You are on page 1of 32

Ao de las Cumbres Mundiales en el Per

ESCUELA PROFESIONAL DE PSICOLOGA

LA BIOTECNOLOGA E INGENIERA GENTICA


PRESENTADO POR :ESTRADA CARHUAMACA MARY BARRETO YAURI, CATHRINE CLAUDIA ESTRADA TAMBINI, BRENDA AUPARI ALCOSER, GIULIANA SURICHAQUI RECUAY, JORGE SOLANO PAULINO, NATHALY UNTIVEROS ISLA, JERLIZ : BIOLOGA : RAL BURGA BENGUER : MAANA : II : B

CTEDRA CATEDRTICO TURNO CICLO SECCIN

HUANCAYO PER 2008

A Dios por ser el Supremo Creador de todas las cosas, a nuestros Padres por su apoyo incondicional y a nuestros Maestros por sus enseanzas.

INTRODUCCIN El planeta es una masa de materia viviente, todo nuestro entorno esta tapizado de organismos de diversos tamaos y complejidad, de constitucin pluricelular como es el caso de "organismos superiores" y tambin por una sola clula como microorganismos ejemplo: bacterias, hongos , protozoos, virus, etc. estos ltimos pueden jugar un papel fundamental en nuestras vidas desempeando funciones positivas para nosotros Ejemplo: en nuestro organismo generacin de vitaminas que no encontramos en alimentos( vitamina K generada en el colon por la flora bacteriana) o ser altamente peligrosos incluso generando la muerte. Los microorganismo, son seres vivos que a simple vista no podemos observar solo utilizando instrumentos especficos como microscopios. Son la herramienta fundamental para el desarrollo de la ciencia de la vida (Biotecnologa), son tan simples pero a la vez tan complejos en cuanto al metabolismo y forma de adaptacin. Muchas civilizaciones del pasado descubrieron que el azcar y las materias primas azucaradas podan sufrir transformaciones espontneas que generaban alcohol. El proceso fue controlado gradualmente, hasta que en el siglo XIX el qumico francs Louis Pasteur demostr que la fermentacin estaba producida por microbios. Pasteur demostr tambin que otros microorganismos, diferentes en apariencia, eran responsables de otros procesos, como la produccin de vinagre. El trabajo de Pasteur no slo revolucion la tecnologa de la elaboracin de la cerveza y el vino, excluyendo microorganismos que pudieran contaminar el proceso de fermentacin y causar grandes prdidas, sino que demostr tambin que haba otros productos que podan ser obtenidos en la industria gracias a la intervencin de los microorganismos. Uno de estos productos fue la acetona, un disolvente utilizado para la fabricacin de plvora explosiva. Durante la I Guerra Mundial, el qumico Chaim Weizmann, verific que la acetona era producida por la bacteria Clostridium acetobutylicum. No siempre es fcil encontrar el organismo o clula adecuados para producir un determinado producto. Para ello se crean mediante la herramienta ms poderosa de la biotecnologa que es la ingeniera gentica. En muchas ocasiones se tienden a confundir debido a que son dependientes una de la otra. La biotecnologa no est exenta de interrogantes y debates moralistas debido a sus posibles indebidos usos, los proyectos como los de Clulasmadre o el proyecto genoma humano que a sido de total oposicin por sus futuras consecuencias como las que podran ser : la clasificacin de la especie humana por sexo , defectos genticos, enfermedades de transmisin genticao que se puedan desarrollar, las posibles catstrofes ecolgicas por la liberacin incontrolada de algunos organismos , los efectos secundarios en productos alimenticios y farmacolgicos , las armas biolgicas usadas por grupos terroristas , etc. En el presente informe trataremos los siguientes puntos: que es la biotecnologa as como sus etapas, historia,, proceso transgnesis y bioprocesos, aplicaciones e medicina humana y en los alimentos, produccin de antibiticos, enzimas y el tratamiento de aguas residuales. En Ingeniera gentica, historia, procedimientos de ingeniera gentica, enzimas de restricidad, aplicaciones, clonacin.

NDICE CARTULA DEDICATORIA INTRODUCCIN NDICE BIOTECNOLOGA E INGENIERA GENTICA 1. BIOTECNOLOGA 1.1 DEFINICIN 1.2 HISTORIA 1.3 ETAPAS 1.4 CLASIFICACIN Y TCNICAS USADAS EN BIOTECNOLOGA 1.4.1 BIOTECNOLOGA ANIMAL 1.4.2 BIOTECNOLOGA INDUSTRIAL 1.4.3 BIOTECNOLOGA AMBIENTAL 1.4.4 BIOTECNOLOGA VEGETAL 1.4.5 BIOTECNOLOGA HUMANA 1.4.6 BIOTECNOLOGA ALIMENTICIA 1.5 LA BIOTECNOLOGA ES INTRNSECAMENTE INTERDISCIPLINAR 1.6 LA BIOTECNOLOGA PRESENTA MUCHOS CAMPOS DE APLICACIN 1.7 LOS TRES NCLEOS DE LA BIOTECNOLOGA 1.8 ALGUNOS ASPECTOS CLAVE EN LAS BIOTECNOLOGAS 1.8.1 MATERIAS PRIMAS 1.9. PROCESOS TRANSGNESIS Y BIOPROCESOS: 1.9.1 TRANSGNESIS 1.9.2 BIOPROCESOS 1.10 BIOTECNOLOGA Y BIOTICA 2. INGENIERA GENTICA 2.1 DEFINICIN DE INGENIERA GENTICA 2.2 HISTORIA 2.3 PROCEDIMIENTO PARA PODER ALTERAR LOS GENES 2.3.1 ENZIMAS DE RESTRICCIN 2.3.2 VECTORES 2.3.3 ADN POLIMERASA 2.4 USOS DE LA TERAPIA GNICA 2.5 APLICACIONES DE LA INGENIERA GENTICA 2.5.1 INDUSTRIA FARMACUTICA 2.5.2 AGRICULTURA 2.6 EXPERIMENTO DE INGENIERA GENTICA 2.6.1 CARACTERIZACIN DEL ADN CLONADO 2.6.2 OTROS MTODOS BSICOS 2.7 CLONACIN. 2.7.1 USOS Y UTILIDADES DE LA CLONACIN 2.7. 2 CLONACIN ANIMAL: 2.7.3 CMO FUE EL PROCESO DE CLONACIN DE LA OVEJA DOLLY 2.7.4 GENOMA HUMANO CONCLUSIONES BIBLIOGRAFA

BIOTECNOLOGA E INGENIERA GENTICA 1. BIOTECNOLOGA: 1.1 DEFINICIN: La biotecnologa, en un sentido amplio se puede definir como la aplicacin de organismos, componentes o sistemas biolgicos para la obtencin de bienes y servicios. La biotecnologa es la tecnologa basada en la biologa, especialmente usada en agricultura, farmacia, ciencia de los alimentos, ciencias forestales y medicina. Se desarrolla en un enfoque multidisciplinario que involucra varias disciplinas y ciencias como biologa, bioqumica, gentica, virologa, agronoma, ingeniera, fsica, qumica, medicina y veterinaria entre otras. Tiene gran repercusin en la farmacia, la medicina, la microbiologa, la ciencia de los alimentos, la minera y la agricultura entre otros campos.

1.2 HISTORIA: Hace miles de aos, la humanidad ha venido realizando biotecnologa, si bien hasta la poca moderna, de un modo emprico, sin base cientfica: La domesticacin de plantas y animales ya comenz en el perodo Neoltico. Las civilizaciones Sumeria y Babilnica (6000 aos a.C.) ya conocan cmo elaborar cerveza. Los egipcios ya saban fabricar pan a partir del trigo hacia el 4000 a.C. Antes de la escritura del libro del Gnesis, se disfrutaba del vino en el Cercano Oriente: recurdese que, segn la Biblia, No "sufri" (o disfrut) accidentalmente los efectos de la fermentacin espontnea del mosto de la uva (primera borrachera con vino). Otros procesos biotecnolgicos conocidos de modo emprico desde la antigedad: - Fabricacin de queso - Cultivo de championes - Alimentos y bebidas fermentadas: salsa de soja, yogur, etc. - Tratamiento de aguas residuales Por supuesto, hasta la llegada de la moderna biologa, y en muchos casos hasta el siglo XIX, la base de muchos de estos procesos era desconocida. De hecho, solamente en el siglo XVIII cobra cuerpo la idea de que la materia viva puede ser estudiada como la materia inanimada, es decir, usando el mtodo experimental, con lo que se inicia el lento declive de las ideas vitalistas (creencias errneas de que "la vida depende de un principio vital irreducible a otras ramas de la ciencia"), que an daran sus ltimos estertores casi al final del siglo XIX. Algunos hitos cientficos que sentaran la base de la biotecnologa contempornea: Los primeros microscopistas, como van Leeuwenhoek y Hooke (siglo XVII) describen los "animlculos" que estn fuera del alcance del ojo, si bien se tarda an un par de siglos en captar la importancia de estas minsculas criaturas. El descubrimiento de que las fermentaciones se deban a microorganismos se debe a la gigantesca figura de Louis Pasteur, en sus estudios realizados entre 1857 y 1876. En la ltima parte del siglo XIX existan ya instalaciones industriales para obtener etanol, cido actico, butanol y acetona, aprovechando fermentaciones al aire libre en condiciones no estriles.

A finales del siglo XIX, la "edad de oro de la bacteriologa" permite: - Mejoras importantes en las tcnicas microscpicas. - El desarrollo de tcnicas aspticas, la esterilizacin y la pasteurizacin. - La posibilidad de cultivar cada cepa microbiana sin mezclas con otras: cultivos puros en medios de cultivo de laboratorio. A comienzos del siglo XX la bioqumica y la microbiologa convergen, estableciendo las bases enzimticas y metablicas de muchos procesos de fermentacin. Se desarrollan procedimientos industriales para producir enzimas (invertasa, proteasas, amilasas, etc.). Desde la dcada de 1940, las tcnicas de ingeniera qumica, aliadas a la microbiologa y a la bioqumica, permiten la produccin de antibiticos, cidos orgnicos, esteroides, polisacridos y vacunas. - La penicilina comenz a fabricarse en plena II Guerra Mundial, como resultado de avances importantes en tcnicas de esterilizacin a gran escala, mejora de las instalaciones de fermentacin (incluyendo la cuestin de la aireacin), cultivo del hongo, etc. A partir de entonces se disearon estrategias para mejorar genticamente las cepas microbianas industriales. - Las dcadas siguientes fueron de eclosin de produccin de antibiticos as como de transformaciones de esteroides y de cultivo de clulas animales para la produccin de vacunas antivirales. - Las dcadas de los 60 y 70 vieron la mejora de procesos de obtencin de pequeos metabolitos como nuclesidos, aminocidos y vitaminas. - Los procesos de fermentacin experimentaron mejoras con las tcnicas de inmovilizacin de clulas y enzimas en soportes, y con la fermentacin continua para obtener protena de clulas sencillas (biomasa microbiana). - Polmeros microbianos como xantanos y dextranos se obtuvieron industrialmente, con apliaciones en el campo de la alimentacin (como aditivos). Pero incluso bien avanzado el siglo XX, cuando la Gentica haba resuelto el misterio de la naturaleza del material de la herencia, las posibilidades que haba para actuar sobre dicho material eran limitadas: cruces entre plantas y animales de la misma especie (o de especies similares), seleccin de los individuos con rasgos deseados, retrocruzamientos (un proceso largo y lento), mutaciones con agentes fsicos (rayos UV, rayos X) o qumicos, con ulterior bsqueda (seleccin o rastreo -screening) de alguna variante de inters (algo tedioso y frecuentemente infructuoso), etc. Debemos esperar a la dcada de los 70 para que surja un conjunto de tcnicas de laboratorio revolucionarias que por primera vez permiten "tocar" de modo racional el sancta sanctorum de la vida. Son tcnicas y herramientas con las que se puede modificar el ADN de acuerdo a diseos previos y objetivos concretos (de ah el nombre popular de Ingeniera Gentica). La Ingeniera Gentica (I.G.), mejor llamada tecnologa del ADN recombinante in vitro, se caracteriza por su capacidad de cortar y empalmar genes o fragmentos de ADN de organismos distintos, creando nuevas combinaciones no existentes en la Naturaleza, combinaciones que ponemos a trabajar en el interior de una variedad de organismos hospederos, para nuestro provecho. 1.3 ETAPAS: La historia de la biotecnologa puede dividirse en tres grandes etapas: 1. La primera se extiende a lo largo de veintitantos siglos, desde los orgenes de la cultura humana hasta el siglo XVIII; 2. La segunda, desde los comienzos de la revolucin cientfica hasta la maduracin de la bioqumica y la aparicin de la biologa molecular; y la 3. Tercera ocupa las tres o cuatro ltimas dcadas del siglo XX. La biotecnologa de la primera mitad de nuestro siglo se fundamenta, sobre todo, en las propiedades de las enzimas, y persigue, principalmente, mejorar las cualidades de los alimentos. En este periodo comienzan a aparecer desviaciones de la idea que la propia ortodoxia semntica impone: el nacimiento bajo el significado de lo biolgico y la proyeccin hacia una necesidad social bajo la forma de una tecnologa. Adquieren importancia los factores econmicos y el anlisis riesgo-beneficio da pie a decisiones polticas no siempre vinculadas a las cuestiones cientficas; los problemas sociales de la salud y del ambiente, de modo principal buscan

soluciones en biotecnologas especficas. Y, pasado el ecuador del presente siglo, la bioqumica puede ofrecer a la biologa y a la qumica la tupida red de reacciones del metabolismo, la especificidad enzimtica y su localizacin celular. Sin embargo, el flujo de todas estas transformaciones adquiere para algunos el signo de lo vulgar y, agotadas prcticamente todas sus posibilidades de creacin de nuevos paradigmas, una tendencia cientfica critica la manera semidescriptiva de los tratamientos biolgicos por la bioqumica, afincada casi de modo exclusivo en el estudio del metabolismo. As naci la biologa molecular, como una forma reduccionista de la fsica a la biologa y bajo una triple concepcin elitista: la de los mtodos, la de los fenmenos estudiados e, incluso, la de los cientficos implicados en ella. Esta idea restrictiva condujo al empleo de las tcnicas fsicas, sobre todo de la difraccin de rayos X y los mtodos espectroscpicos de todo tipo, a la dilucidacin de las estructuras qumicas de importancia biolgica, y pronto fue ampliada a la interpretacin molecular de fenmenos biolgicos de la importancia, por ejemplo, de la herencia, de la expresin y regulacin gnicas, de las interacciones moleculares como base de la comunicacin ligando-clula y clula-clula, de la malignidad, etc. Sin embargo, y como cualquier tendencia en el arte o la literatura, la biologa molecular estricta, al cabo de algunas dcadas, perdi su novedad, desapareci el aislamiento derivado de su autonoma, y en esa secuencia recurrente tan habitual en la historia del conocimiento, volvi a reunirse con los mtodos e ideas de la biologa vecina, logrando ms extensin y mayor realismo. Y fruto de esta nueva ciencia biolgica unificada, colmatada de saberes, la biologa molecular contribuy a la formacin y desarrollo de nuevas reas con las que se va a solapar: la biologa celular, la gentica, la microbiologa, la virologa y la inmunologa. 1.4 CLASIFICACIN Y TCNICAS USADAS EN BIOTECNOLOGA: La biotecnologa, y en particular la llamada "nueva biotecnologa", se ha convertido en las ltimas dcadas en el centro de investigacin cientfica puntera. La mayor parte de los presupuestos gubernamentales dedicados a Investigacin y Desarrollo est, hoy en da, dedicada a ste mbito tecnocientfico. La biotecnologa puede ser clasificada en cinco amplias reas. Biotecnologa en Salud Humana. (Donde se incluye la B. Alimentaria) Biotecnologa Animal. Biotecnologa Industrial. Biotecnologa Vegetal. Biotecnologa Ambiental. Las tcnicas biotecnolgicas utilizadas en los diferentes campos de aplicacin de la biotecnologa se pueden agrupar en dos grandes grupos: Cultivo de tejidos: Trabaja a un nivel superior a la clula e incluye clulas, tejidos y rganos que se desarrollan en condiciones controladas. Tecnologa del ADN: Involucra la manipulacin de genes a nivel del ADN, aislamiento de genes, su recombinacin y expresin en nuevas formas, etc. La ingeniera gentica puede ser una herramienta muy poderosa para crear alternativas amistosas ambientales en productos y procesos que actualmente contaminan el ambiente o acaban con los recursos no renovables. Factores polticos, econmicos y sociales determinarn que posibilidades cientficas se harn realidad. 1.4.1 BIOTECNOLOGA ANIMAL: La biotecnologa animal ha experimentado un gran desarrollo en las ltimas dcadas. Las aplicaciones iniciales se dirigieron principalmente a sistemas diagnsticos, nuevas vacunas y drogas, fertilizacin de embriones in vitro, uso de hormonas de crecimiento, etc. Los animales transgnicos como el "ratn oncognico" han sido muy tiles en trabajos de laboratorio para estudios de enfermedades humanas. Existen tres reas diferentes en las cuales la biotecnologa puede influir sobre la produccin animal: -El uso de tecnologas reproductivas. -Nuevas vacunas y

-Nuevas bacterias y cultivos celulares que producen hormonas. En animales tenemos ejemplos de modelos desarrollados para evaluar enfermedades genticas humanas, el uso de animales para la produccin de drogas y como fuente donante de clulas y rganos, por ejemplo el uso de animales para la produccin de protenas sanguneas humanas o anticuerpos. Para las enfermedades animales, la biotecnologa provee de numerosas oportunidades para combatirlas, y estn siendo desarrolladas vacunas contra muchas enfermedades bovinas y porcinas, que en los ltimos tiempos han hecho mella en estos animales. La biotecnologa animal ha experimentado un gran desarrollo en las ltimas dcadas. Las aplicaciones iniciales se dirigieron principalmente a sistemas diagnsticos, nuevas vacunas y drogas, fertilizacin de embriones in Vitro, uso de hormonas de crecimiento, etc. Los animales como el "ratn oncognico" han sido muy tiles en trabajos de laboratorio para estudios de enfermedades humanas. Para las enfermedades animales, la biotecnologa viene de numerosas oportunidades para combatirlas, y estn siendo desarrolladas vacunas contra muchas enfermedades bovinas y porcinas, que en los ltimos tiempos han hecho mella en estos animales.

1.4.2 BIOTECNOLOGA INDUSTRIAL: Las tecnologas de ADN ofrecen muchas posibilidades en el uso industrial de los microorganismos con aplicaciones que van desde produccin de vacunas recombinantes y medicinas, tales como insulina, hormonas de crecimiento e interfern, como enzimas y produccin de protenas especiales. Desde hace varias dcadas las grandes multinacionales de la biotecnologa tienen puestos sus ojos en el control de algo vital para todos los pueblos del planeta, las plantas. Ya que, tanto las plantas silvestres como los cultivos encierran unas posibilidades de hacer negocio verdaderamente insospechadas. Y esta posibilidad la han visto claramente dos empresas como: Pharmagenesis es una empresa Americana que une, en la investigacin de las plantas, la biologa y la informtica. Esta empresa basa sus estudios en el anlisis de una planta china, llamada "Liana del Dios del Trueno", ha sido analizada qumica y genticamente y se ha descubierto que es eficaz contra la artritis y adems es anticancergena, ya que la molcula extrada de la planta provoca el suicidio de las clulas cancergenas de distintos tumores. Los chinos llevan muchos aos (muchsimos) utilizando de forma natural estas plantas, pero Pharmagenesis tiene la patente para explotar el principio activo de la "Liana del Dios del Trueno" y los chinos no obtienen ningn beneficio de ello, en cambio, esta empresa ganar mucho dinero por los derechos de autor en la venta de cada caja de medicamento que se venda. Pharmagenesis piensa que de alguna forma compensa a los ciudadanos chinos, puesto que les compra las plantas y porque todos sus empleados, en China, son nacionales de pas. Otra de estas industrias es Monsanto. Esta empresa americana es una de las gigantes de la qumica y los plsticos, y desde hace poco, de los genes. Ha creado cerca de dos hectreas de invernaderos en los que ha recreado los distintos climas existentes en el mundo, incluso las estaciones, y ha plantado en ellas una gran variedad de plantas, arroz, soja, maz, tabaco, etc., a las que somete a estudios y pruebas. En sus estudios, cultiva plantas transgnicas, y las sita junto a otras plantas que no han sido modificadas genticamente, y el resultado es asombroso. La planta de patata transgnica ha soportado una plaga de escarabajos, debido a que en sus hojas existe una sustancia letal para ellos, en cambio la planta no modificada ha quedado destrozada por el ataque.

Monsanto se fund en 1901, en ese momento era una de las cinco mayores empresas qumicas americanas. Fabric muchos productos que despus se demostr que eran txicos. En la guerra de Vietnam la aviacin norteamericana derram un potente herbicida, "el agente naranja" y uno de los principales proveedores fue Monsanto. Hoy hace lo que puede por cambiar de imagen, pero parece que no lo est logrando del todo, ya que se sabe que cada ao destina un 20% ms al desarrollo y elaboracin de herbicidas. Todos los beneficios que obtiene los est destinando al descubrimiento de nuevos genes y puesta a punto de nuevas plantas. En 1998 obtuvo unos beneficios de 118.000.000 millones de pesetas. Monsanto ha declarado que para el 2002 producir algodn coloreado genticamente, ser de color amarillo, rojo, blanco y azul. No ser necesario tintarlo despus. Es uno de los principales productores de soja transgnica. Los agricultores que adquieren semillas transgnicas contratan con ella deben firmar un contrato por el que se comprometen a pedir otro stock de semillas al ao siguiente, no tiene derecho a revender las semillas a otros, ya que tienen que devolverlas a la empresa, tampoco pueden volver a utilizarlas, los agricultores estn atrapados por la empresa ya que crean en ellos una dependencia total. Mediante una tarjeta de socio o cliente controlan a los agricultores, saben cuntos kilos de semillas se han llevado, dnde la cultivan, en qu fecha la cultivan, etc. 1.4.3 BIOTECNOLOGA AMBIENTAL: La biotecnologa ambiental se refiere a la aplicacin de los procesos biolgicos modernos para la proteccin y restauracin de la calidad del ambiente. El uso de microorganismos en procesos ambientales se encuentra desde el siglo XIX. Hacia finales de 1950 y principios de 1960, cuando se descubri la estructura y funcin de los cidos nuclicos, se puede distinguir entre biotecnologa antigua tradicional y la biotecnologa de segunda generacin, la cual, en parte, hace uso de la tecnologa del ADN recombinante. Actualmente, la principal aplicacin de la biotecnologa ambiental es limpiar la polucin. La limpieza del agua residual fue una de las primeras aplicaciones, seguida por la purificacin del aire y gases de desecho mediante el uso de biofiltros. La biorremediacin (uso de sistemas biolgicos para la reduccin de la polucin del aire o de los sistemas acuticos y terrestres) se est enfocando hacia el suelo y los residuos slidos, tratamientos de aguas domsticas e industriales, aguas procesadas y de consumo humano, aire y gases de desecho, lo que est provocando que surjan muchas inquietudes e interrogantes debido al escaso conocimiento de las interacciones de los organismos entre s, y con el suelo. Los sistemas biolgicos utilizados son microorganismos y plantas. En definitiva, la biotecnologa puede ser utilizada para evaluar el estado de los ecosistemas, transformar contaminantes en sustancias no txicas, generar materiales biodegradables a partir de recursos renovables y desarrollar procesos de manufactura y manejo de desechos ambientalmente seguros. 1.4.4 BIOTECNOLOGA VEGETAL: Con las tcnicas de la biotecnologa moderna, es posible producir ms rpidamente que antes, nuevas variedades de plantas con caractersticas mejoradas, produciendo en mayores cantidades, con tolerancia a condiciones adversas, resistencia a herbicidas especficos, control de plagas, cultivo durante todo el ao. Problemas de enfermedades y control de malezas ahora pueden ser tratados genticamente en vez de con qumicos. La ingeniera gentica (proceso de transferir ADN de un organismo a otro) aporta grandes beneficios a la agricultura a travs de la manipulacin gentica de microorganismos, plantas y animales. Una planta modificada por ingeniera gentica, que contiene ADN de una fuente externa, es un organismo transgnico. Un ejemplo de planta transgnica es el tomate que permite mantenerse durante mas tiempo en los almacenes evitando que se reblandezcan antes de ser transportados En el mes de Enero del pasado ao 2000, se lleg a un acuerdo sobre el Protocolo de la Bioseguridad. Europa y Estados Unidos acordaron establecer medidas de control al comercio de productos transgnicos.

Mas de 130 pases dieron el visto bueno al acuerdo de Montreal, sin embargo, en este acuerdo existen partes con posiciones, que si no son incompatibles, s son contradictorias en lo relativo al etiquetado y comercializacin de estos productos: De una parte encontramos a EEUU y a sus multinacionales, que acompaados por otros grandes pases exportadores de materias primas agrcolas, quieren una legislacin abierta y permisiva, en la que el mercado sea quien imponga su ley. EEUU defiende el uso de la biotecnologa y pone de relieve la importancia de su industria, que crea nuevos puestos de trabajo y fomenta la innovacin tecnolgica y podra acabar con el hambre del mundo. En el lado opuesto se encuentra la Unin Europea y otros pases desarrollados de Asia, que pretenden poner orden y lmite a ese comercio, empezando por un etiquetado riguroso que diferencie, tanto las materias primas como los productos elaborados en los que se incluyan organismos modificados genticamente (OMG). As mismo pretenden controlar y limitar el desarrollo de las patentes, propugnando incluso, una moratoria de 10 aos, debido a que no se conoce con certeza los verdaderos efectos de esas manipulaciones genticas sobre el resto de variedades vegetales y sobre el ecosistema. Espaa ha sido acusada por grupos ecologistas y organizaciones agrarias como, COAG y UPA de ser uno de los pases ms permisivos en este aspecto. El sector ms radical lo constituye aquellos los grupos conservacionistas y colectivos cientficos que abogan por la prohibicin de cualquier tipo de alteracin de los cdigos genticos. Las multinacionales de la biotecnologa son las que, por ahora se estn llevando el gato al agua. Los cinco gigantes son: AstraZeneca. DuPont. Monsanto. Novartis. Aventis. Suponen el 60%_________________del mercado de pesticidas. 23%_________________del mercado de semillas. 100%_________________del mercado de semillas transgnicas. Entre los cultivos transgnicos autorizados en la Unin Europea: PRODUCTO EMPRESA Tabaco Selta, Soja Monsanto, Colza PGS, Maz Novartis, Colza AgrEvo, Maz (T25) AgrEvo, Maz (MON 810) Monsanto, Maz (MON 809) Ploneer, Achicoria Bejo Zaden, Colza AgrEvo, Maz Novartis, Colza PGS Patata AVEBE, Remolacha DLF-Trifolium, Clavel Florigene, Tomate Zeneca, Algodn Monsanto, Maz DeKalb, Patata Amylogene, Clavel Florigene.

1.4.5 BIOTECNOLOGA HUMANA: Puesto que cada criatura es nica, cada una posee una composicin nica de ADN. Cualquier individuo puede ser identificado por pequeas diferencias en su secuencia de ADN, este pequeo fragmento puede ser utilizado para determinar relaciones familiares en litigios de paternidad, para confrontar donantes de rganos con receptores en programas de trasplante, unir sospechosos con la evidencia de ADN en la escena del crimen (biotecnologa forense). El desarrollo de tcnicas para el diagnstico de enfermedades infecciosas o de desordenes genticos es una de las aplicaciones de mayor impacto de la

tecnologa de ADN. Al utilizar las tcnicas de secuenciacin de ADN los cientficos pueden diagnosticar infecciones vricas, bacterianas o mapear la localizacin especfica de los genes a lo largo de la molcula de ADN en las clulas. El primer tratamiento exitoso en terapia gnica fue en 1990, cuando se trat una enfermedad del sistema inmune de nios llamada "Deficiencia de ADA". Clulas sanguneas con los genes correctos de ADA fueron inyectadas al cuerpo del paciente donde produjeron suficientes clulas normales que permitieron mejorar el sistema inmune. Hoy, la terapia gnica esta tratando enfermedades tales como tumores cerebrales malignos, fibrosis qustica y HIV. Con esta tcnica se pretende tambin reparar rganos, como por ejemplo un hgado cirrtico a partir de las pocas clulas sanas que le quedan, un par de ventrculos nuevos para reemplazar los efectos devastadores de un infarto, la regeneracin de una mano amputada o disponer de una fuente inagotable de neuronas para corregir los efectos de enfermedades tan graves como el Alzheimer o el Parkinson. En estos momentos existen tres lneas de investigacin: La clonacin de clulas madre.: James Thonson, de la Universidad de Wisconsin (EEUU) descubri en 1998 cmo obtener clulas madre a partir de un embrin humano. En el embrin esas clulas son las destinadas a formar todos los rganos del cuerpo, y estimuladas adecuadamente pueden reparar rganos daados. La reprogramacin de clulas adultas sin necesidad de clonar. La empresa britnica PPL Therapeutics est a la cabeza de esta tcnica, que les salva de todos los escollos morales y legales que existen al respecto. El esclarecimiento y manipulacin del mecanismo gentico que dispara la formacin de rganos y extremidades en el embrin. En esta tcnica nos encontramos con un espaol, Juan Carlos Izpisa, que dirige un laboratorio en el Instituto Salk de La Jolla (California). El mecanismo consiste en determinar la relacin existente entre dos familias de protenas (llamadas Wnt y FGF) cuya unin en forma de parejas dispara la formacin de un determinado miembro. Una pareja concreta formada por un miembro de Wnt y un miembro de FGF dispara la formacin de un brazo, otra pareja distinta dispara la de una pierna, otra la del hgado, etc. La investigacin de Izpisa est encaminada a encontrar la forma de reactivar estas parejas en los humanos adultos. 1.4.6 BIOTECNOLOGA ALIMENTICIA: Los europeos y en especial los espaoles, vivimos muy preocupados por su alimentacin. El consumidor tiende a asimilar alimento natural con alimento sano y seguro y a mitificarlo cuando lo compara con los transgnicos, sin pensar que stos han pasado por mayor nmero de evaluaciones sanitarias antes de su comercializacin. Centenares de cientficos de distintas disciplinas (qumica, farmacolgica.) trabajan en los centros de investigacin de la industria alimentaria para desarrollar productos adaptados a nuestros sentidos. Detrs de los alimentos de aspecto y sabor perfecto, se esconde un largo y complejo proceso de elaboracin en el laboratorio. Si un sorbete a base de agua resulta cremoso o si una pizca de polvo marrn se convierte, al disolverse en el agua, en un capuchino, es gracias a recetas basadas en conocimientos de microfsica y de la qumica. Vamos a ver algunos ejemplos curiosos que se dan en algunos de los alimentos que tomamos cada da: La multinacional Nestl est realizando un estudio para lograr que los cereales crujan ms, ya que a los consumidores no les gusta que sean demasiado silenciosos. Para que los espaguetis se cuezan por dentro, es necesario un tiempo de elaboracin de ocho o diez minutos, lo que provoca que la parte exterior se reblandezca demasiado, provocando que no queden al dente. Para evitarlo los cientficos del Centro de Investigaciones Nestl han creado unos espaguetis seccionados en forma de trbol, que se cuecen de forma uniforme en slo tres minutos. Las gominolas se elaboran a partir de macromolculas semejantes a las de los polmeros que forman los materiales plsticos.

Las patatas fritas de bolsa se hicieron ms apetitosas gracias a un experimento de David

Parker, de la Universidad de Birmingham, que las someti a una pequea dosis de radioactividad. Young Hwa Kim, fsico de la Lehig University Bethlem, en Pensilvania, ha logrado, sin aadir ningn ingrediente secreto al maz, palomitas gigantes, multiplicando su tamao por diez, simplemente reduciendo la presin existente en el ambiente en que se cuece. 1.5 LA BIOTECNOLOGA ES INTRNSECAMENTE INTERDISCIPLINAR: La actual biotecnologa es una empresa intensamente interdisciplinar, caracterizada por la reunin de conceptos y metodologas procedentes de numerosas ciencias para aplicarlas tanto a la investigacin bsica como a la resolucin de problemas prcticos y la obtencin de bienes y servicios. Algunas de las ramas de conocimiento implicadas en la biotecnologa: Microbiologa Bioqumica Gentica Biologa celular Qumica Ingeniera (bio)qumica Ingeniera mecnica Ciencia y Tecnologa de alimentos Electrnica Informtica El avance de la biotecnologa depender cada vez ms de esta colaboracin entre disciplinas, y en el uso de lenguajes y paradigmas comunes, as como en que cada tipo de especialista comprenda los logros y limitaciones de las otras ramas biotecnolgicas. 1.6 LA BIOTECNOLOGA PRESENTA MUCHOS CAMPOS DE APLICACIN: Dejando aparte el hecho ya reseado de que las tcnicas biotecnolgicas (principalmente las genticas) encuentran su primera utilidad en el avance de las propias Ciencias de la Vida, desde el punto de vista de su aplicacin comercial e industrial, podemos decir que el campo de utilidad es inmenso: Aplicaciones teraputicas: - Antibiticos - Vacunas - Hormonas - Terapias genticas Diagnstico: - Diagnsticos para la salud humana. - Diagnsticos para agricultura y ganadera. - Ensayos para calidad de alimentos. - Ensayos para calidad ambiental. Alimentacin: - Mejora de procesos tradicionales de obtencin de alimentos y bebidas. - Nuevos alimentos y bebidas. - Nutracutivos: alimentos con perfiles determinados de nutrientes, y para la mejora de la salud. - Aditivos alimentarios. Medio ambiente: - Tratamiento de residuos urbanos, agrcolas e industrials. - Biorremedio y biorreparacin. - Produccin de energa a partir de biomasa. 1.7 LOS TRES NCLEOS DE LA BIOTECNOLOGA: Segn John Smith (1996), muchos procesos biotecnolgicos, especialmente los que se realizan en entornos cerrados industriales, tienen un triple ncleo: Obtener el mejor catalizador biolgico para una funcin o proceso especfico.

obtener el mejor ambiente para la funcin de ese catalizador biolgico, mediante una serie de

diseos tcnicos en los que es fundamental la ingeniera qumica.


procesamiento del material, consistente en separar y eventualmente purificar el material biolgico

producido. Veamos cada uno de estos tres componentes: 1. En la mayora de los casos, el catalizador biolgico son clulas vivas, sobre todo microorganismos. Por ello, uno de los pilares de la biotecnologa es precisamente la microbiologa (entendiendo esta en sentido amplio de biologa microbiana). 2. El segundo componente o ncleo de las biotecnologas estriba en el entorno industrial en que ponemos a funcionar las clulas o las enzimas. Esto nos lleva al concepto de biorreactor, un entorno cerrado y controlado para que nuestros catalizadores biolgicos hagan lo que queremos con la mxima eficiencia. En esta parte de la biotecnologa se requiere la colaboracin estrecha entre los bilogos y los ingenieros de bioprocesos, incluyendo los ingenieros qumicos. 3. Finalmente, queda el rea quiz ms desconocida y compleja, el procesamiento de la biomasa o de la sustancia producidas: separacin de las clulas respecto del medio acuoso en que han funcionado, recuperacin eficiente del producto buscado, purificacin, etc. 1.8 ALGUNOS ASPECTOS CLAVE EN LAS BIOTECNOLOGAS: 1.8.1 MATERIAS PRIMAS: Las materias primas para alimentar los procesos biotecnolgicos industriales pueden ser muy variadas, pero el hecho de que en su mayora se trate de materias naturales biodegradables las hace muy atractivas. Lo ideal sera emplear subproductos de otras empresas, con lo que el proceso se abarata y se eliminan problemas ambientales: Se usan mucho desechos ricos en carbohidratos de ciertas industrias: - Melazas procedentes del procesamiento de caa de azcar y remolacha azucarera. En Brasil usan la caa de azucar para fabricar bioalcohol (Gasohol) como biocombustible. - Desechos ricos en almidn: de granos como el maz, de tubrculos como la tapioca o la patata. El problema aqu es que el almidn debe primero ser degradado a monosacridos u oligosacridos antes de la fermentacin industrial, pero ciertos procesos biotecnolgicos son ya competitivos, como la produccin de jarabes ricos en glucosa o fructosa, usados como endulzantes en alimentos y bebidas. En Suecia eliminan los desechos contaminantes del procesamiento de la patata con un mtodo a base de levaduras, que produce biomasa potencialmente valiosa. - Existe un gran inters en usar como materia prima desechos agrcolas e industriales ricos en celulosa. - De la misma manera, sera estupendo poder aprovechar otros desechos de las actividades humanas como materias primas para los microorganismos industriales, elimando as problemas de polucin ambiental. 1.9. PROCESOS TRANSGNESIS Y BIOPROCESOS: 1.9.1 TRANSGNESIS: Se conoce como transgnesis al proceso de transferir genes en un organismo. La transgnesis se usa actualmente para hacer plantas y animales transgnicos. Existen distintos mtodos de transgnnesis como la utilizacin de pistolas de genes o el uso de bacterias o virus como vectores para transferir los genes. En la prctica, esto consiste en la introduccin de un gen aislado -proveniente de de un virus, bacteria, planta, animal o humano- al material gentico de otro ser vivo. Transgnico se refiere a una planta o a un animal en cuyas clulas se ha introducido un fragmento de ADN exgeno, o sea un ADN que no se encuentra normalmente en ese organismo. Un ratn transgnico, por ejemplo, es uno al que se ha inyectado ADN, en un huevo fertilizado que se reimplanta a una madre adoptiva. El animal que nace tiene no slo su propio ADN, sino tambin el fragmento de ADN exgeno que se reinyect en la etapa de fertilizacin del huevo. Podemos estudiar qu efecto tiene este gen sobre todo el organismo, en vez de mirar tan slo una clula en un tejido de cultivo. Esto es muy importante porque muchas enfermedades no afectan a un solo tipo de clulas, sino que afectan a las interacciones entre muchos tipos diferentes de clulas. Este tipo de tecnologa permite modelar

enfermedades humanas en otras especies donde se puede estudiar la biologa y posibles terapias para la enfermedad.

La transgnesis se puede definir como la introduccin de ADN extrao en un genoma, de modo que se mantenga estable de forma hereditaria y afecte a todas las clulas en los organismos multicelulares. Generalmente, en animales, el ADN extrao, llamado transgen, se introduce en zigotos, y los embriones que hayan integrado el ADN extrao en su genoma, previamente a la primera divisin, producirn un organismo transgnico; de modo que el transgn pasar a las siguientes generaciones a travs de la linea germinal (gametos). Entre las aplicaciones de los animales transgnicos se pueden destacar: La posibilidad de estudiar a nivel molecular el desarrollo embrionario y su regulacin. Manipular de forma especfica la expresin gnica in vivo. Estudiar la funcin de genes especficos. Poder utilizar a mamferos como biorreactores para la produccin de proteinas humanas. La correccin de errores innatos de metabolismo mediante terapia gnica. La transgnesis puede efectuarse siguiendo dos estrategias distintas: Transgnesis por microinyeccin de zigotos: Desde que en 1982 se obtuviera un ratn transgnico, la produccin de animales transgnicas es cada vez ms cotidiana, existiendo ya animales transgnicos de las siguientes especies: ratn, rata, conejo, cerdo, vaca, cabra y oveja. La tcnica se realiza, fundamentalmente por microinyeccin y se realiza de la siguiente forma: En la primera fase, se aslan un nmero grande de vulos fertilizados. Se consigue sometiendo a las hembras a un tratamiento hormonal para provocar una superovulacin. La fertilizacin puede hacerse in vitro o in vivo. En la segunda fase, los zigotos obtenidos se manipulan uno a uno y con una micropipeta a modo de aguja, se introduce una solucin que contiene ADN. En la tercera fase, estos vulos son reimplantados en hembras que actuarn como nodrizas permitiendo la gestacin hasta trmino. Por ltimo, tras el destete de los recin nacidos, stos se chequean, para ver si ha ocurrido la incorporacin del transgn. Transgnesis por manipulacin de clulas embrionarias: Una estrategia ms poderosa para la transgnesis implica la introduccin de ADN extrao en clulas embrionarias totipotentes(clulas ES) o clulas embrionarias madres (clulas EM). Estas clulas se toman del interior de la blstula en desarrollo y se pasan a un medio donde se tratan con distintos productos con lo que se conseguir que las clulas no se diferencien, y se mantiene su estado embrionario. El ADN extrao se introduce en las clulas ES mediante diversas tcnicas,posteriormente las clulas transfectadas son reintroducidas en una blstula y sta reimplantada en una hembra. Con esta tcnica los neonatos son quimeras; pero mediante el cruce de stas se consiguen animales transgnicos con aquellas quimeras que hayan incorporado el transgn en su lnea germinal. APLICACIN DE TRANSGNICOS: A. EN MEDICINA HUMANA: Por tanto, no es de extraar que se haya desarrollado la aspiracin de crear animales transgnicos para poder producir protenas teraputicas humanas, mediante la insercin de los genes correspondientes. Fue en 1980 cuando, por primera vez, se tuvo xito en producir

un animal transgnico, un ratn, con la ayuda de una tcnica de microinyeccin. Desde entonces, son centenares y centenares las lneas de animales transgnicos creadas, la mayor parte de ellas a partir de ratones. En la actualidad se comercializan bastantes compuestos de inters teraputico o biomdico que se han producido biotecnolgicamente mediante cultivos de bacterias, levaduras o clulas de mamfero cultivadas in vitro, tras la correspondiente modificacin gentica. Entre tales compuestos se encuentran la hormona de crecimiento, la insulina o el interfern. Pero, para muchas protenas bioactivas, este procedimiento no es adecuado porque necesitan de ciertas transformaciones tras su sntesis (denominadas modificaciones posttraduccionales) para llegar a alcanzar su total actividad biolgica, y resulta que el proceso de cultivos de microorganismos presenta dificultades, por ahora insalvables, en orden a conseguirlo. La tecnologa consiste en aislar o producir el gen interesado utilizando alguna de las modernas tcnicas de la biologa molecular actual. Tras obtenerlo, usualmente se fusiona con ciertas secuencias reguladoras (promotoras, porciones controladoras, etctera.) pertenecientes a genes de protenas lcteas normales. Se pretende que el nuevo gen engae a la maquinaria celular y se comporte como cualquier otro de los genes responsables de las protenas lcteas, es decir, que no se exprese en todas las clulas del organismo, sino tan solo en las responsables de la secrecin lctea. As no se afecta en absoluto el resto de la fisiologa del animal. La siguiente fase del proceso consiste en extraer ovarios de los animales, que se maduran y fertilizan in vitro en el laboratorio con el semen, previamente obtenido y congelado, de los machos. Con un micromanipulador, bajo observacin microscpica, se procede a la microinyeccin del gen previamente preparado, de modo que es usual que un equipo de 3 personas pueda microinyectar unos 1000 ovocitos durante una jornada de trabajo. Tras ello se cultivan los embriones in vitro durante 6-8 das, realizndose en ellos las pruebas de determinacin de sexo (interesan nicamente las hembras) as como los correspondientes anlisis de integracin del gen externo microinyectado. Se procede entonces a la transferencia de los embriones viables hasta los teros maternos, con un porcentaje de xito que, por ahora, est resultando ser ligeramente superior al 1% de los embriones originales y, de ellos, producen embarazos que llegan a buen trmino unos tres casos por cada grupo de 1000 oocitos iniciales. Entre los logros ms llamativos conseguidos al respecto en estos ltimos aos se pueden citar algunos como los siguientes: uroquinasa humana, en leche de ratonas, a concentraciones diez veces superiores a las obtenidas por sistemas de cultivos celulares in vitro; lactoferrina humana, tambin en ratas transgnicas, aunque en este caso la expresin tuvo lugar en diversos rganos y tejidos; glndulas mamarias de ovejas transgnicas han proporcionado ya tanto factor VIII antihemoflico humano, en unos casos, como factor IX antihemoflico, en otros. Un animal muy interesante para estos experimentos es la cabra, que puede producir hasta 4 litros de leche diarios y cuyos periodos de gestacin y desarrollo (5 y 8 meses respectivamente) son menores que los de las vacas. De su leche se han conseguido extracciones conteniendo miligramos del activador tisular del plasmingeno humano. EJEMPLO: Dos bebs que nacieron con un defecto gentico que les ocasionaba una severa inmunodeficiencia, se les extrajeron clulas madre de mdula sea. Se cultivaron las clulas, se reemplaz el gen defectuoso y se transfirieron de nuevo a los nios. Este experimento, en el que se emplearon clulas madre de los propios bebs, constituy el primer xito de curacin mediante terapia gentica. La inyeccin de clulas madre en el lquido cefalorraqudeo de los animales puede lograr devolver el movimiento a unos roedores con parlisis. Se introducen clulas madre neuronales en los roedores paralizados por un virus que ataca especficamente a las neuronas motoras y se comprob que la mayora recuperaba la habilidad de apoyar las plantas de una o de dos de sus patas traseras. Las investigaciones son muy prometedoras y avanzan muy rpidamente, pero queda mucho por hacer para llegar a aplicaciones clnicas reales. Todava falta por conocer los mecanismos que permiten la especializacin de las clulas madre humanas para obtener tejidos especializados vlidos para el transplante.

B. EN LOS ALIMENTOS: En el campo de la produccin de alimentos, la tecnologa del DNA se est utilizando para varias aplicaciones, y sus perspectivas de futuro, en el aspecto cientfico y tecnolgico, son prometedoras. Esas aplicaciones, presentes y futuras, corresponden a distintos tipos:
<

Modificacin de microorganismos. Las primeras aplicaciones de la tecnologa del DNA recombinante en el campo de los alimentos han consistido en la obtencin de protenas en microorganismos, entre de las hormonas de crecimiento bovina y la quimosina bovina. La hormona de crecimiento bovina recombinante se administra a las vacas para aumentar su produccin de leche. Sin embargo, dadas sus caractersticas, es ms razonable considerarla como un producto de farmacia animal que como un material para uso por la industria alimentaria. Adems su uso no est autorizado en la Unin Europea, aunque s en Estados Unidos. La quimosina bovina recombinante, sin embargo, si que se puede considerar un aporte de la biotecnologa a la industria alimentaria. La quimosina, componente fundamental del cuajo obtenido del estmago de terneros jvenes, es el enzima clsico en la fabricacin de quesos. Tambin se han obtenido otros enzimas de inters industrial, especialmente los destinados a la modificacin de carbohidratos. La modificacin de rutas metablicas en microrganismos ha permitido aumentar la eficacia de la sntesis de cidos orgnicos como el cido lctico y el cido ctrico. Modificacin de vegetales. La modificacin gentica de vegetales es una actividad que acompaa a la civilizacin humana desde la aparicin de la agricultura. Muchos de los vegetales ms importantes cultivados actualmente, como el trigo, no guardan casi ninguna semejanza con sus parientes salvajes. La novedad de la utilizacin de la biotecnologa est simplemente en la potencia y precisin de las herramientas utilizadas actualmente para la creacin de nuevas variedades, no en el hecho en s. En este momento, la obtencin de vegetales transgnicos es el campo con mayores posibilidades de desarrollo, a partir de distintas aproximaciones. Genes antisentido. El primer vegetal transgnico comercial, desarrollado por la empresa Calgene en 1994, fue el tomate Flavr Savr, resistente al ablandamiento al contener un gen antisentido de la poligalacturonasa. En este tomate, el gen antisentido produce la sntesis de un m-RNA complementario del m-RNA de la poligalacturonasa, que al unirse a l impide la sntesis del enzima. Este tomate no ha tenido xito comercial, pero la aproximacin es vlida para la modificacin de otros vegetales. Los genes antisentido no inducen la expresin de una protena nueva, sino que evitan la de una existente en el vegetal no transgnico. Genes de resistencia a insectos. La resistencia a insectos est basada hasta ahora en los genes de las toxinas de Bacillus thuringiensis, una bacteria patgena para determinados lepidpteros. En particular, la toxina crylA(b) aparece en el maiz desarrollado por Monsanto en 1996. Esta protena se une especficamente a determinados receptores que solamente existen en el tubo digestivo de algunos tipos de insectos, entre ellos, Ostrinia nubialis, el barrenador del maiz, endmico en algunas zonas. Genes de resistencia a herbicidas. En este caso son posibles en principio dos aproximaciones. O bien insertar en la planta el gen de un enzima que no se vea inhibido por el herbicida o bien un enzima que inactive el herbicida. En el primero de estos casos tenemos la soja resistente al glifosato, en la que se ha insertado un gen bacteriano para el enzima enolpiruvilshikimato-3 fosfato sintetasa. Este enzima est implicado en la ruta biosinttica de los aminocidos aromticos. El enzima equivalente de la soja es inhibido por el herbicida, pero el bacteriano no lo es, de tal forma que no se corta la correspondiente ruta metablica, y la planta transgnica no se ve afectada. En consecuencia, puede usarse el herbicida en cualquier momento de desarrollo del cultivo, sin que ste se vea afectado.

Cambios en la composicin de vegetales. Los cambios en la composicin de un vegetal comestible pueden permitir mejorar su calidad nutricional, tanto si se emplea en nutricin animal como en humana. Concretamente se puede modificar el patrn de aminocidos de las protenas, corrigiendo la deficiencia en lisina de los cereales o la deficiencia en aminocidos azufrados de la protena de soja. Otras mejoras de este tipo pueden consistir en la obtencin de productos alimentarios o para usos industriales no alimentarios modificando la composicin de los lpidos. En 1995 se desarroll una variedad de colza (canola) cuyo aceite es muy rico en cido lurico. Ventajas de los vegetales transgnicos. Aunque parezca obvio, debe decirse que su ventaja fundamental es que tienen la propiedad (resistencia a insectos o a herbicidas, por ejemplo) que se buscaba con su obtencin. Ahora bien, estas ventajas no resultan casi nunca evidentes para los consumidores, ya que las repercusiones econmicas, como costos de produccin menores, mayor facilidad de cultivo o necesidad de menores subvenciones agrarias no se han trasladado por el momento hacia ellos en forma de nuevos productos, precios menores, etc. Adems, dado que los cultivos ms importantes (maz, soja) no se comercializan directamente, sino que son materias primas para otras industrias o se utilizan en alimentacin animal, es razonable pensar que este traslado de beneficios nunca se va a producir. Las ventajas medioambientales por menor uso de insecticidas son tambin pequeas, y tampoco los consumidores las aprecian directamente. Para la salud del consumidor de los alimentos transgnicos: El riesgo que aparece a primera vista es la posibilidad de que, al introducirse una protena "extraa" en el alimento (la toxina o el enzima bacteriano, por ejemplo) pudieran aparecer reacciones de alergia en algunos consumidores. La experiencia del uso desde hace bastantes aos de las toxina de Bacillus thuringiensis, en la "agricultura biolgica" sin que se hayan indicado casos de alergia hace que no parezca probable su aparicin al encontrarse dentro de un transgnico. Lo mismo puede decirse de las otras protenas, de las que por el momento tampoco se conoce un solo caso de alergia a ellas. La polmica de los transgnicos. La biotecnologa aplicada a los alimentos ha encontrado oponentes en algunos grupos sociales desde sus inicios. Inicialmente, la oposicin parto de grupos fundamentalistas religiosos en Estados Unidos, que se oponan a la modificacin de la Obra de Dios. Otras organizaciones intervinieron tambin en la polmica, con ideas tan peregrinas como el hecho de que si se utilizaran "genes animales" en los vegetales transgnicos, stos seran incomestibles por los vegetarianos. Algunas organizaciones ecologistas o antiglobalizacin han encontrado en la lucha contra los transgnicos una causa atractiva para un sector del pblico, que ve tras ellos el peso de las multinacionales de la agricultura. En su batalla por ganar adeptos, estas organizaciones no han vacilado en lanzar acusaciones falsas y demaggicas, intentando, con cierto xito, trasladar al pblico la idea de que representan un riesgo sanitario y ecolgico, y a empresas y polticos la sensacin de que es preferible no apoyar ni utilizar estos productos para evitar convertirse en la diana de campaas en contra en la calle y en los medios de comunicacin. Situacin actual y perspectivas de futuro. En un sistema de agricultura sostenible, o de gestin integrada, los transgnicos representan una pieza fundamental. Sin embargo, las semillas transgnicas pueden llegar a ser la causa de problemas reales, en el aspecto socioeconmico, en cuanto que pueden producir la dependencia de una parte sustancial de los agricultores de unas pocas empresas. Disfrazar esos problemas con las inexistentes amenazas de los riesgos para la salud y el medio ambiente no hace ms que empeorarlos. Los gobiernos no van a ser propensos a invertir en investigacin en un campo en el que existe una oposicin con una gran capacidad de presin en los medios de comunicacin. Tambin Los microorganismos modificados genticamente se emplean en la industria alimentaria para producir aditivos alimentarios como edulcorantes artificiales y

aminocidos con el propsito de incrementar la eficiencia y reducir su coste. Otros productos de estos microorganismos son enzimas recombinantes que se emplean en panadera, produccin de cerveza, produccin de queso (por ejemplo, quimosina). Tambin se aplican en procesos de fermentacin, como por ejemplo el empleo de levaduras transgnicas para desarrollar el sabor y aroma en la industria de la cerveza. 1.9.2 BIOPROCESOS: Las clulas para multiplicarse necesitan: nutrientes orgnicos e inorgnicos, oxgeno, control de temperatura y pH (buffers, CO2) y agitacin para promover la transferencia de masa y calor. En el bioreactor de produccin el cultivo se lleva a su mxima densidad celular. Antes de llegar al reactor, las clulas de expresin se van cultivando (multiplicando) en aumento de escalas para permitir la aclimatacin de las clulas. Las etapas previas al bioreactor de produccin se conocen como corriente arriba. Por otro lado las etapas despus del bioreactor son las de corriente abajo. La cosecha es la etapa en donde se recupera en forma cruda la protena sintetizada. Esto se puede hacer por extraccin, precipitacin o filtracin. Si la protena producida permanece dentro de las clulas, stas pasan por un proceso de rompimiento (como centrifugacin a alta presin, homogenizacin) antes de la recuperacin. Como en la bioreaccin se forman impurezas, la protena cruda hay que purificarla. Tpicamente se hace en columnas de cromatografa. La solucin acuosa de la protena ya purificada se almacena en recipientes esterilizados. Dependiendo de la protena, su formulacin final es en jeringuilla para inyeccin o slido liofilizado el cual para administrarse se disuelve en agua para inyeccin. La biotecnologa moderna se basa en la manipulacin gentica in vitro de clulas o microorganismos con un propsito determinado. Esto es conocido como Ingeniera Gentica o Tecnologa del ADN recombinante (ADN-r). El organismo modificado se puede conocer como Organismo Transgnico u Organismo Genticamente Modificado. En la dcada de 1970 la Ingeniera Gentica y la ciencia del Cultivo de Clulas, fueron dos tecnologas que convergen en su desarrollo para hacer posible la manufactura a escala industrial de protenas teraputicas. En 1982 se produce la primera protena teraputica por medio de ADN-r. Esta fue la versin humana de la insulina (Humulina nombre comercial) para el tratamiento de la diabetes. Anterior ha esto se usaba la versin porcina que se extraa del pncreas del cerdo.

A. PRODUCCIN DE ANTIBITICOS: Los biofarmaceticos son medicinas creadas por ingeniera gentica y tpicamente son llamadas protenas teraputicas (enzimas, hormonas, pptidos, etc.). Estas protenas las produce naturalmente el cuerpo, pero problemas de ndole gentico (hereditarios o no hereditarios) causan desrdenes de salud. Lo que ocurre es un dficit, cuantitativo o funcional, de protenas con actividad biolgica. Las protenas son estructuralmente complejas y difciles de sintetizar por el hombre. La ingeniera gentica toma ventaja de que las clulas sintetizan stas molculas. Las protenas son frgiles y se degradan fcilmente en el estmago por las condiciones de pH. De aqu que esta primera generacin de productos basados en ADN-r se inyecta directamente al torrente sanguneo. Los cientficos estn desarrollando la prxima generacin de protenas teraputicas en la que la administracin es oral o nasal. El bioproceso completo para la manufactura comercial de protenas teraputicas consta de dos tecnologas opuestas a nivel de escala. La primera etapa es a nivel micro que es la ingeniera gentica cuyo objetivo es generar una colonia de clulas genticamente modificadas para que produzcan una protena en especfica. Estas colonias deben

caracterizarse y su estabilidad gentica tiene que verificarse. Las colonias para produccin industrial son crio-preservadas como banco de clulas en nitrgeno lquido a -180C. La otra etapa de manufactura es a nivel macro cuyo objetivo es cultivar las clulas hasta la etapa de produccin, luego aislar la protena cruda, purificarla y finalmente formularla. Los bioprocesos farmacuticos son complejos y caros en donde se manejan clulas y productos sensitivos. Los equipos y condiciones de operacin tienen que ser capaces de manejar clulas frgiles sin daarlas. Esto hace que los requisitos de buenas prcticas de manufactura sean ms alto que en la produccin de medicamentos por sntesis qumica o fermentacin microbiana. Dos referencias fundamentales son:1) ICH Q7A: GMP Guidance for APIs sobre todo la seccin 18; 2) la publicacin de ISPE, Baseline Pharmaceutical Engineering Guide, Volume 8: Biopharmaceutical Manfacturing Facilities. La primera referencia la adopt el FDA como gua. La segunda contiene buenas prcticas de ingeniera costo efectivas para equipos, sistemas y facilidades para aplicarlas durante diseo, construccin, puesta en servicio (commissioning) y cualificacin. B. PRODUCCIN DE ENZIMAS: Las enzimas microbianas que se producen en mayor cantidad son proteasas, utilizadas como aditivos en los detergentes para lavar ropa. Tambin los detergentes contienen amilasas, lipasas, reductasas y otras. Muchas de estas enzimas son producidas a partir de bacterias alcalfilas, especialmente de Bacillus licheniforme. Estas enzimas tienen pH ptimo entre 9 y 10, as permanecen activas al pH alcalino de las soluciones de los detergentes. Invertasa se produce a partir del cultivo de Saccharomyces cerevisiae, se utiliza para impedir la cristalizacin de azcares, pues convierte sacarosa en azcares ms solubles. Tambin se inyecta en el interior de los caramelos. Pectinasas, producidas por cepas de Aspergillus, se utiliza para licuar jugos de frutas. Renina, producida por cepas de Mucor se utiliza para coagular la leche en la produccin de quesos. Proteasas, para ablandar carnes de Bacillus y Aspergillus. Lactasa, de Kluyveromyces fragilis, para evitar la cristalizacin de helados. Enzimas microbianas y sus aplicaciones:
Enzima Amilasa Fuente Hongos Bacterias Hongos Bacterias Lipasa Celulasa Hongos bacterias Ap.indust. Pan Almidonad en fro ropa Ayuda digestiva Elimin. Manchas Degradar grasa Suaviz. y ablandad. Tej. Industria Panadera Almidn Farmacet. Detergentes Lechera, lavandera lavandera

Enzimas recombinantes: La ingeniera gentica est realizando progresos importantes en la produccin de enzimas recombinantes en microorganismos. Para garantizar la seguridad de su uso debe controlarse que los microorganismos de donde se extraen no sean patgenos, ni fabriquen compuestos txicos. Los ideales son aquellos que tienen una larga tradicin de uso en los alimentos como las levaduras de la industria cervecera y los fermentos lcticos. Bacillus, Aspergillus y Sacharomyces son tres especies de microorganismos bien conocidas, su manipulacin es segura, son de crecimiento rpido y producen grandes cantidades de enzimas, generalmente mediante fermentacin. El medio de cultivo ptimo para estos microorganismos es igualmente bien conocido, lo que reduce los costos de experimentacin.

En la industria alimentaria: Quimosina recombinante (rennina) para la elaboracin de quesos. Muy empleada en EE.UU y Gran Bretaa (90% de los quesos duros), sustityendo a la escasa quimosina de terneros y a la biotecnolgica tradicional obtenida de hongos (Rhizomucor, Endothia parasitica). La quimosina recombinante se obtiene en Kluyveromyces lactis y Aspergillus niger manipulados. Somatotropina bovina recombinante parece estimular la produccin de leche de vacas en los EE.UU. (aprobada por la FDA en 1994) En la industria de detergentes: Entre las proteasas, hay que destacar la subtilisina de Bacillus licheniformis y B. amyloquefaciens, que ayuda a eliminar manchas de sangre, comida, etc. Por ingeniera de protenas ha sido posible mejorar las ya de por s buenas cualidades de la subtilisina, creando variantes resistentes a la oxidacin por perxido de hidrgeno derivado de los perboratos, resistentes a pH alcalinos y termorresistentes. C. TRATAMIENTO DE AGUAS RESIDUALES: En la actualidad, el principal uso de la biotecnologa es descontaminar o paliar la contaminacin. Uno de los primeros usos fue la depuracin de aguas residuales, seguida de la depuracin de aire y efluentes gaseosos. Sin embargo, la biorehabilitacin est pasando a concentrarse cada vez ms en la depuracin de los suelos y los desechos slidos. La biotecnologa ya es, hoy en da, la tecnologa por excelencia para el tratamiento de las aguas residuales. El sistema para la depuracin del agua se divide en varias fases: Tratamiento primario: engloba una fase de pretratamiento de agua y una depuracin primaria en un decantador. Se retiran del agua grandes slidos (trapos, maderas, piezas de coche, escombros) mediante una filtracin por rejillas. Se separan del agua las grasas y se corrige el pH para permitir un posterior ataque de microorganismos a la materia disuelta en ella. En un decantador de grandes dimensiones se recogen los slidos, donde precipitan en el fondo, generando lodos que sern conducidos a un digestor. Tratamiento secundario: tambin llamado depuracin secundaria. Se elimina la materia orgnica por accin de microorganismos. Este tratamiento es aerobio y se comprueba su efectividad midiendo la cantidad de oxgeno consumido por los microorganismos en la oxidacin de la materia orgnica. A medida que disminuye la cantidad de materia orgnica del agua, tambin disminuye el consumo de oxgeno. El agua que sale de este tratamiento entra en el tanque de decantacin en el que, por sedimentacin, se depositan en el fondo materiales inorgnicos y orgnicos insolubles. Una vez que sale el agua de este tanque en el que permanece, al menos dos das, ha perdido el 95% de la materia orgnica que llevaba dispersa. Despus se vierte el agua al medio ambiente. Los restos depositados en el tanque de decantacin se trasladan a los digestores de cieno (lodo), donde las bacterias fermentadoras y bacterias metangenas, en un ambiente anaerobio, producen el denominado biogs, que puede utilizarse como fuente de energa. Los slidos depositados en el digestor de lodos se retiran peridicamente y, despus de eliminarse la mayor parte de los microorganismos, son utilizados como abono agrcola.

1.10 BIOTECNOLOGA Y BIOTICA: En 1971, V. R. Potter utiliz por primera vez la palabra biotica. A ella se refiri como el dilogo entre la cultura cientfica y la humanstica. En la biotica se unen los valores ticos de la Sociedad y los hechos biolgicos conseguidos por los cientficos. Aunque la ciencia es imparable, en 1974 se acord la interrupcin de los trabajos realizados con ADN recombinante. Fue la primera respuesta biotica. Con esta interrupcin los cientficos se plantearon hasta dnde podan o queran llegar en el estudio con el ADN. En 1975 se convoc la Conferencia de Asilomar. En ella se pusieron las bases para el trabajo de la manipulacin gentica. Da a da, la Ciencia y la Tecnologa avanzan y se adelantan a las normas jurdicas. Una vez conseguido un avance cientfico, su aplicacin es inmediata. La Sociedad, a travs de los medios de informacin, examina ese avance y lo critica, lo apoya o lo rechaza. Sin embargo, en Biotecnologa, se puede (o se debe) actuar as? Al crear un organismo transgnico se introduce un gen que no ha coevolucionado con el resto del genoma y se desconocen las consecuencias que esto puede derivar. 2 INGENIERA GENTICA: 2.1 DEFINICIN DE INGENIERA GENTICA: La Ingeniera Gentica (en adelante IG) es una rama de la gentica que se concentra en el estudio del ADN, pero con el fin su manipulacin. En otras palabras, es la manipulacin gentica de organismos con un propsito predeterminado. En este punto se profundizar el conocimiento sobre los mtodos de manipulacin gnica. El fin con el cual se realizan dichas manipulaciones se tratar ms adelante, cuando se analicen los alcances de esta ciencia. 2.2 HISTORIA: 1.000 a.C.: Los babilonios celebran con ritos religiosos la polinizacin de las palmeras. 323 a.C.: Aristteles especula sobre la naturaleza de la reproduccin y la herencia. 100-300: se escriben en la India textos metafricos sobre la naturaleza de la reproduccin humana. 1676: se confirma la reproduccin sexual en las plantas. 1677: se contempla el esperma animal a travs del microscopio. 1838: se descubre que todos los organismos vivos estn compuestos por clulas. 1859: Darwin hace pblica su teora sobre la evolucin de las especies. 1866: Mendel describe en los guisantes las unidades fundamentales de la herencia (que posteriormente recibirn el nombre de genes). 1871: se asla el ADN en el ncleo de una clula. 1883: Francis Galton acua el trmino eugenesia. 1887: se descubre que las clulas reproductivas consituyen un linaje continuo, diferente de las otras clulas del cuerpo. 1908: se establecen modelos matemticos de las frecuencias gnicas en poblaciones mendelianas. 1909: las unidades fundamentales de la herencia biolgica reciben el nombre de genes. 1924: la Ley de Inmigracin en EE.UU. limita la entrada al pas sobre la base del origen racial o tnico. 1925: se descubre que la actividad del gen est relacionada con su posicin en el cromosoma. 1927: se descubre que los rayos X causan mutaciones genticas. 1931: treinta estados de los EE.UU. tienen leyes de esterilizacin obligatoria. 1933: la alemania nazi esteriliza a 56.244 "defectuosos hereditarios". 1933-45: el holocausto nazi extermina a seis millones de judos por medio de su poltica eugensica. 1943: el ADN es identificado como la molcula gentica. 1940-50: se descubre que cada gen codifica una nica protena. 1950: Se logra congelar con xito semen de toro a 79 grados bajo cero para su transporte e inseminacin de vacas. 1952: Thomas King y Robert Briggs clonan ranas a partir de clulas indiferenciadas. 1953: se propone la estructura en doble hlice del ADN. 1956: son identificados 23 pares de cromosomas en las clulas del cuerpo humano. 1962: John Gurdon clona tambin ranas, pero a partir de clulas de renacuajos adultos. 1966: se descifra el cdigo gentico completo del ADN. 1972: se crea la primera molcula de ADN recombinante en el laboratorio.

1973: tienen lugar los primeros experimentos de ingeniera gentica en los que genes de una especie se

introducen en organismos de otra especie y funcionan correctamente.


1973: Stanley Cohen y Herbert Boyer elaboran la tcnica de clonacin de genes. 1975: la conferencia de Asilomar evala los riesgos biolgicos de las tecnologas de ADN

recombinante, y aprueba una moratoria de los experimentos con estas tecnologas. 1975: se obtienen por primera vez los hibridomas que producen anticuerpos monoclonales. 1976: se funda en EE.UU. Genentech, la primera empresa de ingeniera gentica. 1977: mediante tcnicas de ingeniera gentica se fabrica con xito una hormona humana en una bacteria. 1977: los cientficos desarrollan las primeras tcnicas para secuenciar con rapidez los mensajes qumicos de las molculas del ADN. 1978: se clona el gen de la insulina humana. 1978: Nace Baby Louise, el primer beb concebido mediante fecundacin in vitro. 1980: el Tribunal Supremo de los EE.UU. dictamina que se pueden patentar los microbios obtenidos mediante ingeniera gentica. 1981: primer diagnstico prenatal de una enfermedad humana por medio del anlisis del ADN. 1982: se crea el primer ratn transgnico (el "superratn"), insertando el gen de la hormona del crecimiento de la rata en vulos de ratona fecundados. Cientficos de la Universidad de Seattle, San Diego y California, obtienen un ratn transgnico portador del gen de la hormona del crecimiento de la rata. 1982: se produce insulina utilizando tcnicas de ADN recombinante. 1983: se inventa la tcnica PCR, que permite replicar (copiar) genes especficos con gran rapidez. 1984: creacin de las primeras plantas transgnicas. 1984: Primer nacimiento de un beb a partir de un embrin congelado. 1985: se inicia el empleo de interferones en el tratamiento de enfermedades vricas. 1985: se utiliza por primera vez la "huella gentica" en una investigacin judicial en Gran Bretaa. 1985: El laboratorio de Ralph Brinster obtiene cerdos transgnicos que producen la hormona humana del crecimiento. 1986: se autorizan las pruebas clnicas de la vacuna contra la hepatitis B obtenida mediante ingeniera gentica. 1987: propuesta comercial para establecer la secuencia completa del genoma humano (proyecto Genoma), compuesto aproximadamente por 100.000 genes. Primera cepa de ratones portadores de genes humanos. 1987: comercializacin del primer anticuerpo monoclonal de uso teraputico. 1987: PPL Therapeutic consigue una oveja transgnica que produce en la leche la protena humana alfa1 antitripsina. 1988: primera patente de un organismo producido mediante ingeniera gentica. 1989: comercializacin de las primeras mquinas automticas de secuenciacin del ADN. 1990: primer tratamiento con xito mediante terapia gnica en nios con trastornos inmunolgicos ("nios burbuja"). Se ponen en marcha numerosos protocolos experimentales de terapia gnica para intentar curar enfermedades cancerosas y metablicas. 1991: Steve Rosenberg realiza la primera terapia gnica en pacientes con melanoma maligno. 1992: Primera inyecin intracitoplasmtica nuclear de espermatozoides. 1994: se comercializa en California el primer vegetal modificado genticamente (un tomate) y se autoriza en Holanda la reproduccin del primer toro transgnico. 1995: se completan las primeras secuencias completas de genomas de organismos: se trata de las bacterias Hemophilus influenzae y Mycoplasma genitalium. 1995: Ian Wilmut y Keith Campbell obtienen a Megan y Morag, dos corderos engendrados por transferencia nuclear de clulas embrionarias. 1995: Nace el primer beb concebido a partir de un ovocito y una espermtida. 1996: por primera vez se completa la secuencia del genoma de un organismo eucaritico, la levadura cervecera "Saccharomyces cerevisiae". Por otra parte, el catlogo de genes humanos que Victor McKusick y sus colaboradores de la Universidad John Hopkins actualizan cada semana contiene ya ms de cinco mil genes conocidos. El proyecto Genoma, coordinado por HUGO (Human Genome Organization), avanza a buen ritmo. 1996: Primer xenotrasplante de un corazn de cerdo humanizado a un babuino.

1997: Clonacin del primer mamfero, una oveja llamada "Dolly". Ian Wilmut presenta a Dolly. 1997: Don Wolf consigue los primeros clones de macacos a aprtir de clulas de diferentes embriones. 1998: El Doctor Richard Seed anuncia su intencin de clonar bebs humanos. 1998: Nacen George y Charley, una pareja de terneros engendrados a partir de ncleos de clulas

embrionarias. 2001: Gran Bretaa permite la clonacin de embriones humanos menores de 14 das. 2001: Se conoce de forma precisa la secuencia completa y ensamblada del genoma humano. 2.3 PROCEDIMIENTO PARA PODER ALTERAR LOS GENES: Ahora que est consiente de que su carga gentica es defectuosa, que lo hace proclive a la estupidez o a cometer crmenes o simplemente es de inferior calidad que la de sus dolos, usted mismo puede alterar sus propios genes, lo primero que hay que hacer es conseguir un microscopio, o en su defecto una lupa de buen tamao, con cuidado de no poner el lente en punto convergente con la luz solar pues puede provocar destruccin celular, ahora tome una clula cualquiera de su cuerpo, cuando lo haya hecho y una vez localizado el cromosoma que quiera alterar proceda a diseccionar y a agregar las combinaciones de su agrado. Tenga cuidado de que las combinaciones sean de la siguiente forma E, P, R, T o E, P, T, R pues si es E, P, R, T o E, R, P T dejars de sintetizar protenas y la palmars entre un bao de dolor y sufrimiento. Las letras suelen venir impresas en el ADN pero suelen confundirse la P con la R y la R con la E, la T se confunde con todas.

Ahora, hecho todo lo anterior, introduzca la cadena de ADN a donde la encontr, tratando de que por su forma resortfera no salga disparada a su ojo, cuando el ncleo est cerrado suture la clula y djela reposar una semana, repita el procedimiento 300 millones de veces (una vez por cada clula de su cuerpo) cuidando de que la combinacin sea igual en todas las clulas. Puede librar este ltimo paso pagando 15 leros para que en un laboratorio usen la tcnica ADN polimerasa termoestable copy paste. Puede usar esta tcnica para presumir a sus amigos en fiestas y reuniones, para distraerse en clase modificando el genotipo de un lpiz para hacer un raptor asesino que se coma a sus compaeros de clase (no olvide activar el gen de restriccin control mental) o simplemente cuando se haya cansado de la soledad y quiera hacer algo productivo con su simiente. EJEMPLO:

2.3.1 ENZIMAS DE RESTRICCIN: Como ya se dijo, la IG consiste la manipulacin del ADN. En este proceso son muy importantes las llamadas enzimas de restriccin, producidas por varias bacterias. Estas enzimas tienen la capacidad de reconocer una secuencia determinada de nucletidos y extraerla del resto de la cadena. Esta secuencia, que se denomina Restriction Fragment Lenght Polymophism o RLPM, puede volver a colocarse con la ayuda de otra clase de enzimas, las ligasas. Anlogamente, la enzima de restriccin se convierte en una "tijera de ADN", y la ligasa en el "pegamento". Por lo tanto, es posible quitar un gen de la cadena principal y en su lugar colocar otro. 2.3.2 VECTORES: En el proceso de manipulacin tambin son importantes los vectores: partes de ADN que se pueden autorreplicar con independencia del ADN de la clula husped donde crecen. Estos vectores permiten obtener mltiples copias de un trozo especfico de ADN, lo que proporciona una gran cantidad de material fiable con el que trabajar. El proceso de transformacin de una porcin de ADN en un vector se denomina clonacin. Pero el concepto de clonacin que "circula" y est en boca de todos es ms amplio: se trata de "fabricar", por medios naturales o artificiales, individuos genticamente idnticos. 2.3.3 ADN POLIMERASA: Otro mtodo para la produccin de rplicas de ADN descubierto recientemente es el de la utilizacin de la enzima polimerasa. ste mtodo, que consiste en una verdadera reaccin en cadena, es ms rpido, fcil de realizar y econmico que la tcnica de vectores. 2.4 USOS DE LA TERAPIA GNICA: "En marzo de 1989, los investigadores norteamericanos Steve Rosenber y Michael Blease, del Instituto Nacional del Cncer, y French Anderson, del Instituto Nacional del Corazn, Pulmn y Sangre, anunciaron su intencin de llevar a cabo un intercambio de genes entre seres humanos, concretamente en enfermos terminales de cncer. Los genes trasplantados no haban sido diseados para tratar a los pacientes, sino para que actuaran como marcadores de las clulas que les fueron inyectados, unos linfocitos asesinos llamados infiltradores de tumores, encargados de aniquilar las clulas cancergenas. Las vctimas de cncer murieron, pero la transferencia haba sido un xito". Este fue uno de los primeros intentos de utilizar las tcnicas de IG con fines teraputicos. Hoy el desafo de los cientficos es, mediante el conocimiento del Genoma Humano, localizar "genes defectuosos", informacin gentica que provoque enfermedades, y cambiarlos por otros sin tales defectos. La ventaja quiz ms importante de este mtodo es que se podran identificar en una persona enfermedades potenciales que an no se hayan manifestado, para o bien reemplazar el gen defectuoso, o iniciar un tratamiento preventivo para atenuar los efectos de la enfermedad. Por ejemplo, se le podra descubrir a una persona totalmente sana un gen que lo pondra en un riesgo de disfunciones cardacas severas. Si a esa persona se le iniciara un tratamiento preventivo, habra posibilidades de que la enfermedad no llegue nunca. A travs de una tcnica de sondas genticas, se puede rastrear la cadena de ADN en busca de genes defectuosos, responsables de enfermedades genticas graves. Si bien la informacin del Genoma Humano fue recientemente descubierta, ya se han localizado los "locus" de varias enfermedades de origen gentico. He aqu algunas de ellas: Hemofilia Alcoholismo Corea de Huntigton Anemia Falciforme Fibrosis qustica Hipotiroidismo Congnito Retraso Mental Miopata de Duchenne Manacodepresin Esquizofrenia Sndrome de Lesch Nyhan Deficencia de ADA Hidrocefalia Microcefalia Labio Leporino Ano Imperfecto o Imperforacin Espina Bfida. Pero los alcances de la terapia gnica no slo se limitan a enfermedades genticas, sino tambin a algunas de origen externo al organismo: virales, bacterianas, protozoicas, etc. En febrero de este ao, por ejemplo, se anunci que un grupo de cientficos estadounidenses emple tcnicas de terapia gnica contra el virus del SIDA. Sintetizaron un gen capaz de detener la multiplicacin del virus responsable de la inmunodeficiencia, y lo insertaron en clulas humanas infectadas. El resultado fue exitoso: el virus detuvo su propagacin e incluso aument la longevidad de ciertas clulas de defensa, las CD4.

Otra tcnica peculiar inventada recientemente es la del xenotransplante. Consiste en inocular genes humanos en cerdos para que crezcan con sus rganos compatibles con los humanos, a fin de utilizarlos para transplantes. Esto nos demuestra que la Ingeniera Gentica aplicada a la medicina podra significar el futuro reemplazo de las tcnicas teraputicas actuales por otras ms sofisticadas y con mejores resultados. Sin embargo, la complejidad de estos mtodos hace que sea todava inalcanzable, tanto por causas cientficas como econmicas.

ENFERMEDADES GENTICAS: Las enfermedades que hasta ahora parecan incurables y que se inventaron pretende erradicar con la aplicacin de la Ingeniera gentica son: Alteracin
Acn Muerte Fealdad Sndrome de Down Decapitacin Hemofilia Paquismo

Mutacin
maligna Muy buena risible degenerativa infecciosa ruidosa pegajosa

Sndrome del Cubculo Crnico crnica

2.6 APLICACIONES DE LA INGENIERA GENTICA: La Ingeniera gentica tiene numerosas aplicaciones en campos muy diversos, que van desde la medicina hasta la industria. Sin embargo, es posible hacer una clasificacin bastante simple bajo la cual se contemplan todos los usos existentes de estas tcnicas de manipulacin gentica: aquellos que comprenden la terapia gnica, y aquellos que se encuentran bajo el ala de la biotecnologa. A continuacin se detallan las aplicaciones ms comunes. 2.6.1 INDUSTRIA FARMACUTICA: Obtencin de protenas de mamferos: Una serie de hormonas como la insulina, la hormona del crecimiento, factores de coagulacin, etc. tienen un inters mdico y comercial muy grande. Antes, la obtencin

de estas protenas se realizaba mediante su extraccin directa a partir de tejidos o fluidos corporales. En la actualidad, gracias a la tecnologa del ADN recombinante, se clonan los genes de ciertas protenas humanas en microorganismos adecuados para su fabricacin comercial. Un ejemplo tpico es la produccin de insulina que se obtiene a partir de la levadura Sacharomces cerevisae, en la cual se clona el gen de la insulina humana. Obtencin de vacunas recombinantes: El sistema tradicional de obtencin de vacunas a partir de microorganismos patgenos inactivos, puede comportar un riesgo potencial. Muchas vacunas, como la de la hepatitis B, se obtienen actualmente por IG. Como la mayora de los factores antignicos son protenas lo que se hace es clonar el gen de la protena correspondiente.

2.6.2 AGRICULTURA: Mediante la ingeniera gentica han podido modificarse las caractersticas de gran cantidad de plantas para hacerlas ms tiles al hombre, son las llamadas plantas transgnicas. Las primeras plantas obtenidas mediante estas tcnicas fueron un tipo de tomates, en los que sus frutos tardan en madurar algunas semanas despus de haber sido cosechados. Recordando que la clula vegetal posee una rgida pared celular, lo primero que hay que hacer es obtener protoplastos. Vamos a ver las tcnicas de modificacin gentica en cultivos celulares. Estas clulas pueden someterse a tratamientos que modifiquen su patrimonio gentico. Las tcnicas se clasifican en directas e indirectas. Entre las tcnicas indirectas cabe destacar la transformacin de clulas mediada por Agrobacterium tumefaciens. Esta bacteria puede considerarse como el primer ingeniero gentico, por su particular mecanismo de accin: es capaz de modificar genticamente la planta hospedadora, de forma que permite su reproduccin. Esta bacteria es una autntica provocadora de un cncer en la planta en la que se hospeda.

Las tcnicas directas comprenden la electroporacin, microinyeccin, liposomas y otros mtodos qumicos. Entre los principales caracteres que se han transferido a vegetales o se han ensayado en su transfeccin, merecen destacarse: Resistencia a herbicidas, insectos y enfermedades microbianas. Ya se dispone de semillas de algodn, que son insensibles a herbicidas. Para la resistencia a los insectos se utilizan cepas de Bacillus thuringiensis que producen una toxina (toxina Bt) daina para las larvas de muchos insectos, de modo que no pueden desarrollarse sobre las plantas transgnicas con este gen. Respecto a los virus se ha demostrado que las plantas transgnicas con el gen de la protena de la cpsida de un virus, son resistentes a la invasin de dicho virus. Incremento del rendimiento fotosinttico. Para ello se transfieren los genes de la ruta fotosinttica de plantas C4 que es ms eficiente. Mejora en la calidad de los productos agrcolas. Tal es el caso de la colza y la soja transgnicas que producen aceites modificados, que no contienen los caracteres indeseables de las plantas comunes. Sntesis de productos de inters comercial. Existen ya plantas transgnicas que producen anticuerpos animales, interfern, e incluso elementos de un polister destinado a la fabricacin de plsticos biodegradables Asimilacin de nitrgeno atmosfrico. Aunque no hay resultados, se ensaya la transfeccin del gen nif responsable de la nitrogenasa, existente en microorganismos fijadores de nitrgeno, y que permitira a las plantas que hospedasen dicho gen, crecer sin necesidad de nitratos o abonos nitrogenados, aumentando la sntesis de protenas de modo espectacular. 2.7 EXPERIMENTO DE INGENIERA GENTICA: Vamos a ilustrar el concepto de la ingeniera gentica con el caso bastante fcil de lograr bacterias que hospeden nuevas combinaciones de ADN: Partimos de ADN que queremos aislar y estudiar: vamos a llamarlo ADN pasajero. Por otro lado, necesitamos un vehculo gentico para transportar y replicar ese ADN: lo llamamos vector. Los vectores son igualmente molculas de ADN con capacidad de replicarse por s mismos o de insertarse una vez que se introducen en el organismo adecuado. He aqu una lista de lo que debe poseer idealmente un vector gentico: - Capacidad de replicacin autnoma (es decir, se trata de un replicn), o de integracin en el genoma del hospedero.

Marcadores seleccionables: se trata de genes que confieren algn rasgo que se puede rastrear o seleccionar fcilmente en laboratorio. Unos de los ms usados son los genes que confieren resistencia a algn antibitico. - Dianas nicas para al menos una enzima de restriccin. En los modernos vectores se ha introducido un trecho de ADN, denominado polilinker, provisto de varias dianas nicas para diferentes enzimas de restriccin, de modo que en cada experimento se pueda elegir la que ms convenga. Finalmente, contamos con el organismo anfitrin o husped. En los primeros tiempos de la I.G. se manipulaban casi exclusivamente bacterias, pero hoy es posible modificar animales y plantas.

As, pues, el "retrato robot" de un experimento de I.G. podra ser como sigue: 1. Se corta por separado el ADN del organismo a estudiar y el ADN del vector con la misma restrictasa, de modo que se generan extremos compatibles entre s (mutuamente cohesivos). 2. Se juntan ambos ADNs y se les aade ADN-ligasa: de esta forma, las uniones entre ADN pasajero y ADN del vector se sellan covalentemente, generndose molculas hbridas (quimricas o recombinantes). 3. Ahora hay que introducir las molculas generadas en el organismos husped. En el caso de bacterias se recurre a una tcnica sencilla denominada transformacin, que permite la entrada del ADN a travs de las envueltas del microorganismo. 4. Finalmente, hay que localizar las bacterias que han captado y han establecido establemente las molculas hbridas. A menudo este es el paso ms laborioso, pero el hecho de que el vector posea uno o varios genes de resistencia favorece al menos la eliminacin de las bacterias que no han recibido ADN del vector: basta aadir al medio de cultivo el antibitico para el que el vector confiere resistencia. Para localizar los transformantes recombinantes, muchos vectores incorporar un gen marcador que produce alguna sustancia coloreada. Si insertamos el gen a aislar dentro de ese marcador, lo rompemos, por lo que las colonias bacterianas no producirn la sustancia coloreada, sino que permanecen incoloras o blancas. 5. El resultado del experimento es la obtencin de al menos una colonia (clon) de bacterias que portan la combinacin buscada de vector con el inserto de ADN pasajero. Se dice entonces que hemos clonado (=aislado) dicho ADN. 6. El primer experimento de este tipo lo realizaron en 1973 Stanley Cohen y Herbert Boyer en la Universidad de California. Se vio que era factible hacer toda clase de experimentos en los que se recombina ADN de organismos totalmente diferentes (bacterias, plantas, animales). 2.7.1 CARACTERIZACIN DEL ADN CLONADO: Una vez que se ha clonado un gen o trozo de ADN, hay que caracterizarlo lo ms detalladamente posible: Lo primero que se suele hacer es realizar un "mapa fsico". Para ello, muestras independientes del ADN clonado son sometidas a distintas enzimas o combinaciones de enzimas de restriccin, y los fragmentos resultantes se separan por tamaos usando la electroforesis en gel de agarosa con la sustancia fluorescente bromuro de etidio, revelndose en forma de bandas visibles bajo luz UV. A partir de los tamaos de las bandas generadas por las distintas enzimas y combinaciones de enzimas, es posible ensamblar el rompecabezas del fragmento, determinando un mapa donde se van colocando las localizaciones relativas de las distintas dianas de las restrictasas. A partir de la subclonacin de fragmentos del trozo original, es posible, en algunos casos, ir adjudicando funciones a cada subfragmento, lo cual va generando en paralelo un "mapa gentico". El ltimo nivel (el ms detallado) de caracterizacin fsica es la misma secuenciacin del ADN.

2.7.2 OTROS MTODOS BSICOS: Sntesis qumica de ADN Actualmente existen mquinas programables para sintetizar rpidamente secuencias determinadas de ms de 100 nucletidos. Se usan a menudo para generar sondas moleculares en la bsqueda y caracterizacin de determinados segmentos de ADN, y sobre todo para producir los cebadores usados en la reaccin en cadena de la polimerasa.

Reaccin en cadena de la polimerasa (PCR): No cabe ninguna duda de que la tcnica ms revolucionaria de los ltimos 15 aos ha sido la reaccin en cadena de la polimerasa (PCR), que ha dado nuevas alas a la propia Ingeniera gentica y a toda la biologa molecular. Fue inventada por Kary Mullis a mediados de los aos 80. Como ya sabemos, muchas de las tcnicas clsicas de la Ingeniera gentica estaban encaminadas a resolver el complejo problema de cmo clonar o localizar un gen o un segmento de ADN concreto "perdido" en la inmensidad del genoma. Sin embargo, esas tcnicas son a menudo largas y tediosas, y no es raro que no den resultados. La PCR ha venido a cambiar el panorama, ya que permite en principio producir in vitro grandes cantidades de una secuencia de ADN concreta sin recurrir a la clonacin en un organismo husped. Esencialmente la tcnica permite la amplificacin selectiva de cualquier trecho de ADN, supuesto que se conocen las secuencias que lo flanquean. Como alguien ha dicho, "es una tcnica que consigue encontrar la aguja en el pajar, al tiempo que produce un pajar de agujas por amplificacin selectiva". 2.8 CLONACIN. De todos los problemas bioticos planteados por la ingeniera gentica hay uno que se ha convertido ltimamente en el centro de debate pblico: la clonacin. La clonacin es una forma de reproduccin no sexual, que se da naturalmente en muchas plantas junto a la reproduccin sexual y que, a diferencia de esta ltima, produce copias genticas exactas de la planta originaria. Los ejemplos mas conocidos son las patatas y las fresas. La naturaleza produce de modo natural clones, sin intermediacin humana de ningn tipo, como es el caso de los gemelos monocigotos que comparten una informacin gentica idntica debido a una divisin espontnea del zigoto. Clonar significa crear un ser vivo idntico a otro, a partir de una clula del individuo original. Las dos principales tcnicas de clonacin son: Por separacin de embriones. Por transferencia nuclear, que fue el mtodo utilizado para clonar a la Oveja Dolly. 2.8.1 USOS Y UTILIDADES DE LA CLONACIN En el mbito de la medicina y la investigacin mdica: Mejorar el conocimiento gentico y psicolgico. Disponer de modelos de enfermedades humanas. Producir a bajo coste protenas para su posible uso teraputico. Suministrar rganos o tejidos para trasplantes. En la investigacin agrcola y agrnoma: Permite mejorar la seleccin de animales que posean alguna cualidad innata o adquirida de inters (resistencia, productividad, etc). 2.8. 2 CLONACIN ANIMAL: En 1997, el Instituto Roslin, en Escocia, clon por primera vez (despus de 277 intentos) en la historia a un mamfero a partir de una *clula diferenciada de otro. Dolly, es el primer mamfero de la historia que se ha clonado de un adulto.

Antes de Dolly, cientficos de diversas partes del mundo haban logrado clonar sapos, monos, ovejas y vacas. Pero siempre haban utilizado clulas de embriones, las cuales tienen la capacidad de dividirse y dar origen a un nuevo ser. En la dcada de los 70 se descubri, gracias a un experimento con sapos, que era posible clonar individuos completos a partir de clulas diferenciadas. * Clula diferenciada: aquellas que ya tienen determinada su funcin dentro del organismo: clulas de sangre, de huesos, del cerebro. 2.8.3 CMO FUE EL PROCESO DE CLONACIN DE LA OVEJA DOLLY: De la ubre de la madre de Dolly (la llamada original en el dibujo), los cientficos sacaron una clula, que contiene todo el material gentico (ADN) de la oveja adulta. Despus, la otra oveja, a la que llamaremos oveja X, le extrajeron un vulo, el cual servira de clula receptora. Al vulo se le sac el ncleo, eliminando as el material gentico de la oveja donante. Se extrajo el ncleo de la clula mamaria y, mediante impulsos elctricos, se fusion al vulo sin ncleo de la oveja donante. Con los mismos impulsos se activ al vulo para que comenzara su divisin, tal y como lo hacen los vulos fertilizados en un proceso natural de reproduccin. Al sexto da, ya se habr formado un embrin, el cual fue implantado en el tero de una tercera oveja, la madre sustituta, que tras un periodo normal de gestacin, dio a luz a Dolly: una oveja exactamente igual a su madre gentica. 2.8.4 GENOMA HUMANO. Desde el siglo pasado, investigadores de todo el mundo no han cejado en su empeo de descifrar el lenguaje de la vida, cmo unas mismas caractersticas pasan de una generacin a la siguiente. Para entender este lenguaje es esencial comprender la estructura de un organismo vivo y cul es su estructura. Todos los seres vivos estamos compuestos por clulas. En el ncleo o centro de cada clula, hay muchas parejas de cromosomas, que desplegados muestran el ADN, que est formado por largas cadenas de cuatro bases, Adenina, Citosina, Timina y Guanina, llamadas bases nucletidas, que compartimos todos los seres vivos. Estas bases se unen entre s formando cadenas, de las cuales, algunos trozos se denominan genes o segmentos con la suficiente informacin para que las clulas produzcan protenas. El ADN contiene toda la informacin necesaria para que las clulas produzcan cada protena de un ser vivo y por lo tanto, es el responsable de las caractersticas del ser. El ADN transmite esta informacin hereditaria de una generacin a la siguiente. El negocio de los genes. Empresas farmacuticas de la categora y la importancia como Pzifer o American Home Products, podran estar pagando hasta 2.700 millones de pesetas por los archivos genticos de Celera, que ha de recuperar todo lo invertido en este descubrimiento, y no piensa dejar pasar la oportunidad de llenarse los bolsillos.

CONCLUSIONES La ingeniera gentica es el campo de la gentica y las artes oscuras que trata de evitar que los hijos sean tan feos como sus padres. Esto se logra mediante la alteracin del ADN, formado por cuatro pastas primordiales E, P, R, T (Espaghetti, Pastrami, Rabioli y Tallarn), de donde toda la vida proviene. Se toma un trozo de ADN y se hace un copy paste en un trozo de ADN de otra especie. Esta disciplina tiene como nica y ms importante finalidad la mejora de las capacidades y vicios cualidades humanas. La creacin de personas menos enfermizas y estpidas, que vivan ms, resuelvan problemas, se comuniquen con los muertos, nazcan con su propio dinero, entre otras cosas. En realidad, existe una grave preocupacin cientfica por los efectos adversos potenciales de la ingeniera gentica. Esta preocupacin por los efectos adversos ha sido ya el tema central de docenas de reuniones de trabajo auspiciadas por las agencias gubernamentales y asociaciones cientficas, y de artculos publicados en revistas por cientos de cientficos. La ingeniera gentica tiene un gran potencial. Por ejemplo, el gen para la insulina, que por lo general slo se encuentra en los animales superiores, se puede ahora introducir en clulas bacterianas mediante un plsmido o vector. Despus la bacteria puede reproducirse en grandes cantidades constituyendo una fuente abundante de la llamada insulina recombinante a un precio relativamente bajo. La produccin de insulina recombinante no depende del, en ocasiones, variable suministro de tejido pancretico animal. Otros usos de la ingeniera gentica son el aumento de la resistencia de los cultivos a enfermedades, la produccin de compuestos farmacuticos en la leche de los animales, la elaboracin de vacunas, y la alteracin de las caractersticas del ganado.

BIBLIOGRAFA Day PR. (1996) Genetic modification of proteins in food. Crit. Rev. Food Sci. Nutr. 36S: S49S67. Gachet E, Martin GG, Vigneau F, Meyer G. (1998) Detection of genetically modifies organisms (GMOs) by PCR: a brief review of metodologies available. Trends Food Science Technology 9: 380-388. Hoover, D. et al. (2000) Human food safety evaluation ofr DNA biotechnology-derived foods Food Technol., 54 (9) 53-61 Institute of Food Technology (2000) Genetically modified organisms (GMOs). Food Technol., 54 (1) 42-45 Institute of Food Technology (2000) IFT expert report on biotechnology and foods. Introduction. Food Technol., 54 (8) 124-136 Lehrer SB, Horner WE, Reese G. (1996) Why are some proteins allergenic? Implications for biotechology. Crit Rev Food Sci Nutr 36: 553-564. MARTN MUNICIO, ., Tradicin intelectual de la biotecnologa en ABC, enero de 1988. MUOZ, E., Nueva biotecnologa y sector agropecuario. El reto de las racionalidades contrapuestas, IESA, 1997. La biotecnologa ante su espejo. Sociedad, industria, desarrollo y medio ambiente, IESA, 1998.