You are on page 1of 16

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL LITORAL

Secretara Acadmica Direccin de Articulacin, Ingreso y Permanencia Ao 2014

Morfologa: de la clula al hombre como individuo. Conceptos bsicos


Marta Fuentes Larisa Carrera Alicia Costamagna Rosa Markariani (editoras)

ISBN en trmite

Unidad 1

Marta Fuentes y Rosa Markariani (teora) Mara Florencia Peretti Bevilacqua y Mara Leandra Micocci (actividades)

1. El microscopio El trmino microscopio deriva del griego micro, pequeo, y skopein, observar. El microscopio es un instrumento de ptica que permite ver objetos muy pequeos o detalles estructurales imposibles de distinguir a simple vista, o sea, que estn por debajo del lmite del poder de resolucin del ojo humano (70 a 100 m). Recin a principios del siglo XIX se dispuso de buenos microscopios pticos; ello permiti descubrir que los tejidos vegetales y animales estaban formados por agregados de clulas. El microscopio ptico fue inventado alrededor del ao 1600 en Holanda por el fabricante de anteojos Zacaras Janssen. Posteriormente, se efectuaron incesantes perfeccionamientos en el aparato de iluminacin y en la construccin de los objetivos y oculares. El Profesor de Fsica de la Universidad de Jena Ernest Abb fue quien realiz en 1868 los clculos previos para que el sistema ptico del microscopio diese el mximo de magnificacin. El microscopio ptico usual no sirve simplemente para observar con aumento cualquier objeto (por ejemplo una mosca) para ello se requiere el uso de estereomicroscopio, sino que es preciso que lo que se desea observar sea siempre transparente y, de ser posible, se encuentre en un mismo plano. Las alas de una mosca son un buen ejemplo de ello. Esta condicin impuesta al objeto que se pretende estudiar requiere, en la mayora de los casos, de la obtencin de la llamada preparacin, que se realiza generalmente sobre una placa de vidrio el portaobjetos, o simplemente porta de 26x76 mm de superficie y 1 mm de espesor, cubierto con un vidrio sumamente delgado el cubreobjetos, tambin llamado cubre de diversos tamaos, y con un espesor de 0.17 mm. Cuando la luz atraviesa un material biolgico cambia sus caractersticas y estas variaciones se hacen visibles por medio de los sistemas de lentes. El ojo puede diferenPrograma de Ingreso UNL / Curso de Articulacin Disciplinar: Morfologa 1

Morfologa: de la clula al hombre como individuo / Unidad 1

ciar variaciones de intensidad de la luz (luz y sombra), y diferentes longitudes de onda (diferentes colores). Las clulas y los tejidos animales, adems de ser pequeos, cuando no estn coloreados, se captan en el microscopio como transparentes y faltos de color, con poca estructura interna, puesto que no presentan suficiente contraste. El conocimiento de sus diferentes estructuras fue posible gracias al hallazgo, a fines del siglo XIX, de colorantes que proporcionaban el contraste necesario para hacerlas visibles. Lmite de resolucin de un microscopio: es la distancia mnima respecto de la cual dos objetos pueden verse separados. Aumento: se define como la relacin entre el tamao de la imagen y del objeto en medidas lineales.

1.2. El microscopio ptico El poder de resolucin del microscopio ptico oscila entre 0,2 y 0,4 m. En trminos prcticos, las bacterias y las mitocondrias que tienen aproximadamente 0,5 m de dimetro son las estructuras ms pequeas que pueden ser observadas mediante el mismo. a) Microscopio simple o lupa: las lupas son consideradas microscopios simples, ya que estn compuestas por una lente o un solo sistema de lentes convergentes biconvexas, que obran como una sola lente, de pequea distancia focal, entre 5 y 10 cm. Amplan de 2 a 20 veces las estructuras observadas. Distancia focal: es la distancia que se encuentra entre el foco de la lente y su centro ptico. Foco: es el punto donde se cruzan los rayos luminosos luego de atravesar una lente. Centro ptico: es el punto central de una lente en el cual los rayos pasan a travs de l sin desviarse. b) Microscopio compuesto o fotnico: se lo llama tambin microscopio ptico de luz visible. Este microscopio emplea como fuente de luz las radiaciones del espectro solar visibles y no visibles, cuyas longitudes de onda van desde el ultravioleta hasta el infrarrojo. A diferencia del microscopio simple o lupa, est constituido por dos sistemas de lentes convergentes (ocular y objetivo) que forman la parte ptica del mismo. Estas lentes se encuentran ubicadas en un mismo eje dentro del tubo del microscopio.

1.2.1. Partes de un microscopio ptico El microscopio ptico est compuesto por dos partes: una mecnica y otra ptica.

Programa de Ingreso UNL / Curso de Articulacin Disciplinar: Morfologa

Morfologa: de la clula al hombre como individuo / Unidad 1

1.2.1.1. Parte mecnica


pie Parte mecnica, estativo o montura del microscopio columna tubo platina subplatina

Pie: es el encargado de sostener el instrumento y tiene diferentes formas. Debe ser estable, slido, amplio y con el peso necesario para darle estabilidad. Columna: comprende el brazo y el pilar. Mediante el brazo se une al tubo y con el pilar se une al pie. Tambin sostiene a la platina. La articulacin con el tubo se efecta por mando de acomodacin, que permite movimientos de la platina en sentido vertical a fin de lograr el enfoque, est formado por dos botones o tornillos denominados: - Macromtrico: da un ajuste grueso con movimientos amplios de la platina. - Micromtrico: permite un ajuste fino con movimientos inapreciables de la platina, a nivel de micrones, logrando una imagen ntida del preparado Tubo: es un cilindro hueco que est unido a la columna por una cremallera. En su parte inferior est provisto de su sistema de revlver, pieza metlica giratoria en la cual se ajustan a rosca los objetivos de distintos aumentos. Al hacer girar el revlver se colocan los diferentes objetivos en el eje ptico. En su extremo superior se ubican las dos lentes oculares . Platina: tiene forma cuadrangular, se ubica perpendicularmente al eje ptico del microscopio, lleva un orificio central travs del cual llegan los rayos del aparato de iluminacin. Las preparaciones, habitualmente montadas sobre portaobjetos, se colocan sobre la platina y son sostenidas por medio de pinzas metlicas que pueden moverse en las direcciones X e Y por medio de dos tornillos; esto permite recorrer el preparado en sentido lateral y anteroposterior. Subplatina: presenta una serie de aros y cilindros que sirven de soporte al diafragma, al condensador y a los filtros.

1.2.1.2. Parte ptica


lentes objetivos Componentes pticos lentes oculares condensador

Condensador: est constituido por una lente o sistema de lentes convergentes ubicadas en un soporte metlico. Su funcin es hacer eficiente la iluminacin, concen-

Programa de Ingreso UNL / Curso de Articulacin Disciplinar: Morfologa

Morfologa: de la clula al hombre como individuo / Unidad 1

trando los rayos luminosos y proyectndolos sobre el preparado a travs del orificio que posee la platina, de manera que entren en el sistema ptico propiamente dicho. Se mueve en sentido vertical por medio de una cremallera. En posiciones altas, concentra los rayos en un punto (disminuye el ngulo de apertura de los rayos lumnicos) Sistema ptico propiamente dicho: consta bsicamente de dos sistemas de lentes: oculares y objetivos, separados por una distancia fija. Objetivos: estn constituidos por un sistema de 4 5 lentes convergentes de gran potencia que forman una imagen real invertida y de mayor tamao respecto del objeto, esta imagen se forma entre la lente ocular y su foco. Estn recubiertos por cilindros metlicos en los cuales est inscripto el coeficiente de aumento (o potencia) de esa lente objetivo; dicho valor se simboliza con un nmero, seguido de una X. Los objetivos se ubican en el sistema cambiador de objetivos, denominado revlver. Los objetivos pueden ser: a) Objetivos secos: slo se interpone aire entre la preparacin a observar y el objetivo. De acuerdo con su capacidad de aumento pueden ser: 1. dbiles o de menor aumento: 4X 6X (tambin denominados lupa) y 1OX; algunos microscopios estn provistos tambin de un objetivo de 20X. 2. fuertes: corresponden al objetivo de 40X, que es el de mayor magnificacin que puede utilizarse en seco. b) Objetivos de inmersin: entre el objetivo y el preparado se interpone un medio lquido, cuyo ndice de refraccin sea aproximadamente igual al del vidrio, generalmente aceite de cedro (ndice de refraccin 1,52), que impide la desviacin de los rayos luminosos al pasar de un medio a otro. El punto de enfoque de esta lente es muy prximo al portaobjeto por lo que el aceite reemplaza la pelcula de aire entre objetivo y portaobjeto. Oculares: estn constituidos por las lentes que recogen la imagen dada por el objetivo. Al igual que los objetivos, estn recubiertos por un cilindro metlico donde consta el coeficiente de aumento (o potencia) de las mismas, que generalmente es de 5X, 1OX 15X. Estn formados por un sistema de lentes en el que se destacan las lentes inferiores de campo o colectoras, y las lentes superiores u oculares, que actan como una lupa. Aumento final del microscopio: el aumento total se obtiene multiplicando el coeficiente de aumento del objetivo, por el aumento individual del ocular; as, el objetivo de 1OX con el ocular de 1OX da un aumento total de 100 veces.

Programa de Ingreso UNL / Curso de Articulacin Disciplinar: Morfologa

Morfologa: de la clula al hombre como individuo / Unidad 1

1.2.1.3. Sistema o aparato de iluminacin


fuente de luz transformador

Sistema lumnico

potencimetro diafragma filtros

El sistema de iluminacin se sita debajo de la platina Fuente de luz: se encuentra empotrada en el pie del microscopio; son lmparas de filamento metlico de bajo voltaje y de diferentes caractersticas. Transformador: reduce la tensin de la red elctrica al requerido por la lmpara utilizada. Potencimetro: regula la intensidad de la iluminacin. Diafragma iris: se encuentra por debajo del condensador. Es una membrana que se abre o se cierra, su funcin es graduar la cantidad de rayos luminosos que llegan al objeto, eliminando los rayos perifricos que forman imgenes distorsionadas. Filtros de luz: se colocan en los aros portafiltros que estn situados debajo del condensador. Son cristales coloreados que dejan pasar radiaciones con una longitud de onda determinada y absorben las restantes.

Fig. 1: Microscopio ptico. Partes


Programa de Ingreso UNL / Curso de Articulacin Disciplinar: Morfologa 5

Morfologa: de la clula al hombre como individuo / Unidad 1

1.3. Observacin de muestras al microscopio ptico. Tipos de preparaciones Un microscopio funciona debido a que los rayos luminosos atraviesan la muestra y proporcionan una imagen. Una buena observacin al microscopio ptico exige un espesor de la muestra inferior a 10 micrones. Si la muestra es ms gruesa, los planos celulares superpuestos impiden el paso de la luz y las imgenes resultan confusas. Por esta razn la muestra o material a observar debe ser acondicionada constituyendo lo que se denomina un preparado. La forma en que se confecciona un preparado, depende de la muestra a observar y de las estructuras que se pretenden poner de manifiesto
No permanentes frescos frescos coloreados frotis

(hmedos) Tipos de Preparados Semipermanentes (secos) Permanentes

extendidos improntas
cortes histolgicos

1.3.1. Preparados no permanentes o hmedos Preparados frescos: el material es visualizado en condiciones naturales, tiene como objetivo mantener las estructuras sin ninguna modificacin. Su concrecin es muy rpida y consiste en tomar una muestra del material, colocarla sobre un portaobjetos limpio, desengrasado y seco; si ste es slido, se deber agregar una gota de agua o solucin fisiolgica y cubrirlo con un cubreobjetos. Este se coloca formando un ngulo de aproximadamente 45, de tal manera que el lquido se distribuya por capilaridad en su borde, y se lo deja caer tratando que no queden burbujas de aire. Preparados frescos coloreados: con el propsito de aumentar el contraste entre la estructura a observar y el medio, o bien el de algn componente en particular, se pueden realizar distintas coloraciones. Colorantes: Desde el punto de vista de su caracterizacin qumica son en su mayora orgnicos y con estructura semejante al benceno o a sus derivados. El colorante debe unirse especficamente a algn componente celular, ste queda resaltado o diferenciado respecto del resto por el color que adquiere. Debido a la accin del colorante, las estructuras celulares dejan de funcionar normalmente, quitndole las propiedades de vida. Los colorantes se combinan con las diferentes estructuras por afinidad qumica: - Las sustancias ACIDAS se tien con colorantes bsicos. - Las sustancias BSICAS son afines a colorantes cidos.
Programa de Ingreso UNL / Curso de Articulacin Disciplinar: Morfologa 6

Morfologa: de la clula al hombre como individuo / Unidad 1

Los preparados frescos coloreados se realizan de la misma forma que un preparado fresco sin colorear, al cual se le adicionan unas gotas del colorante elegido previamente a la colocacin del cubreobjetos.

1.3.2. Preparados semipermanentes Frotis: se utilizan para observar materiales heterogneos, por ejemplo: mucosa bucal, bacterias, levaduras, materia fecal, flujo vaginal, orina, etc. El material se distribuye formando crculos en el centro del portaobjetos; la capa del material debe quedar pareja y tenue. Extendido: se realiza para observar materiales homogneos, por ejemplo: sangre. Para realizarlo se toman dos portaobjetos bien desengrasados, se coloca una gota de sangre sobre el extremo de uno de ellos, se apoya sobre la gota el borde del otro portaobjeto formando un ngulo de aproximadamente 45 y se desliza este ltimo con un movimiento suave, rpido y parejo. Impronta: este tipo de preparados se utiliza para aquellos materiales ricos en clulas aisladas, que se desprenden fcilmente del trozo de tejido como el timo o el bazo, Pa realizar una impronta se toma una porcin del tejido y se apoya repetidamente sobre un portaobjeto a manera de sello, esto permite el depsito de las clulas sobre el mismo. Una vez distribuido el material sobre el portaobjeto, se procede a una fijacin y posterior coloracin. Fijacin: consiste en provocar la muerte rpida de la clula tratando de mantener intacta su morfologa y composicin qumica. Impide que se produzcan los procesos de descomposicin y tambin permite que los microorganismos y las clulas queden adheridos a la superficie del portaobjeto. Algunos agentes fijadores son: calor, congelamiento, etanol, metanol, formol, etc. Coloracin: se coloca el portaobjeto con la muestra sobre una cubeta de coloracin y se procede a colorearlo. Existen coloraciones simples en donde se utiliza un solo colorante y otras diferenciales en donde se utiliza una batera de colorantes.

1.3.3. Preparados Permanentes Cortes histolgicos: se denominan as puesto que se realizan a partir de cortes muy finos de tejido animal o vegetal. Se los pueden conservar por un largo tiempo debido a que no sufren alteracin progresiva por descomposicin o putrefaccin puesto que la muestra recibe un tratamiento especial y es protegida por un cubreobjeto sellado en forma permanente que impide su alteracin por uso o factores ambientales. La tcnica histolgica consiste en una serie de pasos secuenciales que se enuncian brevemente a continuacin:

Programa de Ingreso UNL / Curso de Articulacin Disciplinar: Morfologa

Morfologa: de la clula al hombre como individuo / Unidad 1

a) fijacin: se realiza de manera idntica a la mencionada en la fijacin de un frotis. b) inclusin: convierte a la muestra en un bloque fcil de seccionar, para ello, previamente se la deshidrata y luego se la coloca en un material que, a temperatura ambiente adquiera consistencia y permita cortarse; se puede usar parafina, gelatina, etc c) corte: se hacen cortes en lminas muy delgadas (entre 2 a 10 micrones de espesor) con un instrumento llamado micrtomo. Las laminas luego se recogen en agua y se adhieren a un portaobjeto. d) coloracin: previamente se elimina la sustancia utilizada en la inclusin (por ejemplo la parafina) y se hidrata la muestra. Luego se coloca en una cubeta de coloracin y se lo cubre con el/los colorantes seleccionados segn la tcnica de coloracin, finalmente se lava y deja secar al aire. e) montaje: se sella el cubreobjeto con un medio de montaje, el ms utilizado es el Blsamo de Canad y de esta manera el preparado ya coloreado se puede conservar indefinidamente.

1.4 . Pasos para realizar el enfoque y observacin al microscopio 1. La posicin descansada del cuerpo posibilita el trabajo cmodo. El observador debe sentarse frente al microscopio con la columna en posicin recta, para lo cual debe seleccionarse un asiento con la altura adecuada. 2. Sujetar el preparado sobre la gua portaobjeto de la platina. Verificar que el preparado este hacia arriba. 3. Conectar la fuente de luz, ubicar una mano sobre el tornillo macro-micrmetro, y la otra mano en los comandos de las guas de los portaobjetos. 4. Para la primera observacin se debe utilizar el objetivo de menor aumento (lupa) este le dar una visin integral del preparado y le permitir elegir las mejores reas para luego observar en mayor aumento. Al seleccionar el objetivo, no tocar con los dedos las lentes de los objetivos. 5. Seleccionar la iluminacin correcta. El condensador se utiliza en posiciones intermedias a bajos aumentos y a posiciones superiores con el objetivo de inmersin. 6. El enfoque correcto del preparado se realiza girando el tornillo macro- micrmetro, ajustando la imagen del campo, moviendo la platina hacia arriba y hacia abajo. 7. El tubo binocular se ajusta con ambas manos a la distancia interpupilar del operador, hasta observar una sola imagen. 8. Al emplear el objetivo de inmersin se utiliza con una gota de aceite de inmersin entre el preparado y la lente. Se debe evitar la formacin de burbujas de aire en la gota de aceite. Luego de utilizado el objetivo se debe limpiar con algodn o pao seco.

Programa de Ingreso UNL / Curso de Articulacin Disciplinar: Morfologa

Morfologa: de la clula al hombre como individuo / Unidad 1

1.5. Tipos de microscopios


Compuesto, fotnico u ptico de luz visible de fondo claro y de campo oscuro De contraste de fase Microscopios De interferencia De polarizacin De fluorescencia Electrnico de Transmisin (MET) De barrido o scanning (SEM)

Microscopio de fondo claro y de campo oscuro: esta divisin se relaciona con la forma en que se ilumina el objeto. En el primero, los rayos luminosos hacen incidencia directa sobre el objetivo. En cambio, en los microscopios de campo oscuro los rayos luminosos del sistema de iluminacin son dirigidos desde la parte lateral, y se produce la difraccin, refraccin o reflexin de los rayos luminosos merced a un juego de espejos. En consecuencia, cuando se observa el objeto por el ocular, se ver intensamente iluminado sobre un campo oscuro, puesto que no se produce una incidencia directa de los rayos sobre el objetivo. Se lo emplea para el estudio de elementos vivos, tales como bacterias o espermatozoides. Permite ver las clulas en accin y estudiar los procesos de mitosis y migracin celular. No es til para observar detalles estructurales. Microscopio de contraste de fase: la manera ms conveniente de establecer que una estructura existe en las clulas consiste en estudiarlas al microscopio mientras estn vivas, sin ninguna fijacin o tincin preliminar. Esto requiere de sistemas pticos especiales diseados para aprovechar las propiedades de difraccin de las clulas. Este equipo transforma las diferencias de fase de la luz en diferencias de amplitud. stas son captadas por el ojo como diferencias de intensidad; para ello este microscopio tiene un dispositivo ubicado entre el diafragma y la platina que produce una variacin en la longitud de onda de la luz de incidencia lateral respecto de la luz de incidencia central. El condensador tambin tiene un diafragma especial; esto permite lograr imgenes diferenciadas. La diferencia de desplazamientos ocurre segn la luz atraviese una zona gruesa o fina de una clula o tejido. Es decir, cuando la luz pasa a travs de una parte relativamente gruesa o densa de una clula, como por ejemplo el ncleo, se retarda y su fase queda desplazada en relacin con la luz que ha pasado a travs de una regin ms fina, por ejemplo el citoplasma. Con este tipo de microscopio quedan claramente visualizados muchos detalles de una clula viva. Microscopio de interferencia: su fundamento es el mismo que el de contraste de fase, por lo que se lo suele considerar un microscopio de fase perfeccionado. Tiene filPrograma de Ingreso UNL / Curso de Articulacin Disciplinar: Morfologa 9

Morfologa: de la clula al hombre como individuo / Unidad 1

tros especiales que se intercalan en el haz lumnico y que producen un contraste de fase coloreado positivo o negativo. Los cambios de color facilitan la observacin de las estructuras vivas como si estuvieran coloreadas. Microscopio de polarizacin: cuando algunos tejidos o componentes de nuestro organismo son atravesados por la luz ultravioleta, se produce un desdoblamiento de manera que de un rayo luminoso a la entrada obtenemos dos rayos que se denominan polarizados. Esto sucede porque esos componentes tienen un ordenamiento determinado de sus tomos. Tales cuerpos o componentes poseen lo que llamamos un estado cristalino, en tanto que las sustancias que no poseen dicho estado se conocen como cuerpos amorfos monorrefringentes o isotrpicos. En estos cuerpos isotrpicos la luz se propaga siempre a la misma velocidad, sin importar la direccin que siga dentro de los mismos. Por lo tanto, ese cuerpo amorfo tendr un solo ndice de refraccin. Por el contrario, en los cuerpo cristalinos, anisotrpicos o birrefringentes la luz variar su velocidad dependiendo de la direccin de su propagacin. Esto da origen a lo que se llama fenmeno de doble refraccin. As, desde un solo rayo refractado se originan o producen dos rayos polarizados en forma rectilnea. En el microscopio de polarizacin se utiliza un cristal polarizador de la luz, localizado entre el foco luminoso y el espcimen observar, que deja pasar solamente la luz polarizada rectilneamente y elimina el rayo ordinario. Otro cristal polarizador se coloca entre el espcimen y el ojo del observador. Si se coloca un cuerpo amorfo en la platina, la luz no sufrir ninguna modificacin, pero lo contrario suceder si el cuerpo es cristalino o birrefringente: la luz brillar con mayor o menor intensidad. De este modo se pueden diferenciar sustancias monorrefringentes y birrefringentes. Microscopio de fluorescencia: emplea una fuente de luz ultravioleta (UV) y filtros capaces de impedir que la radiacin que incide sobre la lmina lesione el ojo del observador. Este tipo de luz permite que sustancias tales como la Vitamina A o los carotenos, constituyentes normales de algunas clulas, emitan radiaciones brillantes. Estos componentes aparecen brillantes sobre un campo o fondo oscuro, el cual no es fluorescente; esto se conoce como fluorescencia primaria. Cuando se colorean clulas con colorantes especiales como el tiocianato de fluorescena, naranja de acridina o tiocianato de rodamina B, stos se fijarn si determinadas estructuras celulares adquieren una fluorescencia que se denomina secundaria. Microscopio electrnico de transmisin (MET): el lmite de resolucin impuesto por la longitud de onda de la luz visible (microscopio ptico) puede ser reducido utilizando electrones en lugar de fotones, ya que los electrones tienen una longitud de onda mucho ms reducida. El poder de resolucin real del microscopio electrnico es de 0,1 nm (1 Angstrom), es decir 100 veces superior a la del ptico.
Programa de Ingreso UNL / Curso de Articulacin Disciplinar: Morfologa 10

Morfologa: de la clula al hombre como individuo / Unidad 1

La fuente de iluminacin es un filamento de tungsteno situado en la parte superior de una columna cilndrica que emite electrones. Para poder conseguir un haz lineal de electrones primero se debe bombear el aire hacia afuera de la columna para producir vaco. Luego, los electrones son acelerados desde el filamento mediante un nodo cercano, de forma que pasan a travs de un agujero diminuto y forman un haz de electrones que se dirige hacia la parte inferior de la columna. Unas bobinas magnticas situadas a intervalos a lo largo de la columna focalizan el haz de electrones, al igual que las lentes focalizan el haz de luz en el microscopio ptico. La muestra se coloca en el vaco y luego se expone al haz de electrones. Algunos electrones son dispersados y no aparecen en la imagen, otros pasan a travs de regiones densas y aparecen como reas de flujo electrnico bajo respecto de las reas de las regiones menos densas. En el microscopio electrnico los electrones reemplazan a la luz y los campos magnticos a las lentes pticas, de manera que se obtienen imgenes electrnicas en lugar de imgenes luminosas. El contraste depende del nmero atmico de los tomos de la muestra: cuanto ms elevado sea el nmero atmico, mayor nmero de electrones sern dispersados y tanto mayor ser el contraste obtenido. Las molculas biolgicas estn compuestas por tomos de nmero atmico bajo (C, O, H); por consiguiente, para conseguir que los cortes ultrafinos de materiales biolgicos sean visibles, se contrastan mediante la exposicin a sales de metales pesados tales como uranio o plomo. De este modo, por ejemplo, los lpidos tienden a teirse de oscuro revelando la localizacin de las membranas celulares. Con este equipo puede observarse la estructu- Fig. 2: Microscopio Electrnico de Transmisin ra interna de la clula (ultraestructura). La imagen final se puede observar sobre una pantalla fluorescente o por medio de una placa fotogrfica. Con microscopio se pueden obtener aumentos de hasta 200.000, 300.000 veces o ms, los que por medio de las ampliaciones fotogrficas pueden llegar hasta 1.000.000 o an ms. Microscopio electrnico de barrido (SEM): el microscopio electrnico de barrido revela la disposicin tridimensional de los componentes celulares. Esto se produce debido a que el haz de electrones se refleja sobre la superficie de la muestra en lugar de atravesarla como sucede en el anterior. La muestra a analizar se fija y seca al vaco,
Programa de Ingreso UNL / Curso de Articulacin Disciplinar: Morfologa 11

Morfologa: de la clula al hombre como individuo / Unidad 1

proceso conocido con el nombre de sombreado. Luego es barrida por un haz focalizado de electrones: cuando el haz choca con la muestra se producen electrones secundarios en la superficie metalizada y stos son detectados y convertidos en una imagen sobre una pantalla de televisin, la que puede tambin ser fotografiada. Puesto que el grado de dispersin de los electrones depende del ngulo relativo entre el haz y la superficie, la imagen tiene puntos brillantes y puntos oscuros. El poder de resolucin de este microscopio es de 10 nm. La siguiente figura pone de relieve las similitudes del diseo general de los tres microscopios. Los dos tipos de microscopio electrnico requieren que la muestra sea colocada en el vaco.

Fig. 3: Rasgos principales de un microscopio ptico, un microscopio electrnico de transmisin y un microscopio electrnico de barrido

Programa de Ingreso UNL / Curso de Articulacin Disciplinar: Morfologa

12

Morfologa: de la clula al hombre como individuo / Unidad 1

Actividades captulo 1

1. Mediante un cuadro compare determinados categricos de los microscopios ptico, electrnico de transmisin y electrnico de barrido: fuente de iluminacin, preparacin de la muestra, poder de resolucin, etc.

2. Establezca diferencia entre los siguientes trminos: a) Poder de resolucin/ lmite de resolucin b) Portaobjeto/ objetivos

3. Cmo se calcula el aumento final de un microscopio?

4. Haga una clasificacin de las lentes que conforman el sistema de lentes mencionando la funcin de cada uno.

5. Decida cules preparados corresponden a observaciones con microscopio ptico y cules corresponden a observaciones en microscopio electrnico. Fundamente la decisin a) Tejido adiposo

Programa de Ingreso UNL / Curso de Articulacin Disciplinar: Morfologa

13

Morfologa: de la clula al hombre como individuo / Unidad 1

b) Clula de hgado de rata

c) Tendn

d) Granos de polen

e) Clula epitelial cilndrica con cilios asociados

Programa de Ingreso UNL / Curso de Articulacin Disciplinar: Morfologa

14

Morfologa: de la clula al hombre como individuo / Unidad 1

Bibliografa
Bibliografa bsica Audesirk, T. (2003): Biologa. La vida en la Tierra. 6 ed. Printice Hall. Bazn, N.; Caro, G.; Lassalle, A.; Maldonado, A. y otros. Botto, J. (coord.) (2006): Biologa. Tinta Fresca. Bocalandro, N.; Frid, D. (1999): Biologa humana y salud. Estrada. Curtis, H. y otros (2000): Biologa. 6 ed. Editorial Mdica Panamericana. Keith L. Moore Dalley (2003): Anatoma con orientacin clnica. 4 ed. Editorial Mdica Panamericana. Purves, W. y otros (2003): Vida. La ciencia de la Biologa. 6 ed. Ediotrial Mdica Panamericana Ross, M.; Kaye, G.; Pawlina, W. (2005): Histologa. Texto y Atlas color con Biologa celular y molecular. 4 ed. Editorial Mdica Panamericana. Tortora, G. y Derrickson, B. (2006). Principios de Antoma y Fisiologa. 11 ed. Editorial Mdica Panamericana. Bibliografa complementaria Alberts, B. y otros (1998): Biologa molecular de la clula. 3 ed. Omega. Cdigos Ifaa Clasificacin Internacional Anatoma [en lnea] Http://www.Salutia.Com.Ar/ Sitio/Sp/Servicios/Datos_Utiles/Ifaa/Ifaa_Index. Htm (Consulta: 06 de junio de 2004). Comit Federal Sobre Terminologa Anatmica. (2001). Terminologa Anatmica Internacional. Ed. Mdica Panamericana. Gartner, L. y Hiatt, J. (1997): Histologa. Texto y atlas. Mc Graw-Hill Interamericana. Geneser, F. (2002): Histologa. 3 ed. Editorial Mdica Panamericana. Healeay, J.M. (1972): Anatoma clnica. Interamericana. Lodish, H. y otros (2002): Biologa celular y molecular. Editorial Mdica Panamericana. Sociedad Anatmica Espaola. (2003). Terminologa Anatmica Internacional. Editorial Mdica Panamericana. Rouviere (1979): Compendio de anatoma y diseccin. Salvat.

Programa de Ingreso UNL / Curso de Articulacin Disciplinar: Morfologa

15

You might also like