INTRODUCCIN

El presente trabajo monogrfico BIOTECNOLOG EN ! "# CI

es para exponer

sobre los puntos de la

$ #E%ICIN & en el cual para su desarrollo

'emos utili(ado palabras sencillas ) comprensibles* En el +rimer +unto se sinteti(an todo lo referentes a las diferentes prote,nas 'umanas con t-cnicas tomadas de la ingenier,a se dise.aron frmacos a medida con material 'ereditario* correctas En el segundo punto se enfocan las t-cnicas al uso en ingenier,a gen-tica estn 'ora /ueda /ue el organismo enfermo fabri/ue -l mismo las prote,nas

demostrando su importancia capital en la in0estigaci1n& desarrollo ) s,ntesis de nue0os frmacos& 0acunas ) medios diagn1sticos* Cuando se combinan con los m-todos de larga tradici1n en biolog,a& ) acrisolados en la producci1n de antibi1ticos mediante 'ongos ) bacterias& se 'abla entonces de biotecnolog,a* Los procedimientos clsicos de obtenci1n de prote,nas eran poco rentables ) limitados a una gama restringida*

BIOTECNOLOGA DE FRMACOS

+rimero se sinteti(aron prote,nas 'umanas con t-cnicas tomadas de la ingenier,a gen-tica* Luego se dise.aron frmacos a medida con material 'ereditario* /ue el organismo enfermo fabri/ue -l mismo las prote,nas correctas Las t-cnicas al uso en ingenier,a gen-tica estn demostrando su importancia capital en la in0estigaci1n& desarrollo ) s,ntesis de nue0os frmacos& 0acunas ) medios diagn1sticos* Cuando se combinan con los m-todos de larga tradici1n en biolog,a& ) acrisolados en la producci1n de antibi1ticos mediante 'ongos ) bacterias& se 'abla entonces de biotecnolog,a* Los procedimientos clsicos de obtenci1n de prote,nas eran poco rentables ) limitados a una gama restringida* 2o)& gracias a la biotecnolog,a& podemos fabricar prote,nas animales ) 'umanas 3) tambi-n p-ptidos& esto es& cadenas de aminocidos& como las prote,nas& pero ms cortas4 para fines medicinales* %esde 'ace muc'os a.os se 0ienen aislando de orina& sangre ) otros tejidos 3'umanos ) animales4 prote,nas terap-uticas con m-todos bio/u,micos tradicionales* +i-nsese en los factores de la coagulaci1n o en la insulina* Las mol-culas obtenidas sal0an 0idas de sujetos con un defecto de s,ntesis cong-nito o ad/uirido* +or dar una muestra& la insulina procedente de pncreas de cerdo regula los ni0eles de glucosa en sangre de los diab-ticos de tipo 5& /ue desde su ju0entud padecen un d-ficit de s,ntesis de la 'ormona* 1. LA RETEPLASA es una prote,na de segunda generaci1n sinteti(ada mediante ingenier,a gen-tica* 6e emplea en la disoluci1n de trombos sangu,neos* 6u precursor es el acti0ador tisular del plasmin1geno 3t+ 4 (izquierda). En esta mol-cula se distinguen dominios con funciones innecesarias o incluso indeseables desde el punto de 0ista terap-utico* 6e 'an eliminado los segmentos de %N correspondientes a estos dominios del gen del t+ de las cepas bacterianas productoras de reteplasa* La en(ima carece de las cadenas laterales de a(7cares /ue se agregan tras la s,ntesis proteica al t+ debido a las deficiencias de la ma/uinaria bacteriana& pero esto s1lo supone una 0entaja adicional* El modelo porcomputador (derecha) de 8olfram Bode ) #artin "enatus& del 'ora /ueda

Instituto #ax9+lanc: de Bio/u,mica de #artinsried& destaca los aminoacidos catal,ticos importantes (en verde) ) los /ue forman puentes disulfuro (en amarillo). Los tratamientos con prote,nas animales /ue presentan diferencias respecto de las de sus 'om1logos 'umanos pueden pro0ocar una respuesta inmunitaria* 6on pocas las 0eces en /ue& con modificaciones m,nimas as, en el caso de la insulina porcina;& se puede transformar la mol-cula fornea en su correspondiente 'umana* Los tejidos 'umanos son una fuente escasa )& lo mismo /ue la sangre& corren adems el riesgo de estar contaminados por g-rmenes* En el tratamiento del enanismo cong-nito con 'ormona de crecimiento& o somatotropina obtenida de 'ip1fisis de cad0eres& se 'an descrito casos de transmisi1n de la enfermedad de Creut(feld9<a:ob& una patolog,a /ue transforma el cerebro de los /ue la padecen en una masa esponjosa* lgo similar 'a sucedido en 'emof,licos& infectados con el 0irus =I"& agente del sida& o con 0irus causantes de 'epatitis* 61lo la ingenier,a gen-tica nos re0ela en su plenitud el potencial terap-utico de las prote,nas 'umanas* Con la a)uda de culti0os industriales de bacterias o de c-lulas superiores se pueden producir grandes cantidades de prote,nas& incluso de a/uellas /ue se encuentren en el cuer+O en concentraciones mu) bajas* La estructura primaria de estas prote,nas es id-ntica a la de las originales& por lo /ue el riesgo de sensibili(aci1n inmunitaria es m,nimo& aun cuando el tratamiento se prolongara 0arios a.os* +ara e0itar la transmisi1n de enfermedades se mantiene un se0ero control de las condiciones de culti0o* En algunos casos la ingenier,a gen-tica 'a despla(ado a los protocolos tradicionales de aislamiento de la prote,na> 'a ocurrido as,& por ejemplo& en el caso de la somatotropina* En otros& las nue0as t-cnicas 'an permitido disponer de la mol-cula en cuesti1n> tal 'a acontecido con la 'ormona eritropo)etina& /ue estimula la formaci1n de gl1bulos rojos* Tambi-n es posible modificar prote,nas naturales para /ue su aplicaci1n cl,nica sea 1ptima* Las nue0as t-cnicas 'an simplificado el desarrollo de las 0acunas& a la par /ue 'an incrementado su seguridad* La moderna 0acuna de la 'epatitis consta de una sola prote,na de la en0oltura& sinteti(ada por una le0adura modificada por ingenier,a gen-tica* +ero el -xito ms notable corresponde a la producci1n de medios diagn1sticos*

Casi todas las prote,nas contenidas en tales productos se fabrican 'o) en d,a con t-cnicas gen-ticas* Potenciale !e "e#ca!o La importancia econ1mica de la ingenier,a gen-tica molecular dentro del sector farmac-utico merece un inciso* %esde /ue la empresa Eli9Lill) introdujera 'ace /uince a.os la insulina 'umana recombinante& los frmacos sinteti(ados con esos procedimientos t-cnicos 'an representado una fracci1n creciente del mercado farmac-utico* En 1995 mo0ieron 5?*@@@ millones de marcos& el triple /ue en 5AA@& ) se espera /ue la cifra se 0uel0a a triplicar en el a.o B@@@* Cn estudio del Instituto +rognos de Basilea 'a estimado /ue& a largo pla(o& un B@9BD E del mercado farmac-utico mundial se abastecer con estos medicamentos* En 5AAF& en todo el mundo estaban autori(ados GB frmacos con principios acti0os sinteti(ados mediante ingenier,a gen-tica* Las pe/ue.as empresas de biotecnolog,a 'an demostrado su eficacia en la in0estigaci1n de productos ) nue0os caminos gracias a su alto grado de especiali(aci1n* 6e estima /ue en el a.o B@@B ms de doscientas substancias desarrolladas por estas empresas 'abrn llegado a la 7ltima fase de ensa)o cl,nico ) son de esperar nue0as sorpresas ) frmacos no0edosos* El a.o pasado& el n7mero de empresas europeas de biotecnolog,a registr1 un aumento del F@ E ) se situ1 en H5F* +or otra parte& contin7a el proceso de concentraci1n de la industria farmac-utica& plasmado en cooperaciones& alian(as ) ad/uisiciones* P#ote$na #eco"%inante El despegue de la ingenier,a gen-comen(1 a inicios de los a.os setenta con el descubrimiento de las en(imas de restricci1n* Con estas tijeras moleculares podemos cortar la mol-cula de fragmentos de nombre de recombinante* %N por donde nos interese& para uncir,a luego en otros %N %N ) formar configuraciones in-ditas* La nue0a mol-cula recibe el

%N recombinante* En 5AHG se sinteti(1 la primera mol-cula de

Todos los seres 0i0os compartimos el mismo c1digo gen-tico& el lenguaje en el /ue se especifican las instrucciones precisas para la s,ntesis de prote,nas* Ello significa /ue podemos introducir material gen-tico forneo en una c-lula* 6i insertamos un gen 'umano en el material gen-tico de una bacteria& -sta fabricar la prote,na correspondiente& siempre ) cuando la informaci1n fornea contenga tambi-n los elementos necesarios para la expresi1n del gen* Las bacterias presentan la 0entaja de multiplicarse en culti0o de una manera 0ertiginosa si se dan condiciones 1ptimas de 0entilaci1n& temperatura ) suministro de nutrientes& entre otros* En teor,a& a partir de una sola bacteria /ue se di0ida cada 0einte minutos& se formarn un bill1n de c-lu,as en poco ms de medio d,a* 6i se seleccionan cepas de alto rendimiento& la cantidad de prote,na sinteti(ada contenida en cada c-lula puede representar la mitad de su peso* 6e entiende /ue las bacterias se consideren ideales para producir cantidades ingentes de una prote,na concreta& aun/ue en el organismo -sta s1lo se sintetice en proporciones m,nimas* Existen muc'as prote,nas 'umanas /ue& una 0e( fabricadas& no pueden desempe.ar su funci1n a menos /ue sufran ciertas modificaciones en las c-lulas somticas& cambios -stos /ue una bacteria no es capa( de operar> nos referimos& por ejemplo& a la adici1n de cadenas laterales de a(7cares* Las le0aduras& al igual /ue las c-lulas superiores simples& s, pueden& pero la ma/uinaria bio/u,mica /ue emplean difiere de la /ue trabaja en animales ) 'umanos* lgunas glicoproteinas 3del griego glykos, dulce4 s1lo se sinteti(an de forma correcta en culti0os celulares animales o 'umanos* &.OBTENCION DE INSULINA PORCINA ) producci1n de la 'ormona en bacterias a tra0-s de los procedimientos de ingenier,a gen-tico9molecular* La insulina extra,da del pncreas de cerdo difiere de la 'umana en un aminoi,cido> el intercambio catal,tico mediado por en(imas la transforma en insulina 'umana (izquierda). La 'ormona producida en bacterias mediante ingenier,a gen-tica permite cubrir la creciente demanda& sin /ue importe la disponibilidad de la insulina de cerdo* En el m-todo mostrado& los genes /ue cifran cada una de las dos cadenas /ue forman la insulina madura se colocaron en el genoma bacteriano justo detrs de los /ue dirigen la s,ntesis de beta9galactosidasa (derecha). Las bacterias sinteti(an esta en(ima junto con la cadena

correspondiente* %espu-s de separar las cadenas de insulina de la en(ima& )a s1lo /ueda unirlas* La 'ormona eritropo)etina 3E+O4 constitu)e un buen ejemplo* +ara su fabricaci1n se recurre a grandes culti0os de c-lulas de o0ario de 'mster c'ino* No se piense /ue este tipo de culti0o precisa del sacrificio continuado de animales* Las c-lulas pertenecen a l,neas celulares /ue se multiplican en culti0o desde 'ace d-cadas* Gracias a ciertas alteraciones 'ereditarias 'an ad/uirido la facultad de di0idirse de forma indefinida& como si de organismos unicelulares se tratara* +ara la s,ntesis de prote,nas se toman estas c-lulas ) se las culti0a en suspensi1n en tan/ues de 'asta ms de mil litros de capacidad* El proceso guarda estrec'a semejan(a con la fabricaci1n de cer0e(a& en la /ue se culti0a le0adura en grandes cubas con una soluci1n de maltosa* +ero las c-lulas de 'mster c'ino son mu) exigentes en cuanto a sus re/uerimientos nutricionales* Necesitan una suerte de sopa artesanal formada por aminocidos* 'idratos de carbono& 0itaminas ) factores de crecimiento /ue les son 0itales* dems las c-lulas de los mam,feros se di0iden a una 0elocidad muc'o menor /ue las bactenas las de o0ario de 'mster c'ino lo 'acen cada BI 'oras9& por lo /ue 'a) /ue esperar una semana para disponer de un n7mero suficiente de c-lu,as a partir del culti0o inicial* El procedimiento es caro ) la 'igiene prioritaria* Cna sola bacteria /ue pasara del alambi/ue al medio de culti0o& en cual/uiera de las distintas fases de multiplicaci1n& bastar,a para coloni(arlo ) arruinar todo el proceso* Las c-lulas de 'mster 0ierten las mol-culas de eritropo)etina reci-n sinteti(ada al medio l,/uido en0ol0ente* 2abr luego /ue separarlas del resto de substancias a tra0-s de di0ersos procesos de purificaci1nJ pre&cipitaci1n& filtraci1n ) cromatograf,a en columna* La s,ntesis de prote,nas en culti0os bacterianos presenta el incon0eniente de /ue -stas no pueden extraerse directamente del medio* 6, pueden sacarse con facilidad de las propias c-lulas* Las cepas industriales sinteti(an mol-culas en cuant,a tal& /ue embota la metaboli(aci1n necesaria para la 0ida de las bacterias*Estas reaccionan con la formaci1n de grnulos insolubles o cuerpos de inclusi1n* Cuando se ju(ga /ue se tiene una cantidad suficiente de prote,na& se filtran las bacterias ) se las somete a grandes

presiones* Luego se solubili(an los agregados de prote,nas* En esta fase se debe ir con tiento para /ue la mol-cula pueda recuperar al final su estructura espacial natural* 6i no lo lograra& tampoco podr,a desempe.ar su funci1n* 6e trata de una 0erdadera obra de arte bio/u,mica* lgo as, como transformar un 'ue0o

duro en uno crudo* 6e utili(an grandes cantidades de 'idrocloruro de guanidinio* Esta sal des'ace los agregados proteicos dejando desplegada la cadena de aminocidos* La concentraci1n de la sal se reduce de forma progresi0a para dar tiempo a /ue las cadenas recuperen su estructura espacial fisiol1gica* Esta renaturali(aci1n& delicada ) laboriosa& tiene un rendimiento 0ariable /ue depende de la prote,na*

LAS BACTERIAS PRODUCTORAS 'acen frente al exceso de prote,na fornea mediante la formaci1n de agregados densos& los cuerpos de inclusi1n* /u, los 0emos en color oscuro en imagen de microscopia electr1nica* +ueden llegar a representar la mitad del peso de la c-lula* Cna 0e( lisadas las bacterias& las prote,nas se separan con facilidad& pero 'a) /ue a.adir ciertas sales /ue faciliten su despliegue* La concentraci1n de las sales remite de forma progresi0a para /ue la prote,na adopte su estructura espacial natural& configuraci1n en la /ue puede ejercer su funci1n* La imagen fue tomada por =ictor Colombo ) !rancois Gerber& de 2offmann La "oc'e de Basilea* Fa#"acia !e '#an(a Cna fuente alternati0a de s,ntesis de prote,nas recombinantes con finalidad terap-utica nos la ofrecen animales ) plantas transg-nicos* 2asta 'o) se 'an introducido genes 'umanos en embriones femeninos de cabras& cerdos& o0ejas ) 0acas* Estos genes lle0aban asociado un interruptor /ue faculta 7nicamente a las c-lulas de las mamas para producir la mol-cula* El producto se recoge directamente de la lec'e del animal* Con este sistema se podr,an fabricar& a un coste barato& prote,nas 'umanas en gran cantidad* %e la Kfarmacia de granjaK sali1 la antitripsina alfa 3 T4& extra,da en lec'e de o0eja*

Esta en(ima facilita la respiraci1n en pacientes afectos de cierto tipo de enfisema pulmonar* 2asta entonces& la prote,na se extra,a de plasma 'umano ) s1lo pod,an tratarse alrededor de un tercio de los pacientes con un coste de G&D millones de pesetas

por indi0iduo* 6i en cada litro de lec'e de o0eja transg-nica 'a) unos G@ gramos de T& con un reba.o de D@@ o 5@@@ o0ejas transg-nicas se tendr,a bastante para tratar a todos los enfermos* Esta t-cnica presenta algunos incon0enientes* #u) laboriosa& el ,ndice de -xito en la obtenci1n de un solo animal /ue produ(ca la substancia deseada en cantidad suficiente es mu) bajo* No basta& pues& con un animal> se re/uiere un reba.o entero* +or eso se in0estigan m-todos /ue permitan donar indi0iduos mediante di0isi1n de embriones o transferencia de n7cleos* Luego se podr,a dirigir la multiplicaci1n de los indi0iduos donados con t-cnicas tradicionales de cr,a de ganado* La uni0ersalidad del c1digo gen-tico est borrando la frontera /ue separaba la biolog,a KrojaK de la K0erdeK& la (oolog,a de la botnica* Cn e/uipo de in0estigaci1n dirigido por #ic'ael C* #ar9den& del 2ospital Bicetre& 'a logrado insertar el gen de la 'emoglobina& un pigmento sangu,neo& en plantas de tabaco 3se conf,a en poder fabricar un sustituto de la sangre a partir de esta 'emoglobina4* %os compa.,as estadounidenses esperan producir 0acunas& anticuerpos monoclonales ) otras prote,nas terap-uticas en plantas de ma,( ) soja* La nat)#ale*a co+ia lo largo de millones de a.os de e0oluci1n& las prote,nas 'an ido determinndose para desempe.ar funciones especificas /ue fracasaron& desaparecieron* +or ello no cabe esperar efectos t1xicos& cancer,genos o terat1genos en el tratamiento sustituti0o de prote,nas aplicado a pacientes con alg7n defecto fisiol1gico en la s,ntesis de las mis9 mas* Las prote,nas recombinantes de primera generaci1n tienen la misma secuencia de aminocidos /ue las naturales* Casi todas las prote,nas terap-uticas /ue se pueden comprar 'o) en d,a pertenecen a esta categor,a& con independencia de si se 'an preparado en culti0os de bacterias o de c-lulas superiores* Cn ejemplo mu) t,pico lo proporciona la eritropo)etina* 2ubo /ue esperar 'asta la introducci1n de la ingenier,a gen-tica para disponer de esta 'ormona* En el 'ombre adulto& la mol-cula se sinteti(a en el ri.1n para /ue estimule en la m-dula 1sea la diferenciaci1n de las c-lulas precursoras a eritrocitos* Las personas /ue padecen una

enfermedad

renal

cr1nica

sinteti(an

menudo

cantidades

insuficientes

de

eritropo)etina* Las sesiones de dilisis suplen la funci1n de filtro del 1rgano lesionado& pero no corrigen el d-ficit 'ormonal* parece as, anemia& /ue causa un descenso en el aporte de ox,geno a los tejidos* La calidad de 0ida de los enfermos disminu)e de forma notableJ se /uejan de cansancio cr1nico& sensaci1n de fr,o ) debilidad general de las extremidades* ntes se recurr,a a repetidas transfusiones como 7nico medio para dems del consabido riesgo de contagio de infecciones latentes& mitigar los s,ntomas*

las transfusiones sobrecargan el organismo con 'ierro& lo /ue afecta al ',gado ) al cora(1n* 6i se administra a estos pacientes eritropo)etina recombinante& los gl1bulos rojos aumentan en pocas semanas ) el estado f,sico ) ps,/uico del indi0iduo mejora* En la actualidad entre el G@ ) el D@ por ciento de todas las personas en dilisis en el mundo& lo /ue supone unas G@@*@@@& reciben tratamiento 'ormonal sustituti0o* Todas disfrutan de una ma)or calidad de 0ida gracias a la ingenier,a gen-tica* Este ejemplo ilustra a la perfecci1n la capacidad de las prote,nas recombinantes para tratar patolog,as ad/uiridas& no s1lo 'ereditarias como la 'emofilia ) el enanismo cong-nito* S$nte i a "e!i!a El conocimiento creciente de la reaci1n entre la estructura terciaria 3tridimensional4 de las mol-culas biol1gicas ) su funci1n abre el 'ori(onte a una s,ntesis a medida de las indicaciones terap-uticas* Bien es cierto /ue las mol-culas naturales 'an sufrido a lo largo de la e0oluci1n un proceso de optimi(aci1n& mediante procesos de mutaci1n ) selecci1n* +ero ello no significa /ue no se puedan mejorar para su empleo cl,nico* s,& se pueden unir genes o fragmentos de genes para formar material gen-tico nue0o* La mol-cula sinteti(ada seg7n las nue0as instrucciones gen-ticas se conoce como prote,na de fusi1n o ',brida* 6e recurre a esa prctica para combinar anticuerpos monoclonales& o s1lo sus regiones de reconocimiento& con otras prote,nas* %e estas /uimeras moleculares se espera en la luc'a contra el cncer la eficacia de un pro)ectil mgico /ue controle por s, mismo su llegada al objeti0o* La parte correspondiente al anticuerpo es la encargada de reconocer a la c-lula tumoral& anclarse en ella e introducir en su interior el principio acti0o /ue lle0a acoplado& /ue podr,a ser una toxina

bacteriana* La inmunotoxina es una especie de /uimiofrmaco de acci1n preferente contra las c-lulas tumorales* 6e pueden fabricar anticuerpos biespec,ficos mediante fusi1n gen-tica* Estas mol-culas tienen dos bra(os diferentes ) cada uno de ellos reconoce un elemento distinto> de esta manera pueden poner en contacto una c-lula tumoral ) una c-lula asesina del sistema inmunitario* 6in embargo& no se conoce prcticamente ninguna estructura molecular exclusi0a de las c-lulas cancerosas& lo /ue obliga a extremar las precauciones con este tipo de frmacos* empleo repetido* Otra estrategia /ue permite adecuar la estructura de la prote,na a los re/uerimientos de su funci1n terap-utica consiste en la eliminaci1n de alguna de sus partes* El laboratorio Boe'ringer #ann'eim de +en(berg aplic1 esa idea al desarrollo de la reteplasa& un medicamento indicado en el tratamiento del infarto agudo de miocardio* El infarto se produce por la oclusi1n de un 0aso coronario con un cogulo* 6e impone disol0er en seguida el trombo& formado por un entramado de fibrina ) pla/uetas> de no 'acerlo& aumenta la masa de tejido lesionado por la falta de perfusi1n* +ara e0itarlo se dispone de 0arias en(imas& como la estrepto/uinasa bacteriana )& desde 'ace die( a.os& el acti0ador tisular del plasmin1geno 3t+ 4* agregados de fibrina* En la prote,na t+ se distinguen 0arias regiones o dominios constituidos por segmentos mbas mol-culas catali(an el paso de plasmin1geno a plasmina& la en(ima de nuestro organismo encargada de des'acer los dems& las estructuras extra.as al organismo& como son las toxinas bacterianas& pro0ocan una respuesta inmunitaria /ue macti0a la mol-cula ) limita el

de la cadena de aminocidos* Los dominios se corresponden en el material gen-tico a segmentos codificantes 3exones4& /ue en los mam,feros se encuentran separados por segmentos no codificantes 3intrones4* La ma)or,a de los dominios tienen funciones conocidas* Con ingenier,a gen-tica se podr,an suprimir en las prote,nas sinteti(adas artificialmente las funciones innecesarias o incluso indeseables para un tratamiento mediante la eliminaci1n de los dominios correspondientes* El ',gado& por ejemplo& elimina rpidamente de la sangre el t+ natural* +ara /ue se

encuentre disponible all, donde ms interesa durante un tiempo prolongado& deben

administrarse dosis relati0amente altas* Esto comporta un ele0ado riesgo de 'emorragias internas /ue pueden lesionar el cerebro ) causar parlisis& si no la muerte* 7n presenta el t+ otra caracter,stica indeseableJ su tendencia a fijarse firmemente a la superficie del cogulo de fibrina 3donde reacciona con plasmin1geno ligado4& lo /ue le impide actuar en el interior* Con el fin de mejorar la eficacia cl,nica de la prote,na& se introdujo en las bacterias productoras solamente la informaci1n gen-tica correspondiente a los dos 7ltimos dominios del total de cinco /ue componen la mol-cula* "ige un principio en 0irtud del cual cada dominio adopta su estructura tridimensional de forma independiente de los dems* %e no cumplirse esta premisa& se producir,a la p-rdida de la capacidad funcional de la prote,na ) se con0ertir,a en objeto de ata/ue por el sistema inmunitario& pues al presentar alterada su estructura espacial la reconocer,a como extra.a* La reteplasa 3r+ 4& esta mol-cula de s,ntesis a medida& tiene una 0ida media en el organismo tres 0eces ms larga /ue su contrapartida natural* ma)or ) disol0er antes el cogulo* dems& se une de manera ms d-bil a la superficie de los trombos& por lo /ue puede alcan(ar una profundidad l sinteti(arse en bacterias& carece de las mol-culas de a(7car /ue se agregan al final de la s,ntesis al t+ * +or fortuna& este detalle no s1lo no interfiere en su funci1n& sino /ue incluso la mejora& pues fa0orece /ue su eliminaci1n se retarde* La ma)or 0irtud de esta mol-cula le 0iene de su prolongada permanencia en la sangreJ no se tiene /ue administrar en infusi1n continua& como sucede con el t+ & sino /ue puede in)ectarse* nte un infarto agudo de miocardio& cada minuto cuenta& ) la reteplasa ofrece la posibilidad de iniciar el tratamiento de forma inmediata* Las prote,nas tambi-n se optimi(an mediante procesos /ue produ(can mutag-nesis dirigidas* 6e pueden cambiar pie(as mu) concretas de un gen donado o pro0ocar mutaciones aleatorias en segmentos cortos* Con ello se obtiene una serie de prote,nas mutadas 3mutainas4& alguna de las cuales puede presentar la caracter,stica buscada* 0eces& la modificaci1n de la estructura proteica mediante ingenier,a gen-tica s1lo persigue la simplificaci1n del proceso de s,ntesis* La mutaina betafer1n& autori(ada para el tratamiento de la esclerosis m7ltiple& difiere de su e/ui0alente 'umano& el interfer1n beta& en un solo aminocidoJ se 'a sustituido& en cierta posici1n& el aminocido cisteina

por se9rina con el fin de e0itar la formaci1n de puentes disulfuro no deseados 3estas uniones trans0ersas entre ciste,nas estabili(an la estructura tridimensional de la prote,na cuando aparecen en las locali(aciones correctas4* 6us propiedades terap-uticas no se 0en afectadas por esta modificaci1n* +ero las mutainas presentan secuencias extra.as al organismo 3aun/ue se deban a una alteraci1n singular de la cadena de aminocidos4 ) pueden& en principio& inducir la formaci1n de anticuerpos /ue inacti0ar,an en sangre el medicamento en posteriores administraciones* Este 7ltimo supuesto carece de inter-s en las prote,nas sinteti(adas con procedimientos de la ingenier,a gen-tica /ue se utili(an en diagn1stico* 6e 'an optimi(ado ciertas en(imas para su empleo como biocatali(adores en reacciones de identificaci1n mediante aportaci1n de substancias mutgenas a las bacterias con el gen forneo ) selecci1n de las productoras de la 0ariante en(imtica id1nea* La imposibilidad de administrar las prote,nas terap-uticas por 0,a oral constitu)e una objeci1n de peso* En el tracto digesti0o& se escinden como cual/uier otra prote,na de la ingesta* +ero el recurso a pol,meros disociables pudiera ser la soluci1n para /ue las mol-culas alcan(aran la circulaci1n& sin sufrir da.o alguno& ) se transportaran luego al lugar de destino* 6e in0estiga tambi-n la administraci1n indolora de insulina a tra0-s de la piel con 0apori(ador a presi1n* El la#'o ca"ino ,a ta la -a#"acia El mercado de la salud est soI<metid o a la presi1n de los costes* Los con0incentes -xitos /ue se consiguen en muc'os casos con las prote,nas recombinantes justifican su precio* relati0amente alto en comparaci1n con los frmacos sint-ticos tradicionales* Obedece esto a la cuantiosa in0ersi1n en in0estigaci1n ) desarrollo ) a la laboriosa producci1n de los medicamentos* El culti0o de c-lulas de mam,fero a escala industrial resulta especialmente delicado* dems& las prote,nas se suelen administrar a dosis altas& del orden de los 5@@ miligramos& lo /ue encarece a7n ms el tratamiento con principios acti0os de por s, tan caros* %esde otro punto de 0ista financiero* las prote,nas recombinantes salen mejor paradas* Cno de los factores /ue ms encarecen los frmacos tradicionales es el tiempo

empleado en su desarrollo* un inter0alo /ue en los G@ 7ltimos a.os se 'a /uintuplicado* +or regla general& suelen transcurrir ms de die( a.os 'asta su introducci1n en el mercado* Cna 0e( se inician los primeros ensa)o pred,nicos& un nue0o principio acti0o /u,mico s1lo tiene una probabilidad del die( por ciento de obtener la autori(aci1n necesaria para su comerciali(aci1n* El tiempo medio /ue se precisa para desarrollar un frmaco recombinante es notablemente ms corto ) la proporci1n de -xitos& un I@ por ciento& claramente superior* Cno de los moti0os por los /ue se explican estas circunstancias es la m,nima toxicidad /ue presentan las prote,nas en comparaci1n con los productos /u,micos* El empleo farmacol1gico de una prote,na cu)o mecanismo de acci1n se cono(ca es muc'o menos arriesgado /ue el de una substancia sint-tica* Te#a+ia '.nica El el futuro las prote,nas terap-uticas se sinteti(arn directamente en el interior del organismo del enfermo* El tratamiento con frmacos recombinantes de tercera generaci1n no consistir en la administraci1n substituti0a de la prote,na defecti0a& sino en la inserci1n de material gen-tico para /ue sean las propias c-lulas las /ue fabri/uen la mol-cula* Con a)uda de 0ectores apropiados& el %N penetrar en el interior de las c-lulas del organismo ) dirigir la producci1n de la prote,na indicada* 2asta el momento se 'a ensa)ado con dos tipos de 0ectoresJ 0irus modificados& sobre todo adeno0irus ) retro0irus& ) liposomas 3microsferas lipidicas4 ) otras membranas* Con su a)uda comen(ar el tratamiento causal* no s1lo sintomtico& de las enfermedades gen-ticas* Naturalmente* no se pretende modificar los genes de las c-lulas germinales 3o0ocitos& espermato(oides ) sus precursores4* 6e trata ms bien de facultar a c-lulas somticas del paciente para /ue ellas mismas se a)uden* 7n /uedan 0arios obstculos por superar* pero este m-todo dilatar el 'ori(onte de las posibilidades terap-uticas* %e 'ec'o* la administraci1n ex1gena de estas prote,nas s1lo tiene sentido si cumplen su funci1n en la sangre o en el medio l,/uido de los tejidos* Cuando falta un polip-ptido /ue forma parte de la estructura de la misma c-lula somtica /ue lo produce* su sustituci1n no es tan sencilla* +recisamente -ste es el problema /ue presentan las personas /ue padecen fibrosis /uistica* La muco0iscidosis* como tambi-n se la conoce& es una patolog,a 'ereditaria

frecuente /ue afecta a uno de cada dos mil reci-n nacidos en pa,ses occidentales* La caracter,stica /ue le da nombre es la presencia de secreciones especialmente 0iscosas en el rbol respiratorio ) en los 1rganos del aparato digesti0o& en los /ue produce lesiones progresi0as* El paciente se encuentra amena(ado de muerte preco(& a menudo por complicaciones pulmonares* Esta enfermedad mortal s1lo se desencadena si se 'ereda el gen defectuoso de ambos progenitores* +ara e0itar la enfermedad& las c-lulas afectadas deber,an sinteti(ar la prote,na implicada 3un canal de iones cloruro4& ) colocarla en su membrana* 6e pretende distribuir copias del gen intacto por toda la superficie pulmonar mediante 0apori(aci1n con un aerosol de %N ) l,pidos /ue deber,a facultar a la c-lula receptora a sinteti(ar por s, misma la prote,na* La in0estigaci1n experimental sobre transferencia gen-tica fuera del organismo (ex vivo) en c-lulas receptoras extra,das del paciente 'a a0an(ado ms /ue la transferencia directa en el interior del organismo (in vivo) +ara dotar& por ejemplo& a c-lulas sangu,neas de una nue0a carga gen-tica& se extraen del enfermo c-lulas madre 'ematopo)-ticas ) se culti0an cierto tiempo* 6i se infecta a -stas con 0ectores 0,ricos* todas las c-lulas maduras /ue pro0engan de una c-lula madre modificada presentarn el nue0o gen& el sano* 6iguiendo este principio& en 5AA@ se procedi1 al primer ensa)o de terapia g-nica en 'umanos* en una jo0en con d-ficit cong-nito de desaminasa de adenosina& una enfermedad en la /ue se acumulan productos del metabolismo celular* Esta patolog,a se ensa.a con las c-lulas precursoras de los leucocitos ) es causa de un gra0e defecto inmunitario* En todo el mundo s1lo se conocen treinta casos* #s de la mitad de todos los ensa)os cl,nicos con terapias g-nicas se centran 'o) en el tratamiento del cncer& la segunda causa de muerte en los pa,ses occidentales* La ma)or,a de las 0eces& el origen del cncer se sit7a ms en alteraciones /ue se 0an acumulando durante la 0ida celular /ue en factores 'ereditarios* Cno de los enfo/ues terap-uticos se basa en a)udar al organismo a enfrentarse con ma)or resoluci1n ante las c-lulas tumorales* Cn posible mecanismo podr,a consistir en

la administraci1n de una suerte de 0acuna con c-lulas cancerosas del paciente modificadas mediante ingenier,a gen-tica para /ue sinteti(aran mediadores inmunitarios& como la interleu/uina B* El tumor captar,a de esta manera la atenci1n de las c-lulas de defensa ) se producir,a una respuesta inmunitaria* 6e 'an conseguido los primeros -xitos en experimentaci1n con ratones& pero en 'umanos no se 'a descrito ning7n tratamiento rese.able* LOS ANIMALES TRANSGENICOS constitu)en una fuente alternati0a de prote,nas terap-uticas recombinantes* El gen /ue cifra la prote,na se combina con un interruptor biol1gico /ue s1lo se acti0a en las c-lulas de las mamas* La prote,na se puede as, aislar en la lec'e* Con este fin se 'a introducido el gen de la en(ima alfa9antitripsina en embriones 'embra de o0eja* 2asta a'ora la 7nica fuente de semejante en(ima& mu) rara& era el plasma 'umano* Otro planteamiento apunta a sensibili(ar el tumor a un frmaco mediante transferencia de genes* En el tratamiento del glioblastoma& el tumor cerebral ms frecuente& se ensa)a la transferencia del gen del 0irus 'erpes simplex /ue codifica la /uinasa de timidina* Las c-lulas cancerosas en di0isi1n se tornan sensibles a la acci1n de un frmaco anti0,rico& el ganciclo0ir* Los resultados intermedios son esperan(adoresJ se 'a obser0ado un retroceso de la masa tumoral en aproximadamente la mitad de los pacientes* Los laboratorios mgen ) No0artis in0estigan otra estrategia de terapia g-nica en el

enc-falo /ue toda0,a no 'a superado la fase inicial de ensa)o cl,nico* 6e trata de la enfermedad de +ar:inson& en la /ue se da una p-rdida progresi0a de c-lulas ner0iosas productoras de dopamina* +or a'ora& lo ms /ue se puede es frenar el ritmo de e0oluci1n de la enfermedad& pero no curarla* En un modelo animal se introdujo en la regi1n cerebral afecta el gen del factor neurotr1fico deri0ado de c-lulas de la gua mediante un 0ector adeno0irico ) se logr1 detener el proceso de muerte celular* Los ejemplos seleccionados demuestran /ue con la ingenier,a gen-tico9molecular podemos afrontar el cncer ) otras enfermedades de tratamiento poco efecti0o o desconocido 'asta el momento* Los principios fundamentales de la terapia pueden entenderse con experimentaci1n animal* $ es a/u, donde ms estrec'amente deben

trabajar la ciencia ) la industria& por/ue para conseguir resultados significati0os se necesitan estudios a ma)or escala de la /ue pueden asumir e/uipos de in0estigaci1n reducidos* En esta l,nea& el laboratorio Boe'ringer #ann'eim ) el 2ospital 6an "afael crearon a finales del a.o pasado en #iln la compa.,a #ol#ed 6p * Los objeti0os de esta asociaci1n se centran en el desarrollo de 0ectores para terapia g-nica& la manipulaci1n de c-lulas de pacientes ) el correspondiente diagn1stico ) los anlisis de seguridad por procedimientos normali(ados* Los m-dicos pueden recoger material& dejar muestras de c-lulas del paciente para /ue se analicen o en0iarlo directamente en persona* Cna empresa similar se 'a fundado en julio de este a.o en la Cni0ersidad de California en 6an %iego* Es cierto /ue la inserci1n perfecta de %N ) la expresi1n de la prote,na /ue codifica presentan toda0,a ciertos problemas* +ero cuando se superen los obstculos tendremos al alcance el tratamiento etiol1gico de enfermedades gra0es mediante mol-culas biol1gicas* Con a)uda de la terapia g-nica se pueden e0itar algunas de las dificultades /ue plantea el tratamiento basado en la administraci1n directa de prote,nas recombinantes* 6i fuera posible reprogramar c-lulas sangu,neas para /ue sinteti(aran una prote,na terap-utica concreta& el organismo obtendr,a el beneficio de unos ni0eles terap-uticos constantes en sangre* 6i la prote,na fuera necesaria s1lo en algunos tejidos& se podr,a limitar a ellos su producci1n& con lo /ue& por un lado& se e0itar,a la eliminaci1n biol1gica preco( de la mol-cula )& por otro& el paciente se a'orrar,a los efectos indeseados producidos por la acti0idad del frmaco en otras regiones del organismo* Esto mismo es lo /ue 'a obligado a abandonar un tratamiento contra el cncer en el /ue se 'ab,an depositado grandes esperan(asJ la administraci1n ex1gena de mediadores inmunitarios& como interferones e interleu/uinas> los efectos secundarios son demasiado importantes* Pe# +ecti/a !e -)t)#o lemania es el pa,s con ma)or numero de frmacos de s,ntesis gen-tica disponibles en el mercado& pero produce 7nicamente F de los GB /ue estaban autori(ados en 5AAF en todo el mundo* 61lo uno de ellos se desarroll1 por entero en ese pa,s* El laborioso proceso de autori(aci1n& debido a la gran desconfian(a /ue la ingenier,a gen-tico9

molecular suscita entre la poblaci1n alemana& 'a limitado su desarrollo ) 'a for(ado a las empresas a trabajar en otros pa,ses* Los laboratorios 2oec'st tu0ieron /ue esperar trece a.os a /ue se les autori(ase la fabricaci1n de insulina 'umana* +ara entonces )a se 'ab,a perfeccionado un proceso de s,ntesis menos agresi0o para el medio ambiente& pero la autori(aci1n no inclu,a estas modificaciones* Los frmacos recombinantes 'an aumentado la seguridad de las terapias sustituti0as cr1nicas ) 'an +Osibilitado el ftatamiento de otras* La situaci1n e0oluciona de forma 'arto prometedoraJ en 5AAF 'ab,a BDG medicamentos recombinantes en fase de ensa)o cl,nico ) muc'os otros estn en las fases de desarrollo pre0ias* medida /ue aumente nuestro conocimiento de los mecanismos moleculares sub)acentes a los distintos procesos patol1gicos se abrirn nue0as posibilidades de diagn1stico ) tratamiento ) se simplificar el descubrimiento de nue0os principios acti0os de origen /u,mico* s,& una prote,na puede ser0ir de 'erramienta para comprobar la eficacia biol1gica de las mol-culas sint-ticas mediante procesos de criba mu) amplios& como la comprobaci1n de su capacidad para blo/uear un receptor espec,fico* La medicina del futuro se fundar cada 0e( ms en el conocimiento de nuestros genes* ntes del B@@D se 'abr secuenciado todo el %N 'umano en el marco del pro)ecto Genoma* Coordinado en todo el mundo ) con unos costes totales de unos G@@@ millones de d1lares es el ma)or pro)ecto de in0estigaci1n conocido* Est al alcance la b7s/ueda de genes con funciones de inter-s m-dico* En manos de los 'ombres /uedar la responsabilidad de 'acer buen uso de este conocimiento* LAS PROTENAS TERAPEUTICAS del futuro& las de tercera generaci1n& se sinteti(arn en el propio cuerpo del paciente* El objeti0o se centra en introducir las instrucciones gen-ticas /ue dirigen la producci1n de la prote,na en 0e( de administrar la prote,na )a formada* La transferencia gen-tica puede tener lugar en c-lulas /ue se tomen del paciente (ex vivo) o directamente en el interior del organismo (in vivo). Como 0ectores g-nicos se ensa)an 0irus inacti0ados ) liposomas& unas estructuras esf-ricas constituidas por l,pidos cati1nicos en cu)o interior se encuentra el %N /ue se pretende transferir*

BIOTECNOLOGA EN MEDICINA INGENIERIA GENETICA Qu es la clonacin? Si nos referimos al mbito de la Ingeniera Gentica, clonar es aislar y multiplicar en tubo de ensayo un determinado gen o, en general, un trozo de !"# Sin embargo, !olly no es producto de Ingeniera Gentica# $n el conte%to a &ue nos referimos, clonar significa obtener un indi'iduo a partir de una clula o de un n(cleo de otro indi'iduo# $n los animales superiores, la (nica forma de reproduccin es la se%ual, por la &ue dos clulas germinales )'ulo y espermatozoide* se unen, formando un zigoto )o +ue'o*, &ue se desarrollar +asta dar el indi'iduo adulto# ,a reproduccin se%ual fue un in'ento e'oluti'o )del &ue &uedaron e%cluidas las bacterias y muc+os organismos unicelulares*, &ue garantiza &ue en cada generacin de una especie 'an a aparecer nue'as combinaciones de genes en la descendencia, &ue posteriormente ser sometida a la dura prueba de la seleccin y otros mecanismos e'oluti'os# ,as clulas de un animal proceden en (ltima instancia de la di'isin repetida y diferenciacin del zigoto# ,as clulas somticas, &ue constituyen los te-idos del animal adulto, +an recorrido un largo camino .sin retorno., de modo &ue, a diferencia de las clulas de las primeras fases del embrin, +an perdido la capacidad de generar nue'os indi'iduos y cada tipo se +a especializado en una funcin distinta )a pesar de &ue, sal'o e%cepciones, contienen el mismo material gentico*# $n los a/os 01, Gurdon logr colecciones de ranas idnticas a base de insertar n(cleos de clulas de fases lar'arias tempranas en o'ocitos )'ulos* a los &ue se +aba despo-ado de sus correspondientes n(cleos# 2ero el e%perimento fracasa si se usan como donadoras clulas de ranas adultas# !esde +ace unos a/os se 'ienen obteniendo

mamferos clnicos, pero slo a partir de clulas embrionarias muy tempranas, debido a &ue a(n no +an entrado en diferenciacin )a esta propiedad se la suele llamar totipotencia*# "o es e%tra/o pues el re'uelo cientfico cuando el e&uipo de Ian 3ilmut, del Instituto 4oslin de $dimburgo comunic &ue +aban logrado una o'e-a por clonacin a partir de una clula diferenciada de un adulto# $sencialmente el mtodo )&ue a(n presenta una alta tasa de fracasos* consiste en obtener un 'ulo de o'e-a, eliminarle su n(cleo, sustituirlo por un n(cleo de clula de o'e-a adulta )en este caso, de las mamas*, e implantarlo en una tercera o'e-a &ue sir'e como .madre de al&uiler. para lle'ar el embarazo# s pues, Dolly carece de padre y es el !ulo contr"#uye producto de tres "madres": la donadora del

con el c"toplasma $%ue cont"ene& adem's m"tocondr"as %ue lle!an un poco de mater"al (en)t"co*& la donadora del n+cleo $%ue es la %ue aporta la "nmensa mayor,a del ADN*& y la %ue par" & %ue (en)t"camente no aporta nada5ientficamente se trata de un logro muy interesante, ya &ue demuestra &ue, al menos ba-o determinadas circunstancias es posible .reprogramar. el material gentico nuclear de una clula diferenciada )algo as como 'ol'er a poner a cero su relo-, de modo &ue se comporta como el de un zigoto*# !e este modo, este n(cleo comienza a .dialogar. adecuadamente con el citoplasma del 'ulo y desencadena todo el comple-o proceso del desarrollo intrauterino# Dolly no es una cop"a "d)nt"ca de la "madre" %ue don n+cleo $no se ol!"de %ue el nuclear& las el

!ulo cont"ene ese pe%ue.o ADN (en)t"cas de Dolly no

de la m"tocondr"a*- Aun%ue am#as comparten el m"smo ADN "nstrucc"ones e/per"mentaron e/actamente el m"smo t"po y com#"nac" n de est,mulos %ue los de su "madre nuclear"- Esto se de#e a los 0en menos de ep"()nes"s& comple1as ser"es de "nteracc"ones

entre los (enes y el entorno& y a%u, entendemos por entorno desde los 0actores presentes en el c"toplasma del !ulo& pasando por los procesos de 0ormac" n del em#r" n20eto& a su !e3 somet"dos al pecul"ar am#"ente uter"no& y alcan3ando a la !"da e/trauter"na $est,mulos al nacer& per"odo de lactanc"a& relac"ones con la madre& "nteracc"ones "soc"ales" con otros "nd"!"duos de la espec"e& etc*- En resum"das cuentas& el ADN no cont"ene un pro(rama un,!oco de "nstrucc"ones& s"no %ue es 0le/"#le& y la e/pres" n (en)t"ca en cada "nd"!"duo %ueda mat"3ada por mult"tud de 0actores& %uedando "a#"erta" con una 0"nal"dad adaptat"!a clara 2ara &u ser'ira la clonacin en animales? 5omo suele ocurrir con muc+os a'ances cientficos de 'anguardia, a&u puede &ue tambin se +ayan e%agerado las posibles deri'aciones prcticas inmediatas, aun&ue no cabe duda &ue a medio y largo plazo, cuando la tcnica se 'aya perfeccionando, podra encontrar numerosos campos de aplicacin# )!e-amos aparte el mbito de la biologa fundamental, &ue tendr &ue .+incar el diente. en los fascinantes interrogantes bsicos abiertos, sobre todo relati'os al ciclo celular y al control de la diferenciacin*# 5omo suele ocurrir con muc+os a'ances cientficos de 'anguardia, a&u puede &ue tambin se +ayan e%agerado las posibles deri'aciones prcticas inmediatas, aun&ue no cabe duda &ue a medio y largo plazo, cuando la tcnica se 'aya perfeccionando, podra encontrar numerosos campos de aplicacin# )!e-amos aparte el mbito de la biologa fundamental, &ue tendr &ue .+incar el diente. en los fascinantes interrogantes bsicos abiertos, sobre todo relati'os al ciclo celular y al control de la diferenciacin*#

6no de los ob-eti'os buscados por el grupo de 3ilmut )en alianza con una empresa* es unir la tcnica de la clonacin con la de Ingeniera gentica de mamferos con ob-eto de producir medicamentos o sustancias (tiles comercialmente# ,a idea es &ue una 'ez &ue se +aya obtenido un animal transgnico interesante )por e-emplo, o'e-as o 'acas &ue en su lec+e secretan sustancias teraputicas determinadas por un gen introducido pre'iamente*, ese indi'iduo ser'ira de .molde. para generar 'arios e-emplares clnicos# 7tra aplicacin )ms en la lnea de la ganadera tradicional* sera asegurar copias de un e-emplar &ue +aya mostrado buenos rendimientos )en carne, en lec+e, etc#*# ,a clonacin e'itara &ue su buena combinacin de genes )su genotipo* se .diluyera. al cruzarlo se%ualmente con otro# Sin embargo, mientras el coste de la tcnica sea ele'ado, no estar al alcance de las e%plotaciones ganaderas con'encionales# 2ero adems +abra &ue tener muc+a precaucin con la amenaza de prdida de di'ersidad gentica de la caba/a ganadera, ya &ue si se impusiera este mtodo, se tendera a la uniformidad )una tendencia ya presente en la agricultura y ganadera actuales*# 4ecordemos &ue la biodi'ersidad es un recurso 'alioso tambin en los .ecosistemas agropecuarios., ya &ue supone una reser'a de recursos genticos adaptados a di'ersas condiciones ambientales y a di'ersos conte%tos socioeconmicos# Se +a +ablado igualmente de &ue la clonacin podra representar la sal'acin .in e%tremis. de ciertas especies sil'estres amenazadas de e%tincin y difciles de criar en cauti'idad# 2ero si se llega a este caso, sera el triste reconocimiento de nuestro fracaso de conser'arlas por medios ms simples y naturales# estu'iera abocada de todas dems, lo ms probable es &ue, a la .muerte gentica., debido a &ue la clonacin no aporta di'ersidad gentica, la especie formas condenada &uizs a 'i'ir en zoolgicos o en condiciones altamente artificiales, casi como piezas de un museo 'i'iente#

5lonacin en +umanos? 5omo es sabido, cuando una tcnica se pone a punto en un animal domstico o de laboratorio, slo es cuestin de tiempo y dinero el &ue pueda ser aplicada a +umanos# $sta perspecti'a es la &ue, ob'iamente, +a despertado esa mezcla de fascinacin, ansiedad y temor en la opinin p(blica# $l ciudadano actual percibe los adelantos cientficos con cierta ambi'alencia8 si bien reconoce como positi'os el a'ance del conocimiento y del bienestar, es igualmente consciente de &ue pueden acarrear problemas ambientales, y amenazar 'alores y creencias importantes para la co+esin social# $l mito de 9ran:estein no es ms &ue la plasmacin simblica del temor a &ue nuestras creaciones tecnolgicas nos sobrepasen y nos dominen, una idea sistematizada por las recientes aportaciones de la filosofa y sociologa de la ciencia y la tecnologa# !esgraciadamente, la mayora de los medios de comunicacin +an perdido una nue'a oportunidad de demostrar &ue pueden estar al ser'icio del debate social y del dilogo sobre bases racionales, primando la difusin de estereotipos trasnoc+ados e ideas peregrinas# 2ero por otro lado, algunas re'istas cientficas siguen empe/adas en &uerer demostrarnos &ue la racionalidad tecnocientfica es la forma ms e%celsa )&uiz (nica?* de conocimiento autntico, y &ue los otros criterios deberan rendirse a ella# ,o &ue se -uega en el debate sobre la clonacin no es obtener copias de $instein o de ;itler, )algo imposible, por&ue en cada indi'iduo influye poderosamente el ambiente y la educacin*# 7l'idmonos de anti<utopas de tipo Un mundo feliz- Tampoco me parece pert"nente la postura de los comentar"stas de la re!"sta Nature& cuando despac4an lo %ue ellos llaman "!a(as ase!erac"ones so#re la d"(n"dad 4umana"& "mputando a sus de0ensores el caer en "deas so#re determ"n"smo (en)t"co-

E0ect"!amente&

nuestros

(enes

no

determ"nan

nuestra

"nd"!"dual"dad n" nuestra d"(n"dad como personas- 5ero la aut)nt"ca opos"c" n a la clonac" n en 4umanos no !a por esos derroteros$'identemente, un indi'iduo clnico )aparte de no ser totalmente idntico al original, por las razones ya apuntadas* tendra su propia indi'idualidad, y es absurdo +ablar en este sentido de .fotocopias +umanas. )sobre todo en lo referente al carcter y conducta*# $sto, insisto, no es lo esencial# Seg(n mi opinin, el cogollo de la cuestin ya &ued brillantemente apuntado +ace casi =1 a/os por ;ans >onas, cuando analiz lo &ue significara e%istencialmente ser un clnico para el propio individuo afectado - Independ"entemente de la "n0luenc"a real %ue ten(an los (enes en la conducta 4umana $desde lue(o& no super"or a la am#"ental y cultural*& el cl n"co se sent"r,a como "nd"!"duo d"se.ado e/6pro0eso por terceras personas& y su s"tuac" n& a d"0erenc"a de lo %ue se 4a d"c4o& no es en a#soluto e%u"!alente a la de los (emelos "d)nt"cosM"entras los (emelos comparten s"mult'neamente en el t"empo un m"smo (enot"po aleator"o totalmente nue!o& del %ue nad"e sa#e nada a pr"or"& al cl n"co se le "mpone un (enot"po ya e/per"mentado anter"ormente por otra personaLa cla!e de la cr,t"ca estr"#a en %ue esto crear,a una s"tuac" n as"m)tr"ca del cl n"co respecto del or"("nal: el cl n"co tendr' enc"ma la "losa" de sa#erse 0ruto de d"se.o de otras personas& y su autopercepc" n se resent"r,a por ello- Todo el proceso de su autodescu#r"m"ento y sus relac"ones con los dem's %uedar'n marcados "ndele#lemente- 7na !e3 m's: no se trata de determ"n"smo (en)t"co& s"no de la "ntrom"s" n de un conoc"m"ento pertur#ador en lo m's central de lo %ue const"tuye la #+s%ueda %ue cada "nd"!"duo 4ace de su prop"a personal"dad- Cada uno de nosotros responde a la pre(unta

"89u")n soy yo:" part"endo de un (enot"po nue!o $con sus potenc"al"dades desconoc"das para todos* y del secreto- 5ero el cl n"co t"ene un (enot"po ya !"!"do $no or"("nal*& y tender' a creer %ue sa#e demas"ado de sus prop"os l,m"tes y pos"#"l"dades: este mero conoc"m"ento puede ser pro0undamente cond"c"onador de su personal"dad- 8D nde %uedar,a la a!entura de sent"rse +n"co e "rse descu#r"endo a s, m"smo: 5or estas ra3ones& y al "(ual a lo %ue se 4a propuesto para los a!ances en las t)cn"cas de sondeo de propens"ones (en)t"cas& la #"o)t"ca y el #"oderec4o est'n art"culando y reclamando la proclamac" n de un "derec4o a ser 0ruto del a3ar" y de un "derec4o a la "(noranc"a"& a no sa#er $o creer sa#er* demas"ado de uno m"smo por adelantado?, por supuesto, paralelamente a estos argumentos, no de-a de resonar un 'ie-o principio tico bsico de nuestra cultura8 los seres +umanos son fines en s mismos, y no pueden ser medios para otros fines, por muy loables &ue stos sean )incluyendo el a'ance cientfico*# 5on &u autoridad y con &u sabidura podramos imponer a otros seres +umanos nuestro dise/o en su misma entra/a biolgica, a carecer de la referencia a un padre y una madre, a ser fruto de una unin se%ual? Seramos capaces de e%perimentar ).a 'er lo &ue sale.* con otros seres +umanos so prete%to de eliminar el azar biolgico? Quines somos nosotros para abrogar este mecanismo de lotera gentica &ue lle'a miles de millones de a/os funcionando, &u criterios usaramos en su lugar, y &uin decidira? $l debate de la clonacin )-unto con otros a'ances deri'ados de la biotecnologa* 'a a ser un buen campo para poner a prueba la capacidad de nuestras sociedades para discutir racional y democrticamente sobre la posibilidad de encauzar la tecnologa# @endremos en nuestras manos la oportunidad de ponerla al ser'icio

de las profundas necesidades de la +umanidad, o seguiremos deslizndonos por la pendiente del sonambulismo tecnolgico? $A2$4IB$"@7S $l intento de obtener seres 'i'os 'iables a partir de clulas somticas lle'a bastante tiempo en la mente de los cientficos# Sin embargo, los e%perimentos lle'ados a cabo nunca +aban dado resultados satisfactorios# 5omo m%imo, se +aban conseguido renacua-os insertando n(cleos de clulas embrionarias de anfibios en sustitucin del n(cleo original del 'ulo o del +ue'o, pero no se +aba logrado &ue se llegara a desarrollar un e-emplar adulto# ,a interpretacin +abitual de estos fracasos se ac+acaba a la prdida de la totipotencia de las clulas embrionarias muy pronto en el curso del desarrollo# !urante ste, se supone &ue se 'an acti'ando y reprimiendo partes del genoma, de modo &ue el estado del !" del n(cleo de una clula en un adulto es muy distinto al del 'ulo recin fecundadoC el del adulto resulta incapaz de e%presar adecuadamente toda la secuencia de rdenes necesarias para el desarrollo y morfognesis# 2or esta razn, en los e%perimentos &ue se +an lle'ado a cabo, se +a tendido a emplear clulas de embrin, me-or cuanto ms precoz8 se supone &ue dic+as clulas tienen toda'a en buena medida la totipotencia &ue se pierde en las clulas del adulto y son, por tanto, me-ores candidatas para la realizacin de una clonacin con %ito# ,a lnea ms sencilla de traba-o disponible consiste en la fisin embrionaria8 la di'isin del embrin de pocas clulas, de modo &ue cada una de las clulas resultantes produzca un ser adulto completo# $l problema de esta tcnica aplicada para la me-ora del rendimiento de la fecundacin in 'itro es su poca fiabilidad8 dado el alto n(mero

de embriones muertos, incluso sin ninguna manipulacin, el intento de clonacin puede destruir las pocas esperanzas de tener un +i-o8 la a'aricia rompe el saco# ? es sabido &ue los embriones +umanos son muc+o ms delicados &ue los embriones de terneros, en los &ue se 'iene practicando con %ito )y tambin con un rendimiento muy pobre* la di'isin de embriones de razas selectas# "o parece &ue la clonacin de embriones sea una solucin clara a este problema# dems, se opusieron a la clonacin argumentos de tipo tico# $l e%perimento de 3ilmut et al#consisti en tomar clulas y ponerlas en culti'o# $l medio nutriti'o, en pases sucesi'os, fue disminuyendo su concentracin de protenas nutriti'as, desde un D1E +asta el 1,FE# !e este modo, se consigui otra parte, se tomaron 'ulos, detener la di'isin de las clulas en culti'o# 2or y se les e%tra-o el n(cleo aspirndolo mediante una micropipeta# 5omo (ltimo paso, se pusieron en contacto las clulas culti'adas y los 'ulos enucleados, y se les someti a un bre'e pulso elctrico, con dos membranas de ambas clulas puestas en ob-eti'os8 por una parte, crear microporos en la contacto, y producir su fusinC por otra, abrir los canales del calcio de la membrana, pro'ocando una reaccin parecida a la &ue causa el espermatozoide al fecundar el 'ulo, &ue pone en marc+a todo el metabolismo celular y el desarrollo del nue'o ser# $sta tcnica fue bsicamente la misma cuando se emplearon como clulas de partida las clulas embrionarias o las de la ubre de una o'e-a adulta, 'ariando solamente el n(mero de pases en culti'o# RE5ERC7;ION ;OCIAL NOTICIA; ,a no'edad y la trascendencia del tema &ue nos ocupa +a dado lugar a

numerosas noticias y artculos de opinin# ,as &ue siguen son una muestra de ello8 .,os mtodos de clonacin de la Go'e-a !ollyG podran ser la cla'e del a'ance en la conser'acin de la di'ersidad zoogentica.# Not"c"as de la <AO& => de D"c"em#re de =??@.,a 9! ) dministracin de 9rmacos y limentos* regular la clonacin de +umanos en $$#66#.# Sociedad Iberoamericana de In0ormac" n C"ent,0"ca"Los seres 4umanos muertos tam#")n podr'n ser clonados"El Mundo.5lonar seres +umanos con la tecnologa +oy disponible es una irresponsabilidad.# Inst"tuto B"o)t"co2Com"t) de E/pertos so#re B"o)t"ca y Clonac" n& =? de Enero de =??>.5lonacin de embriones +umanos8 un deber p(blico.# El Mundo& A= de Enero de =???.5lonacin +umana8 s o no.# B"rtual"a& AC de <e#rero de =??>.!ebe la sociedad imponer lmites a la in'estigacin con embriones +umanos?.# Dos) Anton"o A#r"s%ueta& Mayo =??? .$$#66# y 5anad, dispuestos a cambiar su legislacin ante los a'ances genticos.# El Mundo& <e#rero del ?@9747S !$ !$H @$ $ntre los di'ersos foros &ue se +an abierto, por el carcter polmico del tema estn8 < 9oro sobre 5lonacin Gentica de N7EBA ALEDANDRIAAr(ent"na< .!eben seguir realizndose e%perimentos sobre clonacin?.# El Mundo2$4S2$5@II 4$,IGI7S < CATOLICA

< EEBREA < M7;7LMANA 9I55I7" ,a creacin de rplicas +umanas o de seres artificiales +a sido un tema recurrente en el arte# lgunos e-emplos8 < .6n mundo feliz., de Aldous Eu/ley< .$l !ormiln., de Foody Allen< .5lon., de Da!"d Rol0e.247?$5@7S. !$ 5,7" 5I7" ,os descubrimientos cientficos disparan a menudo la imaginacin de la gente# 2rueba de ello son los proyectos de clonar a >es(s y a $l'is, &ue proponen las dos pginas Jeb siguientes8 < mericans for 5loning El!"s $ACE* < 5+ristians for t+e cloning of Desus

.5lonar +umanos es reprobable e imposible. 5lonar seres +umanos es reprobable ticamente e imposible con las tcnicas actuales, asegur en Harcelona el doctor ;arry Griffin, porta'oz del e&uipo &ue consigui clonar a la famosa o'e-a .!olly.# .;ablar de clonacin +umana es pura ciencia ficcin, por&ue no podemos decir &ue obtendramos una copia igual del original, ya &ue los seres +umanos somos fruto de la interaccin de los genes y del ambiente &ue nos rodea, y ese ambiente es en cada caso distinto., consider el cientfico britnico# 2ara Griffin, .resultara adems ticamente reprobable generar un indi'iduo clnico para &ue cuando fuera adulto sus rganos fueran apro'ec+ables para ser transplantados.# "o menos tico sera el

proceso, pues, como se/al Griffin, .para &ue naciera !olly, se tu'ieron &ue utilizar muc+as o'e-as y en algunos casos surgieron animales con gra'es deformaciones.# $l (nico caso en el &ue Griffin aceptara .con reser'as. la clonacin +umana, sera en pare-as infrtiles &ue no +ubieran obtenido %ito con otras tcnicas de fecundacin# $l cientfico, &ue particip en un congreso sobre Gentica y Hiotica, afirm &ue .las posibilidades de la clonacin animal son GenormesG, especialmente en la obtencin de protenas +umanas a tra's de la lec+e de la o'e-a clonada# $n ese sentido, anunci &ue .para el a/o =11D ya se tendrn los primeros resultados de la aplicacin en +umanos de la protena alfa<D<antitripsina en el tratamiento de la fibrosis &ustica, &ue en la actualidad se encuentra en la fase clnica = con un reducido grupo de pacientes.# Griffin e%plic &ue en estos casos .se suministra al paciente el mismo producto &ue por un defecto gentico no sintetiza su organismo.# .Si ya podemos obtener una o'e-a modificada genticamente y obtener estos productos a partir de la lec+e, es enormemente importante poder clonar esa o'e-a transgnica &ue nos garantiza adems una fuente contnua del producto., a/adi# $sta metodologa, asegur Griffin, sera aplicable en todas las F#111 enfermedades monognicas conocidas, .pero especialmente en las =11 &ue tenemos idea de cmo se pueden curar.# l margen del campo de la medicina, los animales transgnicos tienen adems un gran inters comercial# Griffin record &ue .se +a in'ertido muc+o dinero en las e%plotaciones ganaderas para obtener las 'acas &ue producen ms lec+e, me-or carne, &ue crecen ms rpido, o &ue son resistentes a las enfermedades, &ue por clonacin podran ser copiadas.# .,a tcnica de clonacin <precis el cientfico< no tiene ms lmite &ue el mecnico y el econmico, pero con facilidad se podran tener =11 animales iguales.#

,a manipulacin gentica de los rganos de cerdos resol'er la .inmunocompatibilidad. con los +umanos $l profesor >effrey 2latt, profesor de ciruga, inmunologa y pediatra de la Bayo 5linic y e%perto en %enotrasplantes, asegur en la 6ni'ersidad &ue, .dentro de pocos a/os, podr generalizarse el uso de rganos animales <de cerdos, fundamentalmente< para trasplantarlos a seres +umanos# !e esta forma, se podr sal'ar a los miles de personas &ue mueren cada da por falta de donantes.# 2latt +a participado esta semana en un encuentro sobre . 'ances en Bedicina Bolecular., &ue +a reunido a los principales e%pertos internacionales en esta materia# .!esde &ue se empezaron estas in'estigaciones <asegur el profesor norteamericano<, la limitacin de realizar %enotrasplantes +a 'enido dada por la reaccin inmune del indi'iduo a &ue le pongan un rgano de otra especie# 2ero en los (ltimos a/os se +a comprendido cules eran los problemas del rec+azo y cmo resol'erlos# manipulacin gentica de los rganos de los s pues, la +an animales

posibilitado su utilizacin.# Seg(n el !r# 2latt, en $$#66# mueren +asta D11 pacientes diarios por falta de rganos, y en el mundo son miles de ellos, de a+ la importancia de traba-ar en el rea de %enotrasplantes para poder dar una solucin a este problema#

Trasplante de cora3ones& 4,(ados y r".ones $n su opinin, el animal ideal para obtener los rganos es el .minicerdo., por dos razones8 la gran disponibilidad de estos animales y la facilidad de manipularlos genticamente# ,os rganos trasplantables sern, por a+ora, el corazn, el ri/n y el +gado# .!e todas formas, el .rgano<diana. depende de los pases# $n $$#66#, por e-emplo, el corazn es el ms demandado.# 2ara poder lograr esta prctica, resulta necesario superar tres obstculos8 .$l primer problema es la incompatibilidad del sistema

inmune# $n esta cuestin ya se est traba-ando y se tienen resultados positi'os# $l segundo es &ue los rganos de estos animales funcionen bien una 'ez trasplantados# 2or (ltimo, cabe la posibilidad de &ue estos cerdos puedan transmitir unas enfermedades para las &ue el +ombre no sea inmune# !e momento, no tenemos constancia de esto.# 7tra de las aplicaciones importantes de esta prctica sern los trasplantes de te-idos8 .?a se estn realizando# $ntre los te-idos trasplantables, se encuentran8 el te-ido ner'ioso, para tratar enfermedades como el 2ar:insonC el del pncreas, para el tratamiento de la diabetes, etc# $s necesario &ue las clulas de esos te-idos logren sobre'i'ir y &ue, adems, cumplan la funcin para la &ue se les +a destinado.# Seg(n el profesor 2latt, en los estudios e%perimentales los resultados +an sido positi'os# simismo, se refiri a la reaccin social &ue +an suscitado los %enotrasplantes8 . un&ue +ay alg(n sector crtico, la opinin p(blica en general +a reaccionado de forma muy fa'orable a estas prcticas.# EJEMPLO DE CLONACIONES $n 9ebrero de DKK0, el !r# I# 3illmut y su grupo de in'estigacin en Gran Hreta/a, logr producir el primer mamfero clonado a partir de una clula de un te-ido adulto diferenciado8 se trata de la o'e-a !olly# 2ara su produccin, 3illmut obtu'o clulas de la glndula mamaria de una o'e-a las &ue puso a culti'ar en el laboratorio# !e otra o'e-a obtu'o 'ulos a los &ue les retir &uir(rgicamente sus n(cleos, y luego fusion estos 'ulos sin n(cleos con las clulas mamarias# $stas &ue contienen todos los cromosomas )y genes* de la o'e-a, aportaron el material gentico para &ue los 'ulos sin n(cleos se desarrollaran en embriones#

,os embriones cuyo desarrollo embrionario comenz en el laboratorio, se implantaron en o'e-as<madres +ospederas y de ms de doscientos e%perimentos realizados, naci finalmente !olly &ue corresponde a un clon de la o'e-a dadora de las clulas mamarias# 6e trata de un clon& dado /ue se 'a obtenido un ser 0i0o /ue es una r-plica de otro adulto& sin /ue medie reproducci1n sexual* #s recientemente& se obtu0o una o0eja clonada& llamada +OLL$& /ue posee un gen 'umano* ,a metodologa &ue permiti producir a !olly no es posible de aplicar

al +ombre en la actualidad, ya &ue e%isten limitaciones ticas y tcnicas# Sin embargo, es necesario notar &ue +oy es posible separar las dos clulas &ue se producen luego de la primera di'isin del cigoto )blastmeros* y permitir el desarrollo de cada una de ellas por separado )tcnica de .melliza-e. o tJinning*# $llo fue logrado con embriones +umanos anormales por cientficos de la 6# de 3as+ignton, 6S en DKKL# Bs a(n, +oy e%isten monos 'i'os obtenidos en 6S , por el !r# 3olff de 7regon y &ue fueron producidos mediante esta metodologa, es decir clones de monos obtenidos por melliza-e#

,o perturbador de esta situacin es &ue ella slo se di a conocer inmediatamente despus de la re'elacin de !olly, siendo &ue la e%perimentacin &ue lle' a producir estos monos debi realizarse desde +ace un par de a/os, sin &ue se conociese su e%istencia# $stos resultados demuestran la factibilidad tcnica para la e'entual realizacin de este tipo de clonacin en seres +umanos# fortunadamente, la clonacin +umana +a recibido un unnime rec+azo por parte de toda la sociedad# ,os seres +umanos estamos llamados a nacer por la gracia de !ios, en el seno de una familia y como consecuencia del amor entre un +ombre y una mu-er# ,a clonacin de seres +umanos con'ierte a los clones en productos, 'iolando la dignidad &ue todo ser +umano debe poseer, por lo &ue es intrnsicamente inmoral

Si bien los grandes a'ances cientficos en la esfera biogentica +an

in'adido el terreno de la intimidad de los seres +umanos, obligando a la sociedad a plantearse preguntas bsicas acerca de nuestra naturaleza, no es menos cierto &ue estos a'ances +an contribuido a confirmar la indi'idualidad de los seres +umanos, materia de discusin permanente en el mbito filosfico y religioso# $s de esperar &ue el +ombre apli&ue sabiamente estos grandes conocimientos &ue +a logrado obtener recientemente, para intentar me-orar la calidad de 'ida de los seres +umanos, particularmente de a&uellos ms discapacitados#