VACUNA COLOMBIANA CONTRA ANAPLASMOSIS Y BABESIOSIS BOVINAS: LA ALTERNATIVA MS EFICAZ Y ECONMICA PARA EL CONTROL DE ESTOS HEMOPARASITISMOS Otoniel Vizcano

Gerdts1 & Efran Benavides Ortz2 Desde hace ms de cien aos, las Babesiosis y posteriormente la Anaplasmosis, constituyen por su importancia patolgica y por su repercusin econmica, una de las mayores limitantes de la ganadera en reas tropicales (Babes, 1888; Theiler, 1908). Producen conjuntamente con sus artrpodos vectores, segn estimativos de la FAO, prdidas anuales en la ganadera tropical del mundo, en ms de 7.000 millones de dlares en un nmero aproximado de 1.200 millones de bovinos (FAO, 1988). En Colombia las prdidas debidas a hemoparsitos actualizando a pesos del ao 2000, de cifras provedas por ICA en 1980 (Lobo, 1982) son aproximadamente del orden de los doce mil seiscientos treinta y ocho millones de pesos ($12.638 millones) (Factor de correccin = 27,39). Las investigaciones internacionales realizadas sobre mtodos inmunoprofilcticos en los ltimos aos para prevenir el ganado de la accin patgena de enfermedades como la Anaplasmosis y las Babesiosis, infieren que la vacunacin como mtodo de prevencin, es el mtodo ms eficaz, econmico y confiable (Zaraza y Kuttler, 1971; Callow, 1976; Gonzlez et.al, 1976; Todorovic et.al, 1978; Vizcano et.al, 1978;Corrier et.al, 1980; Vizcano et.al; 1980; Dalgliesh et.al, 1981; Vizcano y Betancourt, 1983 y Patarroyo, 1992;). Por otra parte se destaca que la preparacin industrial de vacunas, debe poseer un soporte basado en el Mtodo Cientfico para la seleccin, formulacin y dosificacin de los organismos vacunales, identificando procesos que han sido resumidos por Grupos de Expertos, como la Red de Laboratorios de Hemoparsitos (FAO; 1994), para obtener un producto biolgico con ptimo Control de Calidad y libre de patgenos contaminantes (virus, bacterias, rickettsias, hemoparsitos, etc.). Estas recomendaciones, desplazan ampliamente, el mtodo riesgoso, contaminante y emprico de la Premunicin. El Convenio CORPOICA-LIMOR, firmado en 1995 consolid con la formulacin de la vacuna ANABASAN contra la Anaplasmosis y las Babesiosis bovina, experiencias previas sobre el uso de vacunas contra hemoparsitos en Colombia, desarrolladas por el ICA en Convenios Internacionales con la Universidad de Texas A&M, Universidad de Illinois y el Convenio Colombo-Alemn y
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Mdico Veterinario Zootecnista, M.Sc., Director de Produccin de ANABASAN, Laboratorios LIMOR DE COLOMBIA, Email:ovizgerdts@hotmail.com. Celular 311-2301354, Bogot, D.C. Mdico Veterinario, M.Sc., Ph.D. Investigador Principal. Grupo de Parasitologa Veterinaria, Programa Nacional de Salud Animal. Centro de Investigacin en Salud y Produccin Animal CEISA. Corporacin Colombiana de Investigacin Agropecuaria CORPOICA. Correspondencia: Apartado Areo 39144, Bogot, D.C., Colombia. Email:ebenavid@andinet.com. Celular:311-2301351.

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posteriormente por la Investigacin desarrollada por el Programa de Salud Animal de CORPOICA. Como un aporte de esas experiencias, lo constituye las cepas de babesias moderadamente atenuadas, aisladas en las principales regiones ganaderas del pas: Babesia bovis, aislada en la Granja de Turipan en Montera (Vizcano y col, 1971) y atenuada a partir del 11 pasaje en terneros esplenectomizados (Gonzlez y col, 1979); Babesia bigemina, aislada en la Granja de La Libertad en Villavicencio en 1982 (Vizcano, 1984) y atenuada por 5 pasajes lentos en terneros intactos y Anaplasma marginale, aislada en la Granja de La Libertad en Villavicencio en 1995 por el Convenio CORPOICA-LIMOR. La vacuna ANABASAN se formul atendiendo las recomendaciones de FAO antes mencionadas y bajo la supervisin en Pruebas de Campo por funcionarios de la Oficina de Insumos Pecuarios del ICA. Esta actividad comprendi cronolgicamente seis fases de trabajo: 1. 2. 3. 4. 5. 6. Multiplicacin y caracterizacin de ceparios (1995). Formulacin de la vacuna (1995). Prueba de seguridad en terneros (1996-1997). Prueba de Potencia (1997-1998). Prueba de Seguridad en campo (1998-2000) y Produccin del Lote Comercial (2001-2003). En el ao de 2004 se ha iniciado el lanzamiento de ANABASAN, en las principales regiones ganaderas del pas.

1.

MULTIPLICACIN Y CARACTERIZACIN DE CEPARIOS (1995)

Los ceparios mantenidos en termos de nitrgeno lquido fueron reactivados mediante inoculacin en terneros esplenectomizados. Estos animales fueron seleccionados mediante estrictos protocolos sanitarios donde previamente se seleccionaban vacas reactoras negativas muy pocos das prximo al parto a una serie de exmenes serolgicos para enfermedades de mayor importancia a la ganadera (IBR, Aftosa, Leucosis, Brucella, Leptospirosis, etc.) y los terneros reactores negativos fueron tambin sometidos a las mismas pruebas de sus madres con muestras sanguneas obtenidas pre y post-ingestin de calostro. (Tabla 1. Pruebas para seleccin de terneros libres de enfermedades). Completada la caracterizacin del comportamiento de los ceparios, se procedi a la formulacin, atendiendo condiciones de seguridad.

2.

FORMULACIN DE LA VACUNA (1995)

La vacuna se formul teniendo en cuenta los procedimientos que para este objetivo sugiere la FAO (FAO, 1994), de modo que cada antgeno est contenido

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en viales individuales identificados con una tapa de color distintivo: Anaplasma marginale, tapa amarilla; Babesia bigemina, tapa azul y Babesia bovis, tapa roja (Figura 1), los cuales post-descongelacin se mezclan con el contenido del frasco diluyente estril para obtener la dosis vacunal trivalente (Anaplasma marginale, Babesia bigemina y Babesia bovis). La dosis vacunal se estableci en 1x107 organismos, para cada uno de los tres parsitos incluidos en la vacuna.

Tabla 1. Protocolos para la seleccin de terneros libres de enfermedades

P ro ced im iento s A plica d o s Ag ente infeccio s o P rueb a s ero l g ic a va ca s P rueba s ero l gica ternero s P reca lo s tra l P o s t c a lo s tra l Fro tis s a ng uneo C a pila r V eno s o

C ertifica do va cuna ci n

T ra ta m iento es trep to m icina

Brucella
Fiebre A fto s a

X X E nferm eda des de la R ep ro d ucci n

I.B.R . D .V .B. P .I.3. B.L .V .

X X X X X

X X X X X H em o p a r s ito s X

Leptospira

B. bo vis B. bigem ina A . m a rgina le

X X X

X X X

L a interpreta ci n d ifiere p a ra va ca s vacuna da s o no va cuna d a s

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Figura 1. Vacuna ANABASAN, presentacin comercial en recipientes plsticos para criopreservacin. 3. PRUEBA DE SEGURIDAD EN TERNEROS (1996-1997)

La prueba de seguridad en terneros se dise acorde a lineamientos de Grupos de Expertos (FAO, 1994) y est dirigida a evaluar el poder patgeno de las cepas a utilizar en la vacuna al ser aplicadas a una concentracin mayor de la que se aplicar como dosis vacunal en condiciones de campo; consisti en la inoculacin experimental de terneros Bos taurus de 10 a 12 meses de edad, intactos (con el bazo), no inmunes a babesias y anaplasma, con 10 Veces la Dosis Vacunal (VDV) para cada una de las especies de Babesias y 5 VDV para anaplasma. Adicionalmente dos animales se inocularon con inmungeno trivalente (3x107 para cada parsito). Desde 15 das antes de la inoculacin, hasta dos semanas despus de finalizado el periodo prepatente para cada parsito se realiz un seguimiento diario de parmetros clnicos, hematolgicos y serolgicos. Las determinaciones clnicas incluyeron temperatura, hemoglobina y recuentos totales de glbulos blancos y rojos, mas el recuento diferencial. El anlisis serolgico consisti en la determinacin de anticuerpos especficos para cada especie de parsito, mediante una prueba de Inmuno Fluorescencia Indirecta (IFI), utilizando una dilucin de los sueros de 1/40. En esta prueba de Seguridad en Terneros, el inculo de Babesias (B. bovis o B. bigemina), fue inocuo a 10 VDV. Para B. bigemina el pico de parasitemia, se present el da 8 post inoculacin (p.i), con una reduccin porcentual del hematocrito (con relacin al valor al inicio del experimento) del 40%, recuperndose los animales sin necesidad de tratamiento. En el caso de B. bovis se present una reduccin del 8% en el hematocrito el da 16 p.i.

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Para el inculo de A. marginale (aplicado a 5VDV) se redujo el hematocrito hasta valores extremos de 14% y se requiri tratamiento del animal; lo cual indica que se debe dar un manejo con tratamiento profilctico para este organismo. Cuando este organismo se inocul 3VDV no se requiri el tratamiento de los terneros (Tabla 2). Tabla 2. Conclusiones de la Prueba de Seguridad en Terneros Babesia spp Anaplasma marginale Inculo Trivalente Inocuo a 10 V.D.V , pico parasitmico da 8 p.i. No fue necesario el tratamiento A 5 V.D.V, redujo el hematocrito 14% del valor absoluto. Fue necesario el tratamiento A 3 V.D.V, no requiri tratamiento de los terneros.

4.

PRUEBA DE POTENCIA (1997-1998)

En la Prueba de Potencia se compar el efecto de un inculo patgeno monovalente de 1x108 en el caso de B. bigemina y de 2x108 organismos tanto para B. bovis como para A. marginale en 40 animales con edades entre 10-18 meses (20 vacunados y 20 controles no vacunados). El grupo control se dividi en 4 subgrupos de 5 animales cada uno. Tres grupos fueron retados con inculos patgenos monovalentes y un cuarto grupo se ret con un inculo patgeno trivalente (A. marginale, B. bovis y B. bigemina). La prueba const de dos fases: Inmunizacin con duracin de 77 das y Desafo con duracin de 46 das. En estas fases, a intervalos semanales se registr la temperatura, condicin general y hematocrito de los animales. En esta Prueba de Potencia durante el desafo se observ 100% de proteccin del grupo vacunado, mientras que todos los animales del grupo Control requirieron tratamiento para salvar sus vidas. El grupo vacunado exhibi un incremento porcentual del Hematocrito de 19%, con relacin al valor al inicio de esta fase (Figura 2). Un resumen de la Prueba de Potencia se aprecia en la Tabla 3. (Documento Convenio CORPOICA-LIMOR, 1998).

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Figura 2. Prueba de Potencia de Anabasan: Cambios en el Hematocrito del Grupo Vacunado y de los Grupos Controles no Vacunados. 5. PRUEBA DE SEGURIDAD EN CAMPO

Esta prueba consisti en el seguimiento de reacciones post-vacunales en grupos de animales con diferentes edades, razas y sexo, localizados en dos regiones del pas: Sabana de Bogot (dos grupos de animales) y Magdalena Medio (un grupo). Las observaciones de los animales para detectar reacciones postinmunizacin, se analizaron durante un periodo de ocho semanas. Se estableci un esquema de tratamiento profilctico para reacciones post-vacunales, consistente en la mitad de la dosis de Diminazene en caso de reacciones desfavorables a Babesias y una dosis teraputica de Oxitetraciclina en el caso de reacciones debidas a Anaplasma. Tabla 3. Resumen de la Prueba de Potencia Grupo Muertos/Total Tratamiento/Total Reduccin Fiebre/Total en Hto. En ms de de 10 puntos 3/20 13/20 1/5 4/5

Vacunado Control B.

0/20 1/5

0/20 3/5

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bovis Control B.bigemina Control A. marginale Control Triple

1/5 0/5 0/5

1/5 5/5 4/5 Babesia spp 3/5 A. marginale

3/5 5/5 4/5

5/5 5/5 5/5

En esta Prueba de Seguridad en Campo, los animales no presentaron reacciones clnicas adversas a la vacunacin, slo una ligera disminucin del hematocrito en animales particularmente susceptibles, de los grupos ubicados en la Sabana de Bogot. En el grupo ubicado en el Magdalena Medio, con previa exposicin a garrapatas, los animales no presentaron ninguna reaccin clnica y por lo tanto no requirieron de tratamiento profilctico (Figuras 3 y 4; Tabla 4) (Documento Convenio CORPOICA-LIMOR, 2000).

Figura 3. Prueba de Seguridad en Campo, Grupo Sabana de Bogot.

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Figura 4. Prueba de Seguridad en Campo, Grupo Magdalena Medio Tabla 4 . Resumen de la Prueba de Seguridad en Campo GRUPO RESULTADO Sabana de Bogot Se trataron 3/29 por Babesia spp y 15/29 por A. marginale. Ninguno de los animales requiri tratamiento Magdalena Medio 6. PRODUCCIN DEL LOTE COMERCIAL (2001-2003)

En el 2003 finaliz la formulacin del lote comercial de ANABASAN , el cual se encuentra disponible para proteger de forma eficaz, econmica y sostenible al ganado susceptible contra la Anaplasmosis y las Babesiosis. En el presente ao de 2004, se ha iniciado el lanzamiento de ANABASAN , en las principales regiones ganaderas del pas, como objetivo del Convenio CORPOICA-LIMOR, para que las enfermedades hemoparasitarias tengan un control sostenible y ms atractivo para el mercado internacional de la carne. CONCLUSIONES ANABASAN es cien por ciento efectiva. Permanente: Una sola dosis de por vida Calidad excelente y libre de patgenos contaminantes. La leche y la carne de animales vacunados, no presentan riesgo alguno para el consumo humano. No contamina el medio ambiente y permite exportaciones sin contaminantes qumicos (Mercado Verde). Ayuda al Mejoramiento Gentico (Ms carne y ms leche), con la introduccin de nuevas razas inmunizadas.

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No produce reaccin anafilctica. BIBLIOGRAFA

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