CULTIVO Y REPRODUCCION DE LENGUADO El lenguado P aralichthys ads pe rs us se distribuye desde la localidad de Paita (norte de Per) hasta el golfo de Arauco

(Chile), incluyendo el archipilago de Juan Fernndez (Pequeo, 1989; Siefeld et al., 2003). hbitat comn corresponde a golfos y bahas someras, con fondos blandos de arena, al igual que otras especies de lenguados como P . de ntatus y P . californic us , bsicamente buscando proteccin frente a la depredacin, temperaturas ms adecuadas y abundancia de alimento (Able et al., 1990; Kramer, 1991; Acua & Cid, 1995). Los lenguados son peces carnvoros que consumen presas activas pelgicas y bentnicas. Su alimentacin est compuesta bsicamente por peces, iones estacionales crustceos y moluscos, difiriendo la importancia de cada tem presa, de la localidad donde se encuentre la poblacin y de las flu en la abundancia de los organismos (Bahamonde, 1954; Klimova & Ivankova, 1977; Silva & Stuardo, 1985; Ziga, 1988; Kong et al., 1995). As, Ziga (1988) indica que en la zona central P . ads pe rs us consume preferentemente anchoveta (E ngraulis ringe ns ) y msidos (Me tam y s idops is s p. ). Seala adems, una marcada diferencia en la dieta entre juveniles y adultos, desde la presencia de numerosas presas pequeas de la epifauna en juveniles, a pocas presas pelgicas grandes en ejemplares adultos. Por su parte, Kong et al., (1995) sealan que en la zona norte consume principalmente peces de media agua (E ngraulis analoga). En cultivo, esta especie acepta y se alimenta bien ind intamente de pellet hmedo y seco de diferentes calibres, segn su tamao. Comparado con otras especies, P . ads pe rs us se alimenta lentamente, tanto en la columna de agua como en el fondo, presentado diferentes patrones de alimentacin dependiendo del tipo de alimento y de su movimiento en el agua. Asimismo, se ha detectado que su consumo es variable dependiendo de su tamao y estacin del ao. As el lenguado muestra consumos a saciedad que van de 11% a 9% de su biomasa da-1 entre los 2 y 5 g de peso, y entre 2,7 y 1,4% de su iomasa da1 a partir de los 46 g de peso (Silva et al., 2001). ringe ns ) y ocasionalmente, crustceos bentnicos (Em e rita

Cuando alcanza su primera madurez sexual, muestra un i durante la estacin reproductiva (Silva, 2001). Crecimiento

mento en el

consumo de alimento durante los meses previos al desove y un decrecimiento

Existen escasos antecedentes sobre el crecimiento natural y/o artificial de ambas especies. Silva & Flores (1994) proponen la siguiente ecuacin de crecimiento en longitud de von Bertalanffy, para P . ads pe rs us , utilizando 182 ejemplares salvajes capturados y mantenidos en cautividad durante 336 das y alimentados con pellet semi-hmedo: Lt = 54,52 (1 - e^sup 0,2725 ( t + 0,1104)^ ) Estos autores proyectan que bajo dichas condiciones, el lenguado alcanzara los 500 g en 1030 das de cultivo, mostrando tasas instantneas mximas de crecimiento en peso de 1,5 g da-1 para peces de 5- 10 g de peso en marzo y mnimas de 0,09 g da-1 para peces de 15-20 cm en septiembre. Por su parte, ngeles & Mendo (2005) presentan las ecuaciones de crecimiento en longitud y peso de von Bertalanffy para ambos sexos, calculados a partir de 150 ejemplares capturados en los puertos de Ancn, Callao, Chorrillos y Pucusana (Per): Crecimiento en longitud: Lt = 101,169 (1-e-^sup 0,139 (t+0,584)^ ) para hembras Lt = 60,539 (1-e-^sup 0,253 (t+0,310)^ ) para machos Crecimiento en peso: Pt = 16412,72 (1-e-^sup 0,139 (t+ 0,584))3,27^ para hembras Pt = 3145,54 (1-e -^sup 0,253 (t + 0,310) )3,27^ para machos

10.1 SELECCION DE REPRODUCTORES Los reproductores de lenguado pueden venir de dos fuentes: captura de ejemplares juveniles o adultos mediante el uso de embarcaciones artesanales con artes de arrastre o de enmalle, o bien de laboratorios de cultivo dedicados a la investigacin de esta especie. En el caso de embarcaciones artesanales, se debe utilizar estrategias de pesca diferentes, reco ose tiempos de peces a arrastre o de reposo de los artes sensiblemente ms cortos que los utilizados por los pescadores en sus faenas habituales. Una vez capturados, trasladar deben ser seleccionados entre los que muestran menor dao aparente, y manipulados lo menos posible antes de proceder a colocarlos en los tanques de traslado. Estos deben estar cubiertos, implementados con oxigenacin directa para mantener el agua sobre los 7 mg L-1 de oxgeno, con bolsas de hielo para mantener bajas temperaturas y a densidades de traslado inferiores a 30 kg m-3. Estos sencillos cuidados durante el traslado permiten asegurar supervivencias entre 60 y 80% y minimizar su (Silva, 2001). ortalidad por stress

10.2 ACONDICIONAMIENTO En laboratorio, los peces son colocados en estanques de cuarentena mayores de 3 m , semi-cubiertos con agua circulante y aireacin constante. En ellos, los peces son sometidos a tratamientos antiparasitarios (formaldehido 50 a 100 ppm) y de ser necesario, antibacterianos para evitar infecciones. Para lo cual se puede utilizar oxitetracicilina y nitrofurazona (50 ppm de cada uno, durante una hora ) este tratamiento se repite de 3 a 5 das para cada captura. Una vez establecidas las condiciones fsicas de los peces se continua con el proceso de desparasitacin, el cual consiste en sumergir los peces en agua dulce durante 5 a 7 minutos para eliminar la mayor parte de los ectoparsitos adheridos a la piel y las branquias . Cuando existe la presencia de abundantes formas parasitarias (Ic thy ophthy rius m arinus , Cry ptoc ary on irritans ), el tratamiento curativo comunmente utilizado verde malaquita a 0.15 m conjuntamente con
3

50 ppm de formalina por una hora durante 3 das Su alimentacin comienza a los 4 a 5 das posteriores a su llegada, dado que los meros das no consumen alimento y su manejo (muestreo, sexado, marcaje), se recom postergarlo hasta 30-40 das, tiempo en que los peces ya se encuentran recuperados. Despus del periodo de cuarentena, los peces pueden ser transferidos a los estanques de reproduccin definitivos, caracterizados por su forma circular y volumen de 10 m 3 o ms, con circulacin continua de agua de mar filtrada a 50 , es pasada por un filtro mecnico (arena y grava) y adems por una unidad de luz ultravioleta y mantenidos con aireacin constante. Los peces se mantienen en proporcin de dos machos por cada hembra, a una densidad mxima recomendada de 2 kg m-3, para lograr su reproduccin espontnea. Durante el primer ao de cautiverio, los ejemplares salvajes normalmente no desovan, an cuando es posible detectar hembras y machos con signos de maduracin, debiendo normalmente transcurrir dos aos ctivos de cautiverio, antes de obtener el primer desove espontneo (Silva, 2001)

Foto N 1

Stock de Reproductores en tanques

Fuente : Silva, A. 1994

10.3 ALIMENTACIN Y NUTRICIN DE REPRODUCTORES La alimentacin de mantencin puede consistir alternadamente en pescado congelado trozado (T rac hurus m urphy i, S ardinops s agax ), pellet semihmedo, constituido por una mezcla de pescado fresco, harina de pescado, aceite y vitaminas, o bien pellet seco, cuidando de mantener niveles nutricionales mnimos recomendados para reproductores por sobre un 45% de protenas y 10% de lpidos (Pavlov et al., 2004). El alimento se provee en proporcin de 1 a 2% de la biomasa, con una frecuencia diaria, o bien cuatro veces a la semana, segn variacin de consumo estacional. Cuatro meses antes de su desove y a fin de asegurar y/o mejorar su acondicionamiento reproductivo, su alimentacin es reforzada con una pre-mezcla de vitaminas del grupo C, B1 y E, y una fuente adicional de cidos grasos, compuesta normalmente por productos comerciales que poseen dichas caractersticas (Silva, 2001). Recientemente y en el tema de optimizacin de dietas, se realiz un experimento para determinar los niveles ms adecuados protenas para el

cultivo de juveniles de lenguado utilizando ejemplares de 100 g, cultivados en estanques semicirculares con circuito abierto de agua de mar en densidades de 5 kg m-2 y utilizando cuatro niveles de protenas (44, 50, 53 y 55%). Los resultados indican que el rango ideal de protenas para el cultivo de juveniles, utilizando la harina de pescado como fuente principal 54 y 57% (Piaget, 2009). 10.4 DIFERENCIACION SEXUAL El lenguado no presenta dimorfismo sexual aparente, por lo que la protenas, est entre

determinacin del sexo se realiza a travs de la exanimacin de las gnadas. En peces con tamao menor de 5.0 cm no es posible determinar el sexo. En peces de 5.0 a 10 cm, las gnadas de machos y hembras presentan una apariencia similar tanto en tamao como en color. Conforme aumentan de tamao, las gnadas de las hembras se vuelven extremadamente cnicas, mientras que las de los machos presentan una forma cnica obtusa (Haaker, 1975). En los peces de tamao mayor de 10.0 cm la distincin entre los sexos

es fcilmente observable por medio de una diseccin macroscpica. Las gnadas de los peces machos inmaduros se caracterizan por mostrar varios tbulos ramificados, mientras que los ovarios inmaduros contienen masas de clulas esfricas, presumiblemente clulas primarias. Las gnadas de hembras maduras presentan una coloracin de amarillo a anaranjado, mientras que los machos tienen una coloracin blanquecina a cremosa (Haaker, 1975). La mayora de las hembras maduran sexualmente alrededor de los 47 cm de longitud total (LT) o al final de su tercer ao de vida y los machos, en su mayora, maduran alrededor de los 23 cm LT o a finales de su segundo ao de vida. El periodo de vida de estos animales comprende de alrededor de 30 aos. Generalmente los machos son ms pequeos y con un periodo de vida ms corto que las hembras (Love y Brooks, 1990). Una vez que se ha llevado a cabo la temporada de reproduccin los huevos permanecern en la columna de agua y su estado de desarrollo embrionario depender del tamao del huevo, y ms especficamente, de la cantidad de vitelo (Ahlstrom et al., 1983). Por lo tanto, el tamao final del ovocito depender de factores como la edad, tamao y condiciones nutricionales de la hembra. Se estima que la talla de primera madurez es a los 24 cm de longitud total (220 g) (Ziga, 1988), tamao que de acuerdo a observaciones en cultivo, se alcanzara a los 21 meses de edad. Las hembras predominan en las capturas en la mayor parte del ao (Acua & Cid, 1995). El tamao de los oocitos maduros alcanza un dimetro entre 0,66 y 0,80 mm. La fecundidad total promedio se estima en 2.125.000 huevos por kg, con un huevos por gramo de pez (ngeles & Mendo, 2005). No presentan dimorfismo sexual marcado, salvo durante el proceso de maduracin sexual cuando la hembra muestra un vientre fcilmente identificable y los machos presencia de semen al ser manipulados. Sin embargo, ngeles & Mendo (2005) reportan la presencia de un orifico genital en hembras sobre la lnea media detrs del ano( Foto N 4), inexistente en machos, que permitira separarlos por sexos. Adems, sealan un claro dimorfismo sexual respecto al crecimiento, alcanzando tamao que los hembras un mayor machos. medio de 1.500

Foto N 2 gnadas femeninas en P a ra lich th ys a .

Foto N3 gnadas masculinas en P a ralich thy s a .

( Fuente N

Ahumada;R. et al., 1979 )

( Fuente: Acua, 1995)

Foto N 4 orificio urogenital en hembras de Paralichthys a

Fuente: Angeles y Mendo 1998

10.5 DESARROLLO GONADAL El proceso reproductivo en peces telesteos exhibe un ritmo endgeno controlado por un reloj biolgico (factores intrnsecos) y por factores ambientales (extrnsecos), tales como fotoperiodo, temperatura, presencia del sexo opuesto, etc. (Lam, 1983; Redding y Patio, 1993; Dawson, 1998). Existen tres tejidos directamente involucrados en el 11 proceso reproductivo. Estos tres tejidos actan recprocamente va mensajeros qumicos (Fig. 1) y cada uno puede influir en los otros por medio de dicho mensajeros. Dichos tejidos son: hipotlamo (H), glndula pituitaria (P) y gnada (G), que en conjunto forman el eje hipotlamo-pituitaria-gnada (HPG) (Powell, 2000).

Fig u ra 1 . Eje Hipotlamo-Glndula Pituitaria-Gnada (HPG).

Fuente : (Pavlov, D., E.,Kjorvisk, 2004)

La traduccin de dichos estmulos ambientales comienza con la activacin de fotorreceptores y/o quimiorreceptores lo que transforma los estmulos

ambientales en seales electroqumicas, enviadas al hipotlamo donde es secretada la hormona liberadora de gonadotrofinas (GnRH) y liberada directamente frente a los gonadotrforos de la hipfisis (Peter, 1983). Ellos responden sintetizando y liberando dos tipos de gonadotropinas (GtH I y GtH II) al torrente sanguneo hacia la gnada donde la GtH I acelera la sntesis de

testosterona (T), la cual dar origen al 17-estradiol (E2). El hgado responde a este estmulo produciendo vitelogenina (VTG) la cual se libera al torrente sanguneo. La gnada absorbe esta protena y la incorpora en los ovocitos va micropinocitosis (Fig. 4), lo que da comienzo al proceso de vitelognesis o primera etapa de maduracin (Ng e Idler, 1983; Dawson, 1998; Powell, 2000).

Fig. N 2 Proceso neuroendocrinolgico

Fuente : Powell, 2001

A partir de la vitelognesis primaria se empiezan a formar los grnulos de vitelo y cuerpos de Balbiani, agregados juxtanucleares basfilos (rosados)en secciones histolgicas. Estudios realizados mediante microscopio electrnico,

revelan que los cuerpos de Balbiani no son estructuras homogneas, sino que estn formados por varios tipos de orgnulos celulares como mitocondrias, aparato de Golgi, retculo endoplasmtico, pequeas vesculas y grnulos lipdicos (Beams y Kessel, 1973; Guraya, 1979; Wallace y Selman 1990). La vitelognesis primaria se caracteriza por el ncleo en posicin central y un tamao del oocito que aumenta progresivamente. El incremento de tamao del oocito es prcticamente debido a la incorporacin del sor de las

protenas del vitelo, la protena vitelogenina (Vtg). La Vtg es sintetizada en el hgado y transportada va sangunea hasta el ovario donde es incorporada a los oocitos en crecimiento. En S . s e ne gale ns is por ejemplo, un oocito inmaduro suele medir unas 50 m, pasando a medir ms de 500 m en su momento de mximo crecimiento, antes del proceso de maduracin. En la fase de maduracin se produce la rotura de la membrana nuclear y la continuacin de la meiosis. Si por algn motivo un oocito vitelognico en estado avanzado o maduro no es ovulado, se produce el estado de atresia, mediante el cual el organismo reabsorbe el material almacenado en el oocito como mecanismo de ahorro energtico. En la Fig. 1.2. se pueden observar algunos de los estadios descritos.

Fuente: Zuniga 2003

10.6 MADURACIN Y OVULACIN DE LOS OOCITOS Cuando el oocito llega a su mximo estado de crecimiento al final de la vitelognesis, est preparado para la fase de maduracin. Esta fase viene

acompaada de diferentes cambios en el ncleo y el citoplasma del oocito. Durante todo el proceso de vitelognesis los oocitos han estado detenidos en la profase de la meiosis I, y durante la maduracin, sta se resume hasta la metafase de la meiosis II. La meiosis finalizar en el momento de la fertilizacin. Durante la maduracin del oocito, tambin llamada maduracin meitica, el ncleo del oocito (vescula germinal, VG) comienza una migracin desde una posicin central del oocito hasta su perifer se sita el micrpilo Foto N 5 Foto N 6 o animal donde

Fuente: Zuiga, 1988

Fuente : Zuiga, 1988

Foto N

Foto N

Fuente:

Zuiga, 1988

Fuente: Zuiga , 1988

10.7 SISTEMAS DE CULTIVO

Generalmente la densidad de cultivo para los reproductores es de 5 Kg/m 2 .La relacin de cultivo que se emplea para reproductores de lenguados es usualmente 1:1 , pero hay estudios que la relacin 1:2 dan buenos resultados (2 machos y una hembra) . los reproductores son mantenidos en tanques mayor de 5 m 3 , con sistemas de recirculacin. El agua es pasada por un filtro de arena y grava y adems por una unidad de luz ultravioleta. Periodo durante el cual los huevos desovados son mantenidos en el sistema hasta su posterior colecta, el drenaje es superficial con un flujo de agua de mas de 200% el resto del tiempo de drenaje se realiza desde el fondo del tanque con un flujo de recirculacin de agua de 800% con el propsito de eliminar sedimentos acumulados en el fondo, adems , el tanque de cultivo debe ser sifonado todos los das para eliminar desechos que no son arrastrados a travs del drenaje. Los reproductores de lenguados comienzan a reproducirse con tallas de 47.8 cm a 76 cm. E las hembras y de 38.4 a 61.2 cm para los machos, el peso promedio de los ejemplares es de 3.9 (hembras) y 0.9 kg (machos), lo, que indica que las hembras son mucho mas grandes que los machos. El ndice gonadosomtico es muy variado, pero los datos promedios son de 1.0% para los machos , y de 5% para las hembras

10.8 MADUREZ SEXUAL Y DESOVE Respecto al control de la reproduccin, se han desarrollado experimentos para medir el rendimiento reproductivo de hembras sometidas a induccin hormonal con GnRHa, en diferentes estados de maduracin a concentraciones de 10 ng kg-1 Los resultados indican que este procedimiento es efectivo para inducir el desove en hembras en estado de maduracin temprana con dimetro promedio de ovocitos entre 350 y 500 . En estados mayores de desarrollo, el procedimiento no muestra buenos resultados (Manterola, 2006). Actualmente, la maduracin natural y desove espontneo de los reproductores se practica rutinariamente con buenos rendimientos. Se utilizan reproductores de 3 a 4 aos de edad (700 a 1.500 g), mantenidos bajo condiciones naturales de luz y temperatura en estanques de 6 a 10 m3, con circuito ab 1-2 kg m-2 (Silva, 1996). de agua de mar y aireacin constante, en proporcin de dos machos por hembra y densidades de

Previo a los desoves (12 a 24 h), las hembras maduras muestran un abdomen abultado y se encuentran permanentemente acompaadas de uno o dos machos en sus desplazamientos en los estanques. No obstante que los desoves espontneos se producen tanto en la maana como en la tarde, es ms frecuente encontrar ovas en sus primeros estados de divisin en las primeras horas de la maana. Perodos de 24 a 48 h alternados con perodos ms largos de cuatro a siete das, separan ms frecuentemente las diferentes puestas espontneas sucesivas que se producen en una temporada normal de reproduccin del lenguado en cautiverio. El perodo normal de desove se inicia a mediados de agosto (fines de invierno) y se prolonga por aproximadamente cinco meses, hasta diciembre, producindose un perodo de latencia aos de control, la mxima produccin y viabilidad de enero y julio s ovas se mantiene cuando los desoves cesan o son ms intermitentes. Sin embargo, durante los estable entre septiembre y octubre (primavera), cuando las temperaturas fluctan entre 16 a 17.5,C, tendiendo a bajar, tanto la produccin como la viabilidad de las ovas, en los desoves producidos fuera de dicho rango. Al mismo tiempo, los valores mnimos y mximos de temperatura entre los cuales ocurre el desove es de 15,7C la mnima y 19,7C la mxima (Silva, 1996). Los registros ocurridos en el Laboratorio indican que una cuales entre el 30 y 50% son viables (flotantes), con mbra puede jes de

producir anualmente un promedio de 2x106 de huevos kg-1 de peso, de los fecundacin que fluctan entre 0 y 100% por desove. Aunque el perodo de desove puede ser extenso, el mayor porcentaje de huevos viables se detecta en un perodo restringido de dos meses a temperatura entre 14 y 15C. Las ovas inviables generalmente tienen apariencia opaca, con dimetro y superficie irregular, distribucin anormal del vitelo y en ocasiones con 2 a 3 gotas lipdicas. Estas se registran durante toda el perodo de desove, pero su nmero tiende a aumentar fuera de los meses de mxima produccin de ovas y cuando la temperatura supera los 16C.

Colecta de huevos e incubacin La obtencin de huevos se puede realizar de dos formas. Mediante desove artificial de hembras ovuladas, en cuyo caso los huevos obtenidos mediante masaje abdominal (Foto N 10 ), deben ser posteriormente fertilizados con esperma de dos machos( Foto N 13), o bien, mediante colecta de huevos fecundados provenientes de desove espontneo, en cuyo caso los huevos se colectan en la alida de agua exterior de los estanques de reproduccin, mediante un colector de malla fina (500-600 ) (Foto N 11 ). En ambos casos, una vez obtenidos, se recomienda que los huevos sean lavados con agua tratada con luz ultravioleta y desinfectados cuidadosamente con una solucin de glutaraldehido (100 ppm). Foto N 10 desove manual Foto N 11 desove natural

Fuente: Bahamonde, N. 1975

Fuente: Fondepez. 2004

El desove de la especie P aralic hthy s wolm ani se efecta regularmente entre las 17.30 y 19.horas, cuando la temperatura del agua es de 19C a 23 C, un colector de huevos es conectado al tanque de maduracin.
Foto N 12 Extraccion manual de esperma Foto N 13 Fecundacion de ovas

Fuente :

Silva, 2003

Fuente: Silva, 2003

Los huevos flotan, son transparentes, tienen una gota oleosa y alcanzan un dimetro promedio de 0,8 mm. Luego se colocan en un estanque cnico transparente de 100-200 L para realizar la separacin de huevos viables de los no viables, los cuales precipitan. Despus de su separacin y registro (conteo, determinacin de desarrollo, calidad) se ponen a incubar. Los estanques de incubacin tienen un volumen de 500 a 1000 L (Foto N )y se llenan con agua de mar microfiltrada (1 ) y esterilizada (UV). Las densidades de incubacin varan de 500 a 1000 huevos L-1 con una renovacin del 50 a 100% de agua diariamente (Silva et al., 1994; Silva & Vlez, 1998). La duracin del perodo de incubacin depende directamente de la temperatura utilizada. Experiencias de incubacin conducidas a 16C, muestran porcentajes de eclosin superiores al 50% a las 80 h a 18C y demoran 60 h, si se utiliza agua a 18C la eclosin demora solamente 45 h (Silva, 2001) (Fig. 2). Los porcentajes de eclosin obtenidos son variables (30-90%) y dependen fundamentalmente de la calidad del desove, que depende a su vez del acondicionamiento nutricional de los reproductores y de una buena separacin de huevos viables e inviables antes de la incubacin.

Foto N 14 tanques de incubacin

Fuente: Fondepez, 2005

10.9 CONTEO Y SELECCIN DE HUEVOS Los huevos fertilizados se colocan en un tanque filtrada de 50 l con agua de mar una vez

(1 micra y esterilizada), luego se coloca una piedra difusora de aire

para que se distribuya uniformemente los huevos en el

distribuidos los huevos en el tanque, se procede a tomar cuatro muestras de 10 ml cada una con una pipeta serolgica, la muestra se vierte en una placa petri de 4 divisiones , en donde se cuentan los huevos viables (flotan en la columna de agua) y los huevos muertos (son de color blanco y se van al fondo ), para una mejor precisin del conteo es recomendable utilizar lugol, el cual va y facilitar la observacin y conteo .
Foto. N 15 Coleccin de huevos Foto N 16 seleccin de huevos

teir

Fuente :

Fondepez 2005

Fuente: Fondepez 2005

Despus de realizar el conteo de huevos totales se apaga el d

y se deja

el agua en reposo por unos 15 minutos a fin de que los huevos viables floten en la superficie y los huevos muertos y otros desechos orgnicos se precipiten en el fondo del tanque. 10.10 INCUBACION Los huevos viables son colocados suavemente en un segundo tanque cnico de 150 a 200 l , ( Foto N 18), la aireacin debe ser suave ya que un flujo mayor puede daar la estructura de los huevos, se han obtenido buenos resultados de calidad de larva eclosionada cuando se efecta un cambio de 200 a 300% de agua empleando una maya de 400 micras La eclosin se produce despues de las 48 horas (Foto N 18)

10.11 DESARROLLO EMBRIONARIO

Foto N17 Incubacion de huevos Foto N 18 Eclosion

Fuente:

Fondepez , 2005

Fuente: Fondepez, 2005

el desarrollo del embrin se inicia despus de 40 a 50 minutos de haber sido fecundado, esto sucede cuando se presenta la primera divisin celular, las subsecuentes divisiones ocurren cada 15 a 25 minutos, l estado de mrula se presenta despus de las 4 horas de fecundacin y el estado de blastula aparece despus de 6 horas ( Fig N 19), La eclosin ocurre despus de las 48 horas

Foto N 19 Desarrollo embrionario

Fuente : Fondepez 2005

Foto N 20 ECLOSION Y ESTADIO LARVAL

Fuente : Fondepez 2005

10.12 DESARROLLO LARVAL Durante la eclosin las larvas con saco miden entre 1,7 y 2,0 mm de longitud total. Tienen caractersticas pelgicas y son muy prim ya que no han completado el desarrollo de los ojos ni del tracto digestivo y su supervivencia depende exclusivamente de su saco vitelino (Fig. 20). Su cultivo se realiza en estanques de 1000 L a densidades entre 30 y 100 larvas con saco/L y una renovacin de agua microfiltrada y esterilizada de 25 50% de su volumen diario. Despus de 4 a 5 das segn la temperatura y con un tamao promedio de 3,7 mm, la larva ha consumido totalmente su saco vitelino y completa el desarrollo de sus ojos y su tracto digestivo es funcional. Durante esta primera etapa, no se producen mayores mortalidades si se mantienen las condiciones higinicas adecuadas, obtenindose supervivencias de 80-90% (Silva, 2001). Tampoco presenta rutinariamente problemas de deformaciones, aunque se ha observado un incidente de macin de mandbula de larvas asociado presuntamente a deficiencias nutricionales de la dieta de reproductores durante su acondicionamiento (Silva et al., 1989). En su segunda etapa, el cultivo larval se desarrolla en estanques circulares de 1 a 2 m3 con densidades inciales de 20-30 larvas por L-1. El intercambio diario de agua de mar micro filtrada y esterilizada es creciente de 0 a 100% entre los das 4 y 20 de cultivo. Se agregan diariamente microalgas (Is oc hry s is y Nannoc hlorops is ) en concentraciones de 150.000 a 200.000 cel mL-1, en caso de utilizar la tcnica de "agua verde". La primera fase de alimentacin (15-20 das) se realiza utilizando rotiferos (B rac hionus plic atilis ) en proporciones de 510 ind mL-1 dos veces al da, enriquecidos con una mezcla de microalgas (80% Is oc hry s is y 20% Nannoc hloris ) o bien con enriquecedores comerciales (Algamac, DHA Selco). Posteriormente, se complementa con nauplius de Artemia en concentracin de 0,5 a 1 ind mL-1 conjuntamente con los rotferos, los cuales se reducen progresivamente hasta el da 20, momento a partir del cual se comienza a alimentar con metanauplius de Artemia enriquecidos a razn de 1 a 3 metanauplius mL-1 y posteriormente, en forma simultnea con micropellet (100-400 nm) hasta el da 60. A esta edad, los ejemplares fluctan entre 15 (67%) y 20 mm (33%), ya han completado su metamorfosis y

alcanzado las caractersticas de juveniles bentnicos. Las supervivencias alcanzadas hasta esta etapa varan entre 10 y 25% (Silva, 2001). Los resultados obtenidos en estas etapas indican que el crecimiento, calidad y supervivencia larval dependen principalmente de factores relacionados con la calidad nutricional del alimento, temperatura y calidad del medio de cultivo. Silva (1999) seala que el uso de las microalgas como uecedores y como parte de la tcnica de cultivo, incrementa significativamente el crecimiento, supervivencia, desarrollo y calidad de las larvas de lenguado durante su primera fase de cultivo, dado su efecto nutricional sobre las presas y el mejoramiento de la calidad del medio de cultivo. No existen antecedentes precisos sobre los requerimientos nutricionales de las larvas de P . ads pe rs us , sin embargo Silva (1999) obtuvo buena supervivencia larval entre 18 y 38 das de cultivo, utilizando rotferos con una relacin de cidos grasos DHA/EPA entre 1,33 y 2,08. Esto indica la importancia de proveer adecuadas cantidades de estos cidos grasos poli insaturados en el alimento larval para asegurar su ptimo desarrollo. Igualmente, experimentos preliminares sobre las necesidades de cidos grasos poliinsaturados (n-3 HUFA) para el desarrollo larval de lenguado indican que niveles de 0,7-1% en rotferos, mejoran los resultados de crecimiento, supervivencia y calidad larval (Silva, 2001). Otros experimentos relacionados con la determinacin de la temperatura ptima para el cultivo larval en un rango entre 16 y 20C, demuestran que las tasas de crecimiento y supervivencia son directa e inversamente proporcionales respectivamente a la temperatura, razn por la cual se recomienda su cultivo a 18C (Orellana, 2002). Al mismo tiempo, se han realizado experimentos para determinar el efecto de inmunoestimulantes en la etapa de desarrollo temprano esta especie. Los resultados indican que aplicar 5 mg L-1 de -glucanos y manano-oligosacridos (G MOS) en el agua de cultivo, aumenta la supervivencia y crecimiento larval, mientras que 15 mg L-1 de G MOS tiene un efecto supresor en ambos parmetros poblacionales. Este efecto aumenta si se ap ca en larvas que recin han absorbido su saco vitelino. El anlisis histolgico del epitelio

intestinal de las larvas sugiere que el G MOS promueve la manifestacin de monocitos (clulas precursoras de macrfagos), asociados al sistema inmune no especifico de los peces (Piaget et al., 2007).

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

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