UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD LABORATORIO CLNICO E HISTOPATOLOGICO

INFORME DE LABORATORIO TEMA:

GERMENES ESTAN PRESENTES EN SECRECION OTICO Y NASAL

CATEDRA: MICROBIOLOGIA I DOCENTE: DRA. PATRICIA MIO ALUMNA: GEOVANNA CAIZA SEMESTRE: TERCER SEMESTRE A AO LECTIVO: 2013 - 2014

1. OBJETIVOS Objetivo General: Conocer que bacterias se pueden encontrar en las secreciones nasales y oticos.

Objetivos Especficos: Sembrar correctamente las bacterias en el agar. Saber la importancia de la proteccin fisca al tomar las muestras. Teir correctamente las placas para que se puedan observar en el microscopio. Obtener todos los materiales necesarios para la elaboracin de esta prctica.

2. FUNDAMENTACIN TERICA: GERMENES SECRECION NASAL Los principales microorganismos causales son los virus respiratorios, especialmente rinovirus (35%), virus influenza A y B (30%), virus para influenza (12%), virus sincicial respiratorio (11%) y adenovirus (8%). Los principales mecanismos de contagio son la inhalacin de aerosoles o microgotas con grmenes e inoculacin en las mucosas nasal, ocular o cavidad oral de secreciones infectadas transportadas por las manos. Por su amplio contacto con el ambiente, el aparato respiratorio est expuesto a una infinidad de agentes infecciosos que cuando logran superar sus mecanismos defensivos provocan una amplia gama de afecciones. Como veremos, es frecuente que las vas areas y el compartimento alveolar se comprometa en forma secuencial o simultnea, pero en la mayora de los casos predomina el compromiso de uno de estos compartimentos, lo que determina las caractersticas clnicas, la evolucin y el pronstico de los enfermos. Las infecciones respiratorias agudas que comprometen las vas areas superiores (IVAS) son en general de escasa gravedad y tienden a ser autolimitadas, pero, por su gran frecuencia, son la principal causa de absentismo escolar y laboral y, aunque una gran mayora de los enfermos se autotrata, constituyen tambin la principal causa de consulta mdica. El 90% de estos episodios son de origen viral y el resto a otros agentes, como

Streptococcus

pneumoniae,

Haemophilus

influenzae,

Mycoplasma pneumoniae, Chlamydia pneumoniae y Streptococcus spp. Si bien

las infecciones de la va area superior producidas por bacterias tienden a tener como

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grupo algunas diferencias, en la prctica clnica resultan indistinguibles de las infecciones virales en el caso individual. El gran nmero de agentes causales posibles determina que cada microorganismo produzca slo una escasa proporcin de las IVAS. Este hecho, junto con la frecuente mutacin que presentan algunos virus, hace prcticamente imposible desarrollar vacunas que puedan prevenir eficazmente este tipo de enfermedades.

Colonizacin nasal bacteriana

El 73% (331/454) de los cultivos realizados fueron positivos. Se identificaron 18 especies bacterianas diferentes. La bacteria ms frecuentemente aislada fue Staphylococcus coagulasa negativo en 53%, seguido de S aureus en 22,7%.

En el 65% de los cultivos positivos se identific solo una especie bacteriana, en 33% de los cultivos se identific a 2 especies bacterianas y en slo el 2,8% de las muestras se identificaron 3 o ms especies bacterianas.
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GERMENES SECRECION OTICO Es un examen de laboratorio para verificar si hay sustancias causantes de infeccin en una muestra de lquido, pus, cera o sangre del odo. El examen se puede realizar si usted o su hijo tienen: Una infeccin del odo que no est respondiendo al tratamiento Una infeccin del odo externo ( otitis externa) Una infeccin del odo con un tmpano roto y secrecin de lquido Tambin se puede hacer como parte rutinaria de una miringotoma.

Significado de los resultados anormales Los resultados anormales pueden ser un signo de infeccin por bacterias, virus u hongos. Los resultados del examen pueden revelar cul microorganismo especfico est causando la infeccin y ayudar al mdico a decidir sobre el tratamiento apropiado. La enfermedad puede presentarse en distintos grupos etarios, ocurriendo la mayor incidencia en nios de tres aos. La OMA se caracteriza por fiebre y fuerte dolor. En los lactantes puede haber irritabilidad. Los grmenes ms frecuentemente hallados son: Streptococcus pneumoniae (agente etiolgico ms importante), Haemophilus influenzae, Staphylococcus aureus, Moraxella catarrhalis y Streptococcus pyogenes. Chlamydia trachomatis produce cuadros respiratorios agudos en nios menores de 6 meses, puede causar OMA en este grupo. PRUEBAS QUE SE REALIZAN PARA LAS GRAM POSITIVAS Las pruebas bioqumicas primarias son usadas para determinar el gnero de la mayora de las bacterias gram positivas. 1. Tincin de GRAM. 2. Prueba de catalasa. 3. Prueba de oxidasa. 4. Prueba de oxidacin/fermentacin conocida como OF. 5. Motilidad.

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Bacterias Gram. Positivas: Estreptococos: pueden ser responsables de infeccin en la sangre, faringitis, infeccin de las vlvulas del corazn, fiebre reumtica, escarlatina, neumona, etc. Corinebacterias: difteria, infeccin de orina, etc. Clostridios: ttanos, botulismo, gangrena gaseosa, infeccin de la sangre, etc. Bacillus: antrax. Estafilococos: pueden causar Neumona, infecciones supuradas (con pus) en la piel y abscesos en otros lugares, sndrome del shock txico, meningitis, artritis, osteomielitis, enteritis, etc. STAPHYLOCOCCUS Es un gnero de bacterias estafilococceas de la clase Cocci. Comprende microorganismos que estn presentes en la mucosa y en la piel de los humanos y de otros mamferos y aves, incluyendo a 35 especies y 17 subespecies, muchas de las cuales se encuentran en los humanos. Las especies que se asocian con ms frecuencia a las enfermedades en humanos son Staphylococcus aureus (el miembro ms virulento y conocido del gnero), Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus saprophyticus, Staphylococcus capitis y Staphylococcus haemolyticus Caractersticas generales

Morfolgicamente los Staphylococcus son cocos grampositivos. Los estafilococos crecen fcilmente sobre casi todos los medios bacteriolgicos, en cultivos su crecimiento es mejor en el medio sal manitol y agar sangre, esto puede llegar a dar problemas en el corazn o hgado, tales como la prdida de un hgado. Es un coco anaerobio facultativo, esto significa que puede crecer tanto en condiciones con oxgeno como carente de ste. Su mayor velocidad de crecimiento es a 5 - 25 C; pero tambin se puede ver en activa fisin binaria entre 30 y 27 C. Adems, producen catalasa, lo que los diferencia de los estreptococos. Tiene importancia mdica principalmente el S. aureus, y en humanos adems de ste, el S. saprophyticus y el S. epidermidis. STAPHYLOCOCCUS AUREUS Conocido como estafilococo ureo, o comnmente estafilococo dorado, es una bacteria anaerobia facultativa, grampositiva, productora de coagulasa, catalasa, inmvil y no

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esporulada que se encuentra ampliamente distribuida por todo el mundo, estimndose que una de cada tres personas se hallan colonizadas, aunque no infectadas, por ella. Puede producir una amplia gama de enfermedades, que van desde infecciones cutneas y de las mucosas relativamente benignas, tales como foliculitis, forunculosis o conjuntivitis, hasta enfermedades de riesgo vital, como celulitis, abscesos profundos, osteomielitis, meningitis, sepsis, endocarditis o neumona. Adems, tambin puede afectar al aparato gastrointestinal, ya sea por presencia fsica de Staphylococcus aureus o por la ingesta de la enterotoxina estafiloccica secretada por la bacteria. En la actualidad, este microorganismo se encuentra como el principal causante de las infecciones nosocomiales. Esta situacin se ve favorecida por el hecho de que esta especie habita tanto en las mucosas como en la piel de los seres humanos, lo que permite que a travs de las heridas quirrgicas pueda penetrar en el torrente sanguneo del paciente por medio del contacto directo o indirecto con el personal sanitario, con un objeto contaminado o incluso con otro paciente. Las cepas habituales de Staphylococcus aureus son resistentes a la penicilina, dejando como los antibiticos ms eficaces para combatirlos a los aminoglucsidos, las cefalosporinas, la oxacilina o la nafcilina. Adems de la administracin del tratamiento antimicrobiano correspondiente, puede ser conveniente, en funcin del caso, la eliminacin de puertas de entradas como catteres venosos permanentes o drenajes quirrgicos. Morfologa S. aureus es un coco inmvil, de 0,5 a 1 m de dimetro, que se divide en tres planos para formar grupos de clulas irregulares semejantes a racimos de uvas. En extendidos de pus los cocos aparecen solos, en pares, en racimos o en cadenas cortas. Los racimos irregulares son caractersticos de extendidos tomados de cultivos que se desarrollan en medios slidos, mientras que en otros cultivos son frecuentes las formas de diplococos y en cadenas cortas. Unas pocas cepas producen una cpsula o capa de baba que incrementa la virulencia del microorganismo. S. aureus es un microorganismo grampositivo pero las clulas viejas y los microorganismos fagocitados se tien como gramnegativos.

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ANTIBIOGRAMA

El antibiograma es la prueba microbiolgica que se realiza para determinar la susceptibilidad (sensibilidad o resistencia) de una bacteria a un grupo de antibiticos. Las tcnicas de antibiograma son las utilizadas en el laboratorio de microbiologa para estudiar la actividad de los antimicrobianos frente a los microorganismos responsables de las infecciones. Se considera como antimicrobiano cualquier sustancia con capacidad de matar o al menos de inhibir el crecimiento de los microorganismos y que sea susceptible de utilizacin como tratamiento en los pacientes. Pueden ser naturales, sintticos o semisintticos (modificacin qumica de un compuesto natural). La historia moderna de los antibiticos comienza con el descubrimiento de sustancias presentes en unos microorganismos capaces de matar a otros microorganismos. La utilizacin de antibiticos supuso un avance enorme en la esperanza de vida de las personas que padecan procesos infecciosos, aunque desgraciadamente tambin supuso un aumento en los niveles de resistencia antibitica. El antibiograma tiene cuatro utilidades principales:

La utilidad bsica del antibiograma es la instauracin de un tratamiento antibitico correcto al paciente. Es necesario conocer si el microorganismo responsable de la infeccin posee mecanismos que le confieran inmunidad frente a algn antibitico para no incluirlo como terapia. En cuanto al tratamiento el antibiograma no slo es necesario en la instauracin, tambin resulta til en el seguimiento e incluso en la confirmacin de tratamientos empricos. En ocasiones la enfermedad infecciosa resulta grave y se comienza el tratamiento antes de conocer los datos de sensibilidad de la cepa. El antibiograma tiene que confirmar, o en su caso corregir el tratamiento.

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Otra aplicacin de las tcnicas de estudio de resistencia es la epidemiologa. Es necesario detectar el aumento de los niveles de resistencia en los aislamientos clnicos para tomar medidas correctoras. Por otro lado tambin puede tener utilidad diagnstica porque el perfil de resistencia puede en algn caso orientar en la identificacin bacteriana. Existen multitud de antimicrobianos en el mercado y el nmero sigue creciendo porque el desarrollo de ms mecanismos de resistencia por parte de los microorganismos se traduce en un esfuerzo mayor por fabricar ms y mejores antibiticos. No es necesario contrastar la eficacia de todos los antibiticos para cada aislamiento bacteriano. Los criterios que se siguen para seleccionar que antimicrobianos se ensayan respondes a factores de diversa ndole: Factores microbiolgicos: Tipo de agente infeccioso y mecanismos de resistencia descritos previamente en su especie. Factores farmacolgicos: Tipo de antimicrobiano y parmetros de absorcin, distribucin y eliminacin. Factores del paciente: Tipo de infeccin. Factores de riesgo y estado general de salud. Situacin inmunolgica e hipersensibilidad. Experiencia anterior referente a los patrones de resistencia antibitica ms habituales para cada especie. 3. MATERIALES Materiales Aza Mechero Hisopos o aplicadores Cajas petri con agar base sangre y macconkey Microscopio Placas porta objetos Aceite de inmersin Solucin salina Tabla antibiograma

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Violeta de genciana Licor de Gram Alcohol cetona Safranina

4. DESARROLLO O PROCEDIMIENTO: Para realizar la prctica y conseguir la siembra de secreciones nasal y otico en los agares base sangre y macconkey debemos hacer lo siguiente: Tener todos los materiales necesarios a la mano. Luego procedemos a tomar la muestra a nuestro paciente utilizando nuestras protecciones fsicas. Al tomar la muestra nasal con el hisopo o aplicador tener cuidado y pedirle al paciente que haga hacia tras su cabeza, para que sea ms fcil la toma, una vez introducido el aplicador en las fosas nasales, dar giros muy despacio para recolectar la secrecin, hacer esto en las dos fosas. Para la toma de muestra de secrecin otico, hacemos casi lo similar pero esta vez en el odo, introducimos el aplicador de una forma casi superficial, giramos el hisopo para recoger la muestra y retiramos. Al tener las muestras en los hisopos procedemos a sembrar, realizando estriados de dos y tres planos con la ayuda del aza en los agares base sangre y macconkey, Al terminar con este paso procedemos a quemar los hisopos con el mechero para evitar que se expanda alguna infeccin. Despus desechamos los aplicadores en los recipientes corto punzantes. Dejamos incubar los cultivos para obtener colonias en refrigeracin temperatura fra. Despus de pasar en refrigeracin y una vez que las bacteria hayan crecido debemos cogerlas una colonia con un hisopo y colocarlo en una placa esta servir para comprobar s son Gram positiva o no, se lo realiza o se lo ve al colocar en la placa con la colonia una pequea gota de una sustancia salina. Casi lo mismo realizaremos en el agar Mller solo que en este obtendremos tres colonias con la ayuda del hisopo y realizaremos un antibiograma que servir este,
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para colocar los analgsicos: en este agar para ver si son resistentes o no a esta bacteria, se colocan 4 antibiticos separados por 2cm cada uno. Debemos dejar pasar un da y al siguiente observar si son resistente so no, medir con la regla indicada y dar el resultado. Para la coloracin de Gram - Realizar un frotis con colonias tanto nasal como otica con solucin salina. - Colorear con la tincin de gram: Fijar al mechero. Aadir 3 gotas de violeta de genciana (1 min). Lavar la placa con agua corriente. Colocar 3 gotas de licor de Gram (30 seg). Aadir alcohol cetona (15 seg). Lavar la placa. Aadir 3 gotas de safranina (1 min). Lavar con agua y dejar secar.

- Observar con el objetivo de 100X las bacterias presentes. - Realizar el estudio de la colonia. - Realizar el antibiograma. - Prueba de la catalasa. (Solo para estafilococo)

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5. RESULTADOS REPORTE Nombre: Muestra: Edad: Fecha: RESULTADO Germen Aislado Secrecin nasal coco - Gram positivo Antibiograma Agente Antimicrobiano *Vancomicina *Bacitracina *Penicilina *Tetraciclina Concentracin 30 mcg 30 mcg 10 U 30 mcg Sensible Sensible Intermedia sensible Daro Yaulema Secrecin nasal 19 aos 26-09-2013

REPORTE Muestra: RESULTADO Germen Aislado Secrecin Otica bacilo - Gram positivo Antibiograma Agente Antimicrobiano *Vancomicina *Bacitracina *Penicilina *Tetraciclina Firma de responsabilidad Concentracin 30 mcg 30 mcg 10 U 30 mcg Sensible Sensible Resistente sensible Secrecin Otica

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6. CONCLUSIONES: Conoc que bacterias se pueden encontrar en las secreciones nasales y oticos. Sembramos bacterias en los agares. Analice la importancia de la proteccin fisca al tomar las muestras. Teimos las placas con las indicaciones establecidas para que su observacin en el microscopio sea la correcta. Se nos facilito todos los materiales necesarios para la elaboracin de esta prctica.

7. RECOMENDACIONES: Una recomendacin que podra decir es que hay que tener cuidado al tomar la muestra y no comprometer ningn rgano. Tambin debemos procurar no romper los agares ya que as las bacterias no crecer. Desechar correctamente la basura en du respectivo tacho en el caso del hisopo quemarlo y arrogarlo a desechos cortopunzantes. Medir correctamente con la regla indicada lo que se indica. No dejar pasar ms del tiempo necesario para la tincin

8. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS: o http://www.scielo.cl/scielo.php?pid=S071848162010000200003&script=sci_arttext o http://escuela.med.puc.cl/publ/AparatoRespiratorio/28InfeccionesAguda.html o http://quimicoclinico.wordpress.com/2008/01/07/cultivo-otico/ o http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003763.htm o http://microbitos.wordpress.com/2011/09/27/pruebas-bioquimicas-primarias/

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9. ANEXOS:

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