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Captulo 1
Introduo
Podemos resumir as funes importantes que os rins desempenham em nosso organismo como sendo duas, a saber: (i) a excreo dos produtos finais do metabolismo, (ii) o controle das concentraes da maioria dos constituintes da parte lquida do organismo [1]. Para desempenhar essas funes no organismo os rins assumem atribuies que podem ser resumidas abaixo: 1. Regulao do balano de gua e eletrlitos; 2. Excreo das escrias metablicas; 3. Regulao da presso arterial; 4. Regulao do equilbrio cido-base; 5. Regulao da osmolaridade dos lquidos corporais; 6. Regulao de eletrlitos; 7. Secreo de hormnios; 8. Gliconeognese. Nos seres humanos, os dois rins situam-se junto parede posterior do abdome. Cada rim de um humano adulto pesa cerca de 150g e tem aproximadamente o tamanho de um punho fechado. Os rins tm cor vermelho-escuro, forma de um gro de feijo enorme e desempenham papel de rgos excretores. Possuem uma cpsula fibrosa, que protege o crtex (cor amarelada) mais externo, e a medula (avermelhada) mais interna. O rim se liga bexiga atravs de um ducto denominado ureter. Ele formado de tecido conjuntivo, que sustenta e d forma ao rgo, e por milhares ou milhes de unidades filtradoras, os nfrons, localizados na regio renal (Fig. 1.1).

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Figura 1.1 - O rim humano

O clculo renal ou pedra renal um material slido policristalino que se forma no rim, proveniente de substncias que so filtradas na urina. Esses clculos podem ser pequenos como gros de areia ou grandes como bolas de golfe, lisos ou cheio de pontas, e usualmente apresentam colorao amarela ou marrom. Litase urinria, urolitase ou nefrolitase so denominaes que se atribuem a formao de policristais (pedras) nas vias urinrias. A urolitase uma doena conhecida h vrios sculos. Os policristais (clculos) em bexiga, que foram descobertos em mmias do Egito [2] constam de registros em papiros babilnicos e egpcios [3]. Dentre as inmeras dores que acometem o ser humano, as causadas por pedras localizadas no sistema urinrio ocupam o primeiro lugar em termos de intensidade.

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A litase do trato urinrio (tambm chamada de clculo ou pedra no rim) um problema extremamente comum na nossa populao, acreditando-se que 12% dos homens e 5% das mulheres podero formar clculo urinrio no decorrer da vida [4]. A etiologia da urolitase revela que 70-90% dos clculos renais so oriundos de causas metablicas e potencialmente tratveis nos indivduos adultos. Alguns fatores esto relacionados a litase renal, sendo que podemos destacar os seguintes: a herana gentica, o sedentarismo, clima e/ou exposio a temperaturas elevadas, hbitos alimentares, entre outros. Basicamente, a origem dos componentes cristalinos se classifica em dois grandes grupos: fisiolgicos, que so aqueles compostos patolgicos ou no que so eliminados na urina e fazem parte da bioqumica humana, e no fisiolgicos, que so aqueles que no so originrios de reaes bioqumicas do organismo [5].

PROCEDNCIA

FISIOLGICA

NO FISIOLGICA

PRESENA PERMANENTE

PRESENA ANORMAL

PRESENA INDUZIDA

PRESENA SECUNDRIA

- OXALATOS - CIDO RICO - URATOS - FOSFATOS

- CISTINA - TIROSINA - LEUCINA - XANTINA - DIHIDROXIADENINA

MEDICAMENTOS

- FOSFATO AMNICOMAGNSICO -URATO AMNICO

Figura 1.2 Origem das substncias de possvel cristalizao [5].

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Durante os ltimos 30 anos foi possvel iniciar o entendimento mais detalhado das causas e da fsico-qumica da litognese. Porm, foram nestes ltimos 15 anos que ocorreu um significativo avano tecnolgico, tais como: mtodos mais precisos de diagnstico metablico, incorporao de novos mtodos prtica mdica como a litotripsia percutnea e a extracorprea (LECO) [6]. Abaixo descrevemos um esquema de como a Litotripsia Extracorprea funciona.

Figura 1.2 - Esquema da LECO [7]. Como se pode ver, uma onda sonora percorre o tecido humano (impedncia similar a gua) atingindo a pedra. Essa onda sofre mltiplas reflexes na pedra causando a sua fratura e a pulverizao

Diversos mtodos so utilizados para a anlise do tipo de cristais que formam os clculos. Entre esses os mais eficientes so a cristalografia por difrao de raios X, a espectroscopia por infravermelho e a anlise qumica [6, 8, 9]. A anlise qumica do clculo o mtodo mais freqentemente utilizado por ser acessvel e barato. A sua principal desvantagem no fornecer o tipo de cristal, mas apenas o componente qumico que forma o clculo [9]. A espectroscopia por infravermelho baseia-se na exposio do material do clculo radiao infravermelha, fornecendo a composio do clculo. Este mtodo possui uma efetividade em 60% das amostras analisadas [9].

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A cristalografia por difrao de raios X o mtodo mais sensvel e alcana efetividade em 80% das amostras avaliadas [9]. Nesse tipo de anlise, o cristal exposto a um feixe de raios X. Dependendo da composio atmica e da orientao espacial do cristal, haver reflexo do feixe de raios X, que registrada sob a forma grfica. A comparao do grfico encontrado com o padro previamente estabelecido para cada tipo de cristal informa a composio do clculo. O arranjo espacial do cristal nico, de modo que a identificao do grfico especfica [6]. Esse mtodo permite caracterizar at mesmo pequenas quantidades de cristais. Embora bastante eficiente, a cristalografia por raios X utiliza aparelhagem cara e requer pessoal tcnico treinado, dificultando sua utilizao na prtica clnica [10]. Este trabalho a continuao de um estudo em desenvolvimento pelo grupo de Biocristalografia (Fsica Mdica) da UFES. O grupo de biocristalografia tem enfocado o estudo sobre as substncias mais freqentemente encontradas nos clculos de doadores do Estado do Esprito Santo que so as duas formas do Oxalato de Clcio: a forma monohidratada (CaC2O4 H2O) e a forma dihidratada. Neste trabalho, em especial, feita uma investigao mais detalhada sobre o Oxalato de Clcio Dihidratado (CaC2O4 2H2O). A anlise cristalogrfica dos clculos tem sido utilizada principalmente com a finalidade de pesquisa [10], porm acreditamos que com o avano do estudo metablico esse mtodo venha a ser incorporado a rotina usada em procedimentos clnicos.

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REFERNCIAS DO CAPTULO 1
[1] GUYTON, A. C. e HALL, J. E. Tratado de Fisiologia Medica, 10 ed., Rio de Janeiro, Guanabara Koogan, 2002. [2] KITTREGE, D., J Urol 67:841, 1952. [3] ATSMON e COLS. Uric Acid Lithiasis. New York: Elsevier, 1963. p.1-13. [4] SMITH, L. H. The medical aspects of urolithiasis: an over view. J. Urol. 141:70710. 1989. [5] ESCRIBA, F. D., Urolitiasis: Valoracin y significado patolgico de uma cristaluria. Act. Fund. Puigvert 2:55-76, 2003. [6] SUTOR, D. J.; WOOLEY, S. E., Growth studies of calcium oxalate in the presence of various compounds and ions. II. Br. J. Urol, v.41, n.2, p.171-178, 1969. [7] Urologia, Litotripsia. Disponvel em: www.uro.com.br/calctex.htm, acessado em: 15 de Dezembro de 2005. [8] ULDALLA, A. A. Wet chemestry method for analysis of urinary calculi. Scand J Clin Lab Invest, [s.l.], v.43, p. 727-733, 1983. [9] DAUDON, M.; PROTAT, M. F.; REVEILLAUD, R. J.; JAESCHKE-BOYER, H. Infrared spectrometry and raman microprobe in the analysis of urinary calculi. Kidney Int, [s.l.], v.23, n.6, p.842-850, 1983. [10] KUPLICH, L. Estudos sobre o CaC2O4.H2O presente em pedras de rins. 2004. Dissertao (Mestrado em Fsica) - Programa de Ps-Graduao em Fsica, Universidade Federal do Esprito Santo, Vitria, 2004.

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Captulo 2
Aspectos Gerais Sobre a Formao de Cristais nos Rins
2.1 Aspectos anatmicos dos rins
O rim um rgo muito importante do corpo humano que trabalha initerruptamente na filtrao do sangue. Como conseqncia ele est susceptvel a formao de clculos em seu interior [1], sendo o local mais afetado do trato urinrio em aproximadamente 58% dos casos [2]. Como descrito no captulo 1, os dois rins localizam-se sobre a parede posterior do abdome, fora da cavidade peritoneal. Seu peso de cerca de 150g e tem tamanho aproximado a de um punho fechado [3].

Figura 2.1 Organizao geral dos rins e do sistema urinrio [3].

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Quando o rim seccionado em duas partes de cima para baixo, as principais regies que podem ser observadas so o crtex externo e a regio interna denominada medula. A medula dividida em mltiplas massas de tecido em forma de cones, denominadas pirmides renais. A base de cada pirmide origina-se na borda entre o crtex e a medula e termina na papila, que se projeta no espao da pelve renal, que a continuao da extremidade superior do ureter. A borda externa da pelve dividida em sculos de extremidade aberta, chamados clices principais, que se estendem para baixo e se dividem em clices menores, que coletam a urina proveniente dos tbulos de cada papila. As paredes dos clices, a pelve e o ureter contem elementos contrateis, que propelem a urina em direo bexiga, onde armazenada at ser eliminada [3].

Figura 2.2 Esquema do rim esquerdo mostrando as regies cortical e medular [4].

2.2 Aspectos fisiolgicos da formao da urina

No seres humanos, cada rim constitudo por cerca de um milho de nfrons. O nfron representa a menor unidade do rim; cada nfron capaz de filtrar e formar a

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urina independentemente dos demais. A funo renal pode, portanto, ser compreendida estudando-se a funo de um nico nfron. O nfron constituido basicamente por um glomrulo e um longo tbulo que desemboca nos tubos coletores de urina. A funo essencial do nfron consiste em depurar o plasma sanguneo das substncias que devem ser eliminadas do organismo. O nfron filtra uma grande proporo do plasma sanguneo atravs da membrana glomerular. Cerca de 1/5 do volume que atravessa o glomrulo filtrado para a cpsula de Bowman que coleta o filtrado glomerular. Em seguida, medida que o filtrado glomerular atravessa os tbulos, as substncias necessrias, como a gua e grande parte dos eletrlitos so reabsorvidas, enquanto as demais substncias, como uria, creatinina e outras, no so reabsorvidas. A gua e as substncias reabsorvidas nos tbulos voltam aos capilares peritubulares para a circulao venosa de retorno, sendo lanadas nas veias arqueadas, e finalmente, na veia renal. Uma parte dos produtos eliminados pela urina constituda de substncias que so secretadas pelas paredes dos tbulos e lanadas no lquido tubular. A urina formada nos tbulos constituida por substncias filtradas do plasma e pequenas quantidades de substncias secretadas pelas paredes tubulares [4].

Figura 2.3 Esquema simplificado do nfron, mostrando os principais componentes funcionais [4].

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Desta forma, para cada substncia presente no plasma, existe uma combinao particular de filtrao, reabsoro e excreo. A excreo da substncia na urina depende das intensidades relativas desses trs processos renais bsicos. Cada um destes processos filtrao, reabsoro e excreo regulado de acordo com as necessidades do corpo.

Figura 2.4 Processos renais bsicos que determinam a composio da urina [3].

As intensidades de excreo de diferentes substncias na urina representam a soma destes trs processos renais. Assim: EXCREO URINRIA = FILTRAO REABSORO + SECREO O filtrado glomerular possui aproximadamente a mesma composio do plasma, exceto em relao s protenas. Existem no filtrado glomerular, pequenas quantidades de protenas, principalmente as de baixo peso molecular, como a albumina. A filtrao e a produo de urina dependem de diversos fatores dentre os quais o mais importante a autoregulao do fluxo de sangue atravs dos

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glomrulos. Dentre de limites fisiolgicos a produo diria de urina por um adulto oscila entre 1 e 1,5 litros/dia.

2.3 A formao de cristais no rim

A formao de clculos um processo biolgico complexo, ainda pouco conhecido, apesar dos considerveis avanos j realizados. Hoje, constata-se que mudanas nos regimes alimentares, promovidas pela industrializao dos alimentos, mais ricos em protenas, sal e hidratos de carbono, aumentaram a formao de clculos[6]. Todo o indivduo produtor de clculos tem envolvimento com um ou mais fatores geradores de clculo: Epidemiolgicos (herana, idade, sexo, cor, ambiente, tipo de dieta); Anormalidades urinrias (saturada de sais, volume diminudo e alteraes do pH); Ausncia de fatores inibidores da formao de clculos (citrato, magnsio, pirofosfato, glicosaminoglicans, nefrocalcina, protena de Tam Horsfall); Alteraes metablicas (calcemia, calciria, uricemia, uricosria, oxalria, cistinria, citratria, hipomagnesria); Alteraes anatmicas e urodinmicas; Infeces urinrias [6]. No processo de formao de clculos renais, vrios eventos devem ser considerados e analisados. A supersaturao, por exemplo, um pr-requisito necessrio, mas no suficiente. Os cristais podem nuclear com baixos nveis de supersaturao na presena de substratos de nucleao, processo conhecido como nucleao heterognea. A nucleao de cristais no levar a formao de clculos, a menos que os cristais sejam retidos no rim. a partir dessa reteno que o agregado poder formar o ncleo do clculo [5].

2.3.1 Saturao Urinria

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O estudo da saturao urinria multifatorial. Depende da concentrao de solutos tais como: clcio, magnsio, sdio, potssio, amnio, fosfato, oxalato, citrato e sulfato; bem como da atividade inica desses compostos. A partir da podem ser calculados parmetros, tais como os produtos de solubilidade e de formao, obtendo o nvel de saturao [6]. O produto de solubilidade indica o limite entre subsaturao e saturao. constante para cada cristal em soluo pura, mas na urina necessrio considerar a presena de outros ons modificando essa solubilidade. O produto de formao separa os nveis de saturao e supersaturao. Esse parmetro varivel e de difcil determinao na urina, sendo influenciado pela concentrao dos solutos e por outras propriedades qumicas da soluo como um todo. Nveis inferiores ao produto de solubilidade indicam urina subsaturada para o determinado soluto. Neste caso, no ocorre a cristalizao e os cristais formados podem se dissolver [6]. A elevao da concentrao de um soluto, ultrapassando o valor do produto de solubilidade, indica soluo saturada em relao ao componente em questo. Nessa condio, a urina tambm denominada metaestvel. A partir do nvel de saturao ocorre cristalizao. Os cristais formados podem apresentar crescimento e agregao. Por outro lado, a ao de inibidores eficaz, prevenindo a cristalizao. Portanto a urina metaestvel de grande importncia na teraputica do paciente litisico, uma vez que possvel diminuir a saturao e aumentar a concentrao dos inibidores, melhorando a solubilidade [7].

2.3.2 Nucleao
A urina saturada ou supersaturada propicia a nucleao dos cristais. O que influencia no tipo de nucleao se ela homognea ou heterognea a composio da urina [8]. A nucleao homognea acontece quando o cristal formado serve de nicho para a deposio de outros cristais semelhantes. A nucleao heterognea, mais comum na urina, resulta da deposio dos cristais sobre um nicho que pode ser constitudo por macromolculas, impurezas ou outro cristal quimicamente diferente [9, 10, 11]. Uma vez nucleada, a deposio de outros

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cristais sobre o nicho facilitada e no requer nveis de saturao to elevados quanto no incio do processo. O ncleo poder crescer, agregar outros cristais ou matriz orgnica formando o clculo; ou ser eliminado sob a forma de cristalria (microclculos). Dependendo do tamanho do ncleo e das condies de reteno, ou da estase da urina, poder ocorrer a eliminao do microclculo [9, 12].

2.3.3 Crescimento de Cristal e Agregao

Aps a cristalizao pode ocorrer a agregao. O termo agregao descreve o processo de ligao dos cristais, resultando na formao de um aglomerado [13]. A agregao do oxalato de clcio e do fosfato de clcio in vitro, por exemplo, ocorre quando a soluo est supersaturada. A deposio desses cristais influenciada pela saturao e pelas interaes inicas. Os compostos orgnicos tambm podem se aderir ao ncleo e facilitar a agregao dos cristais. Vrios trabalhos realizados [14 - 18] tm procurado identificar molculas extracelulares que possam alterar a adeso de cristais de oxalato de clcio monohidratados superfcies das clulas renais na luz do nfron (em seu interior), dentre eles esto vrios Glicoaminoglicanos encontrados na urina. A agregao pode ser o mecanismo que distingue uma simples cristalria, que ocorre em indivduos normais, daquela dos formadores de clculo.

2.3.4 Inibidores da Cristalizao

Vrios ons (Mg++, Al+++), molculas pequenas (citrato, pirofosfato), e

macromolculas, glicosaminoglicanos, protena de Tamm-Horsfall, entre outros, tm sido estudados e podem agir como inibidores ou promotores da cristalizao. Uma molcula pode ser chamada de inibidora, quando interfere num dos processos de formao de cristais (nucleao, agregao e crescimento) diminuindo a possibilidade de um cristal iniciar o processo que resultar em um clculo [14]. Inibidor, portanto, qualquer substncia capaz de parar, desativar ou reduzir um ou mais estgios do processo de cristalizao de um determinado tipo de material [19].

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Experimentos evidenciaram que a urina contm substncias inibidoras e que a deficincia na atividade inibitria urinria pode predispor indivduos cristalizao, principalmente se combinada supersaturao [5, 20, 21].

2.4 Distrbios metablicos relacionados a litase renal

Vrias so as alteraes metablicas que contribuem para a formao de cristais nos rins e a seguir veremos a descrio de algumas delas.

2.4.1 Hipercalciria
A elevada excreo de clcio, tomando como referncia nveis normais de clcio no sangue, define a hipercalciria. A hipercalciria o distrbio mais freqente em pacientes com litase clcica [13]. Quando a elevada absoro no depende da ingesto de clcio, dizemos que existe hipercalciria tipo I, porm se a elevada absoro depende da ingesto excessiva de clcio denominamos hipercalciria tipo II. Quando existe um defeito inerente na absoro tubular de clcio, a perda de clcio denomina-se hipercalciria renal [22]. O principal fator para prevenir a litase clcica a ingesto hdrica suficiente para que o volume urinrio seja superior a 2l/dia. Alm disso, deve-se evitar a baixa ingesto de clcio, pois isso pode ter efeito nocivo sobre a mineralizao e sobre a litognese, devido ao aumento de absoro intestinal de oxalato [23].

2.4.2 Hiperoxalria
O oxalato o produto final do metabolismo do cido glioxlico e do cido ascrbico. H duas formas principais de hiperoxalria: Primria ou hereditria: doena rara causada por uma deficincia funcional na atividade de uma enzima, levando a um aumento da sntese de oxalato e de glicolato.

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Entrica: condio na qual vrias doenas crnicas ou procedimentos cirrgicos intestinais associam-se a uma m-absoro de gorduras, levando a uma hiperabsoro do oxalato da dieta [24].

Dieta rica em oxalato - raramente contribui para a hiperoxalria, porque os alimentos ricos em oxalato deveriam ser consumidos em grande quantidade para que a excreo aumentasse de maneira significativa [25].

2.4.3 Hipocitratria
O citrato tem dois efeitos importantes na preveno da litase renal por clcio: efeito solubilizante dos sais de clcio e efeito inibidor da cristalizao desses sais. A excreo do citrato sofre influncia de vrios fatores: idade do indivduo; sexo; contedo de cido ctrico e protico da dieta; exerccios fsicos; e estado cidobsico sistmico [26].

2.4.4 Xantinria
um distrbio raro, autossmico recessivo e hereditrio devido a uma deficincia na enzima responsvel pela converso de hipoxantina em cido rico. Em conseqncia ocorre a diminuio dos nveis de cido rico e a excreo urinria de xantina e hipoxantina [13].

2.4.5 Infeco do trato urinrio

A litase do trato urinrio pode ser causa ou conseqncia de processo de estase urinria, associando-se infeco do trato urinrio. A presena de clculo no trato urinrio, conseqente ao processo obstrutivo parcial ou total ou estase urinria pode levar proliferao de determinado agente etiolgico e conseqente infeco, muitas vezes potencializada por distrbios metablicos associados [13].

2.4.6 Cistinria

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uma doena hereditria, autossmica recessiva que tem como conseqncia a diminuio na reabsoro de cistina e outros aminocidos dibsicos (lisina, arginina e ornitina) [27].

2.4.7 Hiperuricosria
O cido rico o maior produto final do metabolismo das purinas. pouco solvel nos lquidos orgnicos, precipitando-se quando o fluxo urinrio baixo, ou com o pH cido ou em condio de supersaturao urinria de urato [24]. Um quarto de sua excreo por via entrica (intestinal) e trs quartos, por via urinria. A ingesto excessiva de purinas pode levar hiperuricosria [28].

2.5 Composio dos clculos urinrios

Os clculos urinrios so formados por agregao de diversos policristais formando um aglomerado. Esses policristais podem ser caracterizados em grupos, como: oxalato, fosfato, cido rico, urato, alm dos clculos formados por cistina e xantina.

Figura 2.5 Grupo ao qual pertencem, nome qumico, mineral e frmula dos compostos encontrados nos clculos renais [37].

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A freqncia com que cada tipo de policristal aparece na formao do clculo varivel com a populao estudada e tambm reflete outros fatores associados doena calculosa renal. Todavia, a maioria desses estudos indica que os cristais de oxalato de clcio e fosfato de clcio compem 80 a 90% dos clculos [9, 29]. neste tipo de cristal que iremos concentrar nossa ateno.

2.5.1 Oxalato de clcio

O cristal de oxalato de clcio o mais comumente encontrado. Ele pode se precipitar sob a forma de oxalato de clcio monohidratado, dihidratado e trihidratado. At o momento no se sabe ao certo como a composio da urina facilita a cristalizao de cada um desses cristais. Sabe-se, no entanto, que a cristalizao do oxalato de clcio influenciada pela concentrao de clcio e do oxalato, bem como pela nucleao, seja homognea ou heterognea [9]. A nucleao heterognea ocorre com substncias orgnicas ou cristais de cido rico e de fosfato de clcio. O oxalato de clcio insolvel em pH urinrio entre 4,5 e 8,0, assim, teoricamente, a cristalizao pode ocorrer em urina tanto cida quanto alcalina. Manobras modificando o pH urinrio no alteram a precipitao de modo significativo [10]. Podemos concluir que o controle da cristalizao do oxalato de clcio deve ser dirigido para a reduo dos ons livres de oxalato e de clcio, alm da elevao na concentrao dos inibidores da cristalizao [30].

2.5.2 Metabolismo do Oxalato de Clcio

A excreo urinria normal de oxalato est entre 15 e 40 mg/24h. Existe uma variao diurna na concentrao e excreo do oxalato assim como uma variao sazonal com os maiores valores nos meses de vero [31]. O cido oxlico representa um dos produtos finais e aparentemente intil do metabolismo assemelhando-se assim, ao cido rico. As enzimas que metabolizam o oxalato a cido frmico e dixido de carbono no existem no homem, portanto, uma vez produzidas devem ser excretadas pelos rins. Nenhuma via de excreo intestinal conhecida. Os dois maiores precursores do oxalato so o cido ascrbico e o cido glioxlico [32].

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cido Ascrbico
A converso de cido ascrbico em cido oxlico ocorre aparentemente no fgado por um processo envolvendo o cido dicetogulnico com os dois primeiros carbonos do cido ascrbico sendo convertidos em oxalato [31]. Aproximadamente 35 a 50% do oxalato urinrio proveniente do cido ascrbico [33].

cido Glioxlico
A oxidao do glioxilato a oxalato maior fonte de produo de oxalato nos seres humanos e contribui com aproximadamente 50 a 70% do oxalato urinrio. O glioxilato pode originar-se do metabolismo da glicina, do triptofano, da serina, da hidroxiprolina, do glicolato, da tirosina e da fenilalanina. Todo o processo ocorre com a contribuio das seguintes enzimas: cido-gliclico-oxidase, a xantina-oxidase e a desidrogenase-lctica [34].

2.5.3 Oxalato de clcio trihidratado (OCT)

Oxalato de clcio trihidratado (OCT) se desenvolve em soluo sinttica e raramente pode ser encontrado em clculos urinrios devido a sua instabilidade termodinmica [35].

2.5.4 Oxalato de clcio monohidratado (OCM) - CaC2O4.H2O

O oxalato de clcio mono-hidratado puro apresenta superfcie externa irregular, a sua cor varia entre o amarelo-claro e o marrom, tem estrutura densa e elevada dureza. Internamente, os cristais se depositam de modo concntrico ao ncleo. Os clculos de oxalato de clcio monohidratado podem ser divididos em 2 grupos: a) clculos papilares, com ligao papila claramente identificada e b)clculos no papilares sem ligao s papilas [35].

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2.5.5 Oxalato de clcio dihidratado (OCD) - CaC2O4.2H2O

O oxalato de clcio dihidratado instvel quimicamente, porm uma das formas encontradas em clculos renais. O oxalato de clcio dihidratado o foco principal desta dissertao, sendo assim, suas caractersticas sero discutidas em detalhe na seco subseqente.

2.6 Caractersticas do oxalato de clcio dihidratado (OCD) CaC2O4.2H2O

Os clculos de oxalato de clcio dihidratado podem ser divididos em dois grupos: a) clculos papilares, com ligao papila claramente identificada e b) clculos no papilares, sem ligao s papilas. Em ambos os casos importante considerarmos que a forma dihidratada uma fase termodinamicamente instvel do oxalato de clcio que em contato com lquido gradualmente transformada na forma mais estvel, a forma monohidratada [35]. A formao de cristais de OCD somente pode ser explicada considerando-se fatores cinticos. Estudos tm demonstrado que na presena de elevadas valores da razo Ca2+/Oxalato, elevada fora de ionizao, a presena de citrato em quantidade considervel e na presena de fosfato de clcio coloidal (pH 6,0), a produo da forma dihidratada cineticamente mais favorvel que a formao da forma monohidratada [35].

2.6.1 Clculos Papilares de OCD

Neste tipo de clculo, o local de ligao com a papila claramente diferenciado dos outros. Assim, ele constitudo por um pequeno clculo papilar de COM ou por um depsito papilar de hidroxiapatita sobre o qual se desenvolver um grande cristal piramidal de OCD, formando o corpo principal do clculo como um agregado primrio de cristais de OCD formado por crescimento e mecanismo idnticos [35]. O motivo que induzir a hidroxiapatita ou o COM a fornecer condies mais favorveis

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para o desenvolvimento do OCD ainda est em discusso, podendo ser o alto nvel de clcio na urina, nveis normais de citrato na urina, pH 6,0, etc.

Figura 2.6 Esquema do clculo de OCD papilar. (A) Cristal de OCD desenvolvido sobre um pequeno cristal de COM. (B) Cristal de OCD desenvolvido sobre um depsito papilar de hidroxiapatita [35].

2.6.2 Clculos de OCD sem Ligao com a Papila

Os clculos de OCD no-papilares, segundo Grases et al. [35], podem ser classificados em dois diferentes grupos por sua morfologia: IIa e IIb. Os clculos do grupo IIa so formados principalmente por cristais piramidais de OCD e alguns por quantidades variveis de COM resultante da transformao do OCD mediante liquido (essa transformao depende do tempo de permanncia do clculo o corpo). Esses clculos podem conter pequenas quantidades de hidroxiapatita irregularmente distribudas. Com base nas observaes mencionadas, necessrio que existam cavidades com baixa eficcia urodinmica para que cada clculo seja formado. A sedimentao de algumas partculas slidas (principalmente matria orgnica e hidroxiapatita) nas cavidades poder induzir o desenvolvimento do cristal de OCD devido a composio particular da urina (alto nvel de clcio na urina, nveis normais de citrato na urina e pH urinrio 6,0) [35]. O grupo IIb caracterizado por cristais de OCD com alguma quantidade de OCM resultantes da transformao do OCD, quantidades considerveis de hidroxiapatita e matria orgnica. Esses compostos (OCD, COM, hidroxiapatita e matria orgnica) freqentemente so dispostos alternadamente formando diferentes camadas. Os clculos de OCD so formados, geralmente, por pacientes que apresentam hipercalciria (excreo de clcio na urina > 250-300 mg/24h). necessrio que

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existam cavidades com baixa eficcia urodinmica, ou seja, locais onde a dinmica da urina esteja diminuda, para que o clculo seja formado. A sedimentao de matria orgnica e a calcificao por hidroxiapatita devido a existncia de pH urinrio > 6,0, podero induzir o desenvolvimento de cristais de OCD, quando altos nveis de clcio e citrato estiverem presentes [35]. A existncia de camadas de hidroxiapatita e OCD tem sido atribudas a fenmenos sazonais devido a mudana na composio urinria, conseqncia de modificaes na dieta [36]. Assim, a existncia de pH urinrio relativamente alto devido a dietas vegetarianas, poder favorecer a formao de hidroxiapatita.

Figura 2.7 Clculos de OCD no-papilares. (A) formados principalmente por cristais piramidais de OCD e pequenas quantidades de hidroxiapatita. (B) estruturado em camadas alternadas de hidroxiapatita e preponderantemente cristais de OCD transformados [35].

2.6.3 Informaes Cristalogrficas do OCD.

O composto CaC2O4.2H2O, oxalato de clcio dihidratado, est associado ao grupo espacial I4/m (87) assumindo uma rede tetragonal.

Figura 2.8 Representao esquemtica das faces do cristal de oxalato de clcio dihidratado [38].

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Tabela 2.1 Ficha PDF do Oxalato de Clcio Dihidratado. Ficha N 17-0541 Wavelength= 1.5418 C2CaO42H2O Calcium Oxalate Hydrate Weddellite, syn Rad.:CuKa1 = 1.5405 Filter: d sp: Guinier 114.6 Cut off:50.0 Int.: Film i/Icor.: Ref: de Wolff, P., Technisch Physiische Dienst, Delft, The Netherlandas, IDCC Grant-in-Aid Sys.: Tetragonal S.G.: I4/m (87) a: 12.35 b: c:7.363 A: C: 0.5962 : : : Z: 8 mp: Ref.: Ibid Dx: 1.941 Dm: 1.940 SS/FOM: F30=56(.0157,34) : : 1.523 : 1.544 Sign: +2V: Ref: Prien, Journal of Urology, 57, 949 (1947) CAS #: 18400-37-8. PSC: tl104. Validated by calculated Patter. Mwt: 164.13. Volume[CD]: 1123.02. 2 10.132 14.013 14.332 20.089 20.322 22.743 24.185 24.801 26.289 28.241 28.611 28.895 31.788 32.259 32.415 33.448 37.120 37.344 38.015 38.437 39.453 40.205 40.832 41.241 42.690 44.778 Int 4 6 100 30 2 8 12 2 4 4 2 10 14 65 4 2 8 16 2 4 2 25 6 2 8 6 h 1 1 2 2 2 3 0 3 1 2 3 4 2 4 4 3 5 1 4 4 3 2 4 5 5 5 k 1 0 0 1 2 1 0 0 1 0 2 0 2 1 2 1 1 0 0 3 3 1 2 2 3 1 l 0 1 0 1 0 0 2 1 2 2 1 0 2 1 0 2 0 3 2 1 2 3 2 1 0 2 2 45.441 46.398 46.499 47.903 48.473 49.655 50.809 51.144 51.829 52.371 52.566 53.091 53.493 54.072 54.771 55.128 55.599 56.756 58.490 59.065 59.525 60.425 61.854 61.946 62.596 63.117 Int 4 10 4 16 <1 10 2 2 2 2 6 <1 <1 4 <1 <1 2 2 2 2 2 2 2 2 2 <1 h 3 6 6 4 4 5 6 6 2 5 4 6 6 2 5 3 7 7 5 6 6 4 7 8 7 6 k 2 1 2 1 4 3 0 3 0 5 3 2 4 2 2 1 2 3 5 1 4 2 4 2 3 3 l 3 1 0 3 2 2 2 1 4 0 3 2 0 4 3 4 1 0 2 3 2 4 1 0 2 3 2 63.453 63.940 64.939 65.092 65.607 65.815 67.041 67.479 67.534 67.867 68.374 68.831 69.471 69.706 70.912 71.407 71.594 72.808 73.200 74.132 74.957 Int <1 <1 2 2 2 2 <1 2 4 2 2 <1 <1 <1 2 2 2 2 <1 <1 2 h 5 6 7 7 2 8 7 8 3 8 6 9 3 9 6 4 7 7 8 9 5 k 1 6 5 0 1 3 2 2 0 4 0 1 2 0 5 1 6 4 4 1 5 l 4 0 0 3 5 1 3 2 5 0 4 0 5 1 3 5 1 3 2 2 4

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REFERNCIAS DO CAPTULO 2
[1] AGARWAL R., SINGH V. R. e DHAWAN U., Biomed. Mater Engng. 1 (1991) 149. [2] TRINCHIERI A., ROVERA F., NESPOLI R., CUR A. Clinical observations on 2086 patients with upper urinary tract stone. Arch Ital Urol Androl 1996; 68(4); 2897-902. [3] GUYTON, A. C. e HALL, J. E. Tratado de Fisiologia Medica, 10 ed., Rio de Janeiro, Guanabara Koogan, 2002. [4] SOUZA, M. H. L. e ELIAS, D. O. Fundamentos da Circulao Extracorprea, 2 ed., Rio de Janeiro, Centro Editorial Alfa Rio, 2006. [5] WORCESTER E. M. Inhibitors of stone formation. Semin in Nphrol 1996; 16(5): 474-86. [6] MEYER, J. L. Physicochemistry of stone formation: Urolithiasis a Medical surgical reference. Philadelphia: WB Saunders, p. 11-34, 1990. [7] ROBERTSONS, W.G.; PEACOCK, M.; BEC, N. Measurements of activity products in urine from stone-formers and normal subjects In: Urolithiasis Physical aspects. Washington: National Academy of siences, p.79-96, 1972. [8] RUSSEL, K. C. Nucleation mechanisms in aqueous solutions with comments on urine In: Urolithiasis Physical aspects. Washington: National Academy of Siences, p.129-143, 1972. [9] COE, F. L.; PARKS, J. H. Phisical chemistry of calcium stone disease In: Nephrolithiasis Pathogenesis and Treatment. Year Book Medical. Chicago, p. 3858, 1998.

39

[10] COE, F. L.; PARKS, J. H; ASPLIN, J. R. The pathogenesis and treatment of kidney stones. N. Engl J Med, [s.l.], v. 327, n. 16, p.1141-1152, 1992. [11] FINLAYSON, B. Phisicochemical aspects of urolithiasis. Kidney Int, [s.l.], v. 13, p. 344-360, 1978. [12] MANDEL, N.; RIESE, R. Crystal-cell interactions: crystal binding to rat renal papillary tip collecting duct cells in culture.Am J Kidney Dis XVII, p.402-406, 1991. [13] TOSTES, V.; CARDOSO, L. R. Reviso: recentes avanos em litase urinria. Jornal Brasileiro de Nefrologia, [s.l.], v. 23, n. 3, p. 166-173, 2001. [14] FLEICH H. Inhibitors and promoters of stone formation. Kidney Intern 1978; 13:361-71. [15] LIESK J. C., TOBACK F. G. Adhesion of calcium oxalate monohydrate crystals to renal epithelial cell is inhibited by specific anions. Am JPhysiol 1995;268:F604F12. [16] LIESK J. C., TOBACK F. G. Interaction of urinary crystals with renal epithelial cells in the pathogenesis of nephrolithiasis. Semin Nephrol 1996;16(5):458-73. [17] MANDEL N. S., MANDEL G. S., HASEGAWA A. T. The effect of some urinary stone inhibitors on membrane interaction potencials of stone crystals. J Urol 1987;138:557-62. [18] ROBERTSON W. G., PEACOCK M., NORDIN B. E. C. Calcium crystalluria in recurrent renal stone-formers. Lancet 1968;21-4. [19] DAUDON M., HENNEQUIN C., BADER C., JUNGERS P., LACOUR B., DRECKE T. Inhibitors of crystallization. Advanc Nephrol 1995;24:167-216. [20] PAK C. Y. C., HOLT K. Nucleation and growth of brushite and calcium oxalate in urine of stone formers. Metabolism 1976;25:665-73.

40

[21] ROBERTSON W. G., PEACOCK M., MARSHALL R. W. Saturation-Inhibition index as a measure of the risk of calcium oxalate stone formation in the urinary tract. N Engl J Med 1976;294:249-52. [22] SCHOR, N.; HEILBERG, I. P. Hipercalciria Idioptica. In: SCHOR, N.; HEILBERG, I. P. Calculose Renal: fisiopatologia, diagnstico e tratamento. 2 ed. So Paulo: Sarvier, 1995. p. 43-51. [23] LEONETTI F., LECHEVALLIER E., DUSSOL B., BERLAND Y. Lithiase urinaire. La Revue du Praticien. 1996;1557-67. [24] NAKANO M., KAINER G., FOREMAN J. W., CHAN J. C. M. Renal calculi. In: Barakat AY, ed. Renal disease in children: clinical evaluation and diagnosis. New York: Springer-Verlag; 1989. p. 341-5. [25] SCHOR, N.; HEILBERG, I. P. Calculose Renal: fisiopatologia, diagnstico e tratamento. 2 ed. So Paulo: Sarvier, 1995. [26] RABELO M. A. P. Hipocitratria. In: SCHOR, N.; HEILBERG, I. P., eds. Calculose renal: fisiopatologia, diagnstico e tratamento. 2 ed. So Paulo: Sarvier; 1995. 105-13. [27] GANDOLPHO I. P., SCHOR, N.; HEILBERG, I. P. Cistinuria. In: SCHOR, N.; HEILBERG, I. P., eds. Calculose renal: fisiopatologia, diagnstico e tratamento. 2 ed. So Paulo: Sarvier; 1995. p. 71-6. [28] POLINKY M. S., KAISER B. A., BALUARTE H. J. In: GRUSKIN A. B., SHELDON C. A., CHURCHILL B. M., eds. Nefrologia peditrica e bases terapeutica em urologia peditrica. Interlivros, Rio de Janeiro; 1988. p. 149-77. [29] MANDEL, S.; MANDEL, R. Phisiochemistry of urinary stone formation: Renal stone Disease Pathogenesis, Prevention and treatment. Boston: Martinus Nijhoff, p. 1-24, 1987.

41

[30] COELHO S. T. S. N. Fsico qumica da litognese. In: SCHOR, N.; HEILBERG, I. P., eds. Calculose renal: fisiopatologia, diagnstico e tratamento. 2 ed. So Paulo: Sarvier; 1995. p. 6-12. [31] WILLIAMS, H. E. Oxalate synthesis, transport and the hyperoxaluric syndromes. J. Urol, [s.l.], v. 141, n. 3, p. 742-747, 1989. [32] WILLIAMS A. W.; WILSON, D. M. Dietary intake, absortion, metabolism and excretion of oxalate. Seminars in Nephrology, [s.l.], v. 10, n. 1, p. 2-8, 1990. [33] COE, F. L.; PARKS, J. H. Hyperoxaluric States In: SCHOR, N. Nephrolithiasis: Pathogenesis and treatment. 2 ed. Year Book Medical, Chicago, 1988. [34] PAK, C. Y. C. Hyperoxaluric Calcium nephrolithiasis In: Urolithiasis - A medical and surgical referenc, Philadelphia: W. B. Sounders. 1990. [35] GRASES, F.; COSTA-BAUZA, A.; GARCIA-FERRAGUT, L. Biophatological crystalization: a general view about the mechanisms of renal stone formation . Adv. in Colloid Interface Science, Spain, v. 74, p. 169-194, 1998. [36] CIFUENTES, L. Composicin y Estructura de los calculus Renales. Salvat, Barcelona, 1984. [37] KUPLICH, L. Estudos sobre o CaC2O4.H2O presente em pedras de rins. 2004. Dissertao (Mestrado em Fsica) - Programa de Ps-Graduao em Fsica, Universidade Federal do Esprito Santo, Vitria, 2004. [38] Site www.nature.com.br/ki/journal acesado em 14 de abril de 2008.

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Captulo 3
Teoria de Difrao de Raios X
3.1 Introduo Histrica
Em 1895 W. K. Rtingen realizou os primeiros experimentos. Do ponto de vista cientfico do conhecimento sobre os raios X, o avano foi muito lento e nos primeiros anos, nada de novo foi acrescentado aos resultados de Rtingen. Especulando sobre a natureza dos raios X, os cientistas dividiram-se em dois grupos opostos: O grupo de G. G. Stokes, que atribua uma natureza ondulatria ao raios X, e o grupo de W. H. Bragg, que atriburam uma natureza corpuscular [1]. Somente em 1912, na Universidade de Munique, iniciou-se um perodo de experincias fundamentais para a determinao da natureza dos raios X. P. Ewald finalizara uma tese terica sobre a dupla refrao e disperso das ondas luminosas por corpos anisotrpicos orientado por A. Sommerfeld. Aps uma visita de Ewald, Max Von Laue ao tomar conhecimento de que aos cristais era atribuda uma estrutura regular ficou interessado em estudar o efeito da passagem de raios X atravs de um cristal [1]. Laue discutiu esta hiptese com outros colegas fsicos, havendo um grande interesse da parte dos fsicos experimentais. Porm essa idia foi combatida, ao mesmo tempo, por alguns tericos encabeados por Sommerfeld. Os clculos de Sommerfeld previam que, em qualquer caso, nenhuma difrao seria detectada devido agitao trmica dos tomos de um cristal. Mais tarde, Sommerfeld cedeu ao argumento de que a ltima palavra deveria ser dada pelos resultados experimentais e no por clculos tericos [1]. A partir de ento, Laue executou uma srie de experimentos com o intuito de verificar suas idias. Ainda em 1912, dois fsicos britnicos, W. H. Bragg e W. L. Bragg, pai e filho, inspirados pelo trabalho de Laue e por um notvel sentido prtico, fizeram uma srie de experincias que iriam

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revolucionar a Cristalografia e a Qumica. Depois de agosto de 1914, com a mobilizao de cientistas e laboratrios pela guerra, a investigao cientfica praticamente cessou. Mas pode se dizer que at 1920 foram estabelecidas as bases que iriam servir de suporte a todos os trabalhos de radiocristalografia at o presente. Desde a descoberta dos raios X, surgiram trs ramos da cincia que utilizam esta radiao. O primeiro e mais antigo deles o campo da radiologia. O segundo ramo surgiu no intuito de estudar e confirmar a natureza ondulatria dos raios X. O terceiro ramo estuda o espectro de emisso de raios X dos materiais. Embora tenha sido utilizado j no incio do sculo, este ltimo somente veio a ter aplicaes rotineiras na segunda metade do Sculo XX [1].

3.2 A produo de Raios X

Os raios X so radiaes eletromagnticas que possuem valor de comprimento de onda entre 0.02 e 100 (1 = 10-10 m). Eles so parte do espectro eletromagntico. Devido ao fato dos raios X terem comprimento de onda similares ao tamanho de tomos, eles so usados para fazer estudos em cristais [2].

Figura 3.1 Espectro de radiaes eletromagnticas [2]

Os raios-X so gerados quando uma partcula de alta energia cintica submetida a uma mudana de acelerao. O mtodo mais utilizado para produzir raios-X

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fazendo com que um eltron de alta energia (gerado no ctodo do tubo catdico) colida com um alvo metlico (nodo) [1].

Figura 3.2 Produo de raios X a nvel atmico [2].

Na figura acima, analisamos o fenmeno a nvel atmico. Quando o eltron proveniente do catodo incide no anodo, ele pode expulsar um eltron orbital. A rbita de onde o eltron ser expulso, depende da energia do eltron incidente e dos nveis de energia do tomo do anodo. A lacuna deixada por este eltron ser preenchida por um eltron mais externo. Neste processo, a radiao X ser emitida.

Figura 3.3 A relao entre a diferena de potencial entre os terminais do tubo e as intensidades de cada comprimento de onda produzido [1].

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Analisando o espectro, nota-se que para tenses mais altas, produzem-se certos comprimentos de onda em intensidades bem mais altas que as demais. a chamada radiao caracterstica do alvo. Os demais comprimentos de onda so chamados de radiao branca, pois assim como a luz branca e o rudo branco, so formados por vrios comprimentos de onda. Quanto mais se aumenta a diferena de potencial (cada curva mostrada acima representa o espectro para uma determinada tenso), mais a radiao caracterstica se destaca em relao radiao contnua, possibilitando a utilizao de um comprimento de onda pr-determinado [1]. A maneira como se comporta o espectro de raios X explicada atravs das transies de nveis atmicos de energia. Para cada diferente transio de nveis de energia, um comprimento de onda diferente emitido. A radiao K1, mostrada ao lado, produzida quando um eltron transita da camada L III para a camada K, enquanto que a radiao K1 gerada quando o eltron transita da camada MIII para K.

Figura 3.4 Transies de nveis atmicos de energia [1]

A energia do fton emitido equivale a diferena de energia entre as duas camadas. Para a radiao K1, teramos Efton=K-LIII. Com essa energia, podemos ento obter o comprimento de onda atravs da equao =hc/(K-LIII). Como a energia para cada nvel varia com o elemento atmico (alvo), cada tipo de alvo produz radiaes caractersticas em diferentes comprimentos de onda. A tabela abaixo mostra os comprimentos de onda para os materiais mais utilizados em tubos de Raios-X [1]:
Tabela 3.1 Comprimentos de onda para materiais mais utilizados em tubos de Raios X.

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Elemento W Mo Cu Co Ni Fe Cr

K1 () 0.20901 0.70930 1.54056 1.78896 1.65791 1.93604 2.28970

K1() 0.18437 0.63228 1.39221 1.62079 1.50013 1.75661 2.08487

3.3 Difrao de raios X e Lei de Bragg

A difratometria de raios X corresponde a uma das principais tcnicas de caracterizao microestrutural de materiais cristalinos. Seu funcionamento se baseia no fato de que os raios X ao atingirem um material podem ser espalhados elasticamente, sem perda de energia pelos eltrons de um tomo. O fton de raios X aps a coliso com o eltron, muda sua trajetria mantendo a mesma fase e energia do fton incidente. Sob o ponto de vista da fsica ondulatria, pode-se dizer que a onda eletromagntica instantaneamente absorvida pelo eltron e remitida; cada eltron atua, portanto, como centro de emisso de raios X [3]. Se os tomos que geram este espalhamento estiverem arranjados de maneira sistemtica, como em uma estrutura cristalina, apresentando entre eles distncias prximas do comprimento de onda da radiao incidente, pode-se verificar que as relaes de fase entre os espalhamentos tornam-se peridicas e que efeitos de difrao dos raios X podem ser observados em vrios ngulos [3]. Se um feixe de raios X, com uma dada freqncia, incidir sobre um tomo isolado sabe-se que eltrons desse tomo sero excitados e vibraro, emitindo raios X em todas as direes com a mesma freqncia do feixe incidente. Quando os tomos esto regularmente espaados em um retculo cristalino e a radiao incidente tem comprimento de onda da ordem deste espaamento, ocorrer interferncia construtiva em certas direes e interferncia destrutiva em outras. Conclui-se desse efeito que a difrao ocorre na direo onde h interferncia construtiva [1].

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Considerando-se dois ou mais planos de uma estrutura cristalina, as condies para que ocorra a difrao de raios X vo depender da diferena de caminho percorrida pelos raios X e o comprimento de onda da radiao incidente. Essa condio expressa pela Lei de Bragg:

n =2dsen
onde

(3.1)

corresponde ao comprimento de onda da radiao incidente, n a um nmero ao ngulo de incidncia dos raios X

inteiro (ordem de difrao), d distncia interplanar para o conjunto de planos hkl (ndice de Miller) da estrutura cristalina e

(medido entre o feixe incidente e os planos cristalinos) [3].

Figura 3.5 Interferncia a nvel planar [1].

A intensidade difratada, dentre outros fatores, dependente do nmero de eltrons no tomo, sendo assim temos que tomos com Z alto produzem intensidades difratadas mais altas. Adicionalmente, os tomos so distribudos no espao, de tal forma que os vrios planos de uma estrutura cristalina possuem diferentes densidades de tomos ou eltrons, fazendo com que as intensidades difratadas sejam, por conseqncia, distintas para os diversos planos cristalinos [3].

3.4 Reticulado cristalino

O Reticulado cristalino uma rede de pontos que se prolonga infinitamente nas trs direes do espao. A geometria da rede espacial pode ser caracterizada pelos

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parmetros a, b, c e , e . Esses parmetros permitem definir exatamente como os pontos se distribuem no espao.

Figura 3.6 Unidade espacial bsica - clula unitria [4].

3.5 Estrutura cristalina

Podemos definir um cristal como sendo uma rede de pontos regularmente espaados na qual se adiciona aos pontos conjuntos de elementos reais denominados base.

Figura 3.7 Esquema ilustrativo da construo de um slido.

Materiais cristalinos so aqueles que possuem uma distribuio caracterstica e regular dos seus tomos. Devido a esta regularidade, a estrutura cristalina de um material no precisa ser representada por todos os seus tomos, mas por apenas um conjunto de tomos que possam definir a sua distribuio no espao. A esta pequena poro do reticulado cristalino que tem a propriedade de representar todo o

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cristal chamamos de clula unitria e que est associada a uma figura geomtrica e a distribuio caracterstica dos tomos [4]. Existem sete figuras geomtricas que representam sete sistemas cristalinos, que por sua vez iro formar quatorze distribuies caractersticas dos tomos, produzindo quatorze estruturas cristalinas, que chamamos de Redes de Bravais.

Tabela 3.2 - Classificao das estruturas cristalinas dentro dos sistemas cristalinos.

Sistema cristalino Cbico

Parmetros de rede e ngulo entre os eixos Trs eixos iguais em ngulo reto.

Estrutura cristalina

Cbica simples

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a=b=c, ===90

Cbica de corpo centrado Cbica de face centrada

Tetragonal

Trs eixos em ngulo reto, dois Tetragonal simples iguais. a=bc, ===90 Tetragonal de corpo centrado

Ortorrmbico

Trs eixos desiguais em ngulo Ortorrmbico simples reto. abc, ===90 Ortorrmbico de corpo centrado Ortorrmbico de base centrada Ortorrmbico de face centrada

Rombodrico Hexagonal

Trs eixos iguais, ngulos iguais. a=b=c, == 90

Rombodrico simples

Dois eixos iguais, dois ngulos Hexagonal simples iguais a 90, terceiro a120. a=bc, ==90 =120

Monoclnico

Trs eixos desiguais, um ngulo Monoclnico simples diferente. abc, ==90, 90 Monoclnico de base centrada

Triclnico

Trs eixos desiguais, ngulos Triclnico simples desiguais. abc, 90

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3.5.1 As Redes de Bravais.

A manifestao por parte dos cristais de anisotropias para certas propriedades fsicas, aliadas idia de descontinuidade da matria, levou os cristalgrafos a atribuir aos cristais uma estrutura regular, denominada estrutura cristalina. Esta estrutura cristalina pode ser descrita pela repetio peridica de tomos ou agrupamentos de tomos. Diz-se, por essa razo, que a matria cristalina apresenta uma homogeneidade peridica, quanto distribuio das suas unidades elementares. Esta distribuio regular resulta em uma construo simtrica, que pode ser descrita mediante uma distribuio regular de operadores de simetria. A difrao dos raios X pelos cristais veio confirmar a estrutura triperidica de tomos de um cristal. A estrutura uma construo simtrica, cujo motivo de repetio um tomo, ou um grupo de tomos e, cuja lei que rege esta distribuio um dos 14 modos de Bravais de acordo com um dos 230 grupos espaciais. Assim, a simetria de um cristal corresponde simetria resultante da correlao entre a simetria do motivo da estrutura e a simetria da rede de Bravais que repete aquele motivo [1]. A seguir, so fornecidas duas definies equivalentes de um rede de Bravais:

1. Uma rede de Bravais uma rede infinita de pontos discretos, com arranjo e orientao idnticos seja qual for o ponto espacial de onde a rede observada. 2. Uma rede de Bravais tri-dimensional consiste em todos os pontos com vetores de posio R na forma: R = n1a1 + n2a2 + n3a3 (3.2)

onde a1, a2 e a3 so quaisquer vetores, no todos no mesmo plano, e n1; n2 e n3 so trs nmeros inteiros quaisquer. Os vetores ai; i = 1; 2; 3; so denominados vetores primitivos e a combinao linear (3.2) dita geradora ou varredora da rede cristalina [5].

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Figura 3.8 Redes de Bravais em 3D.

Estas estruturas elementares so denominadas redes de Bravais, em homenagem a Auguste Bravais que em 1848, a partir dos estudos publicados em 1842 por Moritz Ludwig Frankenheim (1801-1869), demonstrou geometricamente que num espao tridimensional s poderiam existir 14 configuraes bsicas.

3.6 Difrao de raios X de p

O problema de produzir a clula unitria a partir de dados de difrao de raios X de p complexo uma vez que a rede recproca tridimensional foi colapsada em um espao unidimensional. Ainda que padres cbicos de difrao de p possam ser

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indexados facilmente atravs de inspeo, e a tetragonal com um pouco mais de dificuldade, outros padres de difrao so freqentemente mais complicados. Por isto foram criadas vrias estratgias para indexar padres de difrao de p automaticamente com a ajuda de computadores. A experincia geral que dados de altssima qualidade so necessrios. Entende-se que padres de difrao com alta resoluo devem apresentar preciso tpica de valores medidos de 2 da ordem de 0,03, no havendo erro sistemtico na determinao do zero e alta contagem dos ftons difratados. Alem disso, devemos realizar medidas que compreendam intervalos de 3 2 150 [6]. A qualidade de qualquer indexao proposta pode ser avaliada atravs de no mnimo dois critrios: primeiro, todas as linhas devem ser indexadas; segundo, o ngulo de Bragg ou espaamento d calculado deve concordar com as medidas experimentais dentro de certo erro estimado [7].

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REFERNCIAS DO CAPTULO 3
[1] Bleicher L. e Sasaki J. M., Introduo difrao de raios X em cristais, Publicao da Universidade Federal do Cear, 2000. [2] Nelson S. A., X-Ray Crystallography: The powder Method, Tulane University New Orleans, LA, EUA, 2003. Disponvel em: http://www.tulane.edu/~sanelson/eens211/#Lecture%20Notes. [3] Kahn H., Difrao de Raios X, Universidade de So Paulo, Escola Politcnica, disponvel em: www.angelfire.com/crazy3/qfl2308, acessado em: 16 de novembro de 2007. [4] Calister Jr. W. D., Materials Science and Engineering, an introduction, Wiley, 3th ed., 1994. [5] GAELZER, R., Universidade Federal de Pelotas, 2004. Disponvel em: www.minerva.ufpel.edu.br/~rudi/grad/EsMa/Apostila/CapIV.pdf, acessado em: 13 de maro de 2008. [6] WELCH, M., Degrees of order in solids; The role diffraction, Module A. Michalmas term, 1999. [7] KUPLICH, L. Estudos sobre o CaC2O4.H2O presente em pedras de rins. 2004. Dissertao (Mestrado em Fsica) - Programa de Ps-Graduao em Fsica, Universidade Federal do Esprito Santo, Vitria, 2004.

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Captulo 4
Metodologia Experimental
4.1 Mtodo de difrao de raios X de p
Embora a difrao de raios X de ps (amostras microcristalinas) tenha sido descoberta por Max Von Laue logo aps sua experincia histrica com um monocristal de KCl (1912), at a dcada de 60 a tcnica de difrao de p (PD) foi muito pouco usada como ferramenta estrutural [1]. Por outro lado, algumas hipteses estruturais podiam facilmente ser verificadas em compostos inicos simples com base em dados de PD experimentais. Esses dados foram colecionados em sua maioria atravs da tcnica de Debye-Scherrer-Hull. Neste caso, usavam-se traos de PD como impresses digitais em anlise qualitativa de materiais cristalinos de diferentes origens. Assim, por mais de 50 anos PD foi um mtodo analtico muito difundido para a caracterizao de solos, minrios, rochas, metais, ligas e outros artigos. Os mtodos experimentais seguiram esta evoluo, permitindo registrar padres de alta resoluo, com razes sinal-rudo melhores. Alm disso, foram desenvolvidas geometrias de difrao mais simples e acessrios teis, como cmaras de altas ou baixas temperaturas. Neste contexto, tambm foram desenvolvidos os difratmetros de Bragg-Bretano-Parrish, junto com outros como: Guinier, Transmisso, Seeman-Bohlin etc., que foram depois aperfeioados por ticas melhores, filtros beta, monocromadores e detectores. Enquanto isso, j em 1957 havia sido coletado e publicado um grande nmero de dados de difrao confiveis, na forma ASTM ou cartes de JCPDS-PDF, para anlise qualitativa rpida, usando procuras manuais baseadas nos mtodos de Hanawalt ou Fink [1]. At o incio da dcada de 80 muitos dos difratmetros de p no eram automatizados e forneciam apenas registros em papel dos padres de difrao. Aliando-se a esse fato, muitos instrumentos no tinham motores de passo nem fontes de alta intensidade (>1.0 kW). Desta maneira, durante muito tempo, anlises qualitativas e semiquantitativas eram lentas, tediosas, mas depois de alguma

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prtica, bastante seguras. interessante comentar que em funo desta segurana, a PD tornou-se uma ferramenta muito importante na cincia forense e nas reivindicaes de patentes [2]. Foi apenas com o desenvolvimento de fontes de alta intensidade, geradores de 2-3kW, anodo giratrio, luz sncrotron, ticas melhores, monocromadores baratos e sistemas computadorizados (que permitem o controle do difratmetro e da aquisio de dados digitalizados simultaneamente) que aqueles mtodos de PD experimentaram uma nova era. Vrios grupos ao redor do mundo se puseram a desenvolver programas especficos e algoritmos numricos capazes de resgatar toda a informao possvel a partir de um padro de difrao de uma fase cristalina complexa, ou de uma mistura de fases. Reconheceu-se ento que, se fossem inventados dispositivos eletrnicos e tcnicas numricas adequadas, seria possvel desenredar a estrutura cristalina tridimensional da projeo unidimensional de sua rede recproca, atravs do diagrama de PD (difratograma) [2].

4.2 Sobre as fontes de raios X e Filtros

A fonte mais antiga de produo de raios X o tubo selado a vcuo. O esquema geral de um tubo de raios X apresentado na figura abaixo. Vrios materiais diferentes podem ser empregados como nodo, sendo Cu, Cr, Fe e Mo os mais usuais (ver tabela 3.1); da mesma maneira, distintas geometrias construtivas podem ser empregadas acarretando em feixes de raios X com diferentes formas e intensidades por unidade de rea.

Figura 4.1 Esquema de um tubo de raios X [3].

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Tabela 4.1 Caractersticas dos diferentes tubos de raios X [4].

Tipo de Tubo Dimenses do rea Focal Dimenses Virtuais (take off 6) 2 foco (mm) (mm ) Foco ponto (mm) Foco linha (mm) Foco fino longo Foco fino Foco Normal Foco largo 0,4 x 12 0,4 x 8 1,0 x 10 2,0 x 12 4,8 3,2 10,0 24,0 0,4 x 12 0,4 x 8 1,0 x 10 2,0 x 12 0,04 x 12 0,04 x 8 0,10 x 10 0,20 x 12

A escolha do tipo de nodo est relacionada principalmente natureza do material a ser analisado, j a seleo do tipo de tubo e do foco a ser empregado (linha ou ponto) est relacionada aplicao a ser efetuada. O espectro de radiao gerado a partir do tubo de raios X no monocromtico, apresentando tanto a radiao caracterstica do material empregado como nodo (K, K, etc), como tambm do espectro contnuo. Visto a necessidade de se empregar uma radiao monocromtica, h que se remover a radiao referente a linha K e tambm parte do espectro contnuo emitido pelo tubo (ver figura 3.3). Duas alternativas podem ser consideradas para tanto; a primeira considera a utilizao de filtros, cujas bandas de absoro de radiao permitam a passagem da radiao referente a linha K e a remoo (absoro) da linha K. A segunda alternativa, a mais freqentemente usada, consiste na utilizao de um filtro monocromador, situado na passagem dos raios X entre a amostra e o detector ou entre o tubo e a amostra, o qual, atravs do princpio da difrao de Bragg, permite exclusivamente a passagem da radiao com o comprimento de onda de interesse (K). A utilizao do filtro monocromador aps a amostra apresenta ainda a vantagem adicional de remover radiaes oriundas de espalhamentos no coerentes, resultantes da interao dos raios X com a amostra [4].

4.3 Mtodo do p
4.3.1 Cmara de Debye-Scherrer

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A cmara de Debye-Scherrer compreende um dispositivo cilndrico no qual a amostra em p acondicionada em um capilar posicionado bem no centro da cmara sobre o qual focalizado um fino feixe de raios X. Cones de difrao de raios X so ento gerados a partir da amostra, sendo que uma parcela destes sensibiliza um filme fotogrfico posicionado na parede interna da cmara, possibilitando a coleta de raios X desde, praticamente, 0 at 180 em termos de 2 . Essa tcnica, introduzida na metade da dcada de 1910, foi bastante empregada at os anos 80. Sua utilizao hoje especfica, estando adequada a situaes em que critica a disponibilidade de amostra (<100mg) e estudos de amostras monocristalinas [4].

Figura 4.2 Cmara de p ou Cmara de Debye-Scherrer [5].

4.3.2 Difratmetro de raios X com geometria Bragg-Bretano Alguns difratmetros de raios X disponveis no mercado so dominados pela geometria parafocal Bragg-Bretano; seu arranjo geomtrico bsico pode constituir-se de um gonimetro horizontal (2) ou vertical (2 ou ). Para a geometria 2, o gonimetro, acoplado aos acessrios de recepo do feixe difratado, move-se (H) com velocidade angular (2/passo) sobre o eixo P e rotaciona a amostra (P) com metade desta velocidade angular (/passo). O raio do crculo do gonimetro fixo, apresentando iguais distncias do tubo gerador de raios X amostra e da amostra fenda de recepo D (LP = PD). O plano do crculo focal contm os raios incidentes e difratados, isto , a fonte, a amostra e a fenda de recepo.

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Figura 4.3 Geometria Bragg-Bretano de um difratmetro de raios X, mostrando as diferentes fendas utilizadas [4].

A partir da fonte, os raios X atravessam a fenda Soller ou colimadores paralelos (G), a fenda de divergncia (B) e irradiam a superfcie da amostra (C). Os raios difratados em determinado ngulo 2 convergem para a fenda de recepo (D). Antes ou depois da fenda de recepo pode ser colocado um segundo conjunto de colimadores (E) e uma fenda de espalhamento (F). Um monocromador do feixe difratado pode ser colocado aps a fenda de recepo, na posio da fenda de espalhamento [4].

4.4 Metodologia empregada nas medidas

4.4.1 Medidas realizadas nos Laboratrios de Fsica da UFES As medidas de difrao de raios X realizadas nos laboratrios de fsica da UFES utilizaram a geometria parafocal Bragg-Bretano. Elas foram realizadas num aparato experimental composto por um difratmetro da marca Rigaku, modelo 4053A3, alimentado com 220 VAC 60Hz, capaz de fornecer uma tenso na faixa de 20 a 60 kV e uma corrente eltrica na faixa de 2 a 80 mA. Foi usado um tubo de raios-X de Cobre, da marca Philips, n 2053/65 (Max. 1kW), tenso de alimentao mxima de

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40 kV e potncia fornecida mxima de 800 W. Este tubo refrigerado por um circuito fechado de gua a uma temperatura de 12C e presso 1,7g/cm2 [2]. Para o alinhamento do feixe foi utilizado um conjunto de trs fendas colimadoras onde uma foi colocada antes do porta amostras e as outras duas foram colocadas aps o porta amostras. Foi utilizado um monocromador secundrio de LiF. A varredura do ngulo foi feita por um gonimetro, modelo SG-9 com capacidade de varredura angular de 3 a 120, alimentado por uma fonte independente de alta tenso. Aps o monocromador acopla-se um detector cintilador, posicionado sobre o gonimetro de forma a receber a radiao K difratada pelo monocromador. Todo o processo de medida e aquisio de dados controlado por uma placa eletrnica responsvel pela automao do sistema. Esta placa controla o passo do gonimetro, a abertura do obturador e faz a filtragem da radiao Kmdio do Cu com comprimento de onda = 1,5418 (angstrns). O equipamento foi alinhado e aferido com base no espectro do Si (99,999%) [2].

4.4.2 Medidas realizadas no LNLS Algumas medidas tambm foram realizadas no LNLS, Laboratrio Nacional de Luz Sncrotron, em Campinas, SP, na linha de luz XPD.

Figura 4.4 Fonte brasileira de Luz Sncontron [6].

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A luz sncrotron uma intensa radiao eletromagntica produzida por eltrons de alta energia num acelerador de partculas. A luz sncrotron abrange uma ampla faixa do espectro eletromagntico: Raios-X, Luz Ultravioleta e Infravermelha, alm da Luz Visvel.

Figura 4.5 - Eletrom que curva a trajetria dos eltrons no acelerador circular. O acelerador do LNLS tem doze dipolos. Cada um deles curva a trajetria dos eltrons em 30 graus. Um dipolo completo a maior pea do acelerador e pesa cerca de sete toneladas [6].

Denomina-se Linha de Luz a instrumentao que acoplada ao anel de armazenamento de eltrons. Em cada linha de luz chegam os feixes de ftons (luz sncrotron), gerados pelos eltrons que circulam no anel de armazenamento. na linha de luz que os feixes so "preparados" para ter utilidade nas estaes experimentais utilizadas pelos cientistas. Ou seja, em cada linha h um componente chamado monocromador que define a caracterstica da luz que o pesquisador utilizar em seu experimento cientfico. Cada linha de luz tem caractersticas prprias e nela se faz determinado tipo de trabalho [6]. A Estao Experimental instalada numa linha de luz. Cada estao formada por equipamentos e instrumentao que permitem ao cientista realizar pesquisas utilizando a luz sncrotron. Uma estao experimental inclui o sistema porta-amostra (no qual colocada a amostra do material que se quer analisar), aparelho

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goniomtrico (que permite posicionar a amostra para receber adequadamente a incidncia da luz sncrotron) e detetores de feixes de ftons espalhados ou transmitidos (que registram os acontecimentos fsicos que ocorrem nos tomos e molculas do material em estudo)[6]. O anel de armazenamento de eltrons existente no LNLS tem capacidade para 24 linhas de luz.

Figura 4.6 Mapa das linhas de luz do LNLS [6].

Para a realizao de nossas medidas utilizamos a linha XPD (difrao de p usando raios X sintonizvel entre 5keV e 14keV . A seguir temos uma descrio desta linha.

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D10B-XPD DIFRAO DE RAIOS-X EM POLICRISTAIS (5 - 14 KeV, 1.1-2.5 ) Essa linha opera na faixa de raios-X com energia entre 5 14 KeV . Utilizada em estudos de fsica do estado slido, qumica e biologia. Dedicada a medidas de difrao de p de alta resoluo/mdia intensidade ou alta intensidade/mdia resoluo. No modo de alta resoluo, cristais analisadores de Si(111), Si(333), Ge(111), e Ge(220) podem ser empregados, sendo este modo apropriado para soluo e/ou refinamento de estruturas cristalinas onde desejada mnima sobreposio entre picos de Bragg. No modo de alta intensidade no se emprega cristal analisador, ou alternativamente usa-se um analisador de Grafite (002). Este modo normalmente utilizado em amostras com menor grau de perfeio cristalina, onde a resoluo instrumental no um fator limitante nas larguras dos picos de Bragg [6]. Aplicao: Caracterizao estrutural de policristais. Estudo de transies de fase cristalogrficas com possibilidades de controle de temperatura (10K - 450K ou 293 1273 K). Fonte: m defletor D10, fluxo na posio do detetor: ~1 x1010 ftons/s.mrad @ 8 keV. Monocromador: Monocromador de duplo cristal de Si (111) com sada constante; faixa de energia: 5-14 keV. Sistema focalizante: Espelhos de luz branca permite focalizao vertical e colimao do feixe de raios-X. Focalizao sagital (10mrad) por curvatura elstica do segundo cristal. Goniometria: Difratmetro de seis crculos (Huber) com analisador -2 e analisador de polarizao. Detetores: Cintiladores Cyberstar.

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Instrumentao complementar: Criostato comercial de circuito fechado de hlio (10K - 450K). Forno desenvolvido pela equipe do LNLS (293K - 1273K) [6].

4.5 Obteno e preparao das amostras

Para que fosse possvel realizar esse trabalho, precisvamos que as pessoas que possussem pedras de rins pudessem doar estas pedras para que ns realizssemos o estudo destas. Tivemos acesso gratuito a alguns meios de comunicao de massa como: Gazeta, Rdio CBN e Tribuna onde, pudemos divulgar gratuitamente nossa pesquisa. Com isso a populao tomou conhecimento do estudo que j vinha sendo realizado na UFES com clculos de rins e clculos biliares e ento as doaes destes clculos foram feitas. Para a realizao deste trabalho conseguimos armazenar 65 amostras de pedras de rins. O procedimento adotado foi tal que, ao entregar o clculo renal, o doador respondia a um questionrio que descrevia as informaes sobre: sexo, idade, profisso, residncia, fatores hereditrios, hbitos alimentares, caractersticas morfolgicas da pedra doada e quadro clnico do paciente. O clculo era catalogado, fotografado e recebia um cdigo de identificao que o mesmo cdigo associado ao questionrio do doador. Acreditamos que esse procedimento permitir que no futuro, com maior estatstica, se faa um estudo que possa correlacionar as caractersticas do doador com o tipo de clculo que ele desenvolveu em seu rim. Com as pedras catalogadas e devidamente identificadas, preparvamos as mesmas para submet-las aos raios-X. Esta preparao foi feita de modo que no ocorresse nenhuma contaminao da amostra nem do ambiente. Para isso usvamos luvas, mscaras e produtos para a higienizao do local e dos materiais utilizados na moagem.

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A moagem das pedras foi feita manualmente num pilo de pedra gata e essas pedras foram modas vigorosamente de modo que os gros (amostras microcristalinas) passassem numa peneira de 53m. Isso foi feito para que cada amostra fosse distribuda no porta-amostra do difratmetro da maneira mais randmica possvel evitando com isso a influncia de direes preferenciais no padro de difrao de raios-X medido. As primeiras medidas realizadas no foram bem sucedidas, pois o espectro obtido correspondia a uma mistura entre o material analisado e o substrato de vidro amorfo. Para a soluo desse problema foi construdo um porta-amostra com as dimenses da rea da amostra reduzida. Alinhando-se o feixe de raios X a esse porta-amostra foi possvel otimizar a rea iluminada de forma a manter sua incidncia sobre a regio da amostra durante a medida. Esta tcnica de reduo da rea exposta da amostra foi objeto da dissertao de Azevedo [7] e produziu excelente resultado [2].

4.6 Procedimento para avaliao das fases presentes na amostra

4.6.1 Identificao dos compostos Como procedimento padro, as medidas foram realizadas varrendo-se um ngulo de 2min=4 at 2max=80 e com passo de 0,05. Com esse intervalo obtm-se um espectro que caracteriza a amostra. A principal aplicao da difrao de raios X refere-se identificao de compostos cristalinos, sejam eles inorgnicos ou orgnicos. Os planos de difrao e suas respectivas distncias interplanares, bem como as densidades de eltrons ao longo de cada plano cristalino, so caractersticas especficas e nicas de cada substncia cristalina, da mesma forma que o padro difratomtrico por ela gerado, como se fosse uma impresso digital. Um banco de dados contendo informaes cristalogrficas bsicas e algumas propriedades fsicas de compostos cristalinos mantido e continuamente atualizado

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pelo ICDD, International Center for Diffraction Data, com sede nos EUA e que chamamos de fichas PDF[4]. O reconhecimento das fases presentes em cada pico de difrao foi feita comparando-se os ngulos e intensidades das fichas PDF com os ngulos e intensidades encontrados em cada difratograma. As fichas PDF utilizadas foram as mesmas selecionadas no estudo de Azevedo [7], so elas: Ficha 20-0231 para a identificao do CaC2O4. H2O (Oxalato de Clcio Monohidratado). Ficha 17-0541 para a identificao do CaC2O4. 2H2O (Oxalato de Clcio Dihidratado). Ficha 44-0761 para a identificao do (Fosfato de Clcio Hidratado). Ficha 31-1982 para a identificao do C4N4O3H5 (cido rico).

Vrias estratgias de identificao podem ser empregadas, sendo que a dificuldade de identificao aumenta progressivamente com a elevao do nmero de fases cristalinas presentes na amostra. Os procedimentos ou estratgias de identificao manual mais comuns so: a busca por compostos e o mtodo Hanawalt [4]. Na busca por compostos temos um conhecimento inicial e adequado de que padres podemos encontrar. Dessa forma, ao encontrar um deles subtramos o mesmo do espectro e analisamos o espectro residual. No mtodo Hanawalt no temos a priori o conhecimento sobre os padres que podemos encontrar. Sendo assim, ordenamos os picos de difrao por ordem de intensidade. A partir da tentamos a identificao de um composto. Ao encontr-lo subtramos o memo do espectro e repetimos o procedimento. (ver fig. 4.3)

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Figura 4.7 Estratgias de identificao de fases por natureza de composto e pelo mtodo Hanawalt [4].

A partir da dcada de 90, com o auxlio de microcomputadores, sistemas automticos de busca por mtodos booleanos e lgica Fuzzy passaram a ser largamente empregados no auxlio identificao das fases cristalinas por difrao de raios X. Nestes procedimentos, trs a dez picos mais intensos de cada fase presente no banco de dados so comparados com o difratagrama da amostra, atribuindo-se crditos e penalidades para cada pico difratado no que se refere a sua presena/ausncia, intensidade difratada e deslocamento da distncia interplanar. Ao final do processo de busca e comparao, os valores dos resultados so expressos em ordem decrescente de pontuao, seguindo-se a avaliao final por parte do usurio [4].

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4.6.2 Avaliao das fases Cada amostra nos forneceu um espectro que precisava ser interpretado e analisado. A avaliao das fases (compostos) presentes em cada espectro feita ajustando-se gaussianas aos picos de difrao. Tomando-se pequenos intervalos, de at quatro picos, faz-se o ajuste repetindo para todos os picos do espectro. Aps identificarmos as fases, calculamos a rea total sob cada pico. Com a soma das reas de cada pico obtemos a rea total do espectro. Admitimos ento, com pequena margem de erro (5%), que a rea de uma fase dividida pela rea total do espectro representa a proporo da fase identificada na amostra. Esse procedimento foi validado pela calibrao feita e descrita na dissertao de mestrado de Kuplich [2]. 4.6.3 Avaliao dos parmetros do cristal Considerando-se que o padro do difratograma de um material cristalino funo da sua estrutura cristalina, possvel se determinar os parmetros de seu reticulado (a, b, c, , e da clula unitria) desde que se disponha de informaes referentes ao sistema cristalino, grupo espacial, ndices de Miller (hkl) e respectivas distncias interplanares dos picos difratados. Este procedimento pode ser efetuado tanto por mtodos manuais para cristais de elevada simetria (sistemas cbico, hexagonal e tetragonal), como mais facilmente a partir de diversos programas de computador, que permitem um rpido processamento para cristais de qualquer sistema cristalino, independente de sua complexidade [4]. Para fazer o refinamento dos parmetros da estrutura foi utilizado o programa CELREF, [8]. CELREF um programa de refinamento dos parmetros de clula do cristal para as difraes de raios X de p e nutrons que utiliza o mtodo dos mnimos quadrados no-lineares. A forma de executar o programa foi relatada por Azevedo em sua dissertao [7]. Com este programa podemos refinar alguns parmetros do cristal estudado ajustando os valores tericos (calculados pelo CELREF) e os valores experimentais (observados na medida de difrao de raios X). Em nosso estudo trabalhamos com

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cinco parmetros independentes: a, b e c, a origem do ngulo zero e o ngulo beta entre a e c. Em um arquivo os valores tericos so calculados pelo CELREF a partir dos dados da ficha PDF. Usamos os seguintes dados nesta anlise: o comprimento de onda, mnimo e mximo, o cdigo do tipo da rede os cdigos de extino e os dados da rede a, b e c e os ngulos , , . A partir da o CELREF gera todos os cdigos de extino do composto. Em outro arquivo fornecemos a identificao da amostra, o vnculo de refinamento, o nmero mximo de ciclos de refinamento, o comprimento de onda, origem do zero, os parmetros de rede os ngulos e seus possveis refinamentos. Por ltimo uma tabela com as extines sistemticas e os ngulos observados na medida. Aps executar o programa os resultados obtidos no clculo so armazenados em um arquivo de sada. Neste arquivo encontramos os valores de entrada e os valores finais dos parmetros fornecidos anteriormente e seus respectivos desvios. Uma tabela com as extines sistemticas, os valores para observado e calculado e as diferenas entre eles. O ajuste feito atravs do mtodo dos mnimos quadrados no lineares [2]. Um exemplo de um arquivo de sada pode ser encontrado no apndice B. Neste processo foram determinados os valores dos parmetros de rede (a, b e c) e o volume do cristal de algumas de nossas amostras.

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REFERNCIAS DO CAPTULO 4
[1] MASCIOCCHI, N. The contribuition of powder diffraction methods to structural crystallography. Rietveld and ab-initio techniques. The Rigaku Journal v.14, n.2, p.9-20, 1997. [2] KUPLICH, L. Estudos sobre o CaC2O4.H2O presente em pedras de rins. 2004. Dissertao (Mestrado em Fsica) - Programa de Ps-Graduao em Fsica, Universidade Federal do Esprito Santo, Vitria, 2004. [3] Site www.radiacoesionizantes.com.br, acessado em 10 de abril de 2008. [4] KAHN, H., Difrao de Raios X, Universidade de So Paulo, Escola Politcnica, disponvel em: www.angelfire.com/crazy3/qfl2308, acessado em: 16 de novembro de 2007. [5] Site www.perso.fundp.be/~jwawters/XRD/diffraction.html, acessado em 22 de maro de 2008. [6] Laboratrio Nacional de Luz Sncrotron, disponvel em: www.lnls.br, acessado em 13 de agosto de 2006. [7] AZEVEDO, N. E. O., Estudo sobre pedras de rins atravs da tcnica de difrao de raios X de p. 2002. 111f. Dissertao (Mestrado em Fsica)- Programa de PsGraduao em Fsica, Universidade Federal do Esprito Santo, Vitria,2002. [8] LAUGIER, J., BOCHU, B., CELREF Programme daffinement des parameters de maille partir dun diagramme de poudre, INPG.

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Captulo 5
Resultados Obtidos
Para este trabalho tivemos disponveis 60 amostras de pedras de rins de doadores residentes no estado do Esprito Santo. A anlise cristalogrfica destacou que 20% das amostras apresentam somente cristais de oxalato de clcio e os 80% restantes apresentam cristais de cido rico, fosfato de clcio e oxalato de clcio ou uma mistura destes. Nestas amostras foram encontradas as seguintes substncias (fases): Oxalato de Clcio Monohidratado; Oxalato de Clcio Dihidratado; Fosfato de Clcio; cido rico; L-cistina; Estruvita; Bruchita.

As quantidades de cada uma destas fases podem ser verificadas na tabela a seguir, que relaciona o cdigo de identificao de cada amostra com a porcentagem das substncias que as compe. Essa identificao foi feita com base nos difratogramas do apndice C.

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Tabela 5.1 - Porcentagem de cada fase encontradas nas amostras. (NI No Identificado)

IDENTIFICAO (%) cido Cdigo ST502 ST503 ST504 ST506 ST508 ST509 ST510 ST512 ST514 ST516 ST517 ST518 ST520 ST521 ST522 ST523 ST524 ST525 ST526 ST530 ST531 ST532 ST534 ST536 ST539 ST540 ST541 ST542A ST542B Sexo OCM OCD Fosfato rico L-cistina M 100 M 65 35 M 29 3 68 F 100 F 100 M 89 11 M 100 M 50 12 38 M 66 26 8 M 51 18 31 F 28 7 65 M 100 F 82 F 60 20 11 9 M 10 M 76 23 1 M 94 6 F 100 M 84 6 M 100 F 95 5 F 100 M 92 8 F 89 11 M 42 14 44 F 100 M 42 58 F 54 F 54 42 IDENTIFICAO (%) cido Sexo OCM OCD Fosfato M 46 31 M 100 M 88 M 15 M 63 34 M M M F M F 26 21 F 28 22 26 F 56 Estruvita Bruchita NI 18 90 10 46 -

Cdigo ST544 ST545 ST546 ST547 ST548 ST549 ST550 ST551 ST552 ST553 ST554A ST554B ST554C

rico L -cistina Estruvita Bruchita NI 12 67 18 25 28 24 44 -

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ST555A ST555B ST555C ST556 ST557 ST558 ST559 ST560 ST561A1 ST561A2 ST561B ST562A1 ST562 ST563 ST564A ST565A ST565B

M M M M F F M F M M M F F M F M M

45 26 42 18 48 100 61 28 66 100 77

25 15 33 7 24 39 39 23

30 11 25 28 26 21 -

22 -

100 100 -

21 -

26 54 -

7 12 -

Do total de amostras estudadas encontramos 20% delas com composio nica de Oxalato de Clcio Monohidratado (CaC2O4.H2O), 15% eram compostas por uma mistura de Oxalato de Clcio Monohidratado e Dihidratado (CaC2O4.2H2O), 8% compunham-se dos dois tipos de Oxalato de Clcio misturados ao Fostato de Clcio (Ca10(PO4)6(OH)2), 3% eram compostas de L-cistina e o restante ou era composto por outro tipo de mistura, ou no teve suas fases identificadas. Aproximadamente 45% destas amostras possuam em sua composio o Oxalato de Clcio Dihidratado (CaC2O4. 2H2O) que o objeto de ateno deste estudo. Veja na tabela a seguir a porcentagem de CaC2O4. 2H2O encontrado em cada amostra bem como o sexo e a idade do doador desta amostra:

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Tabela 5.2 Amostras que contenham alguma porcentagem de CaC2O4.2H2O.

Cdigo da amostra ST503 ST504 ST509 ST512 ST514 ST516 ST517 ST521 ST523 ST526 ST531 ST534 ST536 ST539 ST542B ST544 ST548 ST554A ST554B ST555A ST555C ST556 ST557 ST558 ST561A2 ST563 ST565B Idade 51 40 36 47 48 48 57 51 51 59 28 49 45 39 45 28 45 59 59 58 58 44 37 43 23 35 13

Sexo M M M M M M F F M M F M F M F M M F M M F F M M M

% CaC2O4.2H2O 35 3 11 12 26 18 28 20 23 6 5 8 11 14 42 31 34 21 22 25 15 33 7 24 39 39 23

Verificamos que para as amostras de pedras de rins recolhidas na regio do Estado do Esprito Santo, o composto por ns estudado neste trabalho, Oxalato de Clcio Dihidratado, aparece com maior freqncia em indivduos do sexo masculino. Esse dado relevante pois se compararmos com o estudo feito por Azevedo [1], que possua amostras totalmente distintas das analisadas neste trabalho, veremos que tambm apontavam uma freqncia maior do Oxalato de Clcio Dihidratado em
Azevedo (2002) indivduos do sexo masculino. Veja aCosta comparao nos grficos a seguir: Fanny

33%

(2008)

30%

Grfico 5.1- Comparao da freqncia do Oxalato de Clcio Dihidratado por sexo no estudo atual frente ao estudo de Azevedo [1].

67%
Masculino Feminino Masculino

70%
Feminino

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Conseguimos determinar alguns dados cristalogrficos do CaC 2O4. 2H2O: os seus parmetros de rede a, b e c bem como o seu volume. Observe na tabela abaixo:

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Tabela 5.3 - Valores dos parmetros de rede (a, b e c) e volume do cristal das amostras.

CDIGO DA AMOSTRA ST503 ST504 ST509 ST512 ST514 ST516 ST517 ST521 ST523 ST526 ST531 ST534 ST536 ST539 ST542B ST544 ST548 ST554A ST554B ST555A ST555C ST556 ST557 ST558 ST561A2 ST563 ST565B

a e b () 12.36 0,01 12.35 0,03 12.35 0,03 12.35 0,03 12.35 0,02 12.35 0,01 12.36 0,01 12.3 0,1 12.355 0,09 12.35 0,01 12.34 0,02 12,33 0,03 12.34 0,07 12.33 0,03 12,36 0,02 12,35 0,01 12,35 0,02 12,351 0,002 12,351 0,004 12,352 0,005 12.347 0.005 12.36 0,02 12,35 0,02 12,348 0,009 12,37 0,03 12,359 0,005 12,35 0,01

c () 7.3640 0,0003 7.357 0,001 7.359 0,03 7.368 0,03 7.3639 0,0004 7.3614 0,0006 7.369 0,003 7.3652 0,0006 7.3649 0,0005 7.3638 0,0007 7.371 0,002 7,364 0,01 7.37 0,01 7.3669 0,0008 7,349 0,003 7,35 0,04 7,3618 0,0008 7,3600 0,0001 7,3622 0,0001 7,365 0,001 7.3650 0.0001 7.3628 0,0009 7,357 0,001 7,364 0,001 7,334 0,007 7,3619 0,0002 7,368 0,002

Volume do Cristal ()3 1126 1 1122 3 1122 3 1124 2 1123 2 1124.4 0.9 1126 1 1121.5 0.9 1124.3 0,8 1122 1 1122 2 1122 2 1122 6 1120 3 1122 2 1124 1 1122 6 1122.8 0.2 1123.1 0.3 1123.2 0.4 1122.7 0.4 1125 2 1122 2 1122.7 0.8 1123 3 1124.6 0.4 1123 1

5.1 Grficos de Correlaes

Os dados obtidos e relacionados nas tabelas acima foram utilizados para a construo de grficos de correlaes com o objetivo de captarmos mais informaes a respeito dos cristais de Oxalato de Clcio Dihidratado que encontramos nos clculos renais dos indivduos doadores no Esprito Santo. Nos grficos a seguir relacionamos a qualidade do ajuste versus o erro na medida dos parmetros de rede a e b e c. Isso foi feito com o objetivo de avaliar a qualidade do refinamento feito nos dados de cada amostra.

77

Grfico 5.2 Qualidade do ajuste feito em funo do valor da barra de erro na medida dos parmetros de rede a e b. Homens Mulheres

Qualidade do Ajuste

0,1

0,01 0,00 0,02 0,04 0,06 0,08 0,10 Barra de Erro dos Parmetros a e b

Grfico 5.3 Qualidade do ajuste feito em funo do valor da barra de erro na medida dos parmetros de rede c.

78

0,01

Qualidade do ajuste

0,001

0,0001
Hom ens Mulheres

0,00001 0,04

0,05

0,06

0,07

0,08

0,09

0,10

Barra de Erro do Parmetro C

Os pontos que ficaram muito distantes das retas mdias traadas foram descartados na construo dos outros grficos por considerarmos que o refinamento dos dados dessa amostra no teve boa qualidade. O grfico abaixo mostra a relao entre os parmetros de rede a e b e a idade do doador quando expeliu a pedra estudada.

Grfico 5.4 Evoluo dos parmetros de rede a e b em funo da idade do doador.

79

Homens Mulheres

12,4
Parmetro a e b (ngstrons)

12,3

12,2 10 20 30 40 50 60 Idade (anos)

O que percebemos a partir da observao deste grfico a maior ocorrncia de casos de clculos renais em indivduos com idade maior que 35 anos e uma tendncia dos valores dos parmetros de rede a e b no se alterarem com a evoluo dos anos. O mesmo grfico foi feito considerando o parmetro de rede c e o resultado obtido manteve as mesmas caractersticas do grfico anterior. Observe:

Grfico 5.5 Evoluo do parmetro de rede c em funo da idade do doador de cada amostra.

80

7,40 7,39 7,38 7,37

Parmetro c (ngstrons)

Homens Mulheres

7,36 7,35 7,34 7,33 7,32 7,31 7,30 10 20 30 40 50 60 Idade (anos)

Procedemos da mesma forma para avaliar a evoluo do volume da clula unitria em funo da idade do doador e as tendncias observadas para os parmetros de rede a, b e c permaneceram as mesma.

81

Grfico 5.6 Evoluo do volume da clula unitria em funo da idade do doador de cada amostra.

1130 1128 1126

Volume (ngstrons) 3

Homens Mulheres

1124 1122 1120 1118 1116 10 20 30 40 50 60 Idade (anos)

Separamos os casos femininos e masculinos para avaliar a freqncia desses casos em funo da porcentagem do CaC2O4.2H2O encontrada em cada amostra.

Grficos 5.7 Grficos das freqncias com que aparecem os casos femininos e masculnos em funo da porcentagem de Oxalato de Clcio Dihidratado.

82

Verificamos que nas amostras estudadas que possuam em sua composio alguma porcentagem de Oxalato de Clcio Dihidratado (CaC2O4.2H2O), freqncia nos mesmos. esse percentual alm de ser maior em indivduos do sexo masculino, tambm aparece com maior

83

Captulo 6
Discusses e Concluses
6.1 O Mtodo
A difratometria de raios X fornece as informaes mais bsicas e importantes na caracterizao de slidos cristalinos. O uso da tcnica de difrao de raios X de ps para a caracterizao dos clculos renais foi muito eficiente, pois foi possvel atravs dela identificar as fases presentes em cada amostra e calcular, com um grau de incerteza, as suas respectivas porcentagens. Esta identificao permitiu distinguir claramente os tipos e quantidades de oxalatos de clcio encontrados: monohidratado e dihidratado. A difratometria de raios X tambm permite a anlise de pequenas quantidades de material (clculos), o que foi excelente para o estudo, pois os clculos so de tamanhos diversos e podem ter sido advindos de uma extrao por mtodo cirrgico, expulso espontnea ou por efeito de medicao ou por uso de qualquer outra tcnica de extrao como, por exemplo, a Litotripsia Extra Corprea por Ondas de Choque (LECO). A metodologia empregada em todo o processo permitiu tambm a utilizao dos dados fornecidos pelos doadores para as correlaes.

6.2 Componentes dos Clculos Renais

A maioria dos clculos renais estudados possua em sua composio oxalato de clcio em uma de suas formas, monohidratada e dihidratada. Podemos observar a composio geral dos clculos na tabela a seguir:

84

Tabela 6.1 Composio geral dos clculos renais.

Fase CaC2O4.H2O CaC2O4.H2O + CaC2O4.2H2O CaC2O4.H2O + CaC2O4.2H2O + fosfato CaC2O4.H2O + CaC2O4.2H2O + AcUr L-Cistina Outras Misturas Nenhuma fase identificada

n(%) 12(20) 10(17) 5(8) 4(7) 2(3) 17(30) 9(15)

H dois ou trs tipos de clculos mais comuns em homens. Dentre esses est o Oxalato de Clcio Dihidratado. Esse dado foi verificado com clareza neste estudo e este fato pode estar ligado com o tipo de alimentao que os homens tm, por exemplo, maior ingesto de protena animal e sal que as mulheres. Este fato tambm pode estar ligado aos tipos de hormnios masculinos, diferentes dos femininos.
Tabela 6.2 Porcentagem das fases por sexo

Substncia CaC2O4.H2O CaC2O4.H2O + CaC2O4.2H2O CaC2O4.H2O + CaC2O4.2H2O + fosfato CaC2O4.H2O + CaC2O4.2H2O + AcUr L-Cistina Outras Misturas No Identificada

Feminino (%) 8 3 2 3 15 3

Masculino(%) 12 14 7 7 14 12

Azevedo [1] em seu estudo identificou que dos clculos que possuam em sua composio o CaC2O4.2H2O, 70% eram de pessoas do sexo masculino. Essa tendncia, embora as amostras que ele possua em seu estudo fossem distintas da

85

que utilizamos, foi a mesma observada por ns. Dos clculos analisados em que alguma quantidade de CaC2O4.2H2O foi encontrado 67% deles eram de doadores do sexo masculino contra 33% de doadores do sexo feminino. Isso nos leva a pensar que esse um dado realmente relevante e que merece ateno. alimentao que os indivduos do sexo masculino geralmente possuem. Um estudo feito com 120 pacientes do sexo masculino que tinham recorrncia de clculos de oxalato de clcio e hipercalciria (distrbio metablico intimamente ligado a pacientes com litase clcica) durante cinco anos apontou que os pacientes que tiveram apenas uma limitada ingesto de protena animal (52 mg/dia) e sal (50mmol de cloreto de sdio/dia), sem diminuio da ingesto de clcio, obtiveram maior proteo contra a reincidncia de clculos de oxalato de clcio do que os pacientes que mantiveram uma dieta de baixa ingesto de clcio [2]. Isso acontece porque com a baixa ingesto de clcio h um aumento de absoro intestinal de oxalato [3]. O estudo mencionado acima contraria o senso comum e nos leva crer que a maior incidncia de casos masculinos, com relao presena de CaC2O4.2H2O, se deva principalmente ao tipo de alimentao e que a recorrncia deste tipo de clculo pode ser evitada atravs do consumo de uma dieta adequada. Para este estudo, tambm observamos uma tendncia de encontrarmos cido rico e fosfato de clcio em clculos de doadores do sexo masculino. Das pedras que possuam uma mistura de CaC2O4.H2O + CaC2O4.2H2O + AcUr, 100% delas eram de pessoas do sexo masculino. No caso em que tnhamos uma mistura de CaC2O4.H2O + CaC2O4.2H2O + fosfato, esse percentual era de 78% de casos masculinos contra 22% de casos femininos. H de se fazer futuramente uma investigao que possa auxiliar na deteco dos fatores proporcionam esse resultado para diferentes sexos. Como mencionamos acima a hiptese que isso se deva principalmente ao tipo de

86

REFERNCIAS DO CAPTULO 6

[1] AZEVEDO, N. E. O. Estudo Sobre Pedras de Rins Atravs da Tcnica de Difrao de Raios X de P. 2004. Dissertao (Mestrado em Fsica) - Programa de Ps-Graduao em Fsica, Universidade Federal do Esprito Santo, Vitria, 2002. [2] BORGHI, L., SCHIANCHI, T., MASCHI, T., GUERRA, A., ALLEGRI F., MAGGIORE, H. E NOVARINI A. Comparison of Two Diets for the Prevention of Recurrent Stones in Idiopathic Hypercalciuria. The England Journal of Medicine. 2002, v. 346, p. 77-84. [3] LEONETTI, F., LECHEVALLIER, E., DUSSOL, B., BERLAND, Y. Lithiase urinaire. La Revue du Praticien. 1996;1557-67.

87

APNDICE A
Glossrio
1. cido Ascrbico: vitamina C C6H8O6 ou ascorbato. 2. cido Dicetogulnico: oriundo da hidrlise bsica do cido dehidroascrbico (C6O7H8). 3. cido Glioxlico: O cido glioxlico ou cido formilfrmico um cido orgnico de frmula OHC-COOH, e o mais simples dos cidos-aldedos. 4. cido Gliclico-Oxidase: 5. Calcemia: Taxa de clcio no sangue, cujo valor normal est compreendido entre 85 e 110 mg/l. 6. Calciria: Taxa de clcio na urina; o seu valor normal de 150 a 250 mg em 24 horas. 7. Cistinria: Cistinria um distrbio gentico de transmisso autossmica recessiva caracterizada por uma excreo urinria anormal de cistina e aminocidos dibsicos cursando com formao de clculos urinrios. 8. Citratria: Alterao metablica, citrato na urina. 9. Cristalria: Presena de cristais na urina 10. Desidrogenase Ltica: uma enzima intracelular responsvel pela oxidao reversa do lactato em piruvato (CH3-CO-COOH ). amplamente distribuda em todas as clulas do organismo, concentrando-se mais especialmente no

88

miocrdio, rim, fgado, hemcias e msculos. 11. Entrica: Que se refere aos intestinos. 12. Epitaxia: Crescimento ou sobre-crescimento orientado de um cristal sobre outro pr-existente que apresenta retculo cristalino e cargas inicas semelhantes. 13. Estase: o estado no qual o fluxo normal de um lquido corporal pra. 14. Etiologia: o estudo das causas. 15. Fenilalanina: um dos aminocidos codificados pelo cdigo gentico, sendo portanto um dos componentes das protenas dos seres vivos. (C9H11NO2). 16. Glicina: um aminocido (C2O2H5N). 17. Glicoaminoglicanos: uma glicoprotena que faz parte do tecido conectivo. 18. Glicolato: Sal ou ster do cido gliclico. 19. Gluoxalato: (C2H2O3) um a-cetocido, molcula originria da deaminao de um aminocido. 20. Hidratos de Carbono: Tambm chamados hidratos de carbono, glicdios, ou mais comumente, acares, os carboidratos so compostos ternrios formados de carbono, hidrognio e oxignio em geral, na proporo de um carbono para dois hidrognio para um oxignio, ou seja: C(H2O). 21. Hidroxiprolina: (C5H9NO3) A hidroxiprolina derivada do aminocido prolina e utilizada quase exclusivamente em protenas estruturais. 22. Hipomagnesria: Alterao metablica. Quando encontra-se baixa dosagem de magnsio na urina.

89

23. Hiperoxalria: Dosagem de oxalato na urina. Ocorre devido ao aumento da absoro intestinal de oxalato, levando ao aumento da excreo renal de oxalato. 24. Idioptica: um adjetivo usado primeriamente na medicina significando surgido espontneamente ou de causa obscura ou desconhecida. 25. Litase Renal: Formao de clculos no interior de rgos e condutos. 26. Litase Clcica: caracteriza-se pela formao de clculos renais compostos por oxalato de clcio e/ou fosfato de clcio, por vezes associados a cido rico. 27. Litisico: Relativo a litase, que est acometido por litase. 28. Litognese: Formao de novos clculos no interior de rgos e condutos. 29. Litotripsia Percutnea Extracorprea: Tcnica que utiliza ondas de choque que atravessam o corpo do paciente em direo ao clculo renal, fragmentando-o em pequenas partes e sendo eliminados pela urina. 30. Nefrolitase: O mesmo que clculo urinrio, urolitase, pedras no rim, clculo renal. 31. Oxalria: Presena de cido oxlico na urina, essencialmente sob a forma de sais de clcio. 32. Recorrncia: que volta origem. 33. Serina: (C3H7NO3) A cadeia lateral metil da serina contm um grupo hidroxila, caracterizando este aminocido como um dos dois que tambm so lcoois. 34. Tirosina: (C9H11NO3) A tirosina metabolicamente sintetizada a partir da

90

fenilalanina. 35. Triptofano: (C11H12N2O2) O triptofano um aminocido aromtico, essencial, que precisa ser obtido atravs da alimentao. 36. Urease: uma enzima que cataliza a hidrlise da uria em dixido de carbono e amnia. A urease pode ser encontrada em bactrias, leveduras e vrias plantas superiores. 37. Uricemia: Taxa de cido rico no sangue, que pode ser aumentada (hiperuricemia) ou diminuda (hipouricemia) em estados patolgicos. 38. Uricosria: Eliminao do cido rico pela urina. 39. Xantina: uma base purnica, composto orgnico existente no msculo, na urina, em vrios rgos e em algumas plantas.

91

APNDICE B
Refinamento dos Parmetros do Cristal
CELREF Version 3. ---------------------------------------------------------------------------------------------------ST542B 42% CaC2O4. 2H2O ---------------------------------------------------------------------------------------------------Initial values: (Refinement keys on 2nd line) -----------------------------------------: Zero Lambda a b c alpha beta gamma volume 0.000 1.54180 12.3500 12.3500 7.3630 90.00 90.00 90.00 1123.02 0 0 1 0 1 0 0 0 H 1 0 3 4 4 1 1 0 5 0 K 0 0 3 2 4 6 4 6 0 8 L 1 2 0 2 0 1 3 2 3 0 2Th(obs) 2Th_obs-shift 2Th(Calc) 14.0206 24.2368 30.7114 40.7553 41.3969 46.3870 47.9659 50.8466 52.6236 59.9290 14.0206 24.2368 30.7114 40.7553 41.3969 46.3870 47.9659 50.8466 52.6236 59.9290 14.0029 24.1742 30.7137 40.8478 41.3549 46.3902 47.9169 50.8196 52.5646 59.9164 diff.

0.0177 0.0626 -0.0023 -0.0925 0.0420 -0.0032 0.0490 0.0270 0.0590 0.0126

Sqrt(Sum(2Th O-C)**2)/(Nref-Npar)) : 0.0517 Sqrt(Sum(2Th O-C)**2)/Nref ) : 0.0462 Final values: (Standard errors on 2nd line) ------------------------------------------: Zero Lambda a b c alpha beta gamma volume 0.000 1.54180 12.3564 12.3564 7.3493 90.00 90.00 90.00 1122.09 0.0000 0.00000 0.0158 0.0000 0.0026 0.000 0.000 0.000 1.494 H 1 0 3 4 H 4 1 1 K 0 0 3 2 K 4 6 4 L 1 2 0 2 L 0 1 3 2Th(obs) 2Th_obs-shift 2Th(Calc) diff.

14.0206 14.0206 14.0204 0.0002 24.2368 24.2368 24.2199 0.0169 30.7114 30.7114 30.6975 0.0139 40.7553 40.7553 40.8624 -0.1071 2Th(obs) 2Th_obs-shift 2Th(Calc) diff. 41.3969 41.3969 41.3326 0.0643 46.3870 46.3870 46.3732 0.0138 47.9659 47.9659 47.9631 0.0028

92

0 5 0

6 0 8

2 3 0

50.8466 52.6236 59.9290

50.8466 52.6236 59.9290

50.8224 52.6033 59.8824

Sqrt(Sum(2Th O-C)**2)/(Nref-Npar)) : 0.0493 Sqrt(Sum(2Th O-C)**2)/Nref ) : 0.0441

0.0242 0.0203 0.0466 Estas quantidades representam a qualidade do refinamento feito atravs do mtodo dos mnimos quadrados.

Para fazer o refinamento dos parmetros da estrutura foi utilizado o programa CELREF verso 3 [1]. CELREF um programa de refinamento dos parmetros de clula do cristal que utiliza o mtodo dos mnimos quadrados no-lineares. Com este programa podemos refinar alguns parmetros do cristal estudado ajustando os valores tericos (calculados pelo CELREF) e os valores experimentais (observados na medida de difrao de raios X). Em nosso estudo trabalhamos com 3 parmetros independentes: a, c e a origem do ngulo zero, pois o objeto de estudo possui uma estrutura tetragonal. Em um arquivos valores tericos so calculados pelo CELREF a partir dos dados da ficha PDF. Usamos os seguintes dados nesta anlise: o comprimento de onda, mnimo e mximo, o cdigo do tipo da rede estudada - no nosso . A partir da o CELREF gera todos os cdigos de extino. Em outro arquivo fornecemos a identificao da amostra, o vnculo de refinamento, o nmero mximo de ciclos de refinamento, o comprimento de onda, origem do zero, os parmetros de rede os ngulos e seus possveis refinamentos e ltimo uma tabela com as extines sistemticas e os ngulos 2 observados na medida. Aps executar o programa os resultados obtidos no clculo so armazenados em um arquivo de sada, como o que temos acima. Neste arquivo encontramos os valores de entrada e os valores finais dos parmetros fornecidos anteriormente e seus respectivos desvios. Uma tabela com as extines sistemticas, os valores caso a tetragonal - os cdigos de extino e os dados da rede a, b e c e os ngulos , e

93

para 2 observado e calculado e as diferenas entre eles. O ajuste feito atravs do mtodo dos mnimos quadrados no lineares calculado a partir da expresso:

1/2

(obs - calc)2 (Nref Npar)

X 100

onde obs - calc a diferena entre o observado e o calculado, NREF - NPAR a diferena entre o nmero de refinamentos e o nmero de parmetros [2]. A qualidade do ajuste dos parmetros obtidos foi avaliada com base no valor do fator R dado pela expresso:

1/2

R=

(obs - calc)2 Nref

X 100

94

REFERNCIAS DO APNDICE B
[1] LAUGIER, J., BOCHU, B. Cell parameters refinement program

from powder diffraction diagram. Laboratoire des Matriaux et du Gnie Physique Ecole Nationale Suprieure de Physique de Grenoble (INPG) . [2] KUPLICH, L. Estudos sobre o CaC2O4.H2O presente em pedras de rins. 2004. Dissertao (Mestrado em Fsica) - Programa de Ps-Graduao em Fsica, Universidade Federal do Esprito Santo, Vitria, 2004.

95

APNDICE C
Fotos de Algumas Amostras recolhidas

96

Figura C.1 - ST540

Figura C.2 - ST540 PARTIDA AO MEIO

Figura C.3 - ST560

97

Figura C.4 - ST561

Figura C.5 - ST562

98

Figura C.6 - ST563

Figura C.7 - ST549

99

Figura C.8 - ST530

100

APNDICE D
Difratogramas

101

102

103

104

105

106

107

108

109

110

111

112

113

100

st529

80

Inorm (a.u.)

60

40

20

10

20

30

40

50

60

70

80

114

100

st530

80

Inorm (u.a.)

60

40

20

0 0 10 20 30 40 50 60 70 80

2 Theta

100

st531

80

Inorm (a.u.)

60

40

20

0 0 10 20 30 40 50 60 70 80

2 Theta

115

100

st532

80

Inorm (u.a.)

60

40

20

0 0 10 20 30 40 50 60 70 80

2 Theta

116

100

xst534

80

Inorm (a.u.)

60

40

20

0 0 10 20 30 40 50 60 70 80

100

st535

80

Inorm (u. a.)

60

40

20

0 0 10 20 30 40 50 60 70 80

2 Theta

117

100

st536

80

Inorm (u.a.)

60

40

20

0 0 10 20 30 40 50 60 70 80

2 Theta

100

st539

80

Inorm (u.a.)

60

40

20

0 0 10 20 30 40 50 60 70 80

2 Theta

118

ST540
1200 1000 800

Inorm (u.a.)

600 400 200 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

distncia

100

st541

80

Inorm (u.a.)

60

40

20

0 0 10 20 30 40 50 60 70 80

2 Theta

119

100

st542

80

Inorm (u.a.)

60

40

20

10

20

30

40

50

60

70

80

2 Theta

100

st544

80

Inorm (u.a.)

60

40

20

0 0 10 20 30 40 50 60 70 80

2 Theta

120

100

st545

80

Inorm (u.a.)

60

40

20

0 0 10 20 30 40 50 60 70 80

2 Theta

ST547
100

80

Inorm (u.a.)

60

40

20

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11

Distncia ()

121

100

554 A

80

I norm(u.a.)

60

40

20

0 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

d ()

100

st546

80

Inorm (u.a.)

60

40

20

0 0 10 20 30 40 50 60 70 80

2 Theta

122

ST548
90

Inorm (u.a.)

60

30

0 3 4

Distncia ()

100

ST533

80

60

Inorm

40

20

0 10

Distnce ()

123

100

561A2

80

60

Inorm

40

20

10

D ()

ST565 A
100
100

562 A1
80

80
I noma

60

60

Inorm

40

40
20

20
0

0 1

10

d
2 3 4 5 6 7 8 9 10

Distncia

124

100

ST554 C

80

Inorma

60

40

20

0 1 2 3 4 5

d ()

ST565 B
100

80

60

Inorm

40

20

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

Distncia