Oscar ARAM AGUIRRE GARDEA Sergio MALDONADO MENDOZA Sarah OUAZZANI

Informe de prcticas de anlisis de alimentos

Practicas 1: Cuenta de bacterias mesofisicas aerobias

Introduccin En fin de investigar sobre el contenido de microorganismos viables en un alimento, se usa la tcnica del recuento en placa, que permite poner en evidencia todos les microorganismos sin diferenciacin. Gracias a un medio de cultivo adecuada y a una temperatura de incubacin entre 20 y 37C, los organismos mesofilicaos aerobiosis se desarrollan. Luego, se podr conocer la cantidad con un contador de colonias. Objetivo general Estimar la cantidad de bacterias mesofilicas aerobias en un alimento, en nuestro caso el jugo de naranja en una botella PET. Objetivos especficos 1. Conocer las caractersticas generales de los organismos aerobios como grupo indicador 2. Interpretar su presencia en los alimentos 3. Emplear la tcnica recomendada para su recuento Material Agar para cuenta estndar Tubos con 9mL de agua peptonada Frascos de licuadora Frascos con 90mL de agua peptonada Pipetas de 1 y 10mL (estriles) Contador de colonias Medios de cultivo Cantidades: 5.0g de peptona de casena 2.5g de extracto de levadura 15.0g de agar 1.0g de dextrosa 1L de agua El pH final ser a 7.00.2. Seguir las instrucciones del fabricante. Soluciones diluyentes Cantidades: 1.0g de peptona 8.5g de cloruro de sodio 1L de agua

Cajas de Petri estriles Balanza garnataria Cucharas estriles Incubadora Bao Mara Recipientes estriles para muestras

Disolver los componentes en un litro de agua. Ajustar el pH a 7 0.1 con hidrxido de sodio 1.0N. Distribuir en porciones de 90 a 9mL segn se requiera. Esterilizar a 121 1C durante 15 minutes. Metodologa 1. Tomar 10mL de jugo de naranja y la poner en el frasco con 90mL de agua peptonada para tener la dilucin 10-1. 2. Realizar las diluciones de este muestra de 10-2 a 10-5. 3. Inocular 1mL de las diluciones 10-2 a 10-5 en las cajas de Petri estriles 4. Adicionar el medio de cultivo (15 a 20mL) 5. Homogeneizar el inoculo mediante 6 movimientos arriba-abajo, 6 derecha-izquierda, 6 en el sentido de las manecillas del reloj y por fin 6 en contra. 6. Despus que sea solidificado, incubar a 35 2C durante 482 horas. Expresin de los resultados En la muestra de dilucin 10-3, gracias al contador de colonias, se encuentran 76 colonias de bacterias mesofilicos aerbicas repartidas de forma homognea en la caja Petri. Multiplicando este resultado por el inverso de la dilucin, el nmero de bacterias por mililitro de muestra es de 76 000. As, en el jugo de naranja extracto de una botella PET, vendido en la calle, se cuenta aproximadamente 76 000UFC/mL de bacterias aerobias en placa incubadas 45h a 35C.