CENTRO HOSPITALAR DE COIMBRA E.P.

MANUAL DE PROCEDIMENTOS
PARA MICROBIOLOGIA CLNICA



Laboratrio de Microbiologia

2

Agradecimentos








Este manual contou com a colaborao de vrios profissionais dedicados
microbiologia clnica ao longo destes anos.
A todos os outros que nos ajudaram com esclarecimentos e sugestes.




Henrique Manuel Madeira Resende Oliveira
Mdico Patologista Clnico / Assistente Hospitalar Graduado
Lus Manuel Lebre Albuquerque
Mdico Patologista Clnico / Assistente Hospitalar
Mrio Rui dos Santos e Silva Cardoso
Mdico Interno do 2 ano da Especialidade de Patologia Clnica





Laboratrio de Microbiologia, 04/03/2010
3
Apresentao








Este manual no tem a inteno de alcanar o contedo e a profundidade dos livros de
microbiologia que nos serviram de referncia, mas sim servir como manual de consulta
rpida com procedimentos bsicos padronizados e informaes teis.
As orientaes e sugestes deste manual tm como base as normas do CLSI (Clinical
Laboratory Standards Institute).
Revisto anualmente pretendemos colmatar falhas, actualizar conhecimentos e
acrescentar temas considerados pertinentes.

ltima reviso: 19/01/2010









Os autores
4

NDICE
Introduo 6
Requisio de exames microbiolgicos 6
Colheita, transporte e conservao das amostras 6
Critrios de rejeio 7
Horrio de entrega de produtos no Laboratrio de Microbiologia 7
SANGUE
Hemoculturas 8
Pesquisa de Leptospira no sangue 10
Pesquisa de Trypanosomas 10
Pesquisa de Filrias 10
Pesquisa de Plasmodium 10
URINA
Urina espontnea 11
Urina de paciente cateterizado 12
Pesquisa de Leptospira na urina 12
Exame parasitolgico na urina 12
APARELHO RESPIRATRIO
Expectorao 13
Exsudado nasal 13
Exsudado orofarngeo 13
Aspirado brnquico 14
Aspirado transtraqueal 14
Lavado bronco-alveolar 14
APARELHO DIGESTIVO
Aspirado gstrico/aspirado duodenal 15
Parasitolgico de fezes 15
Pesq.rota/adenovrus;toxina Clostridium e Cryptosporidium nas fezes 15
Coprocultura 15
5
Secrees anais 16
APARELHO GENITAL
Exsudado vulvar/peniano 17
Exsudado uretral 17
Exsudado vaginal 18
Exsudado endocervical 18
Exsudado da glndula de Bartholin 18
Lquios 19
Exsudado prosttico 19
Esperma 19
CATETER E DRENOS VASCULARES
Ponta de cateter intravascular 20
FLUDOS ORGNICOS ESTREIS
Lquido cefaloraquideo (LCR) 20
Outros 20
PELE E TECIDO SUBCUTNEO
Feridas 21
Bipsias 21
Exame micolgico directo 21
TECIDO SSEO 22
SECREES OCULARES 22
MEDULA SSEA
Pesquisa de Leishmania 22
ANAERBIOS 23
RESUMO DOS TEMPOS CRTICOS E TRANSPORTE 24
REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS 25
6
MANUAL DE PROCEDIMENTOS PARA MICROBIOLOGIA CLNICA

INTRODUO
A importncia de informao clnica vlida aliada a uma amostra correctamente colhida e
transportada, e devidamente processada significa o sucesso de toda uma equipa multidisciplinar.
Colheita e transporte inadequados favorecem tanto o desenvolvimento de flora contaminante,
como eventualmente a morte do agente causador da infeco, falseando ou inviabilizando
resultados. Para alm de sujeitar o doente a nova colheita gera tambm aumento de custos.
O responsvel pela colheita deve ser, tambm responsvel pela identificao da amostra. Os
profissionais desta rea devem ser devidamente treinados e periodicamente reciclados.

REQUISIO DE EXAMES MICROBIOLGICOS
Genericamente a requisio deve:
Pertencer a um nico produto
Identificar correctamente o paciente
Proceder identificao da amostra
Explicitar a natureza do exame solicitado
Conter todas as informaes consideradas importantes para o diagnstico
Ser preenchida correctamente e na sua totalidade

COLHEITA, TRANSPORTE E CONSERVAO DAS AMOSTRAS
Consideraes gerais:
Colher em local arejado e com boa iluminao
Esclarecer claramente o paciente sobre o procedimento a realizar
Colher antes da administrao de antibiticos, sempre que possvel
Colher do local onde o microrganismo suspeito tenha maior probabilidade de ser isolado
Colher quantidade suficiente de material
Colher evitando contaminaes
Colher sempre para recipientes rgidos e esterilizados
Acompanhar-se sempre da requisio do exame
Consideraes de segurana:
Todas as amostras devem ser tratadas como potencialmente patognicas
7
Utilizar todas as barreiras de proteco consideradas adequadas a cada procedimento
Observar as condies de anti-sepsia de todo o material clnico que for utilizado
Usar recipientes estreis e meios de transporte apropriados
Identificar a amostra nos respectivos recipientes de colheita, sem nunca danificar rtulos
ou cdigos de barras que os acompanhem
No contaminar a superfcie externa do recipiente e verificar se est firmemente fechado e
vedado (caso ocorram contaminaes da parte externa do frasco, fazer
descontaminao com lcool a 70%)
No contaminar as requisies que as acompanham (caso ocorram contaminaes
proceder ao preenchimento de nova requisio)
No manusear a amostra durante o transporte
As amostras devem ser transportadas em sacos plsticos fechados
O transporte das amostras deve ser imediato porque:
Assegura a sobrevivncia e posterior isolamento do microrganismo em causa
Evita o contacto prolongado com substncias que podem exercer actividade bactericida
(ex: pomadas, anestsicos e anti-spticos)
Evita erros de interpretao nas culturas
So rejeitadas todas as amostras:
No devidamente identificadas
Colhidas em soluo de fixao (formol)
Conservadas inadequadamente quanto temperatura
Transportadas em recipientes no rgidos, frascos no esterilizados, danificados e/ou
conspurcados
Colhidas em zaragatoas completamente secas
Cujo exame bacteriolgico manifestamente intil (ex: saliva e vmito)

HORRIO DE ENTREGA DE PRODUTOS NO LABORATRIO DE MICROBIOLOGIA:
Dias de semana das 08h30 s 16h30
Sbados das 08h30 s 12h
Observaes: no caso da pesquisa de Leptospira no soro e urina estes produtos tero de ser
entregues, em dias de semana, at s 15h30, e aos sbados at s 12h devido morosidade do
seu processamento e da sua leitura.
8
SANGUE
HEMOCULTURAS
Tcnica de colheita:
Colher antes da administrao de antibiticos e no incio do pico febril
Remover os selos das tampas dos frascos desinfectando-as com lcool 70%
Fazer a anti-sepsia com lcool 70%
nota pg.9
de forma circular e de dentro para fora. Deixar
actuar dois minutos antes de efectuar a puno
Fazer a colheita (no trocar a agulha)
Volumes crticos: adultos 8 a 10 ml; crianas 1 a 3 ml; 1 a 5 ml se pesquisa de
micobactrias
Inverter os fracos para homogeneizar
Identificar correctamente todos os frascos
No colocar etiquetas ou rtulos por cima dos cdigos de barras
As requisies devem acompanhar os respectivos frascos (para cada frasco uma
requisio individual)
Transporte: imediato ou temperatura ambiente at 48h. No refrigerar
Tipo de frascos:
Frascos para aerbios e fungos (Plus Aerobic/F)
Frascos para anaerbios (Plus Anaerobic/F)
Frascos para micobactrias (Myco/FLytic)
Nmero de hemoculturas:
Trs em geral so suficientes nas 24h
Em situaes agudas: trs amostras diferentes (brao direito e esquerdo), com intervalos
de 15 a 20 minutos, 1 a 2 horas antes da antibioterapia
Endocardite: trs amostras diferentes (brao direito e esquerdo), com intervalos
superiores a 60 minutos nas 24h e eventualmente nova colheita no segundo dia.
Crianas
Bacterimias em recm-nascidos: duas amostras so geralmente suficientes
Recomendaes:
No est recomendada a colheita atravs de cateter; as punes arteriais no trazem benefcios
quando comparadas com punes venosas; no se recomenda a troca de agulhas entre a colheita
e a dispensa do sangue no frasco; o volume dispensado influencia directamente os resultados
(uma m proporo sangue/meio de cultura pode inibir o crescimento dos microrganismos); o
modo de colher igual para todos os tipos de frascos. No usar solutos iodados aquosos.

9





















NOTAS:
lcool 70%: O etanol tem efeito bactericida, rpido, sobre a maior parte das bactrias
patognicas. menos eficaz sobre fungos e vrus e ineficaz sobre formas esporuladas. A
presena de gua indispensvel sua actividade bactericida, sobretudo sua rapidez de
aco. As concentraes mais eficazes situam-se entre os 40 e 80% (usa-se geralmente a
70%). Para exercer efeito anti-sptico, deve ser mantido em contacto com a pele (sem secar)
durante pelo menos dois minutos. O etanol a 70% mais eficaz do que a 100 % porque este
ltimo precipita as protenas da membrana externa das bactrias reduzindo deste forma a sua
prpria penetrao nas clulas. bem tolerado pela pele intacta e durante curtos perodos de
tempo, mas demasiado irritante para feridas e mucosas.
PVPI 10%: A iodopovidona um complexo de iodo com a polivinilpirrolidona. O iodo
bactericida, esporicida, fungicida e virulicida. Tem ainda aco sobre os protozorios. Estes
complexos funcionam como reservatrios a partir dos quais o iodo se vai libertando lentamente.
A iodopovidona pode causar dermatite de contacto e reaces alrgicas mesmo na ausncia
de hipersensibilidade ao iodo.
10
PESQUISA DE LEPTOSPIRA NO SANGUE
Tcnica de colheita:
Se o doente se encontra em estado de leptospirmia colher sangue por venopuno
Dispensar em tubo de EDTA num volume aproximado de 3 ml
Transporte: imediato.
Observaes estes produtos tero de ser entregues, em dias de semana, at s 15h30, e aos
sbados at s 12h devido morosidade do seu processamento.

PESQUISA DE TRYPANOSOMAS
Tcnica de colheita:
As colheitas devem ser feitas no incio do pico febril e se possvel antes de qualquer
teraputica
Na fase de parasitmia, colher sangue por picada na polpa do dedo ou por venopuno
Dispensar em tubo de EDTA num volume aproximado de 3 ml
Transporte: imediato
Observaes: O laboratrio deve ser informado da rea geogrfica do paciente

PESQUISA DE FILRIAS
Tcnica de colheita:
As colheitas devem respeitar a periodicidade da microfilarmia. Esta pode ser induzida
atravs do uso de dietilcarbamazina (doses orais 50 mg/crianas e 100 mg/adultos). A
colheita feita 30 a 45 minutos aps a administrao
Na fase de parasitmia, colher sangue por picada na polpa do dedo ou por venopuno
Dispensar em tubo de EDTA num volume aproximado de 3 ml
Transporte: imediato

PESQUISA DE PLASMODIUM
Tcnica de colheita:
Colher por venopuno
Dispensar em tubo de EDTA num volume aproximado de 3 ml
Transporte: imediato
11
URINA
URINA ESPONTNEA

Tcnica de colheita:
Colher a primeira urina da manh, ou aps reteno vesical de duas a trs horas
Assepsia prvia das mos e dos genitais com gua e sabo neutro (no usar desinfectantes)
Colher o jacto mdio
Transporte: imediato ou refrigerar entre 2 a 8 C at 24 horas
Adultos do sexo feminino :
Remover a roupa da cintura para baixo
Com uma das mos afastar os grandes lbios
Lavar da frente para trs com gaze esterilizada embebida em sabo neutro
Sempre da frente para trs limpar com outra gaze esterilizada
Continuar a afastar os grandes lbios. Urinar desprezando o primeiro jacto. Colher o jacto
mdio para contentor esterilizado de boca larga (um pouco mais de metade do frasco).
No encher o frasco
Fechar o frasco vedando bem e caso haja alguma contaminao na parte externa do frasco,
descontaminar com lcool a 70%
Adultos do sexo masculino :
Remover a roupa da cintura para baixo
Mantendo o prepcio retrado, lavar com gaze embebido em sabo neutro da frente para
trs, desprezar o primeiro jacto e colher o jacto mdio para contentor esterilizado de boca
larga (um pouco mais de metade do frasco). No encher o frasco
Fechar o frasco vedando bem e caso haja alguma contaminao na parte externa do frasco,
descontaminar com lcool a 70%
Crianas e lactentes:
necessrio lavar toda a regio perianal com gua e sabo neutro e secar com gaze
esterilizada
Quando no se consegue o jacto mdio, usar o saco colector
A troca do saco deve ser feita de 30 em 30 refazendo a assepsia
Em casos especiais (recm-nascidos, lactentes de baixo peso) est indicada a puno
vesical supra pbica.
Fechar o frasco vedando bem e caso haja alguma contaminao na parte externa do frasco,
descontaminar com lcool a 70%
12
URINA DE PACIENTE CATETERIZADO
No realizar cultura de ponta de sonda vesical, porque representa a flora da uretra distal.
Recomenda-se a colheita de urina aps 24 horas da retirada da sonda. Uroculturas realizadas
antes deste perodo de tempo podem fornecer resultados positivos sem que estejam,
necessariamente, associados infeco.
Tcnica de colheita:
Sistema fechado: Clampar o cateter e colher a urina puncionando-se acima da clampagem
na proximidade da juno com o tubo de drenagem, aps desinfeco com lcool 70%
Sistema aberto: Retirar o cateter, utilizando tcnica assptica, instalar outro, deixar fluir
15 ml de urina e colher. Se o cateter vesical estiver instalado h mais de sete dias, dever
ser retirado ou trocado antes da colheita de urina (a presena de crescimento bacteriano em
urina colhida a partir de cateter instalado h mais de sete dias no tem significado)
Fechar o frasco vedando bem e caso haja alguma contaminao na parte externa do frasco,
descontaminar com lcool a 70%
Transporte: imediato ou refrigerar entre 2 a 8 C at 24 horas

PESQUISA DE LEPTOSPIRA NA URINA

Tcnica de colheita:
Antes da colheita avisar o laboratrio
Colher para contentor esterilizado
Fechar o frasco vedando bem e caso haja alguma contaminao na parte externa do frasco,
descontaminar com lcool a 70%
Transporte: imediato
Observaes estes produtos tero de ser entregues, em dias de semana, at s 15h30, e aos
sbados at s 12h devido morosidade do seu processamento e da sua leitura.

EXAME PARASITOLGICO

Tcnica de colheita:
Colher para contentor esterilizado
Fechar o frasco vedando bem e caso haja alguma contaminao na parte externa do frasco,
descontaminar com lcool a 70%
Transporte: imediato ou refrigerar entre 2 a 8C at 24h
Observaes: Para pesquisa de ovos de Schistosoma aconselha-se colheita de urina aps
exerccio fsico (ex: saltar corda, correr)
13
APARELHO RESPIRATRIO
EXPECTORAO

Tcnica de colheita:
Esclarecer o paciente para a importncia da colheita de expectorao profunda e no de
saliva. Colher uma amostra por dia, o primeiro escarro da manh, antes da ingesto de
alimentos
Remover prteses. Bochechar e gargarejar com gua (no utilizar pasta dentfrica)
Respirar fundo e tossir profundamente, recolhendo a amostra em frasco de boca larga
esterilizado
Em caso de dificuldades utilizar nebulizador ou broncofibroscopia
Na suspeita de infeco por micobactrias, colher trs amostras, em 3 dias consecutivos
Transporte: imediato ou refrigerar entre 2 a 8C at 24h excepto para a pesquisa de
micobactrias em que as amostras podem ser refrigeradas entre 2 a 8C at 72h

EXSUDADO NASAL

Tcnica de colheita:
Inserir zaragatoa estril nas fossas nasais at encontrar resistncia e rod-la de encontro
mucosa. Colocar em meio de transporte e conservar temperatura ambiente
A colheita tambm pode ser feita por aspirao atravs de seringa esterilizada
Se a pesquisa dirigida para o Mycobacterium leprae a colheita feita no septo nasal com
raspagem vigorosa
Transporte: imediato ou refrigerar entre 2 a 8C at 24h

EXSUDADO OROFARNGEO

Tcnica de colheita:
Evitar tocar nos lbios, lngua e vula. Pressionando a lngua introduzir zaragatoa estril e
colher na faringe superior, reas tonsilares ou outras reas inflamadas
Na despistagem de portadores de Meningococo colher o exsudato do cavum retro-farngeo
Na suspeita de difteria colher a nvel das falsas membranas
Transporte: imediato

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ASPIRADO BRNQUICO

Tcnica de colheita:
A colheita realizada atravs de sonda por aspirao
Colher para contentor estril
Transporte: imediato ou refrigerar entre 2 a 8C at 24h

ASPIRADO TRANSTRAQUEAL

Tcnica de colheita:
O material obtido por aspirao transtraqueal
Colher para contentor estril
Transporte: imediato ou refrigerar entre 2 a 8C at 24h

LAVADO BRONCO-ALVEOLAR

Tcnica de colheita:
O material obtido por aspirao.
Colher para contentor estril
Transporte: imediato ou refrigerar entre 2 a 8C at 24h.
15
APARELHO DIGESTIVO
ASPIRADO GSTRICO/ASPIRADO DUODENAL

Tcnica de colheita:
A colheita feita por aspirao para contentor estril. Respeitar um jejum de 8 horas
Transporte: imediato ou refrigerar entre 2 a 8C at 24h

PARASITOLGICO DE FEZES

Tcnica de colheita:
Preferir sempre as pores mucosas e sanguinolentas
Colher para frasco estril de boca larga (no colher para frasco com meio de transporte)
Fechar o frasco vedando bem
Transporte: imediato ou refrigerar entre 2 a 8C at 72h

PESQUISA ROTA/ADENOVRUS;TOXINA CLOSTRIDIUM;CRYPTOSPORIDIUM
Tcnica de colheita:
Preferir sempre as pores mucosas e sanguinolentas
Colher para frasco estril de boca larga (no colher para frasco com meio de transporte)
Fechar o frasco vedando bem
Informar o laboratrio da hora da colheita
Transporte: imediato ou refrigerar entre 2 a 8C at 48h

COPROCULTURA

Tcnica de colheita:
Preferir sempre as pores mucosas e sanguinolentas.
Colher para frasco estril de boca larga podendo conter ou no meio de transporte
Fechar o frasco vedando bem
Transporte: imediato. Refrigerar entre 2 a 8C at 24h se em meio de transporte
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SECRECES ANAIS

Tcnica de colheita:
Inserir a zaragatoa cerca de 1 cm no canal anal e fazer movimentos de lado a lado e
rotativos para colher material das criptas anais
A zaragatoa pode ser humedecida com soro fisiolgico estril
Ao retirar, certifique-se que existe colorao fecal no algodo
Colocar em meio de transporte
Transporte: imediato ou refrigerar entre 2 a 8C at 24h
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APARELHO GENITAL
Recomendaes para a preparao dos pacientes / :
No estar menstruada
Evitar tomar banho com aplicao de cremes na vspera da colheita
Trs dias de abstinncia sexual

EXSUDADO VULVAR /PENIANO /

Exsudados vulvares, raspados ou bipsias no tm muito valor para cultura a no ser em casos
de suspeita de sfilis (Treponema pallidum) ou de cancro mole (Haemophilus ducreyi).
Tcnica de colheita:
Limpar a superfcie da leso com soro fisiolgico e gaze estreis (evitar sabes)
Fazer a compresso firme da base da leso com gaze estril e seca at exsudao de um
fludo seroso tentando evitar o sangramento
Limpar este fludo inicial permitindo que o fludo mais profundo venha superfcie. Para o
caso da suspeita de sfilis, colocar um pouco de produto numa lmina para fazer esfregao.
Examinar imediatamente (contactar o laboratrio)
Colocar zaragatoa em meio de transporte em caso de suspeita de cancro mole.
Colher trs amostras em trs dias consecutivos antes de dar o resultado como negativo
Transporte: imediato ou refrigerar entre 2 a 8C at 24h

EXSUDADO URETRAL /

Tcnica de colheita:
Deve ser feita no mnimo uma hora aps a ltima mico
Limpar rea uretral externa com gaze estril
Estimular a descarga purulenta pressionando a uretra
Se no resultar inserir zaragatoa nos 2 a 4 cm distais da uretra
Colocar zaragatoa em meio de transporte
Transporte: imediato ou refrigerar entre 2 a 8C at 24h
18
EXSUDADO VAGINAL

Tcnica de colheita:
Inserir espculo sem utilizar lubrificantes
Retirar o excesso de muco cervical com zaragatoa
Fazer raspado com zaragatoa na parte mais alta do canal vaginal, ou seja, saco lateral e
posterior da vagina, rodar por alguns segundos e retirar evitando o contacto com a parede
vaginal
Colocar em meio de transporte
Transporte imediato ou refrigerar entre 2 a 8C at 24h

EXSUDADO ENDOCERVICAL

Tcnica de colheita:
Inserir espculo sem utilizar lubrificantes
Retirar o excesso de muco cervical com zaragatoa
Comprimir suavemente o colo entre as lminas do espculo para colectar o exsudato
endocervical
Se no resultar inserir zaragatoa no canal endocervical
Colocar zaragatoa em meio de transporte
Transporte imediato ou refrigerar entre 2 a 8C at 24h

EXSUDADO DA GLNDULA DE BARTHOLIN

Tcnica de colheita:
Deve ser feita no mnimo uma hora aps a ltima mico
Limpar rea uretral externa com gaze estril
Estimular a descarga purulenta pressionando a uretra contra a snfise pbica atravs da
vagina.
Colocar zaragatoa em meio de transporte
Transporte: imediato ou refrigerar entre 2 a 8C at 24h
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LQUIOS

Tcnica de colheita:
Colher com zaragatoa esterilizada
Colocar em meio de transporte
Transporte: imediato ou refrigerar entre 2 a 8C at 24h

EXSUDADO PROSTTICO

Tcnica de colheita:
Fazer massagem digital atravs do recto
Colher para recipiente estril ou com zaragatoa
Colocar zaragatoa em meio de transporte
Transporte: imediato ou refrigerar entre 2 a 8C at 24h

ESPERMA

Tcnica de colheita:
Deve ser feita para recipiente esterilizado de boca larga (aps desinfeco das mos e
glande)
efectuada aps masturbao com abstinncia sexual nos trs dias anteriores ao exame
Transporte: imediato. No refrigerar



NOTAS:
A seleco do material genital, bem como a sua colheita adequada, so factores muito
importantes j que este tipo de material, possui grande quantidade de flora comensal. No caso
de suspeita de infeco por Chlamydia trachomatis no colher secrees vaginais porque a
Chlamydia trachomatis um parasita intracelular obrigatrio do epitlio endocervical. Na
suspeita de Neisseria gonorrhoeae o material deve ser colhido no endocolo. Na doena
inflamatria plvica o lquido peritoneal colhido por aspirao do fundo do saco vaginal
(culdocentese). Na pesquisa de estreptococos do grupo B as culturas do endocolo no so
recomendadas e no se devem utilizar espculos. Sugerem-se duas colheitas com zaragatoas:
uma do intrito vaginal e outra do orifcio anorrectal
20
CATETERES E DRENOS VASCULARES
PONTA DE CATETER INTRAVASCULAR
A tcnica semi-quantitativa (mtodo de Maki) importante na diferenciao entre colonizao e
spsis. Os resultados dependem muito dos cuidados de desinfeco utilizados no momento da
extraco do cateter
Tcnica de colheita:
Desinfectar a superfcie com soluo de iodo (PVPI 10%) que dever ser removida com
lcool 70% para evitar queimadura e reaco alrgica
Retirar o cateter e cortar 5 cm da ponta mais distal, ou seja, a que estava mais
profundamente introduzida na pele, utilizando bisturi esterilizado e nunca tesouras
embebidas em solues anti-spticas
Colocar a ponta de cateter em frasco esterilizado
Transporte: imediato

FLUDOS ORGNICOS ESTREIS
LQUIDO CEFALO RAQUDEO (LCR)

Tcnica de colheita:
Procedimento realizado por equipa mdica especializada
Os volumes de LCR a serem colhidos para exames complementares de diagnstico na rea
da Patologia Clnica, devem ser criteriosamente ponderados tendo em especial ateno a
idade, condio fisiolgica do paciente e a inerente complexidade da tcnica de colheita.
Contudo existem volumes mnimos para que as tcnicas possam ser correctamente
efectuadas. MICROBIOLOGIA: GB e FG (1 ml); BK (1 ml): BM (1 ml); Ag CRYPTO (>
0.5 ml); BRUCELLA (2 ml). Caso a colheita s permita disponibilizar um frasco
esterilizado e havendo pedidos para a MICROBIOLOGIA, esta dever ser a PRIMEIRA a
manipul-lo. Caso existam vrios recipientes, a MICROBIOLOGIA dever ficar com o
que contiver menos sangue.
Transporte: imediato. No refrigerar

PLEURAL, ASCTICO, SINOVIAL, PERICRDICO, ARTICULAR, BILIS E OUTROS

Tcnica de colheita:
Desinfectar a superfcie com lcool 70%
Obter a amostra atravs de puno percutnea ou cirrgica. Quanto maior for o volume da
amostra maior a probabilidade de isolamento do agente etiolgico
Colocar em contentor esterilizado ou inocular em frasco de hemocultura
21
Transporte: imediato ou refrigerar entre 2 a 8C at 24h. Se acondicionado em frasco de
hemocultura conservar temperatura ambiente

PELE E TECIDO SUBCUTNEO
FERIDAS
Tcnica de colheita:
Limpar o local com soluo salina estril
Proceder retirada de pus, secrees e/ou tecidos desvitalizados
Colher o pus localizado na parte mais profunda da ferida
Se pouca quantidade de material, juntar soro fisiolgico estril e colocar em frasco
esterilizado
Quando os procedimentos acima descritos no forem possveis, utilizar zaragatoas. A
escarificao das bordas da ferida aps anti-sepsia necessria
Especificar a localizao da ferida
Transporte: imediato ou refrigerar entre 2 a 8C at 24h

BIPSIAS
Tcnica de colheita:
Desinfectar a superfcie com soluo de iodo (PVPI 10%) que dever ser removida com
lcool 70% para evitar queimadura e reaco alrgica
Retirar 3 a 4mm de amostra
Colocar em recipiente estril com soro fisiolgico estril ou meio de transporte
Nunca utilizar formol nem outros conservantes
Nunca envolver as peas em gaze
Transporte: imediato ou refrigerar entre 2 a 8C at 24h
EXAME MICOLGICO DIRECTO
Tcnica de colheita:
Limpar com soro fisiolgico estril; no utilizar desinfectantes
Raspar o bordo da leso utilizando um bisturi
Amostra de couro cabeludo inclui cabelo afectado
Amostra de unha implica raspagem de material por baixo desta (tbua interna)
Colocar em placas de petri esterilizadas e devidamente identificadas
22
Transporte: imediato

TECIDO SSEO
Tcnica de colheita:
Obter amostra atravs de bipsia ou de raspagem
Colocar em recipiente estril contendo soro fisiolgico estril
Nunca utilizar formol nem outros conservantes
Nunca envolver as peas de bipsia em gaze
Transporte: imediato ou refrigerar entre 2 a 8C at 24h

SECREES OCULARES
Tcnica de colheita:
Colher antes da aplicao de antibiticos, colrios ou outros produtos
Com zaragatoa colher na parte interna da plpebra inferior
Identificar correctamente a amostra
Nota: A pesquisa de neisserias pode ser efectuada no exsudato conjuntival nos recm-nascidos
Transporte: imediato

MEDULA SSEA
PESQUISA DE LEISHMANIA
Tcnica de colheita:
Obter medula ssea por puno esternal e coloc-la em recipiente estril
Transporte: imediato
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ANAERBIOS

Tcnica de colheita:
Desinfectar com lcool 70%
Colher o pus por puno aspirativa
Espetar uma borracha na agulha aps retirar o ar da seringa
Se pouca quantidade de material, juntar soro fisiolgico estril e colocar em frasco
esterilizado ou inocular em frasco de hemocultura
Quando os procedimentos acima descritos no forem possveis utilizar zaragatoa
Especificar a localizao do produto colhido
Transporte: imediato. No refrigerar

Observaes:
Sempre que possvel colher contedo purulento atravs de aspirao por agulha aps
desinfeco cuidadosa da pele ou mucosa.
A amostra pode ser obtida a partir de abcessos, feridas abertas, e trajectos fistulosos.
No utilizar zaragatoas para colheita de anaerbios, excepto se estas forem armazenadas
em meio prprio sem oxignio (portagerme).
24
RESUMO DOS TEMPOS CRTICOS E MEIOS DE TRANSPORTE
AMOSTRA TEMPO CRTICO TRANSPORTE
Hemoculturas imediato ou TA at 48h. No refrigerar Frasco prprio
P.Leptospira sangue imediato (at s 15h30 ou 12h) Tubo EDTA
P.Trypanosomas sangue imediato Tubo EDTA
P.Filrias sangue imediato Tubo EDTA
P.Plasmodium sangue imediato Tubo EDTA
Urina espont./cateter imediato ou refrigerar at 24h Contentor estril
P.Leptospira urina imediato (at s 15h30 ou 12h Contentor estril
Parasitolgico urina imediato ou refrigerar at 24h Contentor estril
Expectorao/escarro imediato ou refrigerar at 24h Contentor estril
- p.micobactrias imediato ou refrigerar at 72h Contentor estril
Ex.nasal imediato ou refrigerar at 24h Portagerme/Contentor estril
Ex.orofarngeo imediato Portagerme
Asp.brnquico imediato ou refrigerar at 24h Contentor estril
Asp.transtraqueal imediato ou refrigerar at 24h Contentor estril
Lav.broncoalveolar imediato ou refrigerar at 24h Contentor estril
Asp.gstrico/duodenal imediato ou refrigerar at 24h Contentor estril
Parasitolgico fezes imediato ou refrigerar at 72h Contentor estril
P.rota/adenovrus imediato ou refrigerar at 24h Contentor estril
Coprocultura imediato ou refrigerar at 24h Portagerme/Contentor estril
Secreces anais imediato ou refrigerar at 24h Portagerme
Ex.vulvar/peniano imediato ou refrigerar at 24h Portagerme ou esfregao
Ex.uretral imediato ou refrigerar at 24h Portagerme
Ex.vaginal imediato ou refrigerar at 24h Portagerme
Ex.endocervical imediato ou refrigerar at 24h Portagerme
Ex.glndula Bartholin imediato ou refrigerar at 24h Portagerme
Lquios imediato ou refrigerar at 24h Portagerme
Ex.prosttico imediato ou refrigerar at 24h Portagerme
Esperma imediato. No refrigerar Contentor estril
P.cateter intravascular imediato Contentor estril
LCR imediato. No refrigerar Contentor estril
Pleural e outros imediato ou refrigerar at 24h Cont. estril/fr.hemocultura
Feridas imediato ou refrigerar at 24h Portagerme/ Contentor estril
Bipsias imediato ou refrigerar at 24h C. estril c/ soro fisiolgico estril
Ex.micolgico directo imediato Placa de petri esterilizada
Tecido sseo imediato ou refrigerar at 24h C. estril c/ soro fisiolgico
Secrees oculares imediato Zaragatoa
P.Leishmania medula imediato Contentor estril
Anaerbios imediato. No refrigerar C.estril/fr.hemo/portagerme
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REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
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