Bacteriología Unidad Temática I 2013-2014 PDF

Manuales Departamentales
Programa acadmico de la asignatura de Microbiologa y Parasitologa
Bacteriologa
Unidad Temtica I
PLAN 2010
Segundo ao 2013-2014
Departamento de Microbiologa y Parasitologa Facultad de Medicina

Universidad Nacional Autnoma de Mxico
Ciudad Universitaria, D.F., julio de 2013.
FACULTAD DE MEDICINA
Dr. Enrique Graue Wiechers Dra. Rosalinda Guevara Guzmn Dr. Pelayo Vilar Puig Dr. Leobardo Ruz Prez Dra. Irene Durante Montiel Dr. Melchor Snchez Mendiola Dr. Ricardo Valdivieso Caldern Dr. Jaime Mas Oliva Dra. Teresa Fortoul van der Goes Dr. Arturo Ruiz Ruisnchez Lic. Graciela Zuiga Gonzlez Lic. Ral A. Aguilar Tamayo Dra. Ma. Eugenia Ponce De Len Castaeda
Director Secretario General Jefe de la Divisin de Estudios de Posgrado E Investigacin Secretaria de Enseanza Clnica, Internado Y Servicio Social Secretaria Tcnica del H. Consejo Tcnico Secretario de Educacin Mdica Secretario de Servicios Escolares Coordinador de Investigacin Coordinadora de Ciencias Bsicas Coordinador de Servicios a la Comunidad Secretaria Administrativa Secretario Jurdico y de Control Administrativo Coordinacin de Modificacin del Plan de Estudios
DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGA Y PARASITOLOGA Dra. Patricia M. Tato Zaldivar Q.F.B. Yolanda Garca Yez Dr. Javier R. Ambrosio Hernndez M. en C. Aurora Candil Ruiz M. en C. Rafael Garca Gonzlez M.C. Beatriz Meraz Ros Jefa del Departamento Coordinadora de Enseanza Coordinador de Investigacin Colaboradora de la Coordinacin Colaborador de la Coordinacin Colaboradora de la Coordinacin
ACTUALIZACIN Y REVISIN DE LOS GUIONES Dr. en C. Gonzalo Castillo Rojas M. en C. Estrella Cervantes Garca M. en C. Rafael Garca Gonzlez Dra. en C. Lilian Hernndez Mendoza Dra. en C. Patricia Tato Zaldivar M. en C. Jorge Villaseca Flores Profesor Titular de Bacteriologa y Virologa
Profesora Titular de Bacteriologa y Virologa
Profesor Titular de Bacteriologa y Virologa Profesora Titular de Bacteriologa y Virologa Profesora Titular de Bacteriologa y Virologa Profesor Titular de Bacteriologa y Virologa
DATOS GENERALES DE LA ASIGNATURA
Coordinacin del programa Tipo de asignatura Ubicacin Duracin Nmero de horas Crditos Carcter Clave Requisitos acadmicos
Coordinacin de Enseanza, Departamento de Microbiologa y Parasitologa Terica Prctica (40-60%) 2 ao Anual Teora 102 h. (3h/sem) Prctica 136 h. (4h/sem) 17 Obligatorio 1231
Acreditacin total de las asignaturas de 1 ao
I. BACTERIOLOGA SEGUNDO AO, 2013-2014
CALENDARIO ESCOLAR 2013-2014 PLAN 2010
Bacteriologa Inicio: Trmino: Virologa Inicio: Trmino: Micologa Inicio: Trmino: Parasitologa Inicio: Trmino:
Lunes 5 de agosto Viernes 11 de octubre
EXMENES ORDINARIOS Primero: Lunes 5 de mayo De: 08:00 a 15:00 h Sede: Unidad Tlatelolco Martes 20 de mayo De: 08:00 a 12:30 h Sede: Unidad Tlatelolco
Lunes 14 de octubre Viernes 22 de noviembre Lunes 25 de noviembre Viernes 24 de enero Lunes 27 de enero Viernes 11 de abril
Segundo:
EXAMEN EXTRAORDINARIO Mircoles 11 de junio De: 08:00 a 12:30 h Sede: Unidad Tlatelolco VACACIONES Del 16 de diciembre de 2013 al 04 de enero de 2014. Semana Santa del 14 al 18 de abril de 2014. Del 07 al 25 de julio de 2014.
EXMENES PARCIALES Primero: jueves 31 de octubre Bacteriologa 10:00 a 12:00 h Sede: Facultad de Medicina Segundo: lunes 9 de diciembre Virologa 10:00 a 12:00 h Sede: Facultad de Medicina Tercero: martes 4 de febrero Micologa 8:00 a 15:00 h Sede: Unidad Tlatelolco Cuarto: Mircoles 23 de abril Parasitologa 8:00 a 15:00 h Sede: Unidad Tlatelolco
PROGRAMA ACADMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGA Y PARASITOLOGA
OBJETIVOS DEL REA
OBJETIVOS DEL REA DE BACTERIOLOGA MDICA 1. Sealar los microorganismos mas frecuentes asociados a enfermedades infecciosas de los diferentes aparatos y sistemas. 2. Explicar los mecanismos moleculares y factores de virulencia que ejercen las bacterias para producir enfermedad. 3. Describir los mecanismos moleculares desencadenados en el husped para defenderse de los microorganismos responsables de enfermedad. 4. Sealar el tratamiento antimicrobiano especfico para las enfermedades bacterianas ms frecuentes, el mecanismo de accin de los mismos. 5. Informar de los mtodos diagnsticos utilizados, para la identificacin del agente etiolgico de una enfermedad infecciosa bacteriana. 6. Establecer diagnsticos clnicos y etiolgicos diferenciales en una enfermedad infecciosa.
ACTIVIDADES DEL PROCESO ENSEANZA-APRENDIZAJE

DEL PROFESOR TITULAR 1. Discusin dirigida 2. Seminarios 3. Dinmica de grupos 4. Evaluacin DEL PROFESOR DE PRCTICAS 1. Discusin dirigida 2. Demostracin 3. Evaluacin DEL ALUMNO 1. Preparacin del tema 2. Revisin bibliogrfica 3. Desarrollo de habilidades y destrezas 4. Participacin en las clases tericas y prcticas PERFIL DEL DOCENTE 1. Tener una licenciatura en medicina o reas afines 2. Demostrar aptitud para la docencia 3. Tener preparacin en el rea docente por impartir 4. Enriquecer sus conocimientos en la materia que imparta. 5. Contar con solvencia moral, tica y profesional 6. Realizar trabajo en equipo 7. Capacidad para conducir grupos de alumnos MATERIAL DE APOYO A LA DOCENCIA Fsicos 1. Laboratorio 2. Proyectores
Materiales 1. Microscopios 2. Proyectores 3. Epidiascopios 4. Transparencias 5. Preparaciones para la observacin al microscopio 6. Audiovisuales 7. Pelculas 8. Micoteca. 9. Equipo y material de laboratorio OBRAS DE CONSULTA Fuentes de informacin electrnica 1. Recursos en Microbiologa y Parasitologa del Depto. de Microbiologa y Parasitologa, Fac. de Medicina, UNAM en: www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/ Libros 1. Champoux JJ, Neidhart FC, Drew L, Plorde JJ. Microbiologa Mdica 4a.ed. Mxico: McGraw-Hill Interamericana Editores; 2004. 2. Jawetz E, Melnick JL, Adelberg EA, Brooks GF, Butel JS, Ornston LN. Microbiologa mdica. Mxico; Manual moderno; 2005. 3. Molina LJ, Manjarrez ZM, Tay ZJ. Microbiologa:Bacteriologa y Virologa. 1 ed. Mxico; Mndez Cervantes; 2010 4. Murray PR, Rosenthal KS, Kobayashi GS, Pfaller MA. Microbiologa Mdica .5a ed. Mxico; McGraw Hill Interamericana; 2006. 5. Ryan KJ, Ray Sherris CG. Microbiologa Mdica. 4a ed. Mxico; McGraw-Hill Interamericana; 2004. 6. Tay ZJ, Gutirrez QM, Lpez MR, Manjarrez ZMA, Molina LJ. Microbiologa y Parasitologa Mdica. Mxico; Mndez Cervantes; 2012.
CALENDARIO DE ACTIVIDADES: CALENDARIO SUGERIDO PARA CUBRIR LAS ACTIVIDADES DE LA PRIMERA UNIDAD TEMTICA (Bacteriologa)
EL CALENDARIO SE ENCUENTRA EN LA PAGINA WEB DEL DEPARTAMENTO COMO ARCHIVO INDEPENDIENTE
PRESENTACIN
EL
PROPSITO
FUNDAMENTAL
DEL
Aunque
resulte
reiterativo, ya
es que
importante tanto el
CURSO de bacteriologa para los estudiantes de segundo ao de la carrera de Mdico Cirujano de la Facultad de Medicina de la Universidad Nacional Autnoma de Mxico es el de proporcionar al estudiante, la informacin necesaria para entender el comportamiento de la bacteria como organismo vivo y su relacin con el ambiente que le rodea. Para este fin, se abordarn temas de bacteriologa bsica, que incluirn; estructura bacteriana, funcin de los componentes celulares, gentica, metabolismo y mecanismos de resistencia bacteriana. As como el conocimiento de las bases biolgicas de la interaccin del patgeno con el husped a de travs los de la respuesta agentes inmune. Constituyendo la base para el entendimiento diversos bacterianos productores de enfermedades infecciosas en diferentes sitios del cuerpo humano., as como su diagnstico etiolgico y medidas de prevencin y tratamiento.
mencionar que este curso no debe ser considerado terminal, estudiante como el mdico deben mantenerse constantemente actualizados, debido a los constantes bacteriologa. El presente edicin del Manual presenta una organizacin temtica, en la que incluye once guiones; dos guiones de bacteriologa bsica y ocho en la que se abordan las diferentes bacterias organizadas en base al aparato o sistema que se ven afectados por ellas y finalizamos con un guin relacionado con la respuesta inmune inducida por las bacterias. Se incluye adems, referencias especficas sobre el rea en estudio y una lista de referencias de Internet que contienen informacin sobre bacteriologa mdica, con el fin de orientar al estudiante. cambios que se dan en Microbiologa, de la que forma parte la
NDICE
GUIONES PRCTICOS Pg. Directorio ... 2 Calendario escolar 2013-2014 ... 5 Objetivos de rea . 6 Actividades del proceso enseanzaaprendizaje . 7 Introduccin a las prcticas de Laboratorio de Microbiologa y Parasitologa . 37 Prctica No. 1 Bioseguridad . 38 Prctica No. 2 Manejo y cuidado del microscopio . 41 Prctica No. 3 Introduccin a la Bacteriologa.. 43 Prctica No. 4 Infecciones de vas respiratorias 46 Prctica No. 5 Infecciones de tejidos blandos . 48 Prctica No. 6 Infecciones del tracto gastrointestinal 50 Prctica No. 7 Infecciones sistmicas 53 Prctica No. 8 Infecciones de vas urinarias . 55 Prctica No. 9 Infecciones de transmisin Sexual .. 59 Prctica No. 10 Infecciones del SNC ... 60 Anexo: Determinacin de sensibilidad a antimicrobianos .... 62
GUIONES TERICOS 1. Introduccin a la Relacin hospederoparsito . 11 2. Introduccin a la Bacteriologa ....... 12 3. Bacterias causantes de Infecciones del tracto respiratorio ...... 13 4. Bacterias causantes de Infecciones de tejidos superficiales y profundos .. 17 5. Bacterias causantes de Infecciones del tracto gastrointestinal .... 19 6. Bacterias causantes de Infecciones Sistmicas . 22 7. Bacterias causantes de Infecciones del tracto urinario ..... 25 8. Bacterias causantes de Infecciones de transmisin sexual .. 27 9. Bacterias causantes de Infecciones del sistema nervioso central ... 31 10. Agentes Bacterianos productores de neurotoxinas .33 11. Respuesta inmune hacia las bacterias 35
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1. INTRODUCCIN A LA RELACIN HOSPEDERO-PARSITO

La Microbiologa mdica estudia los microorganismos que son responsables de las principales enfermedades infecciosas de los humanos. Podemos considerar como agentes infecciosos a los priones, virus, bacterias, hongos y parsitos. Las enfermedades infecciosas son muy frecuentes, pueden ser graves e incluso causar la muerte. En general son fcilmente diagnosticables y curables, algunas son prevenibles y muchas de ellas tienen importantes consecuencias sociales y econmicas. Los diferentes agentes infecciosos presentan factores de virulencia que les permiten colonizar al hospedero y causar enfermedad. La mayora son transmitidos por alimentos o agua contaminados, por fmites, por contacto directo, por la sangre o secreciones, y algunos de ellos, necesitan de vectores para poder infectar al humano. Las bacterias, los virus y los parsitos transportados por el agua, provocan cerca de cuatro millones de muertes por ao en el mundo. Quienes ms riesgo corren son los 1,100 millones de personas que carecen de acceso a agua potable y segura y los 2,400 millones sin instalaciones de servicios de salud adecuadas. 1.1 Importancia infecciosas de las enfermedades
1.6 Mecanismos de transmisin 1.7 Vas de diseminacin 1.8 Eliminacin 1.9 Control de enfermedades infecciosas 1.10 Generalidades de los factores de virulencia y patogenicidad de bacterias, virus, hongos y parsitos 1.11 Conceptos bsicos de la Microbiologa y Parasitologa mdicas 1.11.1 Infeccin, enfermedad, signo, sntoma y sndrome 1.11.2 Historia natural de la enfermedad: periodo de incubacin, prodrmico, de estado, convalecencia y recada 1.11.3 Enfermedad: aguda, latente, crnica, sistmica, primaria y secundaria. 1.11.4 Morbilidad y mortalidad 1.11.5 Oportunismo 1.11.6 Emergencia y re-emergencia 1.11.7 Trasmisores biolgicos y mecnicos
1.2 Caractersticas de los agentes infecciosos 1.3 Relaciones interespecficas de los seres vivos 1.3.1 Simbiosis 1.3.1.1 Foresis 1.3.1.2 Comensalismo 1.3.1.3 Parasitismo 1.3.1.4 Mutualismo 1.4 Relacin husped-parsito 1.4.1 Factores del husped 1.4.2 Factores del parsito 1.4.3 Factores del ambiente 1.5 Etiologa de las enfermedades infecciosas 1.5.1 Postulados de Koch (clsicos y moleculares).
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2. INTRODUCCIN A LA BACTERIOLOGA
Las bacterias son clulas procariotas y pequeas que solo se pueden observar con la ayuda del microscopio, presentan diferentes formas, carecen de ncleo y de organelos celulares. Tienen estructuras nicas como la pared celular que contiene peptidoglicano con o sin lipopolisacridos. Tpicamente, el cromosoma bacteriano es solo uno y es una molcula circular de ADN de doble cadena que contiene aproximadamente 5 millones de pares de bases. Las bacterias tienen ribosomas 70S que son diferentes a los de las clulas eucariotas pero que realizan la misma funcin. Aunque las bacterias se dividen por fisin binaria, han desarrollado mecanismos para intercambiar informacin gentica, lo que les ha permitido adaptarse mejor al medio ambiente. Las bacterias pueden sobrevivir en medios hostiles como en los que la presin osmtica es muy baja o en temperaturas extremas y pueden usar diversas fuentes de energa para su metabolismo. Es indudable que el conocimiento de las bacterias, desde el punto de vista gentico, metablico y estructural, constituye un elemento fundamental para poder realizar una clasificacin til en la prctica mdica, as como comprender la participacin de la expresin de los factores de patogenicidad en la relacin husped bacteria. 2.1 Antecedentes histricos de la Bacteriologa 2.2 Formas bacterianas 2.2.1 Cocos, bacilos y espirilos 2.3 Estructura y funcin de sus componentes celulares 2.3.1 Cpsula 2.3.2 Pared celular bacterias gram-positivas y gram negativas. Protoplastos, esferoplastos y formas L 2.3.3 Membrana externa y membrana plasmtica 2.3.4 Pili, fimbrias, flagelos 2.3.5 Citoplasma (ribosomas, cuerpos de inclusin) 2.3.6 Cromosoma bacteriano, elementos extracromosmicos 2.3.7 Esporas
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Clasificacin. La clasificacin ms importante para el mdico es la que permite hacer una pronta y correcta identificacin del microorganismo (morfologa, agrupacin, tipo de tincin, identificacin serolgica, metabolismo y gentica). Gentica bacteriana 2.5.1 Replicacin del cromosoma 2.5.2 Informacin gentica: genes (estructura y funcin: transcripcin, traduccin). 2.5.3 Mecanismos de intercambio de informacin gentica entre las bacterias: conjugacin, transformacin, transduccin. 2.5.4. Rearreglos cromosmicos por transferencia horizontal de genes: transposones, secuencias de insercin y eventos de recombinacin. 2.5.5 Tipos de mutaciones, factores fsicos y qumicos que intervienen en la induccin de mutaciones. Metabolismo bacteriano 2.6.1 Auttrofos, Hetertrofos, Quimiottrofos y Littrofos 2.6.2 Aerobios, Anaerobios, Facultativos y Microaeroflicos 2.6.3 Metabolismo fermentativo y oxidativo 2.6.4 Cultivo de bacterias. Curva de crecimiento bacteriano.
2.5
2.6
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3. BACTERIAS CAUSANTES DE INFECCIONES DEL TRACTO RESPIRATORIO

Las enfermedades del tracto respiratorio superior representan una de las causas ms frecuentes de consulta mdica. El tracto respiratorio es un sitio comn para el establecimiento de microorganismos patgenos debido al tropismo que tienen ciertos microorganismos por el epitelio respiratorio y por encontrarse en real comunicacin con el medio ambiente. Las manifestaciones clnicas de las infecciones depen del rgano blanco del microorganismo (otitis media, sinusitis, faringitis, amigdalitis, epiglotitis, bronquitis, neumona, etc.), de la edad del paciente y de factores predisponentes agregados que presente. En general, las infecciones del tracto respiratorio las podemos dividir en infecciones altas y bajas. Aunque existen numerosas bacterias que pueden producir enfermedad, aqu solo se har referencia a aquellas que son ms importantes por su frecuencia o por producir cuadros clnicos graves. Un diagnstico etiolgico correcto har la diferencia en el xito del tratamiento y evitar complicaciones con secuelas importantes. 3.1 Streptococcus pyogenes 3.1.1 Caractersticas del microorganismo 3.1.1.1 Microscpicas 3.1.1.2 Antignicas 3.1.2 Factores de virulencia 3.1.2.1 Adherencia al epitelio (protena M, ALT y F). 3.1.2.2 Evasin de la fagocitosis (protena M y cpsula) 3.1.2.3 Dao al husped por enzimas (hialuronidasa, DNAsas, C5a peptidasas, estreptocinasas, estreptolisisnas S y O) y exotoxinas pirognicas A, B y C. 3.1.3 Epidemiologa 3.1.3.1 Transmisin por contacto directo y secreciones farngeas. 3.1.3.2 Incidencia de la faringitis en los grupos de edad 5-15 aos. Importancia de cuadros clnicos de repeticin. 3.1.3.3 Serotipos asociados a faringoamigdalitis, fiebre reumtica, enfermedades infecciosas de piel, sndrome de choque txico. 3.1.4 Patognesis 3.1.4.1 Iniciacin del proceso infeccioso y desarrollo de signos y sntomas. 3.1.4.2 Faringitis. 3.1.4.3 Enfermedades producidas por toxinas (Escarlatina y Sndrome de Choque txico estreptoccico). 3.1.4.4 Otitis media, adenitis cervical supurativa, angina de Ludwig, sinusitis aguda. 3.1.4.5 Otras enfermedades asociadas a estreptococos (infecciones de tejidos blandos). 3.1.4.6 Complicaciones: secuelas posestreptoccicas (fiebre reumtica aguda y glomerulonefritis aguda), sndrome de choque estreptocccico. 3.1.5 Participacin de la respuesta inmune en el control de las infecciones. 3.1.6 Diagnstico de laboratorio 3.1.6.1 Cultivo en agar sangre 3.1.6.2 Aglutinacin con anticuerpos contra el antgeno del grupo A 3.1.6.3 Pruebas serolgicas (deteccin de anticuerpos anti-estreptolisina O, anti DNasas y anti hialuronidasa) 3.1.7 Diagnstico diferencial 3.1.7.1 Faringitis de origen viral y bacteriano 3.1.7.2 Escarlatina con otras enfermedades exantemticas 3.1.7.3 Fiebre reumtica aguda con enfermedades autoinmunes 3.1.8 Estrategias de Tratamiento 3.1.8.1 Antimicrobiano 3.1.8.2 Tratamientos de fiebre reumtica y glomerulonefritis. 3.1.9 Prevencin y Control 3.1.9.1 Identificacin de portadores y erradicacin del estado de portador 3.1.9.2 Quimioprofilaxis en personas que han padecido fiebre reumtica.
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3.2 Corynebacterium diphtheriae 3.2.1 Caractersticas del microorganismo 3.2.1.1 Caractersticas de la pared celular 3.2.1.2 Morfologa (forma pleomrfica, presencia de grnulos metacromticos) 3.2.1.3 Caractersticas tintoriales y agrupacin 3.2.1.4 Cultivo 3.2.2 Factores de virulencia 3.2.2.1 Toxina diftrica (tipo A-B). Mecanismo de accin de la toxina. 3.2.3 Epidemiologa 3.2.3.1 Distribucin 3.2.3.2 Portadores asintomticos 3.2.3.3 Transmisin 3.2.3.4 Reservorio 3.2.3.5 Grupo susceptible de infeccin 3.2.3.6 Morbilidad y mortalidad 3.2.4 Patognesis 3.2.4.1 Iniciacin del proceso infeccioso y desarrollo de signos y sntomas 3.2.4.2 Difteria respiratoria (pseudomembrana en faringe y regiones aledaas) 3.2.4.3 Difteria cutnea 3.2.4.4 Complicaciones: obstruccin respiratoria, arritmia cardaca y coma. 3.2.5. Participacin de la respuesta inmune en el control de las enfermedades 3.2.6 Diagnstico diferencial 3.2.6.1 Streptococcus pyogenes 3.2.6.2 Haemophilus influenzae B 3.2.7 Diagnstico de laboratorio 3.2.7.1 Cultivo 3.2.7.2 Identificacin microscpica y macroscpica a partir del aislamiento en Medio Lffler y Agar cistena-telurito 3.2.7.3 Caracterizacin bioqumica: catalasa y nitrato positivo, fermentacin de glucosa y maltosa 3.2.7.4 Pruebas de toxinogenicidad in vivo e in vitro 3.2.8 Estrategias del tratamiento 3.2.8.1 Antitoxina diftrica 3.2.8.2 Antimicrobianos
3.2.9 Prevencin y control 3.2.9.1 Vacunacin con toxoide diftrico (DPT) 3.2.9.2 Prueba de Schick 3.2.9.3 Profilaxis con antimicrobianos 3.3 Bordetella pertussis 3.3.1 Caractersticas del microorganismo 3.3.1.1 Morfologa y tincin 3.3.1.2 Cultivo 3.3.1.3 Caractersticas antignicas 3.3.2 Epidemiologa 3.3.2.1 Distribucin de la enfermedad 3.3.2.2 Morbilidad y mortalidad 3.3.2.3 Reservorio 3.3.2.4 Factores de riesgo para desarrollar la enfermedad 3.3.2.5 Transmisin 3.3.3 Factores de virulencia 3.3.3.1 Adhesinas fimbriales y no fimbriales 3.3.3.2 Toxina pertussis 3.3.3.3 Toxina adenilatociclasa 3.3.3.4 Toxina dermonecrtica 3.3.3.5 Citotoxina traqueal 3.3.3.6 Lipopolisacrido 3.3.4 Patognesis 3.3.4.1 Iniciacin del proceso Infeccioso y desarrollo de signos y sntomas 3.3.4.2 Tosferina 3.3.4.3 Complicaciones: anoxia del SNC, neumona secundaria por invasin de otros microorganismos. 3.3.5 Participacin de la respuesta inmune en el control de la enfermedad 3.3.6 Diagnstico diferencial 3.3.6.1 Haemophilus influenzae 3.3.6.2 Streptococcus pneumoniae 3.3.6.3 Mycoplasma pneumoniae 3.3.7 Diagnstico de laboratorio 3.3.7.1 Muestra: aspirado de nasofaringe 3.3.7.2 Cultivo 3.3.7.3 Inmunofluorescencia 3.3.7.4 Pruebas serolgicas (deteccin de IgG e IgA contra la hemaglutinina filamentosa, IgG contra la toxina pertussis) 3.3.8 Estrategias de Tratamiento 3.3.8.1 Medidas de apoyo 3.3.8.2 Antimicrobiano
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3.3.9 Prevencin y control 3.3.9.1 Vacuna multivalente DPT triple 3.3.9.2 Vacuna de antgenos especficos como la hemaglutinina filamentosa o la toxina pertussis, aglutininas fimbriales y pertactina 3.3.9.3 Profilaxis antibacteriana de los contactos. 3.4 Streptococcus pneumoniae 3.4.1 Caractersticas del microorganismo 3.4.1.1 Morfologa, agrupacin y tincin 3.4.1.2 Serogrupos 3.4.2 Factores de virulencia 3.4.2.1 Cpsula 3.4.2.2 Pared celular 3.4.2.3 Autolisina 3.4.2.4 Neumolisina 3.4.2.5 Factor purprico 3.4.2.6 Neuraminidasa 3.4.2.7 Amidasa. 3.4.2.8 Protenas de unin a colina 3.4.2.9 Peroxidasa 3.4.2.10 Proteasa de IgA 3.4.3 Epidemiologa 3.4.3.1 Morbilidad y mortalidad 3.4.3.2 Transmisin 3.4.3.3 Factores predisponentes del husped (edad susceptible) 3.4.3.4 Portadores sanos 3.4.4 Patognesis 3.4.4.1 Iniciacin del proceso infeccioso y desarrollo de signos y sntomas 3.4.4.2 Neumona 3.4.4.3 Bronquitis aguda 3.4.4.4 Bronquitis crnica 3.4.4.5 Complicaciones: derrame pleural y bacteriemia 3.4.5 Participacin de la respuesta inmune en contra de la infeccin 3.4.6 Diagnstico diferencial 3.4.6.1 Haemophilus influenzae 3.4.6.2 Chlamydophila pneumoniae 3.4.6.3 Mycoplasma pneumoniae 3.4.7 Diagnstico de laboratorio 3.4.7.1 Tincin y agrupamiento 3.4.7.2 Reaccin de Qellung, coaglutinacin 3.4.7.3 Cultivo 3.4.7.4 Susceptibilidad a optoquina y solubilidad en sales biliares 3.5
3.4.8 Tratamiento 3.4.8.1 Antimicrobianos 3.4.9 Prevencin y control 3.4.9.1 Vacuna 7-valente para lactantes y nios. Vacuna 23valente para personas con riesgo de desarrollar enfermedad neumoccica. 3.4.10 Otras enfermedades producidas por S. pneumoniae Mycoplasma pneumoniae y Chlamydophila pneumoniae 3.5.1 Caractersticas de los microorganismos 3.5.1.1 Envoltura celular 3.5.1.2 Parsitos intracelulares obligados 3.5.1.3 Cultivo 3.5.2 Factores de virulencia 3.5.3 Epidemiologa 3.5.3.1 Transmisin y factores predisponentes 3.5.3.2 Morbilidad y mortalidad 3.5.4 Patognesis 3.5.5 Participacin de la respuesta inmune en el control de estas infecciones 3.5.6 Diagnstico etiolgico diferencial 3.5.6.1 Streptococcus pneumoniae 3.5.6.2 Haemphilus influenzae 3.5.6.3 Chlamydophila pneumoniae 3.5.6.4 Mycoplasma pneumoniae 3.5.7 Diagnstico de laboratorio 3.5.7.1 Cultivo 3.5.7.2 Serolgico 3.5.8 Tratamiento 3.5.8.1 Antimicrobiano 3.5.9 Control y prevencin
3.6. Mycobacterium tuberculosis 3.6.1 Caractersticas del microorganismo 3.6.1.1 Pared celular, morfologa y metabolismo 3.6.1.2 Tincin 3.6.1.3 Cultivo 3.6.1.4 Componentes antignicos 3.6.2 Factores de virulencia 3.6.2.1 Factor cordn 3.6.2.2 Supervivencia en macrfagos 3.6.2.3 Componentes que intervienen en la activacin de macrfagos 3.6.2.4 Induccin de inmunopatologa 3.6.2.5 Desarrollo de resistencia a drogas antituberculosas
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3.6.3 Epidemiologa 3.6.3.1 Morbilidad y mortalidad 3.6.3.2 Incidencia nacional y mundial 3.6.3.3 Infeccin emergente (husped inmunocomprometidos) 3.6.3.4 Transmisin 3.6.4 Patognesis 3.6.4.1 Iniciacin del proceso infeccioso y desarrollo de signos y sntomas 3.6.4.2 Formas clnicas y complicaciones 3.6.4.3 Primo infeccin 3.6.4.4 Tuberculosis primaria 3.6.4.5 Tuberculosis secundaria 3.6.4.6 Meningoencefalitis tuberculosa 3.6.4.7 Tuberculosis diseminada 3.6.5 Participacin de la respuesta inmune en el control de la infeccin 3.6.6 Diagnstico diferencial 3.6.6.1 Otras micobacterias: M. bovis, M. avium. Destacar la importancia de estas micobacterias no tuberculosas en pacientes inmunodeprimidos por SIDA o drogas inmunosupresoras. 3.6.6.2 Cncer pulmonar 3.6.7 Diagnstico de laboratorio y de gabinete 3.6.7.1 Baciloscopa 3.6.7.2 Cultivo 3.6.7.3 Mtodos moleculares 3.6.7.4 Valoracin del PPD 3.6.7.5 Radiografa de trax 3.6.7.6 Otras tcnicas de gabinete 3.6.8 Estrategia de tratamiento 3.6.8.1 Esquema de tratamiento antifmico (Norma Oficial Mexicana) 3.6.9 Control y prevencin 3.6.9.1 Vacuna BCG 3.6.9.2 Otras medidas de prevencin
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4. BACTERIAS CAUSANTES DE INFECCIONES DE TEJIDOS SUPERFICIALES Y PROFUNDOS

La piel es el rgano ms extenso de nuestro cuerpo, sus principales funciones son cubrir y proteger nuestra superficie corporal. Acta como una barrera fsica contra el medio ambiente y es la primera lnea de defensa del organismo contra la invasin de cualquier microorganismo. Cuando la piel es daada, esta barrera se rompe, haciendo susceptible al organismo a la entrada de bacterias (patgenas o de la flora normal) hacia la dermis y capas ms profundas y produciendo una serie de patologas en cada uno de estos tejidos. 4.1 Staphylococcus aureus 4.1.1 Caractersticas del microorganismo 4.1.2 Factores de virulencia 4.1.2.1 Protena A 4.1.2.2 Pptidoglicano y cido teicoico 4.1.2.3 Cpsula 4.1.2.4 Protena fijadora de fibronectina 4.1.2.5 Factor de agregacin 4.1.2.6 Toxinas: exfoliativa, toxina de sndrome de choque txico, enterotoxinas 4.1.2.7 Citotoxinas: hemolisinas, leucocidina 4.1.2.8 Enzimas: coagulasa, catalasa, colagenasa, hialuronidasa, DNasas, fibrinolisina, penicilinasas, nucleasas 4.1.3 Epidemiologa 4.1.3.1 Importancia del estado de portador 4.1.4 Patognesis 4.1.4.1 Iniciacin del proceso infeccioso y desarrollo de signos y sntomas 4.1.4.2 Factores predisponentes para adquirir la infeccin y desarrollar la enfermedad: Sndrome de piel escaldada, foliculitis, fornculos, ntrax, carbunco y acn. 4.1.5 Participacin de la respuesta inmune en el control de estas infecciones 4.1.6 Diagnstico diferencial Streptococcus pyogenes, Clostridium perfringens
4.1.7 Otras Enfermedades Asociadas a S. aureus 4.1.7.1 Osteomielitis 4.1.7.2 Intoxicacin alimentaria 4.1.7.3 Infecciones en pacientes inmunocomprometidos o con factores de riesgo agregado (infecciones intrahospitalarias) 4.1.8 Diagnstico de laboratorio 4.1.8.1 Frotis y tincin 4.1.8.2 Cultivo 4.1.8.3 Pruebas bioqumicas especficas y diferenciales 4.1.8.4 Pruebas de sensibilidad a antimicrobianos 4.1.9 Estrategias de Tratamiento 4.1.9.1 Antimicrobianos 4.1.9.2 Medidas de apoyo 4.2 Clostridium perfringens 4.2.1 Caractersticas del microorganismo 4.2.1.1 Produccin de esporas 4.2.2 Factores de virulencia 4.2.2.1 Toxinas: alfa, beta, epsilon, iota, delta, theta, kappa, lambda, miu, enterotoxina 4.2.2.2 Neuraminidasa 4.2.3 Epidemiologa 4.2.3.1 Presencia en el intestino de mamferos 4.2.3.2 Vas de entrada y transmisin 4.2.4 Patognesis 4.2.4.1 Iniciacin del proceso infeccioso y desarrollo de signos y sntomas 4.2.4.2 Gangrena gaseosa (signos y sntomas de las enfermedades) 4.2.5 Participacin de la respuesta inmune en el control de estas infecciones 4.2.6 Diagnstico diferencial Streptococcus pyogenes, Staphylococcus aureus 4.2.7 Otras enfermedades causadas por C. perfringens 4.2.7.1 Intoxicacin alimentaria 4.2.7.2 Colitis ulcerativa 4.2.7.3 Endometritis
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PROGRAMA ACADMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGA Y PARASITOLOGA 4.2.8 Diagnstico de laboratorio 4.1.8.1 Frotis y tincin 4.1.8.2 Cultivo 4.1.8.3 Pruebas bioqumicas especficas y diferenciales 4.1.8.4 Pruebas de sensibilidad a antimicrobianos 4.2.9 Estrategias de Tratamiento 4.1.9.1 Antimicrobianos 4.1.9.2 Medidas de apoyo 4.3 Otros microorganismos asociados infecciones de tejidos superficiales profundos 4.3.1 Streptococcus pyogenes 4.3.1.1 Fiebre escarlatina 4.3.1.2 Erisipela 4.3.1.3 Eccema 4.3.1.4 Artritis septica 4.3.1.5 Celulitis 4.3.1.6 Fasciitis necrozante 4.3.1.7 Miositis 4.3.2 Streptococcus y Staphylococcus 4.3.2.1 Imptigo 4.3.2.2 Osteomielitis 4.3.2.3 Artritis sptica 4.3.2.4 Celulitis 4.3.2.5 Fascitis necrozante 4.3.2.6 Miositis 4.3.3 Propionibacterium acnes 4.3.3.1 Acn a y Factores de riesgo del individuo ante la exposicin 4.4.4 Patognesis 4.4.4.1 Iniciacin del proceso infeccioso y desarrollo de signos y sntomas. 4.4.4.2 Invasin de nervios sensitivos perifricos produciendo anestesia 4.4.4.2 Respuesta inmune hacia el bacilo 4.4.4.3 Factores de resistencia del husped ante la infeccin: especficos (inmunidad) e inespecficos (HLA-DR3). 4.4.4.4 Formas y manifestaciones clnicas (Lepra lepromatosa, tuberculoide e indeterminada) 4.4.4.5 Relacin de cada una de las formas de lepra con la respuesta inmune celular. 4.4.4.6 Afeccin ocular en la lepra. 4.4.4.7 Discapacidades fsicas 4.4.5 Participacin de la respuesta inmune en la evolucin de la enfermedad 4.4.6 Diagnstico diferencial de las formas de lepra 4.4.6.1 Clasificacin bacilar de la lepra 4.4.7 Diagnstico de laboratorio y gabinete 4.4.7.1 Laboratorio: bsqueda de bacilos en muestras obtenidas de raspado de lesiones (en particular mucosa nasal y orejas). 4.4.7.2 Estudio histopatolgico de biopsias cutneas. 4.4.7.3 Pruebas serolgicas con PGL-1. 4.4.7.4 Pruebas cutneas: Lepromina 4.4.7.5 Valor diagnstico de la reaccin de Mitsuda y reaccin de Fernndez 4.4.8 Estrategias del Tratamiento. 4.4.8.1 Norma Mexicana para el tratamiento de la lepra 4.4.9 Prevencin y control 4.4.9.1 Profilaxis en contactos con enfermos de lepra. 4.4.10 Otras micobacterias que producen infecciones en piel y tejido subcutneo: 4.4.10.1 M. marinum 4.4.10.2 M. ulcerans 4.4.10.3 M. tuberculosis 4.5 OTRAS BACTERIAS QUE PRODUCEN INFECCIONES EN PIEL. 4.5.1 Nocardia brasiliensis 4.5.2 Nocardia otitidiscaviarum 4.5.3 Nocardia asteroides 4.4.3.5
4.4 Mycobacterium leprae 4.4.1 Caractersticas del microorganismo 4.4.1.1 Morfologa y metabolismo 4.4.1.2 Envoltura celular y tincin 4.4.1.3 Estructuras antignicas de superficie 4.4.1.4 Desarrollo en un modelo animal 4.4.2 Factores de virulencia 4.4.2.1 Tropismo por clulas especficas 4.4.2.2 Sobrevivencia y multiplicacin intracelular 4.4.2.3 Estructuras de superficie en el microorganismo responsables de activar la respuesta inmune humoral y celular 4.4.2.4 Mecanismos por los cuales se produce el dao en los tejidos 4.4.3 Epidemiologa 4.4.3.1 Morbilidad y mortalidad de los leprosos en Mxico y otros pases 4.4.3.2 Transmisin 4.4.3.3 Reservorio natural 4.4.3.4 Distribucin geogrfica
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5. BACTERIAS CAUSANTES DE INFECCIONES DEL TRACTO GASTROINTESTINAL

En nuestro pas, las diarreas siguen siendo una causa comn de consulta con el mdico general. Aunque, generalmente son enfermedades que se autolimitan, es importante mantener el buen estado de hidratacin y de nutricin del paciente para evitar serias complicaciones. La mayora de las diarreas no requieren del uso de antimicrobianos para su tratamiento. Sin embargo, existen patgenos importantes que producen diarrea acompaada de moco y sangre produciendo dao en la mucosa o en el epitelio intestinal, que pueden llevar al paciente a presentar complicaciones graves. En estos casos de diarrea, el tratamiento correcto comprende la administracin de antibiticos, adems, de las medidas generales para obtener la completa recuperacin del paciente. Por tal motivo, el mdico debe de saber cules son los microorganismos causales en diarreas acuosas y cules son productores de diarrea con sangre, con el fin de hacer un diagnstico etiolgico correcto e instalar el tratamiento adecuado. ESTOMAGO Y DUODENO 5.1 Helicobacter pylori 5.1.1 Caractersticas del microorganismo 5.1.1.1 Morfologa 5.1.1.2 Diversidad gentica 5.1.1.3 Variacin antignica 5.1.2 Factores de virulencia 5.1.2.1 Ureasa 5.1.2.2 Antgenos de Lewis 5.1.2.3 Adhesinas 5.1.2.4 Isla de patogenicidad cag 5.1.2.5 Protena CagA 5.1.2.6 Citotoxina vacuolizante 5.1.3 Epidemiologa 5.1.3.1 Frecuencia de la infeccin a nivel nacional y mundial 5.1.3.2 Factores predisponentes para adquirir la infeccin 5.1.3.3 Va de transmisin 5.1.4 Participacin de la respuesta inmune en el control de la infeccin 5.1.5 Patognesis 5.1.5.1 Iniciacin del proceso infeccioso y desarrollo de signos y sntomas. 5.1.5.2 Gastritis 5.1.5.3 Ulcera pptica 5.1.5.4 Asociacin con desarrollo de cncer
5.1.6 Diagnstico de laboratorio 5.1.6.1 Mtodos invasivos 5.1.6.2 Mtodos no invasivos 5.1.7 Estrategia de Tratamiento 5.1.7.1 Terapia triple 5.1.7.2 Terapia cudruple INTESTINOS DELGADO Y GRUESO 5.2 Escherichia coli enterotoxignica Escherichia coli enteroagregativa Escherichia coli enteropatgena Escherichia coli enteroinvasiva Escherichia coli enterohemorrgica 5.2.1 Caractersticas de los microorganismos 5.2.1.1 Morfologa 5.2.1.2 Metabolismo y medios de cultivo diferenciales para su crecimiento 5.2.1.3 Caractersticas bioqumicas diferenciales 5.2.1.4 Estructuras antignicas base de su clasificacin serolgica (antgenos K, O y H) 5.2.1.5 Variacin antignica 5.2.2 Factores de virulencia 5.2.2.1 Escherichia coli enterotoxignica - Toxinas termoestables (STa y STb) - Toxinas termolbiles (LT-1 y LT-2) - Adhesinas CFA/I, /II, /III 5.2.2.2 Escherichia coli enteroagregativa - Plsmido que codifica para la expresin de una fimbria (GVVPQ) que media la unin con la mucosa intestinal. - Patrn de adherencia (formando agregados) - Toxina EAST (parecida a la LT) - Hemolisina (formadora de poros en la membrana de las clulas husped.
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5.2.3
5.2.4 5.2.5
5.2.6
5.2.7
5.2.2.3 Escherichia coli enteropatgena - Plsmido EAF que codifica para una adhesina Bfp (pili) al parecer media la interaccin bacteria-bacteria. - Intimina codificada por el gen eae que favorece la unin ntima entre la bacteria y la clula. Produce el fenmeno llamado unin y esfacelacin de las microvellosidades. -isla de patogenicidad LEE. 5.2.2.4 Escherichia coli enteroinvasiva - Caractersticas genticas que le confieren el fenotipo de invasin. - Mecanismo de invasin las clulas del coln. - Distribucin lateralmente a clulas adyacentes. 5.2.2.5 Escherichia coli enterohemorrgica Serotipo representativo importante - Intimina - Toxina Shiga-like (SLT) Epidemiologa 5.2.3.1 Va de transmisin 5.2.3.2 Poblacin susceptible 5.2.3.3 Distribucin mundial 5.2.3.4 Grupos de edad afectados Participacin de la respuesta inmune en el control de estas infecciones Patognesis 5.2.5.1 Iniciacin del proceso infeccioso y desarrollo de signos y sntomas. 5.2.5.2 Diarrea del viajero y diarrea infantil 5.2.5.3 Diarrea acuosa persistente Complicaciones 5.2.5.1 Deshidratacin 5.2.5.2 Desnutricin 5.2.5.3 Muerte Diagnstico de laboratorio 5.2.7.1 Aislamiento del microorganismo a partir de heces en medios de cultivos selectivos. 5.2.7.2 Pruebas bioqumicas y serolgicas
5.2.8 Estrategias de Tratamiento 5.2.8.1 Tratamiento de apoyo: atender el desequilibrio hidroelectroltico 5.2.8.2 Tratamiento antimicrobiano para clera. 5.2.9 Prevencin y Control 5.3 Vibrio cholerae 5.3.1 Patognesis 5.3.1.1 Iniciacin del proceso infeccioso y desarrollo de signos y sntomas. 5.2.5.2 Diarrea grave (clera) 5.2.2.3 Vibrio cholerae - Toxina colrica - Pili Tcp 5.3.2 Estrategias de Tratamiento 5.2.8.1 Tratamiento de apoyo: atender el desequilibrio hidroelectroltico. 5.2.8.2 Tratamiento antimicrobiano para clera. 5.4 Campylobacter spp. Shigella spp. Salmonella enteritidis. Clostridium difficile 5.4.1 Caractersticas de los microorganismos 5.4.1.1 Morfologa colonial y microscpica 5.4.1.2 Metabolismo y medios de cultivo diferenciales para su crecimiento 5.4.1.3 Caractersticas bioqumicas diferenciales 5.4.2 Factores de virulencia 5.4.2.1 Campylobacter jejuni - Enterotoxina - Toxinas citopticas - Adhesinas - Movilidad. 5.4.2.2 Shigella dysenteriae - Toxina Shiga - Protenas que participan en la adhesin, invasin y proliferacin 5.4.2.3 Salmonella enteritidis - Protenas A-H - Enzimas: catalasa, superxido dismutasa - Antigeno Vi, - LPS
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5.4.3
5.4.4
5.4.5 5.4.6
5.4.7
Clostridium difficile - Citotoxina - Enterotoxina Epidemiologa 5.4.3.1 Enfermedades frecuentes en pases no industrializados 5.4.3.2 Vas de transmisin 5.4.3.3 Reservorios animales Patognesis 5.4.4.1 Iniciacin del proceso infeccioso y desarrollo de signos y sntomas 5.4.4.2 Gastroenteritis 5.4.4.3 Disentera 5.4.4.4 Colitis ulcerosa 5.4.4.5 Complicaciones: Sndrome urmico hemoltico (SUH), colitis psuedomembranosa, Sndrome de Guillain-Barr, artritis reactiva. Participacin de la respuesta inmune en el control de estas infecciones. Diagnstico de laboratorio 5.4.6.1 Coprocultivo 5.4.6.2 Pruebas bioqumicas 5.4.6.3 Pruebas serolgicas Estrategia de Tratamiento 5.4.7.1 Antimicrobiano de eleccin 5.4.7.2 Prevencin y Control
5.4.2.4
OTRAS BACTERIAS PRODUCTORAS DE DIARREA POR INTOXICACIN ALIMENTICIA 5.5 Microorganismos Gram positivos 5.5.1 No productores de esporas 5.5.1.1 Staphylococcus aureus 5.5.2 Productores de esporas 5.5.2.1 Bacillus cereus
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6. BACTERIAS CAUSANTES DE INFECCIONES SISTMICAS

Cualquier infeccin localizada puede complicarse cuando los agentes causales acceden al torrente sanguneo y se extienden por todo el cuerpo. Este proceso es un signo de mal pronstico en la evolucin de la enfermedad infecciosa. La presencia transitoria de patgenos en la sangre es referida como bacteriemia, la cual no suele tener trascendencia clnica ya que los grmenes son eliminados rpidamente por los mecanismos de defensa y puede diagnsticarse a travs de un hemocultivo. La presencia permanente de bacterias en sangre resultado de una infeccin generalizada o sistmica es referida como sepsis o septicemia. El sistema circulatorio funciona como dispersante de los microorganismos que pueden colonizar y producir dao en otras localizaciones anatmicas alejadas del foco primario. Los sntomas de las sepsis son bastante inespecficos, pero destacan la fiebre alta y los escalofros. De estas infecciones sistmicas, las ms comunes son las producidas por bacterias Gram negativas. Entre las bacterias Gram-negativas encontramos a Salmonella entrica serotipo Typhi que produce la fiebre tifoidea que se adquiere por consumir agua y alimentos contaminados. Como efectos secundarios de las septicemias pueden aparecer inflamacin vascular (tromboflebitis) y endocarditis. En ocasiones, los episodios de sepsis se producen como consecuencia de la contaminacin de prtesis. Las infecciones intraabdominales como la peritonitis y los abscesos de glndulas abdominales, as como las infecciones en huesos y articulaciones tambin son consideradas sistmicas. Adems de los microorganismos Gram positivos y Gram negativos, existe bacterias que ocasionan un grupo de enfermedades infecciosas, transmitidas por animales (zoonosis) que provocan infecciones sistmicas. Destacan entre ellas, la brucelosis (Brucella), enfermedad de Lyme (Borrelia), Leptospirosis (Leptospira) y las enfermedades producidas por rickettsias. 6.1 Salmonella entrica sero tipo Typhi 6.1.1 Caractersticas del microorganismo 6.1.1.1 Morfologa colonial y microscpica 6.1.1.2 Metabolismo y medios de cultivo diferenciales para su crecimiento 6.1.1.3 Caractersticas bioqumicas diferenciales. Estructuras antignicas como base de su clasificacin serolgica 6.1.1.5 Variacin antignica 6.1.2 Factores de virulencia 6.1.2.1 Adherencia e invasin 6.1.2.2 Plsmidos de virulencia 6.1.2.3 Resistencia al suero 6.1.2.4 LPS 6.1.2.5 Regulacin de los genes de virulencia 6.1.2.6 Genes de invasividad 6.1.2.7 Genes spv 6.1.2.8 Sobrevivencia en los fagocitos 6.1.2.9 Sensibilidad al pH cido 6.1.3 Epidemiologa 6.1.3.1 Va de transmisin 6.1.3.2 Distribucin geogrfica 6.1.3.3 Importancia del portador asintomtico 6.1.4 Patognesis 6.1.4.1 Iniciacin del proceso infeccioso y desarrollo de signos y sntomas. 6.1.4.2 Fiebre tifoidea. Cuadro clnico 6.1.4.3 Complicaciones: megacolon, perforacin intestinal con abdomen agudo. 6.1.5 Participacin de la respuesta inmune en el control de la infeccin 6.1.6 Otras infecciones producidas por Salmonella Typhi 6.1.6.1 Septicemia 6.1.6.2 Infeccin urinaria 6.1.6.3 Osteomielitis 6.1.7 Diagnstico diferencial 6.1.7.1 Brucelosis 6.1.7.2 Faringoamigdalitis estreptocccica 6.1.7.3 Tifo 6.1.8 Diagnstico de Laboratorio 6.1.8.1 Cultivos de mdula sea, sangre, heces, u orina dependiendo del tiempo de evolucin. 6.1.8.2 Pruebas serolgicas 6.1.9 Estrategias de Tratamiento 6.1.9.1 Antimicrobianos 6.1.10 Prevencin y control 6.1.10.1 Vacuna 6.1.1.4
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6.2
Brucella 6.2.1 Caractersticas generales 6.2.1.1 Morfologa 6.2.1.2 Antgenos A y M. 6.2.1.3 Diferentes especies de Brucella y especificidad de husped. 6.2.2 Factores de virulencia. 6.2.3 Epidemiologa de la brucelosis 6.2.3.1 Mecanismos de transmisin. 6.2.3.2 Reservorios animales 6.2.3.3 Distribucin mundial y estado actual en Mxico. 6.2.4 Patognesis 6.2.4.1 Iniciacin del proceso infeccioso y desarrollo de signos y sntomas. 6.2.4.2 Brucelosis: manifestaciones clnicas agudas, subagudas y crnicas. 6.2.4.3 Complicaciones: artritis, osteomielitis, meningitis, cistitis, nefritis, orquiepididimitis, endocarditis e hiperesplenismo. 6.2.5 Participacin de la respuesta inmune en el control de la infeccin 6.2.6 Diagnstico diferencial 6.2.6.1 Fiebre Tifoidea 6.2.6.2 Tifo 6.2.7 Diagnstico de laboratorio 6.2.7.1 Cultivo de sangre, medula sea o tejidos infectados. 6.2.7.2 Serologa: Prueba de aglutinacin con rosa de Bengala, Prueba de Huddleson, ELISA (deteccin de anticuerpos IgM e IgG). 6.2.8 Estrategias de Tratamiento 6.2.9 Prevencin y control
6.3.4
6.3.5 6.3.6 6.3.7
6.3.8 6.3.9 6.4
6.3.3.7 Vas de transmisin 6.3.3.8 Vas de entrada Patognesis 6.3.4.1 Iniciacin del proceso infeccioso y desarrollo de signos y sntomas 6.3.4.2 Ciclo de vida 6.3.4.3 Tifo epidmico y Enfermedad de Brill-Zinsser 6.3.4.4 Complicaciones Participacin de la respuesta inmune en el control de la enfermedad. Diagnstico diferencial 6.3.6.1 Brucelosis 6.3.6.2 Fiebre tifoidea Diagnstico de laboratorio 6.3.7.1 Cultivo 6.3.7.2 Pruebas serolgicas 6.3.7.3 Pruebas moleculares Estrategias de tratamiento Prevencin y control
6.3 Rickettsia prowasekii 6.3.1 Caractersticas del microorganismo 6.3.1.1 Estructura 6.3.1.2 Parsito intracelular 6.3.2 Factores de virulencia 6.3.3 Epidemiologa 6.3.3.1 Enfermedad re-emergente. 6.3.3.2 Distribucin geogrfica a nivel mundial y en Mxico 6.3.3.3 Estacin del ao 6.3.3.4 Condiciones favorables para su transmisin
Leptospira interrogans 6.4.1 Caractersticas del microorganismo 6.4.1.1 Estructura 6.4.1.2 Antgenos 6.4.1.3 Serovares de Leptospira interrogans. 6.4.2 Factores de virulencia 6.4.3 Epidemiologa 6.4.4 Participacin de la respuesta inmune en el control de la enfermedad. 6.4.5 Patognesis 6.4.5.1 Iniciacin del proceso infeccioso y desarrollo de signos y sntomas 6.4.5.2 Leptospirosis anictrica e icterica. 6.4.6 Diagnstico diferencial. 6.4.6.1 Hepatitis, fiebre amarilla y dengue 6.4.7 Diagnstico de laboratorio 6.4.7.1 Microscopa. Tincin con Giemsa o Wright 6.4.7.2 Cultivo 6.4.7.3 Serologa. 6.4.7.4 Prueba de ELISA (deteccin de antgeno) y Western blot (prueba confirmatoria). 6.4.7.5 Microscopia de campo oscuro 6.4.8 Estrategias de Tratamiento 6.4.9 Prevencin y control
6.3.3.5 6.3.3.6
Reservorio y vector Poblacin susceptible
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PROGRAMA ACADMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGA Y PARASITOLOGA 6.5
Borrelia recurrentis 6.5.1 Caractersticas del microorganismo 6.5.1.1 Estructura 6.5.1.2 Cultivo y desarrollo 6.5.2 Factores de virulencia 6.5.2.1 Variacin antignica 6.5.2.2 Liberacin de endotoxina. 6.5.3 Epidemiologa 6.5.3.1 El humano como nico husped. 6.5.3.2 Vectores: piojo (Pediculus humanus) y garrapata (Ornithodorus). 6.5.4 Patognesis 6.5.4.1 Iniciacin del proceso infeccioso y desarrollo de signos y sntomas. 6.5.4.2 Fiebre recurrente endmica y epidmica. 6.5.4.2 Complicaciones: Insuficiencia cardiaca, necrosis heptica, hemorragia, alteraciones cerebrales. 6.5.5 Participacin de la respuesta inmune en el control de la Infeccin. 6.5.6 Diagnstico diferencial Tifo Fiebre tifoidea Salmonelosis Paludismo Dengue Leptospirosis Fiebres hemorrgicas virales Tuberculosis 6.5.7 Diagnstico de laboratorio. 6.5.7.1 Frotis y visualizacin en campo oscuro o tincin de Giemsa o Wright de sangre en episodios febriles. 6.5.7.2 Cultivo. 6.5.7.3 Pruebas serolgicas. 6.5.7.4 Pruebas moleculares. 6.5.8 Estrategias del tratamiento. 6.5.9 Prevencin y control 6.5.9.1 Control de vectores. 6.5.10 Otras especies importantes; Borrelia burgdorferi
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7. BACTERIAS CAUSANTES DE INFECCIONES DEL TRACTO URINARIO

Las infecciones del tracto urinario (ITU) son causa frecuente de consulta con el mdico general. Se ha estimado que aproximadamente 30% de las mujeres sufre una infeccin de vas urinarias en algn momento de su vida, aumentando esta frecuencia en mujeres con vida sexual activa. Las bacterias que ms frecuentemente se asocian a ITU en mujeres jvenes son Escherichia coli (8090%), Staphylococcus saprophyticus y otras enterobacterias. Existen ciertos factores predisponentes en el husped que favorecen las ITU por microorganismos, en su mayora, de la familia Enterobacteriaceae. Estos factores incluyen la permanencia de sondas utilizadas para drenar la orina, una estancia prolongada en el hospital y septicemia. La infeccin bacteriana se adquiere habitualmente por va ascendente desde la uretra a la vejiga y en ocasiones hasta el rin. Ocasionalmente, durante una infeccin del tracto urinario, las bacterias invaden la sangre produciendo septicemia. Con menos frecuencia, la infeccin puede ser consecuencia de la diseminacin hematgena de un microorganismo al rin y ser en este rgano donde ocurra la primo infeccin. Cuando ha habido diseminacin hematgena al tracto urinario pueden encontrarse otras especies involucradas, por ejemplo Salmonella entrica sero tipo Typhi, Staphylococcus aureus y Mycobacterium tuberculosis (tuberculosis renal). 7.1 Bacilos Gram negativos 7.1.1 Escherichia coli (agente etiolgico ms frecuente). 7.1.2 Klebsiella pneumoniae (asociado a infecciones urinarias en pacientes hospitalizados). 7.1.3 Proteus mirabilis (produce una orina alcalina, est asociado a la presencia de piedras en la vejiga). 7.1.4 Enterobacter sp 7.1.5 Citrobacter sp 7.1.6 Pseudomonas aeruginosa generalmente en pacientes inmunocomprometidos). 7.2 Cocos Gram positivos 7.2.1 Staphylococcus saprophyticus (coagulasa negativa, segunda causa de infeccin de vas urinarias en mujeres con vida sexual activa). 7.2.2 Staphylococcus epidermidis (causa de infeccin urinaria adquirida en hospital). 7.2.3 Staphylococcus aureus (generalmente se establece por va sistmica). 7.2.4 Enterococos del grupo D de Lancefield 7.2.5 Enterococos: Streptococcus faecalis, Streptococcus faecium. 7.3 Factores de virulencia de cada uno de los enteropatgenos y sus mecanismos de accin. 7.3.1 Escherichia coli: adhesina, Pili P, AFAI, AFAII, hemolisina, HIyA. 7.3.2 Pseudomonas aeruginosa: hemolisina, colagenasa, elastasa, fibrinolisina, fosfolipasa C, DNAasa, algunas cepas poseen cpsula. 7.3.3 Klebsiella pneumoniae: Cpsula 7.3.4 Proteus mirabilis: Flagelos, ureasa. Epidemiologa. 7.4.1 Transmisin; ascendente y hematgena 7.4.2 Factores predisponentes 7.4.3 Pacientes hospitalizados 7.4.4 Instalacin de sondas de Foley 7.4.5 Inmunosupresin 7.4.6 Diabetes 7.4.7 Malformaciones congnitas 7.4.8 Embarazo 7.4.9 Patognesis 7.4.9.1 Iniciacin del proceso infeccioso y desarrollo de signos y sntomas. 7.4.9.2 Infeccin de vas urinarias bajas: Cistitis, uretritis. 7.4.9.3 Infeccin de vas urinarias altas: Pielonefritis, pielitis, salpingitis. Participacin de la respuesta inmune en el control de las infecciones Diagnstico de laboratorio 7.6.1 Toma adecuada de muestra clnica: Chorro medio, aspiracin suprapbica, empleo de sonda, uso de bolsa recolectora. 7.6.2 Urocultivo 7.6.3 Interpretacin del urocultivo: Criterios de Kass.
7.4
7.5 7.6
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PROGRAMA ACADMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGA Y PARASITOLOGA 7.7 7.8 Diagnstico de gabinete 7.7.1 Urografa excretora Estrategias de tratamiento 7.8.1 Criterios 7.8.2 Antimicrobianos de eleccin Prevencin y control
7.9
26
8. BACTERIAS CAUSANTES DE INFECCIONES DE TRANSMISIN SEXUAL

Tradicionalmente, las infecciones de transmisin sexual (ITS) se han mantenido como un problema importante de Salud Pblica. La sfilis y la gonorrea han ido de la mano con la historia del hombre. El surgimiento del VIH ha favorecido la difusin y promocin de las medidas de control de las ITS con resultados controversiales. Los agentes bacterianos responsables son muy variados incluyendo patgenos como Treponema pallidum, Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis, Haemophilus ducreyi, Mycoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum y oportunistas como Gardnerella vaginalis y Klebsiella granulomatis. Dependiendo del agente, la enfermedad puede ser local o sistmica u ocasionar infeccin neonatal. De acuerdo a los reportes de Estados Unidos, las tres principales causas de ITS son Chlamydia trachomatis, Treponema pallidum y Neisseria gonorrhoeae con una incidencia anual de 4 millones, 400 mil y 50 nuevos casos respectivamente. Las infecciones por clamidia se han considerado una epidemia silenciosa, su elevada incidencia radica en la dificultad para la deteccin clnica y de laboratorio; pueden ocasionar; inflamacin plvica con secuelas de infertilidad y embarazos ectpicos, endometritis postpartum, as como linfogranuloma venreo y uretritis en los hombres. La vaginosis bacteriana debido al sobre crecimiento de la flora vaginal, representa la forma ms frecuente en la mujer, el principal agente involucrado es Gardnerella vaginalis (90%). El tratamiento de las ITS depende del agente involucrado lo que destaca la importancia de un diagnstico diferencial apropiado. 8.1 Neisseria gonorrhoeae 8.1.1 Caractersticas del microorganismo 8.1.1.1 Morfologa, agrupacin y tincin de Gram. 8.1.1.2 Estructura y variacin antignica 8.1.1.3 Condiciones de crecimiento y Metabolismo. 8.1.2 Factores de virulencia 8.1.2.1 Estructuras involucradas en la adherencia e invasividad: LOS y protenas de superficie (pilinas, Por, Opa, Rmp, ionforos, proteasas y lactamasas). 8.1.3 Epidemiologa 8.1.3.1 Gonorrea como problema de salud pblica. 8.1.3.2 El hombre como hospedero natural. 8.1.3.3 Factores de riesgo Patognesis 8.1.4.1 Iniciacin del proceso infeccioso y desarrollo de signos y sntomas. 8.1.4.2 Infecciones localizadas En la mujer: Endometritis, salpingitis, cervicitis, vulvovaginitis, enfermedad plvica inflamatoria, gonorrea ano-rectal. En el hombre: uretritis, epididimitis y gonorrea ano-rectal. Conjuntivitis purulenta en el recin nacido. 8.1.4.3 Infecciones sistmicas: Meningitis, endocarditis, artritis sptica, dermatitis 8.1.4.4 Otras enfermedades: Infeccin de vas urinarias, faringoamigdalitis. 8.1.4.5 Complicaciones: Esterilidad y embarazo ectpico, artritis, perihepatitis, dermatitis en mujeres; estrechamiento uretral, rectal, abscesos y fstulas perirectales en hombres. Participacin de la respuesta inmune en el control de las infecciones por gonococos. Diagnstico de laboratorio 8.1.6.1 Tincin y microscopa 8.1.6.2 Cultivo e identificacin bioqumica 8.1.6.3 Deteccin antignica 8.1.6.4 Pruebas moleculares Diagnstico diferencial 8.1.7.1 Uretritis no gonoccica Estrategias de Tratamiento 8.1.7.1 Antimicrobiano de eleccin Prevencin y Control 8.1.9.1 Uso de condn en personas con vida sexual activa, sexo seguro. 8.1.9.2 Terapia preventiva con antimicrobianos.
8.1.4
8.1.5 8.1.6
8.1.7 8.1.8 8.1.9
27
PROGRAMA ACADMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGA Y PARASITOLOGA 8.2 Ureaplasma urealyticum, Mycoplasma hominis. 8.2.1 Caractersticas del microorganismo 8.2.1.1 Morfologa, envoltura celular, actividad enzimtica. 8.2.1.2 Medio de cultivo y desarrollo 8.2.2 Factores de virulencia 8.2.2.1 Protenas de superficie 8.2.2.2 Induccin de citocinas proinflamatorias por macrfagos. 8.2.3 Epidemiologa 8.2.3.1 Incidencia y distribucin 8.2.3.2 Poblacin en riesgo 8.2.4 Patognesis 8.2.4.1 Iniciacin del proceso infeccioso y desarrollo de signos y sntomas. 8.2.4.2 Uretritis no gonoccica. 8.2.4.3 Enfermedad inflamatoria plvica 8.2.4.4 Complicaciones: ruptura prematura de membranas, parto prematuro, neonatos con bajo peso al nacer e infertilidad. 8.2.5 Participacin de la respuesta inmune en el control de la Infeccin. 8.2.6 Estrategias del tratamiento 8.2.7 Prevencin y control 8.2.7.1 Terapia preventiva con Antimicrobianos 8.2.7.2 Control de personas Infectadas. Chlamydia trachomatis 8.3.1 Caractersticas del microorganismo 8.3.1.1 Microscpicas 8.3.1.2 Ciclo de replicacin 8.3.1.3 Parsito intracelular obligado 8.3.1.4 Serotipos causantes de diferentes entidades clnicas 8.3.1.5 Caractersticas de tincin 8.3.2 Factores de virulencia 8.3.2.1 Tropismo celular (cuerpo elemental y reticular). 8.3.2.2 Estrategias empleadas en la invasin celular. 8.3.3 Epidemiologa 8.3.3.1 Distribucin geogrfica 8.3.3.2 Poblacin afectada 8.3.3.3 Factores predisponentes, distribucin y edad. 8.3.4 Patognesis 8.3.4.1 Iniciacin del proceso infeccioso y desarrollo de signos y sntomas.
8.3.5 8.3.6
8.3.7
8.3
8.3.8 8.3.9
Infeccin asintomtica y serotipos asociados 8.3.4.3 Cervicitis, salpingitis, uretritis y enfermedad inflamatoria plvica en mujeres. 8.3.4.4 Uretritis no gonoccica y ocasionalmente, epididimitis en hombres Linfogranuloma venreo. 8.3.4.5 Otras enfermedades asociadas a clamidias: Tracoma, conjuntivitis de inclusin y neumona en neonato. 8.3.4.6 Complicaciones: esterilidad, embarazo ectpico y enfermedad inflamatoria plvica en mujeres; estrechamiento uretral, rectal, abscesos y fstulas perirectales y Sndrome de Reiter en hombres. Participacin de la respuesta inmune en el control de las infecciones Diagnstico de laboratorio 8.3.6.1 Citologa 8.3.6.2 Cultivo en lneas celulares, HeLa, McCoy, HEp-2 y otras 8.3.6.3 Deteccin antignica 8.3.6.4 Pruebas moleculares 8.3.6.5 Pruebas serolgicas Diagnstico diferencial 8.3.7.1 Uretritis gonoccica 8.3.7.2 Uretritis no gonoccica 8.3.7.3 Ulceras genitales por T pallidum, H ducreyi, Calymmatobacterium y por granulomatis virus de herpes simple 1 y 2. Estrategias de Tratamiento Prevencin y Control 8.3.9.1 Terapia preventiva con Antimicrobianos. 8.3.9.2 Control de personas infectadas
8.3.4.2
8.4
Treponema pallidum 8.4.1 Caractersticas del microorganismo 8.4.1.1 Morfologa, envoltura celular, endoflagelo, protenas externas. 8.4.2 Factores de virulencia 8.4.2.1 Movilidad y quimiotaxis 8.4.2.2 Capacidad de adherencia mediada por protenas de membrana externa. 8.4.2.3 Invasin y sobrevivencia Intracelular.
28
8.4.3
8.4.4
8.4.5 8.4.6
8.4.7
8.4.8 8.4.9
Estimulacin de la respuesta inflamatoria Epidemiologa 8.4.3.1 La sfilis como problema de salud pblica 8.4.3.2 Frecuencia en la ltima dcada 8.4.3.3 El hombre como nico hospedero natural 8.4.3.4 Va de transmisin 8.4.3.5 Factores de riesgo Patognesis 8.4.4.1 Iniciacin del proceso infeccioso y desarrollo de signos y sntomas. 8.4.4.2 Cuadro clnico: Sfilis primaria Sfilis secundaria Sfilis terciaria o tarda Sfilis congnita. 8.4.4.3 Complicaciones: neurosfilis, glomerulonefritis y sndrome nefrtico. Participacin de la respuesta inmune en el control de las infecciones Diagnstico de laboratorio 8.4.6.1 Microscopa de campo oscuro 8.4.6.2 Pruebas serolgicas inespecficas: VDRL (Venereal Disease Research Laboratory) RPR (Prueba rpida de la reagina en plasma). 8.4.6.3 Pruebas serolgicas especficas: FAT-ABS (Prueba de absorcin de anticuerpos treponmicos fluorescentes) MHA-TP: (Prueba de microaglutinacin para T. pallidum) TPI: (Prueba de inmovilizacin de T. pallidum). 8.4.6.4 Pruebas moleculares Diagnstico diferencial 8.4.7.1 Chancroide 8.4.7.2 Linfogranuloma venreo 8.4.7.3 Herpes simple 1 y 2 Estrategias de Tratamiento Prevencin y Control 8.4.9.1 Control de personas con vida sexual activa 8.4.9.2 Terapia preventiva con antimicrobianos
8.4.2.4
8.5
Haemophilus ducreyi 8.5.1 Caractersticas del microorganismo 8.5.1.1 Morfologa, agrupacin y tincin de Gram 8.5.1.2 Condiciones de crecimiento y metabolismo 8.5.2 Factores de virulencia 8.5.2.1 Protenas de superficie involucradas en la adherencia a clulas epiteliales y matriz extracelular. 8.5.2.2 Enzimas y toxinas que intervienen en el dao celular 8.5.3 Epidemiologa 8.5.3.1 Prevalencia y distribucin 8.5.3.2 Poblacin en riesgo 8.5.3.3 Factores predisponentes para adquirir la infeccin 8.5.4 Patognesis 8.5.4.1 Iniciacin del proceso infeccioso y desarrollo de signos y sntomas. 8.5.4.2 Chancro blando 8.5.5 Participacin de la respuesta inmune en el control de las infecciones 8.5.6 Diagnstico de laboratorio 8.5.6.1 Cultivo e identificacin Bioqumica 8.5.6.2 Pruebas moleculares 8.5.6.3 Pruebas serolgicas 8.5.7 Diagnstico diferencial 8.5.7.1 Sfilis primaria y secundaria 8.5.8.2 Linfogranuloma venreo 8.5.8.3 lceras de Herpes simple 1y2 8.5.8 Estrategias de Tratamiento 8.5.9 Prevencin y Control 8.5.9.1 Uso de condn en personas con vida sexual activa, sexo seguro 8.5.9.2 Terapia preventiva con antimicrobianos Gardnerella vaginalis 8.6.1 Caractersticas del microorganismo 8.6.1.1 Morfologa, agrupacin y tincin de Gram 8.6.1.2 Condiciones de crecimiento y metabolismo 8.6.2 Factores de virulencia 8.6.2.1 Sialidasa 8.6.2.2 Biopelcula
8.6
29
8.6.3 Epidemiologa 8.6.3.1 Prevalencia y distribucin. 8.6.3.2 Poblacin en riesgo 8.6.3.3 Factores predisponentes para adquirir la infeccin 8.6.4 Patognesis 8.6.4.1 Iniciacin del proceso infeccioso y desarrollo de signos y sntomas. 8.6.4.2 Vaginosis bacteriana 8.6.4.3 Infeccin de vas urinarias 8.6.5 Participacin de la respuesta inmune en el control de las infecciones 8.6.6 Diagnstico de laboratorio 8.6.6.1 Cultivo e identificacin bioqumica 8.6.6.2 Citologa; clulas clave 8.6.6.3 Criterios de Amsel 8.6.7 Diagnstico diferencial 8.6.7.1 Candidiasis 8.6.7.2 Tricomoniasis 8.6.7.3 Vaginitis atrfica 8.6.8 Estrategias de tratamiento 8.6.9 Prevencin y control
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9. BACTERIAS CAUSANTES DE INFECCIONES DEL SISTEMA NERVIOSO CENTRAL

La meningitis bacteriana sigue siendo una enfermedad grave con un alto porcentaje de mortalidad y de secuelas neurolgicas que imposibilitan al paciente en su desarrollo social y econmico de por vida. Los agentes bacterianos responsables son variados con predominio de algunos dependiendo de la edad. Por ejemplo, bacterias gram negativas como Salmonella spp., Klebsiella spp., y E. coli K1 son los patgenos ms frecuentes en neonatos. En nios mayores, la meningitis bacteriana se presentaba ms frecuentemente asociada a Haemophilus influenzae tipo b, pero a partir de la aplicacin universal de la vacuna contra este microorganismo, los agentes bacterianos que prevalecen ahora son Streptococcus pneumoniae, seguido de Neisseria meningitidis y Mycobacterium tuberculosis. La instalacin de otros microorganismos considerados oportunistas como causa de meningitis bacteriana son de difcil diagnstico, por no ser considerados en los laboratorios como responsables en esta patologa clnica. Adems, el alto consumo en tiempo para la identificacin microbiana y el incremento de multi resistencia de las cepas de origen intrahospitalario asociada a meningitis en pacientes susceptibles puede agravar el problema. 9.1 Haemophilus influenzae serotipo b 9.1.1 Caractersticas del microorganismo 9.1.1.1 Morfologa, tincin de Gram y agrupacin 9.1.1.2 Caractersticas estructurales; pared y cpsula, serotipos (antgenos capsulares; a-f). 9.1.1.3 Cultivo: factores de crecimiento (satelitismo) y condiciones de Incubacin. 9.1.2 Factores de virulencia 9.1.2.1 Adhesinas fimbriales y no fimbriales 9.1.2.2 Componente capsular (poliribitol fosfato) 9.1.2.3 Endotoxina (LPS) induccin de altos niveles de secrecin de citocinas (IL-6 e IL-8) 9.1.2.4 Proteasa de IgA 9.1.2.5 Variacin de fase 9.1.3 Epidemiologa 9.1.3.1 Incidencia 9.1.3.2 Morbilidad y mortalidad 9.1.3.3 Poblacin en riesgo 9.1.3.4 Portador asintomtico 9.1.3.5 Mecanismo de transmisin 9.1.4 Patognesis 9.1.4.1 Iniciacin del proceso Infeccioso y desarrollo de signos y sntomas. 9.1.4.2 Meningoencefalitis 9.1.4.3 Otras infecciones asociadas al microorganismo: sepsis y epiglotitis. 9.1.4.4 Haemophilus influenzae no capsulados; sinusitis, otitis media y neumona. 9.1.4.5 Complicaciones: edema cerebral, alteraciones en la excitabilidad neuronal, secuelas neurolgicas graves como hidrocefalia, sordera y retraso mental y prpura trombocitopnica. 9.1.5 Participacin de la inmunidad en el control de la infeccin 9.1.6 Diagnstico diferencial 9.1.6.1 Neisseria meningitidis 9.1.6.2 Streptococcus pneumoniae 9.1.7 Diagnstico de laboratorio 9.1.7.1 Frote y tincin de Gram 9.1.7.2 Cultivo de LCR 9.1.7.3 Anlisis citoqumico de LCR 9.1.7.4 Pruebas serolgicas 9.1.7.5 Pruebas moleculares 9.1.8 Estrategias de tratamiento 9.1.9 Prevencin y control 9.1.9.1 Vacuna 9.1.10 Otras enfermedades causadas por H. influenzae. 9.1.10.1 Conjuntivitis, epiglotitis, celulitis, otitis media, sinusitis, neumona, bronquitis y artritis.
31
9.2
Neisseria meningitidis 9.2.1 Caractersticas del microorganismo 9.2.1.1 Morfologa, tincin de Gram y Agrupacin 9.2.1.2 Caractersticas estructurales 9.2.1.3 Cultivo: factores de crecimiento y condiciones de incubacin 9.2.2. Factores de virulencia 9.2.2.1 Adhesinas fimbriales y no fimbriales 9.2.2.2 Componente capsular 9.2.2.3 Endotoxina (LOS), superantgenos 9.2.3 Epidemiologa 9.2.3.1 Incidencia 9.2.3.2 Morbilidad y mortalidad 9.2.3.3 Poblacin en riesgo 9.2.3.4 Portador asintomtico 9.2.3.5 Mecanismo de transmisin 9.2.4 Patognesis 9.2.4.1 Iniciacin del proceso Infeccioso y desarrollo de signos y sntomas. 9.2.4.2 Meningitis. Mencionar las diferencias sobresalientes que orienten al diagnstico clnico por este microorganismo. 9.2.4.3 Meningococcemia 9.2.4.4 Otras infecciones asociadas al microorganismo: artritis, uretritis y neumona. 9.2.4.5 Complicaciones: edema cerebral, alteraciones en la excitabilidad neuronal, secuelas neurolgicas graves: hidrocefalia, sordera, retraso mental y prpura trobocitopnica 9.2.5 Participacin de la inmunidad en el control de la infeccin 9.2.6 Diagnstico diferencial 9.2.6.1 Haemophilus influenzae 9.2.6.2 Streptococcus pneumoniae 9.2.7 Diagnstico de laboratorio 9.2.7.1 Frote y tincin de Gram 9.2.7.2 Cultivo de LCR 9.2.7.3 Anlisis citoqumico de LCR 9.2.7.4 Deteccin de antgenos 9.2.7.5 Pruebas moleculares
9.2.8 9.2.9 9.3
Estrategias de tratamiento Prevencin y control
Otros microorganismos que producen infeccin del sistema nervioso central 9.3.1 Streptococcus pneumoniae 9.3.2 Mycobacterium tuberculosis
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10. AGENTES BACTERIANOS PRODUCTORES DE NEUROTOXINAS

Bacterias esporuladas. El gnero Clostridium se encuentra constituido por bacilos Gram positivos, anaerobios estrictos y formadores de esporas. La mayora de las especies de Clostridium son saprfitas, pero algunas de ellas son patgenas del humano como Clostridium botulinum y Clostridium tetani productores de botulismo y ttanos respectivamente. Desde finales del siglo XVIII en que aparecieron los primeros reportes de botulismo, ste ha llamado la atencin tanto entre los productores de alimentos como en los consumidores, pero principalmente por ser causa de muerte en bebes y drogadictos. El botulismo es causado por la toxina botulnica, tipo A-B con actividad neurotxica, altamente potente, formada durante el desarrollo de C botulinum, y considerada como el denominador comn de todas las cepas de esta especie. El mecanismo de accin es a travs de la inactivacin de protenas que intervienen en la regulacin de la acetilcolina, produciendo parlisis flcida. C. tetani es causa de toxicidad grave en humanos. Provoca ttanos generalizado, ceflico, neonatal y de las heridas a travs de la tetanoespasmina, neurotoxina termolbil, elaborada en la clula vegetativa bajo el control de un plsmido que, una vez liberada, experimenta una autolisis produciendo una molcula que bloquea la liberacin de neurotransmisores inhibidores de la contraccin muscular. Como consecuencia se produce una contraccin continua que conduce a la llamada contraccin tetnica. El ttanos es una enfermedad de distribucin mundial, que provoca al ao ms de un milln de muertes en el mundo, la mayora de ellas en pases en vas de desarrollo por la escasa inmunizacin, contaminacin de heridas en los medios agrcolas y rurales, administracin de drogas y abortos. La toxina producida en las heridas se une a los terminales de las neuronas motoras perifricas, entra en el axn y es transportada a la mdula espinal y al cerebro a travs del cuerpo de la neurona. 10.1 Clostridium tetani 10.1.1 Caractersticas del microorganismo 10.1.1.1 Morfologia, tincin de Gram 10.1.1.2 Caractersticas estructurales. Esporas 10.1.1.3 Cultivo: factores de crecimiento y condiciones de incubacin 10.1.2 Factores de virulencia 10.1.2.1 Tetanolisina 10.1.2.2 Tetanoespasmina (neurotoxina) 10.1.3 Epidemiologa 10.1.3.1 Mecanismo de infeccin 10.1.3.2 Poblacin en riesgo 10.1.3.3 Incidencia 10.1.3.4 Morbilidad y mortalidad 10.1.4 Patognesis 10.1.4.1 Iniciacin del proceso infeccioso y desarrollo de signos y sntomas. 10.1.4.2 Ttanos generalizado 10.1.4.3 Ttanos localizado 10.1.4.4 Ttanos ceflico 10.1.4.5 Ttanos neonatal 10.1.4.6 Complicaciones: paro respiratorio y falla cardiaca. 10.1.5 Participacin de la inmunidad en el control de la infeccin 10.1.6 Diagnstico diferencial 10.1.6.1 Rabia 10.1.6.2 Hipocalcemia 10.1.6.3 Intoxicacin con veneno 10.1.7 Diagnstico de laboratorio 10.1.7.2 Prueba de neutralizacin de toxina 10.1.8 Estrategias de tratamiento 10.1.8.1 Tratamiento antimicrobiano 10.1.8.2 Inmunizacin pasiva con suero antitetnico 10.1.8.3 Tratamiento quirrgico 10.1.9 Prevencin y control. 10.1.9.1 Vacunacin con toroide tetnico
33
10.2
Clostridium botulinum 10.2.1 Caractersticas del microorganismo 10.2.1.1 Morfologa, tincin de Gram 10.2.1.2 Esporas 10.2.1.3 Cultivo: factores de crecimiento y condiciones de incubacin. 10.2.2 Factores de virulencia 10.2.2.1 Neurotoxina (tipos A-G) mecanismo de accin y propiedades fenotpicas. 10.2.3 Epidemiologa 10.2.3.1 Poblacin en riesgo 10.2.3.2 Mecanismo de infeccin o transmisin 10.2.3.3 Diseminacin 10.2.3.4 Morbilidad y mortalidad 10.2.4 Patognesis 10.2.4.1 Iniciacin del proceso infeccioso y desarrollo de signos y sntomas 10.2.4.2 Botulismo clsico 10.2.4.3 Botulismo del lactante 10.2.4.4 Botulismo de heridas 10.2.4.5 Botulismo por inhalacin 10.2.4.6 Complicaciones: parlisis Respiratoria 10.2.5 Participacin de la inmunidad en el control de la infeccin 10.2.6 Diagnstico clnico 10.2.6.1 Criterios clnicos que permiten diagnosticar botulismo. 10.2.6.2 Diagnstico diferencial: Myasthenia gravis, Sndrome de Guillain Barr y poliomielitis. 10.2.7 Diagnstico de laboratorio 10.2.7.1 Cultivo de heces y alimento contaminado 10.2.7.2 Deteccin de la toxina en suero 10.2.7.3 Demostracin de actividad de la toxina (bioensayo en ratn) 10.2.8 Estrategias de tratamiento 10.2.7.1 Tratamiento de soporte 10.2.7.2 Lavado gstrico 10.2.7.3 Antimicrobianos 10.2.7.4 Antitoxina botulnica trivalente
10.2.9
Prevencin y control 10.2.9.1 Vacunacin con toroide Tetnico 10.2.9.2 Medidas preventivas. 10.2.10 Otras patologas causadas por C. botulimun 10.2.10.1 Diarreas
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11. RESPUESTA INMUNE HACIA LAS BACTERIAS

La respuesta inmune es muy importante para evitar, controlar y erradicar las infecciones bacterianas. Las barreras fsicas, qumicas y biolgicas (microbiota normal); la fagocitosis y el complemento forman parte de la inmunidad innata, al igual que las clulas NK o asesinas naturales. Las diferentes funciones de estos componentes, evitan que se produzcan infecciones aparentes controlando a los microorganismos desde el momento en que entran en contacto con el organismo. Sin embargo, si los microorganismos logran colonizar, establecerse y causar enfermedad, nuestro cuerpo establece la respuesta inmune adquirida que puede ser de tipo humoral (anticuerpos) y celular (linfocitos T) y que ayuda, junto con el tratamiento antimicrobiano, a resolver la infeccin. La inmunidad innata est ntimamente relacionada con la inmunidad adquirida, de hecho el establecimiento de la segunda depende de la primera. As, las clulas presentadoras de antgeno de la inmunidad innata (clulas dendrticas y macrfagos) pueden activar a los linfocitos para que respondan con sus mecanismos efectores y resuelvan la infeccin y formen, adems, clulas de memoria. Las vacunas tienen como objetivo inducir respuestas inmunes y, sobre todo, clulas de memoria que respondan rpidamente cuando el organismo se expone a la bacteria patgena. En el caso de bacterias, cuyos factores principales de virulencia son toxinas, se inmuniza con toxoides para inducir anticuerpos que neutralizen las toxinas y eviten que se produzca su efecto (toxoide tetnico). Las infecciones tambin inducen la formacin de clulas de memoria que, muchas veces, nos protegen de infecciones con el mismo serotipo. La respuesta inmune tambin es usada para realizar el diagnstico inmunolgico que consiste en detectar anticuerpos especficos o bien la presencia de antgenos bacterianos. La utilidad de la respuesta inmune en el diagnstico ha sido tratada en los temas anteriores. Finalmente, la respuesta inmune puede ser responsable de parte de la patologa observada en algunas infecciones bacterianas como la tuberculosis, donde los granulomas son resultado de la respuesta celular hacia Mycobacterium tuberculosis. 11.1 Respuesta inmune innata contra: 11.1.1 Bacterias intracelulares 11.1.2 Bacterias extracelulares Respuesta inmune adquirida contra: 11.2.1 Bacterias intracelulares 11.2.2 Bacterias extracelulares 11.2.3 Toxinas bacterianas Evasin de la respuesta inmune por las bacterias Inmunopatologa: Tuberculosis, fiebre reumtica y glomerulonefritis.
11.2
11.3 11.4
35
GUIONES PRCTICOS
36
INTRODUCCIN A LAS PRCTICAS DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGA Y PARASITOLOGA
Objetivos del laboratorio de Microbiologa y Parasitologa en la carrera de Medicina. Al finalizar el curso, el alumno sabr cules son los procedimientos que sigue el laboratorio de Bacteriologa, Virologa, Micologa y Parasitologa, as como el tiempo que se requiere para llegar a la identificacin completa del organismo. Comprender la importancia de acompaar su solicitud con un diagnstico clnico presuntivo. Conocer la importancia que tiene la correcta toma de una muestra clnica para el xito en la identificacin del organismo asociado a la enfermedad infecciosa. Valorar el riesgo de establecer una terapia inadecuada en contra de organismos patgenos.
Desarrollo de las Prcticas Se sugiere la participacin de los profesores titulares durante la ejecucin de la prctica en el laboratorio.
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PRCTICA No. 1 BIOSEGURIDAD

Objetivos generales Establecer las medidas de bioseguridad que se emplean en los laboratorios de Microbiologa y Parasitologa. Identificar los riesgos que se presentan en el manejo del material que se utiliza en un laboratorio de Microbiologa y Parasitologa. Antecedentes Es aconsejable que toda persona que labore en un laboratorio de Bacteriologa o en cualquier otra rea de la Microbiologa, no tenga riesgos innecesarios ya que el descuido, la negligencia y las prcticas poco seguras pueden causar daos serios, no solo en los individuos, sino tambin en los colaboradores o en los pacientes. Es decir, cada profesional de la salud es responsable por su seguridad y la de sus compaeros (Organizacin Mundial de la Salud). La bioseguridad se entiende como el conjunto de polticas destinadas a mantener la vigilancia, para proteger el medio ambiente, la salud y la seguridad de los profesionales de la salud que realizan actividades frente a riesgos ocupacionales procedentes de agentes biolgicos, fsicos o qumicos. Su objetivo es implementar una serie de acciones que garanticen una mejor calidad de vida. Por lo cual, se han llevado a cabo una serie de normas, tendientes a disminuir el riesgo de transmisin de microorganismos a partir de fuentes reconocidas o no reconocidas de infeccin en Servicios de Salud, relacionadas con accidentes por exposicin a sustancias, sangre y fluidos corporales potencialmente peligrosos. Sugerencias generales e informacin Las siguientes consideraciones generales pueden hacer menos riesgosas las actividades a realizar en el laboratorio: 1. Cada persona que labore en el laboratorio, debe ser informada acerca de la ubicacin y la operacin de cada uno de los equipos de seguridad y de las instalaciones, tales como extinguidores, duchas y lava ojos, los cuales deben ser fcilmente accesibles en el laboratorio. 2. Los equipos de proteccin personal, que incluyen entre otros guantes y bata, deben ser utilizados cuando sea indicado. La bata debe estar cerrada (abotonada) en todo momento y es necesario quitrsela al abandonar el laboratorio. Los hbitos y el arreglo personal debe de tomarse en cuenta. El cabello largo debe atarse, de modo que no interfiera con el trabajo. Se debe evitar la aplicacin de cosmticos dentro del rea de trabajo. Las sandalias y zapatos abiertos estn contraindicados ya que no protegen al pie. En lo posible, no llevarse los dedos y los lpices a la boca. Es aconsejable no llevar lentes de contacto puestos en el laboratorio ya que absorben solventes. Es recomendable usar lentes de seguridad cuando se trabaja con material custico o infeccioso. Est prohibido comer o almacenar alimentos y bebidas en el laboratorio o en el refrigerador del laboratorio. Por tal motivo, se debe designar un refrigerador especfico para almacenar alimentos del empleado. Esta absolutamente prohibido pipetear con la boca cualquier material. Por lo que se aconseja emplear accesorios para pipetas. Cada sesin de laboratorio deber iniciarse con una explicacin y tiempo de instrucciones. No empiece a trabajar hasta que haya recibido las instrucciones. Pregunte cuando no entienda el mtodo o la finalidad de algn experimento. La buena tcnica de laboratorio depende primordialmente de que se conozca lo que se va a hacer. Anote cuidadosamente todas las observaciones en el momento de hacerlas.
3.
4.
5.
6. 7. 8. 9. 10. 11.
Normas a seguir en el laboratorio 1. 2. 3. 4. Limpie la superficie de su mesa con una solucin germicida, al principio y al final de cada sesin de laboratorio. Mantenga la mesa libre de todo lo que no sea esencial y al final de la sesin djela limpia y libre de material y equipo. Ponga todo el material slido en las canastillas para este fin y el material de vidrio en las gradillas. Debido a que algunos de los microorganismos con que se va a trabajar son patgenos en potencia, es necesario desarrollar tcnicas de asepsia al manejarlos y transferirlos.
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5. Evite el contacto de la boca con las manos, comer o humedecer las etiquetas con la lengua. 6. Informe inmediatamente al instructor de cualquier accidente tal como cortaduras, quemaduras o derrame de cultivos. 7. Tome todas las precauciones posibles para evitar estos accidentes. Precauciones sistemticas de seguridad Agujas y material de vidrio 1. Desechar todo material de vidrio que est quebrado o rajado, y colocarlo en recipientes adecuados. 2. Recoger los vidrios rotos con escobilln y pala; no hacerlo con la mano. 3. Los artculos de vidrio no deben ser arrojados a la pileta ni arrojarlos sueltos a un cesto de desperdicios en el que se arrojan artculos de papel. 4. Las agujas y lancetas usadas deben colocarse en recipientes para agujas usadas para ser eliminados de manera adecuada. 5. Evitar, siempre que sea posible, quitar o intercambiar las agujas de las jeringas. La prctica de cambiar las agujas antes de descartar la sangre extrada de la vena dentro de la botella de cultivo ha sido abandonada por la mayora de los hospitales. Manejo de muestras y derrames 1. Las muestras se deben de recolectar en recipientes slidos, con cierres adecuados para evitar derrames y prdidas. Todas las muestras deben ser consideradas potencialmente peligrosas. 2. Las cortaduras en las manos debern ser adecuadamente protegidas con tela adhesiva. Si la actividad laboral implica el manejo de sangre, suero, plasma u otras muestras, se debe de usar guantes desechables. 3. Si una muestra presenta evidencia de rotura, derrame o suciedad dentro del recipiente, ponerse guantes. 4. Las muestras contaminadas con sangre deben ser rechazadas. Manipularlas solo con guantes. Notificar este hecho como peligroso para la salud. 5. Lavarse las manos minuciosamente con agua y jabn varias veces al da, en particular despus de manipular las muestras y antes de retirarse.
6.
Inunde con solucin desinfectante cualquier rea donde haya ocurrido un derrame de sangre o suero. Utilice guantes, toallas de papel o gasa para absorber el lquido, y luego realice un lavado minucioso con agua. Guarde en una bolsa todo el material empleado contaminado, para eliminarlo como material infeccioso.
Manipulacin de desperdicios 1. 2. 3. 4. 5. Reserve algunas de las piletas del laboratorio para eliminar muestras de sangre y orina. No permitir el lavado de manos en estas piletas. Eliminar en recipientes adecuados y rotulados: tubos con sangre, pipetas, puntas y agujas. El material de vidrio o cortante debe ser eliminado en recipientes adecuados de paredes slidas. Llevar estos recipientes al rea de desecho con la frecuencia necesaria para evitar su acumulacin. Sumerja el material de vidrio contaminado en solucin desinfectante. Enjuague minuciosamente con agua y esterilcelo antes de usarlo otra vez.
Desarrollo de la prctica Sesin I 1. El profesor definir el concepto de bioseguridad. 2. Los alumnos, en grupos pequeos, revisarn las normas a seguir en el laboratorio. 3. El profesor dirigir la discusin sobre: a) Manipulacin de agujas y material de vidrio. b) Manejo de muestras y derrames c) Manipulacin de material infectocontagioso. NOTA: Recuerde que las medidas de seguridad estn dirigidas al manejo adecuado de productos Corrosivo, Reactivos. Explosivos, Txico, Inflamables, Biolgicos-infecciosos (CRETIB) y Radioactivos con el fin de evitar riesgos.
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Preguntas orientadas para consolidar el conocimiento 1. Qu medidas de proteccin personal se deben emplear en un laboratorio de Microbiologa y Parasitologa? 2. Cul es el manejo correcto de los desechos infecto-contagiosos? 3. Por qu se usan contenedores para la eliminacin de punzocortantes? Preguntas orientadas para evaluar el conocimiento adquirido 1. Por qu no se deben ingerir alimentos en los laboratorios? 2. Cules son las normas empleadas en la manipulacin de muestras clnicas y derrame de las mismas? 3. Cul es la indicacin para el uso de bata en el laboratorio? Resumen de la prctica El profesor, junto con los alumnos, elaborar las conclusiones sobre las medidas de seguridad que se deben seguir en el laboratorio de Microbiologa y Parasitologa.
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PRCTICA No. 2 MANEJO Y CUIDADO DEL MICROSCOPIO

Objetivos generales Mencionar las partes fundamentales microscopio y sus funciones.
del
Sealar el manejo y los cuidados que se deben tener con el microscopio compuesto. Observacin de preparaciones. Antecedentes El microscopio es un instrumento de gran utilidad en el estudio de la Microbiologa y Parasitologa; puede ser simple, cuando su sistema se basa en una lente biconvexa o compuesto cuando utiliza dos sistemas de lentes que se encuentran separados, consiguiendo con ello un mayor aumento. Entre los microscopios compuestos el ms usado es el de luz, el cual emplea fotones de luz visible para formar imgenes. Sin embargo, el tipo de luz empleada y cmo se manipula puede variar. Los tipos de microscopios de luz ms comunes son: campo brillante, campo oscuro, contraste de fase y de fluorescencia. El microscopio de luz brillante se encuentra constituido por tres sistemas: 1. ptico. 2. Mecnico 3. Iluminacin Cuidados que hay que tener con el microscopio 1. El microscopio debe guardarse protegido de la humedad y el polvo. 2. Al trasladarlo, debe sujetarse de su brazo y del soporte o base. 3. Antes de usarlo, debe cerciorarse de que las lentes accesibles (objetivos, oculares y condensador) estn limpias, de no ser as, hay que limpiarlas con papel seda especial para evitar su deterioro. 4. No tocar nunca las lentes. 5. No dejar el portaobjeto puesto cuando no se est usando el microscopio. 6. Al terminar la observacin con el objetivo de inmersin debe retirarse el aceite utilizando papel seda o un lienzo suave, limpio y seco, porque de no hacerlo se reseca, dificultando su limpieza y causando deterioro del lente.
7. Si los objetivos de poco aumento se manchan con aceite, limpiarlos inmediatamente con papel seda. 8. Si el aceite se ha secado o endurecido en las lentes, se puede limpiar con papel humedecido con xilol. Tener precaucin, ya que al emplear un exceso de xilol podra disolver el cemento que une las lentes. 9. Las lentes de los objetivos, el condensador y los oculares han sido cuidadosamente ajustados en la fbrica de origen, por lo tanto, no deben ser desarmados por el observador. Recuerde que el poder de resolucin del microscopio depende de que todas las lentes estn centradas y a la distancia correcta unas de otras. 10. Los objetivos, el condensador y los oculares pueden limpiarse con agua destilada; la lente de inmersin y la parte superior del condensador con xilol, pero con poca cantidad, humedeciendo ligeramente un lienzo y pasndolo suavemente por la superficie del lente. No usar este solvente en exceso, porque las lentes vienen montadas con blsamo de Canad, el cual puede disolverse. 11. Mantener seca y limpia la platina del microscopio. Si se derrama sobre ella algn lquido, secarla con un pao. Si se mancha con aceite, limpiarla con un pao humedecido con xilol. 12. La superficie del microscopio se puede limpiar con un lienzo humedecido con agua. La cremallera del tornillo macromtrico debe limpiarse ocasionalmente con una pequea cantidad de aceite o grasa delgada. El tornillo micromtrico no necesita aceite. 13. No inclinar el microscopio cuando se est trabajando con aceite de inmersin. Este puede caer al sistema mecnico de la platina donde es difcil limpiarlo, o puede gotear al condensador y ah solidificarse. 14. Cuando no se usa el microcopio, guardarlo cubierto y en su caja.
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Para evitar rotura del microscopio 1. No forzarlo nunca. 2. Las lentes objetivo no deben tocar nunca los portaobjetos. 3. No bajar el tubo del microscopio con el tornillo de enfoque macromtrico mientras se est mirando por el ocular. 4. No intercambiar los objetivos o los oculares de microscopios distintos y, bajo ninguna circunstancia, se deben separar las lentes frontales de los objetivos. Desarrollo de la prctica Material 1. Microscopios compuestos. 2. Preparaciones fijas de bacterias, protozoos, hongos y artrpodos de importancia mdica. 3. Preparaciones en fresco (cultivo de paja). 4. Portaobjetos. 5. Cubreobjetos. 6. Aceite de inmersin. 7. Papel seda. 8. Diapositivas. Mtodo 1. El profesor explicar la diferencia entre una preparacin en fresco y una fija. 2. Observar preparaciones en fresco con los objetivos de 10X y 40X 3. Observar preparaciones fijas con los objetivos de 10X, 40X y 100X Preguntas orientadas para consolidar el conocimiento 1. Cul es la utilidad del microscopio en el estudio de la Microbiologa y Parasitologa? 2. Cul es el poder de resolucin del microscopio ptico al emplear el objetivo de inmersin? 3. Mencione tres tipos de microscopios y su utilidad. Preguntas orientadas para evaluar el conocimiento adquirido 1. Qu objetivo se utiliza para observar una preparacin en fresco? 2. Mencione tres medidas para mantener limpio el microscopio compuesto. 3. Con qu se deben limpiar los objetivos de inmersin despus de la observacin? 4. Qu cuidados se deben tener con el microscopio al terminar la observacin?
Resumen de la prctica El profesor, junto con los alumnos, elaborar las conclusiones del tema.
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PRCTICA No. 3 INTRODUCCIN A LA BACTERIOLOGA
Objetivos generales Establecer un marco de referencia en el estudio de la Bacteriologa clnica. Revisar los recursos con que cuenta el laboratorio de bacteriologa para la realizacin de tinciones y cultivos bacteriolgicos, empleados en la identificacin de una bacteria. Explicar la importancia que tiene el laboratorio de bacteriologa clnica, en la determinacin del diagnstico etiolgico correcto para establecer la terapia antimicrobiana especfica. Antecedentes 14 El cuerpo humano se encuentra formado por 10 clulas. De las que solo, aproximadamente, el 10% son humanas. El resto son microorganismos asociados. Desde el momento de su nacimiento, el individuo establece una relacin con microorganismos del ambiente que formarn la microbiota. Dependiendo del sitio del cuerpo ser el tipo de microorganismo que lo colonice. La microbiota es benfica para el humano, salvo en el momento en que se presente algn factor de oportunismo que favorezca el crecimiento inusual de los microorganismos y produzca dao. Por lo tanto, en la mayora de los casos, esta interaccin es benfica. El conocimiento de la microbiota permite diferenciar los microorganismos patgenos de los no patgenos. Por otro lado, debido a que se han incrementado los factores de oportunismo que favorecen las patologas por estos microorganismos, las infecciones que producen representan, en la actualidad, un problema de diagnstico. En el estudio bacteriolgico de un caso clnico, se sigue la secuencia siguiente: A). Toma de productos: Es importante el conocimiento del sitio de donde se tomar la muestra. A las bacterias se les puede aislar prcticamente de cualquier sitio (piel, mucosas y secreciones), sin que estn produciendo procesos patolgicos. En otras ocasiones, se presenta la necesidad de aislar bacterias a partir de tejidos lesionados o productos patolgicos. En el caso de infecciones de vas respiratorias, se tomar exudado farngeo, nasal o muestras obtenidas por lavado bronquial o esputo. En enfermos B).
del tracto gastrointestinal, se tomar materia fecal o bien muestras con hisopo estril por va rectal o directamente utilizando rectosigmoidoscopa. En casos de infecciones de vas urinarias, la muestra til es la orina recolectada en condiciones de esterilidad y, en infecciones localizadas, como es el caso de pstulas, fornculos, fstulas, otitis, lesiones oculares, etc., el producto a tomar ser el exudado de esas lesiones. En caso necesario, se emplear un medio de transporte que permitir sobrevivir a la bacteria antes de ser sembrada en un medio de cultivo. Aislamiento: Proceso necesario para identificar al microorganismo. Para lo cual, se emplean diferentes medios de cultivo, que proporcionarn los requerimientos nutritivos necesarios (carbono, nitrgeno, electrolitos, agua y, en algunos casos, sustancias de enriquecimiento como es la sangre) para el crecimiento y reproduccin de la bacteria. Atendiendo a su estado fsico, los medios de cultivo pueden ser lquidos, semislidos y slidos. Los slidos son empleados en el aislamiento y caracterizacin de la morfologa colonial del microorganismo. De acuerdo con su utilidad prctica, pueden ser selectivos, no selectivos, enriquecidos y para aislamiento especializado. Los selectivos son aquellos que promueven el desarrollo de ciertas bacterias, inhibiendo otras. En tanto que los no selectivos estn libres de inhibidores lo cual, permiten el desarrollo de una gran cantidad de bacterias. Entre los empleados para la identificacin se cuenta con los medios diferenciales. Mtodos de aislamiento y observacin de la morfologa colonial. La tcnica de aislamiento ms frecuentemente usada es por estras en medio de cultivo slido en placa de petri. Con este procedimiento se logra obtener un cultivo puro. Es decir, se logra separar un tipo de bacteria de otras presentes en la misma muestra clnica. Tambin se cuenta con el mtodo de dilucin con asa calibrada (cultivo de orina) o la de medicin con pipeta graduada.
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La inspeccin de las caractersticas macroscpicas de las colonias (tamao, forma, elevacin, margen, color, superficie, densidad, consistencia, produccin de pigmento y hemlisis en caso de haberse empleado agar sangre) se efecta con el examen visual del desarrollo en la superficie de las placas de agar. C). Identificacin bacteriolgica. Procedimiento que se efectuar con base en la fisiologa bacteriana para reconocer los productos del metabolismo de sta; produccin de cido y gas a partir del empleo de carbohidratos; glucosa, lactosa o sacarosa. Presencia de productos liberados por la presencia de enzimas que desdoblan aminocidos (triptfano, cistina, metionina, ornitina, arginina y lisina) como sera la produccin de indol, H2S, etc. de protenas (gelatina, caseina). As como hemolisinas que lisan glbulos rojos (produciendo hemlisis , , y ) o ausencia de hemlisis. Tcnicas de Tincin La falta de contraste entre la bacteria y el medio que la rodea hace necesario de la coloracin de stas, con el fin de aumentar el contraste y poder observarlas con el microscopio ptico, lo que permite distinguir los diferentes tipos celulares. La mayora de los colorantes son compuestos orgnicos, cargados positivamente (cationes), como el azul de metileno, cristal violeta y safranina, que se combinan con constituyentes celulares cargados negativamente (aniones). Las tinciones pueden ser simples cuando se emplea un solo colorante y compuestas cuando se utilizan varios colorantes combinados, ejemplo de stas son la tincin de Gram y la de Ziehl-Neelsen Desarrollo de la prctica. Sesin I 1. El profesor apoyado con material didctico explicar de manera terica y prctica el desarrollo de la prctica. 2. Los alumnos, en grupos pequeos, revisarn el material que se emplear durante el desarrollo de la prctica. 3. Los alumnos bajo, vigilancia del profesor, realizarn la prctica.
Material 1. Medio de transporte. 2. Placas de Eosina azul de metileno (EMB), Salmonella-Shigella agar (SS), agar sangre y agar chocolate. 3. Tubos de agar hierro triple azcar (TSI), agar hierro lisina (LIA), agar movilidad, indol, lisina (MIO), tubos de citrato de Simmons. 4. Tubos con caldo nutritivo. 5. Asas bacteriolgicas. 6. Placas de agar nutritivo. 7. Hisopo estril. 8. Tubo con agua destilada estril. 9. Marcador (el alumno deber traerlo). 10. Mechero. Mtodo Manos sin lavar. 1. Humedecer el hisopo estril con agua. 2. Con el hisopo humedecido, tomar la muestra de los pliegues interdigitales, dorso y palma. 3. Sembrar con el hisopo en un extremo de la placa con agar nutritivo. 4. Realizar estriado para obtener colonias aisladas. 5. Rotular la caja de petri. 6. Incubar a 35-37 C durante 24-48 horas. Manos lavadas. 1. Realizar el aseo de manos con agua y jabn de manera tradicional. 2. Frotar las manos enjabonadas durante 30 segundos. 3. Humedecer el hisopo estril con agua. 4. Tomar la muestra de los espacios interdigitales, del dorso y palmas. 5. Sembrar en las placas de agar nutritivo como en el caso anterior. 6. Rotular la caja de petri. 7. Incubar a 35-37 C durante 24-48 horas. Sesin II Material 1. Cajas de petri sembradas por los alumnos 2. Equipo para tincin de Gram 3. Portaobjeto 4. Aceite de inmersin 5. Microscopio 6. Asa bacteriolgica 7. Placas y tubos sembrados (demostrativos)
D).
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Mtodo Los alumnos: 1. Observarn, macroscopicamente, los cultivos (morfologa colonial) 2. Realizarn tincin de Gram a partir de colonias aisladas desarrolladas. 3. Realizarn observacin microscpica. Preguntas orientadas para consolidar el conocimiento 1. Mencionar bacterias que forman parte de la microbiota. 2. Indicar los recursos de laboratorio que se utilizan para el diagnstico de infecciones bacterianas. 3. Qu importancia tiene el hacer el diagnstico etiolgico en casos de infecciones bacterianas? Preguntas orientadas conocimiento adquirido. para evaluar el
1. Cul es el motivo para emplear un medio de transporte? 2. Cul es el motivo para sembrar por estras en un medio de cultivo slido? 3. Qu fin se persigue con el empleo de medios diferenciales? Resumen de la prctica: El profesor, junto con los alumnos, discutir la utilidad del empleo de las tcnicas usadas en bacteriologa diagnstica. .
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PRACTICA No.4 INFECCIONES DE VAS RESPIRATORIAS

Objetivos generales Establecer un marco de referencia para el estudio de las infecciones bacterianas de vas respiratorias. Identificar los principales agentes etiolgicos que producen infecciones de vas respiratorias. Revisar los recursos de laboratorio para el diagnstico de las infecciones bacterianas de vas respiratorias. Antecedentes Entre los microorganismos involucrados en procesos infecciosos de vas respiratorias, se encuentra; Streptococcus pyogenes tambin llamado Estreptococo beta hemoltico del grupo A de Lancefield. As como estreptococos del grupo C, D, Streptococcus pneumoniae, Arcanobacterium haemolyticum, Staphylococcus aureus, Neisseria gonorrhoeae, Corynebacterium diphtheriae, Haemophilus influenzae tipo B, Bordetella pertussis, Borrelia vincenti, Fusobacterium sp y Mycobacterium tuberculosis. Es importante mencionar que en caso de pacientes inmunocomprometidos pueden participar Klebsiella pneumoniae y Pseudomonas aeruginosa. Entre los virus tenemos una alta participacin de Adenovirus, Epstein-Barr, Coxsackie A, Herpes simple 1 y 2, Virus de la Influenza A y B, Parainfluenza, Coronavirus y Citomegalovirus. Las muestras que se emplean en infecciones de vas respiratorias incluyen, exudado farngeo, exudado nasal, exudado nasofarngeo, lavado nasal, aspirado sinusal y esputo entre otras. En presencia de patologa pulmonar, el estudio bacteriolgico de una muestra de esputo (expectoracin) debe constituir el examen inicial. La calidad de la muestra es ms importante que el volumen obtenido. Para un diagnstico confiable, el material debe ser representativo de vas areas inferiores, debindose caracterizar, macroscpicamente por la presencia de material mucoide, aspecto herrumbroso propio del inicio de neumona y microscpicamente por la presencia de macrfagos, eritrocitos y/o clulas glandulares. Desarrollo de la prctica Sesin I: El profesor de laboratorio conjuntamente con los alumnos revisar un caso clnico de infecciones de vas respiratorias e identificarn: a) Datos relevantes del caso. b) Posibles diagnsticos clnicos. c) Productos biolgicos empleados para el diagnstico de laboratorio. d) Exmenes de laboratorio tiles para confirmar el diagnstico clnico. e) Realizarn estudio bacteriolgico de esputo. Material - Frotes preparados. - Mecheros. - Equipo de Tincin de Ziehl-Neelsen y Gram. - Diapositivas. - Microscopio - Aceite de inmersin. Mtodo 1. Para realizar el aislamiento de la o las bacterias (BAAR positivas) a partir de esputo, se realizar previamente la descontaminacin y concentracin de la muestra que se vaya a emplear. 2. Toma de muestra: se le pide al paciente que la recoleccin se haga por la maana. Sin necesidad de realizar limpieza de los dientes y encas. Se har un enjuague con agua nicamente. 3. Inmediatamente pedirle realizar inspiraciones profundas para provocar un acceso de tos que el paciente aprovechar para expulsar un esputo de su rbol bronquial. 4. Depositar el esputo en un frasco estril de boca ancha, proporcionado por el laboratorio. 5. En la mayora de los casos el tamao de la muestra ser de una cucharadita, cantidad suficiente para el estudio. 6. En caso de que no se cultive inmediatamente, la muestra podr mantenerse 24 horas, en el refrigerador. Siembra 1. La siembra de la muestra se realizar en una campana de proteccin con los cuidados adecuados, evitando la produccin de aerosoles. 2. Se emplear una pipeta Pasteur estril para colocar la muestra en un tubo con medio de Lowenstein-Jensen o los que se requieran. 3. De la misma muestra se realiza un frote en un porta objeto (laminilla). 4. Este cultivo se incubar a 37 C., con tubo inclinado y su tapn ligeramente apretado. 5. Se debe vigilar el desarrollo en los medios inoculados e incubados durante un perodo de 6 a 8 semanas.
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Prctica 1. Por razones de seguridad nicamente se realizar la tincin de Ziehl-Neelsen de un frote con la bacteria previamente fijada al portaobjeto. 2. Una vez teida la laminilla, observar al microscopio. Interpretacin de resultados Medio de Lowenstein-Jensen: Observar la morfologa colonial, determinar la presencia o no de pigmentacin. Preguntas orientadas para consolidar el conocimiento 1. Mencione tres bacterias que se asocian a enfermedades de vas respiratorias. 2. Indique los recursos de laboratorio que se utilizan para el diagnstico de infecciones bacterianas de las vas respiratorias. 3. Qu importancia tiene hacer el diagnstico etiolgico en las infecciones bacterianas de vas respiratorias? Preguntas orientadas para evaluar el conocimiento adquirido 1. Qu utilidad tiene el tipo de pigmento observado en los tubos con medio de Lowenstein-Jensen? 2. Qu bacteria se aisl en el cuadro clnico estudiado? 3. Qu aplicacin tienen los anlisis serolgicos en el diagnstico de infecciones bacterianas de las vas respiratorias? Resumen de la prctica El profesor junto con los alumnos correlacionar el caso clnico con el diagnstico de laboratorio y elaborarn un esquema grfico. .
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PRCTICA No.5 INFECCIONES DE TEJIDOS BLANDOS
Objetivos generales Establecer un marco de referencia para el estudio de infecciones bacterianas de tejidos blandos superficiales y profundos. Identificar los principales agentes bacterianos causantes de infeccin de tejidos blandos superficiales y profundos. Revisar los recursos para el diagnstico de bacterias que causan infeccin de tejidos blandos superficiales y profundos. Antecedentes La superficie de la piel normal se encuentra colonizada por bacterias, clasificadas en dos grandes grupos; microbiota residente y microbiota transitoria o temporal. Esta ltima cobra importancia por que no solo es capaz de desarrollar lesiones en el individuo, sino tambin por transformar a ste en un portador sano. Entre los microorganismos que la integran se encuentra con elevada incidencia a Staphylococcus aureus y Streptococcus pyogenes. Con menor frecuencia estn bacterias Gram negativas. La distribucin de estas dos especies de cocos Gram positivos en la superficie de la piel es preferencial, encontrndose en espacios interdigitales de pies, ombligo, axilas, cara interna de muslos, ingle, cuello y cara. En relacin a la cara se localizan en sitios cercanos a los grandes orificios (boca y nariz), en tanto que las bacterias Gram negativas se ubican preferentemente en ambientes hmedos y con cierto grado de maceracin. La piel constituye una barrera natural a la infeccin, sin embargo, puede ser vencida, tanto por la capacidad de multiplicacin bacteriana como por los factores de virulencia del microorganismo. Existen zonas susceptibles a la infeccin como son los folculos pilosebceos y las glndulas sudorparas apcrifas, cuya estructura anatmica los convierte en verdaderos fondos de saco, favoreciendo la accin de las bacterias (S aureus, S pyogenes, Corynebacterium sp y en ocasiones bacterias Gram negativas).
Entre los efectos de estos microorganismos se encuentran las infecciones primarias, tal es el caso de pioderma (infecciones de piel y anexos), localizadas al inicio en un tegumento previamente normal, aunque pueden dar sintomatologa posteriormente a distancia. La pioderma produce cuadros clnicos muy variados. Cuando afecta la superficie cutnea se genera; imptigo, sndrome de la piel escaldada, estima, erisipela, la pioderma que afecta anexos; foliculitis, porofoliculitis, ntrax y piodermas atpicas; chancriforma, vegetante. El diagnstico etiolgico de estos cuadros se realiza a travs del cultivo de la muestra clnica, tendiente al aislamiento e identificacin del o de los microorganismos causantes de la lesin. Desarrollo de la prctica. Sesin I 1. El profesor de laboratorio conjuntamente con los alumnos revisarn un caso clnico de infeccin bacteriana de tejidos blandos superficiales o profundos e identificar: a) Datos relevantes del caso. b) Posibles diagnsticos clnicos. c) Productos biolgicos a utilizar para el diagnstico de laboratorio. d) Exmenes de laboratorio tiles para confirmar el diagnstico clnico. 2. Realizar un cultivo del material obtenido. Material 1. Hisopo estril. 2. Placas de agar sangre, sal manitol y EMB. 3. Tubo de agua destilada o solucin salina estril (SSI) 4. Asa bacteriolgica. 5. Marcador. 6. Mechero. 7. Equipo para tincin de Gram. 8. Portaobjetos. 9. Aceite de inmersin. 10. Microscopio.
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Mtodo 1. Humedecer el hisopo estril con agua o SSI estril 2. Con el hisopo humedecido se introducir a un tubo que contenga una muestra de material bacteriolgico. 3. El hisopo se descargar en las cajas que contienen los tres medios en la zona indicada por el profesor de laboratorio 4. Con el empleo del asa bacteriolgica previamente esterilizada y fra, se harn las estras tendientes para lograr el aislamiento bacteriano. 5. Incubar a 3537 C durante 24 a 48 horas. Sesin II Material 1. Cajas de petri sembradas por los alumnos. 2. Medios de cultivo; aislamiento e identificacin bioqumicas demostrativas. 3. Equipo para tincin de Gram. 4. Portaobjetos Mtodo Los alumnos: 1. Observarn macroscopicamente los cultivos (morfologa colonial). 2. Realizarn frote y tincin de Gram a partir de las colonias previamente identificadas y anotarn sus caractersticas tintoriales. 3. Interpretar las pruebas bioqumicas junto con los dems datos para llegar al diagnstico etiolgico. Preguntas orientadas para consolidar el conocimiento 1. Mencione las bacterias que se asocian a cuadros de piodermia. 2. Indicar los recursos de laboratorio que se Utilizan para el diagnstico de infecciones bacterianas de tejidos blandos superficiales y profundos. 3. Qu importancia tiene hacer el diagnstico etiolgico en las infecciones de tejidos blandos superficiales y profundos?
Preguntas orientadas para evaluar el conocimiento adquirido 1. Qu estudios se realizaron para llegar al diagnstico en el caso clnico revisado? 2. Qu agente etiolgico fue responsable de la patologa en el caso clnico revisado? 3. Qu bacterias se identificaron en el cultivo de piel que realizaron. Resumen de la prctica: El profesor con los alumnos correlacionar el caso clnico con el diagnstico de laboratorio y elaborarn un esquema grfico.
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PRCTICA No. 6 INFECCIONES DEL TRACTO GASTROINTESTINAL

Objetivos generales Establecer un marco de referencia para el estudio de infecciones bacterianas del tracto gastrointestinal. Identificar los principales agentes causantes de infecciones bacterianas del tracto gastrointestinal. Revisar los recursos para el diagnstico de las infecciones bacterianas del tracto gastrointestinal. Antecedentes La microbiota normal del tracto gastrointestinal, esta constituida por una gran diversidad de especies bacterianas, entre las que se encuentran bacterias de la familia Enterobacteriaceae. Sin embargo, algunos gneros de esta familia son agentes etiolgicos de padecimientos como son; gastroenteritis y disentera bacilar. Las bacterias patgenas del tracto gastrointestinal, las podemos dividen en: Bacterias enteroinvasivas: E. coli enteroptogena (ECEP), E. coli enteroagregativa (ECEA), E. coli enteroinvasiva (ECEI), Salmonella enteritidis (con numerosos serovares), Shigella sp., Yersinia enterocolitica y Campylobacter jejuni. Bacterias enterotoxignicas: E coli enterotoxigenica (ECET), E. coli enterohemorrgica (ECEH), Vibrio cholerae, V. mimicus, V. vulnificus, V. parahemolyticus y Clostridium difficile. Todos estos microorganismos ocasionan afecciones entricas a travs de la elaboracin de toxinas, cuya liberacin ocurre despus de la colonizacin del intestino. El diagnstico etiolgico, se realiza mediante el cultivo de los microorganismos presentes en la materia fecal, procedimiento denominado coprocultivo, a travs del cual se logra, inicialmente el aislamiento y para posteriormente realizar la identificacin bioqumica y serolgica de las bacterias presentes (ver diagrama) Para realizar con xito este mtodo se recomienda: 1. Que el paciente no se encuentre en tratamiento antimicrobiano, antes de recolectar la muestra. 2. El recipiente para la muestra debe ser un frasco con tapn de rosca, absolutamente limpio, estril y exento de desinfectantes, detergentes o jabones. 4.
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En pacientes peditricos, si la muestra no puede obtenerse naturalmente, debe introducirse un hisopo hasta rebasar el esfnter anal y rotarlo suavemente. Cuando sea posible recurrir a la proctoscopa o la sigmoidoscopa, para obtener la muestra procedente de la regin afectada. Es conveniente analizar y sembrar la muestra en cuanto sea recolectada, ya que la flora intestinal puede continuar la fermentacin de los carbohidratos, disminuyendo el pH y con ello, afectando la viabilidad de algunos patgenos delicados. Del mismo modo, las temperaturas de refrigeracin suelen resultar perjudiciales para algunas cepas de Shigella sp. Cuando la muestra no pueda analizarse inmediatamente despus de haberse obtenido, es oportuno el empleo de medios de transporte, tales como el Cary Blair, que carece de nutrimentos y cuyo contenido en sales y tioglicolato preserva la viabilidad de los microorganismos patgenos, sin que ocurra un crecimiento considerable de ellos ni de los miembros de la flora intestinal. Si la evacuacin es slida, antes de la siembra debe colocarse en solucin salina isotnica buscando que quede en una proporcin de 1:8 a 1:10 aproximadamente. Cuando la muestra presenta moco y/o sangre, estos materiales son los que se siembran.
Los medios mas empleados en el coprocultivo para el aislamiento e identificacin de bacterias, se clasifican como selectivos y diferenciales, puesto que contienen inhibidores para bacterias Gram positivas y permiten diferenciar entre las colonias lactosa positivas y lactosa negativas, debido a que su formulacin incluye lactosa y un indicador que detecta los cambios de pH. Considerar que el pH de los medios mencionados anteriormente es neutro, por lo tanto, su coloracin inicial ser la de sus respectivos indicadores. Una vez sembrados, las observaciones deben realizarse 24 horas despus ya que el indicador del medio habr virado de acuerdo a la acidez o alcalinidad formada. Las pruebas bioqumicas son otro recurso para poder identificar a las enterobacterias.
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Desarrollo de la prctica Sesin I 1. El profesor de laboratorio conjuntamente con los alumnos revisarn un caso clnico de gastroenteritis bacteriana e identificarn: a) Datos relevantes del caso. b) Posibles diagnsticos clnicos. c) Productos biolgicos a utilizar para el diagnstico de laboratorio. d) Exmenes de laboratorio tiles para confirmar el diagnstico clnico. 2. Realizarn un coprocultivo. Material 1. Placas Eosina Azul de Metileno (EMB), Salmonella-Shigella (SS). 2. Tubos de citrato de Simmons, Agar hierro triple azcar (TSI), Agar hierro lisina (LIA), Agar Movilidad Indol Ornitina (MIO) 3. Asas bacteriolgicas 4. Problema 1 Mtodo 1. Obtener una muestra de materia fecal en un frasco estril y de aqu tomar una pequea porcin con un hisopo estril, de preferencia de los sitios con moco y sangre. 2. Con el hisopo, inocular las siguientes medios: EMB y SS, seguir el procedimiento por estras en placa para el aislamiento de colonias 3. Incubar a 37 C durante 24 horas 4. Sembrar en los tubos de citrato, TSI, LIA y MIO, la bacteria problema, como lo indique el profesor, incubar a 37 C durante 24 horas. 5. Identificar al o los microorganismos con las pruebas bioqumicas. Nota: En la prctica mdica, el coprocultivo se realiza como se indica en el diagrama 1, por lo que el resultado se obtiene de tres a cinco das. Sesin II Material 1. Cultivos demostrativos y de la prctica anterior. 2. Pruebas bioqumicas demostrativas y de la prctica anterior. 3. Reactivo de Kovac
Metodologa Los alumnos: 1. Observarn macroscpicamente los cultivos (morfologa colonial) y diferenciarn colonias lactosa positivas de las negativas. 2. Realizarn tinciones de Gram a partir de colonias previamente identificadas y anotarn sus caractersticas tintoriales. 3. Interpretarn las pruebas bioqumicas junto con los dems datos para llegar al diagnstico etiolgico. Interpretacin de bioqumicas Agar citrato de Simmons: Prueba empleada para diferenciar aquellas bacterias que usan el citrato como nica fuente de carbono y energa. Tiene como indicador, al colorante azul de bromotimol, que se alcaliniza al emplear las sales de amonio, que hace que el medio vire a un color azul, cuando es positivo. TSI (Agar triple azcar-hierro).Prueba que permite observar la fermentacin de glucosa, lactosa y sacarosa as como la produccin de gas y cido sulfhdrico. La fermentacin acidifica el medio, haciendo que el indicador (rojo de fenol) vire a amarillo. En tanto que el tiosulfato de sodio se reduce a sulfuro de hidrgeno que reacciona con sales de hierro, proporcionando sulfuro de hierro de color negro. LIA (Agar hierro lisina). Prueba basada en la descarboxilacin y desaminacin de lisina, as como en la produccin de cido sulfhdrico. Descarboxilacin de la lisina positiva; Pico violeta/fondo violeta. Prueba negativa: Pico violeta/ fondo amarillo. Desaminacin de la lisina; Pico rojizo/fondo amarillo, se presenta en Proteus, Providencia y Morganella sp Produccin de cido sulfhdrico: Ennegrecimiento del medio (especialmente en el lmite entre el pico y el fondo.
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MIO (Agar hierro ornitina). Prueba que permite detectar la movilidad del microorganismo, produccin de indol y descarboxilacin de ornitina. La fermentacin de la dextrosa hace que el medio vire a un color amarillo. La descarboxilacin de la ornitina alcaliniza el medio dando un vire a color prpura. La produccin de indol a partir del triptfano se manifiesta al agregar el reactivo de Kovac o de Erlich. Preguntas orientadas para consolidar el conocimiento 1. Mencione cuatro bacterias que se asocian a cuadros de infecciones del tracto gastrointestinal. 2. Indicar los recursos de laboratorio que se utilizan para el diagnstico de infecciones del tracto gastrointestinal 3. Qu importancia tiene hacer el diagnstico etiolgico en una infeccin del tracto gastrointestinal? 4. Qu importancia tiene la prueba de fermentacin de la lactosa en la identificacin de las enterobacterias? Preguntas orientadas para evaluar el conocimiento adquirido 1. Cul fue el agente etiolgico en el caso clnico revisado? 2. Qu estudios se usaron para confirmar el diagnstico clnico del caso revisado? 3. Qu utilidad tienen las pruebas bioqumicas en la identificacin del agente etiolgico en el caso clnico revisado? Resumen de la prctica: El profesor junto con los alumnos correlacionar el caso clnico con el diagnstico de laboratorio y elaborarn un esquema grfico
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PRCTICA No. 7 INFECCIONES SISTMICAS
Objetivos generales Establecer un marco de referencia para el estudio de infecciones sistmicas de origen bacterianas. Identificar las bacterias causantes de infecciones sistmicas. Revisar los recursos para el diagnstico de infecciones sistmicas. Antecedentes. Una infeccin sistmica es definida como aquella que se encuentra en el torrente circulatorio. La presencia de bacterias en el sistema circulatorio sin cuadro clnico, es referida como bacteriemia y se clasifica en; a) transitoria (ocasionada por la manipulacin de tejido infectado o procedimientos quirrgicos. b) intermitente (asociada a infecciones cerradas) y c) continua (caracterstica de endocarditis infecciosa y otras infecciones intravasculares; fiebre tifoidea y brucelosis). La septicemia es definida como la presencia de la bacteria o sus productos en el sistema vascular y de una respuesta inflamatoria sistmica. Su origen puede ser trauma quirrgico, quemaduras, abscesos cutneos, aplicacin de sondas o catteres. As como enfermedades localizadas; gonorrea, neumona, tuberculosis, infecciones urinarias. Los agentes causales son mltiples entre los que se incluyen, bacterias Gram positivas y Gram negativas; Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus sp, Serratia marcescens, Citrobacter freundii, Staphylococcus aureus, Staphylococcus coagulasa negativos, Streptococcus hemolitico, Enterococcus faecalis Bacteroides fragilis, Clostridium perfringens, Peptostreptococcus sp., Leptospira interrogans, Neisseria gonrorrhoeae, Neisseria meningitidis, Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae, Brucella sp, Salmonella entericas serotipo Typhi. Segn el nmero de especies de microorganismos encontrados, estas pueden ser mono o polimicrobianas. De acuerdo al lugar de adquisicin; extra o intrahospitalarias y segn el foco, son primarias o secundarias.
El diagnstico es clnico (manifestaciones clnicas de sepsis, sepsis grave, shock septico y bacteremia) y de laboratorio: Este se realiza a travs del cultivo de sangre (hemocultivo). La que se obtiene por venopuncin e inoculacin en el cultivo. Estrictamente hablando, la sangre obtenida del paciente es cultivada en medios slidos selectivos, y a partir de las colonias aisladas se efectuarn las pruebas bioqumicas correspondientes y la determinacin serolgica.
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Desarrollo de la prctica Sesin I: 1. El profesor de laboratorio conjuntamente con los alumnos revisaran un caso clnico de infecciones sistmicas e identificarn: 2. Datos relevantes del caso. 3. Posibles diagnsticos clnicos. 4. Productos biolgicos empleados para el diagnstico de laboratorio. 5. Exmenes de laboratorio tiles para confirmar el diagnstico clnico. Material 1. Hemocultivos demostrativos. 2. Placas de agar sangre. 3. Asa bacteriolgica. Mtodo Los alumnos: 1. Observarn macroscpicamente los hemocultivos. 2. A partir del hemocultivo realizar un cultivo en agar sangre, con la tcnica de estras para lograr el aislamiento del microorganismo. 3. Incubarn las placas a 35-37C durante 24-48 horas. Sesin II Material 1. Placas de agar sangre inoculadas. 2. Equipo de Tincin de Gram 3. Preparaciones fijas 4. Portaobjetos 5. Cubreobjetos 6. Microscopio 7. Aceite de inmersin 8. Papel para la limpieza del microscopio Mtodo Los alumnos: 1. Observarn macroscpicamente los cultivos y diferenciarn la morfologa colonial. 2. Realizarn tinciones de Gram a partir de colonias previamente identificadas y anotarn sus caractersticas tintoriales.
Interpretacin de resultados. Preguntas orientadas para consolidar el conocimiento 1. Mencione tres bacterias que se asocian a enfermedades sistmicas. 2. Indique los recursos de laboratorio que se utilizan para el diagnstico de infecciones sistmicas. 3. Qu importancia tiene hacer el diagnstico etiolgico en las infecciones sistmicas? Preguntas orientadas para evaluar el conocimiento adquirido 1. Qu utilidad tiene el hemocultivo? 2. Qu bacteria se aisl en el cuadro clnico estudiado? 3. Qu aplicacin tienen los anlisis serolgicos en el diagnstico de infecciones sistmicas? Resumen de la prctica El profesor junto con los alumnos correlacionar el caso clnico con el diagnstico de laboratorio y elaborarn un esquema grfico.
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PRCTICA NM. 8 INFECCIONES DE VAS URINARIAS

Objetivos generales Establecer un marco de referencia para el estudio de infecciones bacterianas de vas urinarias. Identificar las bacterias causantes de infecciones de vas urinarias. Revisar los recursos para el diagnstico de infecciones de vas urinarias. Antecedentes Las infecciones urinarias son de las ms importantes en el ser humano, afectan ms a las mujeres, se adquieren con mayor frecuencia por va ascendente exgena que por endgena. Se asocian a la falta de higiene, malformaciones, uropata obstructiva, alteraciones neurognicas de vejiga, cateterismo uretral, diabetes mellitus, embarazo, hipertensin arterial, neoplasias, alteraciones de los mecanismos de defensa especficos e inespecficos. Uno de los riesgos ms serios de las infecciones urinarias radica en que, cualquiera de las zonas afectadas del tracto, constituye un importante foco a partir del cual los microorganismos responsables pueden diseminarse hasta el rin e inclusive migrar de ste hacia la sangre, comprometiendo en ambos casos, la vida del enfermo. En la mujer, la uretrocistitis es la entidad clnica ms frecuente y generalmente cursa en forma aguda. En el hombre, tambin se presenta prostatitis. Estas infecciones son de difcil curacin y causan frecuentes recadas. La pielonefritis representa en ambos sexos la entidad de mayor gravedad y se debe en un 10 % de los casos a ms de una especie bacteriana, sobre todo cuando se trata de pacientes sometidos a cateterismo permanente o quienes presentan lesiones obstructivas en el tracto urinario. Los principales agentes etiolgicos de infecciones del tracto urinario estn limitados a unos cuantos microorganismos de crecimiento rpido. Escherichia coli, Enterococcus faecalis, Klebsiella pneumoniae, Enterobacter sp, Proteus sp, Pseudomonas sp., estafilococos coagulasa negativa, S. saprophyticus, y ocasionalmente Candida albicans, as como otros microorganismos oportunistas, tanto en pacientes hospitalizados como externos. Las muestras de orina son remitidas para urocultivo a partir de pacientes sintomticos con infecciones del tracto urinario y de asintomticos con alto riesgo de infeccin. La recoleccin de la muestra se realiza mediante varios mtodos, entre los que destacan el de la media miccin, el cateterismo, la puncin suprapbica, la habilitacin de los catteres permanentes y el empleo de colectores peditricos. Si la muestra no es colectada apropiadamente, puede contaminarse con microorganismos de la microbiota normal del perin, la prstata, la uretra o la vagina. Coleccin de la muestra 1. Chorro medio de orina emitido espontneamente: mtodo que se realiza regularmente, debido a que no representa mayores problemas para el paciente. Se recomienda que el paciente realice la limpieza adecuada de las zonas cercanas a la uretra. Una vez efectuada la limpieza, se descarta en el inodoro la primera parte de la miccin y, sin que esta se suspenda, se recogen los 20 a 30 ml siguientes en un recipiente de boca amplia, con tapn de rosca, estril, sin trazas de detergente o desinfectantes. 2. Cateterismo vesical: tcnica que aumenta el riesgo de infecciones del tracto urinario ya que, con frecuencia acta como vehculo para que los microorganismos, presentes en la sonda o en la porcin externa de la uretra, alcancen vejiga, ureteros y rin, agravando la condicin de los enfermos, por lo tanto, este procedimiento no es recomendado de rutina. 3. Puncin suprapbica: orina colectada de la vejiga, este mtodo es el preferido para pacientes en estado de coma o cuando los resultados obtenidos con otras tcnicas sean confusos, ya que la muestra se obtiene directamente de la vejiga y, bajo estas condiciones, no se contamina con microorganismos provenientes de otros sitios (siempre que la asepsia previa se haya realizado cuidadosamente).
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4. Bolsas colectoras peditricas: son adecuadas en los nios en quienes, debido a su corta edad, no se puede emplear el mtodo de la media miccin; dichos colectores se fijan a los genitales sin resultar incmodos, dado que el material con el que se confeccionan es blando y plegable. 5. Las puntas de sondas de Foley no son aceptables para cultivos. Momento de la coleccin de la muestra 1. Obtener la primera orina de la maana. 2. La ingesta excesiva de lquidos, puede diluir la orina y disminuir la cuenta de colonias a menos de cien mil UFC/ml. 3. Colectar muestras durante tres das consecutivos en pacientes asintomticos. Transporte de muestras 1. Transportar la muestra al laboratorio tan pronto como sea posible despus de la coleccin. 2. Cultivar las muestras dentro de las dos horas posteriores a la coleccin, o refrigerarlas y sembrarlas en un lapso no mayor de 8 horas. 3. Se requiere tomar una nueva muestra de orina cuando no hay evidencia de refrigeracin, el mtodo de coleccin no han sido el adecuado. 4. Si se trata de una muestra colectada, transportada y manejada de manera inadecuada y no puede ser reemplazada, se documenta en el reporte final que la calidad de la muestra no es la adecuada y se debern tomar con reserva los resultados. 5. La refrigeracin no es necesaria si la muestra de orina es colectada en tubos de transporte con preservativos. Colocar cuando menos 3 ml de orina en el tubo para evitar un efecto inhibitorio o diluyente en los microorganismos. Anlisis de las muestras. Los mtodos para el anlisis de las muestras son cuantitativos, debido a la elevada frecuencia con la que estas se contaminan durante su obtencin o cualitativos en los casos de recoleccin suprapbica. Deteccin de Bacteriuria 1. Tincin de Gram El mtodo de tincin de Gram puede detectar la presencia tanto de bacterias como leucocitos en muestras de orina
Tcnica 1. Colocar 10 microlitros de orina no centrifugada y bien mezclada sobre un portaobjetos de vidrio y dejar secar al aire sin extender 2. Fijar, teir e identificar al microorganismo. 3. Determinar el nmero de microorganismos por campo utilizando el objetivo de inmersin Interpretacin: 1. Reportar el nmero de microorganismos: la presencia de uno o ms microorganismos por 5 campo se correlaciona con una cuenta 10 UFC/ml. 2. La presencia de muchas clulas epiteliales escamosas y diferentes morfotipos microbianos indica contaminacin y requiere repetir la muestra. Mtodos de cultivo 1. Mtodo de estriado en superficie con asa calibrada. Las asas calibradas presentan caractersticas especficas que las habilitan para recoger, si solo se introduce a la muestra la parte circular, un volumen conocido de orina. La siembra se realiza descargando su contenido en toda la superficie del medio seleccionado. Cabe sealar que la eleccin de los medios es importante. No debe faltar una gelosa sangre u otro medio en el que pueda desarrollar el agente etiolgico, aunque este sea exigente en cuanto a sus requerimientos nutricionales, y algunos otros medios con caractersticas diferenciales y/o selectivas, que permitan el desarrollo de los patgenos, inhibiendo a los contaminantes. Las placas sembradas se incuban a 35 C en aerobiosis, durante 24 a 48 horas. Transcurrido el tiempo, se analizan las caractersticas macroscpicas obtenidas, poniendo especial cuidado en detectar si estn presentes uno o ms microorganismos diferentes y en realizar el recuento correspondiente. Como las asas comerciales ms utilizadas son las que recogen un volumen de 0.001 ml de orina, el nmero de colonias de cada caja deber multiplicarse por 1000 para conocer la cantidad de microorganismos o de UFC que la muestra contiene por mililitro. Adicionalmente, deben someterse a pruebas de identificacin, tomando en cuenta que las infecciones urinarias son causadas, en el 85 a 90 % de los casos, por una sola especie bacteriana.
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I. BACTERIOLOGA SEGUNDO AO, 2013-2014 Para la interpretacin de resultados es importante considerar de manera conjunta, la identidad de los microorganismos encontrados, los criterios de Kass, la historia clnica y algunos otros factores de riesgo que apunten hacia la firme posibilidad de una patologa urinaria, debido a que algunas bacterias se pueden presentar como contaminantes de la muestra o se presentan casos en los que no llegan a alcanzar las cifras reconocidas como significativas (segn Kass) Los criterios de Kass establecen lo siguiente: No de UFC/ ml 100 000 10 000 y 100,000 1000 INTERPRETACIN Infeccin activa Dudosa* Contaminacin de la muestra *Debe analizarse otra muestra del paciente. Considerar Los falsos negativos pueden obtenerse cuando a) El paciente se encuentra bajo tratamiento antimicrobiano poco antes o durante la recoleccin de la muestra: b) El microorganismo causante del cuadro es incapaz de desarrollarse en los medios utilizados o bajo las condiciones de incubacin que se seleccionaron c) La muestra analizada no fue la primera de la maana d) El depsito en el que se recoge el espcimen contiene restos de detergente o desinfectante e) El enfermo se encontraba recibiendo lquidos intravenosos f) La calidad y/o la preparacin de los medios no es la adecuada g) El asa calibrada recoge volmenes menores a los esperados h) La muestra no se homogeniz antes de introducir el asa i) La alcuota descargada en la superficie del medio no se distribuy adecuadamente. Los falsos positivos pueden ocurrir cuando a) El paciente no efecta la limpieza previa en forma adecuada b) El espcimen se siembra despus de haber permanecido dos horas o ms a temperatura ambiente c) El depsito en el que se recoge la muestra se encuentra contaminado d) El asa calibrada recoge mayores cantidades que las esperadas e) La paciente suspendi la miccin para recolectar la parte media f) El catter se encontraba contaminado
Procedimientos de medio mnimo Mtodo de las diluciones Este se considera ms confiable que el del asa calibrada, Se realiza preparando diluciones 1:10, 1:100 y 1:1000 a partir de la muestra, emplendose SSI estril como diluyente, y, posteriormente, se coloca 1 ml de la ltima dilucin en una o mas cajas Petri estriles, a las que despus se le vierten 20 ml de los medios seleccionados cuando estos se han esterilizado y se encuentran a una temperatura de 45 o 50 C. Las cajas se mezclan, de manera que la alcuota se distribuya uniformemente; finalmente, se permite que los medios solidifiquen y la placa se incuba a 35 C en aerobiosis, durante 24 a 48 h. El procedimiento y la interpretacin de resultados son similares al descrito para el mtodo del asa calibrada. Considerando en este caso, la posibilidad de falsos negativos cuando los medios se vierten a temperaturas mayores a las sealadas, y la de falsos positivos cuando las diluciones se preparan con una misma pipeta o sin condiciones aspticas. Consideraciones especiales 1. No cultivar lo siguiente: a) Puntas de catter de Foley b) Orina en medio lquido c) Sedimento de orina 5 2. El criterio de 10 UFC/ml puede ser aplicado a la mayora de las muestras remitidas para cultivo 5 3. Las cuentas de colonias o igual a 10 UFC en muestras emitidas espontneamente con disuria y sntomas de infeccin del tracto urinario puede ser importante y debe ser valorado por el clnico. 4. Realizar cultivos en anaerobiosis solo en aspirados por puncin suprapbica cuando sean requeridos Desarrollo de la prctica: Sesin I 1. El profesor del laboratorio conjuntamente con los alumnos revisarn un caso clnico de infecciones bacterianas de vas urinarias e identificarn: a) Datos relevantes del caso. b) Posibles diagnsticos clnicos. c) Productos biolgicos a utilizar. d) Exmenes de laboratorio a tiles para confirmar el diagnstico clnico.
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2. Realizarn un urocultivo. Material 1. Placa de Eosina Azul de Metileno (EMB) y gelosa sangre. 2. Asa calibrada de 0.001 ml 3. Orina No 1 Mtodo 1 Colectar la primera orina de la maana Mediante la tcnica de chorro medio, el paciente se debe lavar la regin periuretral y el perin con agua jabonosa y enjuagar muy bien con solucin salina estril o agua destilada. Durante la recoleccin se desecha la primera porcin de la orina para eliminar por arrastre mecnico las bacterias residentes en la uretra distal, recolectndose nicamente la porcin media de la orina en un recipiente estril, desechando la porcin final. 2. Homogenizar la orina agitando el frasco por rotacin con el asa calibrada estril, tomar una asada y descargar en lnea recta en el centro de la placa de agar EMB y estriar masivamente (en forma cruzada a la primera descarga). 3. Repetir el procedimiento en las placas de gelosa sangre. 4. Incubar las cajas a 37 C durante 24 a 48 horas. Sesin II Material 1. Cultivos demostrativos y de la prctica anterior 2. Equipo para tincin de Gram Mtodo Los alumnos: 1. Observarn macroscpicamente los cultivos (morfologa colonial) y diferenciarn las colonias. 2. Contarn el nmero de colonias que se desarrollaron en las cajas 3. De acuerdo con el criterio de Kass y Stanford, si el nmero de bacterias es 100 000 UFC/ml, se proceder a identificar l o los microorganismos por los mtodos usuales. 4. Realizarn tincion de Gram a partir de colonias previamente identificadas y anotarn sus caractersticas. 5. Interpretarn las pruebas bioqumicas junto con los dems datos para llegar al diagnstico etiolgico.
Preguntas orientadas para consolidar el conocimiento 1. Mencione los criterios de Kass y Stanford para el diagnstico de infecciones bacterianas de vas urinarias. 2. En qu condiciones se pueden obtener falsos positivos o negativos? 3. Qu indica el encontrar ms de una especie bacteriana en un urocultivo? 4. Por qu se emplea un medio de cultivo para Gram negativos? Preguntas orientadas para evaluar el conocimiento adquirido 1. Cul fue el agente etiolgico del caso clnico revisado? 2. Cmo se confirm el diagnstico clnico del caso clnico revisado? 3. Por qu se emplea el asa calibrada para la siembra de la orina? 4. De acuerdo a los criterios de Kass y Stanford, 5 cmo se interpreta el encontrar >10 UFC/mL? Resumen de la prctica El profesor junto con los alumnos correlacionar el caso clnico con el diagnstico de laboratorio y elaborarn un esquema grfico
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PRCTICA NO. 9 INFECCIONES DE TRANSMISIN SEXUAL
Objetivos generales: Establecer un marco de referencia para el estudio de las infecciones de transmisin sexual. Identificar los principales agentes de infecciones de transmisin sexual. Revisar los recursos para el diagnstico de las infecciones de transmisin sexual de etiologa bacterianas. Antecedentes. Las enfermedades de transmisin sexual (ETS) son un conjunto de afecciones clnicas infectocontagiosas, transmitidas de persona a persona durante el acto sexual. Sin embargo, su transmisin tambin puede realizarse a travs del empleo de jeringas contaminadas, por transfusin sangunea o durante el embarazo o parto. Las ETS son causadas principalmente por bacterias y virus, aunque tambin pueden ser ocasionadas por hongos y protozoarios. En la etiologa bacteriana, se cuenta con; Neisseria gonorrhoeae, Mycoplasma homimis, Ureaplasma urealyticum, Chlamydia trachomatis, Treponema pallidum y Haemophilus ducreyi, productoras de uretritis y/o lesiones ulcerativas. Otro cuadro clnico, que no necesariamente es ocasionada por transmisin sexual es la vaginosis bacteriana, la cual se presenta como una alteracin en la microbiota vaginal, con sobrecrecimiento de Gardnerella vaginalis, junto con bacterias anaerobias y disminucin de lactobacilos. Aproximadamente el 50% de las pacientes cursan asintomticas y se diagnostican durante una exploracin o al realizar citologa de rutina. El sntoma fundamental es leucorrea blanco-griscea, adherente a las paredes vaginales, maloliente (olor a pescado), al no existir proceso inflamatorio las pacientes no refieren prurito, dispareunia ni disuria. El diagnstico se realiza si se cumplen 3 de los 4 criterios diagnsticos de Amsel, que son los siguientes:1) Secrecin caracterstica. 2) pH >4.5. 3) Olor a aminas de la secrecin despus de agregarle KOH. 4) Clulas clave (clulas del epitelio vaginal recubiertas de bacterias, que le dan un aspecto granular). Desarrollo de la prctica Sesin I 1. El profesor de laboratorio conjuntamente con los alumnos revisarn un caso clnico de ETS e identificar:
a) Datos relevantes del caso. b) Posibles diagnstico clnicos. c) Productos biolgicos a utilizar para el diagnstico de laboratorio. d) Exmenes de laboratorio tiles para confirmar el diagnstico clnico. 2. Realizar tincin de Gram y observacin de material demostrativo. Material 1. Placas de medio de cultivo sembradas (demostrativo) 2. Laminillas con muestra clnica fijadas. 3. Equipo para tincin de Gram. Mtodologa 1. Los alumnos observarn macroscpicamente los cultivos (morfologa colonial). 2. Realizarn tinciones de Gram con las laminillas facilitadas y anotarn las caractersticas tintoriales y elementos observados. Preguntas orientadas para consolidar el conocimiento 1. Mencione las bacterias que se asocian a cuadros de infecciones de transmisin sexual. 2. Indicar los recursos de laboratorio que se utilizan para el diagnstico de infecciones de transmisin sexual. 3. Qu importancia tiene hacer el diagnstico etiolgico de una infeccin de transmisin sexual? 4. Qu importancia tienen los criterios de Amsel en el caso clnico discutido? Preguntas orientadas conocimiento adquirido. para evaluar el
1. Cul fue el agente etiolgico en el caso clnico revisado? 2. Qu estudios se usaron para confirmar el diagnstico clnico del caso revisado? Resumen de la prctica: El profesor junto con los alumnos correlacionarn el caso clnico con el diagnstico de laboratorio y elaborar un esquema grfico.
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PRCTICA NO. 10 SISTEMA NERVIOSO CENTRAL

Objetivos generales Establecer un marco de referencia para el estudio de infecciones bacterianas del sistema nervioso central (SNC). Identificar las bacterias causantes de infecciones en el SNC Revisar los recursos para el diagnstico de infecciones del SNC Antecedentes: El sistema nervioso central (SNC), puede ser infectado por diferentes microorganismos, entre los que se encuentran bacterias consideradas potencialmente patgenas como es el caso de Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae, Neisseria meningitidis y Mycobacterium tuberculosis y aquellas pertenecientes a la microbiota transitoria o permanente. La participacin de estas va a depender de la edad, estado inmunolgico e integridad anatmica del SNC del paciente. Entre los cuadros clnicos ocasionados; se encuentran; meningitis aguda, crnica (tuberculosis, brucelosis), absceso cerebral, infarto cerebral embolico por endocarditis bacteriana y empiema subdural. La meningitis puede ser aguda o crnica, dependiendo del agente infeccioso. Los principales agentes bacterianos, en nios menores de cuatro aos, son transmitidos por portadores sanos, que tienen al microorganismo en las vas respiratorias altas, que son: Haemophilus influenzae, Neisseria meningitidis y Streptococcus pneumoniae y en la crnica: Mycobacterium tuberculosis y Brucella sp. El examen del lquido cefalorraqudeo (LCR) es importante y fundamental en la valoracin del paciente con una infeccin del SNC. Por lo quel se requiere realizar una puncin raqudea tcnicamente correcta y de un estudio meticuloso del producto. Su anlisis incluye; la determinacin de la presin de apertura, aspecto, recuento celular y diferencial, glucosa y protenas. As como la demostracin directa de patgenos a travs de la microscopa y el empleo de tincin de Gram y/o Ziehl Neelsen.
La deteccin de antgenos bacterianos se realiza con el objeto de identificar al microorganismo sin tener que esperar a su aislamiento mediante el cultivo, el cual se debe realizar con el empleo de medios de rutina para el aislamiento de bacterias y confirmar el diagnstico etiolgico. El diagnstico rpido y la aplicacin temprana del tratamiento con el antibitico especfico, son pasos esenciales para prevenir las complicaciones del padecimiento, como son las secuelas neurolgicas que pueden presentarse sobre todo en un nmero apreciable de lactantes y nios. Sin embargo, pese a la existencia de tratamiento efectivo, el ndice de letalidad por meningitis bacteriana puede llegar al 15% aproximadamente. Desarrollo de la prctica Sesin I 1. El profesor, de laboratorio conjuntamente con los alumnos, revisarn un caso clnico de infeccin bacteriana del SNC para identificar: a) Datos relevantes del caso. b) Posibles diagnsticos clnicos. c) Productos biolgicos a utilizar. d) Exmenes de laboratorio tiles para confirmar el diagnstico clnico. 2. Realizarn un cultivo de lquido cefalorraqudeo. Material 1. Muestra de LCR 2. Placas de Agar chocolate , agar sangre. 3. Equipo para tincin de Gram. 4. Asa bacteriolgica. Mtodo El alumno: 1. Describir las caractersticas macroscpicas del LCR proporcionado. 2. Sembrar la muestra en los medios de cultivo. 3. Realizar frote y tincin de Gram a partir de la muestra. 4. Observar al microscopio el frote realizado.
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Sesin II Material 1. Placas de medios de cultivo demostrativas y las sembradas por los alumnos. 2. Tubos con pruebas bioqumicas demostrativas. 3. Equipo para tincin de Gram. 4. Asas bacteriolgicas. Mtodo El alumno: 1. Describir la morfologa colonial. 2. Comparar su aislado con las placas de demostracin. 3. Leer las pruebas bioqumicas demostrativas. 4. Realizar frote y tincin de Gram a partir de los aislados. 5. Identificar la especie bacteriana aislada. Preguntas orientadas para consolidar el conocimiento 1. Cules son los efectos que pueden producir las bacterias que infectan al SNC? 2. Qu estudios de laboratorio permiten establecer el diagnstico etiolgico de una infeccin bacteriana? 3. Mencione una prueba serolgica que permita realizar un diagnstico rpido de una infeccin del SNC? Preguntas orientadas para evaluar el conocimiento adquirido. 1. Que utilidad tienen las pruebas rpidas en el diagnstico de enfermedades de etiologa bacteriana? 2. Qu estudios se utilizan para llegar al diagnstico de meningoencefalitis? 3. Que muestras se deben tomar para realizar los estudios de meningoencefalitis? 4. Qu mtodos directos se pueden emplear para el diagnstico de origen bacteriano en el laboratorio? Resumen de la prctica El profesor junto con los alumnos correlacionar el caso clnico con el diagnstico de laboratorio y elaborarn un esquema grfico
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ANEXO DETERMINACIN DE SENSIBILIDAD A ANTIMICROBIANOS

Objetivos Identificar el efecto antibacteriano de los frmacos en un cultivo de bacterias. Demostrar la utilidad de la prueba de sensibilidad antimicrobiana por difusin en disco. Identificar la utilidad de las pruebas de sensibilidad a los antimicrobianos en la clnica. Antecedentes La quimioterapia antimicrobiana ha desempeado un papel vital en el tratamiento de las enfermedades infecciosas durante el siglo XX. Desde el descubrimiento de la penicilina, cientos de agentes antimicrobianos han sido obtenidos a partir de microorganismos o por sntesis. El uso de estas sustancias ha permitido la seleccin de variantes resistentes a los mismos. Existen dos mecanismos principales por los cuales los microorganismos cambian su sensibilidad hacia los antimicrobianos y otras drogas utilizadas en la prctica mdica: la mutacin e intercambio gentico (conjugacin, transformacin o transduccin). La resistencia a los antimicrobianos se manifiesta como decremento de la permeabilidad al medicamento, modificacin de su receptor, inactivacin enzimtica de la droga, alteracin del blanco del antimicrobiano, etctera. Las pruebas in vitro de sensibilidad antimicrobiana estn indicadas para determinar los frmacos de eleccin en infecciones producidas por microorganismos cuya sensibilidad es impredecible o en infecciones que no responden al tratamiento inicialmente elegido, infecciones intrahospitalarias, infecciones crnicas o cuadros clnicos de repeticin; y para seleccionar el antimicrobiano ms adecuado en pacientes con problemas especficos como edad, hipersensibilidad, tc. Algunos microorganismos que con frecuencia desarrollan resistencia a los antimicrobianos son: Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Haemophilus influenzae, Neisseria gonorrhoeae, Streptococcus pneumoniae y Proteus sp. No est indicado solicitar pruebas de sensibilidad a antimicrobianos cuando no se ha reportado resistencia al agente de eleccin o est se ha reportado slo raramente. Algunas de las pruebas de sensibilidad antimicrobiana realizadas en los laboratorios clnicos son las siguientes: 1. Difusin en disco: procedimiento simple que emplea agar Meller-Hinton, medio que permite el crecimiento de la mayora de los microorganismos para los cuales estas pruebas son relevantes. Est tcnica es cualitativa, reproducible, econmica, no requiere de equipo especial y est estandarizada para probar bacterias de crecimiento rpido. Determina sensibilidad, sensibilidad intermedia y resistencia empleando un disco de papel filtro impregnado con un antimicrobiano seleccionado que se difunde a travs del medio. Para efectuarla se inocula una placa de agar con el microorganismo problema, a la que se le depositan discos secos de papel filtro que contienen los agentes antimicrobianos. Los discos adsorben agua del medio, la droga se disuelve y difunde hacia el medio adyacente siguiendo las leyes fsicas que gobiernan la difusin de las molculas a travs de agar. El resultado es un gradiente de concentracin de la droga alrededor del disco. Las clulas bacterianas que no son inhibidas por el agente antibacteriano, sern capaces de crecer en toda la zona alrededor del disco, mientras que en las bacterias sensibles a la droga, no se observar crecimiento en el rea donde las concentraciones inhibitorias de la doga estn presentes. La zona de inhibicin es afectada por la velocidad de difusin de las diferentes drogas a travs del agar, por lo que las zonas observadas con una droga no pueden ser comparadas con las de otra droga. Sin embargo, el dimetro de la zona de inhibicin es inversamente proporcional al MIC. Algunas de las limitaciones de este procedimiento son: a) El mtodo est estandarizado slo para microorganismos aerobios de crecimiento rpido incluyendo Enterococcus sp., Staphylococcus sp. Pseudomonas aeruginosa, Acinetobacter sp., algunos Streptococcus y Listeria monocytogenes y con algunas modificaciones ha sido utilizado para microorganismos exigentes como Haemophilus sp., Neisseria sp. y Streptococcus pneumoniae. b) Organismos de crecimiento lento, anaerobios obligados y aquellos que requieren CO2 para su crecimiento no dan resultados confiables al ser probados por este mtodo por lo que se recomiendan mtodos de dilucin.
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2. Concentracin mnima inhibitoria (MIC) en caldo: prueba cuantitativa til para microorganismos anaerobios, determina la actividad bactericida o evidencia el sinergismo o antagonismo entre agentes antimicrobianos. 3. Produccin de beta-lactamasa: basada en la deteccin de los productos finales de la hidrlisis de beta-lactmicos por colorimetra. Los procedimientos comnmente utilizados incluyen el mtodo cromognico de cefalosporina, el acidimtrico y el iodomtrico. 4. Deteccin de resistencia a oxacilina (metacilina): se emplea una oxacilina ms estable que permite detectar tanto las cepas de Staphylococcus oxacilina resistentes y la mayora de las cepas metacilina resistentes. Esta prueba es importante considerando que algunas cepas de Staphylococcus pueden dar falsos negativos para metacilina en pruebas de difusin debido, a la rpida inactivacin de este medicamento en refrigeracin. 5. Dilucin en caldo para bacterias anaerobias: se emplean medios suplementados que favorezcan el crecimiento de anaerobios. Se recomienda utilizar microdilucin y macrodilucin en caldo. En particular la microdilucin es til para Clostridium.
5. Discos impregnados con antibiticos. 6. Regla graduada en milmetros y centmetros (para ajustar la turbidez del inculo). 7. Hisopos estriles. 8. Pinzas. 9. Marcador. IV. Mtodo (consultar diagrama de flujo) 1. A partir de un cultivo en placa, tomar con un asa bacteriolgica cuatro o cinco colonias bien aisladas del mismo tipo morfolgico e inocularlas en un tubo que contenga 5 ml de caldo Meller-Hinton. Incubar a 35 C hasta que aparezca una turbidez visible (2-5 h) que se ajusta, con caldo o solucin salina, por comparacin visual hasta obtener una turbidez de la mitad del estndar 1 de Mac Farland (tubo 0.5). Otra alternativa para preparar el inoculo, es resuspender un cultivo de toda la noche en solucin salina y ajustar su densidad con el tubo 0.5 de Mac Farland. La suspensin ajustada del inculo, no debe permanecer ms de 15 a 20 min. antes de proceder a sembrarla en la placa de gelosa Meller-Hinton. Para inocular la placa, utilizar un hisopo estril, el cual se moja en la suspensin bacteriana, quitando el exceso de lquido al presionar el hisopo contra las paredes del tubo, sembrar con el hisopo la caja de agar en tres direcciones, con lo cual se produce un crecimiento confluente de las bacterias. Dejar secar unos cinco minutos la placa antes de depositar los discos. Depositar los discos con unas pinzas estriles y apretarlos ligeramente contra el agar. Esperar 5 10 min, invertir la placa e incubarla a 35 C durante 16-18 h (el tiempo puede variar dependiendo de los microorganismos). Pasado el tiempo de incubacin, medir con una regla, vernier o una plantilla diseada para este propsito, los dimetros de las zonas de inhibicin completas. Comparar los resultados obtenidos con la tabla proporcionada. Reportar los resultados obtenidos.
2.
3.
En laboratorios clnicos especializados se realizan otras pruebas para determinar la sensibilidad a antimicrobianos como: 1. 2. 3. 4. 5. 7. Induccin de beta-lactamasa para bacilos Gram negativos. Cloranfenicol acetiltransferasa. MIC por dilucin en agar para bacterias anaerobias. MIC por microdilucin en caldo para micobacterias de crecimiento rpido y Nocardia. Dilucin en agar (mtodo de las proporciones, modificado para micobacterias de crecimiento lento). Radiomtricas (BACTEC) para micobacterias de crecimiento lento.
4.
5.
6. 7.
Material 1. Cajas con gelosa Meller-Hinton con 4 mm de grosor. 2. Tubo MacFarland de 0.5. 3. Tubos con solucin salina estril cada uno con 3 ml 4. Cultivos de 18 a 24 h de Escherichia coli en caldo nutritivo.
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DIAGRAMA DE FLUJO DE PRUEBAS DE SENSIBILIDAD A ANTIMICROBIANOS POR DIFUSIN EN DISCO
Primer da Colonias puras (primoaislamiento) a partir de urocultivo, hemocultivo, heridas, LCR, etctera
Ajustar inculo a turbidez del tubo 0.5 de Mac Farland
Sembrar con hisopo (estra cerrada) en: placa de Meller-Hinton
Colocar los discos con antibiticos segn su morfotipo al Gram
Incubar a 37 C x 24 horas
Segundo da
Medir dimetro del halo de inhibicin
Comparar con tablas: sensible, intermedio, resistente
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Manuales Departamentales

Programa acadmico de la asignatura de Microbiologa y Parasitologa

Departamento de Microbiologa y Parasitologa Facultad de Medicina

DATOS GENERALES DE LA ASIGNATURA

Acreditacin total de las asignaturas de 1 ao

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CALENDARIO ESCOLAR 2013-2014 PLAN 2010

Lunes 5 de agosto Viernes 11 de octubre

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OBJETIVOS DEL REA

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ACTIVIDADES DEL PROCESO ENSEANZA-APRENDIZAJE

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1. INTRODUCCIN A LA RELACIN HOSPEDERO-PARSITO

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3. BACTERIAS CAUSANTES DE INFECCIONES DEL TRACTO RESPIRATORIO

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PROGRAMA ACADMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGA Y PARASITOLOGA

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4. BACTERIAS CAUSANTES DE INFECCIONES DE TEJIDOS SUPERFICIALES Y PROFUNDOS

I. BACTERIOLOGA SEGUNDO AO, 2013-2014

5. BACTERIAS CAUSANTES DE INFECCIONES DEL TRACTO GASTROINTESTINAL

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6. BACTERIAS CAUSANTES DE INFECCIONES SISTMICAS

I. BACTERIOLOGA SEGUNDO AO, 2013-2014

6.3.5 6.3.6 6.3.7

6.3.8 6.3.9 6.4

Reservorio y vector Poblacin susceptible

PROGRAMA ACADMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGA Y PARASITOLOGA 6.5

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7. BACTERIAS CAUSANTES DE INFECCIONES DEL TRACTO URINARIO

I. BACTERIOLOGA SEGUNDO AO, 2013-2014

8. BACTERIAS CAUSANTES DE INFECCIONES DE TRANSMISIN SEXUAL

8.1.7 8.1.8 8.1.9

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9. BACTERIAS CAUSANTES DE INFECCIONES DEL SISTEMA NERVIOSO CENTRAL

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9.2.8 9.2.9 9.3

Estrategias de tratamiento Prevencin y control

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10. AGENTES BACTERIANOS PRODUCTORES DE NEUROTOXINAS

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11. RESPUESTA INMUNE HACIA LAS BACTERIAS

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INTRODUCCIN A LAS PRCTICAS DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGA Y PARASITOLOGA

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PRCTICA No. 1 BIOSEGURIDAD

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PRCTICA No. 2 MANEJO Y CUIDADO DEL MICROSCOPIO

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