ESTRUTURA DE BIOREATORES

NDIA S. PARACHIN Aula 2

BIORREATORES OU REATORES BIOQUMICOS

So aqueles nos quais se do vrias reaes qumicas na presena de biocatalisadores que podem ser clulas vivas ou enzimas.

BIORREATORES
PRESENA DE CLULAS VIVAS REATORES ENZIMTICOS REATORES EM FASE NO-AQUOSA

Microorganismos: Naturais ou Recombinantes Clulas Animais Clulas Vegetais

Fase Homognea: Enzimas Livres Fase Heterognea: Enzimas imobilizadas

Cultivos em meios semi-slidos

Tipos de Bioreatores

MICRORGANISMO S BIOPRODUTOS ENZIMAS VACINAS

VITAMINAS ANTIBITICOS PROTENAS ETC...

alimentao
Vlvula e manmetro

(Agitao mecnica)

defletor

Technical illustration of an 18 ml working volume miniature stirred bioreactor (MSBR) prototype.

Fonte: Betts and Baganz Microbial Cell Factories 2006 5:21

Vista superior do biorreator New Brunswick Scientific Bioflo 110

Vista lateral do biorreator New Brunswick Scientific Bioflo

Como lidar com a tampa do fermentador

Figure 2a: WRONG Handling of Drive Assembly
HEADPLATE

impeller shaft, note that there is a correct and an incorrect way to position the drive assembly aside while it is still attached to the headplate and the agitation assembly on a flat surface. impeller shaft, note that there is a correct and an incorrect way to position the assembly on a flat surface. The wrong way, which is resting the headplate and impeller shaft on a surface (see Figure 2a) puts the impeller shaft at risk for damage: The wrong way, which is resting the headplate and impeller shaft on a surface (see Figure 2a) puts the impeller shaft at risk for damage: Figure 2a: WRONG Handling of Drive Assembly

HEADPLATE
DRIVE ASSEMBLY DRIVE ASSEMBLY

IMPELLER SHAFT

IMPELLER SHAFT

The correct way, which is resting the drive assembly and headplate on the surface (see Figure 2b below), protects the impeller shaft from bearing weight. Naturally, you will The correct way, which is resting the drive assembly and headplate on the surface (see have to take care not to hit the shaft as you work around it Figure 2b below), protects the impeller shaft from bearing weight. Naturally, you will have to take care not to hit the shaft as you work around it Figure 2b: CORRECT Handling of Drive Assembly

Figure 2b: CORRECT Handling of Drive Assembly

HEADPLATE

HEADPLATE
DRIVE ASSEMBLY DRIVE ASSEMBLY

IMPELLER SHAFT

IMPELLER SHAFT

Tanque de agitao
Estrutura tpica de um fermentador utilizado para fermentao microbiana
Stirred Tank Bioreactors 181

Wb

Li Wi

Hb

D
Figure 1 Basic stirred tank design with a radial impeller (Rushton turbine) and four equally spaced baffles.

Fermentadores em escalas de at 10L so feitos em pirex. Acima disso so feitos de alumnio

Table 1 Typical dimension ratios among parameters in Figure 1 H /D L i /T W i /T Hb/T 1 T/D Wb/D 0.1 0.30.6 12 (until 4) 0.25 0.2

Caractersticas geomtricas
Mistura do meio de cultura prioridade Estrutura cilindrica ou abaulada para facilitar mistura Dimenses pr-definidas.De acordo com padres internacionais. Partes essenciais: motor , sparger, e p rotatria

Geometria tpica de um tanque de agitao

Volume de trabalho vs. Head space

Volume de trabalho: volume total do meio de cultura Head space: volume restante De um modo geral o volume de trabalho = 70-80% do volume total do fermentador. Varia de acordo com o fermentador utilizado
Volume vazio
Vessels Total Volume Working Volume Design Design Display Function Indication Range Control

47

5
1.3 L 0.4-1.0L

SPECIFICATIONS
3.0L 0.8-2.2L 7.5L 2.0-5.6L 14.0L 4.0-10.5L

BioFlo/CelliGen 115 System

Volume de trabalho

Control Station/ Utility Station

Temperature

Heat-blanketed and Water-jacketed All vessels are borosilicate glass, autoclavable, with dished-bottom Advanced compact controller with integrated utility station capable of supporting 2 additional utility stations and vessels 8.4 industrial color touchscreen display is standard with control station but not included with for 2nd or 3rd utility station Fermentation and cell culture monitoring and control Digital display in 0.1C increments 20C above coolant temperature to 70C max temperature (65C max temperature for 14.0L) PID for heating and cooling Heat-blanketed Vessels: External heating blanket and immersed

Componentes de um bioreator

Sistema de agitao Sistema de ar Controle de espuma Controle de temperatura Controle de pH Porte de retirada de amostra/entrada de nutrientes

Sistema de Agitao
O Sistema de agitao consiste no agitador e aletas. Aletas- quebra o fluxo de lquido para aumentar a eficincia de mistura

Principais funes do sistema de agitao: 1. Proporcionar boas taxas de transferncia de mistura e, assim, aumentar a massa atravs do lquido em volume e camadas limite de bolhas. 2. Providenciar que as bolhas de ar sejam quebradas

Sistema de agitao
Componentes do agitador

Motor Redutor de velocidade Selador mecnico Eixo de rotao

Impulsores Ps rotatrias

Tipos de ps rotatrias
(a) (b) (c) (d)

Sistema de entrada de ar
Consite nas seguintes partes: Compressor/ Balas de gs Sistema interno de controle Sistema de filtro para esterelizar Sparger Sada de ar pelo condenssador

Fonte: http://www.dasgip.com/ catalog/SR0200SS/

Condensador
O Sistema de sada de ar de fermentadores pequenos (< 10L) contm um condensador

Condensador
Troca de calor por onde h passagem de gua Compostos volteis e vapor de gua se condensam na superfcie interna do condensador. Reduz a perda de compostos volteis na fermentao ex: etanol.

Sparger- Espalhador de ar
Quebra o ar que est entrando no fermentador em pequenas bolhas Modelo mais frequente consiste em um anel cilindrico com pequenos crculos.

Sparger-localizado abaixo das ps rotatrias

Quando o fermentador esvaziado o ar deve estar desligado para evitar contamizao com a linha de gs.

Impacto na oxigenao do fermentador e velocidade da p giratria

Baixa velocidade

Alta velocidade

As bolhas de ar no so quebradas e tendem a subir rapidamente. Baixa diluio no lquido

Quebra das bolhas de ar que de difundem mais facilmente

Importante- compromisso ar, velocidade, tipo de cultura

Cascata Ar/Agitao
Permite aumentar a quantidade de ar no fermentador de acordo com a necessidade do microrganismo
Modo padro nenhuma cascata. Os modos de cascata disponveis aparecem em preto

Selecione a cascata desejada. Nesse ex. agitao e ar

Digite os valores desejados/ apropriados

Unidades comuns de fluxo de ar

Volume por volume por minuto ou VVM definida por : taxa de fluxo de ar volumtrico volume lquido

VL
importante que o fluxo de ar seja expresso em volume/ minuto para que seja compatvel com o volume do reator

FA

Controle de espuma
O controle de formao de espuma essencial para fermentaes aeradas. Dependendo do microrganismo utilizado a espuma formada ir interferir com o procesos de fermentao

Controle de espuma no fermentador

Problemas associados a formao de espuma: 1. Entupimento de filtros 2. Aumento da presso interna no bioreator 3. Perda de meio de cultura Solues:

1. Deteco da espuma 2. Adio de antiespumantes

A Necessidade de antiespumante vai depender de:

composio do meio. Meio rico em protenas gera mais espuma produtos da fermentao. Produtos com caractersticas de detergentes geram mais espuma Taxa de aerao e velocidade de agitao. Uso de controladores mecanicos Equipamentos de ultrasom reduzem a formao de espuma Volume vazio ou head space Fermentaes que tendem a formar muita espuma requerem um maior volume de head space Temperatura do condensador Condensadores resfriados reduzem a formao de espuma

Sonda para deteco de espuma no fermentador

Nvel das sondas

Antiespumante

Quando a sonda superior no estiver sendo molhada pela espuma a bomba de antiespumante fica desligada.

Quando a sonda superior estiver imersa na espuma a bomba ser acionada permitindo a entrada de antiespumante no fermentador.

Controle de Temperatura
O Sistema de controle de temperatura consiste em: Sondas de temperatura Sistema de transferncia de calor O Sistema de transferncia de calor consiste em um sitema de jaqueta que envolve o fermentador.

Sistema de aquecimento/ refrigerao

Jaqueta de aquecimento

Bioreactors Design

Sistema de aquecimento

(b)

(c)

(a)

Jaqueta de gua re 3 Heat transfer ways in a stirred tank bioreactor (STBR): (a) jacket; (b) internal coils; and (c) external heat exchang

Alternativas para la transferencia de calor en los bioreactores tipo tanque agitado

a) Vaso enchaquetado b) Enrrollado externo c) Enrrollado interno d) Deflector enrrollado e) Intercambiador de calor externo

Controle de pH
Sistema de controle de pH consiste em: Sonda Base cido

A sonda de pH esterelizada com o fermentador

Controle de pH
Bases comumente utilizadas: NaOH KOH cidos comumente utilizados: H2SO4 < 10%

A sonda de pH esterelizada com o fermentador

Controle de pH: Setpoint and deadband

Setpoint: pH desejado Deadband: intervalo no qual no ser adicionado cido ou base no fermentador

deadband
Objetivo: evitar excesso de cido ou base no fermentador Ajustado da seguinte forma:
A bomba de cido ligada quando o pH ultrapassa esse limite

Limite superior Setpoint Limite inferior

A bomba de cido ligada quando o pH ultrapassa esse limite

Ligar o controle de pH Deadband

Acesso a tela de controle