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MEDIOS DIFERENCIALES
Son empleados para detectar reacciones bioqumicas, con carcter diferencial de grupos, gneros o especies microbianas, mediante el viraje de color del indicador presente en el medio, demostrando algunas de sus caractersticas. Estos medios son el TSI, LIA, Citrato de Simmons, SIM, Caldo rea.
CARAC
SUSTRATOS PRINCIPALES: Lactosa, sacarosa y glucosa (la proporcin en el medio de lactosa y sacarosa es de 10:1 con la glucosa) SUSTRATOS SECUNDARIOS: tiosulfato sodico, peptona, citrato ferrico amoniacal y extractos. Se siembra por picadura profunda con aguja y luego se siembra por estria en el pico. FUNDAMENTO: en es te medio se busca determinar la capacidad de la bacteria para degradar los azucares y la formacin de gas y de H2S. la fermentacin aerobica se produce en el pico del tubo y la anaerobica en el fondo del tubo. La degradacin de la lactosa ocurre en la parte superior, la de la sacarosa en la parte intermedia y de la glucosa en la parte profunda producindose un viraje de rojo a amarillo. El tiosulfato es reducido a H2S quien reacciona con el citrato frrico amoniacal para dar formacin a sulfuro de de fierrro que es de color negro. La presencia de gas se debe al CO2 producto de la
fermentacin.
INHIBIDORES: no tiene INDICADOR: prpura de bromocresol SUSTRATOS PRINCIPALES: Lisina y glucosa SUSTRATOS SECUNDARIOS: peptona, tiosulfato de sodio, extracto de levadura. Se siembra por picadura profunda con aguja y luego por estrias en el pico.
FUNDAMENTO: En este medio se permite evidenciar la descarboxilacin del aminocido lisina en la diamina cadaverina, como tambin la desaminacin de la lisina en un alfa cetocido. Estas dos reacciones se ponen de manifiesto por el viraje del indicador prpura de bromocresol. La formacin de H2S se pone de manifiesto por la presencia del tiosulfato sdico, que dar formacin al sulfato frrico. Tambin puede verificarse la formacin de gas a partir de la degradacin de la glucosa.
2.-
3.-Lisina descarboxilasa
negativa
CARACTERSTICAS: COLOR: verde INHIBIDOR: no tiene INDICADOR: azul de bromocresol SUSTRATO PRINCIPAL: citrato de sodio SUSTRATO SECUNDARIOS:fosfato dipotasico, cloruro de sodio, sulfato de magnesio y fosfato monoamonico. Se siembra por estrias.
FUNDAMENTO: Nos permite comprobas la capsidad de la basteria de utilisar el citrato como unica fuente carbono.
La degradacion del citrato conlleva a la alcalinizacion del medio y el viraje del indicador azul de bromotimol de verde a azul prusia. Con este medio podemos diferenciar entre las coliformes fecales y Citrobacter como algunas especies de Salmonella.
FUNDAMENTO: MOTILIDAD HIDROGENO SULFURADO: Aqu se estudia el metabolismo de la cisteina que posee dos molculas de asufre(S) que sern liberados como H2S por accin de la cisteinasa y con la presencia de sales ferrosas formaran S2Fe que le dar un precipitado de color negro.
INDOL: para la demostracion de indol de usa el reactivo de Kobacs, que manifiesta la degradacion del triptofano por la enzima triptofanasa en indol, que se combina con el aldehido(paradimetilbenzaldehido) presente en el reactivo de Kobacs, para producir un color rojo
CALDO REA
CARACTERISTICAS: COLOR: Rosado INDICADOR: rojo fenol INHIBIDOR: no tiene SUSTRATO PRINCIPAL: urea SUSTRATO SECUNDARIO: extracto de levadura, fosfato monopotasico y fosfato dipotasico. Este medio no se autoclava.
FUNDAMENTO: Se observa la capacidad de la bacteria de degradar la urea por medio de la enzima ureasa formando amoniaco y carbonato de aminio, que alcaliniza el medio por lo cual el rojo de fenol vira a un rojo cereza.