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corresponde a los microorganismos que obtienen el Carbono del C02 como las algas y algunas bacterias, y los heterotrficos que necesitan compuestos orgnicos como fuente de carbono. Otro factor esencial est determinado por las condiciones del cultivo, si es aerobio o anaerobio. El 02 es uno de los oxidantes ms comunes en el metabolsmo energtico. En la ausencia del 02, el N03 o S04 son utilizados como aceptores de electrones por algunas bacterias. Las bacterias metanognicas son auxtrofos anaerobios que utilizan H2 para reducir el C02 a CH4 para obtener energa. Otros protistas obtienen su energa, en condiciones anaerobias por reaccin de xido-reduccin realizadas sobre compuestos orgnicos. Las fuentes de carbono cumplen tambin el rol de ser fuente de energa. Otro requerimiento nutricional est constituido por las fuentes de nitrgeno que pueden ser de naturaleza inorgnica u orgnica. El nitrgeno es utilizado para la biosntesis de protenas, cidos nucleicos y polmeros de la pared celular. Para la sntesis de protena se requieren en general L-aminocidos, aunque tambin son necesarios algunos aminocidos de la serie D como D-alanina y D-asprtico para su incorporacin a la pared de la clulas. En algunos casos se requieren tambin pptidos de histidina. Los requerimientos de otros macronutrientes como el P y el S son suministrados en forma de P04H y S04 (o aminocidos azufrados). El fsforo se incorpora en cidos nucleicos, y polmeros celulares. El S es asimilado para la sntesis de aminocidos azufrados, y adems se necesita para la biotina, coenzima A, tiamina y otros componentes. Los requerimientos de K y Mg son tambin esenciales. Una parte importante del primero est unida al RNA de manera que los requerimientos de K aumentan con los factores que influyen en el aumento del RNA de las clulas, como la velocidad de crecimiento. El in K actua como coenzima y probablemente acta como catin en la estructura aninica de varios componentes celulares. El in Mg es esencial para la estabilidad de los ribosomas y actua como cofactor en numerosas reacciones del metabolismo. Tanto el K como el Mg se incorporan a los medios en forma de sales como fosfato y sulfato.
Con respecto a los micronutrientes se distinguen 2 categoras: a) Los que son frecuentemente esenciales para el crecimiento como Ca, Mn, Fe, Co, Cu y Zn y b) los que son raramente esenciales como B, Na, Al, Si, Cl, V, Cr, Ni, As, Se, Mo, Sn, e I. En general los requerimientos de trazas de elementos son conocidos cualitativamente. A veces es difcil demostrar un requerimiento de un micronutriente porque generalmente est presente en suficiente cantidad como impureza de los componentes principales. Los requerimientos de stos compuestos pueden aumentar varias veces cuando el cultivo ha estado sujeto a "strees", como por ejemplo por aumento de temperatura por encima de un valor ptimo. Los requerimientos de factores de crecimiento comprenden ciertos aminocidos y vitaminas del grupo B como tiamina, riboflavina, cido pantottico, niacina, etc., que representan para muchas bacterias y levaduras factores esenciales en los medios sin los cuales no se produce crecimiento celular. La mayor parte de las vitaminas son constituyentes de co-enzimas. Otros factores de crecimiento son las purinas, poliaminas, putrescinas, etc. En algunos procesos existe la necesidad de efectuar otros agregados, a parte de los nutrientes requeridos por los microorganismos y que representan los requerimientos especficos del proceso considerado. Un ejemplo es el caso de los precursores que constituye la base de una molcula que debe ser sintetizada por el microorganismo, como el cido fenil actico para la penicilina. Otro ejemplo es el agregado de ciclo dextrinas en procesos de produccin de Bordetella pertussis que puede actuar como complejante de inhibidores de crecimiento celular. El agregado de cloruros o bromuros en el caso de algunos antibiticos como cloro y bromotetraciclinas, tetraciclidas producidas por el Streptomyces aureofaciens, responde tambin a requerimientos especficos para inhibir la sntesis de productos no deseados, como ocurre tambin con el agregado de mananos y barbitricos en la produccin de estreptomicina por S. griseus. El agregado de sulfato, en el proceso de fermentacin alcohlica, que favorece la formacin de glicerol, es otro ejemplo de un requerimiento especfico. El diseo correcto tiene que ver con las caractersticas bioqumicas propias y evolucin de los parmetros de cada proceso. Por ejemplo, un proceso caracterizado por un descenso continuo de pH, debido al uso
de una sal de amonio como fuente de nitrgeno, obliga a considerar en su diseo algn agregado que no corresponda a una exigencia nutricional, como es el caso del control de pH del mismo. Este puede efectuarse por agregados al medio de agentes "buffer" como mezclas de fosfatos o de carbonato de calcio o como ms generalmente se hace, con agregados peridicos de soluciones alcalinas que pueden efectuarse en forma ms conveniente mediante un control automtico de pH. El diseo de un medio especfico para la produccin de cido ctrico debe considerar la influencia negativa que para el proceso tiene un exceso de hierro en su composicin; por lo tanto dicho medio debe disearse de manera tal que su preparacin (a partir de diversas materias primas) considere una eliminacin total del hierro y posterior agregado del mismo en cantidades controladas. Produccin de enzimas Los procesos de produccin de enzimas microbianas se realizan mediante cultivos aerbicos. En general las enzimas se producen en pequeas cantidades durante la fase de crecimiento activo, pero se acumulan en grandes cantidades en la fase estacionaria del crecimiento. Las enzimas inducibles se producen slo cuando en el medio se encuentra el inductor (sustrato). Las enzimas microbianas que se producen en mayor cantidad son proteasas, utilizadas como aditivos en los detergentes para lavar ropa. Tambin los detergentes contienen amilasas, lipasas, reductasas y otras. Muchas de estas enzimas son producidas a partir de bacterias alcalfilas, especialmente de Bacillus licheniforme. Estas enzimas tienen pH ptimo entre 9 y 10, as permanecen activas al pH alcalino de las soluciones de los detergentes. Amilasas, se producen mediante fermentacin y se utilizan en la conversin de cereales en el producto final llamado jarabe de cereales rico en fructosa. Alfa amilasa provoca ataque inicial al polmero, acortando la cadena y reduciendo la viscosidad del polmero, clarificante. Glucoamilasa produce monmeros de glucosa, sacarificante. Glucosa isomerasa realiza la conversin final de glucosa en fructosa, isomerizacin. Invertasa se produce a partir del cultivo de Saccharomyces cerevisiae, se utiliza para impedir la cristalizacin de azcares, pues convierte sacarosa en azcares ms solubles. Tambin se inyecta en el interior de los caramelos.
Pectinasas, producidas por cepas de Aspergillus, se utiliza para licuar jugos de frutas. Renina, producida por cepas de Mucorse utiliza para coagular la leche en la produccin de quesos. Proteasas, para ablandar carnes de Bacillus y Aspergillus. Lactasa, de Kluyveromycesfragilis, para evitar la cristalizacin de helados.