(Universidad Del Per, DECANA DE AMRICA)

Curva de crecimiento, fases, manejo e implicancias.

Mg. Sc. Estela Memenza Z. 2013 - II

Crecimiento Bacteriano
Incremento del nmero de clulas y masa celular
ADN

FISIN BINARIA

Replicacin del ADN Elongacin de la clula, R, Mol, CoEnz., Dupl. Cromosoma

Una generacin

Formacin del septo

Terminacin del septo con formacin de paredes bien diferenciadas

Separacin de las clulas

Crecimiento Bacteriano

Crecimiento de Poblaciones
Una generacin Tiempo de generacin/duplicacin

Velocidad de Crecimiento Tasa de Crecimiento

Curva de Crecimiento
FASE EXPONENCIAL

FASE ESTACIONARIA

FASE DE MUERTE

Logaritmos del nmero de clulas/ml

FASE LAG

Tiempo (Horas)

Fases en la Curva de Crecimiento

Progresin geomtrica 20 21 22 24 2n

Medidas de Crecimiento Microbiano

Medicin del cambio del nmero de clulas 1. Mtodo Directo
a. Recuento de clulas totales

1. Mtodo Directo
b. Recuento de clulas viables
Mtodo Difusin

Mtodo Diseminacin Mtodo Estriado

Medidas de Crecimiento Microbiano

2. Mtodo Indirecto
a. Turbidimetra

Tubo control

Turbidez: Poblacin microbiana

Espectofotmetro: Densidad ptica (Absorbancia)

Sistemas de Cultivo
Depende de la forma de operacin del Biorreactor o Fermentador

Biorreactor

Biorreactor de Mesa 0.5 10 L

Biorreactor piloto 15 100 L

Biorreactor Industrial 150 10000 L

Agitador

Termmetro

Manmetro

pH

1. Cultivo en Lote o BATCH

Cultivo de microorganismos a partir de una cantidad limitada NO RENOVABLE de medio de cultivo hasta que se agoten los nutrientes esenciales o se acumulen productos txicos en niveles que inhiben el crecimiento microbiano.

2. Cultivo Continuo
Cultivo de microorganismos en sistemas abiertos con ADICIN CONSTANTE de medio de cultivo nuevo y SALIDA CONSTANTE de medio de cultivo usado ms clulas (volumen cte.) a velocidad constante.

QUIMIOSTATO

2. Cultivo Continuo Forma de Operacin

2. Cultivo Continuo

3. Cultivo en lote Alimentado o FED BATCH

Cultivo de microorganismos con un sistema semicontinuo con ADICIN CONSTANTE de medio de cultivo nuevo pero SIN SALIDA de medio de cultivo usado (sustrato cte.).

F: Flujo de entrada CSA: Concentracin de sustrato alimentado. V: Volumen de la mezcla X: Concentracin de biomasa en la mezcla

Cultivo en Lote

Cultivo Continuo

Cultivo en Lote Alimentado

Ventajas
-Sistemas de simple operacin - Ahorro de nutrientes -Ampliamente utilizado - Mayor posibilidad de control de parmetros - Control de velocidad de crecimiento - Obtencin de altas cantidades de productos - Automatizado - Obtencin de altas concentraciones de productos - Sin prdida de clulas viables

Desventajas
- Produccin limitada del producto - Produccin de sustancias que inhiben el crecimiento - Imposible su automizacin - Prdida de clulas viables - Gasto de medio de cultivo
- Acumulacin de sustancias txicas - Limitado por la capacidad de trabajo del reactor