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Patologia Clnica Veterinria

Hematologia: Introduo: -Composio do Sangue: -Clulas: eritrcitos, leuccitos e plaquetas -Plasma: protenas plasmticas (fibrinognio, albumina e globulinas), glicose, eletrlitos, colesterol, enzimas, hormnios, vitaminas, lipdeos, aminocidos, produtos de excreo (uria, creatinina e cido ltico). *Hemostasia Homeostasia -Hemostasia: o conjunto de mecanismos que o organismo emprega para coibir hemorragia. -Homeostasia: a propriedade de um sistema aberto, seres vivos especialmente, de regular o seu ambiente interno para manter uma condio estvel, mediante mltiplos ajustes de equilbrio dinmico controlados por mecanismos de regulao interrelacionados. *Plasma Soro -Plasma: o sobrenadante obtido quando uma amostra de sangue que foi coletada com anticoagulante centrifugada. -Soro: o equivalente de uma amostra que se permitiu coagular, no possui fibrinognio. -Funes das Clulas: -Eritrcitos: composto por hemoglobina e responsvel pelas trocas gasosas -Leuccitos: defesa do organismo -Neutrfilos: defesa primria -Moncitos: limpeza
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-Eosinfilo -Linfcitos: resposta celular e humoral -Plaquetas: hemostasia Hematopoese: 1-Eritropoese: a produo de eritrcitos e ocorre na medula ssea vermelha. 2-Leucopoese: a produo de leuccitos e ocorre na medula ssea vermelha. 3-Trombocitopoese: a produo de plaquetas e ocorre na medula ssea vermelha. *Nas aves, rpteis, anfbios e peixes ocorre em locais diferentes dos mamferos, assim: -Eritropoese: ocorre intravascularmente -Leucopoese: ocorre em stios extravasculares -Trombocitopoese: ocorre intravascularmente -Tipos: -Hematopoese Pr-Natal: Ocorrendo: Primeiramente no Saco vitelnico, posteriormente no Fgado, Bao e finalmente na Medula ssea -Hematopoese Ps-Natal: Ocorrendo na: -Medula ssea Vermelha (ativa): que na puberdade est presente em todos os ossos *Medula ssea Amarela: inativa 1-Eritropoese:

Clula Pluripotente (clula tronco)

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Srie Granuloctica

Eritroblasto Pr - Eritroblasto

Srie Tromboctica
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Eritroblasto Basoflico Eritroblasto Policromatoflico Metaeritroblasto Reticulcito

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Eritrcito

1- Ncleo grande e contm nuclolo 2- Perde nuclolo 3- H diminuio no tamanho e a cromatina est condensada 4- Incio da sntese de hemoglobina, citoplasma cinza 5- Ocorre a perda do ncleo 6- Retculo azul (basoflico) visvel com colorao especial 7- Clula adulta sem ncleo em mamferos, em formato de disco bicncavo.

Eritropoese ocorre na medula ssea vermelha. Conforme as hemcias amadurecem, elas se tornam muito facilmente deformveis (o que necessrio para que elas possam passar por vasos capilares pequenos). A eritropoiese normal envolve um mnimo de quatro mitoses: uma na fase de eritroblasto, outra no estgio de pr-eritroblasto e duas no estgio de eritroblasto basoflico. -Tempo de Maturao: O tempo de maturao total varia entre as espcies de aproximadamente 4-5 dias em bovinos para cerca de uma semana no co. Quando h um aumento na demanda de hemcias, a produo aumentada primeiramente ao se permitir que formas mais jovens (reticulcitos) entrem na circulao e tambm ao se permitir que os estgios de maturao sejam agrupados e ignorados, de modo que se apresse a eritropoese Reticulcitos no vista em todas as espcies, como, ces demonstram reticulcitos rapidamente, bovinos s em situaes extremas e eqinos nunca apresentam esta resposta.

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O apressamento da eritropoese ocorre em todas as espcies e, algumas vezes, leva ao aparecimento de algumas hemcias imperfeitas na circulao, tais como corpsculos de Howell-Jolly, poiquilcitos e leptcitos. -Durao de Vida: a durao de vida das hemcias varia nas espcies, assim: Sunos: cerca de 65 dias. Bovinos: mais de 160 dias. Ovinos: apresentam duas populaes de hemcias, uma de vida curta (70 dias) e outra de vida mais longa (150 dias). Ces: cerca de 120 dias Gatos: cerca de 70 dias. Eqinos: cerca de 150 dias -Destruio: esse processo ocorre de 3 formas: -O eritrcito pode ser fragmentado em pequenos pedaos o suficiente para que sejam captados pelo sistema retculo-endotelial -O eritrcito pode-se tornar mais frgil e romper-se com o esgotamento das enzimas intracelulares e assim sendo fagocitada. -O eritrcito como um todo pode ser fagocitado. A hemoglobina de uma hemcia morta reutilizada. A frao protica (globina) lisada em aminocidos. A frao heme perde seu tomo de ferro (sendo reciclado em uma nova molcula de hemoglobina) e o restante da molcula de heme transforma-se em bilirrubina (no hidrossolvel) e ento precisa ser transportada no plasma pela albumina. Ao atingir o fgado esta bilirrubina conjugada com o cido glicurnico (agora torna-se hidrossolvel) e pode ser excretada na bile. Depois da reciclagem na circulao heptica e de um metabolismo aditivo, a maior parte dela excretada nas fezes como urobilina e estercobilina e um pouco dela tambm excretado na urina como urobilinognio. -Tamanho:

Co > Bovino > Caprino

-Quantidade:

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Caprino > Bovino > Co

-Controle da Eritropoese: O hormnio responsvel pela regulao da taxa de eritropoese uma glicoprotena, denominada eritropoetina (EP ou EPO). O stio para a produo deste hormnio so os rins (por isso o hornnio totalmente ausente em animais nefrectomizados). O estmulo fundamental para a produo de eritropoetina a hipxia tecidual. A eritropoetina afeta a produo de hemcias de trs formas: -Mais clulas-tronco se diferenciam em precursores eritrocitrios -A velocidade de desenvolvimento dos estgios de maturao de hemcias aumentada -O tempo de trnsito para fora da medula ssea reduzido A eritropoetina pode ser estimulada ou inibida por hormnios, que na realidade afetam o metabolismo celular, e por conseguinte, os requerimentos teciduais de oxignio, exercendo uma retroalimentao na sntese de EPO. O estmulo fundamental para a eritropoiese a tenso tecidual de oxignio (PO2). A hipxia tecidual desencadeia a produo de eritropoietina, um fator humoral especificamente responsvel pela produo de eritrcitos. produzida pelos rins (clulas corticais endoteliais, glomerulares e intersticiais) e em menor proporo pelo fgado (clulas de Kupffer, hepatcitos e clulas endoteliais). O rim considerado a nica fonte de eritropoietina no co e o fgado o stio predominante no feto. A eritropoietina gerada pela ativao do eritropoietinognio, uma alfa-globulina, pelo fator eritropoitico renal ou eritrogenina, ou pela ativao da proeritropoietina, produzida no rim, por um fator plasmtico. A eritropoietina estimula a eritropoiese em vrias etapas, pela induo da diferenciao de progenitores eritrides (UFC-E) at eritroblastos, estimulando a mitose de clulas eritrides e reduzindo seu tempo de maturao e aumentando a liberao de reticulcitos e eritrcitos jovens ao sangue perifrico. -Hormnios que aumentam a produo: andrgenos, cortisol, tiroxina, adrenalina, prolactina, hormnio do crescimento, TSH e ACTH. -Hormnios que diminuem a produo: estrgenos *Machos tendem a ter um volume globular (VG) maior que as fmeas *O excesso de um hormnio (hormnio que aumenta a produo) levar a um aumento no VG (o exemplo mais comum o excesso de cortisol no hiperadrenocorticismo) *A deficincia de um hormnio (hormnio que aumenta a produo) levar a uma diminuio do VG. So exemplos: hipotireoidismo, hipoadrenocorticismo. -Exigncia Nutricional:
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-Ferro: mais componente da hemoglobina -Protenas -Vitaminas B2, B6 e B12 -Cobre: sistema anti-oxidante (ele se oxida no lugar de outros componentes) -Funes: -Equilbrio cido-base -Transporte de O2 e CO2 -Hemoglobina: -Possui 400 milhes de molculas por eritrcito. A seqncia de aminocidos da hemoglobina o que diferencia a hemoglobina entre as espcies. -Oxihemoglobina: ligada ao O2 -Desoxihemoglobina: ligado ao CO2 -Carboxihemoglobina: ligado ao CO (irreversvel).

-Metabolismo da Hemoglobina: Normalmente aps 120 dias, as hemcias so fagocitadas pelo Sistema RetculoEndotelial (bao e fgado) e a frao heme da hemoglobina serve de fonte para a formao da bilirrubina. Assim, cerca de 80% da bilirrubina formada no organismo deriva da hemoglobina de hemcias. O restante (20%) deriva da degradao de hemoprotenas no hemoglobnicas como catalase e citocromos. A frao heme da hemoglobina degradada em biliverdina pela remoo do complexo ferroprotoporfirina da globina. A biliverdina, por sua vez, transformada em bilirrubina indireta (no conjugada) pela ao da biliverdina-redutase. Neste processo, so formados bilirrubina indireta ou no conjugada (lipossolvel). A Bilirrubina indireta (no conjugada), sendo lipossolvel necessita ligar-se albumina para ser transportada at o hepatcito. Chegando ao hepatcito, captada na sua face sinusoidal por protenas intracelulares que funcionam como receptores, facilitando a transferncia do pigmento para o interior do hepatcito. O transporte intracelular realizado atravs do complexo protico-pigmentar que transportado dentro do citoplasma at os microcosmos do Retculo Endoplasmtico Liso (REL). Duas protenas chamadas Y e Z so responsveis por este transporte. Nos microssomos do REL, a Bilirrubina indireta (no conjugada) conjugada ao cido glicurnico por ao da enzima UDP-glicuroniltransferase, formando a bilirrubina direta ou conjugada.
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A Bilirrubina direta (conjugada) excretada do fgado sob a forma de um complexo micelar com o colesterol, fosfolipdios e sais biliares e atinge o intestino onde sofre ao das bactrias que promovem sua desconjugao, reduo e formao do urobilinognio e estercobilinognio. Uma parte do urobilinognio reabsorvido e recaptado pelo fgado (circulao entero-heptico 5%), voltando para a corrente sangunea e sendo excretada na urina pelos rins.O estercobilinognio oxidado estercobilina que eliminada pelas fezes. *Hiperbilirrubinemia: alta da bilirrubina circulante, levando uma ectercia. Causas:
1- Pr-Heptica: hemlise intravascular. Devido eficincia do sistema

retculo endotelial, possvel um grau leve a moderado de hemlise, sem que haja ictercia. Entretanto, com o aumento da severidade da hemlise, a capacidade excretora ultrapassada e h o desenvolvimento da hiperbilirrubinemia (ictercia).
2- Heptica: insuficincia heptica. Devido grande quantidade de funes

exercidas pelo fgado, a insuficincia deste rgo pode apresentar diversas sndromes clnicas. Geralmente, ocorre insuficincia das funes de conjugao/excreo. A mensurao da funo heptica (ALT, AST e fosfatase alcalina) nem sempre estar anormal. *H mais esterobilinognio na corrente sangunea, pois quando reabsorvido, no consegue ser excretado novamente pelo fgado.
3- Ps-Heptica: doena biliar obstrutiva. Pode ser uma obstruo intra-

heptica ou ps-heptica. Em casos de obstruo completa, a concentrao plasmtica de bilirrubina pode subir muito e as fezes ficam plidas por causa da ausncia de estercobilina. Nos estgios iniciais as atividades plasmticas das enzimas do parnquima heptico geralmente esto normais, mas a fosfatase alcalina encontra-se elevada. *Hiperbilirrubinemia por jejum: o cavalo a nica espcie em que isto prontamente observado. Em um cavalo anorxico, a concentrao de bilirrubina plasmtica pode subir, mesmo na ausncia de qualquer anormalidade hemoltica ou hepatobiliar. Pode ocorrer devido ao fato dos cidos graxos livres, que aumentam no plasma durante o jejum em cavalos, competirem com a bilirrubina pela captao nos hepatcitos. *Hiperbilirrubinemia Pr e Ps-heptico podem ser tornar Heptico pela sobrecarga que o fgado recebe. *Para a diferenciao do tipo de ictercia o animal apresenta, deve-se dosar as bilirrubinas (direta e indireta) e o urobilinognio. Ictercia

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Pr-Heptica Bilirrubina Direta Bilirrubina Indireta Urobilinognio Normal

Heptica

Ps-Heptica

Normal

*Bilirrubina Direta e Indireta, a dosagem feita pelo sangue. Consegue-se dosar a bilirrubina total e a direta, a bilirrubina indireta obtida pela subtrao dos 2 valores obtidos. Usa-se o soro para a dosagem, e este deve ser protegido da luz. *O Urobilinognio, a dosagem feita pela urina.

Metabolismo de Ferro: -Caractersticas: - absorvido no intestino -Transportado pela transferrina (protena plasmtica) -Na medula ssea h a formao do heme -O excesso de ferro transportado para fgado pela transferrina e armazenado sob a forma de ferritina (ligado apoferritina). *Anemia da Inflamao Crnica: em uma septicemia, as bactrias necessitam de ferro para seu metabolismo. O organismo para se defender retira sua prpria reservas de ferro, causando uma anemia.

Eritrograma: - o estudo da srie vermelha (eritrcitos ou hemcias). Ao microscpio, as hemcias tm colorao acidfila (afinidade pelos corantes cidos que do colorao rsea) e so desprovidos de ncleo (exceto aves, rpteis e anfbios). As hemcias apresentam colorao central mais plida e colorao um pouco mais escura na periferia. Elas so bicncovas. Quando uma hemcia tem tamanho normal ela chamada de normoctica. Quando ela apresenta colorao normal chamada de normocrmica. -Utilizado para a determinao da concentrao da Hemoglobina (Hb) -Utilizado para a determinao do Volume Globular (VG) Hematcrito

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-Utilizado para a determinao dos ndices hematimtricos (VGM, CHGM e DDE) -E utilizado para a avaliao morfolgica dos eritrcitos. 1-Contagem de Eritrcitos: (L) -Mtodo manual: utilizando a cmara hemocitomtrica ou de Neubauer. Procedimento: Para contagem de hemcias deve-se fazer a seguinte diluio: 4 ml de soluo fisiolgica e 20 l de sangue (homogeneizar antes de coletar uma alquota). Nesta diluio, cada clula contada na cmara de Neubauer equivaler a 10.050 clulas reais. Este fator de 1/10.500 foi calculado da seguinte forma: -A altura da cmara corresponde a 0,1 mm 1/10 -So contados apenas 5 micro-quadrantes do quadrante central 1/5

-Mtodo automatizado: utilizando aparelho para contagem de eritrcitos. 2-Determinao da Concentrao de Hemoglobina: (%) -Mtodo Qumico: mtodo de cianeto-hemoglobina Hemocue). 3-Determinao do Volume Globular (VG) ou Hematcrito: -Mtodo do Microhematcrito: o procedimento inicialmente feito pelo preenchimento do tubo de micro-hematcrito com sangue por capilaridade. Depois este tubo fechado no fogareiro. Pode haver as entre o final do tubo j fechado e o sangue, mas isso no problema porque este ar removido pela centrifugao. Posteriormente o tubo levado centrfuga e encaixado corretamente. Normalmente se espera no mnimo 5 minutos com exceo de sangue de caprinos, que leva em torno de 15 minutos para total compactao das hemcias no fundo pelo fato de as hemcias serem muito menores. (hemoglobinmetro

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Aps a remoo do tubo da centrfuga, possvel notar trs camadas distintas no tubo: a coluna de plasma no topo, as hemcias compactadas no fundo e uma fina camada esbranquiada de leuccitos sobre as hemcias. necessrio verificar qualquer alterao no plasma (colorao) que pode estar normal, ictrica, lipmica e hemolisada. -Volume Globular: Corresponde porcentagem de hemcias presentes no sangue. calculado a partir de uma coluna de sangue, sua centrifugao promove compactao mxima das hemcias

VG: policitemia (relativa ou absoluta/vera) VG: anemia (relativa ou absoluta)

Eritrcitos

Plasma

VG

1 2 3 4 5

Normal

1- Normal 2- Anemia Relativa: se deve basicamente ao aumento do volume do lquido plasmtico no sangue, e as principais origens relacionadas so: gestao, hiperproteinemia e fluidos intravenosos. 3- Anemia Absoluta: se deve a diminuio no nmero de eritrcitos. 4- Policitemia Absoluta: a policitemia absoluta primria (ou policitemia vera, eritropoese independente) est relacionada com processos leucmicos, sendo de etiologia desconhecida. Est policitemia caracterizada pelo aumento da massa eritrocitria, por proliferao autnoma (eritropoese independente). Neste caso a medula produz glbulos em quantidades acima do normal. A policitemia vera produz aumenta o eritrcito e a volemia globular (hipervolemia globular). A
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eritropoetina est normal. A policitemia absoluta secundria (ou eritrocitose aumento da produo da eritropoetina) pode ser fisiolgico ou patolgico. 5- Policitemia Relativa: Observamos a policitemia relativa (ou hemoconcentrao) em casos desidratao (diarria e vmito). -ndices Hematimtricos: Os ndices hematimtricos fornecem importantes informaes sobre o tamanho, concentrao de hemoglobina e peso da hemoglobina de uma hemcia mdia. VGM: Volume Globular Mdio (L) uma mensurao do tamanho das hemcias e obtido por simples clculo aritmtico a partir do hematcrito (VG) e da contagem de hemcias da amostra: VGM (L )= VG x 100 N de eritrcitos L: fentolitro = 10-15L VGM das espcies: Espcie Co Porco Vaca (adulta) Gato Cavalo Ovelha Cabra VGM (L) mdio 70 60 50 45 45 30 15

A classificao quanto ao VGM se d da seguinte forma: -Normoctico: VGM normal -Macroctico: VGM aumentado Ex.: eritropoese acentuada (clulas novas) -Microctico: VGM diminudo
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Ex.: anemia ferro-priva *Animais jovens tendem a ter hemcias menores em relao aos animais adultos, paradoxalmente, os neonatos, tm hemcias to grandes quanto as de animais adultos. -CHGM: Concentrao de Hemoglobina Globular Mdia (% ou g/dL) - CHGM uma mensurao da concentrao de hemoglobina nas hemcias e obtido aritmeticamente a partir do hematcrito (VG) e da concentrao total de hemoglobina da amostra. CHGM (g/dL ou %) = Hb x 100 VG A classificao quanto ao CHGM se d da seguinte forma: -Normocrmico: CHGM normal -Hipocrmico: CHGM diminudo Ex.: anemia ferro-priva -Hipercrmico: no existe erro laboratorial Ex.: amostra de sangue hemolisada, plasma lipmico, tudo preenchido parcialmente, entre outros. -DDE ou RDN: Distruibuio do Dimetro Eritrocitrio feito por aparelhos eletrnicos. E faz a mensurao do dimetro (calcula anisocitose numericamente). *Policromatofilia ou Policromasia: O termo refere-se aos eritrcitos que tem colorao rseo-azulada em conseqncia da captao simultnea da eosina (pela Hb) e dos corantes bsicos (pelo RNA ribossmico). Uma vez que os reticulcitos so clulas cujo RNA ribossmico absorve corantes supravitais, formando um retculo visvel, h um relacionamento entre os reticulcitos e as clulas policromticas. Ambos so eritrcitos imaturos, recmsados da medula ssea *Anisocitose: Anisocitose o aumento da variabilidade do tamanho dos eritrcitos que excede a observada em um indivduo sadio. uma anormalidade inespecfica comumente encontrada nas desordens hematolgicas. -Reticulcitos:

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A enumerao dos reticulcitos freqentemente realizada para a obteno de informaes a cerca da integridade funcional da medula hematopoitica (resposta medular anemia). O reticulcito sofre um perodo inicial de maturao dentro da medula ssea e ento liberado ao sangue perifrico onde diferencia-se em hemcia madura. Ele uma clula vermelha anucleada ligeiramente maior do que a hemcia madura, e contm resqucios de RNA e outras organelas que podem ser visualizadas com o uso de corantes supravitais do tipo do azul de cresil brilhante. Os reticulcitos jovens possuem massas densas de RNA e outras substncias, que vo se tornando granulares e finalmente desaparecem quando o reticulcito completa a sua diferenciao a eritrcito maduro. Possuem 80% da hemoglobina do eritrcito maduro. Os reticulcitos maturam-se em eritrcitos 24-48 horas na circulao ou no bao, onde podem ser seqestrados temporariamente. O processo de maturao envolve a perda de algumas superfcies de membranas, receptores para transferrina e fibronectina, ribossomos e outras organelas, obteno da concentrao normal de hemoglobina, organizao final do esqueleto submembranoso, reduo do tamanho celular e mudana de forma para o aspecto bicncavo. A contagem de reticulcitos mais til para ces e gatos e tem alguma aplicao para vacas. No utilizado em eqinos. A faixa de normalidade para mamferos domsticos representa as contagens esperadas quando o hematcrito normal: -Ces e Gatos: 0 a 60.000 clulas/L -Vacas: 0 clulas/L -Eqinos: no liberam reticulcitos. Em anemia, espera-se maior nvel de liberao medular de reticulcitos desde que a medula responda anemia. Isso implica nas orientaes apresentadas a seguir quanto interpretao da contagem de reticulcitos em relao ao tipo de anemia. -Anemia no-regenerativa com baixssimo grau de regenerao: 0 a 10.000 clulas/L -Anemia no-regenerativa com grau mnimo de regenerao: 10.000 a 60.000 clulas/L -Anemia regenerativa com liberao discreta a moderada: 60.000 a 200.000 clulas/L -Regenerao mxima: 200.000 a 500.000 clulas/L Exceo: Os gatos representam uma espcie particular de animais, pois tm mais de um tipo de reticulcitos (agregados ou pontilhados).
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Os reticulcitos agregados evoluem para a forma de pontilhado (resposta mais antiga) em aproximadamente 12 horas. Devido ao curto perodo de maturao dos reticulcitos agregados, essas clulas so os melhores indicadores de liberao medular ativa. Portanto, apenas os reticulcitos agregados so contados em gatos. E depois de feita a contagem deve-se calcular o valor corrigido, que dada pela frmula: VG da amostra x quantidade de reticulcitos VG mdio da espcie Parasitas: -Hemoparasitas -Concentram-se em sangue capilar, deve-se fazer o esfregao com o sangue da ponta de orelha ou cauda. -Babesia spp: ces, eqinos e bovinos -Anaplasma spp: bovinos, ovinos e caprinos -Mycoplasma sp (antiga Haemobartonella sp): ces e gatos Corpsculos de Howell-Jolly: So eritrcitos com resto nucleares. Um aumento no contedo de corpsculos de Howell-Jolly est associado a anemia regenerativa (eritropoese acelerada), esplectomia e supresso da funo esplnica. Ponteado Basoflico: a presena de considervel nmero de pequenas incluses basfilas, contendo RNA, dispersas no citoplasma de eritrcito jovens. So compostas de agregados de ribossomos. Raras hemcias com pontilhado basfilo podem ser vistas em distenses de indivduos normais. Comum em intoxicao por chumbo. Corpsculo de Lentz: So raramente encontradas em ces com cinomose (patognomnico). Quando encontradas, elas apresentam variaes de tamanho, quantidade e cor e so mais vistas em hemcias policromatoflicas.

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Aglutinao: A aglutinao de hemcias resulta em aglomerados de clulas irregulares e esfricas devido s pontes de anticorpos. Aglutinao um sinal muito sugestivo de anemia hemoltica imunomediada ou em transfuso sangunea com tipo de sangue inadequado. Eritrcitos Nucleado: O aumento da quantidade de hemcias nucleadas est associado a anemia regenerativa e liberao precoce dessas clulas em resposta hipxia. Uma maior quantidade de hemcias nucleadas tambm pode ser notada em animais com disfuno do bao e com alto teor de corticosterides. Formao de Rouleaux: Corresponde ao posicionamento espontneo das hemcias em forma de pilhas lineares (semelhante a uma pilha de moedas). normal nos eqinos e uma quantidade discreta tambm normal em ces e gatos. Nota-se maior formao de Rouleaux quando h aumento da concentrao de protenas plasmticas, como o fibrinognio e imunoglobulinas. Este aumento normalmente sugere gamopatia. Eritrcitos Crenados (equincitos): So clulas espiculadas com vrias projees pequenas, afiladas, distribudas uniformemente pela superfcie. A presena de equincitos pode ser um artefato (crenao) decorrente da alterao de pH, alm disso, sua presena tem sido associada a doena renal, linfoma, picada de cascavel e quimioterapia.

Acantcitos: -Parecem clulas crenadas So hemcias espiculadas irregulares, com poucas projees de comrpimentos desiguais na superfcie. Acredita-se que os acantcitos sejam provenientes de alteraes nas concentraes de colesterol ou de fosfolipdeos na membrana das hemcias.

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Raramente so notados em esfregaos sanguneos de ces com hepatopatia e so muito constatados em gatos com lipidose heptica e ces com hemangiossarcoma. Corpsculo de Heinz: causado pela desnaturao oxidativa da hemoglobina. Cerca de 1 a 2% das hemcias de gatos normais contm esses corpsculos. Os corpsculos de Heinz so pequenas estruturas plidas excntricas presentes nas hemcias. Quando grande quantidade de hemcias afetada, pode haver uma anemia hemoltica grave e algumas substncias oxidantes induzem a formao destes corpsculos tambm. No se coram com corantes de rotina (tipo Romanosky) e se coram com o novo azul de metileno. Leptcito ou Eritrcito em Alvo: Os eritrcitos em alvo possuem uma rea de colorao aumentada no meio da rea de palidez central. Eritrcitos em alvo formam-se como conseqncia de um excesso de membrana em relao ao volume do citoplasma, resultando em dobradura da membrama. Tem pouca importncia ao diagnstico e pode se formar in vitro, quando h contato do sangue com EDTA em excesso. Mas pode estar relacionada com doenas hepticas ou deficincia de ferro (baixa quantidade de hemoglobina). Poiquilocitose: A clula que tem forma anormal. Fala-se em poiquilocitose, quando h um nmero exagerado de clulas de forma anormal. A altitude produz um certo grau de poiquilocitose em indivduos hematolgicamente normais. A poiquilocitose uma anormalidade comum, inespecfica, encontrada em vrias desordens hematolgicas: pode resultar de produo de clulas anormais pela medula ssea ou de dano s clulas normais aps serem liberadas para a corrente sangnea. E pode estar relacionadas com a troca de eritrcitos (fase fetal para a jovem nos primeiros meses). Esquistcito ou Esquizcito: So fragmentos das hemcias e geralmente se originam de traumatismo eritrocitrio intravascular. Pode estar associado deficincia de ferro, com animais com coagulopatia intravascular disseminada (CID) e hemangiossarcoma.

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Esfercito: So hemcias de colorao escura que perdem a palidez central. Parecem pequenos, mas seu volume normal. resultado da fagocitose parcial pelos macrfagos e perda de fragmentos de membrana e sugere anemia hemoltica imunomediada. Anemia: a diminuio no nmero de eritrcitos, hemoglobina e/ou hematcrito. -Classificao quanto a resposta medular: -Regenerativa: quando a medula ssea responde anemia. O eritrograma apresenta elementos que revelam regenerao ou resposta medular, que so: reticulocitose, anisocitose e policromasia, podendo encontrar-se, muitas vezes, presena de metarrubrcitos, principalmente no co e no gato e corpsculos de Howell-Jolly. So necessrios dois a trs dias para uma resposta regenerativa tornar-se evidente no sangue. -No Regenerativa: quando no h resposta por parte da medula ssea. causada por leses na medula ssea ou ausncia de elementos necessrios para a produo de eritrcitos. Este tipo de anemia apresenta curso clnico crnico e incio lento, acompanhada de neutropenia e trombocitopenia. Pode ser causada por eritropoiese reduzida (medula ssea hipoproliferativa), na ausncia de eritropoietina (insuficincia renal crnica), na doena endcrina (hipoadrenocorticismo, hiperestrogenismo, hipoandrogenismo), na inflamao crnica, leso txica da medula (radiao, qumicos, intoxicao por samambaia, infeco por vrus e ricketsias como a Ehrlichia canis). So anemias normocticas normocrmicas. Na anemia arregenerativa no existem reticulcitos e nem policromasia. -Classificao segundo ndices hematimtricos: -Macroctica e Hipocrmica: VGM alto e CHGM baixo. Indica uma anemia regenerativa, pois h presena de reticulcitos grandes com pouca hemoglobina. O grau de macrocitose e hipocromia depende da severidade da anemia, associada intensidade da resposta eritropoitica medular, o que leva a reticulocitose sangnea. A reticulocitose em resposta anemia aumenta o VCM e reduz o CHCM. Entretanto, muitos dias devem passar desde a manifestao da anemia antes da alterao da morfologia eritroctica se mostrar aparente. Ex.: Babesiose -Normoctica e Hipocrmica: apenas o CHGM est baixo. Indica uma anemia no regenerativa. Ex.: por alguma falta de substrato para composio da hemoglobina

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-Microctica e Hipocrmica: VGM e CHGM diminudos. Indica uma anemia no regenerativa. Ex.: deficincia de Ferro -Normoctica e Normocrmica: ndices hematimtricos normais. Indica uma anemia no regenerativa. Ex.: insuficincia renal crnica (no produz eritropoetina) -Macroctica e Normocrmica: apenas o VGM est aumentado. Em bovinos, na deficincia de cobalto ou pastagem rica em molibdnio. A anemia resulta de uma assincronia da eritropoiese causada por alteraes na maturao no estgio de prrubrcito a rubrcito basoflico, produzindo eritrcitos megaloblsticos na medula ssea. Em ces poodle os eritrcitos macrocticos normocrmicos no so acompanhados por anemia. -Classificao por alteraes ou achados morfolgicos: -Na anemia regenerativa: -Anisocitose -Policromatofilia -Eritrcitos nucleados -Corpsculos de Howell-Jolly -Ponteado Basoflico (agregado ribossmico) -Na anemia no regenerativa -No tem

Leuccitos: Funo: proteo do organismo contra antgenos. Ex.: bactrias, vrus e parasitas. -Classificao:

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1- Granulcitos ou Polimorfonucleares: possuem ncleo condensado e segmentado. So clulas comumente referidas como granulcitos porque contm grande nmero de grnulos citoplasmticos que so lisossomas, contendo enzimas hidrolticas, agentes antibacterianos e outros compostos -Neutrfilos -Eosinfilos -Basfilos 2- Agranulcitos ou Mononucleares: no so destitudas de grnulos, mas possuem grnulos em menos nmero. -Linfcitos -Moncitos -Granulopoiese: Mieloblasto Pr-Mielcito Mielcito (eosinoflico, basoflico e neutroflico

Metamielcito

Bastonete Basfilo Neutrfilo

Eosinfilo

*1 stem-cell geram 32 clulas segmentadas. -Compartimentos (medula ssea): 1-Proliferao (mittico): constitudo de mieloblastos, pr-mielcitos e mielcitos 2-Maturao (ps mittico): constitudo de metamielcitos e bastonetes

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3-Armazenamento (estoque): constitudo de alguns bastonetes e segmentados. *A liberao do compartimento de armazenamento acontece em horas e o aumento da produo leva de 2 a 4 dias e o aparecimento de novas clulas no sangue acontece por volta do 5 dia. -Leucopoese (Linfopoese): -Produo fetal: medula ssea -Produo ps-natal: so produzidos na medula ssea, nos rgos linfides como o timo, linfonodos, bursa de fabricius e bao, alm dos tecidos linfides viscerais, que incluem as placas de Peyer, tonsilas e apndices. -Recirculao: em torno de 70% dos linfcitos do sangue perifrico que saem atravs do tecido retornam ao sistema vascular para recirculao. Esta propriedade dos linfcitos torna difcil e imprecisa a estimativa da meia vida dos linfcitos. O fenmeno de recirculao de suma importncia biolgica porque proporciona um mecanismo de distribuio generalizada de clulas linfides ocupadas com a resposta imune sistmica. Como resultado, um grande nmero de linfcitos podem ser expostos a um antgeno depositado localmente no tecido. Estas clulas antigenicamente expostas podem ser transportadas por vrios lugares no corpo para propagar e montar uma vigorosa resposta imune. -Funes dos Leuccitos: 1-Neutrfilos: a linha primria de defesa. A funo primria dos neutrfilos a fagocitose e morte de microorganismos (bactrias, fungos, parasitos e vrus). Os neutrfilos tambm podem causar dano tecidual e exercer efeito citotxico, como atividade parasiticida mediada por anticorpo e atividade tumoricida. Possuem grnulos lisossomais no interior dos vacolos fagocticos fundem-se com a membrana vacuolar para formar um fagolisossomo e liberar seus componentes (metablitos reativos de O 2 H2O2, O2- e O-) para matar e digerir a bactria. Esto distribudos na circulao sangunea (compartimento circulante e marginal), e a circulao laminar mantm os neutrfilos contra a parede do vaso. A maioria das espcies possuem o pool circulante igual ao marginal, mas no gato o pool circulante menor que o marginal (1:3). *Numa inflamao aguda, h grande presena de clulas jovens na circulao. O compartimento de mitose (proliferao) est normalmas os compartimentos de maturao e armazenamento esto diminudos. *Numa inflamao crnica, h grande presena de clulas jovens na circulao. Os compartimentos de mitose (proliferao), maturao e armazenamento esto todos aumentados.

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*Corticides causam um estresse crnico, ento h uma demarginao dos leuccitos (aumento de neutrfilos e moncitos) e diminuio no nmero de linfcitos. E h presena de neutrfilos hipersegmentados. *Adrenalisa causa um estresse agudo, ento h demarginao dos leuccitos (aumento no nmero de neutrfilos) e tambm no nmero de linfcitos pela esplenocontrao. 2-Basfilos: so mediadores da hipersensibilidade do tipo tardia ou imediata. Possuem grnulos com histamina, heparina e algumas espcies serotonina. No so precurssores de mastcitos, porm possuem funes similares. Quando estimulado antigenicamente sintetiza importantes fatores como Fator ativador plaquetrio (FAP), substncias de reao anafilaxia (SRA) e tromboxano A2 (TxA2). 3-Eosinfilos: o maior stio de produo de eosinfilos a medula ssea, embora tambm ocorra em menor grau em outros tecidos como bao, timo e linfonodos cervicais. Em geral, os eosinfilos so produzidos em torno de 2 a 6 dias e adentram no sangue perifrico aproximadamente 2 dias aps. Os eosinfilos tm participao na regulao alrgica e resposta aguda inflamatria e pode induzir dano tecidual. Podem ainda, participar na coagulao e fibrinlise atravs da ativao do fator XII e plasminognio. As principais funes dos eosinfilos so: fagocitose e atividade bactericida, atividade parasiticida, regulao das respostas alrgicas e inflamatrias e injria tecidual. 4-Linfcitos: os linfcitos T e B exercem diferentes funes e possuem receptores de membrana para o reconhecimento de antgenos. Existe uma terceira populao de linfcitos que no expressam receptores de antgenos em suas membranas, as clulas exterminadoras naturais (Natural Killer), so derivadas da medula ssea e so funcionalmente distintas das clulas T e B pela sua habilidade de lisar certas linhagens de clulas tumorais sem prvia sensibilizao. As principais funes dos linfcitos incluem a imunidade humoral, imunidade celular, regulao imune, atividade citotxica e vigilncia imune e secreo de linfocinas. 5-Moncitos: as funes dos moncitos e macrfagos incluem a transformao de moncitos em clulas efetoras teciduais (macrfagos); ao fagoctica e microbicida; regulao da resposta imune; remoo fagocitria de debris e outros restos celulares; secreo de monocinas, enzimas lisossomais, e outros; efeito citotxico contra clulas tumorais e eritrcitos; regulao da hematopoiese: granulo, mono, linfo e eritro; regulao da inflamao e reparo tecidual e ainda coagulao e fibrinlise. Dentre os produtos secretados pelos moncitos e macrfagos, citam-se componentes do sistema complemento, substncias citotxicas e antimicrobianas, produtos do metabolismo do cido aracdnico, enzimas lisossomais, fatores moduladores de outras clulas incluindo interleucinas, fatores fibrinolticos e pr-coagulantes e outros fatores. Leucograma:
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- uma contagem dos leuccitos, faz parte do hemograma. -Deve-se fazer uma avaliao quantitativa e qualitativa -Deve-se fazer uma contagem total e uma contagem diferencial de leuccitos. -Deve-se fazer uma avaliao morfolgica destes leuccitos. ...citose: aumento no nmero Ex.: leucocitose, linfocitose, monocitose ...filia: aumento no nmero Ex.: neutrofilia, eosinofilia, basofilia ...penia: diminuio no nmero Ex.: leucopenia, neutropenia, linfopenia, eosinopenia e monocitopenia Parmetros Valores *Parmetros: as clulas a serem contadas Ex.: eritrcitos, neutrfilos.... *Valores: a quantificao da contagem de cada clula Ex.: n de eritrcitos, n de neutrfilos.... -Leucocitose: 1-Fisiolgica: ocorre como uma resposta a adrenalina (excitao, medo, exerccio extremo, gestao e parto), no qual o compartimento marginal de neutrfilos e/ou linfcitos so mobilizados para a circulao geral, aumentando a contagem total de leuccitos e o nmero de neutrfilo absoluto e/ou linfcitos. Assim uma neutrofilia ou linfocitose transitria, ou ambas, podem se manifestar. Esta condio comum em animais jovens e geralmente desencadeada por distrbios emocionais e fsicos. Raramente o nmero de moncitos e eosinfilos aumenta. 2-Reativa: ocorre em resposta s doenas. Certas doenas podem induzir uma resposta especfica, mas usualmente um padro geral de resposta dos leuccitos evidente, independente da doena. A leucocitose reativa pode ocorrer com ou sem desvio esquerda. -Leucopenia: em muitos animais, ocorre por neutropenia e linfopenia. A neutropenia causa primria de leucopenia em animais com uma relao N:L maior que 1, e linfopenia em animais que a relao N:L menor que 1. A neutropenia mais comum em infeces bacterianas e linfopenia em infeces virais. Severas infeces bacterianas

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e virais podem causar leucopenia associada com neutropenia e linfopenia, ou ambas e tambm podem reduzir o nmero de outros leuccitos. Tipos de Leucopenia: demanda tecidual aguda e macia, produo reduzida pela medula ssea (parvovirose, leucemia felina, drogas estrgeno), produo ineficaz (neutropenia imunomediada) ou neutropenia por seqestro (choque anafiltico) -Alteraes Leucocitrias Quantitativas: 1-Neutrofilia: ocorre devido uma infeco (bactrias, vrus, fungos ou parasitos), necrose, distrbios imunomediados, estresse, hiperadrenocorticismo e leucemia. 2-Neutropenia: ocorre devido uma infeco bacteriana aguda (bovinos e eqinos), toxemia, septicemia, esplenomegalia, drogas (estrgenos), radiao, leucemia, vrus da leucemia felina. 3-Eosinofilia: ocorre devido uma inflamao (IgA) no trato respiratrio, digestivo, peritnio e tero, perda tecidual crnica (reaes alrgicas, parasitismo), hipoadrenocorticismo, estro em cadelas, sndromes hipereosinoflicas (granuloma eosinoflico e pneumonia eosinoflica), mastocitoma. 4-Eosinopenia: ocorre devido a um estresse agudo (adrenalina), estresse crnico (glicocorticides endgenos), hiperadrenocorticismo, inflamao/infeces agudas. 5-Basofilia: ocorre devido a dermatites alrgicas, eczemas e reaes de hipersensibilidade. E est associado eosinofilia. 6-Monocitose: ocorre devido a um hiperadrenocorticismo, esterides, estresse severo (piometra), doenas imunomediadas, inflamao/afeco aguda ou crnica e animais idosos. 7-Monocitopenia: muito difcil 8-Linfocitose: ocorre em animais jovens, fisiolgico (medo, excitao felinos e eqinos), vrus da imunodeficincia felina, infeco crnica, hipersensibilidade, doenas auto-imunes, ps-vacinao e hipoadrenocorticismo. 9-Linfopenia: ocorre devido a efeitos de esterides (hiperadrenocorticismo, corticides, estresse severo), infeco sistmica aguda, infeco viral recente (cinomose), leso nos linfonodos ou dos vasos linfticos (ruptura dos vasos linfticos - quilotrax), quimioterapia, radiao. -Classificao dos Desvios de Neutrfilos:
Mieloblasto Pr-mielcito Mielcito Metamielcito Bastonete Segmentado - Hipersegmentado

Desvio esquerda

Desvio direita

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1-Desvio Esquerda: Normalmente o sangue perifrico contm pequeno nmero de neutrfilos imaturos. Em muitas espcies este consiste de menos de 300 bastonetes/l de sangue. O aumento da liberao da medula ssea de neutrfilos imaturos para o sangue ocorre quando aumenta a demanda funcional de neutrfilos para os tecidos ou em casos de leucemias mielgenas ou mielomonocticas agudas ou crnicas. A presena de neutrfilos imaturos no sangue, acima do nmero normal para a espcie, constitui um desvio esquerda. 2-Desvio Esquerda Regenerativo: quando a contagem total de leuccitos moderadamente elevada por causa da neutrofilia e o nmero de neutrfilos imaturos (bastonetes) encontra-se abaixo do nmero de neutrfilos maduros (segmentados) resposta escalonada. Isto indica uma boa resposta do hospedeiro, e ocorre quando a medula ssea tem tempo suficiente (usualmente 3-5 dias) para responder demanda tecidual aumentada de neutrfilos. -Leve: at bastonetes -Moderada: at metamielcitos -Intensa: mielcitos ou mais jovens *Resposta escalonada: a sria anterior (mais jovem) sempre em menor quantidade do que a srie posterior (mais madura). 3-Desvio Esquerda Degenerativo: A contagem total de leuccitos varia, podendo ser normal, leucocitose ou leucopenia. A resposta principal a presena de neutrfilos imaturos acima dos neutrfilos maduros (resposta no escalonada). O desvio degenerativo esquerda indica que a medula ssea tem um esgotamento no compartimento de reserva de neutrfilos segmentados e conseqentemente ocorre a liberao de clulas imaturas, ultrapassando os neutrfilos maduros. Em muitas espcies isso um sinal de prognstico desfavorvel que requer um rigoroso protocolo teraputico. 4-Desvio Direita: a presena no sangue circulante de vrios neutrfilos hipersegmentados, isto , neutrfilos com mais de 5 lbulos. A hipersegmentao nuclear ocorre devido a presena circulante de corticosterides, tanto endgenos como exgenos. A deficincia da Vitamina B12 tambm pode levar a hipersegmentao, mas uma condio muito rara. 5-Reao Leucemide: A reao leucemide geralmente uma leucocitose reativa, consistindo de uma alta contagem de leuccitos com uma contagem absoluta de um tipo de leuccito, ou tambm um acentuado a extremo desvio esquerda sugestivo de leucemia. Portanto, um processo patolgico benigno, embora se assemelhe a leucemia granuloctica. Ocasionalmente, o quadro sangneo leucemide pode envolver outros tipos de leuccitos, como os linfcitos ou eosinfilos. Os resultados laboratoriais e a avaliao do paciente revelam que a doena no uma leucemia. Exemplos de reaes leucemides:

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-Extremo desvio esquerda regenerativo visto na piometra e peritonite ativa crnica em ces; -Acentuada linfocitose em condies supurativas crnicas como, por exemplo, reticulite traumtica. -Resposta Leucocitria em Bovinos: -Entre 6 e 24 horas h uma leucopenia -Entre 24 e 48 horas h uma leucopenia com desvio esquerda -Entre 72 e 96 horas leuccitos normais ou leucocitose por neutrofilia. *Deve-se dosar o fibrinognio que uma protena de resposta aguda. -Alteraes Leucocitrias Qualitativas: -Neutrfilos txicos: granulao txica e/ou difusa basofilia citoplasmtica acontece quando h continuado estmulo granulopoiese, pela extenso e/ou durao de um processo inflamatrio, h diminuio dos prazos de maturao das clulas precursoras, e os neutrfilos chegam ao sangue com persistncia da granulao primria, prpria dos pr-mielcitos, normalmente substituda pela granulao secundria, tnue e caracterstica. Os grnulos primrios so ricos em enzimas e coramse em pardo escuro com os corantes usuais, e impropriamente denominados de granulaes txicas. -Corpsculos de Dhle: so reas, na periferia dos neutrfilos, nas quais houve liquefao do retculo endoplasmtico. So de rara ocorrncia, mas possuem interesse diagnstico por refletirem infeces graves e/ou sistmicas. E em felinos normal. -Neutrfilos Hipersegmentados: no sangue normalmente predominam os neutrfilos com 2 a 4 lbulos nucleares, havendo poucos com cinco ou mais. O aumento ou predomnio de neutrfilos com mais de cinco lbulos - hipersegmentados - visto quando h uma maior permanncia destes na circulao. Esta sobrevida intravascular prolongada caracteriza o desvio direita. Isto acontece na insuficincia renal crnica, neutrofilias de longa durao, tratamentos com corticides ou estresse, defeitos genticos raros ou em sndromes mieloproliferativas, degenerao em amostras envelhecidas.
-Corpsculos de Lentz: corpsculo eosinoflico no citoplasma de leuccitos

patognomnico da cinomose canina. Sua ocorrncia se limita fase de viremia do processo infeccioso, sendo, portanto de pouca sensibilidade diagnstica. Ocorre em neutrfilos, linfcitos, moncitos e hemcias. -Moncitos Ativados: os moncitos apresentam vacolos no seu interior, normalmente em resposta hemoparasitos. -Linfcitos Reativos: a ocorrncia de linfcitos ativados acontece quando h um estmulo da srie linfocitria, com o aparecimento de linfcitos com citoplasma aumentado e basoflico, em parte seguindo a diferenciao para plasmcitos, cuja
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presena rara na circulao. A ativao de linfcitos na circulao deve-se principalmente a uma exacerbada resposta humoral ou a uma leucemia de clulas plasmocitrias (Mieloma Mltiplo). -Parasitas: -Hepatozoon canis: neutrfilos -Ehrlichia equi: neutrfilos -Ehrlichia canis: moncitos e linfcitos *Infeces por Ehrlichia desencadeia um processo de trombocitopenia.

Recipientes para Coleta:

1-Tubo de Tampa Vermelha: Este tubo destinado obteno de amostra de soro e no contm anticoagulante. utilizado para obteno de soro necessrio s anlises bioqumicas comuns. 2-Tubo de Tampa Roxa: Este tubo contm o anticoagulante EDTA 3% ou 10%. A concentrao de 3% utilizada para coleta sangunea de aves e repteis e o de 10% para outras espcies animais. utilizado aos exames hematolgicos. O anticoagulante EDTA preserva melhor o volume celular e as caractersticas morfolgicas das clulas. O EDTA um quelante de clcio, deixando o indisponvel ao sangue, fazendo com que no ocorra a coagulao. 3-Tubo de Tampa Verde: Este tubo contm o anticoagulante Heparina. Este anticoagulante utilizado para alguns testes bioqumicos especiais, principalmente aqueles que requerem o sangue total e podem ser influenciados por outros anticoagulantes. A heparina impede a transformao do fibrinognio em fibrina. 4-Tubo de Tampa Azul:
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Este tubo contm citrato de sdio. utilizado para determinao bioqumica de substncias ou fatores relacionados coagulao. 5-Tubo de Tampa Cinza: Este tubo contm fluoreto de sdio (NaF) e EDTA. O NaF inibe a enzima que participa da via glicoltica, impedindo a metabolizao da glicose pelos eritrcitos. 6-Tubo de Tampa Amarela: Este tubo possui um ativador de coagulo e disponibiliza melhor o soro para testes. indicado para amostras pequenas de sangue.

Referncias Bibliogrficas: THRALL. M.A, et al. Hematologia e Bioqumica Clnica Veterinria. 1 Ed. So Paulo: Roca, 2007. KERR M.G. Exames Laboratoriais em Medicina Veterinria Bioqumica e Hematologia. 2 Ed. So Paulo: Roca, 2003.

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