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6, 1352-1358, 2010 FOSFATOS DE CLCIO DE INTERESSE BIOLGICO: IMPORTNCIA COMO BIOMATERIAIS, PROPRIEDADES E MTODOS DE OBTENO DE RECOBRIMENTOS

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Antonio Carlos Guastaldi* e Anahi Herrera Aparecida Departamento de Fsico-Qumica, Instituto de Qumica, Universidade Estadual Paulista, Rua Prof. Francisco Degni, s/n, 14800-900 Araraquara SP, Brasil Recebido em 12/8/09; aceito em 1/2/10; publicado na web em 5/5/10

CALCIUM PHOSPHATES OF BIOLOGICAL INTEREST: IMPORTANCE AS BIOMATERIALS, PROPERTIES AND METHODS FOR COATINGS OBTAINING. For decades the Hydroxyapatite (HA) was only bioceramic of calcium phosphate system used for bone replacement and regeneration, due to its similarity to the mineral phase of bones and teeth. Because its slow degradation, other calcium phosphate classified as biodegradable started to awaken interest, such as: amorphous calcium phosphate (ACP), octacalcium phosphate (OCP) and tricalcium phosphate (TCP). This work presents the evolution of the use of other calcium phosphates due to their better solubility than the HA, comparing their main physical-chemical and biological properties. Are also presented the main methods used to obtain bioceramic coatings on metal and polymer surfaces. Keywords: biomaterials; calcium phosphates; bioceramics.

INTRODUO O aumento da expectativa de vida da populao mundial tornou doenas relacionadas estrutura ssea um problema de sade pblico, sendo suficiente para que a ONU declarasse, em 30/11/1999, a dcada de 2000 a 2010 como A dcada do osso e das juntas. Um dos setores de maior demanda o de ortopedia, onde diversos autores alertam para a premncia na priorizao de polticas pblicas voltadas aos problemas osteoarticulares e para a necessidade de desenvolvimento de novos materiais e aprimoramento dos dispositivos j disponveis para a correo de problemas existentes e possibilitar melhor qualidade de vida aos pacientes.1 Materiais utilizados para a substituio e regenerao da estrutura ssea enquadram-se na classe de materiais denominados biomateriais. Estes materiais devem apresentar um conjunto de propriedades fsicas, qumicas e biolgicas que permitam desempenhar a funo desejada, alm de estimular uma resposta adequada dos tecidos vivos.2 De acordo com a resposta induzida ao meio biolgico, os biomateriais podem ser classificados em bioinertes, biotolerveis e bioativos. A resposta induzida pelos materiais bioinertes e biotolerveis, em relao ao tecido sseo, a encapsulao do implante por uma camada de tecido fibroso no aderente, que impossibilita a interao direta entre implante e tecido, podendo levar instabilidade e falha. Os materiais bioativos so capazes de interagir intimamente com o tecido vivo sem a interveno de tecido fibroso. Uma resposta biolgica especfica na interface com o tecido vivo possibilita a formao de uma ligao qumica entre o material e o prprio tecido vivo, tambm chamada por bioadeso.3 A Figura 1 apresenta o comportamento das classes de biomateriais quando implantados em defeitos sseos. IMPORTNCIA DOS FOSFATOS DE CLCIO COMO BIOMATERIAIS Os ossos e dentes de todos os vertebrados so compsitos naturais formados por molculas de colgeno ligadas em cadeias lineares arranjadas em fibras. Entre estas molculas h pequenos compartimentos intersticiais regularmente espaados, onde esto
*e-mail: guastald@iq.unesp.br

Figura 1. Comportamento biolgico dos biomateriais: a) bioinertes e biotolerveis e b) bioativos

presentes nanocristais de um slido inorgnico, que representa cerca de 65% da massa total do osso, Figura 2. Em 1926, De Jong observou a semelhana entre os padres de difrao de raios-X destes nanocristais inorgnicos e de um composto de fosfato de clcio. Apesar do componente mineral do tecido sseo no apresentar composio definida e mostrar variaes entre os estgios de maturao e envelhecimento, sua estrutura cristalina e razo Ca/P assemelhavam-se s da HA, apresentando ainda a presena de ons Na+, Mg2+ e CO32- e em menor quantidade K+, F- e Cl-, podendo ser caracterizada como uma hidroxiapatita carbonatada de composio representada por: Ca8,3 c1,7(PO4)4,3(CO3)(HPO4)0,7(OH,CO3)0,3 c1,7 onde c representa as possveis substituies catinicas. Desde ento, vrios estudos foram conduzidos para testar os efeitos de diferentes fosfatos de clcio em contato com o tecido sseo vivo.4 A deposio do fosfato de clcio nas molculas de colgeno ocorre por um processo de biomineralizao controlado envolvendo mais de 200 diferentes protenas, que atuam como inibidores e nucleares para o crescimento epitaxial e ancoragem ao colgeno. Por outro lado, a cristalizao do fosfato de clcio presente no tecido sseo envolve a formao cineticamente controlada de produtos intermedirios metaestveis. Dentro de condies in vitro, observada a transformao de um fosfato de clcio amorfo a fosfato octaclcico (OCP), o qual se converte ao fosfato de clcio com composio semelhante a HA.4 Os fosfatos de clcio apresentam-se hoje como os principais materiais estudados e empregados como biomaterial para a reposio

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Fosfatos de clcio de interesse biolgico Tabela 2. ndice de bioatividade (Ib) de diferentes biomateriais Biomaterial Vidro bioativo (4555) Vidro bioativo (5254) Cermica bioativa (AW) Hidroxiapatita (HA) Alumina Ib 12,5 10,5 6,0 3,1 0

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Classe de Ligao Ligao com bioatividade com o osso tecido mole A Sim Sim A Sim Sim B Sim No B Sim No No No

CLASSIFICAO DOS FOSFATOS DE CLCIO

Figura 2. Arranjo da HA e do colgeno no tecido sseo e semelhana dos padres de difrao de raios X do componente inorgnico do tecido sseo e da HA

e regenerao do tecido sseo, pois apresentam como principais caractersticas: semelhana com a fase mineral de ossos, dentes e tecidos calcificados; excelente biocompatibilidade; bioatividade; ausncia de toxicidade; taxas de degradao variveis; osteocondutividade (indicam o caminho para o crescimento sseo, fazendo que ocorra sobre a superfcie ou atravs dos poros). Devido sua similaridade qumica e estrutural com a fase mineral presente em ossos e dentes, durantes os ltimos 20 anos a HA foi o principal material de escolha para a reposio do tecido sseo em aplicaes mdicas, ortopdicas e odontolgicas, como recobrimento ou materiais densos.5 Trata-se de um material que apresenta ausncia de toxicidade local e sistmica, ausncia de respostas inflamatrias e aparente habilidade em se ligar ao tecido hospedeiro.2,6 Contudo, apesar de suas propriedades biolgicas promissoras, seu baixo ndice de bioatividade (Ib) e sua lenta taxa de degradao passaram a se apresentar como fatores limitantes para sua utilizao. Neste cenrio, surge o interesse no conhecimento das propriedades e comportamento biolgico de outros fosfatos de clcio para o seu emprego como biomateriais para a reposio ssea.7 A Tabela 1 relaciona diversos fosfatos de clcio e suas ocorrncias em sistemas biolgicos.
Tabela 1. Ocorrncias de fosfatos de clcio em sistemas biolgicos Fosfato de clcio Hidroxiapatita (HA) Ocorrncias Esmalte, dentina, osso, clculo dentrio e urinrio. Fosfato de clcio amorfo (ACP) Clculo dentrio e urinrio. Fosfato octaclcico (OCP) Clculo dentrio e urinrio. Mono-hidrognio fosfato de Clculo dentrio, ossos decompostos. clcio di-hidratado (DCPD) Fosfato triclcico (TCP) Clculo dentrio e urinrio, pedras salivares, cries dentrias. Calcificao de tecido mole. Pirofosfato de clcio Depsitos de pseudo-gotas em fluidos. di-hidratado (CPPD)

Uma forma conveniente de classificar os fosfatos de clcio atravs da razo molar entre os tomos de clcio e fsforo (razo Ca/P), a qual varia de 0,5 a 2,0, conforme mostra a Tabela 3.8
Tabela 3. Razo Ca/P dos fosfatos de clcio Fosfato de clcio Fosfato tetraclcico (TeCP) Hidroxiapatita (HA) Fosfato de clcio amorfo (ACP) Fosfato triclcico (a, a, b, g) (TCP) Fosfato octaclcico (OCP) Mono-hidrognio fosfato de clcio di-hidratado (DCPD) Mono-hidrognio fosfato de clcio (DCP) Pirofosfato de clcio (CPP) Pirofosfato de clcio di-hidratado (CPPD) Fosfato heptaclcico (HCP) Di-hidrognio fosfato tetraclcico (TDHP) Fosfato monoclcico mono-hidratado (MCPM) Metafosfato de clcio (a, b, g) (CMP) Frmula qumica Ca4O(PO4)2 Ca10(PO4)6(OH)2 Ca3(PO4)2 . nH2O Ca3(PO4)2 Ca8H2(PO4)6.5H2O CaHPO4.2H2O CaHPO4 Ca2P2O7 Ca2P2O7.2H2O Ca7(P5O16)2 Ca4H2P6O20 Ca(H2PO4)2.H2O Ca(PO3)2 Ca/P 2,0 1,67 1,5 1,5 1,33 1,0 1,0 1,0 1,0 0,7 0,67 0,5 0,5

A bioatividade dos materiais bioativos pode ser quantificada pelo ndice de bioatividade (Ib), que descrito como o tempo necessrio para ocorrer 50% de ligao interfacial entre um biomaterial e o tecido sseo. Materiais que apresentam ndice de bioatividade maior que 8 so classificados como de classe A e so osteoprodutores, ou seja, promovem uma resposta intracelular e extracelular que permite a colonizao de sua superfcie por clulas tronco livres no ambiente defeituoso. Materiais com ndice entre 0 e 8 so classificados como de classe B, exibindo somente osteocondutividade, ou seja, propiciam o crescimento sseo ao longo de sua superfcie. Na Tabela 2 so apresentados exemplos de materiais de cada classe de bioatividade, bem como o comportamento frente aos tecidos moles e ao osso, onde se pode observar o baixo Ib da HA, sendo superior apenas ao da alumina, a qual classificada como um biomaterial bioinerte.

Estes fosfatos de clcio podem ser sintetizados por precipitao a partir de solues contendo ons Ca2+ e PO43-. Os compostos que apresentam o grupo H2PO4- somente so obtidos em meio cido, enquanto que os que apresentam os grupos HPO42- e PO43- podem ser obtidos sob condies cidas ou alcalinas.9 Uma das propriedades mais importantes dos fosfatos de clcio, a qual explorada nas diversas aplicaes e que pode predizer seu comportamento in vivo, a solubilidade em gua. De forma geral, quanto maior a razo Ca/P, menor ser a solubilidade. Observando-se as isotermas de solubilidade de sete fosfatos de clcio, Figura 3, notase a inclinao negativa nas regies neutras e cidas do diagrama de fases. Isso reflete o fato de que todos os compostos so mais solveis conforme o pH diminui. Na regio alcalina, a concentrao de clcio aumenta com o aumento do pH.10 Dessa forma, em pH fisiolgico, a solubilidade dos fosfatos de clcio e, consequentemente, sua degradao in vivo, dada pela seguinte ordem: MCPM > a-TCP > DCPD > DCP > OCP > b-TCP > H Fosfatos de clcio de interesse biolgico Hidroxiapatita (HA) A HA est presente em ossos e dentes de todos os vertebrados, representando 5% do peso total de um indivduo adulto. Representa 55% da composio de ossos, 96% da composio do esmalte dentrio e 70% da dentina. Apresenta frmula qumica Ca5(PO4)3OH, podendo ser escrita tambm como Ca10(PO4)6(OH)2, mostrando que h 2 unidades de

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meio de sua liberao ou armazenamento. A Tabela 4 apresenta a composio inorgnica de ossos e dentes. Essa caracterstica tambm responsvel pela crescente utilizao da HA na rea ambiental para o tratamento de solos e guas contaminados e dejetos industriais.5
Tabela 4. Composio inorgnica de ossos e dentes Dente Elementos Ca P Mg Na K C Cl F Osso (%) 34 15 0,5 0,8 0,2 1,5 0,2 0,08 Dentina (%) 35 16 1 0,4 0,1 1,1 Traos 0,03 Esmalte (%) 37 17 0,4 0,6 0,2 0,8 0,3 0,01

Figura 3. Diagrama de solubilidade para o sistema ternrio Ca(OH)2-H3PO4H2O a 37 C: isoterma de solubilidade mostrando log[Ca] e pH de solues em equilbrio com vrios sais

frmula na clula unitria. Cristaliza-se no sistema hexagonal com grupo espacial P63/m, onde P indica que um sistema hexagonal primitivo, ou seja, a = b = 9,43 , c = 6,88 , a = b = 90 e g = 60. Os tomos de clcio esto localizados em stios no equivalentes, sendo 4 no stio I (Ca1) e 6 no stio II (Ca2), e os ons OH- ocupam os denominados stios canais, Figura 4.11

Figura 4. Representaes esquemticas da estrutura cristalina da HA

A estrutura cristalina da HA lhe confere uma de suas mais importantes propriedades, a facilidade de substituies catinicas e aninicas, sendo referida como capaz de incorporar metade dos elementos da tabela peridica em sua estrutura. ons Ca2+ podem ser substitudos por um grande nmero de ctions metlicos mono e divalentes, tais como K+, Na+, Mg2+, Mn2+, Ni2+, Co2+, Cu2+, Zn2+, Sr2+, Ba2+, Pb2+, Cd2+, Fe2+, e ons trivalentes de elementos terra rara. A diferena de valncia causada por qualquer substituio requer uma reduo na carga aninica para manter o balano de carga. ons PO43- podem ser substitudos por ons AsO43-, SO42-, CO32-, SiO44-, VO43- e os ons OH- por ons CO32-, F-, Cl-. Todas as substituies podem alterar a cristalinidade, os parmetros de rede, as dimenses dos cristais, a textura superficial, a estabilidade e a solubilidade da HA que, por sua vez, alteram a degradao e o comportamento in vivo. O on CO32- pode fazer tanto substituies no stio do OH-, originando a denominada HA carbonatada do tipo A, quanto no stio do PO43-, originando HA carbonatada do tipo B. Para estas substituies ocorrem efeitos opostos nos parmetros de rede: substituio do tipo A causa expanso no eixo a e contrao no eixo c, enquanto que a substituio do tipo B causa contrao no eixo a e expanso no eixo c. Alm disso, a substituio do tipo B acarreta tambm a diminuio do tamanho dos cristais e da cristalinidade. As substituies catinicas por Sr2+ e Mg2+ causam aumento da solubilidade.12 Nos organismos vivos, sua facilidade de substituies catinicas e aninicas faz com que a HA atue como reserva de clcio e fsforo e um sistema regulador de diferentes ons nos lquidos corporais por

Outra propriedade da HA a adsoro de protenas em sua superfcie. Protenas com ponto isoeltrico maior que 8 so adsorvidas na superfcie da HA devido interao eltrica entre os grupos PO4 da HA com grupos NH4 da protena. No caso de protenas cidas a adsoro ocorre pela formao do complexo HA-Ca2+ ... OOCprotena. Esta propriedade responsvel pela utilizao da HA como adsorvente em cromatografia lquida de alta performance (HPLC) para a separao de protenas e cidos nucleicos.12 Na rea de biomateriais, a HA apresenta-se como material de referncia, pois, alm da sua similaridade com a parte mineral de ossos e dentes, exibe excelentes biocompatibilidade, osteocondutividade e bioatividade, permite a proliferao de clulas sseas (fibroblastos e osteoblastos) as quais no a distinguem da superfcie do osso e hidrofilicidade, permitindo o molhamento de sua superfcie por lquidos corporais.12 Apesar de todas as vantagens exibidas pela HA seu uso clnico limitado devido sua lenta biodegradao. Estudos efetuados por longos perodos de tempo tm mostrado que a HA comea a ser reabsorvida gradualmente aps 4 a 5 anos de implantao. A reabsoro uma caracterstica desejada para biomateriais nos quais o processo de degradao concomitante com a reposio do osso em formao. Fosfato de clcio amorfo (ACP) Embora no parea existir em quantidade detectvel nos tecidos duros dos vertebrados, o ACP tem sido encontrado em sistemas biolgicos como composio de clculos dentrios e urinrios. Apresenta interesse como biomaterial, pois ocorre como uma fase intermediria durante a formao de fosfatos de clcio no meio biolgico e em sistemas aquosos.13 Apresenta frmula qumica Ca3(PO4)2.nH2O, com n variando de 3 a 4,5. Corresponde em composio HA deficiente em clcio de composio Ca9H2(PO4)6.nH2O. Anlises por microscopia eletrnica de transmisso mostram que o ACP formado por aglomerados de pequenas partculas esfricas amorfas com dimetros de 20 a 120 nm. H a possibilidade que o ACP apresente uma estrutura semelhante da HA, mas como os cristais so muito pequenos esta fase aparece como amorfa. Alguns autores descrevem a ocorrncia de dois tipos de ACP, denominados de ACP1 e ACP2, os quais apresentam a mesma composio, diferindo apenas em morfologia. As morfologias caractersticas para estes compostos so, respectivamente, gros esfricos e morfologia flocular, apresentadas na Figura 5.14 Baseado no mtodo de distribuio radial de raios-X, proposto que o ACP formado por clusters esfricos de aproximadamente 0,95 nm de dimetro, de composio Ca9(PO4)6, denominados clusters de Posner, com molculas de gua nos interstcios, Figura 6.

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Figura 5. Morfologias caractersticas do ACP1(a) e ACP2(b)

Figura 7. Estrutura cristalina do OCP

Figura 6. Distribuio dos clusters de ACP

As principais propriedades apresentadas pelo ACP so: - possibilidade de substituies catinicas e aninicas: apresenta caracterstica semelhante HA, porm com menor nmero de possibilidades de substituies, incluindo apenas os ons Mg2+ como substituintes do Ca2+ e CO32- e F- como substituintes do PO43-; - habilidade de transformao a outros fosfatos de clcio: reconhece-se que o ACP ocorra como uma fase metaestvel nos estgios iniciais da formao de fosfatos de clcio a partir de solues aquosas supersaturadas, em pH neutro ou alcalino e, tambm, durante a mineralizao dos tecidos vivos. Pode converter-se diretamente a HA ou tendo como fases intermedirias fosfato octaclcico (OCP) e HA deficiente em clcio; - solubilidade: a maior solubilidade do ACP em comparao HA torna-se uma caracterstica importante para a sua utilizao como biomaterial, pois lhe confere maior velocidade de degradao no meio biolgico. A velocidade de degradao de um material est fortemente relacionada osteocondutividade e desempenha papel importante na fixao inicial de implantes com o tecido sseo. Um material solvel possibilita a troca de ons Ca2+ e PO43- com o meio biolgico, facilitando o crescimento sseo. Fosfato octaclcico (OCP) Alm de ocorrer como fase intermediria durante a formao de ossos e dentes, convertendo-se diretamente HA, o OCP participa do processo de controle da morfologia dos cristais presentes no tecido sseo atravs da sua adsoro na superfcie da matriz proteica amelogenina, que responsvel por este processo.15 Apresenta frmula qumica Ca8(HPO4)2(PO4)4.5H2O e estrutura cristalina pertencente ao sistema triclnico (P`1) com parmetros de rede a = 19,71 , b = 9,53 e c = 6,83 e a = 9,014, b = 92,52 e g = 108,67. Consiste de um arranjo alternado entre camadas com estrutura semelhante da HA de composio 4[Ca3(PO4)2.0,5H2O] e camadas hidratadas de composio 4[CaHPO4.2H2O], apresentado na Figura 7.9,16 Como pode ser observado na Figura 7, a formao do OCP se d numa regio intermediria entre CaHPO4.2H2O e HA, explicando a composio de suas camadas e a similaridade de suas propriedades com a HA.

As principais propriedades do OCP so:17,18 - possibilidade de substituies catinicas e aninicas: a estrutura do OCP permite a incorporao de ons Cd2+, Cu2+ e F-, este ltimo levando formao de fluorapatita [Ca5(PO4)3F2]. A capacidade de adsoro destes ons pelo OCP maior que a da HA e menor que do composto CaHPO4.2H2O; - adsoro de protenas: o OCP adsorve protenas em sua superfcie to bem quanto a HA; - converso HA: o OCP uma fase metaestvel e sua transformao a HA termodinamicamente favorvel, sendo espontnea e irreversvel. Esta transformao ocorre atravs da hidrlise do OCP, acompanhada pelo consumo de ons Ca2+ do fluido biolgico, segundo a reao: Ca8(HPO4)2(PO4)4.5H2O + 2Ca2+ + 2OH- + 2H2O Ca10(PO4)6(OH)2 + 5H2O + 2H3O+ A presena de ons Mg2+ na soluo numa razo Mg/Ca superior a 0,02 inibe a transformao do OCP, devido incorporao preferencial do Mg2+ na estrutura de fosfatos de clcio; - proliferao celular e osteocondutividade: a utilizao de OCP como biomaterial vem crescendo acentuadamente, pois estudos revelam que este composto apresenta as propriedades de proliferao celular e osteocondutividade mais acentuadas que da HA, devido sua maior velocidade de reabsoro em comparao HA. A reabsoro do OCP estimula a regenerao ssea logo nos estgios iniciais de aposio ssea, sendo seguida pela formao de novo tecido sseo. Dessa forma, o OCP considerado um substituto sseo mais adequado que a HA em aplicaes onde se requer rpida formao ssea. Dekker et al.17 analisaram o comportamento in vitro, mediante cultura de clulas da medula ssea, e in vivo, mediante implantao em ratos, de amostras de Ti recobertas com HA carbonatada e OCP. Os resultados mostraram que a proliferao e adeso celular foram maiores nas amostras recobertas por OCP. Alm disso, o recobrimento de OCP ocasionou a formao de maior volume de tecido sseo na superfcie do Ti, sendo este osso mais organizado que o formado sobre o recobrimento de HA carbonatada. Estudo semelhante foi realizado por Imaizumi et al.,18 confirmando os resultados de Dekker et al..17 Os autores atriburam o melhor comportamento do OCP sua maior velocidade de reabsoro, que seguida pela formao de novo tecido sseo. Esses resultados indicam que o OCP um substituto sseo mais adequado que a HA em aplicaes onde se requer rpida formao ssea.

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Fosfato triclcico (TCP) Ocorre em vrias calcificaes patolgicas, como clculos dentrios e urinrios e o principal constituinte de cries dentrias. Pode ocorrer em 4 formas alotrpicas, onde as temperaturas de transio e sequncia de ocorrncia so: b-TCP 1120-1180C 1430-1470C > a-TCP > a-TCP

satisfatrias, no exibem comportamento biolgico adequado. Uma alternativa desenvolvida para combinar a resistncia mecnica de metais e polmeros com as propriedades biolgicas dos fosfatos de clcio a utilizao de recobrimentos da superfcie bioinerte com o material bioativo. Neste caso, a capacidade de ligao com o tecido sseo apresentada pela superfcie bioativa associada s propriedades mecnicas apresentadas pelo substrato. 23

a fase g-TCP s ocorre em altas presses. A estrutura cristalina e os parmetros de rede de cada fase so apresentados na Tabela 5. A estrutura cristalina da fase a-TCP no conhecida devido dificuldade de preparao.
Tabela 5. Estruturas cristalinas e parmetros de rede das fases alotrpicas do TCP a-TCP b-TCP g-TCP Sistema Monoclnico Rombodrico Rombodrico a (nm) 1,287 1,043 0,524 b (nm) 2,728 1,043 c (nm) 1,521 3,737 1,867

As principais propriedades apresentada pelo TCP incluem:2,5,19,20 - possibilidade de substituies catinicas: a forma alotrpica b-TCP possibilita que at cerca de 15% dos ons Ca2+ sejam trocados por Mg2+ sem mudanas significativas em sua estrutura, originando o composto denominado de b-TCP substitudo por magnsio; - bioatividade e osteocondutividade: as formas alotrpicas a e b-TCP exibem a mesma habilidade de osteoconduo, porm a fase a-TCP apresenta maior bioatividade, sendo este fato atribudo ao arranjo estrutural desta fase que possibilita que maior quantidade de ons Ca2+ e PO43- sejam trocados com o meio biolgico; - biodegradao: a utilizao do TCP juntamente com a HA tem sido uma alternativa vivel para aumentar a velocidade de reabsoro da HA. Nestes casos, a velocidade de dissoluo da mistura HA/ TCP controlada pela quantidade de TCP utilizado. Devido ao seu comportamento biodegradvel, o TCP nas formas alotrpicas a e b tem se tornado objeto de interesse na rea de biomateriais, sendo utilizado na ortopedia e odontologia como material de preenchimento de cavidades e defeitos sseos e fixao de tecidos moles. Mtodos de obteno de recobrimentos de fosfatos de clcio Fosfatos de clcio tm sido utilizados como recobrimentos de implantes ortopdicos e odontolgicos para providenciarem um ambiente condutivo para a formao e o crescimento sseo na superfcie destes implantes e promoverem a estabilizao do implante a longo e curto prazo.21 Os mtodos de recobrimento de superfcies com fosfatos de clcio incluem: plasma spray, sol-gel, eletrlise e biomimtico. Todos estes mtodos foram desenvolvidos com o objetivo de se obter recobrimento de HA, pois at ento o interesse na utilizao de outros fosfatos de clcio ainda no havia sido despertado.22 Apesar das qualidades biolgicas satisfatrias dos fosfatos de clcio, por se tratarem de materiais cermicos, apresentam baixa resistncia fratura quando submetidos a esforos de trao. As cermicas sofrem uma quantidade crtica de deformao elstica e fraturam imediatamente aps serem submetidas a esforos de trao, ao contrrio dos metais que sofrem um segundo estgio de deformao plstica antes de fraturarem, conforme pode ser observado pelo grfico de tenso x deformao apresentado na Figura 8. Portanto, a utilizao de fosfatos de clcio como biomateriais restrita a locais onde ocorram predominantemente esforos de compresso. Por outro lado, metais e polmeros, que apresentam propriedades mecnicas

Figura 8. Curva de tenso x deformao de cermicas e metais

Plasma spray ou asperso trmica Este mtodo consiste em colocar o p do material bioativo em um gs transportador, geralmente argnio, que ionizado ao passar por um arco eltrico com alta temperatura estabelecido entre dois eletrodos, sendo um nodo de cobre e um ctodo de tungstnio. O gs alcana temperaturas de at 10.000 C dentro do arco e entre 2.000 a 3.000 C a 6 cm do arco. Nestas condies, o p de fosfato de clcio transportado em alta velocidade atravs do gs, fundindo-se parcialmente e sendo projetado sobre o substrato a ser recoberto, sofrendo resfriamento rpido. O substrato a ser recoberto pode alcanar at 300 C. O recobrimento produzido mediante a deposio de vrias camadas. A espessura final do recobrimento de 40 a 60 mm. o nico mtodo utilizado para fins comerciais para recobrir implantes ortopdicos e odontolgicos, pois quando da sua criao o equipamento tecnolgico usado foi disponibilizado a um preo acessvel e os resultados indicaram produtividade adequada.24-26 Devido s elevadas temperaturas de processo, este mtodo apresenta as seguintes desvantagens: restrio da utilizao somente para substratos metlicos; utilizao somente de HA como material de recobrimento, pois os demais fosfatos de clcio sofreriam decomposio trmica; ligao puramente mecnica entre o recobrimento e o substrato; recobrimentos comportam-se como cermica frgil falhando quando submetidos a cargas de trao, devido diferena entre os coeficientes de expanso trmica do substrato e da HA. Deposio eletroltica um mtodo de eletrlise convencional que se baseia na reduo catdica da gua: H2O + e- H2 + OHEsta reao eletroltica produz um aumento local do pH nas imediaes do ctodo, sendo este aproveitado para a precipitao de ons Ca2+ e PO43- presentes na soluo. O substrato a ser recoberto atua como ctodo e um eletrodo de platina como nodo, sendo imersos em uma soluo rica em ons Ca2+ e PO43-. O pH da soluo e a densidade da corrente determinaro a quantidade e a composio do fosfato de clcio obtidas no recobrimento. Trata-se de um mtodo que emprega equipamento de baixo custo e conhecimentos cientficos e tecnolgicos bem estabelecidos,

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Fosfatos de clcio de interesse biolgico

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porm apresenta como desvantagens permitir o recobrimento apenas de substratos metlicos e as velocidades de formao e adeso do recobrimento so baixas.23 Sol-gel24-26 um mtodo de via mida que utiliza alcxidos metlicos ou sais inorgnicos como fonte de ctions e nions, gua como agente de hidrlise e alcois como solventes. A primeira etapa do processo consiste na hidrlise do alcxido (M(OR)n), gerando um hidrxido metlico (M-OH), fazendo com que a soluo se torne um sol. Em seguida, ocorre a condensao das espcies M-OH, solidificando o sol em um gel. Os gis, aps secagem, podem ser os produtos finais ou por calcinao ou sinterizao podem se transformar em outros produtos como ps, fibras, monlitos ou recobrimentos cermicos. A utilizao do processo sol-gel para a obteno de recobrimentos de fosfatos de clcio bastante recente. Como os alcxidos de clcio e fsforo apresentam baixa solubilidade em gua, o que levaria formao de um sol no muito homogneo, os precursores mais indicados para a obteno de recobrimentos de fosfatos de clcio so nitrato de clcio, cido fosfrico e fosfato de amnio dibsico. As temperaturas de sinterizao e calcinao variam de acordo com a fase de fosfato de clcio desejada no recobrimento. Este mtodo apresenta como principais vantagens: controle das caractersticas do recobrimento; baixas temperaturas de processo; permite a obteno de diferentes fosfatos de clcio; possibilidade de recobrimento de substratos metlicos e tambm polimricos; simplicidade do equipamento tecnolgico empregado; baixo custo. Por se tratar de um mtodo com emprego recente na rea de biomateriais, a literatura carece de dados quanto aderncia do recobrimento.27-29 Mtodo biomimtico Em 1990, foi desenvolvido por Abe e colaboradores um procedimento que permite recobrir praticamente qualquer substrato com uma camada uniforme de HA similar biolgica com at 15 mm de espessura, denominado mtodo biomimtico de recobrimento. O procedimento foi originalmente empregado sobre Ti c.p., ligas de Ti-6Al-4V, ao inoxidvel SUS 316, Pt e Cu, alm da Al2O3, ZrO2, vidro de slica, polimetacrilato de metila e polietileno; posteriormente, foi aplicado com xito a poli(etilenotereftalato), poli(etersulfona), poliamida 6, poli(tetrafluoretileno) e poli(alcoolvinlico), sendo que a nica limitao aparente a natureza do substrato que deve ser estvel no meio utilizado e no liberar substncias inibidoras da nucleao da HA. Trata-se de um mtodo de nucleao heterognea que permite recobrir substratos metlicos, polimricos e cermicos.30-32 Mimetiza o processo biolgico de formao de ossos e dentes atravs da utilizao de uma soluo de composio, pH e temperatura similares ao plasma sanguneo denominada simulated body fluid SBF. A composio inica do plasma sanguneo e da soluo SBF apresentada na Tabela 6.
Tabela 6. Composio inica do plasma sanguneo e da soluo SBF (mmol dm-3) Na+ Plasma sanguneo 142,0 SBF 142,0 K+ 5,0 5,0 Mg2+ Ca2+ Cl- HPO42- SO42- HCO31,5 2,5 103,0 1,0 0,5 27,0 1,5 2,5 147,8 1,0 0,5 4,2

composta por HA carbonatada de baixa cristalinidade semelhante HA biolgica presente no tecido sseo. Em seguida, o substrato era colocado em uma soluo SBF 1,5 vezes mais concentrada, obtendose um recobrimento com a mesma composio, porm com cerca de 15 mm de espessura. O mecanismo proposto para a formao do recobrimento foi: os ons silicatos presentes no vidro G dissolvem-se e adsorvem-se sobre o substrato na forma de grupos Si-OH; ocorre a nucleao de HA sobre os ons silicatos adsorvidos; os ncleos de HA crescem s custas da SBF supersaturada em relao HA, produzindo-se a primeira camada de recobrimento; a espessura da camada aumenta (at 15 mm) s custas da SBF 1,5 vezes mais concentrada. Desde a sua primeira formulao, o mtodo biomimtico sofreu significantes variaes, visando acelerar o processo de deposio e alterar a cristalinidade do recobrimento, incluindo pr-tratamentos do substrato que incluem:33-39 substituio da placa de vidro G pela prvia imerso dos substratos em soluo de silicato de sdio, levando formao de grupos Si-OH na superfcie; para substrato metlicos, substituio da soluo de silicato de sdio por tratamento em soluo de NaOH 5 M seguido por tratamento trmico a 600 C; para substratos polimricos de cadeia apolar, prvio tratamento em soluo de H2O2 30%, formando grupos polares C-OH e C=O; tratamento de superfcies metlicas por feixe de laser; utilizao direta da soluo SBF 1,5 vezes mais concentrada; diminuio do perodo de imerso de 14 para 4 dias. Outra alterao consistiu na modificao da composio da soluo biomimtica, realizada por Aparecida,40 com o objetivo de possibilitar a obteno das diferentes fases de apatita de importncia biolgica como recobrimento, tendo em vista que o mtodo biomimtico foi inicialmente desenvolvido com o propsito de se obter no recobrimento a HA. Com o crescente interesse na utilizao de outros fosfatos de clcio como recobrimento, a autora desenvolveu 6 diferentes solues biomimticas, as quais foram denominadas de SBF modificadas, possibilitando a obteno das diferentes fases de apatita de importncia biolgica e o planejamento da composio do recobrimento de acordo com a soluo utilizada. Este mtodo apresenta como principais vantagens o baixo custo, a utilizao de baixas temperaturas de processo (<100 C), a possibilidade de recobrimento de substratos metlicos, polimricos e cermicos com diferentes formas e tamanhos e o nico mtodo que possibilita a obteno de todos os fosfatos de clcio de interesse biolgico como recobrimento. Porm, ainda apresenta como desvantagem o longo perodo de imerso (4 dias) necessrio para a obteno de recobrimento. CONCLUSES Durante dcadas, devido a sua similaridade com a fase mineral de ossos e dentes, a HA foi a nica biocermica do sistema dos fosfatos de clcio empregada como biomaterial para reposio e regenerao ssea. A partir do reconhecimento da limitao de seu uso clnico, devido sua lenta biodegradao, outros fosfatos de clcio passaram a despertar interesse na utilizao como biomateriais, tais como, ACP, OCP e TCP. A maior solubilidade destas fases de apatita faz com que suas propriedades fsico-qumicas e biolgicas superem as da HA, guiando o cenrio atual para a classificao destes materiais como substitutos sseos mais adequados que a HA em aplicaes onde se requer rpida formao ssea. REFERNCIAS
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O mtodo inicialmente proposto consistia em colocar em SBF o substrato a ser recoberto juntamente com um vidro bioativo de composio em peso (%) MgO 4,6, CaO 44,7, SiO2 34,0, P2O5 16,2 e CaF2 0,5, denominado vidro G. O sistema era mantido a 37 C por 7 dias, formando-se uma camada homognea de 1 mm de espessura,

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Guastaldi e Aparecida

Quim. Nova

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