METABOLISMO DE CARBOHIDRATOS, LPIDOS Y PROTENAS Aurora Hilda Ramrez-Prez y Silvia E. Buntinx Dios Depto.

de Nutricin Animal y Bioqumica Introduccin El metabolismo es el ensamble de las transformaciones moleculares y de transferencia de energa que se desarrollan sin interrupciones dentro de la clula o del organismo. Los procesos son ordenados, interviniendo procesos de degradacin (catabolismo) y de sntesis orgnica (anabolismo). Se puede distinguir el metabolismo basal (durante el sueo) y el metabolismo en actividad (actividad cotidiana). Toda actividad celular y del organismo requiere de energa, pero tambin, de nutrimentos especficos (protenas, cidos nucleicos, lpidos, minerales, vitaminas), que deben moverse a travs de membranas, con frecuencia contra un gradiente de concentracin, lo que implica un gasto importante de energa. Los niveles de energa y las concentraciones de nutrimentos deben estar disponibles constantemente y debern satisfacer la tasa de actividad y sus variaciones. La economa y la flexibilidad son los principios que gobiernan la regulacin de las vas metablicas. Los organismos deben regular sus actividades metablicas econmicamente para evitar deficiencias o excesos de productos metablicos. El organismo debe ser flexible para poder alterar su metabolismo ante cambios significativos en su medio (variaciones en las concentraciones o en el tipo de nutrientes).

Metabolismo de carbohidratos (CHOs) Los carbohidratos de la racin proporcionan ms del 50% de la energa necesaria para el trabajo metablico, el crecimiento, la reparacin, la secrecin, la absorcin, la excrecin y el trabajo mecnico. El metabolismo de CHOs incluye las reacciones que experimentan los CHOs de orgenes alimentarios o los formados a partir de compuestos diferentes a los CHOs. La oxidacin de este tipo de glcidos proporciona energa, se almacenan como glucgeno, sirven para la sntesis de aminocidos no esenciales y ante el exceso de CHOs se favorece la sntesis de cidos grasos. Gluclisis (Va de Embden-Meyerhof) La gluclisis es un proceso comn a todas las clulas, es la principal va metablica de utilizacin de hexosas, principalmente glucosa pero tambin directamente de la fructosa y de la galactosa. El conjunto de las reacciones permiten oxidar parcialmente la glucosa para formar piruvato con el objeto de liberar energa para sintetizar ATP. Esta va se desarrolla totalmente en el citoplasma celular en condiciones anaerbicas o aerbicas. Pueden considerarse dos fases dentro de esta va. 1) La primera parte o fase preparativa, la glucosa es activada y para ello se emplean dos ATP. Los enzimas

hexocinasa y glucosinasa son responsables de la conversin de glucosa a glucosa 6-P. La hexocinasa se encuentra en todos los tejidos, tiene una gran afinidad por la glucosa y otras hexosas, puede llevar a cabo la reaccin aun a bajas concentraciones del enzima y es inhibido por la glucosa 6-P. El enzima glucocinasa se localiza en el hgado y en las clulas del pncreas, tiene una baja afinidad por la glucosa, por ello es efectiva cuando la glucosa se encuentra a elevadas concentraciones, no es inhibido por el producto y est ausente o sus concentraciones son muy bajas en los rumiantes. La formacin de fructosa 1, 6-bi fosfato se lleva a cabo por la fosfofructocinasa. Este enzima est presente slo en la gluclisis, as, constituye un sitio de control. La adrenalina, el glucagon, aumento en los cidos grasos libres, el citrato, y el ATP inhiben su actividad. 2) En la segunda parte de la gluclisis o fase productora de energa, se lleva a cabo la generacin de ATP. El balance general de las reacciones de la gluclisis es el siguiente:

En condiciones anaerobias se producirn y en condiciones aerobias se generaran que entrarn al Ciclo de Krebs. El ciclo de Krebs (ciclo del cido tricarboxlico o del cido ctrico) La gluclisis y el ciclo de Krebs son consideradas las vas metablicas eje, participan en la degradacin de casi todos los componentes que la clula es capaz de degradar y proveen el poder reductor y los materiales de construccin, adems del ATP, para todas las secuencias biosintticas de la clula energa para otras actividades. El proceso general es el de metabolismo respiratorio aerbico. En estas condiciones, el es el ltimo aceptor de energa, los tomos de C de la glucosa (u otro sustrato) se oxidan por completo a y , la energa se conserva, la produccin de ATP es 20 veces ms importante en comparacin de las condiciones anaerbicas. En este ciclo se pueden mencionar dos procesos separados pero relacionados: 1) El metabolismo oxidativo, hay remocin de electrones de sustancias orgnicas y transferencia a coenzimas. 2) Hay reoxidacin de las coenzimas a travs de la transferencia de electrones al acompaada directamente de la generacin de ATP. En anaerobiosis, la gluclisis es la fase inicial del catabolismo de la glucosa. Los otros componentes del metabolismo de respiracin son el ciclo de Krebs (continuacin de la oxidacin del piruvato), la cadena de transporte de electrones y la fosforilacin oxidativa de ADP a ATP a travs de un gradiente

de protones generado en el transporte de electrones. El proceso completo genera de 36 a 38 molculas de ATP/mol de glucosa, en cada vuelta del ciclo de Krebs entran dos moles de acetil CoA y se libern 2 carbonos () lo que regenera la molcula de oxaloacetato (OAA). La serie de eventos de la descarboxilacin oxidativa del piruvato para producir acetil CoA es catalizada por el complejo de la piruvato deshidrogenasa (localizado en la mitocondria).

El primer paso del ciclo de Krebs es catalizado por el enzima citrato sintasa. El resumen del proceso es:

El ciclo de Krebs es sensible a la disponibilidad de su sustrato (acetil-CoA), a los niveles acumulados de sus productos finales, NADH y ATP, as como a las relaciones NADH/y ATP/ADP. Otros reguladores son la relacin acetil-CoA/CoA libre, acetil-CoA/succinil-CoA y citrato/oxaloacetato. La va colateral de las pentosas (ruta de la pentosa fosfato) Esta va metablica ni requiere, ni produce ATP, se desarrolla en el citoplasma de las clulas de tejidos con elevada actividad lipogentica (hgado, tejido adiposo, glndula mamaria, cerebro en desarrollo). La molcula de glucosa 6-fosfato ser transformada en finales pueden contener de 3 a 7 y una pentosa fosfato. Los carbonos de la pentosa se transferirn en piezas de 2 a 3 carbonos entre molculas. Los productos tomos de carbono que sern utilizadas posteriormente en la gluclisis (triosas fosfato), en la sntesis de aminocidos (eritrosa 4-fosfato), en la sntesis de ac: nucleicos, NAD, FAD, y CoA. En esta va se genera tambin NADPH, esta coenzima se utilizar para la sntesis de cidos grasos de cadena larga, de colesterol, la hidroxilacin de cidos grasos y esteroides, mantenimiento de la glutatin reducido (GSSG) en los glbulos rojos. Gluconeognesis Es la produccin de azcares a partir de sustancias diferentes a los carbohidratos (lactato, aminocidos, propionato y glicerol). Esta va permite tener una fuente alterna de glucosa, remover el lactato (producido por los glbulos rojos y el tejido muscular) de la sangre, remover el glicerol producido por el tejido adiposo. Esta va metablica se activa ante la disminucin de la glucosa sangunea, en el cerdo su activacin es el ayuno: cerdo, 24 h, hombre 8 y en el pollo 2 h. En el rumiante es una va constantemente activa. La gluconeognesis se encuentra bajo control hormonal (insulina, glucagon y adrenalina).

La dieta metablica de los rumiantes es la combinacin entre los productos de la fermentacin y el alimento no fermentado que escapa a la accin de las bacterias ruminales. Los rumiantes son eficientes para realizar la gluconeognesis y su aparato digestivo se ha adaptado a una falta de azcar y almidn por lo que la capacidad para el manejo de estos carbohidratos es limitada. As, los rumiantes absorben la mayora de su carbono dietario digerido (energa) en forma de cidos grasos voltiles (AGV). Los AGV son producidos por la fermentacin bacteriana de los carbohidratos en el rumen y en menor cantidad en el intestino grueso, pueden contribuir con 70-80% de la energa total que el animal necesita. Las diferencias metablicas entre rumiantes y no rumiantes se presentan en la tabla 1.

Tabla 1. Diferencia metablicas entre rumiantes y no rumiantes

Glucosa sangunea Rumiantes 40-60 mg/dL Disminuye durante el ayuno (1-2 das) No cambia despus de comer La gluconeognesis aumenta despus de comer No rumiantes 80-100 mg/dL No cambia con el ayuno Aumenta despus de comer La gluconeognesis se inhibe despus de comer principal es la

Lipognesis

La fuente principal es el La fuente acetato glucosa No tienen enzimas para la sntesis de AG a partir de glucosa Prcticamente ausente Presente

Hexocinasa heptica

Respuesta del cerebro a la Incorporacin de glucosa sin Disminuye la incorporacin de hipoglucemia cambios glucosa Cuerpos cetnicos El cerebro no los utiliza Utilizados por otros tejidos El cerebro los puede utilizar

Los rumiantes utilizan la glucosa principalmente para el crecimiento fetal y la produccin lctea. La diferencia del metabolismo intermediario de rumiantes y no rumiantes es principalmente las cantidades de carbono que pasan por ciertas vas, ya que hay una muy baja absorcin de glucosa y una elevada absorcin de acetato, propionato y butirato (AGV). Metabolismo de los cidos grasos voltiles (AGV) El acetato y butirato absorbidos son las principales fuentes de energa para oxidacin, el acetato es el precusor lipognico ms importante, en tanto el propionato es utilizado para la gluconeognesis (Figura 1).

RUMEN ACETATO

EPITELIO RUMINAL

VENA PORTA (HGADO)

HGADO

SANGRE ACETATO (90%)

LACTATO (15%) PROPIONATO PROPIONATO (85%) BUTIRATO -OH butirato Butirato Acetoacetato

Gluconeognesis

GLUCOSA

Interconversin

-OH butirato

Figura 1. Destino de los cidos grasos voltiles en el rumiante

Metabolismo de lpidos Los cidos grasos (AG) son los componentes principales de los lpidos complejos (triacilgliceroles, fosfolpidos). Los triacilgliceroles son la forma ms importante de almacenamiento de energa en los animales. Este tipo de almacenamiento presenta sus ventajas, al oxidarse el C de los AG producen ms ATP que cualquier otra forma de C, adems, los lpidos estn menos hidratados que los polisacridos, por lo que ocupan menos espacio. Los AG se incorporan a las membranas celulares. El principal rgano de interconversin y metabolismo de lpidos es el hgado. Biosntesis de cidos grasos El hgado, el tejido adiposo y la glndula mamaria son los sitios ms importantes de biosntesis de AG. La actividad del tejido adiposo predomina en el rumiante. Los principales sustratos para la sntesis de AG son el acetil-CoA y el NADPH, stos se generan en la gluclisis, el ciclo de las pentosas y el ciclo de Krebs. El enzima citrato sintasa convierte al acetil CoA y al OAA en citrato y de esta manera logra cruzar la membrana mitocondrial para salir al citoplasma; el citrato es retransformado en acetil CoA y OAA en el citosol por el enzima ATP-citrato liasa. El oxalato se convierte en malato para regresar a la mitocondria e incorporarse al ciclo de Krebs. El enzima mlica descarboxila al malato en piruvato que puede ser transportado a la mitocondria. Este enzima en el citosol genera NADPH, necesario para la sntesis de AG. Los enzimas para la sntesis de AG estn organizados en un complejo multienzimtico en los animales. El complejo es llamado cido graso sintasa que adems incluye la protena transportadora

de acilos (PTA o ACP). Slo hay una reaccin en la sntesis de AG que no ocurre en el complejo, sta es la formacin de malonil-CoA a partir de acetil-CoA la cual es catalizada por la acetil-CoA carboxilasa. El complejo cido grasa sintasa cataliza: la unin entre el acetil-CoA y malonil-CoA, una reaccin de condensacin, reacciones de reduccin, de continuacin, de elongacin, desaturacin. La sntesis de AG produce principalmente cido palmtico, que ser el sustrato para producir una variedad de AG. En los rumiantes, el acetato es la fuente ms importante para la sntesis de AG. Los enzimas ATPcitrato liasa y mlica no funcionan. Por esta razn los rumiantes recurren al ciclo de las pentosas, a la oxidacin de isocitrato a -cetoglutarato en el citosol y la desviacin isocitrato-oxaloacetato en la mitocondria, para conseguir equivalentes reductores (NAPDH). La primera reaccin limitante de la sntesis de AG es la sntesis de malonil-CoA. El enzima acetil-CoA carboxilasa es estimulado por elevadas concentraciones de citrato y altas concentraciones de ATP. Por el contrario es controlada por mecanismos de fosforilacin y desfosforilacin. El enzima fosforilado es menos activo. La insulina promueve la desfosforilacin y el glucagon la fosforilacin. Oxidacin de los cidos grasos Cuando el aporte de energa de la dieta es insuficiente, el animal responde con la seal hormonal, que se transmite al tejido adiposo por medio de la liberacin de adrenalina, glucagon u otras hormonas. stas se unen a la membrana de la clula adiposa y estimulan la sntesis del quien activar a una protena quinasa que fosforila y activa a la triglicrido lipasa. Los triglicridos se hidrolizan a diglicridos, liberando un cido graso del carbono 1 3 del glicerol. Los diglicridos y los monoglicridos son hidrolizados rpidamente para producir cidos grasos y glicerol. El cido graso no esterificado sale a la sangre y se une a la albmina para ser transportado a otros tejidos, y el glicerol ser utilizado por el hgado para la produccin de glucosa. Los AG se oxidan en el carbono , de ah el nombre de -oxidacin y se degradan a cido actico y un cido graso con dos carbonos menos:

La -oxidacin inicia con una reaccin de deshidrogenacin (acil-CoA deshidrogenasa), utilizando a FAD como coenzima. El producto de esta reaccin es un enoil-CoA y . El enoil-Coa es hidratado por la enoil-CoA hidrasa, se produce un hidroxiacil-CoA. El grupo hidroxilo de este compuesto es oxidado por y la hidroxiacil-CoA deshidrogenasa, se produce -cetoacil-CoA y NADH. El ltimo paso es catalizado

por una tiolasa, produciendo acetil-CoA y un acil-CoA, con dos carbonos menos que el sustrato inicial. Estos pasos se repiten hasta que en la ltima secuencia de reacciones el butiril-CoA es degradado a dos acetil-CoA. En los rumiantes, la oxidacin de AG de cadena impar puede representar tanto como el 25% de sus requerimientos de energa. La oxidacin de un AG de 17 carbonos dara por resultado 7 acetil-CoA y un propionil-CoA. El propionil-CoA es tambin un producto de la degradacin de valina e isoleucina. El propionil-CoA es convertido en succinil-CoA y ser utilizado en el ciclo de Krebs.

Metabolismo de protenas Las protenas funcionan como enzimas, para formar estructuras, pero adems los aminocidos pueden utilizarse como fuente de energa o como sustratos para otras rutas biosintticas. En los animales superiores, los aminocidos provienen de la protena de la dieta o por recambio metablico de protena endgena. El exceso de aminocidos se degrada parcialmente para dejar esqueletos de carbono para biosntesis o se degradan totalmente para producir energa. Los aminocidos son catabolizados a travs de la remocin del nitrgeno (N), a travs de dos rutas principales: la transaminacin y la desaminacin oxidativa. En la transaminacin, un aminocidos dona su grupo amino al -cetoglutarato (ciclo de Krebs) se forma un -cetocido y glutamato, el coenzima utilizado es principalmente el piridoxal fosfato. Esta reaccin es reversible y se encuentra ampliamente distribuida en los tejidos, especialmente: cerebro, corazn, rin, hgado. Slo la lisina, treonina, prolina e hidroxiprolina no sufren transaminacin. La regeneracin del -cetoglutarato se consigue mediante la desaminacin oxidativa del glutamato catalizada por la glutamato deshidrogenasa unida al NAD. El amoniaco resultante de la desaminacin de a.a. se transforma en urea en el hgado para destoxificarlo. En muchos rganos (cerebro, intestino, msculo esqueltico), la glutamina es el transportador del exceso de N. En el msculo esqueltico existe el ciclo glucosa-alanina para transportar el amoniaco al hgado bajo la forma de alanina. La formacin de urea involucra una serie de pasos de la ornitina en arginina. La urea se forma a partir de la arginina. El ciclo de la urea utiliza cinco enzimas: argininosuccinato sintasa, arginasa, arginosuccinato liasa (los tres se encuentran en el citosol), ornitina transcarbamoilasa y carbamoil

fosfato sintasa (presentes en la mitocondria). El amonio libre formado en la desaminacin oxidativa del glutamato se convierte en carbamoil fosfato, reaccin catalizada por la carbamoil fosfato sintetasa I y que requiere dos ATP. El carbamoil fosfato transfiere su grupo amino a la ornitina y forma citrulina. sta debe transportarse a travs de la membrana mitocondrial al citosol, donde se formar la urea.

En cada vuelta del ciclo de la urea se eliminan dos N, uno que se origina de la desaminacin oxidativa del glutamato y el otro del aspartato. Como el se hidroliza, se necesitan 4 fosfatos de alta energa para formar una molcula de urea. El fumarato es el vnculo entre el ciclo de la urea y el de Krebs. Despus de la desaminacin, el esqueleto de carbono de los aminocidos puede ser utilizado para la produccin de energa. El catabolismo de los aminocidos involucra su conversin a intermediarios en el ciclo de Krebs, su conversin a piruvato o a acetil-CoA. Este ltimo puede oxidarse en el ciclo de Krebs o puede convertirse en acetoacetato y lpidos. Los aminocidos que forman acetoacetato son cetognicos, ya que no pueden convertirse en glucosa. Los aminocidos que forman -cetoglutarato o cidos dicarboxlicos de cuatro carbonos estimulan el funcionamiento del ciclo de Krebs y son considerados glucognicos. La tabla 1 presenta algunos productos derivados de los aminocidos. Tabla 1 Productos derivados de los aminocidos Aminocido Producto Histidina Histamina Carnosina (-alanilhistidina) y anserina (gpo. ) Tirosina Melanina Catecolaminas Hormonas tiroideas NAD(P) Serotonina Melatonina Esperimina, espermidina y putrescina

Funcin Vasodilatador Amortiguadores intracelulares en el msculo Pigmento Neurotransmisores Metabolismo Coenzima Neurotransmisor Hormona Estabilizadores de polianinicas (DNA) estructuras

Triptofano

Ornitina

Conclusin

El metabolismo implica toda una serie de complicados procesos bioqumicos controlados que ocurren en las clulas de los animales para mantenerlos vivos. Para tener el metabolismo adecuado, los animales dependen en gran medida de los nutrimentos que adquieren va la racin, que debe ser lo ms adecuada posible para mantener el estado de salud de los animales y alcanzar las producciones deseadas. En el caso de los rumiantes el reto est en alimentar adecuadamente a la microflora ruminal y lograr su aprovechamiento en la alimentacin del animal.