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(Director-Coordinador)
MICOTOXINAS EN ALIMENTOS
Director-Coordinador
Jos Miguel Soriano del Castillo. Area de Nutrici i Bromatologia. Departament de Medicina Preventiva i Salut Pblica, Cincies de l'Alimentaci,
Toxicologia i Medicina Legal. Facultad de Farmcia. Universitat de Valncia.
Valncia. Espaa.
Autores
M. Lourdes Abarca. Salat Grup de Micologia Veterinria. Departament de
Sanitat i d'Anatomia Animals. Facultat de Veterinria. Universitat Autnoma de Barcelona. Bellaterra. Barcelona. Espaa.
Houda Berrada Ramdani. Area de Toxicologia. Departament de Medicina Preventiva i Salut Pblica, Cincies de l'Alimentaci, Toxicologia i Medicina
Legal. Facultat de Farmcia. Universitat de Valncia. Valncia. Espaa.
M. Rosa Bragulat Arar. Grup de Micologia Veterinria. Departament de Sanitat i d'Anatomia Animals. Facultat de Veterinria. Universitat Autnoma
de Barcelona. Bellaterra. Barcelona. Espaa.
Pedro A. Burdaspal Prez. rea Qumica, Centro Nacional de Alimentacin
(CNA). Agencia Espaola de Seguridad Alimentaria (AESA).
F. Javier Cabaes Senz. Grup de Micologia Veterinria. Departament de Sanitat i d'Anatomia Animals. Facultat de Veterinria. Universitat Autnoma de
Barcelona. Bellaterra. Barcelona. Espaa.
Magda Carvajal Moreno. Departamento de Botnica. Instituto de Biologa.
Universidad Nacional Autnoma de Mxico. Ciudad Universitaria. Mxico,
D.F. Mxico.
Gemma Castell Gmez. Grup de Micologia Veterinria. Departament de
Sanitat i d'Anatomia Animals. Facultat de Veterinria. Universitat Autnoma de Barcelona. Bellaterra. Barcelona. Espaa.
VIII
Autores
Autores
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PRLOGO .....................................................................................................
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PREFACIO .....................................................................................................
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Introduccin ......................................................................................
Toxicidad ...........................................................................................
Evaluacin de riesgos .......................................................................
Referencias bibliogrficas ................................................................
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1. Introduccin ......................................................................................
2. Caracteres utilizados en la identificacin de hongos ....................
2.1. Caractersticas diferenciales del gnero Penicillium ..........
2.2. Caractersticas diferenciales del gnero Aspergillus ...........
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XIV
Micotoxinas en alimentos
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XV
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1. Introduccin ......................................................................................
2. Extraccin y purificacin .................................................................
2.1. Extraccin en fase slida ......................................................
2.1.1. Extraccin en fase slida convencional ..................
2.1.2. Extraccin con columnas Mycosep .......................
2.1.3. Dispersin de matriz en fase slida ........................
2.1.4. Microextraccin en fase slida ................................
2.2. Extraccin con columnas de intercambio inico ................
2.3. Extraccin con columnas de inmunoafinidad ....................
2.4. Extraccin por fluidos supercrticos ....................................
2.5. Extraccin asistida por microondas .....................................
2.6. Extraccin acelerada por disolventes ..................................
3. Tcnicas de exploracin o screening ...............................................
3.1. Inmunoensayos ......................................................................
3.2. Biosensores ............................................................................
4. Tcnicas de confirmacin ................................................................
4.1. Cromatografa en capa fina ..................................................
4.2. Electroforesis capilar ............................................................
4.3. Cromatografa gaseosa .........................................................
4.4. Cromatografa lquida ...........................................................
5. Referencias bibliogrficas ................................................................
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1. Introduccin ......................................................................................
2. Control ..............................................................................................
2.1. Buenas prcticas agrcolas ....................................................
2.2. Buenas prcticas de almacenaje y manufactura .................
2.3. Sistema de Anlisis de Peligros y Puntos Crticos de Control (APPCC) .........................................................................
2.3.1. Introduccin ..............................................................
2.3.2. Metodologa previa a la aplicacin del sistema
APPCC ......................................................................
2.3.3. Principios ...................................................................
2.3.3.1. Realizar un anlisis de peligros ................
2.3.3.2. Identificar los Puntos Crticos de Control
(PCC) .........................................................
2.3.3.3. Establecer los lmites crticos en cada
PCC .............................................................
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1. Introduccin ......................................................................................
2. Principales factores que influyen en el establecimiento de la legislacin sobre micotoxinas .............................................................
2.1. Evaluacin del riesgo ............................................................
2.1.1. Evaluacin del peligro ..............................................
2.1.2. Estimacin de la ingesta ...........................................
2.1.3. Evaluacin de la exposicin .....................................
2.1.4. Comparacin entre la evaluacin de la exposicin
y la estimacin de la ingesta segura ........................
2.2. Distribucin de la micotoxina en el producto y procedimientos de muestreo .............................................................
2.3. Mtodos de anlisis ...............................................................
2.4. Poltica econmica y disponibilidad del alimento ..............
3. Legislacin actualmente existente sobre micotoxinas ..................
3.1. Introduccin: la encuesta FAO 2002-2003 ..........................
3.1.1. Resultados de la encuesta por regiones ..................
3.1.2. Resultados de la encuesta por micotoxina o grupo
de micotoxinas ...........................................................
3.2. Legislacin vigente en la Unin Europea y sus transposiciones a la legislacin espaola ............................................
3.2.1. Legislacin relativa a niveles mximos admitidos ....
3.2.1.1. Aflatoxinas .................................................
3.2.1.2. Patulina .......................................................
3.2.1.3. Ocratoxina A ..............................................
3.2.1.4. Toxinas de Fusarium ..................................
3.2.2. Legislacin relativa a mtodos de toma de muestras y mtodos de anlisis de referencia .................
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Introduccin ......................................................................................
Caractersticas del compuesto .........................................................
Mecanismo de accin .......................................................................
Toxicologa ........................................................................................
4.1. Toxicidad aguda .....................................................................
4.2. Toxicidad crnica ...................................................................
Incidencia en alimentos ...................................................................
Ingesta diaria ....................................................................................
Descontaminacin/detoxificacin ...................................................
7.1. Mtodos fsicos ......................................................................
7.2. Mtodos qumicos .................................................................
7.3. Mtodos biolgicos ...............................................................
Referencias bibliogrficas ................................................................
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1. Introduccin ......................................................................................
2. Caractersticas del compuesto .........................................................
3. Toxicologa ........................................................................................
3.1. Toxicocintica ........................................................................
3.2. Toxicidad ................................................................................
4. Incidencia en alimentos ...................................................................
5. Ingesta diaria ....................................................................................
6. Descontaminacin/detoxificacin ...................................................
6.1. Mtodos fsicos ......................................................................
6.2. Mtodos qumicos .................................................................
7. Referencias bibliogrficas ................................................................
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XVIII
Micotoxinas en alimentos
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1. Introduccin ......................................................................................
2. Caractersticas del compuesto .........................................................
3. Toxicologa ........................................................................................
3.1. Toxicocintica ........................................................................
3.2. Toxicidad aguda y toxicidad crnica ....................................
3.3. Mecanismos de toxicidad .....................................................
4. Incidencia en alimentos ...................................................................
4.1. Cereales y derivados .............................................................
4.2. Bebidas alcohlicas ...............................................................
4.3. Caf ........................................................................................
5. Ingesta diaria ....................................................................................
6. Descontaminacin/detoxificacin ...................................................
6.1. Mtodos fsicos ......................................................................
6.2. Mtodos qumicos .................................................................
6.3. Mtodos biolgicos ...............................................................
7. Referencias bibliogrficas ................................................................
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1. Introduccin ......................................................................................
2. Caractersticas del compuesto .........................................................
3. Toxicologa ........................................................................................
3.1. Mecanismos de accin ..........................................................
3.2. Efectos txicos .......................................................................
3.2.1. Efectos sobre el ser humano ....................................
3.2.2. Efectos sobre los animales .......................................
4. Incidencia en alimentos ...................................................................
4.1. Cereales y derivados .............................................................
4.2. Cerveza ...................................................................................
4.3. Leche ......................................................................................
4.4. Alimentos para animales ......................................................
5. Ingesta diaria ....................................................................................
6. Descontaminacin/detoxificacin ...................................................
6.1. Mtodos fsicos ......................................................................
6.2. Mtodos qumicos .................................................................
6.3. Mtodos biolgicos ...............................................................
7. Referencias bibliogrficas ................................................................
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Introduccin ......................................................................................
Caractersticas del compuesto .........................................................
Toxicologa ........................................................................................
Incidencia en alimentos ...................................................................
Ingesta diaria ....................................................................................
Descontaminacin/detoxificacin ...................................................
6.1. Mtodos fsicos ......................................................................
6.2. Mtodos qumicos .................................................................
6.3. Mtodos biolgicos ...............................................................
7. Referencias bibliogrficas ................................................................
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1. Introduccin ......................................................................................
2. Caractersticas del compuesto .........................................................
3. Toxicologa ........................................................................................
3.1. Toxocintica ...........................................................................
3.2. Toxicidad aguda y subaguda .................................................
3.3. Mecanismo de toxicidad .......................................................
4. Incidencia en alimentos ...................................................................
4.1. Cereales ..................................................................................
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Micotoxinas en alimentos
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Introduccin ......................................................................................
Caractersticas del compuesto .........................................................
Toxicologa ........................................................................................
Incidencia en alimentos ...................................................................
Ingesta diaria ....................................................................................
Descontaminacin/detoxificacin ...................................................
6.1. Mtodos fsicos ......................................................................
6.2. Mtodos qumicos .................................................................
6.3. Mtodos biolgicos ...............................................................
7. Referencias bibliogrficas ................................................................
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Caractersticas del compuesto .........................................................
Toxicologa ........................................................................................
Incidencia en alimentos ...................................................................
Descontaminacin/detoxificacin ...................................................
Referencias bibliogrficas ................................................................
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Introduccin ......................................................................................
Caractersticas del compuesto .........................................................
Toxicologa ........................................................................................
Incidencia en alimentos ...................................................................
Descontaminacin/detoxificacin ...................................................
5.1. Mtodos fsicos ......................................................................
5.2. Mtodos qumicos .................................................................
5.3. Mtodos biolgicos ...............................................................
6. Referencias bibliogrficas ................................................................
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Introduccin ......................................................................................
Caractersticas del compuesto .........................................................
Toxicologa ........................................................................................
Incidencia en alimentos ...................................................................
Ingesta diaria ....................................................................................
Descontaminacin/detoxificacin ...................................................
Referencias bibliogrficas ................................................................
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1. Introduccin ......................................................................................
2. Micotoxinas del gnero Alternaria ..................................................
2.1. Alternariol .............................................................................
2.2. cido tenuaznico ................................................................
2.3. Altertoxina I-III .....................................................................
3. Micotoxinas del gnero Aspergillus .................................................
3.1. cido kjico ...........................................................................
3.2. Esterigmatocistina .................................................................
4. Micotoxinas del gnero Claviceps ...................................................
5. Micotoxinas del gnero Fusarium ...................................................
5.1. Beauvericina ..........................................................................
5.2. Butenlido .............................................................................
5.3. Diacetoxiscirpenol .................................................................
5.4. Fusarenona X ........................................................................
5.5. Fusaproliferina ......................................................................
5.6. Fusarina C ..............................................................................
5.7. Fusarocromanona .................................................................
5.8. Monoacetoxiscirpenol ..........................................................
5.9. Neosolaniol ............................................................................
5.10. Sambutoxina ..........................................................................
6. Micotoxinas del gnero Penicillium ................................................
6.1. cido peniclico .....................................................................
6.2. cidos secalnicos ................................................................
6.3. Citreoviridina .........................................................................
6.4. Luteosquirina ........................................................................
6.5. Penitremos .............................................................................
6.6. Roquefortina .........................................................................
6.7. Rubratoxinas ..........................................................................
6.8. Rugulosina .............................................................................
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Micotoxinas en alimentos
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Prlogo
Siempre es una grata satisfaccin prologar una nueva obra, placer que se ve
aumentado, bien si se percibe que la misma va a tener un alto nivel de utilidad
o inters para el pblico, bien si se trata de un autor o autores que son garantes
de rigor y claridad en sus planteamientos.
En el caso del presente libro vienen a confluir precisamente esos dos elementos
inductores de satisfaccin: por una parte, el contenido del libro se puede considerar como muy interesante, tanto por su estructura y contenido, como por la
forma en que est redactado. Por otra parte, tanto el doctor Jos Miguel Soriano, como director-coordinador de la obra, y los autores son personas que merecen la mxima consideracin profesional, participando, entre otros, investigadores de la Universitat de Valncia y Agencia Francesa de Seguridad Sanitaria
de los Alimentos, dndose adems la circunstancia de que dos de los autores
espaoles pertenecen al Comit Cientfico y al Centro Nacional de Alimentacin de la Agencia Espaola de Seguridad Alimentaria respectivamente, por lo
que me permito dar fe de su inequvoco grado de calificacin profesional, lo
que constituye una buena vitola de excelencia profesional que puede acompaar, por tanto, a la presente obra.
Aunque hoy se dispone en abundancia de alimentos infinitamente mejores que
los que consumieron nuestros abuelos, tanto en lo referente a calidad, salubridad, valor nutritivo y diversidad, como en lo concerniente a su aspecto sensorial, envasado, etiquetado e incluso presentacin, la realidad es que la persistencia de la aparicin de casos espordicos relativos a la seguridad alimentaria
crean una gran intranquilidad y recelo ante los alimentos que ofrece el comercio. Afortunadamente, los conocimientos actuales de higiene e inspeccin de
alimentos, debidamente aplicados, permiten establecer medidas que garantizan
una muy razonable seguridad alimentaria, riesgo que sin duda la aplicacin de
los conocimientos recogidos en el libro Micotoxinas en alimentos contribuirn a
minimizar. El nivel de riesgo cero seguir siendo un desideratum hacia el que
XXIV
MIcotoxinas en alimentos
Prefacio
XXVI
MIcotoxinas en alimentos
durante la estancia de investigacin con la doctora Miraglia en el Istituto Superiore di Sanit en Roma, aport datos nuevos a la obra. Los doctores Catal
Gregori, lo mejoraron con sus revisiones y con la realizacin de prcticamente
todas las figuras del libro, que han permitido ilustrar didcticamente la obra.
Todos mis compaeros del Departament de Medicina Preventiva i Salut Pblica, Cincies de l'Alimentaci, Toxicologa i Medicina Legal de la Universitat de
Valncia que han aguantado todos los avatares que ha tenido esta obra y que
con su dedicacin y paciencia han mejorado el libro que usted, lector, tiene
entre sus manos. Quiero agradecer tambin a Tecasa (Tecnologa Agraria S.A.)
y a Vicam (Watertown, EE UU) por la ayuda y cesin de las Figuras 2, 3 y 5 del
Captulo 5 sobre el anlisis de micotoxinas y sobre la aclaracin de diversos conceptos. Muchas gracias a la Agencia Espaola de Seguridad Alimentaria
(AESA), y en especial a su Presidente, por el inters y seguimiento que han realizado de esta obra. Por ltimo, quiero agradecer a la Agencia Espaola de
Cooperacin Internacional (AECI) la concesin del proyecto (A/5725/06) que
permitir en un futuro la creacin de una Red Iberoamericana para el Control
de la Contaminacin Alimentaria por Micotoxinas.
Como director-coordinador de la obra doy las gracias a todos, por haber credo
en el proyecto y por haberse involucrado en l, porque era una necesidad y un
sueo.
PRIMERA PARTE
Generalidades
Introduccin
Jos Miguel Soriano
Micotoxinas en alimentos
Log biomasa
Las micotoxinas pueden contaminar los alimentos, o los piensos, o las materias
primas utilizadas para su elaboracin, originando un grupo de enfermedades y
trastornos, denominados micotoxicosis, y que resultan txicos para el hombre o
los animales. Adems hay que tener en cuenta que la presencia de estas micotoxinas en los alimentos puede ser individual o simultnea con otras, lo que puede
provocar efectos sinrgicos en su accin sobre el organismo aumentando as su
toxicidad. El trmino de presencia simultnea es el trmino ms apropiado a utilizar cuando hablamos en ingls de co-occurrence. Por lo que se debera de evitar
el trmino de concurrencia o co-ocurrencia. A lo largo de todo este libro usaremos el trmino de presencia simultnea, cuando aparecen dos o ms micotoxinas.
Introduccin
Micotoxinas en alimentos
Introduccin
Micotoxinas en alimentos
Introduccin
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Micotoxinas en alimentos
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Micotoxinas en alimentos
Popularmente los rusos denominaron al ergotismo como zlaia korcha (la maldad se retuerce), y una de las primeras referencias de ergotismo tuvo lugar
durante el periodo comprendido entre 1785 y 1786 a lo largo del ro Desna,
siendo identificado su origen en 1797, gracias a un mdico que acert en relacionar esta enfermedad con la descrita por un mdico suizo llamado Simn
Andres Tissot. Sin embargo, se tuvo que esperar a alrededor de 1840 para que
el gobierno ruso aceptara esta idea. Los aos en los cuales se apreci esta micotoxicosis tuvo lugar en 1832, 1837, 1863-1864, 1909, 1926 y 1928-1929 debido
tanto a las condiciones climticas como al consumo de alimentos susceptibles
de ser contaminados por esta micotoxina.
Para el caso de la toxina T-2 es importante tomar como punto de partida la descripcin de la primera micotoxicosis por tricotecenos que se identific en Rusia
en el ao 1932, con una tasa de mortalidad del 60% (8), siendo su presencia
endmica durante este perodo frente a los casos espordicos acaecidos durante las dos primeras dcadas. Se observ que las regiones ms afectadas contenan hasta un 40% de Fusarium sporotrichoides en los cultivos, mientras que este
porcentaje disminua hasta un 2% en las zonas no afectadas. Durante la II Guerra Mundial provoc la muerte de cientos de miles de habitantes de Rusia, siendo la zona de Siberia y el distrito de Orenburg los lugares ms afectados. En sus
orgenes se confundi con la escarlatina, difteria, pelagra e incluso escorbuto,
pero no fue hasta 1943 cuando el gobierno ruso lo nombr como Alimentary
Toxic Aleukia (ATA).
Etimolgicamente la traduccin al castellano del ATA presenta variaciones
frente a diversos autores, algunos lo llaman aleucia txica alimentaria, aleucemia txica alimentaria o incluso leucemia txica alimentaria. Sin embargo, el
nombre correcto es leucopenia txica alimentaria. Veamos una explicacin de
esto. Est claro que el trmino gira en torno a los leucocitos, y son las diferentes etapas de la enfermedad las que dan la clave del concepto en castellano (19).
En la primera etapa de la micotoxicosis, que dura de 3 a 9 das, la cantidad de
leucocitos disminuye a ) 2000/mm3; en la segunda etapa, que dura de las 3 a las
4 semanas, los leucocitos disminuyen a ) 100/mm3. En el diccionario de la Real
Academia Espaola de la Lengua (15) no aparecen ni el trmino de aleucia ni
aleucemia, aunque s en algn diccionario mdico (18), y s el de leucopenia, que
es el nmero de leucocitos en la sangre inferior al normal. De todas maneras
estamos tambin a la espera de la publicacin del Diccionario terminolgico de
las ciencias mdicas, que actualmente est elaborando la Real Academia Nacional de Medicina, con la participacin de Fernando Navarro, Fernando Pardos,
Ignacio Navascus, Carmen Remacha y Cristina V. Gonzlez Snchez, bajo la
direccin acadmica de Hiplito Durn, y que permitir una revisin ms
Introduccin
13
extensa de este trmino. Por otro lado, el trmino de leucemia usado por varios
autores, es incorrectamente utilizado porque la caracterstica de la leucemia es
el aumento permanente del nmero de leucocitos, situacin totalmente contraria a las descritas por las dos etapas del ATA. Por lo tanto, es ms correcto nombrar a esta micotoxicosis como leucopenia txica alimentaria, aunque a lo largo
de este libro lo veremos como ATA.
3.nREFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
11.NBibliotheca Sanctorum. (1989). Vol. II, pg. 122. Roma.
12.NBosir, B; Smole, P; Povsic, Z (1981). Factors affecting the yield and quantity
of sclerotia from Claviceps purpurea. Farmatsevtski Vestnik, 32, pgs. 21-25.
13.NCaporael, LR (1976). Ergotism: the Satan loosed in Salem? Science, 192,
pgs. 21-26.
14.NCarlile, MJ; Watkinson, SC; Gooday, GW (2001). The Fungi (2.a Edition).
Academia Press. Londres. Reino Unido.
14
Micotoxinas en alimentos
Toxicidad y evaluacin
de riesgos
Mara Jos Ruiz
Guillermina Font
1.NINTRODUCCIN
Desde hace siglos el hombre ha utilizado los hongos que se desarrollan en los
alimentos para obtener otros alimentos con caractersticas organolpticas diferentes al original. Existe una larga tradicin de empleo de algunos hongos en la
produccin de quesos, de salami, en la fermentacin de la cerveza, produccin
de vino, etc., y algunos de ellos tambin se utilizan en la produccin de frmacos con fines teraputicos.
No obstante, algunos hongos que crecen sobre materiales vegetales producen
toxinas con efectos indeseables para plantas y animales. Las micotoxinas son
metabolitos secundarios txicos con diferentes propiedades qumicas, biolgicas y toxicolgicas, producidas por hongos toxignicos que se desarrollan en
productos vegetales (2).
Las micotoxicosis son las intoxicaciones provocadas por micotoxinas. La incidencia de micotoxicosis aguda es un problema de salud animal, ya que los alimentos deteriorados por hongos se desechan o se destinan a consumo animal.
Mientras que para el hombre tiene mayor importancia la toxicidad crnica, asociada al consumo de pequeas cantidades de micotoxinas durante periodos
prolongados. Los primeros casos de micotoxicosis conocidos datan de la Edad
Media y fueron debidos a la contaminacin de centeno con Claviceps purpurea.
La epidemia provocada por los alcaloides producidos por este hongo, el cornezuelo del centeno, se conoce con el nombre de ergotismo. Actualmente, los brotes de ergotismo son infrecuentes, debido a que los procesos normales de limpieza y molido del grano eliminan la mayor parte del cornezuelo de centeno, y a
que los alcaloides son relativamente lbiles y se destruyen durante el horneado
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Micotoxinas en alimentos
2.NTOXICIDAD
Elevados niveles de micotoxinas en la dieta pueden causar efectos adversos
agudos y crnicos sobre la salud del hombre y una gran variedad de especies
animales. Los efectos adversos pueden afectar a distintos rganos, aparatos o
sistemas, especialmente al hgado, rin, sistema nervioso, endocrino e inmunitario. Los sntomas causados por las micotoxinas suelen ser tan diferentes unos
de otros como lo son las propias estructuras qumicas de dichas toxinas (1, 4, 8).
En trminos generales, el riesgo de intoxicacin aguda por micotoxinas en el
hombre es bajo o moderado en comparacin con intoxicaciones de origen
microbiolgico o por contaminantes qumicos. No obstante, segn KuipperGoodman (8), en la exposicin crnica y teniendo en cuenta la severidad de las
lesiones crnicas (especialmente el cncer), las micotoxinas presentan mayor
riesgo txico que los contaminantes de origen antropognico, aditivos alimentarios y plaguicidas (Figura 2.1).
En la Tabla 2.1 se detallan los efectos fisiopatolgicos producidos por las principales micotoxinas. Las micotoxinas abarcan un amplio espectro de efectos
txicos fisiopatolgicos, entre los que hay que destacar los producidos sobre el
Plaguicidas
Plaguicidas
Aditivos
Aditivos
Microbiolgicos
Micotoxinas
Ficotoxinas
Fitotoxinas
Dieta
Ficotoxinas
Fitotoxinas
Microbiolgicos
Micotoxinas
EFECTOS AGUDOS
EFECTOS CRNICOS