Incertidumbre de la medicin en ensayos instrumentales.

Silva, M L; Friedrichs, M; Navarro, M Av. Figueroa Alcorta 6081 GC Bs. As TEL: 63195327- FAX:63195310 Maria_L_Silva@aguasargentinas.com.ar Mnica_N_Friedrichs@aguasargentinas.com.ar Marcelo_Navarro@aguasargentinas.com.ar

Sobre los Autores Forman parte del equipo de trabajo del Laboratorio Central de Aguas Argentinas, el cual se encuentra acreditado bajo la norma ISO /IEC 17025:1999. Mara Lujn Silva es Licenciada en Bioqumica egresada de la Universidad de Buenos Aires. Actualmente es Responsable del rea Tcnica del Laboratorio Central AASA. Mnica Friedrichs es Licenciada en Ciencias Qumicas, egresada de la Universidad de Buenos Aires. Actualmente se desempea como especialista del Sector Orgnica del Laboratorio Central AASA. Marcelo Navarro es Tcnico Qumico, especialista en Espectrometra. Actualmente se desempea como Supervisor del Sector Espectrometra e Insumos del Laboratorio Central AASA.

Palabras Claves: Incertidumbre expandida, Incertidumbre combinada, Ensayos Interlaboratorios, reproducibilidad, sesgo.

Introduccin:

La Incertidumbre de la medicin aplicada a ensayos instrumentales puede ser calculada empleando dos modelos alternativos. El primer modelo se basa en el empleo de los datos de reproducibilidad entre e intra laboratorio, as como el sesgo del mtodo y del Laboratorio en cuestin. El segundo modelo evala la incertidumbre cuantificando individualmente la contribucin de cada componente ( Diagrama Causa - efecto) El objetivo del presente trabajo es el de estimar la Incertidumbre de basndose en ambos modelos y realizar una comparativa de los resultados obtenidos. Para ejemplificar el clculo se utilizan los resultados obtenidos en dos ensayos instrumentales, tales como el que corresponde al anlisis de PCBs en aceite de Transformadores por Cromatografa gaseosa, segn Norma ASTM D4059-00 y el ensayo de Arsnico en matriz agua, de acuerdo con el th mtodo de Absorcin Atmica Atomizacin Electrotrmica ( 3113 B -Standard Methods Ed 20 ) Resumen: Ejemplo 1: Incertidumbre de PCBs en aceite de Transformadores Esta metodologa implica la preparacin de estndares, calibracin del cromatgrafo, preparacin de la muestra (pesada, dilucin, tratamiento cido) y posterior lectura cromatogrfica . En la Figura 1 se presenta un cromatograma de la mezcla de Aroclor (1242-1254-1260) acompaado de las condiciones cromatogrficas empleadas. Fig. 1

Cromatograma de Aroclor 1242;1254;1260 Columna DB5 (30m*0.53mm*1.5>m) Gas carrier: Nitrgeno Flujo:30 cm / seg. Programa del horno: T0=190 C por 1 min., 11 C / min. a 225 C por 1 min., 17 C / min. a 290 C por 2 min. Detector: Captura de electrones

Con el fin de aplicar el Modelo basado en datos pre-existentes ( Modelo 1) se compilaron los resultados de los Ejercicios Intercomparativos de PCBs en aceite de Transformadores por Cromatografa gaseosa, segn Norma ASTM D4059-00 organizados por el Instituto Nacional de Tecnologa Industrial (INTI) y analizados en el Sector Orgnica del Laboratorio Central de Aguas Argentinas. En la Tabla 1 se resumen los resultados obtenidos en los cuatro ltimos aos, el clculo de la raz cuadrada del promedio de sesgos al cuadrado (RMS) y la Incertidumbre del valor nominal (u (Cref))

Tabla 1
Resultados de Ejercicios Interlaboratorio de PCBs en aceite Resultados Valor nominal de Valor Medio Ejercicio x ref Sesgo % Laboratorio >g/g xi 216,7 0,1 192 174 9,4 2001-04 INTI 53,0 0,1 50 44 12,0 44 6 44,7 42,7 4,5 2002-06 INTI 240 5 215,9 211,7 1,9 20 4 21,7 19 12,4 2003-02 INTI 213 25 220,4 186,3 15,5 80 8 83 80 3,6 2004-03 INTI 50 6 48 45 6,3 promedio 8,2 Suma de 702,0 cuadrados RMS 9,4

sR % 18 16 7,1 10,7 19,8 13,7 13,0 15,0 14,2

Nmero de laboratorios

23 21 28 29 33 33 39 40 30,8

Donde:

RMS =

bias
i =1

u (Cref ) = sR

u (Cref ) = 2.55

Los pasos del esquema de clculo aplicando el Modelo 1 se resumen en el siguiente cuadro:

PASO 1 2 3

u(bias ) 4

ACCIN MESURANDO Especificar PCB en Aceite de Transformadores segn ASTM D4059-00. Mesurando Cuantificar De la muestra control, s Rw =7.3% para 45 Fg /g u ( Rw ) Cuantificar De cuatro ejercicios interlaboratorios los sesgos fueron:9.4; 12.0; 4.5; 1.9; sesgo de 12.4;15.5; 3.6; y 6.3 %. Mtodo y de Raz cuadrada del promedio de sesgos al cuadrado es (RMS) 9.4 %. laboratorio. La Incertidumbre del valor nominal es u (Cref) =2.55%( sR = 14.2 n =31) Convertir 2 = RMS2 + ua u(bias ) = 9.4 2 + 2.552 u (Rw)=7.3 % ( Cref ) componentes u (bias) = 9.7 % u (x)

u c = 9 .7 2 + 7 .3 2

uc = 12.1
MESURANDO

PASO 5 6

ACCIN Calcular u c Calcular U

U =2 *12.1 U = 24 %

Por otro lado, si se tiene en cuenta la contribucin de todas las posibles fuentes de Incertidumbre (Modelo 2) se debe considerar la aplicacin de un diagrama detallado Causa-efecto (espina de pescado o diagrama de Ishikawa). Los pasos correspondientes al Modelo 2 son los siguientes: PASO ACCIN MESURANDO Especificar 1 PCB en Aceite de Transformadores segn ASTM D4059-00. Mesurando Reproducibilidad Pureza Masa Curva de calibracin Resultado R Identificar Volumen Fuentes de 2 Incertidumbre Diagrama Causa-efecto

Paso 3-Accin : Cuantificar la incertidumbre de los componentes

up = 5

3
Valor x Incertidumbre estndar u (x) Incertidumbre estndar relativa u (x)/x 0.0029 Resolucin:0.0001 g; Linealidad: 0.0002 g Rep.:0.0001g s =3.33 Fg /g 0.75 Fg/g (1242) 0.29 Fg/g (1254) 0.65 Fg/g (1260) 0.014 ml (pipeta) 0.12 ml (matraz) 0.00024 0.074 0.048(1242) 0.023(1254) 0.044 (1260) 0.003 (pipeta) 0.002 (matraz)

Descripcin Pureza (Aroclors 1242;1254;1260 Peso de la muestra Reproducibilidad Curva de calibracin Material volumtrico

P m R C V

5 0.843 g Valor medio 45 Fg /g Valor medio 15.6 Fg /g (1242) 12.6 Fg /g (1254) 14.8 Fg /g (1260) 5 ml (pipeta) 50 ml (matraz)

Paso 4- Accin : Calcular la Incertidumbre estndar combinada y expandida, U Descripcin Curva de calibracin Pureza Volumen Reproducibilidad Peso

u (x)/x Suma de cuadrados u c(x) /x

0.048 0.024 0.044 0.004816 0.069397406

0.0029 0.0029 0.0029 0.00002523

0.003 0.074 0.002 0.000013 0.005476 5.76*10

-8

0.0024

0.005022947 0.003605551 0.005476 0.00024 0.101638022 u /c u 4.6 U 9.1 U% 20 En la Figura 2 se observa la contribucin de cada fuente analizada para un valor de la mezcla de Aroclor (1242-1254-1260) de 45 Fg /g Fig. 2

Contribucin de Incertidumbres estndares en 45 >g/g

Diluciones pesada Curva de calibracin Pureza patrn Reproducibilidad

0,0
Reproducibilidad Pureza patrn Curva de calibracin pesada Diluciones

0,5
u (y,xi) 3,3 0,2 3,1 0,01 0,2

1,0

u (y,xi) >g/g

1,5

2,0

2,5

3,0

3,5

Ejemplo 2: Incertidumbre de Arsnico en matriz agua El ensayo consiste en la medicin de Arsnico por Atomizacin Electrotrmica-Espectrometra de th Absorcin Atmica segn Standard Methods 3113 B ( Ed. 20 ). El mismo implica la preparacin de la muestra (acidificacin), preparacin de estndares, calibracin del equipo y posterior medicin de la muestra en cuestin. Aplicando el Modelo 1, en el cual se tienen en cuenta los resultados obtenidos de los Ejercicios Interlaboratorios y el Control de Calidad analtica interna, se obtiene el siguiente esquema de clculo: PASO 1 2 3 4 ACCIN Especificar Mesurando Cuantificar u ( Rw ) Cuantificar sesgo de Mtodo y de laboratorio. Convertir MESURANDO As en aguas por Abs. Atmica (Horno)(3113 B SM Ed. 20 ) De la muestra control, s Rw =2.2% para 50 Fg /l De 4 ejercicios interlaboratorios los sesgos son:5.9; 2.8; 3.4 y 2.0 %. La raz cuadrada del promedio cuadrtico de sesgos es (RMS) 3.8 %. La Incertidumbre del valor nominal es u (Cref) =1.56% ( sR = 7.8 n =25) u (Rw)=2.2 %
th

u(bias ) = RMS2 + u(Cref )

uc = 4.12 + 2.2 2
componentes a u (x) 5 6 Calcular u c

u(bias ) = 3.82 + 1.562

u c = 4 .7
u (bias) = 4.1 %

Calcular U

U =2 *4.7

U = 9.4 %

Asimismo es posible considerar todas las fuentes contribuyentes a la Incertidumbre, aplicando el Modelo 2, Diagrama detallado Causa-efecto, de acuerdo con los siguientes pasos:

PASO 1

ACCIN Especificar Mesurando

MESURANDO As en aguas Absorcin Atmica ( Horno) (3113 B -SM Ed. 20 ) Volumen Pureza Resultado R
th

Identificar Curva de calibracin Repetibilidadad Fuentes de 2 Incertidumbre Diagrama Causa-efecto

Paso 3-Accin : Cuantificar la incertidumbre de los componentes

up = 5
Descripcin

3
Valor x Incertidumbre estndar u (x) Incertidumbre estndar relativa u (x)/x 0.0029 s=0,22086 Fg/l s=0,28919 Fg/l s=0,38350 Fg/l s=0,57965 Fg/l s=0,63216 Fg /l 0.90 Fg/l 0.71 Fg/l 0.62 Fg/l 0.79 Fg/l 0.97 Fg/l 0.004 ml (pipeta) 0.006 ml (pipeta) 0.075 (matraz) 0.537 (matraz) 0.0221 0.0145 0.0128 0.0116 0.0105 0.0900 0.0356 0.0207 0.0158 0.0161 0.004 0.002 0.00075 0.00054

Pureza del MRC

5 10 Fg/l 20 Fg/l 30 Fg/l 50 Fg/l 60 Fg/l 10 Fg/l 20 Fg/l 30 Fg/l 50 Fg/l 60 Fg/l 1 ml (pipeta) 3 ml (pipeta) 100 ml (matraz) 1000 ml (matraz)

Repetibilidad

Curva de calibracin

Material volumtrico

Paso 4- Accin : Calcular la Incertidumbre estndar combinada y expandida, U

Nivel >g /l 10 20 30 50 60

Curva de calibracin 0.0900 0.0356 0.0207 0.0158 0.0161

Pureza 0.0029 0.0029 0.0029 0.0029 0.0029

Volumen 0.0046 0.0046 0.0046 0.0046 0.0046

Repetibilidad 0.0221 0.0145 0.0128 0.0116 0.0105

Uc(x) /x 0.093 0.039 0.025 0.020 0.020

uc 0.93 0.78 0.75 1.02 1.20

U 1.9 1.6 1.5 2.0 2.4

U% 18.6 7.8 5.0 4.1 4.0

En la Figura 3 se representa la contribucin de cada una de las Incertidumbres estndares para un valor de Arsnico de 50 Fg /l Fig. 3

Contribucin de Incertidumbres estndares en As ( 50 >g/l)

Repetibilidad

Volum en

Pureza

Curva de calibracin

0,0

0,1

0,2

0,3

0,4

0,5

0,6

0,7

0,8

0,9

u(y,xi) >g/l

Fuente Curva de calibracin Pureza Volumen Repetibilidad

uc (x) 0,8 0,1 0,2 0,6

La relacin existente entre el valor de Incertidumbre y la concentracin del mesurando responde a la siguiente frmula:

2 u ( x ) = s0 + ( x * s1 ) 2

Donde S0 representa una contribucin constante sobre toda la Incertidumbre y, S1 es una constante de proporcionalidad La Tabla 2 correlaciona las expresiones cuadrticas de concentracin e Incertidumbre calculada.

Tabla 2.

x (As >g/l) 10 20 30 50 60 En la Figura 4 se observa la

uc x2 (uc)2 0,93 100 0,862335 0,78 400 0,601779 0,75 900 0,561139 1,02 2500 1,031839 1,20 3600 1,442849 variacin de la Incertidumbre en funcin de la concentracin de Arsnico.

Fig. 4

Variacin de incertidumbre en funcin del resultado observado

Incertidumbre u (x) 1,5 1,0 0,5 0,0 0 10 20 30 40 50 60 70 Resultado x

Graficando la expresin cuadrtica de la Incertidumbre en funcin de la expresin cuadrtica de la concentracin para valores superiores a los 30 Fg /l se obtiene la curva de la Figura 5

Fig. 5

Variacin de u respecto de x (sobre 30 > g/l)

2 1,5 1 0,5 0 0 500 1000 1500 2000
x
2

y = 0,0003x + 0,2554 R2 = 0,9956

2500

3000

3500

4000

Del Grfico se desprende el valor de s0 =0.2554 y s1 =0.0003 Es posible estimar la Incertidumbre para un valor determinado de x aplicando la siguiente frmula:
2 u ( x ) = s0 + ( x * s1 ) 2

A modo de ejemplo, para un valor x de 40 Fg /l , de acuerdo a los valores obtenidos en el grfico precedente (Figura 5)

u ( x ) = 0 .2554 + 0 .0003 * x 2 u( x) = 0 . 2554 + 0 . 0003 * 1600

u(40)=0.86 Conclusiones:

U (40)=1.7

U % (40)=4.3

Del anlisis de los resultados se desprende que, para ambos ejemplos, es posible utilizar datos Control de Calidad analtica y resultados Interlaboratorios para realizar el clculo de la Incertidumbre de la medicin (Modelo1) Asimismo, es posible estimar la Incertidumbre analizando y cuantificando las contribuciones individuales de los componentes (Modelo 2) Aplicando el Modelo 2 se observa una subestimacin en el clculo de la Incertidumbre respecto a lo obtenido con el Modelo 1 ( 20% frente a 24 % para PCB y 4.1% frente a 9.4 % en el caso de Arsnico). Es decir que la probabilidad de incluir todas las fuentes contribuyentes resulta mayor aplicando el Modelo 1. La relacin de las expresiones cuadrticas de Incertidumbre y concentracin permite predecir valores de Incertidumbre para distintos valores de concentracin. El Modelo 2 basado en el diagrama detallado Causa-efecto, resulta til para evaluar qu fuente contribuye en mayor proporcin al valor de Incertidumbre, destacando en los ejemplos instrumentales presentados, el peso de la curva de calibracin y la precisin del ensayo. Como porpuesta de trabajo, se plantea la utilizacin de los datos preexistentes, es decir Controles de Calidad analtica interna y resultados Interlaboratorios, con el propsito de poder expresar los resultados con una Incertidumbre asociada con mayor probabilidad de incluir todas las posibles fuentes contribuyentes (Modelo 1).

Referencias : Quantifying Uncertainty in Analytical Measurement-Second Edition EURACHEM/CITAC Guide (QUAM:2000 P1) Guide To The Expression of Uncertainty in Measurement (1993) th Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater Ed.20 , 1998 Norma ASTM D4059-00