Microbiologia de Anaerbios

Aerao - Metabolismo energtico

Aerbio estrito Anaerbio estrito (18-21% ) (<0,5%) P. aeruginosa, C.haemolyticum Mycobacterium

Microaerfilo Facultativo aerbio (1-5%) (<0.5-21%) Enterobactrias Campylobacter, Neisseria

Microaerfilo anaerbio (Aerotolerante) (2-8%) Bacteroides, Clostridium

Organismos quanto utilizao de O2

Bactrias aerbias e facultativas

O2

Metabolismo

Produtos txicos

Sistema de desintoxicao

Produtos no txicos

O2 + 2 e- + 2 H+ H2O2 O2 + e- O-2 O2 + H2O2 OH* O-2 + H2O2 O2 + OH2- + OH* H2O2 + e- + H+ H2O + OH*

Ao das enzimas superxido dismutase, catalase e peroxidase. Estas enzimas eliminam radicais txicos do oxignio que so inevitavelmente gerados em sistemas vivos na presena de O2. A distribuio destas enzimas nas clulas determina a capacidade destas clulas existirem na presena de O2 .

Bactrias anaerbias estritas

O2

Metabolismo

Produtos txicos

O2 + 2 e- + 2 H+ H2O2 O2 + e- O-2 O2 + H2O2 OH* O-2 + H2O2 O2 + OH2- + OH* H2O2 + e- + H+ H2O + OH*

Ausncia do sistema de desintoxicao

Morte bacteriana

Danos ao DNA, destroem componentes lipdicos, inativam enzimas

Teste da Catalase

Reao positiva produzida por Bacillus sp; Reao negativa produzida por Clostridium sp.

Viso geral das infeces por bactrias anaerbias

Ttano

Toxinfeces
Botulismo

Determinam quadros clnicos especficos

(infeces clssicas)

Gangrena Gasosa
Colite Pseudomembranosa Infeces Inespecficas

Bastonetes Esporulados Gram Positivos

Cocos ou Bastonetes Gram Positivos ou Negativos

Principais bactrias anaerbias de importncia clnica

Cocos Gram positivos Gram negativos Peptococcus Peptostreptococcus Veilonella

Bastonetes

Gram positivos no esporulados Gram positivos esporulados

Actinomyces, Propionibacterium Clostridium C. botulinum, C. tetani, C. difficile, C. perfringens Bacteroides fragilis, Prevotella, Fusobacterium, Porphyromonas

Gram negativos

Anaerbios predominantes da microbiota normal

Pele
Propionibacterium acnes, Peptostreptococcus

Cavidade oral e Trato respiratrio superior

Fusobacterium nucleatum Cocos anaerbios Actinomyces

Trato genital feminino Bacteroides, Porphyromonas

Peptostreptococcus; Clostridium; Lactobacillus

Intestino Grupo Bacteroides fragilis, Cocos anaerbios,

Clostridium; Eubacterium, Bifidobacterium

Bactrias anaerbias e infeces associadas representativas

Abscessos no crebro -Peptostreptococos, Fusobacterium nucleatum e outros Infeces de orofaringe -Anaerbios de orofaringe; Actinomyces, Prevotella melaninogenica, espcies de Fusobacterium Infeces de pleura e pulmes -Peptostreptococos, espcies de Fusobacterium, Prevotella melaninogenica, Bacteroides fragilis em 20 a 25% dos casos e outros

Infeces intra-abdominais
-Abscesso de fgado: anaerbios mistos em 40 a 90% dos casos, microrganismos facultativos -Abscessos abdominais: Bacteroides fragilis e outros da microbiota gastrintestinal Infeces do trato genital feminino

-Abscessos vulvares: Peptostreptococos e outros -Abscessos plvicos e tubos ovarianos: Prevotella bivia e P. disiens, peptostreptococos, outros
Pele, tecidos moles e infeces de medula -Microbiota anaerbica mista; Propionibacterium acnes

Bacteriemia
-Bacteroides fragilis; peptostreptococos; Propionibacterium; Fusobacterium; Clostridium e outros Endocardite -Bacteroides fragilis; Actinomyces

Localizaes habituais de infeces causadas por bactrias anaerbias

Abscesso cerebral Infeces periodontais Abscesso pulmonar -pneumonia necrtica -empiema Infeces abdominais -ps-traumtica ou ps-cirrgica -posterior a ruptura visceral -tumor maligno Abscesso perirretal Sinusite crnica

Bacteremia, septicemia, endocardite Abscessos subdiafragmtico, heptico e sub-heptico

Na mulher, abscesso plvico, endometrite, infeco ps-aborto, abscesso tubo ovariano

Celulite necrtica

Infeco vascular ou gangrena gasosa

Locais da infeco Sistema Nervoso Central Cabea e Pescoo Pleuro pulmonar

Tipo de infeco Abscessos cerebrais Abscesso periodontal Outras infeces orais Pneumonia por aspirao Abscessos pulmonares Pneumonia necrosante Peritonites e abscessos Abscessos tubo-ovarianos Abscessos vulvo-vaginais Aborto sptico Gangrena gasosa (mionecroses) Celulite crepitante Fascite necrosante

Intra-abdominais Trato genital feminino

Tecidos moles

Caractersticas importantes das infeces inespecficas por bactrias anaerbias

Geralmente so infeces endgenas

Geralmente so infeces mistas

Geralmente o patgeno no apresenta fatores de virulncia evidentes Geralmente existem fatores predisponentes caractersticos Geralmente existem dados clnicos sugestivos

Fatores predisponentes das infeces por anaerbios

Isquemia tecidual
Presena de destruio tecidual
Insuficincia vascular perifrica Traumas

Presena de tecidos desvitalizados

Presena de tecidos necrosados Infeco prvia por outras bactrias Presena de corpo estranho nos tecidos Mordidas de animais ou humanas

Cirurgias

Processos obstrutivos (vias respiratrias ou biliares, trato intestinal)

Dados clnicos sugestivos Odor ftido (cidos graxos e aminas) Necrose tecidual intensa e desproporcional a leso Produo de gs em abscessos Produo de gs em tecidos moles (celulite crepitante); Prximo a superfcie de mucosas (anaerbios fazem parte da microbiota de mucosas);

Colorao negra em secrees contendo sangue;

Dados clnicos sugestivos Infeco depois de mordidas;

Infeco associada a tumor maligno, cirurgia intestinal ou ginecolgica Endocardite com hemoculturas negativas
Uso de aminoglicosdeos sem resultado teraputico Visto na lmina de microscopia e no cresceu no meio de cultura em cultivos normais;

Bacilos anaerbios Gram Positivos no esporulados Actinomyces (A. israelli); Propionibacterium; Eubacterium (E. lentum, E. timidum, E. brachy), Bifidobacterium (B. longum, B. breve) ; Arachnia; Rothia; Lactobacillus. -Membros da microbiota da pele e superfcies mucosas (boca, intestino, genitais) do Homem e animais -Muitas espcies so consideradas oportunistas -Crescimento lento: 3 ou + dias; Actinomyces (2 ou mais semanas)

Actinomyces
Semelhante fungos (filamentos ramificados)
Actinomyces israelli Agente da Actinomicose (60% cervicofacial, 15% torcica, 20% abdominal, 5% outros tipos ex. DIU)

Raramente isolado em cultura pura (crescimento lento)

Tpicos gros de enxofre na descarga da leso

Actinomyces

Actinomicose cervicofacial

Bifidobacterium sp

Propionibacterium acnes
habitante da pele e clon implicado em quadros de endocardite (prteses valvulares), septicemias acne em adolescentes

Bacilos anaerbios Gram negativos Bacteroides; Fusobacterium; Prevotella; Porphyromonas; Wolinella; Leptotrichia; Desulfomonas; Butyrivibrio; succinivibrio, Anaerovibrio, Anaerobiospirillum, Selenomonas. Membros da microbiota normal de animais e humanos -boca - trato respiratrio superior - intestino - aparelho genital Encontrados em mais de 50% das amostras clnicas que contm anaerbios

Bacteroides
Grupo dos Bacteroides pigmentados e Porphyromonas (colnias pigmentadas) (B. corporis, B. denticola, P. asaccharolytica, P. gingivalis,, P. endodontalis:

-Microbiota normal da boca, aparelho intestinal e urogenital -So agentes frequentes de infeces: dentrias pescoo e cabea aps mordedura

Bacteroides
Grupo dos Bacteroides no pigmentados (bile sensveis) Atualmente inclui Prevotella (P. melaninogenica) e B. bivius, B. disiens, B. oris, B. buccae, B. oralis Implicados em situaes idnticas s referidas para os Bacteroides pigmentados

Bacteroides
Grupo do Bacteroides fragilis (bile resistentes) Inclui, entre outros: B. fragilis; B. tethaiotaomicron, B. distasonis -Implicados em situaes de infeces e sepsis com ponto de partida abdominal

Fusobacterium
Fusobacterium longos, finos, pontas afiladas F. nucleatum Microbiota normal da boca, trato respiratrio superior, intestino e aparelho genital; implicado no mesmo tipo de infeco que os Bacteroides pigmentados F. necrophorum Altamente virulento; em crianas e jovens: pode causar faringoamigdalite, complicaes locais (abscesso periamigdalino, abscesso periapical, tromboflebite sptica veia jugular. Complicaes distncia: abscessos metastticos, ps bacteriemia pulmo, pleura, fgado, articulaes. F. ulcerans (isolado a partir de leses ulceradas )

Bacilos anaerbios Gram negativos

1 - Fusobacterium nucleatum - microscopia eletrnica de transmisso; 2 - Bacteroides fragilis - microscopia eletrnica de transmisso; 3 - Fusobacterium nucleatum - colorao de Gram; 4 - Bactrias produtoras de pigmento negro - Porphyromonas e Prevotella.

Prevotella sp

Cocos anaerbios Gram positivos

Relevncia clnicas Gneros Peptostreptococcus (P. magnus, P. asaccharolyticus, P.prevotti, P.micros e P. anaerobius); Peptococcus (P. niger) Normalmente colonizam a cavidade oral, trato gastrintestinal, trato genito-urinrio e a pele; Quando estes microrganismos se disseminam para locais normalmente estreis eles causam infeces;
- necessrio evitar a contaminao de amostras clnicas por peptostreptococos que existem na microbiota da mucosa; -A amostra colhida deve ser transportada num recipiente livre de oxignio para impedir a perda dos microrganismos; -Os microrganismos necessitam de ser cultivados em meios enriquecidos e por um perodo longo, entre 5 a 7 dias.

BACTRIAS ANAERBIAS (Isolamento)

Amostras Exsudato de abscessos profundos, bipsias teciduais;

Coleta Descontaminar adequadamente a superfcie (sabo, lcool iodado, iodo polvidona ou clorexidina) (Aspirao com agulha e seringa)
Transporte adequado Sem ou com mnima exposio ao oxignio atmosfrico
Obs: Swab devem ser, sempre que possvel, rejeitados
- So susceptveis de serem contaminados, - ficam mais expostas ao O2 ambiente e dissecao, - colhem pequenos volumes de produto para amostra, - no permitem a preparao de um bom esfregao.

BACTRIAS ANAERBIAS (Tratamento de doenas inespecficas) Seleo de agentes antimicrobianos apropriados Remoo de bactrias por drenagem de abscessos Eliminao de corpos estranhos Desbridamento de tecido necrtico

Gnero Clostridium (* 202 espcies)

* Euzby (2012) www.bacterio.cict.fr/c/clostridium.html

Bastonetes Gram positivos (0,2 a 4 m por at 20m)

Endsporos (mtodo

de Wirtz)

Endsporos Microscopia eletrnica

C. tetani

C. botulinum

C. difficile

Gnero Clostridium
Normalmente mveis (peritrqueos)

cpsula

Cpsula (C. perfringens)

Cultivo em anaerobiose (Tcnicas especiais)

Gnero Clostridium
Patognicos Meios Complexos e Enriquecidos (AS)

pH prximo do neutro; Incubao em torno de 37oC

Colnias (1 ou 2 dias, Contornos Irregulares)

Maioria hemolticos

C. perfringens

Gnero Clostridium
Meio lquido (Tioglicolato ou Fragmentos de Tecidos) Odor ptrido em culturas ou leses Produtos do Metabolismo Identificao de espcies Sensveis ao estresse ambiental e desinfetantes

Espcies Patognicas Exotoxinas

(Neurotrpicas e Necrozantes)

Gnero Clostridium
No Invasivos Toxinfeco (C. tetani e C. botulinum) Invasivos Manifestaes Regionais ou Sistmicas

C. perfringens (Enterotoxemias; Infeces de Feridas)

C. septicum (Infeces de Feridas Edema maligno)

C. difficile (Enfermidades diarricas em HO)

C. novyi (GG em HO)

C. chauvoei , C. haemolyticum (Anaerbio estrito), C. piliforme, C. sordelli , C. colinum , C. spiroforme,

Clostridium tetani
(10 tipos sorolgicos - Ag H)
Solo ( Doena Telrica) Transitrio no intestino; Todos os mamferos so susceptveis

Perodo de Incubao x Mortalidade (incubao 3-5 dias mortalidade 90%) (incubao 20 dias mortalidade 3%)

Clostridium tetani
Patogenia Toxinas (Tetanolisina e Tetanospasmina)
Esporo (Leso) Forma Vegetativa Toxina (Tetanospasmina) SNC Impede liberao Glicina e/ou cido Gama-Aminobutrico Paralisia Espstica Morte Som e Luz x Liberao de Glicina;

Riso Sardnico ou Trismo

Neurotoxinas de Clostridium
Polipeptdeo 50 k Da (Pr-Toxina)
Frao A (Active) (Leve) (50 kDA) - Efeito Txico Frao B (Binding) (Pesada) (100 kDA) - Fixao
Ativao quando quebra desta ligao bissulfeto Proteases-Ttano Tripsina - Botulismo

Ao da toxina tetanospasmina (Neurotoxina)

Interneurnio inibitrio Inibio Sinais excitatrios do Sistema Nervoso Central

Glicina

Toxina tetnica

Acetilcolina

Msculo

Clostridium tetani
-DiagnsticoClnico, Bacterioscopia, Cultura, Inoculao em Animais Sensveis. -Tratamento Antitoxina (Soro antitetnico) (para Toxina livre) (Tratamento de suporte) -Sensibilidade a drogas Penicilinas, Cefalosporinas, Metronidazol -Imunizao Toxide Tetnico (Neurotoxina tratada)

Patogenia do

C. tetani

Paralisia Espstica

Opisttono A severe case of tetanus. muscles, back and legs are rigid muscle spasms can break bones can be fatal (e.g respiratory falure falure) )

Paralisia Espstica

(Toxina potente x termolbil)

Botulismo (Botulus = Salsicha)

Clostridium botulinum
Patogenia

Esporo no alimento Forma Vegetativa Toxina (Tipos = A, B, C1, C2, D, E, F, G e H) Intestinos Circulao Nervos (Placa Mioneural) Inibe liberao de Acetilcolina Paralisia flcida Morte (18 a 36 horas)
Resistente Pepsina e HCL Sensvel Tripsina (Ativao da Toxina) Secura na boca e diplopia

Ao da toxina Botulnica(Neurotoxina)
Sinais excitatrios do Sistema Nervoso Central

Msculo

Mecanismo da Toxina Botulnica

Patogenia do Botulismo

Botulismo Clssico ou por alimentos: Resulta da ingesto de toxina pr-formada em alimentos contaminados Os alimentos caseiros esto mais envolvidos do que os alimentos industrializados observado tipicamente em adultos Botulismo infantil: Resulta da multiplicao in vivo de C. botulinum, com produo de neurotoxina no intestino do lactente Os lactentes ingerem esporos (do solo ou da poeira caseira), mas no a toxina pr-formada a forma mais comum Dificuldade em sugar e deglutir, choro alterado, hipotonia e fraqueza muscular

Botulismo de feridas: Resulta da produo de toxina botulnica in vivo aps multiplicao do C. botulinum numa ferida infectada a forma mais rara

Ferida botulnica

Botulismo indeterminado: No possvel implicar uma origem de C. botulinum alimentos ou feridas observado em indivduos com mais de 12 meses de idade

em

Clostridium botulinum
-Diagnstico Clnico Toxina no plasma ou em tecidos antes da morte

-Tratamento Soroterapia (Para toxina livre) Guanidina e Aminopiridina ( liberao de Acetilcolina)

-Imunizao Toxide (Necessrio elevada quantidade

da toxina)

Clostridium perfringens (Tipos A - E)

(Clostridio Invasivo) Ocorre no trato intestinal de humanos, animais e solo. Capsulado

Manifestao Clnica Intoxicao (Enterotoxemias) (Rpida Multiplicao) Infeco com Gangrena Gasosa (Destruio Tecidual)

C. perfringens

Clostridium perfringens
Patogenia Esporo Tecido (Leso ou Via Digestiva) Toxinas
e Enzimas Necrozantes (Forma Vegetativa) Necrose

Bacteremia (Linfticos e Sanguneo) Toxemia

Morte do Indivduo.

Clostridium perfringens
-Toxinas (14 tipos) (Toxina alfa ou fosfolipase C) (Age sobre Lecitina do Tec. Conj. Necrose local)

-Diagnstico Bacterioscopia, Pesquisa da toxina,

(cultivo) -Tratamento Enterotoxemia Antitoxina

Penicilina G, Metronidazol, Macroldeos, Ampicilina

Oxignio Hiperbrico

Toxinas de Clostridium perfringens

FERMENTAO TUMULTUOSA- STORMY FERMENTATION

IRON MILK O Clostridium perfringens O NICO MICRORGANISMO QUE PRODUZ ESTA REAO

Toxina alfa - lecitinase (fosfolipase C)

enterotoxignico

C. perfringens

Gangrenas

Gangrenas

Gangrenas

Clostridium septicum Edema maligno

Celulite por

Clostridium

Colite (Clostridium difficile)

Muito obrigado!!!