoquinasa fosforila a la glucosa est gastando ATP entonces para general ATP hay q poner a reaccionar ADP + mas fosfato inorgnico para formar ATP entonces cuando la hexoquinasa es inhibida por el producto lo que la clula est buscando es ahorrar sus niveles de fosfato inorgnico para otro proceso y x eso la hexoquinasa es inhibida por el producto la glucoquinasa q hace lo mismo que la hexoquinasa donde lo hace esta en el hgado fundamentalmente no es inhibida por el producto y q importancia tiene q la glucoquinasa heptica no sea inhibida por el producto que es la misma glucosa 6-fosfato q permite fisiolgicamente hablando? Que eso permite tamponar el nivel plasmtico de glucosa porque si la glucoquinasa fueran inhibida por producto entonces controlar la glicemia no seria tan fcil por q es fundamental por q lo q hace es fosforilar toda la glucosa q entra en el hgado favoreciendo el proceso de glucogenogenesis y facilitando la normalizacin de tu glicemia mire la importancia de q la glucoquinasa no resulte inhibida por el producto si esta fuese inhibida por el producto hubiese mas hiperglicemia por que llegara un momento en que el hgado dejara de fosforilar glucosa y la glucosa como no esta fosforilada entra y sale entonces esto aria q hubiese un descontrol en el control de la glicemia y eso lo vamos a ver en pacientes diabticos la actividad de la glucoquinasa heptica esta disminuida y eso explica por q ellos no controlan su glicemia. Por eso los q tiene consumo de carbohidrato tiene mas concentracin de glucosa que los q consumen mayormente protena entonces resulta que la sntesis de la enzima sea inducida por la enzima sea la insulina estimula la transduccin del gen q codifica por la sntesis de glucoquinasa entonces los pacientes diabticos tiene menor actividad de glucoquinasa heptica q los pacientes que no son diabticos y eso explica en parte por que el hgado del diabtico a pesar de tener hiperglicemia sigue sacando glucosa al torrente sanguneo contribuyendo con mas hiperglicemia vea la importancia en lo fisiolgico de este concepto que usted tiene que aprender como medico entonces hay distintos mecanismo regulatorios y en una va metablica pueden ayer distinto mecanismo de regulacin.