PRACTICA N 10 ACCIN DE LOS AGENTES QUMICOS SOBRE EL CRECIMIENTO BACTERIANO: CONTROL DE MICROORGANISMOS

I.

INTRODUCCIN:

Existen ciertas sustancias qumicas que influyen negativamente sobre las bacterias, pudiendo ejercer tres tipos de efectos diferentes: Bactericida Bacteriostatico Bacteriolitico Antes de proceder al estudio de las diversas molculas que pueden afectar el crecimiento o la viabilidad de los microorganismos, veamos unas cuantas definiciones bsicas. Agentes esterilizantes son aquellos que producen la inactivacin total de todas las formas de vida microbiana (o sea, su muerte o prdida irreversible de su viabilidad). (Tambin existen agentes fsicos esterilizantes, como ya vimos en los dos captulos anteriores). Agentes desinfectantes (o germicidas) son agentes (sobre todo qumicos) antimicrobianos capaces de matar los microorganismos patgenos (infecciosos) de un material. Pueden (y en muchos casos suelen) presentar efectos txicos sobre tejidos vivos, por lo que se suelen emplear slo sobre materiales inertes. Agentes antispticos son sustancias qumicas antimicrobianas que se oponen a la sepsis o putrefaccin de materiales vivos. Se trata de desinfectantes con baja actividad txica hacia los tejidos vivos donde se aplican. Quimioterpicos son compuestos qumicos con actividad microbicida o microbiosttica, con una toxicidad suficientemente baja como para permitir su administracin a un organismo superior, en cuyos fluidos corporales y tejidos permanece estable un cierto tiempo a concentraciones tales que los hace eficaces como antimicrobianos dentro del organismo

Los objetivos de la prctica son: Demostrar la accin de algunos desinfectantes sobre el crecimiento bacteriano Determinar la sensibilidad antibitica de algunas bacterias

II.
Vidrio: -

MATERIAL:
Placas petri Tubos de ensayo Frasco tapa rosca Vaso de precipitado Bagueta Probeta Otros: Fsforos Hisopos estriles Algodn Agua destilada Alcohol Pabilo

Metal: Asa bacteriolgica Gradilla Esptula Medios de cultivo: Agar Mueller Hinton

Equipos: Autoclave Horno estufa Balanza analtica Incubadora Cultivos Bacterianos:

Proteus ssp. Pseudomonas spp. Escherichia coli

III.

MTODO:

A. Accin de algunos desinfectantes sobre el crecimiento bacteriano Introduzca un hisopo estril dentro del cultivo (Pseudomonas spp), eliminando el sobrante presionando el hisopo contra la pared del tubo y siembre en tres direcciones sobre toda la superficie de la placa de Agar Mueller Hinton . Tape las placas y deje secar el inculo unos minutos a temperatura ambiente. Coloque con la ayuda de una pinza en la superficie sembrada los discos estriles de papel de filtro previamente embebidas con cada uno de los desinfectante (tenga cuidado de no impregnar demasiado los discos) Incube las placas a 35-37 C por 24-48 horas y luego mida el dimetro de cada zona de inhibicin en milmetros. B. Sensibilidad antibitica de algunas bacterias Mtodo de difusin en agar (tcnica de kirby-bauer) - Introduzca un hisopo estril dentro del cultivo (Streptococcus spp) , eliminando el sobrante presionando el hisopo contra la pared del tubo y siembre en tres direcciones sobre toda la superficie de la placa de Agar Mueller Hinton . - Tape las placas y deje secar el inculo unos minutos a temperatura ambiente. - Coloque con la ayuda de una pinza en la superficie sembrada los discos que contienen los antibiticos respectivos. - Incube las placas a 35-37 C por 24-48 horas y luego mida el dimetro de cada zona de inhibicin en milmetros. - La interpretacin de los resultados se realizar teniendo en cuenta el protocolo de anlisis de discos de sensibilidad biolabtest. Se medir el dimetro del halo de inhibicin de todas las cepas bacterianas y los intervalos nos indicaron sensible, sensibilidad intermedia o resistente del microorganismo al antibitico.

IV.

RESULTADOS:

A. Accin de algunos desinfectantes sobre el crecimiento bacteriano

Ficha de observacin del agente qumico frente a Bacillus spp

Agente qumico Lejia Sapolio Poet Kreso Ac. Muriatico

Halo neto de inhibicin del crecimiento 2 (mm) 1 0 4 16

Ficha de observacin del agente qumico frente a Staphylococcus

Agente qumico Leja Sapolio Poet Kreso Ac. Muritico

Halo neto de inhibicin del crecimiento 2 (mm) 1 0 1 8

Ficha de observacion del agente qumico frente a Proteus spp

Agente qumico Leja Sapolio Poet Kreso Ac. Muriatico

Halo neto de inhibicin del crecimiento 5 (mm) 1 2 2 15

Ficha de observacion del agente qumico frente a Escherichia Coli

Agente qumico Lejia Sapolio Poet Kreso Ac. Muriatico

Halo neto de inhibicin del crecimiento 4 (mm) 1 1 2 3

Ficha de observacion del agente qumico frente a Pseudomonas

Agente qumico Lejia Sapolio Poet Kreso Ac. Muriatico

Halo neto de inhibicin del crecimiento 13 (mm) 12 3 10 35

B. Sensibilidad antibitica de algunas bacterias

Ficha de observacion de la sensibilidad antibiotica para Staphylococcus (a)

Antibiti Halo de co inhibicin del DOX 22 TET 20 NIT 25 STX 1 CTR 30

Interpretacin sensible sensible sensible resistente sensible

Ficha de observacion de la sensibilidad antibiotica para Staphylococcus (b) Antibiti Halo de co inhibicin del CLN 0 PEN 0 AMX 0 CAZ 33 CAZ 33

Interpretacin resistente resistente resistente sensible sensible

Ficha de observacion de la sensibilidad antibiotica para Pseudomonas (a) Antibiti Halo de co inhibicin del NAL 45 AMK 33 VAN 1 DOX 31 TET 43

Interpretacin sensible sensible resistente sensible sensible

Ficha de observacion de la sensibilidad antibiotica para Pseudomonas (b)

Antibiti Halo de co inhibicin del NIT 25 STX 0 CTR 35 PEN 0 AMX 0

Interpretacin sensible resistente sensible resistente resistente

Ficha de observacion de la sensibilidad antibiotica para Escherichia Coli (a)

Antibiti Halo de co inhibicin del CAZ 23 CLN 2 NAL 20 AMK 15 VAN 4

Interpretacin sensible resistente sensible intermedio resistente

Ficha de observacion de la sensibilidad antibiotica para Escherichia Coli (b)

Antibiti Halo de co inhibicin del DOX 17 TET 17 NIT 21 STX 21 CTR 26

Interpretacin sensible intermedio sensible sensible sensible

Ficha de observacion de la sensibilidad antibiotica para Bacillus Subtilis

Antibiti Halo de co inhibicin del PEN 0 AMX 0 CAZ 19 CLN 15 NAL 10

Interpretacin resistente resistente sensible intermedio resistente

V. DISCUSIN: Antibioticos usados y en que parte del microorganismo actua:

DOX: Doxicilina.- Bacteriostatico. Actua por inhibicin de la sntesis de

protenas y bloquea la union del ARN.

TET: Tetracilina.- Bacteriostatico. Actua a nivel del ribosoma, altera la membrane citoplasmatica. NIT: Nitrofuranloina.- Bacteriostatico. Actua en el ADN. STX: Trimetropin / Sulfametaxol.- Bacteriostatico. Impide el metabolism bacteriano. CTR: Ceftriaxona.- Bacteriostatico. Inhibicion de la pared celular. PEN: Penecilina.- Bactericida. Altera la pared celular bacteriana. AMX: Amoxicilina.- Bactericida. Altera la pared celular bacteriana. CAZ: Ceftazidima.- Bactericida. Inhibe la absorcion de peptidoglicanos de la

pared celular. CLN: Clindamicina.- Bacteriostatico. Interfiere en la sisntesis de proteinas. NAL: Ac. Naldixidico.- Bacteriostatico. Bloquea la replicacion del ADN. AMK: Amikacina.- Bactericida. Actua en el ribosoma. VAN: Vancomicina.- Bactericida. Inhibe la sintesis de la pared bacteriana.

VI.

BIBLIOGRAFA:

http://www.ugr.es/~eianez/Microbiologia/14agquimicos.htm http://es.wikipedia.org/