Inserm et Innovation

Neurone immature

Neurone adulte

Co-transporteur du chlore KCC2 Cl-

10/ U29: Le cerveau en construction,

GABA ClCl(Cl-)i = 25mM

Co-transporteur du chlore NKCC1 2 Cl-

GABA Cl-

Co-transporteur du chlore NKCC1 2 Cl(Cl-)i = 7mM

Dveloppement

un tissu prserver
LInmed * - unit 29 de lInserm, Marseille, se consacre ltude du dveloppement crbral et ses pathologies, notamment les pilepsies. En dcouvrant comment le GABA, qui est le principal mdiateur de linhibition du cerveau adulte, excite au contraire les neurones immatures, les chercheurs dmontrent que le cerveau jeune, loin dtre un cerveau adulte en miniature, possde ses propres lois. Dcrypter ces lois est un enjeu majeur pour comprendre, voire prvenir certaines pathologies de la maturation crbrale.
Chez ltre humain adulte, la gense dactivits cohrentes requiert lactivation synchronise de rseaux de neurones : ceux-ci produisent des patrons de dcharge et des oscillations essentielles lapprentissage et lintgration des informations. Le GABA joue un rle crucial dans cette synchronisation : chez ladulte, il est le principal mdiateur de linhibition neuronale, et les neurones qui le librent (interneurones GABA) innervent des centaines de neurones principaux. Ds lors, on comprend pourquoi le blocage de linhibition GABAergique provoque des crises dpilepsie chez ladulte, et pourquoi de nombreux anti-pileptiques, somnifres, anxiolytiques ou analgsiques sont de puissants activateurs des rcepteurs GABA, inhibant ainsi lactivit crbrale. le cerveau jeune possde ses propres lois , souligne Yzkiel Ben-Ari, directeur de lunit 29. Connatre ces lois est primordial, notamment pour prvenir les dgts que peuvent provoquer, sur le cerveau ftal, des substances activant le GABA consommes par la femme enceinte ou, sur le cerveau de lenfant, des mdicaments prescrits mal propos . Y. Ben-Ari. Cette courbe maturative du chlore a t prserve au cours de lEvolution, probablement parce quelle constitue une proprit fondamentale de lontogense et de la phylogense : le chlore joue notamment un rle essentiel dans la rgulation du volume deau intracellulaire . Pourquoi le taux de chlore intracellulaire, dabord lev dans les cellules immatures, baisse-t-il ultrieurement ? Lexplication rside dans la squence dapparition des deux co-transporteurs du chlore dans les cellules 4 : le NKCC1, qui importe le chlore, est dj prsent in utero ; tandis que le KCC2, qui exporte le chlore, apparat plus tardivement. Les chercheurs ont aussi montr que, dans lhippocampe comme dans dautres structures du cerveau en dveloppement, les neurones et les synapses GABA deviennent fonctionnels avant les neurones et les synapses au glutamate 5,6,7 (le glutamate tant le principal neurotransmetteur excitateur chez ladulte). Par consquent, une phase prcoce du dveloppement, les neurones et les synapses GABA fournissent lessentiel de lexcitation neuronale : cette excitation lie au GABA joue un rle primordial dans la croissance, la migration et la diffrenciation de groupes de neurones et dans la formation des synapses donc, in fine, dans la construction de cartes crbrales fonctionnelles.
Site de fixation des benzodiazpines Recepteur GABAA ClClGABA Site de fixation des anesthsiques

DEPOLARISATION

Site de fixation des benzodiazpines Site de fixation des anesthsiques ClClGABA

HYPERPOLARISATION

EXCITATION

INHIBITION

Site de fixation du GABA Site de fixation des barbituriques

Site de fixation du GABA Site de fixation des barbituriques

mais excitateur sur les neurones immatures

Ces travaux pionniers trouvent leur origine en 1989, lorsque lquipe de Y. Ben-Ari dcouvre leffet excitateur du GABA dans le cerveau jeune, en enregistrant des milliers de neurones immatures dans la formation hippocampique de rongeurs. Mieux : les chercheurs expliquent cet effet inhibiteur par le fait que les neurones immatures contiennent une concentration trs leve de chlore intracellulaire 1. Le rcepteur GABAA, en effet, est coupl un canal chlore : son activation laisse entrer ou sortir les ions chlore selon le gradient de chlore de part et dautre de la membrane cellulaire (voir figures). Lorsque le taux de chlore intracellulaire est lev, comme dans les neurones immatures, lactivation du rcepteur GABA entrane une sortie dions chlore et non une entre comme dans les neurones adultes. Cette sortie dions chlore dpolarise le neurone : elle rend le potentiel de repos moins ngatif, favorisant lapparition dun potentiel daction, donc lexcitation du neurone.

Le GABA : un effet inhibiteur chez ladulte

Mais ce rle inhibiteur du GABA est propre au cerveau adulte : sur les neurones immatures, au contraire, le GABA a un effet excitateur. En rvlant cette diffrence essentielle et en en expliquant lorigine, les chercheurs de lunit 29 de lInserm, Marseille, ont renvers un dogme de la neurologie: loin dtre un cerveau adulte en miniature,

dplacs constituent une des causes les plus importantes de maladies neurologiques, notamment chez le nourrisson : pilepsies gravissimes, retards mentaux, autisme, schizophrnie Une pharmacope spcifique de la femme enceinte est dvelopper, pour tenir compte des effets varis de lactivation des rcepteurs GABA selon le degr de maturation neuronale . Par ailleurs, quand on opre certains patients adultes pileptiques, il arrive que lon retrouve dans le tissu pileptique le mme type dexcitation GABAergique que celle que lon observe dans les neurones immatures , souligne le Professeur Olivier Dulac, de lHpital Necker (voir larticle sur les pi-

lepsies de lenfant, pp 33 de ce numro). Comme si, chez ces patients, il se produisait une rgression de la maturation de certaines rgions crbrales .

Laccouchement : une exception notoire leffet excitateur du GABA dans le cerveau ftal

Le neurone immature ( gauche) renferme un taux lev de chlore intracellulaire car seul le co-transporteur NKCC1, qui importe le chlore, est alors prsent : quand le GABA se lie son rcepteur GABAA, il entrane une sortie dions chlore, une dpolarisation et une excitation. Le neurone adulte ( droite), en revanche, contient peu dions chlore intracellulaire car le co-transporteur KCC2, qui exporte le chlore, est aussi prsent : quand le GABA se lie son rcepteur GABAA, il provoque une entre dions chlore, une hyperpolarisation et une inhibition neuronale.

car ceux-ci contiennent un taux lev de chlore intracellulaire

Source :
Yzkiel Ben-Ari dirige lInmed, Marseille. * LInmed (Institut de neurobiologie de la Mditerrane) est un des principaux centres de neurosciences de l'Inserm qui regroupe des quipes de recherche fondamentale et applique (l'unit 29 de l'Inserm), des quipes Avenir, un incubateur form de 3 socits de biotechnologies et des coles de formation de lycens ( l'cole Hippocampe), de chercheurs et de mdecins (l'cole d't Hippocrate).
DR

Dvelopper une pharmacope spcifique de la femme enceinte

Ces dcouvertes ont des implications cliniques importantes. Puisque lactivation du GABA a des effets contraires sur les neurones maternels et ftaux, inhibant les premiers et excitant les seconds, les molcules qui agissent sur les rcepteurs GABA, quand elles sont consommes par la femme enceinte, peuvent perturber la construction des cartes crbrales du ftus , souligne Y. Ben-Ari. De fait, lunit 29 a montr que certains anti-pileptiques retardent la migration neuronale, tant in vitro quin vivo chez le rongeur 8,9, pouvant aboutir la formation de foyers htrotopiques. Or ces amas de neurones

En 2003 et 2006, les chercheurs ont valu cette baisse en enregistrant des canaux GABA individuels laide dune technique sophistique : la concentration intracellulaire de chlore est 4 fois plus leve dans les neurones immatures que dans les neurones matures, passant de 25 30 mM in utero 6 7 mM chez ladulte 2,3. Il sagit l dune proprit universelle : elle touche toutes les espces animales tudies et tous les types cellulaires , indique

En 2006, lunit 29 a dcouvert que le GABA excite certes les neurones immatures, sauf durant une priode-cl : laccouchement, marque par une chute brutale et transitoire de la concentration de chlore intracellulaire dans les neurones ftaux 3. Ainsi, juste avant laccouchement, le taux de chlore intracellulaire, qui tait de 25 mM 30 mM dans les neurones ftaux durant toute la grossesse, chute trs rapidement 4 mM dans lhippocampe et le nocorPeu avant laccouchement, les neurones ftaux cessent tex de rats : le GABA, jusqualors excitateur, dedtre excits par le GABA car le taux de chlore intracelvient un puissant inhibiteur de lactivit neurolulaire chute, sous laction de locytocine maternelle. Cette inhibition neuronale protge le cerveau ftal des nale 3. Les chercheurs ont identifi le facteur ventuels traumatismes lis la naissance. responsable de cette chute : il sagit de locytocine, cest--dire lhormone responsable des contractions, Neurones excits par le GABA (%) produite par lhypothalamus et libre dans le sang quelques heures 100 avant laccouchement. Ladminis80 tration la rate gestante dune substance qui bloque les rcepteurs 60 locytocine (comme celles utilises En prsence dun en clinique contre les menaces dacagent qui bloque 40 couchement prmatur) empche les rcepteurs locytocine cette inhibition neuronale 3. 20
Naissance 0 E18 E20 P0 P1 P3 P5 ge (jours)

ment aux chocs traumatiques lis la naissance qui sont parmi les principales causes de lsions et de squelles neurologiques 3. La mre prvient ainsi le ftus de limminence de laccouchement et le protge des risques de squelles potentielles. En termes cliniques, cette dcouverte pourrait avoir plusieurs retombes importantes : dune part, il pourrait tre utile de dvelopper des molcules destines retarder un travail prcoce, qui bloqueraient lactivit utrine sans agir sur les neurones ftaux, donc sans perturber le mcanisme neuroprotecteur de locytocine. Dautre part, des agonistes puissants des rcepteurs de locytocine ou des bloquants de la pompe chlore pourraient fournir de nouveaux types danti-pileptiques. Une affaire suivre I Florence Rosier

Rfrences
1 - Ben-Ari Y. et al. J Physiol 1989 ; 416 : 303-25. 2 - Tyzio R. et al. J Neurophysiol 2003 ; 90 : 2964-72. 3 - Tyzio R. et al, Science 2006 ; 314 : 1788-92. 4 - Rivera C. et al, Nature 1999 ; 397 : 251-55. 5 - Tyzio R. et al, J Neurosci 1999 ; 19 : 10372-82. 6 - Khazipov R. et al, J Neurosci 2001 ; 21 : 9770-81. 7 - Hennou S. et al, Eur J Neurosci 2002 ; 16 : 197-208. 8 - Manent J.B. et al, J Neurosci 2005 ; 25 : 4755-65. 9 - Manent J.B. et al, J Neurosci 2006 ; 26 : 5901-09.

Anesthsis par locytocine peu avant la naissance, les neurones ftaux rsistent mieux aux pisodes danoxie et probable-

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