DIAGNSTICO MICROBIOLGICO DE

INFECES DO TRATO URINRIO UROCULTURA

PROFA. KTIA E. S. AVELAR

 Amostras de urina devem ser submetidas cultura quando existem suspeitas de infeco do trato urinrio, para controle de tratamento, ou em pacientes assintomticos com alto risco de infeco; Agentes etiolgicos mais freqentes Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus sp e Enterobacter sp. Entre os

cocos

Gram

positivos

destacam-se

Staphylococcus

saprophyticus, Streptococcus agalactiae e Enterococcus sp; ITU em pacientes ambulatoriais > 70% de E. coli; Importncia da anlise conjunta de EAS + urocultura.
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 COLETA DO ESPCIME CLNICO Primeira urina da manh em frasco estril de rosca e boca larga, anterior ao uso de antimicrobianos; Tempo transcorrido entre a coleta e incio das anlises No mximo 1 hora.
Jato mdio Mais apropriada para cultura Qualquer jato Crianas com auxlio de saco coletor Sonda vesical No ideal para culturas Primeiro jato Utilizado para pesquisa de processo infecciosos de uretra

Puno suprapbica Procedimento agressivo no muito utilizado

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 PROCEDIMENTO LABORATORIAL Microscopia pelo mtodo de Gram: - Valor diagnstico em casos de amostras coletadas atravs de puno supra-pbica; - No caso de bacilos Gram negativos, reportar o nmero de

microrganismos observados por campo de imerso;

- No caso de cocos Gram positivos, reportar apenas a presena dos microrganismos.

 PROCEDIMENTO LABORATORIAL Cultura: 1- Semeadura semi-quantitativa em placa - Imergir ala calibrada de 0,001mL na amostra e depositar no centro do meio de cultura;

- Espalhar o material por toda a superfcie do meio com o

auxlio de uma ala de Drigalski; - Meio de semeadura primria CLED ou Brolacin; - Incubao 35 10C / at 48h.
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 PROCEDIMENTO LABORATORIAL - Interpretao dos resultados

Contagem bacteriana - Sem crescimento - At 10.000 UFC/mL - < 105 UFC/mL - 105 UFC/mL Resultado - Cultura negativa - Provvel contaminao - Suspeita de infeco* - Infeco / Fazer identificao + TSA

* Verificar a necessidade de realizao de identificao e antibiograma

 PROCEDIMENTO LABORATORIAL Identificao dos principais patgenos: 1- Famlia Enterobacteriacea 1.1- TSI (Triple Sugar Iron)
- Produo de gs partir da glicose;
- Fermentao de glicose, lactose e sacarose; - Produo de H2S 1- Sac (-), Lac (-), Gli (-), Gs (-) H2S (-) 2- Sac (-), Gs (-) H2S (+); 3- Sac (+), Lac (+), Gli (+), Gs (+) H2S (-)

4- Meio no inoculado
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 PROCEDIMENTO LABORATORIAL Identificao dos principais patgenos: 1- Famlia Enterobacteriacea 1.2- LIA (Lisina Iron Agar)
- Descarboxilao da lisina;
- Desaminao da fenilalanina; - Produo de H2S. 1- Desaminao da fenilalanina sem H2S 2- Negativo 3- Descarboxilao da lisina sem H2S
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 PROCEDIMENTO LABORATORIAL Identificao dos principais patgenos: 1- Famlia Enterobacteriacea 1.3- SIM
- Produo de indol Presena da enzima triptofanase quebrando o triptofano com produo de gs indol. Esse reage com o reagente pdimetil-amino-benzaldedo dando uma colorao rosa
- Motilidade;
Indol (+) H2S (+)

- Produo de H2S partir da quebra do tiossulfato

de sdio.

 PROCEDIMENTO LABORATORIAL Identificao dos principais patgenos: 1- Famlia Enterobacteriacea 1.4- Citrato
- Verificar a utilizao do citrato como nica fonte de carbono pelo microrganismo;
Neg Pos

- A viragem do meio para azul se deve sua alcalinizao devido liberao de grupo amina pela utilizao do citrato.
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 PROCEDIMENTO LABORATORIAL Identificao dos principais patgenos: 1- Famlia Enterobacteriacea 1.5- Degradao da uria
- Verificar a presena da enzima urease, a qual degrada a uria levando a uma alcalinizao do meio de cultura;
- O meio de cultura utilizado o Rustigian & Stuart

+
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 PROCEDIMENTO LABORATORIAL Identificao dos principais patgenos: 1- Famlia Enterobacteriacea 1.6- Oxidase
- Pesquisa da enzima citocromo oxidase, uma enzima da cadeia respiratria; - Reativo de Kovacs Formao do composto oxidase + Kovacs (Azul de Indofenol), que substitui o oxignio como receptor final de eltrons; - As enterobactrias so oxidase negativas
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 PROCEDIMENTO LABORATORIAL Identificao dos principais patgenos: 2- Staphylococcus saprophyticus

- Prova da catalase + Prova da coagulase + Fermentao de carboidratos (manose, trealose e manitol) + descarboxilao da ornitina + resistncia novobiocina + resistncia desferrioxamina + produo de fosfatase alcalina + produo da urease; - Ver fluxograma e tabela de identificao de espcies de Staphylococcus nos anexos.

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 PROCEDIMENTO LABORATORIAL Identificao dos principais patgenos: 3- Streptococcus agalactiae

- Prova da catalase + Padro de hemlise + Teste CAMP + hidrlise do hipurato + Sorologia - Ver fluxograma e tabela de identificao de espcies de Streptococcus nos anexos.

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 PROCEDIMENTO LABORATORIAL Identificao dos principais patgenos: 4- Enterococcus sp

- Prova da catalase + Padro de hemlise + PYR, LAP, Hidrlise da esculina + Resistncia ao NaCl 6,5% + Descarboxilao de arginina + Produo de pigmento + Motilidade + Fermentao de carboidratos (arabinose, rafinose, sorbose, sorbitol, manitol e MGP) - Ver fluxograma e tabela de identificao de espcies de Enterococcus nos anexos.

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