Actividade Enzimtica

1. O grfico de Lineweaver-Burk representado na Figura refere-se a uma reaco catalisada por uma enzima sem inibidores (linha contnua) e na presena dos inibidores A e B (linhas a tracejado) em experincias separadas. A concentrao de inibidor usada foi nos dois casos 8.0 mM.

a) Determine os valores de KM e Vmax da enzima. KM = 0.0015M e Vmax =5x10-6 M/s b) Determine o tipo de mecanismo de inibio de A e B e os respectivos valores de Ki. A: inibio competitiva e KI = 0.006 M B: inibio mista: KI = 0.00343 M e KI = 0.00340 M

2. Os ies de prata reagem com os grupos tiol (-SH) das protenas, podendo inibir a aco de certas enzimas. Numa reaco, so necessrios 0.0075 g de AgNO3 (M=170 g/mol) para inibir completamente 5 mL da soluo de enzima a uma concentrao de 75 mg enzima/mL. Estime a massa molar da enzima justificando porque se trata de uma massa molar mnima. R: Mp = 8500 g/mol (mnima: s um grupo tiol por enzima; reaco completa) 3. Uma reaco catalisada por uma enzima (KM = 2.7x10-3 M) inibida competitivamente por um composto I (KI = 3.1x10-5 M). Assumindo uma concentrao do substrato de 3.6x10-4 M calcule a concentrao de inibidor necessria para que o valor V0 baixe 65%. Quanto ter de aumentar a concentrao de substrato para que a inibio seja s 25 %. R:[I]= 6.52x10-5 M [S]: aumentar de 3.6x10-4 M para 0.0143 M

4. Uma reaco catalisada por uma enzima (KM = 2.7x10-3 M) inibida competitivamente por um composto I cuja concentrao 2.2x10-5 M. Assumindo uma concentrao do substrato de 4.3x10-4 M calcule o KI sabendo que V0 baixou 57%. Para a concentrao de inibidor que calculou qual teria de ser a concentrao mnima de substrato para qua e reduo de V0 (relativamente a V0 sem presena de inibidor) seja no mximo de 10%?