Sensibilidade: A sensibilidade foi verificada atravs de ensaios com teores 0,1 a 100mg/ dL , sendo observado sensibilidade a partir de 0,39mg/dL.

A sensibilidade do sistema est diretamente relacionada com a do aparelho utilizado no laboratrio. Diluio da matriz: O efeito de diluio da matriz foi verificado atravs de ensaios de diluies seriadas de amostra humana. Constatou-se com este ensaio que diluies sucessivas da matriz no interferem na sensibilidade diagnstica do mtodo. Ensaios de Recuperao: A capacidade de recuperao do produto foi verificada atravs de misturas de propores variadas de 02 amostras humanas com teores de 53 e 615mg/dL de glicose. Este estudo demonstrou ndice de recuperao de 98 a 106%. Reprodutibilidade: Foram realizados 20 ensaios de trs amostras distintas, em diferentes dias, obteve-se os seguintes resultados:
Concentrao (mg/dL)

evitar tal ocorrncia, recomenda-se a utilizao de plasma colhido com fluoreto, o que ir impedir o fenmeno da gliclise. Certas drogas e outras substncias podem afetar os valores da glicose. Para controle de interferncias recomendado que o paciente seja questionado quanto ao uso de medicamentos.
BIBLIOGRAFIA CONSULTADA Trinder, P.: Ann. clin. biochem., 6-24, 1969. D. Barham e P. Trinder: Analyst 97, 1972. Jacobs D.S.: Kasten B.L.: Dematt W.R., Walfson W.L: Labortory test handbook, 2a ed, 113, 1990. Pagana, K.D.: Mosbys diagnostic and laboratory test reference, 379 - 381, 1992 Cockayne, Susan: Clinical chemistry: Concepts and applications, 156-158, 1993. Tibrcio, H.M.: Controle interno da qualidade analtica, 1aed. maro/1995 Henry, John Bernard: Clinical diagnosis and management by laboratory methods, 19a ed, 194-207,423-426,1996.
Doles: dados de arquivo

GLICOSE ENZIMTICA LQUIDA

FINALIDADE Sistema enzimtico para determinao da glicose no soro, plasma e demais lquidos biolgicos. Somente para uso diagnstico in vitro. PRINCPIO Ao adicionar-se glicose em uma soluo tampo de fosfatos, contendo p-Hidroxibenzoato, 4-Aminoantipirina (4-AAP), Glicose Oxidase e Peroxidase processam-se as seguintes reaes:
Glicose + O2 + H2O GOD 2H2O2 + 4AAP cido Glucnico + H2O2

BIOQUMICA CLNICA

Ref. B

Manual Automao (*)

1.500 testes 3.600 testes

(*) A quantidade de testes na automao varivel de acordo com o equipamento. Protocolos de automao encontram-se disponveis no site Doles ou atravs do Servio de Atendimento ao Consumidor. EQUIPAMENTOS E MATERIAIS NECESSRIOS NO FORNECIDOS Espectrofotmetro capaz de medir a absorvncia em 510nm ou fotocolormetro com filtro verde (490-540nm). Tubos de ensaio. Pipetas graduadas. Pipeta semiautomtica 10L. Banho maria (37C). Cronmetro. Ponteiras descartveis.

POD 4-Antipirilquinonimina + 4 H2O

Amostra 1 Amostra 2 Amostra 3 75,89 1,69 2,23 128,96 3,34 2,59 330,11 8,46 2,56

Desvio Padro Coeficiente de variao (%)

Repetitividade: Foram realizados 20 ensaios sucessivas, com trs amostras, obteve-se os seguintes resultados:
Amostra 1 Amostra 2 Amostra 3

Concentrao (mg/dL)
Desvio Padro Coeficiente de variao (%)

45,94 1,04 2,26

89,05 1,04 1,17

292,24 3,11 1,06

TERMOS E CONDIES DE GARANTIA DA QUALIDADE DO PRODUTO As garantias do fabricante ao consumidor seguem estritamente as relacionadas na Lei no 8.078, de 11 de setembro de 1.990 - Cdigo de Defesa do Consumidor. Os reagentes que compem este sistema para diagnstico so garantidos na sua performance, reprodutibilidade e qualidade at a data de vencimento. Os produtos que apresentarem problemas tcnicos comprovados sero substitudos, sem nus para o consumidor. Doles Reag. Equip. para Laboratrios Ltda. CNPJ: 01.085.513/0001-05 Rodovia BR 153, Km 493, Lt.07 Chcara Retiro, Conjunto Palmares. CEP: 74775-027 Goinia - GO Brasil e-mail: doles@doles.com.br M.S.: n 10231810084 Reviso: 12 (04/2011)

S u b s t n c i a s in terf eren tes: s o r o s lipmicos, hemolisados e ictricos podem causar resultados falsamente elevados. Nestes casos recomendado que seja feito um branco da amostra (1,0mL do reagente de cor + 10L do soro, leitura imediata). O uso de soros pode provocar valores falsamente diminudos de glicose, quando no so separados em tempo hbil. Tal fato deve-se presena de enzimas glicolticas degradantes da glicose. Para SAC: (62) 3269 0000 (Grande Goinia) SAC: 0800 644 6433 (Demais localidades)

O produto formado pela oxidao de 4-Aminoantipirina (4- Antipirilquinonimina) d e c o l o ra o ave r me l h ad a e s u a intensidade diretamente proporcional concentrao de glicose na soluo. A cor avermelhada, formada pela reao, medida em espectrofotmetro ou fotocolormetro, ARMAZENAMENTO E ESTABILIDADE com absoro mxima em 510nm, ou filtro DOS REAGENTES Reagente de Cor: armazenar temperatura verde. de 2-8C. Estvel at a data de vencimento indicada no rtulo do frasco, obedecidas as PARTICULARIDADES DO SISTEMA condies de armazenamento. O reagente glicose enzimtica lquida Soluo padro 100mg/dL: armazenar apresenta-se pronto para uso . Sua temperatura de 2-8C. Estvel at a data simplicidade torna-o mtodo eleito para de vencimento indicada no rtulo do frasco, rotina de laboratrios, sendo ainda aplicvel obedecidas as condies de armazenamento. aos diversos sistemas de automao. CUIDADOS E PRECAUES COM O USO DOS REAGENTES METODOLOGIA Todos os reagentes so somente para uso Glicose Oxidase. diagnstico in vitro. Seu manuseio deve ser cuidadoso, evitando-se contato com REAGENTES pele e mucosas. Em caso de contaminao Reagente de Cor: soluo tampo acidental lavar a parte afetada em gua de fosfatos 0,05M, pH 7,45 +/- 0,1, corrente. O descarte do material utilizado Aminoantipirina 0,03mM e 15mM de dever ser feito obedecendo-se aos critrios p-Hidroxibenzoato de sdio. Contm, ainda, de biossegurana estabelecidos pelo um mnimo de 12kU de glucose oxidase e laboratrio, de acordo com as normas locais, estaduais ou federais. 0,8 KU de Peroxidase por litro. Soluo padro 100mg/dL: soluo Observar a simbologia constante nos rtulos aquosa contendo 100mg/dL de glicose.
do produto:

APRESENTAO

AMOSTRA Ref. A Ref. B Reagente de Cor 1 x 500mL 3 x 500mL Soro, plasma, lquor e outros lquidos Soluo padro 100mg/dL 1 x 3mL 1 x 3mL biolgicos. A amostra dever ser colhida com o paciente em jejum. Para obteno de plasma utilizar anticoagulante contendo NMERO DE TESTES fluoreto - Anticoagulante Glicose Doles. Ref. A Todas as amostras biolgicas devem Manual 500 testes ser consideradas como potencialmente Automao (*) 1.200 testes infectantes. SAC: (62) 3269 0000 (Grande Goinia) SAC: 0800 644 6433 (Demais localidades) 1/4

Irritante

4/4

PROCEDIMENTO TCNICO Os padres utilizados na montagem da Rotular 3 tubos de ensaio com B (branco), curva de calibrao foram preparados com T (teste) e P (padro). produto de referncia D-Glucose Standard Proceder como segue: Reference Material 917a procedncia NACIONAL INSTITUTE of STANDARDS & B T P TECHNOLOGY (NIST).
Reagente de Cor Amostra Soluo Padro 1mL 1mL 10L 1mL 10L

CLCULOS
absorvncia teste Glicose (mg/dL) = x 100 absorvncia padro Exemplo: Padro: 0,280 0,230 Glicose (mg/dL) = 0,280 Teste: 0,230

Misturar por agitao e incubar por 05 minutos em banho maria, a 37C. Proceder leitura das absorvncias em espectrofotmetro ou fotocolormetro, em 510nm ou filtro verde, zerando o aparelho com o branco. A cor final da reao permanece estvel por 20 minutos, temperatura ambiente (20 - 30C). CURVA DE CALIBRAO
Conc. Padro Absorvncia (mg/dL) 1 2 3 4 5 6 7 0.000 0.137 0.280 0.715 1.150 1.680 1.900 0 50 100 250 400 600 800

x 100 = 82

Como a reao corada segue estritamente a lei de Beer, basta que se determine um fator (F) para clculo dos resultados. 100 Fator (F)= absorvncia padro Glicose mg/dL= absorvncia teste x F Para obteno do fator, recomenda-se dosar em triplicata o padro, ler as absorvncias e tirar a mdia aritmtica das mesmas. Exemplo: Padro: 0,283, 0,285, 0,284

CONTROLE DA QUALIDADE DO SISTEMA 1.A limpeza e a secagem adequada do material a ser utilizado so de fundamental importncia para a estabilidade dos reagentes e obteno de resultados corretos. 2.O nvel da gua do banho maria deve ser superior ao nvel dos reagentes nos tubos de ensaio. A temperatura (37oC) deve ser observada. 3.O uso de soro controle de referncia deve ser uma prtica rotineira do laboratrio. Recomenda-se utilizar um soro controle com valor na faixa de normalidade (soro controle N - Doles) e outro soro controle de valor elevado (soro controle P Doles). VALORES DE REFERNCIA recomendado que cada laboratrio estabelea sua prpria faixa de valores de referncia na populao atendida. Como orientao, sugerimos os seguintes valores: Plasma:(jejum de 8 horas) 70 - 99 mg/dL Lquor: 40 - 70 mg/dL Informaes sobre os critrios para diagnstico de diabetes podem ser obtidas no site da Sociedade Brasileira de Diabetes: www.diabetes.org.br. SIGNIFICADO CLNICO A dosagem da glicose sangunea o teste bioqumico mais realizado em laboratrio. Suas alteraes no so simples marcadores de doena, mas o reflexo de profundas alteraes no meio ambiente biolgico. A quantificao da glicose no sangue reflete apenas o ponto de equilbrio momentneo entre sua produo, utilizao e estocagem. O Diabetes representa um grupo de distrbios metablicos onde a glicose, mal utilizada, resulta em hiperglicemia. Os nmeros que indicam a incidncia de diabetes no Brasil so desconhecidos, mas admite-se que 5% da nossa populao seja portadora de diabetes em seus diversos nveis. Atualmente, distingue-se no diabetes duas variedades principais: Diabetes mellitus tipo 1 (IDDM- diabetes mellitus, insulino dependente). Deficincia de insulina (insulino dependentes). SAC: (62) 3269 0000 (Grande Goinia) SAC: 0800 644 6433 (Demais localidades)

Obs.: No utilizar esta curva para determinar o resultado de seu ensaio A curva de calibrao a representao grfica entre os valores das absorvncias com os valores das concentraes de um conjunto de solues padro. A curva de calibrao demonstra a linearidade da reao at uma determinada concentrao, na qual pode ser determinado um fator de calibrao (F), de acordo com a Lei de Beer. A reao linear at 600mg/dL (ver curva acima). Obtendo-se valores mais elevados, dilui-se a amostra com soluo fisiolgica e procede-se nova dosagem. Multiplicar o valor encontrado pelo fator de diluio. O kit de Glicose Enzimtica Lquida Doles possui padro no intervalo de linearidade da metodologia de Glicose Oxidase. O laboratrio deve realizar o ensaio com o padro que acompanha o kit e calcular seu fator de calibrao (F), a exemplo do demonstrado nos clculos abaixo. O fator deve ser refeito periodicamente e a cada lote do produto. 2/4

0,283 + 0,285 + 0,284 Mdia aritmtica = = 0,284 3 100 Fator (F)= = 352 0,284 Leitura do teste: 0,270 Glicose (mg/dL) = 0,270 x 352 = 95

EXPRESSO DOS RESULTADOS EM UNIDADES S.I. Glicose (mmol/L) = Glicose (mg/dL) x 0,0555 LIMITAES DO SISTEMA Para se obter timo desempenho do sistema, necessrio que o procedimento tcnico seja rigorosamente seguido conforme instrues de uso. Qualquer alterao poder levar a resultados errneos. A separao do plasma dever ocorrer at duas horas aps a coleta. No plasma refrigerado (2-8C), a glicose permanece estvel por trs dias. Na ausncia de fluoreto, a glicose consumida pelo fenmeno de gliclise a um ritmo de 5% por hora.

H destruio de mais de 90% das clulas b das ilhotas de Langherans. Presena de anticorpos anti-insulina e anti-ilhotas de Langherans. Viroses e toxinas qumicas so os provveis agentes causais. Ocorre geralmente em jovens (abaixo dos 30 anos) e representa, aproximadamente, 10% dos diabticos. As complicaes so frequentes. Diabetes mellitus tipo 2 ( NIDDMdiabetes mellitus no dependente de insulina). Nveis variados de insulina. Ausncia de anticorpos anti-insulina e anti-ilhotas. Em geral os pacientes so obesos, com a presena de componente familiar. Incidncia maior a partir dos 40 anos. Considere-se ainda: Diabetes mellitus secundria: sndrome diabtica secundria pancreatite, sndrome de Cushing, feocromocitoma, insuficincia heptica grave, terapia por corticoides, etc. Diabetes mellitus gestacional: diabetes que se exterioriza durante a gravidez. Tolerncia de glicose alterada: glicemia basal entre 110 e 120 mg/dL, com alteraes de curva glicmica, ainda no conclusiva, de diabetes. Grupos de risco: pacientes com hiperglicemia transitria, espontnea ou secundria a estmulos. Irmo monozigtico de portador de diabetes tipo 2. Pessoas com histrico familiar de diabetes. Obesos e membros de grupos raciais ou tnicos com alta incidncia de diabetes. A hipoglicemia tem como causas principais: o e xc e s s o d e i n s u l i n a p a n c r e t i c a , hipotiroidismo, insuficincia suprarenal, a l c o o l i s m o, u s o n o c o n t r o l a d o d e hipoglicemiantes orais, sendo ainda encontrada nas insuficincias hepticas graves. CARACTERSTICAS DE DESEMPENHO Especificidade: Foram realizados 71 testes em amostras cujo teor de glicose se situava no intervalo de 50 a 600mg / dL. Esses ensaios foram realizados em paralelo com uma metodologia similar (glicose oxidase). A comparao da Glicose Enzimtica Lquida Doles (Y) com a metodologia mencionada (X) deu origem a seguinte equao de regresso linear: y = 1,055X 3,122, sendo o coeficiente de correlao de 0,999. 3/4

SAC: (62) 3269 0000 (Grande Goinia) SAC: 0800 644 6433 (Demais localidades)