Contraccin del msculo esqueltico

Protenas constituyentes de la maquinaria contrctil - Miosina: dominios funcionales y asociacin en filamentos - Composicin molecular de los filamentos delgados - Otras protenas sarcomricas - Diversidad molecular de las protenas sarcomricas Teora de los filamentos deslizantes - Orientacin de los filamentos en el sarcmero - Cambios en el sarcmero durante la contraccin Mecanismo molecular de la contraccin muscular - Actividad ATPasa de la miosina pura en solucin - Efecto de la presencia de actina: interaccin cclica actina/miosina asociado a la hidrlisis de ATP - Mecanismo de interaccin actina/miosina en el sarcmero

Criterios de purificacin de miosina 1. Protena soluble en soluciones de elevada fuerza inica (0.6 M ClK) 2. Precipita al reducir la fuerza inica por dilucin o dilisis

Miosina: Caracterizacin estructural

Organizacin de una superhlice: Secuencia de heptapptidos en los que el 1 y el 4 aa son hidrofbicos.

Composicin molecular de los filamentos delgados: Actina tropomiosina troponina

La titina (conectina) es la que proporciona el componente elstico al sarcmero. La nebulina acta como regla molecular.

Diversidad molecular del msculo estriado 1. Filamento delgado

-Actina (M. esqueltico) -Actina (M. cardaco) Solamente se diferencian en 4 de los 375 aminicidos ACTINA: TROPOMIOSINA (TM): TM- (rpida y lenta) , , TM- Se han encontrado 4 genes, cada uno de ellos puede generar varios mensajeros por splicing alternativo. Estas tres TM de msculo esqueltico proceden de 3 genes diferentes TROPONINAS (TnC, TnI y TnT) TnC: Tiene dos isoformas procedentes de distintos genes (TnC-rpida y TnC-lenta/cardaca) TnI: Tiene 3 isoformas (TnI-rpida, TnI-lenta y TnI-cardaca). La cardaca tiene una extensin N-terminal que contiene zonas de fosforilacin para PKA TnT: Existen 3 genes en msculo adulto que codifican isoformas de TnT-rpida, lenta y cardaca diversas debidas a splicing alternativo. Adems se pueden generar diversas variantes moleculares de estas isoformas por fosforilacin. Existen tambin isoformas fetales TROPOMODULINA Se han observado mltiples mensajeros pero no se han encontrado isoformas diferentes de la protena

Estructura atmica de la cabeza de la miosina y disposicin de la cadenas reguladoras en la zona del cuello Cabeza globular: Cadena pesada de miosina (MHC) Cadena ligera reguladora (rMLC)

Cadena ligera esencial (eMLC)

Variantes moleculares de las isofrmas lenta (s) y rpida (f) de las cadenas ligeras reguladoras de la miosina (rMLCs)

2s
lenta rpida

2s1

2s2

2f

2f1

2f2

Diversidad molecular del msculo estriado 2. Filamento grueso: Isoformas de las subunidades de la miosina

CADENAS PESADAS DE MIOSINA (MHCs) ISOFORMA MHC-/lenta MHC- MHC-2A MHC-2B MHC-2X MHC-emb MHC-neo MHC-eo MHC-m PATRON DE EXPRESION M. esqueltico lento, miocardio (ventrculo) M. mandibular (m) y extraocular (eo), aurcula M. esqueltico rpido M. esqueltico rpido M. esqueltico rpido M. esqueltico embrionario, mand. y extraocular M. esqueltico en desarrollo, mand. y extraocular M. extraocular M. mandibular (carnvoros)

CADENAS LIGERAS DE MIOSINA (MLCs) ISOFORMA MLC-1f, MLC-3f MLC-1sa lenta MLC-1s/v (-1sb) MLC-1e/a MLC-2f MLC-2s/v MLC-2m MLC-2a PATRON DE EXPRESION M. esqueltico rpido M. esqueltico lento M. esqueltico lento, ventrculo M. esqueltico desarrollo, aurcula M. esqueltico rpido M. esqueltico lento, miocardio (ventrculo) M. mandibular (carnvoros) Miocardio (aurcula)

Uso de una trampa ptica para determinar la fuerza que una nica molcula de miosina (o de otros motores moleculares) ejerce sobre el filamento de actina (o, en su caso, con el microtbulo) con el que interacciona. El trabajo mecnico que desarrolla el motor molecular puede ser utilizado para desplazar un filamento (como ocurre en la contraccin muscular) o para que el motor molecular se deslice sobre un filamento trasladando una carga de un lugar de la clula a otro (como ocurre en el transporte axoplsmico).