COMISIN DE CONTROL ANALTICO Y AMPLIACIN DE COBERTURA Rev. No.

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3.3 BLANCO DE MUESTRA: Son matrices que no contienen el analito de inters (placebo). Son difciles de obtener pero son necesarios para estimar las interferencias que pudieran encontrarse durante el anlisis de las muestras de prueba. 3.4 CRITERIOS DE ACEPTACIN: Parmetros bajo los cuales el resultado de una prueba ser considerado aceptable. 3.5 CURVA DE CALIBRACIN: Es la representacin grfica de la seal medida como una funcin de cantidad del analito. 3.6 INCERTIDUMBRE: Estimacin que caracteriza el intervalo de valores, dentro de los cuales se encuentra el valor convencionalmente verdadero de la magnitud medida. 3.7 INTERVALO DE TRABAJO: Intervalo comprendido entre las concentraciones superior e inferior (incluyendo dichas concentraciones) y para las que se ha demostrado que el analito es cuantificado con un nivel satisfactorio de repetibilidad, recuperacin y linealidad. 3.8 INTERVALO LINEAL: Es la capacidad de un mtodo analtico para dar resultados que son directamente proporcionales a la concentracin del analito dentro de un intervalo dado. 3.9 LMITE DE CUANTIFICACIN: Es la concentracin ms baja a la cual el analito puede cuantificarse con una precisin y veracidad aceptables bajo las condiciones experimentales establecidas. 3.10 LMITE DE DETECCIN: Es la concentracin ms baja a la cual puede detectarse el analito pero no necesariamente cuantificarse bajo las condiciones experimentales establecidas. 3.11 MATRIZ O PLACEBO: Muestra que contiene todos los componentes de un producto a excepcin del analito. 3.12 MTODO NORMALIZADO: Proceso de medicin robusto donde pequeas variaciones en el procedimiento no deben producir de forma imprevista grandes variaciones en los resultados. 3.13 MTODO NO NORMALIZADO: Mtodo alternativo que demuestra o estima el mismo analito tal cual se mide utilizando el mtodo normalizado. 3.14 MUESTRA ADICIONADA O FORTIFICADA: Porcin representativa del material a evaluar, a la que se le adicionan cantidades conocidas del analito de inters.
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3.15 PARMETRO DE DESEMPEO: Parmetro especfico a evaluar en una validacin. 3.16 RECUPERACIN O RECOBRO: Cantidad del analito recuperada en la porcin de muestra o muestra adicionada cuando esta es conducida a travs del mtodo analtico completo, y que permite evaluar la eficiencia de la extraccin, proceso de preparacin e interferencias que puedan existir al aplicarlo. Se expresa en trminos de porcentaje. 3.17 REPETIBILIDAD: Grado de concordancia entre resultados analticos individuales, cuando el procedimiento se aplica repetidamente a diferentes porciones de una muestra homognea por un solo analista, usando los mismos instrumentos y mtodo en intervalos cortos de tiempo. 3.18 REPRODUCIBILIDAD (PRECISIN INTERMEDIA): Grado de concordancia entre resultados analticos individuales, cuando el procedimiento se aplica repetidamente a diferentes porciones de una muestra homognea por dos analistas o instrumentos diferentes, usando el mismo mtodo en diferentes das. 3.19 RESPUESTA ANALTICA: Lectura obtenida al aplicar un mtodo analtico, como pueden ser el rea o altura del pico en un cromatograma, lectura de absorbancia, cuentas de iones en un Espectro de Masas, lectura en mV, mL gastados en volumetra, diferencia de peso en un gravimtrico, entre otros. 3.20 RESULTADO DE ENSAYO: Valor de un mensurando obtenido tras la realizacin de un mtodo de ensayo especfico. 3.21 ROBUSTEZ: Es la medida de la capacidad del mtodo analtico de permanecer inalterado por pequeas, pero deliberadas variaciones (efecto de cambio en las condiciones) en los parmetros del mismo, proporcionando un ndice de su confiabilidad durante su uso normal. 3.22 SELECTIVIDAD: Es la capacidad de un mtodo analtico para medir solamente lo qu se pretende que se mida. 3.23 SENSIBILIDAD: Es el cambio en la respuesta del instrumento que corresponde a un cambio en la concentracin del analito. Es la pendiente del intervalo de trabajo y cuanto mayor es esta, mayor es la sensibilidad del mtodo. 3.24 SESGO: Es la diferencia entre el valor promedio obtenido de los resultados de prueba con respecto a un valor de referencia aceptado o conocido. 3.25 VALIDACIN: Es el proceso que establece, mediante estudios de laboratorio, que las caractersticas de desempeo del mtodo, satisfacen los requisitos para su aplicacin analtica.
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3.26 VALIDACIN PARCIAL (confirmacin del mtodo): Evidencia objetiva para demostrar que al aplicar un mtodo normalizado, se cumple con las especificaciones del mismo y se cuenta con la competencia tcnica para realizarlo adecuadamente tomando en consideracin sus propias instalaciones, equipo y personal. 4. DOCUMENTOS APLICABLES 1. AOAC. Guidelines for Single Laboratory Validation of Chemical Methods for Dietary Supplements and Botanicals. December 2002. 2. CENAM. Gua para estimar la incertidumbre de la medicin. Abril 2004. 3. CENAM-EMA. Gua tcnica sobre trazabilidad e incertidumbre en las mediciones analticas que emplean la tcnica de medicin de conductividad electroltica. Abril 2008. 4. CENAM-EMA. Gua tcnica sobre trazabilidad e incertidumbre en las mediciones analticas que emplean las tcnicas de Espectrofotometra de Absorcin Atmica y de Emisin y Atmica con Plasma Acoplado Inductivamente. Abril 2008. 5. CENAM-EMA. Gua tcnica sobre trazabilidad e incertidumbre en las mediciones analticas que emplean las tcnicas de Cromatografa de Gases (GC) y Cromatografa de Lquidos de Alta Resolucin (HPLC). Abril 2008. 6. CENAM-EMA. Gua tcnica sobre trazabilidad e incertidumbre en las mediciones analticas que emplean la tcnica de Gravimetra de Masa. Abril 2008. 7. CENAM-EMA. Gua tcnica sobre trazabilidad e incertidumbre en las mediciones analticas que emplean la tcnica de medicin de pH. Abril 2008. 8. CENAM-EMA. Gua tcnica sobre trazabilidad e incertidumbre en las mediciones analticas que emplean la tcnica de Titulacin volumtrica. Abril 2008. 9. CENAM-EMA. Gua tcnica sobre trazabilidad e incertidumbre en las mediciones analticas que emplean la tcnica de Espectrofotometra de Ultravioleta-Visible. Abril 2008. 10. Colegio Nacional de Qumicos Farmacuticos Bilogos. Gua de Validacin de Mtodos Analticos. Edicin 2002. 11. Directiva 96/23/CE en cuanto al funcionamiento de los mtodos analticos y la interpretacin de los resultados. Agosto 2002.
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12. EMA. Documento MP-CA005-01. Manual de Procedimientos. Incertidumbre de mediciones. Poltica. 13. Eurachem. The Fitness for Purpose of Analytical Methods. A Laboratory Guide to Method Validation and Related Topics. First Edition 1998. 14. Eurachem-CITAC. Guide CG4 Quantifying Uncertainty and Analytical Measurements. Second Edition. QUAM :2000.1 15. IUPAC. Harmonized Guidelines for Single Laboratory Validation of Methods of Analysis. Pure Appl. Chem., Vol. 74, No. 5, pp. 835855, 2002. 16. NMX-CH-140-IMNC-2002. Gua para la expresin de incertidumbre en las mediciones. 17. RILAA/INPAZ. Curso a distancia sobre Validacin de Mtodos Qumicos. Buenos Aires, Argentina. 2005. 18. Eurolab. Measurement Uncertainty in Testing. A short introduction on how to characterize accuracy and reliability of results including a list of useful references. Techical Report No. 1/2002. June 2002. 5. 5.1 DESCRIPCIN DE LA ACTIVIDAD CRITERIO No. 1 Clasificar el mtodo como Normalizado o no Normalizado conforme a lo siguiente: 5.1.1 Mtodo Normalizado es aquel mtodo publicado como primera instancia en: 1. Normas Oficiales Mexicanas (NOM) 2. Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos (FEUM) 3. Normas Mexicanas (NMX). Como segunda instancia: 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. Mtodos Oficiales del AOAC Standard Methods Environmental Protection Agency (EPA) Pesticide Analytical Manual (PAM) Collaborative International Pesticides Analytical Council (CIPAC) United States Pharmacopoeia (USP) British Pharmacopoeia (BP) American Society for Testing Materials (ASTM) International Standard Organization (ISO)
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13. 14. 15. 16. 17. 5.1.2

Codex Alimentarius Food and Drug Administration (FDA) Food and Agriculture Organization (FAO) European Commission (CE) United States Department of Agriculture (USDA)

Mtodo no Normalizado es aquel: 1. Desarrollado por el laboratorio (mtodo propio). 2. Mtodo obtenido de publicaciones cientficas (Journals, tesis, etc). 3. Mtodo normalizado modificado, ampliado o usado fuera de su alcance.

5.2

CRITERIO No. 2 Considerar los siguientes parmetros de desempeo de acuerdo al tipo de mtodo. Mtodos normalizados Fisicoqumicos Intervalo lineal y de trabajo Lmite de deteccin Lmite de cuantificacin Recuperacin Sesgo Repetibilidad Reproducibilidad Incertidumbre Sensibilidad Selectividad Robustez Fsicos Cuantitativos Cualitativos Mtodos no normalizados Fisicoqumicos

Parmetro

Nota: Los parmetros de desempeo a considerar para los mtodos fisicoqumicos depender del tipo de prueba de que se trate.

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5.3

CRITERIO No. 3 Clasificar el mtodo por tipo de prueba

Tipo de prueba Metodologa

Espectrofotometra UV-Visible Turbiedad Espectrofotomtrica Absorcin Atmica (AA), Plasma Inductivamente Acoplado (ICP) Cromatografa de Lquidos (HPLC), Cromatografa de Gases (GC), Cromatografa de Lquidos-Masas (HPLC-MS), Cromatografa de Gases- Masas (GC-MS) pH Aniones y cationes por tcnica de Ion selectivo Conductimetra Valoraciones por titulacin (manual y automtica) Prdida por secado Residuo de ignicin Materia extraa Densidad relativa Disolucin Desintegracin ndice de refraccin Rotacin ptica Punto de fusin Polarimetra Espectrometra de Infrarrojo Variacin de volumen Uniformidad de dosis Osmolaridad Temperatura de fusin Dispositivos mdicos Color Viscosidad Temperatura de fusin, etc.

Cromatogrfica

Potenciomtrica Volumtrica Gravimtrica

Fsica (cuantitativa)

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Tipo de prueba

Metodologa Pruebas lmites de cloruros, fosfatos, hierro, fluoruros, sulfatos, etc Metales pesados (cualitativa) Inhibidores (formaldehdo, sales cuaternarias, oxidantes, derivados clorados, etc.

Fsica (cualitativa)

CRITERIO No. 4 Establecer los parmetros finales de desempeo con base al tipo de prueba:
Tipo de prueba Espectrofotomtrica Gravimtrica SI NO SIa SI SI SI SI SI SId SI SId

Volumtrica

Intervalo lineal y de trabajo Lmite de deteccin Lmite de cuantificacin Recuperacin Sesgo Repetibilidad Reproducibilidad Incertidumbre Sensibilidad Selectividad Robustez
a

SI SIa SIa SI SI SI SI SI SId SId SId

SI SIa SIa SI SI SI SI SI SId SId SId

SI NO SIa NO SI SI SI SI SId,e SId,e SId

SI NO SIa SI SI SI SI SI SIe SI SId

NO SIb NO NO NO SIc SIc SIc NO SIb SId

Solo para anlisis a nivel de trazas (ppm, ppb, ppt) b Solo mtodos cualitativos. c Solo mtodos cuantitativos. d Solo aplica para mtodos no normalizados. e Solo para el anlisis de aniones y cationes por in selectivo

Nota: Solo para mtodos gravimtricos y volumtricos la selectividad se sustenta con los resultados de linealidad, recuperacin, repetibilidad y reproducibilidad, si estos cumplen con los criterios de aceptacin establecidos 8 / 20

Fsica

Parmetro de desempeo

Potenciomtrica

Cromatogrfica

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5.5

CRITERIO No. 5 Seleccionar el tipo de matriz a evaluar conforme a: 1. La ms solicitada. 2. La ms compleja. 3. Para mtodos generales que apliquen a diferentes matrices; FEUM, Residuos orgnicos, metales contaminantes, etc. Se debe seleccionar una matriz representativa por grupo (alimentos, principio activo, tipo de presentacin, entre otros) a. Alimentos: lcteos, crnicos, productos de la pesca agua, cereales, frutas, vegetales, productos de panificacin, miel, productos de confitera, especias, entre otros. b. Medicamentos: cpsula, gragea, tableta, suspensin, jarabe, ungento, colirio, espuma, gel, supositorio, parche, jalea, ovulo, entre otros.

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5.6

CRITERIO No. 6

Evaluar los parmetros de desempeo correspondientes como se detalla en las siguientes tablas:
Parmetro Muestras Repeticiones Calcular/determinar Observaciones
a) Utilizar niveles establecidos en la curva de calibracin utilizar la tabla gua contenida en el anexo A. Blancos de muestra (placebos) o muestras adicionadas a) Graficar respuesta analtica (y) vs. nivel de concentracin adicionado (x) b) Confirmar visualmente la existencia de linealidad del intervalo. c) Elaborar grfico de residuales. d) Confirmar aleatoriedad de los residuales alrededor de la recta
Ver nota 2

b) Los niveles de concentracin deben estar igualmente espaciados en el intervalo de inters. c) Considerar en el intervalo el valor de la especificacin y/o los valores de aceptacin y rechazo y estar en la medida de lo posible al centro de este. d) Reportar el intervalo de concentraciones obtenido en las unidades establecidas por el mtodo. a) Utilizar los datos obtenidos en la estimacin del intervalo lineal. b) Reportar el intervalo de concentraciones obtenido en las unidades establecidas por el mtodo

Intervalo lineal

Mnimo 5 niveles diferentes de concentracin

Cada nivel por triplicado

Intervalo de trabajo

Blancos de muestra (placebos) o muestras adicionadas Mnimo 5 niveles diferentes de concentracin.

a) Considerar los niveles que cumplen con los criterios de recuperacin y repetibilidad establecidos. Cada nivel por triplicado b) Graficar la concentracin obtenida (y) vs. la concentracin adicionada (x) c) Calcular la pendiente (m) y el coeficiente de correlacin (r ). 10 / 20

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Parmetro Lmite de deteccin (pruebas cualitativas)

Muestras
Blancos de muestra (placebos) o muestras adicionadas. Mnimo 5 niveles diferentes de concentracin.

Repeticiones

Calcular/determinar

Observaciones

10 replicas de cada nivel

Elaborar tabla de respuesta de resultados positivos y negativos con respecto a la concentracin a) Calcular la pendiente (m) y la desviacin estndar de la ordenada al origen (sbo) de la respuesta analtica (y) vs nivel de concentracin adicionado (x) Estimar los lmites con las siguientes ecuaciones:

Concentracin mnima en la cual se obtienen 10 resultados positivos

a) Utilizar los datos obtenidos en la estimacin del intervalo de trabajo, b) Reportar los lmites estimados estadsticamente en las unidades establecidas por el mtodo. c) Considerar como lmite prctico de cuantificacin el nivel inferior estimado en el intervalo de trabajo.

Lmites de deteccin y cuantificacin

Blancos de muestra (placebos) o muestras adicionadas Mnimo 5 niveles diferentes de concentracin.

Cada nivel por triplicado

b)

LD = LC =

3.3 * sbo m 10 * sbo m

Recuperacin y sesgo

Blancos de muestra (placebos) o muestras adicionadas. Mnimo 5 niveles diferentes de concentracin

Cada nivel por triplicado

a) Calcular la concentracin recuperada para cada nivel de concentracin adicionado. b) Para el sesgo, efectuar la resta aritmtica de la concentracin aadida menos la concentracin recuperada. 11 / 20

a) Utilizar los datos obtenidos en la estimacin del intervalo de trabajo b) Reportar la recuperacin como intervalo en % y el sesgo como intervalo en las unidades establecidas por el mtodo.

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Parmetro

Muestras

Repeticiones

Calcular/determinar
a) Analizar las muestras por un mismo analista (analista 1) en 2 das diferentes (3 niveles/triplicado /da).

Observaciones
a) Utilizar la informacin obtenida en la estimacin del intervalo de trabajo como los datos para el da 1 (cada nivel por triplicado por da). b) Reportar la desviacin estndar (sr) o coeficiente de variacin (CVr) mximos obtenidos. c) Si no se cuenta con dos analistas o dos equipos para estimar la reproducibilidad, estimar solo la repetibilidad con el mismo analista pero utilizando un tercer da.

Blancos de muestra (placebos) o muestras adicionadas.

Repetibilidad

Tres niveles diferentes de concentracin (niveles inferior, medio y superior estimados en el intervalo de trabajo)

Cada nivel por sextuplicado.

b) Calcular el % de recuperacin de los 6 resultados para cada nivel c) Calcular la media (x), desviacin estndar (sr) y el coeficiente de variacin (CVr) de los % de recuperacin obtenidos para cada nivel adicionado. a) Analizar las muestras en 2 das diferentes (3 niveles/triplicado/da) y por un analista diferente (analista 2)

Reproducibilidad Tres niveles diferentes de (Precisin concentracin (niveles inferior, intermedia)

Blancos de muestra (placebos) o muestras adicionadas.

Cada nivel por sextuplicado.

b) Calcular el % de recuperacin de los 6 resultados para cada nivel c) Combinar estos resultados con los datos obtenidos en la estimacin de la repetibilidad y calcular la media (x), desviacin estndar (sR) y el coeficiente de variacin (CVR) de los % de recobro para cada nivel.

Reportar la desviacin estndar (sR) o coeficiente de variacin (CVR) mximos obtenidos

medio y superior estimados en el intervalo de trabajo).

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Parmetro

Muestras
Blancos de muestra (placebos) o muestras adicionadas.

Repeticiones

Calcular/determinar
a) Graficar la respuesta analtica (y) vs la concentracin adicionada (x) b) Calcular la pendiente de la recta (m)

Observaciones
a) Utilizar los datos obtenidos en la estimacin del intervalo de trabajo b) Reportar la relacin entre el cambio de respuesta analtica por unidad de concentracin. Pueden emplearse tcnicas confirmatorias para asegurar la identidad del analito como son la utilizacin de detectores de espectrometra de masas, arreglo de diodos o infrarrojo. Cuando no se tienen estndares de interferencias o impurezas se pueden aplicar las siguientes condiciones de degradacin: a) Temperatura: 70-120 C o 20 C por debajo de su punto de fusin, durante 2 a 4 semanas. b) Luz UV, luz fluorescente y/o humedad relativa por un tiempo apropiado. c) pH 1 a 2 y/o 10 a 12 y someterlas a 60-80 C por un tiempo apropiado. d) Para lquidos y semislidos adicionar perxido de hidrgeno.

Sensibilidad

Mnimo 5 niveles diferentes de concentracin.

Cada nivel por triplicado

Selectividad

Blancos de muestra o muestras adicionadas con cantidades conocidas de interferencias, productos de degradacin o impurezas

Por duplicado

Evaluar si la presencia de las interferencias, impurezas o productos de degradacin inhiben o incrementan la deteccin del analito.

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Parmetro

Muestras

Repeticiones

Calcular/determinar
a) Identificar de 4 a 7 factores que puedan tener un efecto significativo en el desempeo del mtodo y variar ligeramente cada uno ellos. b) Efectuar una serie de 8 combinaciones de valores nominales con variaciones deliberadas

Observaciones

Blancos de muestra (placebos) o muestras adicionadas

a) Reportar los factores que ms influyen en el resultado final. b) Establecer si el mtodo es robusto frente a las variaciones establecidas.

Robustez

Concentracin equivalente al nivel medio estimado en el intervalo de trabajo

8 muestras por duplicado

c) Analizar una muestra por duplicado con cada serie de combinaciones d) Calcular las diferencias de las mediciones de los subgrupos. e) Graficar en una lnea los valores de las diferencias de menor a mayor. f) Calcular la desviacin estndar de las diferencias (sDi).

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Parmetro

Muestras

Repeticiones

Calcular/determinar
a) Especificar el mensurando. b) Identificar incertidumbre las fuentes de

Observaciones

Incertidumbre

No aplica

Utilizar la informacin obtenida en el proceso de validacin.

c) Cuantificar los componentes de la incertidumbre (u) d) Calcular la incertidumbre estndar combinada (uc) e) Calcular expandida(Uexp) la incertidumbre

Puede utilizarse como gua los criterios establecidos en las referencias 2, 12, 14, 16 y 18.

Nota 1. Cuando no sea posible adicionar de manera directa el analito en la muestra, la adicin debe ser llevada a cabo en las primeras etapas. Nota 2. Para la determinacin de: intervalo lineal y de trabajo, lmites de deteccin y cuantificacin, recuperacin, sesgo, repetibilidad y sensibilidad se debe aplicar el mtodo de ensayo especfico por un mismo analista (el de ms experiencia en el anlisis) bajo las mismas condiciones. Nota 3. Para mtodos fsicos cuantitativos la repetibilidad y reproducibilidad se calculan en base a la lectura directa.

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5.7

CRITERIO No. 7 Criterios de aceptacin

Parmetro Intervalo lineal b) Datos aleatorios en el grfico de residuales a) Pendiente: valor cercano a 1 Intervalo de trabajo b ) Coeficiente de correlacin: r 0.98 para cuantificacin de residuos e impurezas r 0.99 para cuantificacin de contenido e ingrediente activo Nivel inferior estimado en el intervalo de trabajo Menor o igual al nivel inferior estimado en el intervalo de trabajo Los establecidos en la referencia original del mtodo. Si no se dispone de estos datos utilizar como gua las tablas contenidas en el anexo B. Si sDi < sR el conjunto de los factores no influye en el resultado y por tanto el mtodo es robusto. Criterio de aceptacin a) Comportamiento lineal en la grfica de concentracin vs respuesta analtica.

Lmite de cuantificacin prctico Lmite de cuantificacin estimado Lmite de deteccin Recuperacin Repetibilidad Reproducibilidad Robustez

5.8

CRITERIO No. 8

Elaborar un protocolo de validacin que incluya lo siguiente:

Ttulo 1.Objetivo 2. Campo de aplicacin 3. Mtodo de ensayo 4. Equipo 5. Materiales Protocolo de validacin parcial o total (segn aplique). Sealar asimismo el nombre y clave del mtodo que se pretende validar. Considerar los parmetros de desempeo a evaluar y el analito a determinar Indicar el tipo de producto (s) para los cuales aplica la validacin Elaborar un diagrama de flujo simplificado, que seale la metodologa empleada para cuantificar el analito (mtodo interno) Descripcin general del equipo a utilizar en la validacin. Indicar los materiales a utilizar separando como material de uso general y material volumtrico
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6. Reactivos

a) Indicar el nombre de los reactivos a utilizar y su grado. b) Sealar los patrones a utilizar con su grado de pureza o concentracin. c) Detallar la preparacin de las soluciones de trabajo (soluciones que no requieren de un valor de ttulo exacto). d) Detallar la preparacin de la soluciones de referencia (soluciones que requieren de un ttulo exacto, soluciones stock, curva de calibracin, etc.). Indicar las caractersticas, forma de almacenamiento y cantidades de muestra estimadas para llevar a cabo la validacin. Detallar la preparacin de los blancos de muestra o muestras adicionadas. Detallar las instrucciones para cada uno de los parmetros de desempeo a ensayar. Propuesta de formato de registro Establecer para cada parmetro de desempeo la herramienta estadstica a utilizar para su evaluacin. Establecer los criterios de aceptacin que deben cumplirse con su respectiva referencia bibliogrfica.

7. Muestras 8. Desarrollo experimental 9. Resultados 10. Anlisis estadstico 11. Criterios de aceptacin

Nota: El protocolo debe incluir firmas de quien elabor, revis y aprob.

5.9

CRITERIO No. 9

Elaborar un informe de resultados de validacin que incluya lo siguiente: Ttulo 1.Objetivo 2. Campo de aplicacin 3. Antecedentes 4. Equipo 5. Materiales Informe de resultados de validacin parcial o total (segn aplique). Sealar asimismo el nombre y clave del mtodo que se valid. Considerar los parmetros de desempeo evaluados y el analito determinado. Indicar el tipo de producto (s) para los cuales aplic la validacin Hacer una breve explicacin de las caractersticas del analito, su importancia sanitaria o nutricional, as como las especificaciones nacionales e internacionales establecidos para este. Descripcin del nombre, marca, modelo, nmero de serie, nmero de identificacin e intervalo de trabajo del equipo utilizado en la validacin Descripcin de: a) Nombre, marca y lote del material de uso general utilizado. b) Nombre, marca, clave, volumen nominal y volumen real del material volumtrico empleado a) Indicar el nombre, marca, grado, pureza, presentacin y lote de los reactivos utilizados b) Indicar el nombre, marca, pureza o concentracin, presentacin y lote de los patrones de referencia utilizados c) Detallar la preparacin de las soluciones de trabajo (soluciones que no requieren de un valor de ttulo exacto) que se emplearon
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6. Reactivos

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d) Detallar la preparacin de la soluciones de referencia (soluciones que requieren de un ttulo exacto, soluciones stock, curva de calibracin, etc.) que se utilizaron. Indicar las caractersticas, forma de almacenamiento, marca, presentacin, caducidad y cantidades de muestra utilizadas para llevar a cabo la validacin. Detallar la preparacin de los blancos de muestra o muestras adicionadas utilizados. Elaborar un diagrama de flujo simplificado, que seale la metodologa empleada para cuantificar el analito (mtodo interno) Detallar como se llevaron a cabo los ensayos de cada uno de los parmetros de desempeo. Presentacin de resultados en forma de tablas, sealando fechas de inicio y trmino, analistas, laboratorio, analito, matriz, unidades y clave de bitcora o registro primario Presentar en forma de tabla los criterios de aceptacin considerados y los resultados obtenidos y hacer las observaciones correspondientes. Efectuar una conclusin final en donde se seale que el mtodo se ajusta al uso propuesto (Numeral 5.4.3 17025) Referencias utilizadas. Los que aplique: Bases de datos utilizadas Cromatogramas, espectros, resultados impresos, etc. Certificados de anlisis o pureza. Certificados de trazabilidad Certificados de calibracin de material. Formatos de verificacin de material Grficos de control, etc.

7. Muestras 8. Mtodo de ensayo 9. Desarrollo experimental 10. Resultados 11. Anlisis de resultados 12. Conclusin 13. Bibliografa

14. Anexos

Nota: El informe de resultados debe incluir firmas de quien elabor, revis y aprob.

6.0 NOTIFICACIN DE VIGENCIA Se otorga un periodo de transicin de 180 das contados a partir de la fecha de publicacin para que los laboratorios que se encuentren autorizados o en proceso del mismo se apeguen a estos criterios. Para los laboratorios que soliciten autorizacin posterior a la fecha de publicacin, debern cumplir estos criterios de inicio. Estos criterios se aplicarn en todos los procesos de evaluacin que se realicen a los 180 das naturales, a partir de la fecha de publicacin del documento en la pgina web de la COFEPRIS.
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ANEXOS Anexo A. Gua para considerar los niveles del intervalo lineal

Determinacin Contenido o principio activo Cuantificacin de una impureza Uniformidad de contenido Prueba de disolucin Residuos y contaminantes

Intervalo recomendado 80 a 120 % del contenido del marbete o especificacin 50 a 120 % el valor de la especificacin 70 a 130 % la concentracin declarada en el marbete Mnimo 20% el intervalo establecido 0 a 150 % el valor de la especificacin.

Anexo B.- Criterios de aceptacin Recuperacin para contenido en alimentos y agua

Concentracin del analito 0.1 a 1 % 1 a 10 % 10 a 99 % 100 % Criterio de aceptacin 90-108% 92-105% 95-102% 98-101%

Recuperacin para residuos y contaminantes en alimentos y agua.

Concentracin del analito < 1 g/kg g/L 1 a 10 g/kg g/L 10 a 100 g/kg g/L 0.1 a 100 mg/kg mg/L 100 a 1000 mg/kg mg/L Criterio de aceptacin 50-120% 60-120% 70-120% 70-110% 85-110%

Recuperacin en productos farmacuticos

Prueba Cromatogrfica Volumtrica Espectrofotomtrica 19 / 20 Criterio de aceptacin 98-102% 98-102 % 97-103 %

COMISIN DE CONTROL ANALTICO Y AMPLIACIN DE COBERTURA Rev. No.: 0 CRITERIOS PARA LA VALIDACIN DE MTODOS FISICOQUMICOS FECHA: 2011-02-16 CLAVE: CCAYAC-P-058

Repetibilidad y reproducibilidad para contenido en alimentos y agua.

Repetibilidad ( r) CVr 3% CVr 2% CVr 1.5 % CVr 1% Reproducibilidad (R ) CVR 6% CVR 4% CVR 3 % CVR 2%

Concentracin del analito 0.1 a 1 % 1 a 10 % 10 a 99 % 100 %

Repetibilidad y reproducibilidad para residuos y contaminantes en alimentos y agua.

Concentracin del analito < 1 g/kg g/L 1 a 10 g/kg g/L 10 a 100 g/kg g/L 0.1 a 100 mg/kg mg/L 100 a 1000 mg/kg mg/L Repetibilidad ( r) CVr 35% CVr 30% CVr 20% CVr 15% CVr 10 % Reproducibilidad (R ) CVR 53% CVR 45% CVR 32% CVR 23% CVR 16%

Repetibilidad y reproducibilidad en productos farmacuticos

Prueba Cromatogrfica Volumtrica Espectrofotomtrica Repetibilidad CVr 2 % CVr 2 % CVr 3 % Reproducibilidad CVR 2 % CVR 2 % CVR 3 %

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