Finalidade .

Princpio .
Caractersticas do sistema .
Sistema enzimtico para a determinao da glicose no
sangue, lquor e lquidos asctico, pleural e sinovial por mtodo cintico
ou de ponto final.
A glicose oxidase catalisa a oxidao da glicose de acordo
coma seguinte reao:
GOD
Glicose + O + H O cido Glucnico + H O
O perxido de hidrognio formado reage com 4-aminoantipirina e fenol,
sob ao catalisadora da peroxidase, atravs de uma reao oxidativa de
acoplamento formando uma antipirilquinonimina vermelha cuja
intensidade de cor proporcional concentrao da glicose na amostra.
POD
2H O +4-Aminoantipirina +fenol Antipirilquinonimina +4H O
O reagente apresentado pronto
para uso e utiliza metodologia enzimtica de grande especificidade
analtica, de simples e fcil aplicao no laboratrio clnico.
A Labtest desenvolveu o sistema Glicose Liquiform otimizando as
concentraes de enzimas do reagente visando fornecer o melhor
desempenho analtico e maior estabilidade.
Os dados de repetitividade e reprodutibilidade obtidos com o sistema
Glicose Liquiform demonstram que o mtodo capaz de fornecer
resultados que superam as metas de desempenho para as medidas de
glicose estabelecidas pela (ADA). A
comparao entre as imprecises encontradas na repetitividade e na
reprodutibilidade demonstra que o sistema de medio bastante
robusto nas regies de concentraes significativas para uso clnico,
indicando que temumdesempenho muito estvel no dia a dia.
O sistema permite que a determinao seja realizada emmtodo cintico
de tempo fixo obtendo-se resultados emapenas 90 segundos de reao e
tambm em mtodo de ponto final, que proporciona mais agilidade para
determinados analisadores bioqumicos.
O mtodo pode ser utilizado em tcnica manual e facilmente aplicvel
emanalisadores semi-automticos e automticos capazes de medir com
exatido a absorbncia entre 490 e 520 nm.
[Somente para uso diagnstico in vitro.]
2 2 2 2
2 2 2
American Diabetes Association
Metodologia .
Reagentes
1. -
2. -
Materiais necessrios e no fornecidos
1.
2.
3.
4.
GOD-Trinder.
Contm tampo fosfato 30 mmo/L, pH 7,5; fenol 1 mmol/L; glicose
oxidase 12500 U/L; peroxidase 800 U/L; 4-aminoantipirina
290 mol/L; azida sdica 7,5 mmol/L; e surfactantes.
Contm: glicose 100 mg/dL e biocida no txico. Aps o manuseio
sugere-se armazenar bemvedado para evitar evaporao.
O estabilizador do padro pode precipitar em baixas temperaturas, o que
no interfere emseu desempenho.
Os reagentes no abertos, quando armazenados nas condies
indicadas, so estveis at a data de expirao impressa no rtulo.
Durante o manuseio, os reagentes esto sujeitos contaminaes de
natureza qumica e microbiana que podem provocar reduo da
estabilidade.
Os cuidados habituais de segurana devem ser aplicados na
manipulao do reagente.
O Reagente contm azida sdica que txica. Deve-se tomar cuidado
para evitar a ingesto e no caso de contato com os olhos, deve-se lavar
imediatamente com grande quantidade de gua e procurar auxlio
mdico. A azida pode formar compostos altamente explosivos com
tubulaes de chumbo e cobre. Portanto, utilizar grandes volumes de
gua para descartar o reagente.
No utilizar o Reagente 1 quando sua absorbncia medida contra a gua
em 505 nm for igual ou maior que 0,300 ou quando mostrar-se turvo ou
comsinais de contaminao.
Banho-maria mantido temperatura constante ( 37C).
Fotmetro capaz de medir com exatido a absorbncia entre 490 e
520 nm.
Pipetas para medir amostras e reagente.
Cronomtro.
Reagente 1- Armazenar entre 2- 8C.
Padro calibrador - Armazenar entre 2- 30C.

GLICOSE Liquiform
Instrues de Uso
Ref.: 133
MS 10009010236
01 Portugus - Ref.: 133
Precaues e cuidados especiais
1
Influncias pr-analticas . Por ser uma substncia com
caracterstica redutora o cido ascrbico impede a formao do
cromgeno levando a obteno de resultados falsamente diminudos.
Pacientes que fazem uso de cido ascrbico (Cebion , Energil C ,
Redoxon , dentre outros) devem ser aconselhados a interromper seu
uso por 24horas antes da realizao do exame .
Nas 24 horas que sucedem a ingesto aguda de lcool ocorre
significativa reduo da glicemia. As redues podem tambm ser
significativas nos indivduos submetidos a jejum prolongado ou em
obesos tratados comdietas combaixo valor calrico .
Pacientes diabticos em uso continuado de clorpropamida podem
desenvolver hipoglicemias importantes que so muito difceis de corrigir.
A variao biolgica intra-individual da glicose 5,7% e a variao
biolgica intragrupo 6,9% .
Deve ser criado um Procedimento Operacional Padro (POP) para
colheita, preparao e armazenamento da amostra. Enfatizamos que os
erros devidos amostra podemser muito maiores que os erros ocorridos
durante o procedimento analtico.
A amostra de sangue deve ser obtida aps jejumde no mnimo 8 horas ou
emmenor tempo de acordo comrecomendao mdica.
Usar plasma ou soro tomando as precaues a seguir:
Realizar a colheita do sangue utilizando um anticoagulante contendo um
inibidor da gliclise. O uso do anticoagulante Glistab (Labtest Ref. 29)
permite a colheita de uma s amostra para as dosagens de creatinina,
glicose e uria.
As amostras de sangue no contendo antiglicoltico devem ser
centrifugadas imediatamente aps a colheita, e o plasma ou soro
separados das clulas ou cogulo.
Emoutros lquidos biolgicos (lquor e lquidos asctico, pleural e sinovial)
adicionar anticoagulante contendo antiglicoltico na mesma proporo
usada para a amostra de sangue, e centrifugar antes de iniciar a
medio .
Nas amostras de sangue tratadas com antiglicoltico a concentrao da
glicose permanece estvel at 8 horas. No plasma, soro e outros lquidos
separados das clulas, a glicose permanece estvel 3 dias entre 2 - 8 C,
quando no ocorre contaminao bacteriana e fungica .
Como nenhum teste conhecido pode assegurar que amostras de sangue
no transmitem infeces, todas elas devem ser consideradas como
potencialmente infectantes. Portanto, ao manuse-las deve-se seguir as
normas estabelecidas para biossegurana.
Para descartar os reagentes e o material biolgico sugerimos aplicar as
normas locais, estaduais ou federais de proteo ambiental.
9
3
4
6
6
Mtodo de ponto final .
Branco da amostra .
Mtodo cintico .
Mtodo de ponto final .
Concentraes de bilirrubina at
2,5 mg/dL e hemoglobina at 200 mg/dL no produzem interferncias
significativas. Concentraes de bilirrubina maiores que 2,5 mg/dL
produzeminterferncias negativas.
Concentraes de triglicrides at 1000 mg/dL no produzem
interferncia significativa quando se utiliza branco de amostra.
Para avaliar a concentrao aproximada da hemoglobina em uma
amostra hemolisada pode-se proceder do seguinte modo: diluir 0,05 mL
da amostra em 2,0 mL de NaCl 150 mmol/L (0,85%) e medir a
absorbncia em 405 ou 415 nm, acertando o zero com gua deionizada
ou destilada.
Hemoglobina (mg/dL) Absorbncia x 601
Hemoglobina (mg/dL) Absorbncia x 467
Este procedimento aplicvel quando houver
ao positiva de interferentes. Misturar 1,0 mL de NaCl 150 mmol/L
(0,85%) com 0,01 mL da amostra. Medir a absorbncia em 505 nm,
acertando o zero com gua destilada ou deionizada. Diminuir a
absorbncia assim obtida, da absorbncia do teste e calcular a
concentrao.
Concentraes de bilirrubina at 2,5 mg/dL,
hemoglobina at 200 mg/dL e triglicrides at 1000 mg/dL no produzem
interferncias significativas.
Tomar 3 tubos de ensaio e proceder como
a seguir:
Misturar vigorosamente e incubar em banho-maria a 37 C durante 10
minutos. O nvel da gua no banho deve ser superior ao nvel dos
reagentes nos tubos de ensaio. Determinar as absorbncias do Teste e
Padro em 505 nm (490 a 520), acertando o zero com o branco. A cor
estvel 30 minutos.
O procedimento sugerido para a medio adequado para fotmetros
cujo volume mnimo de soluo para medio igual ou menor que
1,0 mL. Deve ser feita uma verificao da necessidade de ajuste do
volume para o fotmetro utilizado.
Os volumes de amostra e reagente podem ser modificados
proporcionalmente sem prejuzo para o desempenho do teste e o
procedimento de clculo se mantm inalterado. Em caso de reduo dos
volumes fundamental que se observe o volume mnimo necessrio para
a leitura fotomtrica. Volumes da amostra menores que 0,01 mL so
crticos em aplicaes manuais e devem ser usados com cautela porque
aumentama impreciso da medio.

405
415
02
Interferncias
Portugus - Ref.: 133
Procedimento
Amostra
Amostra
Padro
Reagente 1
Branco
1,0 mL
0,01 mL
Teste Padro
1,0 mL
0,01 mL
1,0 mL
Exemplo
Calibrao .
Controle interno da qualidade .
Intervalo de referncia .
A Teste =0,104 A Padro =0,095
A Teste =0,181 A Padro =0,178
0,181 - 0,104
Glicose (mg/dL) = x 100 =93
0,178 - 0,095
O padro rastrevel ao
(SRM) 917 do of (NIST).
Obter o fator de calibrao ao usar novo lote de reagentes ou quando o
controle interno da qualidade indicar.
Branco de reagentes: gua ou soluo de cloreto de sdio 150 mmol/L
(0,85%);
Padres: usar calibradores proticos. A concentrao de glicose no
calibrador da linha Calibra - Labtest rastreavel ao SRM917 do NIST.
Calibrao do branco ao usar novo frasco de reagente;
Calibrao de 2 pontos ao mudar de lote;
Calibrao de 2 pontos quando o controle interno da qualidade indicar.
O resultado da medio linear at 500 mg/dL. Quando for obtido valor
igual ou maior que 500 mg/dL, diluir a amostra com NaCl 150 mmol/L,
realizar nova medio e multiplicar o resultado obtido pelo fator de
diluio. Sugerimos a verificao da linearidade metodolgica e
fotomtrica, no mnimo semestralmente utilizando amostra com valores
at 500 mg/dL.
O laboratrio deve manter um
programa de controle interno da qualidade que defina claramente os
objetivos, procedimentos, normas, critrios para limites de tolerncia,
aes corretivas e registro das atividades. Materiais de controle devem
ser utilizados para monitorar a impreciso da medio e desvios da
calibrao. Sugere-se que as especificaes para o coeficiente de
variao e erro total sejam baseadas nos componentes da variao
biolgica (VB).
Sugere-se utilizar os produtos da linha Qualitrol - Labtest para controle
interno da qualidade emensaios de qumica clnica.
Os intervalos devem ser usados apenas
como orientao. Recomenda-se que cada laboratrio estabelea sua
prpria faixa de valores de referncia na populao atendida.
30 30
90 90
Standard Reference Material
National Institute Standards and Technology
Calibraes manuais
Sistemas automticos
Intervalo de calibraes
Clculos .
Exemplos
Mtodo cintico .
Clculos
Ver linearidade.
Absorbncia do Teste
Glicose (mg/dL) = x 100
Absorbncia do Padro
Devido a grande reprodutibilidade que pode ser obtida com a
metodologia, o resultado tambm pode ser obtido utilizando fator de
calibrao.
100
Fator de Calibrao =
Absorbncia do Padro
Glicose (mg/dL) =Absorbncia do Teste x Fator de calibrao
Os dados apresentados a seguir so ilustrativos.
Absorbncia do Teste =0,362
Absorbncia do Padro =0,340
0,362
Glicose (mg/dL) = x 100 =106
0,340
ou
100
Fator de Calibrao = =294
0,340
Glicose (mg/dL) =0,362 x 294 =106
Deve ser utilizado em todas as amostras
lipmicas. Oprocedimento utiliza uma cintica de 2 pontos e no requer o
branco da reao. O controle da temperatura absolutamente
indispensvel para a reprodutibilidade dos resultados. fundamental
tambm que as operaes com amostras e padres sejam realizadas
mantendo-se rigorosamente constante o intervalo de tempo entre a
mistura da amostra ou padro com o reagente e o incio da medio no
fotmetro. Como o tempo de reao muito pequeno, necessrio
utilizar umfotmetro que tenha controle de temperatura a 37 Cna cubeta
(cubeta termostatizada).
Acertar o zero do fotmetro em 505 nm (490 a 520) com gua destilada
ou deionizada. Adicionar 0,01 mL da amostra ou Padro a 1,0 mL do
Reagente 1 previamente aquecido a 37 C. Misturar e iniciar
imediatamente a medida fotomtrica. Realizar uma medio da
absorbncia aos 30 segundos e outra medio aos 90 segundos
mantendo a reao comtemperatura controlada em37C.
A(Teste ou Padro) =Absorbncia - Absorbncia
Ado Teste
Glicose (mg/dL) = x 100
Ado Padro

90 30
03 Portugus - Ref.: 133
Linearidade
Plasma (jejum de 8 horas)
Idade
Prematuro
0 a 1 dia
> 1 dia
Crianas e Adultos
mg/dL
20 a 60
40 a 60
50 a 80
65 a 99
Os critrios para diagnstico de pr diabetes podem ser obtidos em:
American Diabetes Association. Diabetes Care 2006; (suppl 29):
S43-S48.
2/3 da glicemia quando a medio realizada em amostras
colhidas simultaneamente.
Em indivduos sadios, a pequena quantidade de lquido presente nas
cavidades articular, pleural e peritoneal originada do ultrafiltrado do
plasma. Portanto, pode-se considerar que, praticamente, a glicose ali
presente est na mesma concentrao do plasma.
Unidades convencionais (mg/dL) x 0,0556 = Unidades
SI( mmol/L)
Em duas amostras com concentraes de glicose iguais a
78 e 150 mg/dL foram adicionadas quantidades diferentes do analito,
obtendo-se no mtodo de ponto final recuperaes entre 98 e 99%. Oerro
sistemtico proporcional mdio obtido emumvalor de 120 mg/dL igual
a 1,8 mg/dL ou 1,5%.
Omtodo proposto foi comparado comummtodo
similar apresentando os resultados abaixo:
Utilizando a equao da regresso, o erro sistemtico total (constante e
proporcional) verificado no limite de deciso (120 mg/dL) foi igual a
1,58 mg/dL ou 1,32%.O erro total obtido no mesmo nvel de deciso
4,32%. Os resultados do estudo comparativo atendem especificao
para Erro Sistemtico Total de 6,9%para a Variao Biolgica.
Como as amostras foram selecionadas aleatoriamente em pacientes de
ambulatrio e pacientes hospitalizados, pode-se inferir que o mtodo tem
uma especificidade metodolgica adequada e atende aos requisitos
especificados pela American Diabetes Association (ADA) .
Os estudos de preciso foram realizados
utilizando 80 amostras com concentraes mdias iguais a 47, 129 e
194 mg/dL.
Lquor .
Converso .
Caractersticas do desempenho
Exatido .
Especificidade .
Estudos de preciso .
12
5
O erro total (erro aleatrio + erro sistemtico) estimado em
concentraes iguais a 45 mg/dL, 120 mg/dL e 180 mg/dL igual a
6,17%, 4,32%e 4,83%, respectivamente.
Os resultados indicam que o mtodo atende a especificao desejvel
para o erro total ( 6,9%) baseada nos componentes da Variao
Biolgica.
Uma amostra protica contendo
44 mg/dL de glicose foi utilizada para calcular o limite de deteco do
ensaio tendo sido encontrado um valor igual a 1,77 mg/dL, equivalente
3 vezes o desvio padro das replicatas da amostra. Utilizando-se a
absorbncia do padro como parmetro, o limite de deteco fotomtrica
0,28 mg/dL correspondendo a uma absorbncia igual a 0,001.
Duas amostras com valores
iguais a 634 e 625 mg/dL foram utilizadas para avaliar a resposta do
sistema nas diluies da matriz com NaCl 150 mmol/L (0,85%).
Utilizando fatores de diluio que variaram de 2 a 8 foram encontradas
recuperaes entre 95 e 99%.
Valores elevados de glicose ocorrem nos
vrios tipos de diabetes primrias, nos estados de intolerncia glicose e
nas diabetes secundrias vrias doenas (hiper tireoidismo,
hiperpituitarismo, hiperadrenocorticismo, etc.).
Valores diminudos de glicose ocorremnas hipoglicemias que podemser
devidas a vrias causas. Quando a ocorrncia de sintomas de
hipoglicemia relacionada alimentao, duas formas de hipoglicemia
podemser definidas: hipoglicemia do jejume ps-prandial.
As causas mais comuns de hipoglicemia do jejum so: hiperinsulinismo
endgeno (insulinoma e sulfonilurea), hiperinsulinismo exgeno
(factcio), tumores extrapancreticos, sndrome auto imune (formao
espontnea de anticorpos para receptores da insulina), insuficincia
supra-renal e ou hipofisria, doena heptica grave e alcoolismo.
A hipoglicemia ps-prandial dependendo da histria clnica e da resposta
ao teste oral de tolerncia glicose, classificada em hipoglicemia
alimentar, hipoglicemia do diabtico tipo II e do paciente comintolerncia
glicose, hipoglicemia funcional ou reativa.
Para uma reviso dos critrios diagnsticos e classificao do diabetes
mellitus consultar Diabetes Care 2004; 27 (SUPLL 1):S5-S10 ou:
http:/care.diabetesjournals.org/cgi/content/full/27/suppl_1/s5.
Areduo da concentrao de glicose nos lquidos corporais encontra-se
usualmente relacionada a processos inflamatrios ou infecciosos. A
determinao da concentrao de glicose no lquor representa um dos
parmetros para a distino entre meningite bacteriana e virtica, porm
tendo sensibilidade inferior avaliao da celularidade no mesmo
material.

Sensibilidade metodolgica .
Efeitos da diluio da matriz .
Significado clnico .
04 Portugus - Ref.: 133
Mdia
47
129
194
DP
0,60
1,86
2,81
CV (%)
1,25
1,08
0,62
N
80
80
80
Amostra 2
Amostra 3
Amostra 1
Repetitividade - impreciso intra-ensaio
Mdia
47
129
194
DP
1,04
1,47
1,88
CV (%)
2,19
1,82
1,66
N
80
80
80
Amostra 2
Amostra 3
Amostra 1
Reprodutibilidade - impreciso total
Nmero de amostras
Intervalo de
concentraes (mg/dL)
Mtodo
Comparativo
40
44 - 606 mg/dL
Mtodo Labtest
Equao da regresso
Coeficiente de correlao
Mtodo Labtest (mg/dL) = 0,9637 x
Comparativo + 2,8
0,999
Observaes
1.
2.
3.
Referncias
A limpeza e secagem adequadas do material utilizado so fatores
fundamentais para a estabilidade dos reagentes e obteno de resultados
corretos.
O laboratrio clnico tem como objetivo fornecer resultados exatos e
precisos. A utilizao de gua de qualidade inadequada uma causa
potencial de erros analticos. A gua utilizada no laboratrio deve ter a
qualidade adequada a cada aplicao. Assim, para preparar reagentes,
usar nas medies e para uso no enxge final da vidraria, a gua deve ter
resistividade 1 megaohm.cm ou condutividade 1 microsiemens/cm e
concentrao de silicatos <0,1 mg/L. Quando a coluna deionizadora est
com sua capacidade saturada ocorre liberao de vrios ons, silicatos e
substncias com grande poder de oxidao ou reduo que deterioram
os reagentes em poucos dias ou mesmo horas, alterando os resultados
de modo imprevisvel. Assim, fundamental estabelecer umprograma de
controle da qualidade da gua.
Vrias publicaes demonstram que a urina contm numerosas
substncias, principalmente o cido rico, que interferem nos mtodos
utilizando a reao GOD-POD, levando a resultados falsamente
diminudos.
1. Bergmeyer HU. Methods of Enzimatic Analysis, 3a. edio, Vol VI,
Deerfield Beach:VCH, 1986:178-184.
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10. Basques JC. Especificaes da Qualidade Analtica. Labtest
Diagnstica 2005.
11. Burtis CA, Ashwood ER. Textbook of Clinical Chemistry, 2a. edio,
Philadelphia: W.B. Saunders, 1986:2175-2211.
12. Labtest: Dados de Arquivo.
Esto disponveis aplicaes para sistemas automticos e semi-
automticos.
O nmero de teste
garante o desempenho deste produto, dentro das
especificaes, at a data de expirao indicada nos rtulos, desde que
os cuidados de utilizao e armazenamento indicados nos rtulos e
nestas instrues sejamseguidos corretamente.
em aplicaes automticas depende dos
parmetros de programao.
[Termos e Condies de Garantia]
A Labtest Diagnstica
Informaes ao consumidor
05 Portugus - Ref.: 133
Apresentao
Produto Referncia Contedo
133-1/500
1 x 5 mL
1 x 500 mL
1
Glicose Liquiform
133-2/500
1 x 5 mL
2 x 500 mL
1
CNPJ: 16.516.296 / 0001 - 38
Av. Paulo Ferreira da Costa, 600 - Vista Alegre - CEP 33400-000
Lagoa Santa . Minas Gerais Brasil - www.labtest.com.br
Labtest Diagnstica S.A.
Servio de Apoio ao Cliente 0800 031 34 11 (Ligao Gratuita)
e-mail: sac@labtest.com.br
Reviso: Dezembro, 2011
Ref.: 270212
Copyright by Labtest Diagnstica S.A.
Reproduo sob prvia autorizao
06 Portugus - Ref.: 133
Smbolos utilizados com produtos diagnsticos in vitro
Smbolos usados con productos diagnsticos in vitro
Symbols used with ivd devices
Representante Autorizado na Comunidade Europeia
Representante autorizado en la Comunidad Europea
Authorized Representative in the European Community
Contedo suficiente para < n > testes
C
C
ontenido suficiente para < n > tests
ontains sufficient for < n > tests
Data limite de utilizao (aaaa-mm-dd ou mm/aaaa)
Estable hasta
Use by
(aaaa-mm-dd o mm/aaaa)
(yyyy-mm-dd or mm/yyyy)
Limite de temperatura (conservar a)
Temperatura limite
Temperature limitation
(conservar a)
(store at)
Material Calibrador
Material Calibrador
Calibrator Material
Material Calibrador
Material Calibrador
Calibrator Material
Consultar instrues de uso
Consultar instrucciones de uso
Consult instructions for use
Adies ou alteraes significativas
Cambios o suplementos significativos
Significant additions or changes
Liofilizado
Liofilizado
Lyophilized
Produto diagnstico in vitro
Dispositivo de diagnstico in vitro
In vitro diagnostic device
Nmero do catlogo
Nmero de catlogo
Catalog Number
Ref.: 170309
Corrosivo
Corrosivo
Corrosive
Controle negativo
Control negativo
Negative control
Controle positivo
Control positivo
Positive control
Controle
Control
Control
Controle
Control
Control
Marca CE
Marcado CE
CE Mark
Txico
Txico
Poison
Reagente
Reactivo
Reagent
Nmero do lote
Denominacin de lote
Batch code
Risco biolgico
Riesgo biolgico
Biological risk
Fabricado por
Elaborado por
Manufactured by