MINISTERIO DE SALUD SECRETARIA DE POLITICAS, REGULACION E INSTITUTOS ADMINISTRACION NACIONAL DE MEDICAMENTOS, ALIMENTOS Y TECNOLOGIA MEDICA Disposicin N 4394/2013 Bs.

As., 15/7/2013 VISTO el Expediente N 1-47-2629-12-3 del Registro de esta Administracin Nacional, la Ley N 16.463, sus Decretos Reglamentarios Nros. 9.763/64, 150/92 y 177/93, la Ley 24.766, las Resoluciones Conjuntas Nros. 988/92 (Ex - M.E y O. y S.P.) y 748/92 (Ex - M.S. y A.S.), las Disposiciones ANMAT Nros. 3185/99, 6677/10 y sus complementarias, y CONSIDERANDO: Que el artculo 1 de la Ley 16.463 establece que quedan sometidos a la presente ley y a los reglamentos que en su consecuencia se dicten, la importacin, exportacin, produccin, elaboracin, fraccionamiento, comercializacin o depsito en jurisdiccin nacional o con destino al comercio interprovincial de las drogas, productos qumicos, reactivos, formas farmacuticas, medicamentos, elementos de diagnstico, y todo otro producto de uso y aplicacin en medicina humana y las personas de existencia visible o ideal que intervengan en dichas actividades. Que el artculo 2 de la citada ley establece que las actividades mencionadas slo podrn realizarse previa autorizacin y bajo el contralor de la autoridad sanitaria, en establecimientos por ella habilitados y bajo la direccin tcnica del profesional universitario correspondiente; todo ello en las condiciones y dentro de las normas que establezca la reglamentacin, atendiendo a las caractersticas particulares de cada actividad y a razonables garantas tcnicas en salvaguarda de la salud pblica y de la economa del consumidor. Que asimismo el artculo 3 del mencionado cuerpo legal prescribe que los productos comprendidos en la citada ley debern reunir las condiciones establecidas en la Farmacopea Argentina, y en caso de no figurar en ella, las que surgen de los patrones internacionales y de los textos de reconocido valor cientfico, debiendo a la vez ser inscriptos por ante esta Administracin Nacional de conformidad a lo establecido en el Decreto N 150/92 (T.O. 1993). Que el artculo 1 del Decreto N 9763/64, reglamentario de la Ley 16.463, establece que el ejercicio del poder de polica sanitaria referido a las actividades indicadas en el artculo 1 de la mentada ley, y a las personas de existencia visible o ideal que intervengan en las mismas, se har efectivo por el Ministerio de Asistencia Social y Salud Pblica de la Nacin (hoy Ministerio de Salud), en las jurisdicciones que all se indican. Que por su parte el Decreto N 1490/92, crea esta Administracin Nacional de Medicamentos, Alimentos y Tecnologa Mdica (ANMAT), como organismo descentralizado de la Administracin Pblica Nacional, con un rgimen de autarqua financiera y econmica, con jurisdiccin en todo el territorio nacional, asumiendo dichas funciones. Que el advenimiento de principios activos cada vez ms eficaces, as como la existencia de medicamentos similares y las caractersticas farmacocinticas de ciertas drogas, han generado la necesidad de adoptar medidas en aras de la proteccin de la salud de la poblacin. Que en ese marco y en pos de mejorar la calidad de los medicamentos, se abord la problemtica en torno a la forma de encarar cualitativa y cuantitativamente los ensayos de

bioequivalencia en seres humanos, todo ello respetando lo establecido en la Disposicin ANMAT N 6677/10, la cual aprueba el Rgimen de Buena Prctica Clnica para Estudios de Farmacologa Clnica. Que en tal sentido y luego de un exhaustivo anlisis de todas las variables posibles esta Administracin adopt el criterio para la exigencia de dichos estudios teniendo en cuenta el riesgo sanitario de cada droga, dictando al efecto la Disposicin ANMAT N 3185/99, por la que se aprueban las recomendaciones tcnicas para la realizacin de estudios de bioequivalencia. Que los estudios de bioequivalencia comprenden tres etapas sucesivas: clnica, analtica y estadstica. Que la etapa analtica es altamente crtica, dado que con los resultados obtenidos en dicha etapa se realizar el anlisis estadstico sobre el cual se tomar la decisin de aceptacin o no de bioequivalencia entre el producto en estudio y el producto de referencia. Que por ende los Centros que participen en estos estudios debern adecuarse a las Buenas Prcticas de Laboratorio (BPL) de manera de generar resultados tcnicamente vlidos. Que por Disposicin ANMAT N 4844/05 se aprob la normativa aplicable a la etapa analtica para la realizacin de los Estudios de Biodisponibilidad/Bioequivalencia, que se incorpor como Anexo XII de la Disposicin ANMAT N 2819/04 (la cual aprueba los lineamientos generales de Buenas Prcticas de Fabricacin para Elaboradores, Importadores/Exportadores de Medicamentos). Que el aseguramiento integral de la calidad de los estudios de bioequivalencia constituye un elemento crucial para acreditar la confianza en la exactitud, validez y credibilidad de los resultados obtenidos. Que es necesario asegurar la calidad de los procedimientos a ser seguidos por los Centros interesados en llevar a cabo la etapa analtica de los Estudios de Biodisponibilidad/Bioequivalencia. Que a los fines de asegurar la calidad de los procedimientos tcnicos, operacionales y cientficos en el cumplimiento de la etapa analtica de los Estudios de Biodisponibilidad/Bioequivalencia de Especialidades Medicinales se hace necesario el dictado la presente Normativa de Buenas Prcticas de Laboratorio en los Centros Bioanalticos, que complemente la aplicable a la etapa analtica de estos estudios contemplada en la Disposicin 4844/05. Que asimismo, siendo que el Anexo I de la presente modifica los puntos 1 a 13 del Anexo XII de la Disposicin ANMAT 2819/04, corresponde derogar los aludidos puntos. Que el Instituto Nacional de Medicamentos y la Direccin de Asuntos Jurdicos han tomado la intervencin de su competencia. Que se acta en virtud de las facultades conferidas por los Decretos Nros. 1490/92 y 425/10. Por ello, EL INTERVENTOR DE LA ADMINISTRACION NACIONAL DE MEDICAMENTOS, ALIMENTOS Y TECNOLOGIA MEDICA DISPONE: ARTICULO 1 Aprubase la NORMATIVA DE BUENAS PRACTICAS DE LABORATORIO

APLICABLE A LOS CENTROS BIOANALITICOS PARA ESTUDIOS DE BIODISPONIBILIDAD/BIOEQUIVALENCIA, que figura como Anexo I de la presente Disposicin y forma parte integrante de la misma. ARTICULO 2 La normativa aprobada por el artculo 1 de la presente Disposicin ser complementaria de lo establecido en el Anexo XII de la Disposicin ANMAT N 2819/04 incorporado por su similar N 4844/05, respecto de la etapa analtica para la realizacin de Estudios de Biodisponibilidad/Bioequivalencia. ARTICULO 3 Derganse los puntos 1 a 13 del Anexo XII de la Disposicin ANMAT N 2819/04 incorporado por su similar N 4844/05, respecto de la etapa analtica para la realizacin de Estudios de Biodisponibilidad/Bioequivalencia. ARTICULO 4 Establcese que en caso de incumplimiento de la presente normativa esta ANMAT podr rechazar el centro bioanaltico propuesto, suspender la etapa bioanaltica o rechazar los resultados de la etapa bioanaltica del estudio, segn el caso, sin perjuicio de otras acciones que pudieran corresponder. ARTICULO 5 La presente Disposicin entrar en vigencia a partir del da siguiente al de su publicacin en el Boletn Oficial. ARTICULO 6 Regstrese, comunquese a las Cmaras y dems Entidades Profesionales y a quienes corresponda. Dse a la Direccin Nacional del Registro Oficial para su publicacin. Cumplido, archvese PERMANENTE. Dr. CARLOS CHIALE, Interventor, A.N.M.A.T. ANEXO I NORMATIVA DE BUENAS PRACTICAS DE LABORATORIO APLICABLE A LOS CENTROS BIOANALITICOS PARA ESTUDIOS DE BIODISPONIBILIDAD / BIOEQUIVALENCIA, INDICE 1. OBJETIVO 2. ALCANCE 3. DEFINICIONES 4. REQUERIMIENTOS 4.1- Documentacin correspondiente a Informacin General 4.2- Documentacin correspondiente a Garanta de Calidad 4.3- Infraestructura e Instalaciones 4.4- Muestras 4.4.1- Tubos de muestreo y anlisis 4.4.2- Identificacin 4.4.3- Transporte 4.4.4- Recepcin

4.4.5- Almacenamiento 4.4.6- Procesamiento 4.4.7- Re-anlisis 4.4.8- Descarte 4.5- Sustancias patrones 4.6- Reactivos y Solventes 4.7- Soluciones 4.8- Material de vidrio 4.9- Equipamiento 4.9.1- HPLC y otros equipos destinados a la cuantificacin 4.9.2- Freezers y heladeras 4.9.3- Sistema de agua utilizado para los ensayos 4.9.4- Pipetas automticas 4.9.5- Balanzas analticas 4.9.6- Peachmetro 4.9.7- Centrfugas 4.9.8- Termmetros 4.9.9- Sistema de evaporacin de muestra 4.9.10- Campana de extraccin 4.10- Residuos 4.11- Bioseguridad 4.12- Mtodos bioanalticos 4.12.1- Validacin del mtodo bioanaltico 4.12.2- Aplicacin del mtodo bioanaltico 4.12.3- Criterios de aceptacin de la serie analtica 4.12.4 - Integracin 4.13- Manejo de Resultados

4.14- Archivo de Documentacin 5. GLOSARIO 1. OBJETIVO La presente normativa tiene el objetivo de establecer los requerimientos administrativos, estructurales y funcionales de los Centros interesados en llevar a cabo la etapa analtica de los Estudios de Biodisponibilidad/Bioequivalencia (BD/BE) de Especialidades Medicinales, adecundose a las Buenas Prcticas de Laboratorio (BPL). 2. ALCANCE Esta normativa es aplicable a las instituciones responsables de la etapa bioanaltica de los estudios de Biodisponibilidad/Bioequivalencia de Especialidades Medicinales. 3. DEFINICIONES A los fines de la presente normativa se entiende por: Centro bioanaltico para estudios de Biodisponibilidad/Bioequivalencia de Especialidades Medicinales: institucin que realizar la etapa bioanaltica de los estudios de Biodisponibilidad/Bioequivalencia de especialidades medicinales, responsabilizndose tcnicamente por la veracidad de los datos e informacin de todos los procesos. Dichos centros deben contar con suficiente espacio e infraestructura para el desarrollo de los ensayos. Adems, deben tener reas separadas para la realizacin de actividades especficas a los fines de prevenir la posibilidad de cualquier tipo de contaminacin, incluyendo la contaminacin cruzada, y mezcla de las muestras durante la preparacin y anlisis de las mismas. Responsable de la etapa bioanaltica: persona fsica calificada por su formacin profesional, capacitacin y experiencia, quien ser responsable de la correcta ejecucin y/o coordinacin de la etapa bioanaltica. 4. REQUERIMIENTOS 4.1- Documentacin correspondiente a Informacin General El Centro Bioanaltico debe contar con la siguiente documentacin administrativa, la cual se debe encontrar permanentemente actualizada y a disposicin de la autoridad sanitaria cuando la misma lo requiera: Certificado de Habilitaciones correspondientes, emitido por la autoridad de aplicacin, para la obtencin y el manejo de muestras biolgicas. Datos del Representante Legal del Centro Bioanaltico. Datos del profesional que actuar como Director Tcnico. Capacidad operacional (cantidad de estudios por mes). Validaciones y resultados del total de estudios realizados a la fecha. Organigrama (cantidad de personas, definicin de roles, responsabilidad y autoridad de los cargos).

 Diagrama de Flujo de trabajo para los estudios de BD/BE. Curriculum vitae de los responsables del Centro. Listado del personal, profesin y funcin. Listado de equipos, instrumentos y aparatos. Documentos de compras Contratos con terceros Planos aprobados 4.2- Documentacin correspondiente a Garanta de Calidad El Centro debe establecer y mantener un Sistema de Calidad, contando con personal responsable para su implementacin. Debe documentar sus polticas, procesos, procedimientos e instrucciones para asegurar la calidad. La documentacin usada en el Sistema de Calidad debe ser comunicada a todo el personal, entendida e implementada. El Centro debe contar con la siguiente documentacin: Manual de calidad. Programa de capacitacin del personal (cronograma y registro de capacitaciones generales y especficas para la tarea a desempear, evaluaciones). Manual de seguridad e higiene. Acreditaciones (si presenta). Registro de controles de calidad internos y externos. Programa anual/semestral de calibracin, segn corresponda. Certificados de anlisis, verificacin y/o calificacin segn corresponda. Cuaderno de analista. Procedimientos Operativos Estandarizados (POEs): - Generales del Centro Bioanaltico. - Particulares para los estudios de BD/BE: 1. Transporte y recepcin de muestras. Criterios de rechazo. 2. Identificacin de muestras. 3. Almacenamiento de muestras. 4. Procesamiento de muestras. 5. Anlisis de muestras.

6. Descarte de muestras. 7. Uso, mantenimiento y calibracin del HPLC y otros equipos destinados a la cuantificacin. 8. Adecuacin de sistemas cromatogrficos. 9. Codificacin de secuencias de anlisis. 10. Verificacin e integracin de los cromatogramas. 11. Re-inyeccin y Re-anlisis de muestras. 12. Uso, mantenimiento y almacenamiento de columnas cromatogrficas. 13. Uso, mantenimiento y calibracin de balanzas analticas. 14. Uso, mantenimiento y calibracin de peachmetro. 15. Uso, mantenimiento y registro de temperatura de freezers y heladeras. 16. Uso, mantenimiento y calibracin de pipetas automticas. 17. Uso y mantenimiento de centrfuga. 18. Uso y mantenimiento del sistema de evaporacin de muestras. 19. Preparacin, rotulado, uso y almacenamiento de soluciones valoradas, reactivos y solventes. 20. Uso, mantenimiento y limpieza del equipo productor de agua. Controles realizados al agua y frecuencia de dichos ensayos. 21. Verificacin, calidad y calibracin peridica del material de vidrio. 22. Lavado del material de laboratorio. 23. Identificacin, conservacin y registro de estndares. 24. Validacin de mtodos bioanalticos. 25. Estabilidad de frmacos en fluidos biolgicos. 26. Desinfeccin y descarte de material biolgico y no biolgico. 27. Bioseguridad y proteccin individual. 28. Uso del cuaderno del analista. 29. Almacenamiento de la documentacin. 30. Programa de auditoras internas y tratamiento de no conformidades. 31. Programa de auditoras externas. Los documentos deben revisarse regularmente y mantenerse actualizados. Cuando un

documento haya sido revisado, debe existir un sistema para prevenir el uso inadvertido de la versin reemplazada. Los documentos reemplazados deben retenerse por un perodo de tiempo definido de acuerdo al Sistema de Calidad del Centro Bioanaltco o, en su defecto, por un perodo mnimo de 24 meses. El archivo de los Procedimientos en desuso debe hacerse en un sitio que impida su intercambio con los Procedimientos vigentes. 4.3- Infraestructura e Instalaciones El Centro debe ser de tamao, construccin y ubicacin acorde con las actividades a desarrollar. El diseo debe permitir un flujo lgico de los procesos proporcionando un adecuado grado de separacin de las actividades. Para ello se debe tener en cuenta: Separacin efectiva entre reas vecinas donde se realicen actividades incompatibles. Medidas para evitar la contaminacin cruzada. Adecuada disposicin de equipos, instrumentos, heladeras y freezers. Iluminacin y climatizacin adecuadas. Controles y registro de temperatura y humedad ambiente de cada rea con instrumentos calibrados. Area de acceso restringido a personal autorizado. Adecuado orden y limpieza del laboratorio y de las instalaciones. Sistemas de apoyo adecuados (electricidad, agua, gases, etc.). Generador de energa elctrica para los casos de emergencia. Mantenimiento y verificacin de funcionamiento vigente. Instalaciones auxiliares (vestuarios, sanitarios). 4.4- Muestras 4.4.1-Tubos de muestreo y anlisis Para la recoleccin y almacenamiento de las muestras biolgicas se deben utilizar tubos que no cedan material a las muestras de anlisis. Los tubos pueden ser de polipropileno o de polietileno de alta densidad y no deben ser reutilizados. Se debe evitar el uso de tubos de vidrio a los fines de prevenir posibles roturas durante el almacenamiento o transporte con la consecuente prdida de muestra. Al cambiar de proveedor o de tipo de material, debe realizarse un blanco para verificar que no exista interferencia del material en el resultado del anlisis. 4.4.2- Identificacin Los tubos correspondientes a la muestras de los voluntarios deben ser claramente rotulados. Como mnimo debe figurar: cdigo del estudio, nmero de voluntario, perodo de estudio, secuencia, nmero de muestra. Se debe diferenciar la identificacin de la muestra y de la contramuestra. En caso de ser el Centro el responsable de la conservacin de las contramuestras, debe estar especificado mediante POE. Si el Centro asigna adems una identificacin propia debe utilizar un mtodo que no altere la trazabilidad de las muestras.

4.4.3- Transporte Se debe establecer quin es el responsable del transporte de las muestras desde el Centro Clnico donde se desarroll el estudio hasta el Centro Bioanaltico. Dicho transporte debe ser realizado en condiciones que aseguren una adecuada conservacin de las muestras (cadena fro, etc.) durante el traslado de las mismas. De ser realizado por una empresa externa, la misma debe estar habilitada y acreditada para tal fin. 4.4.4- Recepcin El Centro debe implementar un adecuado registro de las muestras a los fines de evitar prdidas y/o confusiones entre las mismas. Para ello debe contar con la siguiente documentacin: Remito de Recepcin de Muestras provenientes del Centro Clnico conteniendo los siguientes datos: - Cdigo de identificacin del estudio, droga, origen, responsable del envo. - Fecha, hora y responsable de la recepcin. - N de pgina del Libro de registro donde se asienta el ingreso. - Condiciones de embalaje, rtulo, cantidad de muestras recibidas, temperatura del recipiente. - Responsable del transporte - Fecha y hora de inicio del traslado. - Observaciones. - Firmas del Investigador Principal, de los Responsables de la etapa clnica, de la entrega y la recepcin de las muestras y de la etapa bioanaltica. Libro de registro foliado, donde debe ser asentado el ingreso de las muestras con indicacin de la Identidad de cada una y en el estado en el que arribaron al Centro, dejando consignado: - Fecha de recepcin - N del Estudio - Principio Activo - Centro Clnico - Patrocinador - Tipo de muestra - Cantidad de muestras Para cada voluntario debe registrarse: - N de voluntario

- Perodo del estudio - Tiempos de muestreo faltantes - Anormalidades Debe figurar claramente, mediante POE, cules son los criterios adoptados para el rechazo de muestras. Por ejemplo: dificultades en la extraccin, faltantes, descongelado accidental, volumen escaso, muestra ictrica, lipmica o hemolizada, etc. 4.4.5- Almacenamiento Las muestras de los estudios de bioequivalencia deben ser almacenadas en reas dedicadas a tal fin. Las mismas deben conservarse correctamente identificadas y rotuladas, en las condiciones de tiempo y temperatura determinadas por los estudios de estabilidad. Las contramuestras deben ser almacenadas en forma separada de las muestras que van a ser procesadas. La temperatura debe ser controlada con dispositivos de control de temperatura o con termmetro de mnima y mxima calibrado y registro diario. Debe establecerse claramente cmo proceder en caso de cortes de suministro elctrico. Asimismo debe llevarse un registro de almacenamiento de muestras donde figure claramente la persona responsable de dicho procedimiento. 4.4.6- Procesamiento El procesamiento de las muestras debe ser realizado por personal capacitado para tal fin. El Centro debe implementar un POE para el procesamiento de muestras. 4.4.7- Re-anlisis El Centro debe implementar un POE para el re-anlisis de muestras y los criterios de aceptacin. El mismo debe explicar las razones para la repeticin del anlisis. Los motivos que llevan al reanlisis pueden ser, entre otros: muestras fuera del rango de trabajo, errores durante el procesamiento, errores en equipos, pobre separacin cromatogrfica, anlisis de replicado inconsistente, solicitud de la agencia regulatoria. Las muestras no pueden ser reanalizadas por motivos farmacocinticos. El fundamento de la repeticin de anlisis y el registro de los resultados del mismo deben ser claramente documentados. 4.4.8- Descarte El Centro debe contar con un POE sobre almacenamiento, descontaminacin y descarte de las muestras biolgicas. En el mismo debe figurar el mtodo propuesto para el tratamiento de las muestras, adecundose a la normativa vigente en la jurisdiccin correspondiente y a lo especificado en el tem 4.10- Residuos. 4.5- Sustancias patrones La pureza del estndar de referencia utilizado en la validacin puede afectar los datos del estudio. El uso de sustancias qumicas de alto grado de pureza es fundamental para asegurar la calidad de los datos analticos en la cuantificacin de los frmacos y/o de sus metabolitos. Por esta razn se requiere el uso de patrones primarios de identidad y pureza conocidas (USP,

BP, INAME u otros organismos internacionales reconocidos). En el caso de no contar con patrones primarios se podrn utilizar estndares secundarios o de trabajo siempre y cuando estn bien caracterizados segn anexo IV de la Disposicin ANMAT N 2819/04 o la que en un futuro la complemente o reemplace. De ser posible, el estndar de referencia debe ser idntico al del analito. Cuando esto no sea posible puede ser utilizada una forma qumica establecida (base libre o de cidos, sales o steres). En el caso de los estndares de metabolitos (los que usualmente no se encuentran comercialmente disponibles) el Centro debe demostrar, a travs de certificados de anlisis del proveedor o por ensayos realizados en el propio laboratorio, que ste presenta un grado de pureza definido y adecuado para ser utilizado como estndar de trabajo. Los estndares internos deben presentar un grado analtico p.a. (para anlisis) o superior, de manera de que supuestas impurezas de estas drogas no interfieran en el anlisis del analito de inters. En todos los casos, los estndares deben ser trazables, contar con protocolos analticos y almacenarse conforme a las instrucciones del proveedor. Frecuentemente, stos deben ser conservados en un lugar fresco, al abrigo de la luz, con baja humedad y siempre en frascos bien cerrados, a los fines de resguardar su identidad durante todo el perodo de vida til del mismo. Segn el tipo de estndares se debe contar con la hoja de seguridad y el certificado de anlisis donde se detalle: procedencia, nmero de lote, identidad, ensayos de identidad, pureza, fecha de vencimiento y/o re-anlisis. Adems se debe llevar un registro de stock de estndares en la que figure como mnimo: nmero de lote origen cantidad disponible de cada uno fecha en que comenz a utilizarse masa utilizada perodo de validez. As mismo deben estar disponibles los certificados de anlisis y/o evidencia interna o externa de su identidad y pureza segn corresponda. El Centro debe contar con un POE donde se describa la forma de conservacin de los estndares, y de qu manera se lleva el registro de existencia y uso de los mismos. 4.6- Reactivos y Solventes Los reactivos y solventes deben ser de la calidad adecuada para su uso, de manera de no generar interferencia en los resultados. Deben existir procedimientos adecuados de control de proveedores para asegurar que los reactivas y solventes adquiridos tengan la calidad deseada. Se debe solicitar a los proveedores los certificados analticos y evidencia documentada para asegurar la confiabilidad de los mismos. Dicha documentacin debe mantenerse archivada y disponible.

Se debe llevar un registro de todos los reactivas y solventes disponibles en el laboratorio, indicando: cantidad, presentacin, nmero de lote, fecha de vencimiento, fecha de recepcin en el laboratorio y fecha en que comenz a utilizarse. Se deben conservar los documentos de compra de los mismos. Los reactivos y solventes deben almacenarse en condiciones apropiadas para asegurar la integridad de los mismos. Las reas destinadas para el almacenamiento deben ser adecuadas en cuanto a ventilacin y temperatura. Los reactivos deben poseer un rtulo en el que figure como mnimo: Origen Identidad Nmero de lote Concentracin - Pureza Impurezas Perodo de validez Forma de conservacin Registro de temperatura de almacenamiento Control de stock Clasificacin por categoras (cidos, solventes, etc.) El Centro debe contar con un POE para rotulado, uso, almacenamiento y descarte de reactivos y solventes. 4.7- Soluciones Debe existir un POE para la preparacin de todas las soluciones necesarias para la cuantificacin de las muestras biolgicas. Adems deben figurar las condiciones de seguridad, manipulacin y descarte de las mismas. Las soluciones deben poseer un rtulo en el que figure como mnimo: Identidad Concentracin- pH. Fecha de preparacin Responsable de preparacin Cantidad preparada Perodo de validez Forma de conservacin

 Precauciones en la manipulacin 4.8- Material de vidrio El material de vidrio interviene en la mayora de los anlisis y se tiende errneamente a dar por supuesta su idoneidad. Esto puede extenderse a material de porcelana, cuarzo, plstico y metlico. Los errores a causa de estos materiales puede ser debido a: - suciedad o contaminacin - defectos del material: la exactitud del material volumtrico (pipetas y matraces aforados) tiene gran influencia en el resultado de los anlisis Todo el material de vidrio debe ser de buena calidad, mantener un nivel de limpieza tal que permita el desplazamiento uniforme de un film de lquido y almacenarse correctamente cuando no est en uso. El material de vidrio volumtrico debe ser certificado y estar adecuadamente identificado. Debe calibrarse de forma peridica, desechando el que no cumpla con las especificaciones. Se deben verificar los volmenes dispensados por estos materiales utilizando una masa de agua y estos controles deben ser documentados y archivados. El Centro debe contar con un POE que contemple la identificacin, verificacin, calidad y calibracin peridica de dichos materiales, el lavado y la verificacin de dicho proceso. 4.9- Equipamiento El Centro debe estar dotado de todos los equipos, en cantidad suficiente y de capacidad adecuada, requeridos para el correcto funcionamiento como Centro Bioanaltico. Debe incluir los equipos necesarios para la preparacin, procesamiento, almacenamiento y descarte de las muestras biolgicas. Los equipos deben mantenerse limpios y en buen funcionamiento para obtener resultados fiables. Cada equipo debe estar identificado de manera inequvoca, debe indicarse el estado de uso, el responsable del mismo, fechas del ltimo y del prximo mantenimiento, calibracin y calificacin. Las instrucciones de operacin y mantenimiento deben estar fcilmente disponibles. El equipamiento debe ser utilizado solamente por personal autorizado. La instalacin de los equipos debe realizarse en las condiciones apropiadas y deben mantenerse bajo control para asegurar la confiabilidad de los mismos. Cada instrumento o equipo debe contar con una carpeta individual de registro en la cual debe asentarse nombre del equipo, marca, modelo, nmero de serie, fecha de ingreso al laboratorio, condiciones en que fue recibido (nuevo, usado, etc.), detalle de los controles a los que fue sometido al ingresar, fecha en la que fue puesto en uso, ubicacin. Adems se debe archivar la siguiente documentacin: Factura de compra Manual de uso Registro de uso Registro de fallas o mal funcionamiento, incluyendo las acciones llevadas a cabo para solucionar el inconveniente, asentando el nombre del responsable de la reparacin, los controles a los que fue sometido y la fecha de la nueva puesta en funcionamiento.

Deben existir POEs que contemplen: Plan de calibracin (de corresponder), Mantenimiento preventivo/correctivo, Registro de verificaciones peridicas, Calificacin (DQ, IQ, OQ, PQ). As mismo se deben definir las acciones de control y se deben mantener los registros de dichas acciones. El centro debe contar con un grupo electrgeno de reserva para alimentar el equipo esencial, del cual deben llevarse controles peridicos de funcionamiento y registro de los mismos. Toda la documentacin generada debe ser archivada. Todos los tems antes mencionados deben aplicarse a los equipos enumerados a continuacin. 4.9.1- HPLC y otros equipos destinados a la cuantificacin Siempre que la molcula pueda ser analizada por mtodos cromatogrficos, ste debe ser el mtodo de eleccin. En caso de que se utilice otro mtodo se debe presentar una justificacin tcnica. Para la cuantificacin por mtodos cromatogrficos debe emplearse estndar interno. En caso contrario debe estar tcnicamente justificado. La instalacin de los equipos debe realizarse en las condiciones apropiadas segn las indicaciones del fabricante, en sitios con temperatura y humedad ambiental controladas. El Centro debe contar con un programa escrito de mantenimiento y calibracin peridica. La calibracin externa debe realizarse como mnimo anualmente. Todo mantenimiento y calibracin debe ser registrado y la documentacin archivada. Para el caso de las columnas cromatogrficas stas deben contar con un registro de uso donde figure como mnimo el tipo de columna, con qu droga fue utilizada y la cantidad de inyecciones realizadas en esa columna. De usarse una fase mvil crtica, esta informacin tambin debe asentarse en dicho registro. 4.9.2- Freezers y heladeras Las muestras biolgicas de los estudios de bioequivalencia deben ser conservadas y almacenadas en freezers o heladeras destinados exclusivamente a tal fin, debidamente identificados y de acceso restricto. De no contar con un freezer o heladera totalmente dedicado se debe destinar un espacio exclusivo dentro del mismo. En este ltimo caso se debe indicar con un rtulo claro la existencia de dichas muestras. Se debe llevar un registro diario de control de temperatura de los freezers y heladeras, mediante el uso de dispositivos de registro continuo de temperatura. Los termmetros deben estar instalados adecuadamente (en la parte central interna del equipo). Los instrumentos de medicin deben ser calibrados en forma peridica. En el caso de equipamientos que tengan registro automtico de temperatura, stos deben permitir una verificacin diaria de la temperatura y los datos impresos o anotados deben ser archivados para su control. El Centro debe contar con un POE describiendo la operatoria y frecuencia de limpieza y registro de temperatura.

Es indispensable respetar la capacidad interior del freezer o heladera, manteniendo un orden adecuado del material conservado. Debe existir un POE que contemple el movimiento de muestras y soluciones dentro de freezers o heladeras. Todo movimiento debe registrarse. 4.9.3- Sistema de agua utilizado para los ensayos El agua utilizada en los ensayos debe ser de una calidad tal que no interfiera con los resultados analticos. Esta puede ser: deionizada, destilada, bidestilada, ultrapura. La pureza de la misma debe ser comprobada analticamente mediante un protocolo previamente definido de acuerdo a las necesidades del ensayo. En el caso que el Centro cuente con equipo productor de agua, debe redactar un POE de uso, mantenimiento y limpieza del mismo, como as tambin del depsito y almacenamiento del agua. Se debe realizar el control de calidad del agua producida, estableciendo en un POE los ensayos a ser realizados en el agua, la frecuencia y registros de dichos controles. 4.9.4- Pipetas automticas El Centro debe contar con un POE para utilizacin, limpieza, descarte de tips y conservacin de las pipetas automticas. Debe verificarse la performance y contar con calibraciones peridicas. Toda verificacin de la performance y calibraciones externas deben ser registradas y archivadas. Los ensayos para determinar exactitud y precisin de las pipetas mecnicas de volumen fijo se deben realizar con masa de agua cada tres meses. En el caso de pipetas de volumen variable tambin se debe verificar la exactitud y la precisin usando una masa de agua en dos puntos distintos del rango por lo menos cada tres meses. 4.9.5- Balanzas analticas Las balanzas analticas deben ser instaladas en un local adecuado, niveladas, libre de corrientes de aire, en mesadas exclusivas y estables (alejadas de fuente de vibracin). Siempre que sea posible, deben estar dispuestas en ambientes con temperatura controlada. El Centro debe contar con un POE con la informacin bsica sobre el uso y funcionamiento de las balanzas, limpieza, mantenimiento y calibracin de las mismas. Las balanzas deben limpiarse inmediatamente despus de su uso, para su adecuada conservacin. Se debe llevar un registro de uso. El Centro debe contar un programa de mantenimiento y calibracin peridica de las balanzas (como mnimo, anualmente) con toda la informacin registrada y archivada. La verificacin debe realizarse diariamente con pesas certificadas antes de su utilizacin. En el registro de verificacin de las balanzas debe figurar como mnimo: fecha, datos de la verificacin diaria, nombre del operador y datos de la pesada (sustancia, cantidad pesada, destino). Todos los registros deben ser archivados. Las pesas patrn utilizadas en las verificaciones deben ser re-certificadas anualmente, por un organismo acreditado para tal fin. 4.9.6- Peachmetro

El procedimiento para la utilizacin del peachmetro debe contener informacin bsica sobre el uso, cuidados de mantenimiento, conservacin de las soluciones buffer de calibracin, limpieza y almacenamiento de los electrodos. La eficiencia de los electrodos debe ser verificada peridicamente. En cuanto a la calibracin sta debe ser realizada antes del uso y deben usarse por lo menos dos soluciones buffer de calibracin con un pH por encima y otro debajo del valor medido. Se deben registrar dichas calibraciones en el registro de uso del equipo. Debe controlarse la vigencia de las soluciones de calibracin y de la solucin de almacenamiento de los electrodos. 4.9.7- Centrfugas El Centro debe contar con un procedimiento operativo para el correcto uso de la centrfuga (balanceo, capacidad mxima), procedimientos de limpieza y de descontaminacin de la misma. Se debe registrar el uso y todo mantenimiento realizado en la centrfuga. 4.9.8- Termmetros

Se debe contar por lo menos con un termmetro certificado por un organismo calificado, del que se debe verificar su calibracin de forma anual en su rango de uso. Dicho termmetro puede utilizarse para la calibracin de los dems termmetros utilizados, con una frecuencia trimestral. En caso de no contar con un termmetro certificado, todos los termmetros utilizados deben ser calibrados externamente. Debe haber un POE que describa este procedimiento. 4.9.9- Sistema de evaporacin de muestra El Centro debe contar con un POE describiendo el correcto uso, limpieza y mantenimiento de rutina del evaporador. El uso y mantenimiento deben ser registrados y la documentacin archivada. 4.9.10- Campana de extraccin El Centro debe contar con un POE describiendo el correcto uso, limpieza, controles y mantenimiento de rutina de la campana de extraccin. El uso, controles y mantenimiento deben ser registrados y la documentacin archivada. 4.10- Residuos El Centro debe contar con un POE sobre tratamiento y disposicin final de residuos. En el mismo debe figurar el mtodo propuesto para el tratamiento segn el tipo de residuo. Si el tratamiento de residuos fuese propio debe especificarse claramente en el POE las caractersticas del sistema (dimensiones, combustible utilizado, conducto de evacuacin de gases, materiales constructivos, caractersticas de los quemadores si correspondiere, dispositivo de seguridad) y la ubicacin de la unidad de tratamiento dentro del establecimiento. Si el sistema fuese contratado, el Centro debe archivar el original o una copia autenticada ante Escribano Pblico Nacional de los contratos celebrados para el tratamiento y disposicin final de residuos. Se debe archivar el comprobante de recoleccin de los residuos lquidos y slidos llevada a cabo por una empresa habilitada para tal fin.

El almacenamiento de los residuos patognicos en el interior del laboratorio debe hacerse en un local ubicado en reas preferentemente exteriores, de fcil acceso, aislado y que no afecte la bioseguridad e higiene del establecimiento y su entorno. 4.11- Bioseguridad Los procedimientos y prcticas de seguridad en el laboratorio deben formar parte de la capacitacin bsica del personal. El Centro Bioanaltico debe implementar un programa de bioseguridad. Debe existir asesoramiento por un ingeniero de seguridad e higiene industrial o, en su defecto, se deben seleccionar los responsables de controlar la seguridad, instruccin y entrenamiento necesarios del personal. El Centro debe adoptar un manual de seguridad o de trabajo en el que se identifiquen los riesgos conocidos y potenciales, se especifiquen las prcticas y los procedimientos encaminados a eliminar o reducir al mnimo estos riesgos. Todo el personal debe leer el manual de seguridad y se debe llevar registro de lectura. A su vez se debe implementar un programa de prevencin de accidentes. El laboratorio debe ser mantenido limpio y ordenado. El personal debe usar bata, chaqueta o uniforme dentro del laboratorio y gafas de seguridad cuando corresponda. Se deben utilizar guantes de ltex para todo manejo de material biolgico o donde exista aunque sea de manera potencial el riesgo de exposicin a sangre o fluidos corporales. Deben existir cronogramas de vacunacin y programas de exmenes peridicos de salud para el personal. El Centro debe contar con un sistema de seguridad el cual debe incluir medios de proteccin contra incendios (matafuegos con carga vigente), duchas para casos de urgencia, medios para el lavado de ojos, y kit antiderrames. Debe existir un registro del control peridico de dichos elementos de seguridad. Adems debe contar con un plan de contingencia, planos de evacuacin visibles y adecuada sealizacin de las salidas de emergencia. Debe disponer de un botiqun de primeros auxilios y de un ndice con nmeros telefnicos de emergencia, el cual debe ser de fcil acceso. La descontaminacin y el descarte de desechos de origen biolgico y dems materiales deben adecuarse a los POEs sobre almacenamiento, descontaminacin y descarte de las muestras biolgicas. Todos los derrames, accidentes y exposiciones reales o potenciales deben ser comunicados al responsable. Se debe contar con un procedimiento escrito para la limpieza de todos los derrames. El Centro debe contar con un programa de control de plagas, llevando registro de los controles realizados. Se debe archivar el original o una copia autenticada ante Escribano Pblico Nacional de los contratos celebrados con la empresa contratada para tal fin y de los comprobantes correspondientes. 4.12- Mtodos bioanalticos En los estudios de Biodisponibilidad/Bioequivalencia, la etapa bioanaltica es altamente crtica. En base a los resultados obtenidos en dicha etapa, se realizar el anlisis estadstico sobre el cual se tomar la decisin de aceptacin o no de Bioequivalencia entre el producto en estudio y el producto de referencia. Teniendo en cuenta adems que estos estudios involucran voluntarios humanos, el Centro Bioanaltico debe asegurar que el mtodo analtico utilizado para la cuantificacin de las muestras biolgicas ha sido debidamente validado de manera de obtener

resultados confiables y consistentes. Por lo tanto, antes de implementar un mtodo bioanaltico debe realizarse la validacin total del mismo. Cuando existan cambios en el mtodo bioanaltico validado, debe realizarse una validacin parcial. Cuando el impacto de los cambios sea desconocido, corresponde realizar una validacin total. 4.12.1- Validacin del mtodo bioanaltico El Centro debe verificar toda la metodologa analtica empleada, que involucra la preparacin de la muestra con los procesos de extraccin y/o separacin, purificacin, identificacin y cuantificacin de la droga en la matriz biolgica. El mtodo bioanaltico utilizado debe ser descrito en un POE. A su vez, se debe contar con un POE para la validacin de mtodos bioanalticos. Los parmetros para la validacin de un mtodo bioanaltico deben evaluarse segn las Disposiciones ANMAT N 2819/04 (anexo XII), N 4844/05 y N 5040/06, o la que en su caso las complementen o reemplacen. Dichos parmetros incluyen: exactitud, precisin, selectividad, sensibilidad, linealidad, lmite de cuantificacin, recuperacin y estabilidad (ciclos de congelamiento/descongelamiento, corto plazo, condiciones de anlisis, largo plazo, de la solucin patrn). El Centro debe contar con los registros completos de las tcnicas validadas y la siguiente documentacin respecto a cada validacin: metodologa analtica, protocolo, cromatogramas, resultados e informe de validacin. En la validacin, la matriz biolgica utilizada debe ser preferentemente la misma matriz objeto de estudio. De no disponer de la matriz de estudio se debe justificar el uso de otra matriz biolgica. Se debe demostrar la estabilidad de frmaco estudiado en la matriz biolgica utilizada. 4.12.2- Aplicacin del mtodo bioanaltico Para la aplicacin del mtodo analtico, los mismos parmetros y condiciones estudiados durante la validacin deben seguir siendo controlados durante el anlisis de rutina de las muestras de un estudio, incluyendo el mismo anticoagulante, tcnica de extraccin, condiciones analticas y tiempos de estabilidad establecidos. Para ello el Centro debe contar con un POE para el anlisis de muestras, que incluya el diseo de la serie analtica. Se define como serie analtica o lote de muestras a la cantidad de muestras preparadas por el mismo profesional, para una tanda de anlisis ininterrumpido, pudiendo incluir uno o ms voluntarios. Preferentemente todas las muestras de un mismo voluntario deben ser analizadas en una nica serie analtica. Todas las muestras de la serie deben ser procesadas y extradas en conjunto. Debe estar formada por: Una muestra cero (matriz procesada sin Analito y con Estndar Interno). Una muestra blanco (matriz procesada sin Analito ni Estndar Interno). Una curva de calibracin idntica a la utilizada en la validacin, constituida por un conjunto de estndares de calibracin en un mnimo de 6 niveles de concentracin. Debe cubrir todos los valores esperados de las muestras e incluir el Lmite de Cuantificacin (LIQ). Muestras de control de calidad (QCB, QCM, QCA)

 Muestras desconocidas provenientes de Voluntarios. 4.12.3- Criterios de aceptacin de la serie analtica Los criterios de aceptacin o rechazo de una serie analtica deben estar previamente establecidos en un POE. En el Protocolo Analtico o en un POE se debe contemplar los criterios de re-anlisis de muestras. 4.12.4 - Integracin La integracin y reintegracin de los cromatogramas deben ser descriptos en un POE. Cualquier desviacin de este POE debe ser discutida en el informe analtico. Los parmetros de integracin de los cromatogramas y, en el caso de una re-integracin, los datos de la integracin inicial y final deben ser documentados. 4.13- Manejo de Resultados Si el Centro Bioanaltico es el responsable de la evaluacin estadstica de los resultados del estudio, segn se haya establecido en el protocolo del mismo, debe contar la documentacin y los registros sobre la metodologa, pruebas y programas informticos a utilizar en el anlisis. 4.14- Archivo de Documentacin Todos los documentos que se mencionan en esta normativa pueden estar sujetos a monitoreo y auditora por parte del patrocinador y a inspeccin por parte de la ANMAT, y deben estar disponibles cuando sta lo requiera. Los procedimientos operativos estandarizados relativos al sistema en uso deben estar disponibles y ser de fcil acceso para las personas autorizadas. La documentacin y registros, incluyendo los cromatogramas, de un estudio deben conservarse desde su inicio y por un perodo no menor a 5 aos a partir de la finalizacin del mismo. Asimismo, en caso de que alguno de los POEs utilizados durante el estudio haya sido reemplazado, debe retenerse una copia de la versin utilizada junto con la documentacin del estudio. La documentacin puede mantenerse en papel o mediante sistemas electrnicos de procesamiento de datos u otro medio confiable. Si se maneja mediante mtodos electrnicos de procesamiento de datos, slo las personas autorizadas deben poder ingresar o modificar los datos en la computadora, y debe haber un registro de los cambios y supresiones; el acceso debe restringirse mediante claves u otros medios y el ingreso de informacin crtica debe verificarse en forma independiente. Los registros almacenados electrnicamente deben protegerse mediante una copia de seguridad o impresiones en papel u otros medios. Es particularmente importante que, durante el perodo de conservacin de la documentacin, la informacin est rpidamente disponible. El Centro debe tomar las medidas necesarias para prevenir la prdida o destruccin accidental de la documentacin. Si el sistema de archivo fuese contratado, el Centro debe archivar el original o una copia autenticada ante Escribano Pblico Nacional de los contratos celebrados. 5. GLOSARIO:

Analito: Compuesto qumico especfico contenido en la muestra sometida a anlisis. Area dedicada: Area que provee una separacin completa y total de todos los aspectos de una operacin, incluyendo el movimiento del personal y equipamientos, con procedimientos bien establecidos, controles y monitoreo. Esto incluye barreras fsicas como tambin sistemas de manejo de aire separados, pero no necesariamente implica que deba encontrarse en un edificio distinto y separado. Auditora de Calidad: Examen sistemtico e independiente de las actividades y documentos para determinar si las actividades evaluadas fueron realizadas y los datos fueron registrados, analizados y reportados con exactitud de acuerdo al protocolo o procedimiento correspondiente. Biodisponibilidad: Es la cantidad y velocidad con las que el principio activo contenido en una forma farmacutica alcanza la circulacin sistmica, determinadas mediante la curva concentracin/tiempo o la excrecin urinaria. Bioequivalencia: Dos especialidades medicinales son bioequivalentes cuando siendo equivalentes farmacuticos o alternativas farmacuticas sus biodisponibilidades despus de la administracin en la misma dosis molar son semejantes en tal grado, que pueda esperarse que sus efectos sean esencialmente los mismos. Buena Prctica de Laboratorio (BPL): estndar de organizacin y de tareas de laboratorio bajo los cuales los estudios se planifican, realizan, registran, controlan y exponen. Su objetivo es asegurar la calidad e integridad de todos los datos obtenidos durante un estudio determinado y tambin reforzar la seguridad. Calibracin: Conjunto de operaciones que establecen, bajo condiciones especficas, la relacin entre los valores indicados por un instrumento o sistema de medicin o los valores representados por una medida de un material, y los correspondientes valores conocidos de un estndar de referencia, todos registrados y controlados. Los lmites de aceptacin del resultado de medicin deben estar establecidos. Calificacin del instrumental analtico: El proceso de calificacin de instrumentos sigue el modelo de las 4Qs para la especificacin, la verificacin de la instalacin y el seguimiento permanente de funcionamiento del instrumento. Calificacin del diseo (DQ): Define las especificaciones funcionales y operativas del instrumento y el software asociado para el uso previsto. Esta informacin debe ser suministrada por los fabricantes de los instrumentos. Debe ser realizado antes de la compra de un nuevo instrumento. Calificacin de la Instalacin (IQ): Establece que un instrumento se recibe como se especific, est correctamente instalado y en condiciones de funcionamiento. Debe ser realizado tanto en la instalacin de nuevos sistemas como en los sistemas ya existentes. Calificacin Operacional (OQ): Establece que el instrumento funciona de acuerdo a sus especificaciones operacionales en el entorno seleccionado. Calificacin de Desempeo (PQ): Consiste en la realizacin de actividades para demostrar que todas las especificaciones del instrumento son consistentes con la necesidad de su uso. Cuaderno del analista: documento controlado e identificado en el que deben registrarse todos y cada uno de los experimentos realizados con las incidencias de todo tipo que se hayan producido.

Estndar interno: Compuesto de estructura similar a la del analito, agregado en concentraciones conocidas y constantes a los estndares de calibracin y a todas las muestras, para facilitar la cuantificacin de la sustancia analizada. Garanta de calidad: Todas las actividades planeadas y sistemticas implementadas dentro del sistema de calidad que se puede demostrar que proveen confianza que un producto o servicio cumple los requerimientos de calidad. Gestin de calidad: Es un conjunto de acciones planificadas y sistemticas que son necesarias para proporcionar la confianza adecuada para que un producto o servicio satisfaga los requisitos fijados sobre la calidad. Lmite inferior de cuantificacin (LIQ): Mnima cantidad de analito en una muestra que puede determinarse cuantitativamente con adecuada precisin y exactitud. Lmite superior de cuantificacin (LSQ): Mxima cantidad de analito en una muestra que puede determinarse cuantitativamente con adecuada precisin y exactitud. Manual de Calidad: Es un documento o grupo de documentos que identifican la poltica, organizacin, objetivos, actividades funcionales y especficas de la Gestin de la Calidad, diseadas para llevar a cabo los logros de calidad. Matriz biolgica: Material de origen biolgico que puede muestrearse y procesarse de forma reproducible. Por ejemplo: sangre, suero, plasma, orina, heces, saliva, tejidos, etc. Mtodo Bioanaltico: conjunto de todos los procedimientos involucrados en la obtencin, tratamiento, almacenamiento y anlisis de muestras biolgicas para la determinacin cuantitativa de una sustancia en una matriz biolgica determinada. Muestra: trmino general que incluye controles, muestra blanco, muestra cero y muestras desconocidas. Muestra blanco: muestra procesada de matriz biolgica, libre del analito en estudio y del estndar interno. Muestra cero: muestra procesada de matriz biolgica que contiene una concentracin conocida de estndar interno, libre del analito en estudio. Muestra de control de calidad (QC): muestra procesada de matriz biolgica con una concentracin conocida de los analitos. Se utiliza para evaluar la precisin y exactitud del mtodo, la estabilidad de los analitos y para evaluar la integridad y validez de los resultados de las muestras desconocidas. No se utiliza para la determinacin de la curva de calibracin. Muestra de estudio, desconocida o problema: muestra biolgica a ser analizada. No se refiere a muestras de control de calidad o a muestras de estndar de calibracin. Incluye las muestras provenientes de los voluntarios. Muestra de estndar de calibracin: muestra procesada de matriz biolgica con una concentracin conocida de los analitos. Se utiliza exclusivamente para la determinacin de la curva de calibracin. Muestra procesada: extracto final de una muestra que fue sometido a diversas manipulaciones (por ejemplo: dilucin, extraccin, concentracin) antes del anlisis instrumental.

Procedimiento Operativo Estandarizado: Documento que describe la secuencia de pasos necesarios para asegurar la correcta ejecucin de actividades de tipo administrativo o tcnico. En general, define qu se debe hacer, quin lo debe hacer, cundo y en dnde se debe realizar. Organigrama: documento que especifica la responsabilidad y autoridad del personal del Centro y la relacin entre la gestin de calidad, las operaciones tcnicas y los servicios de apoyo. Debe reflejar la estructura organizativa del rea responsable de la etapa analtica de los estudios de Biodisponibilidad/Bioequivalencia. Revalidacin: Repeticin total o parcial de la validacin de un mtodo analtico debido a modificaciones en el propio mtodo, equipos, muestras a analizar, etc. con el objeto de garantizar que los resultados continan siendo fiables. Serie analtica o lote analtico: conjunto de muestras formado por al menos una curva de calibracin idntica a la utilizada en la validacin, muestras blanco, muestra cero, muestras de control de calidad y muestras problema, procesadas conjuntamente. Sistema de calidad: Actividades del laboratorio para producir productos y servicios de alta calidad y exactitud. Validacin: Accin documentada que demuestra que un mtodo bioanaltico conducir con un alto grado de seguridad a la obtencin de resultados precisos y exactos dentro de las especificaciones y atributos de calidad previamente establecidos. Validacin parcial: Cambio en el mtodo bioanaltico validado que no requiere la necesidad de una revalidacin completa. Validacin total: Establecimiento de los parmetros de validacin de un mtodo bioanaltico, aplicable al anlisis de las muestras.

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Resumen: El anlisis clnico de las muestras biolgicas en las unidades de cuidados intensivos peditricos y neonatales es una herramienta fundamental en el diagnstico y tratamiento de los nios enfermos. Estudiaremos las muestras biolgicas ms solicitadas en el mbito hospitalario: sangre, orina, heces, LCR y esputo. Tan importante como su obtencin es su manipulacin, transporte y procesamiento en laboratorio. Existen unas normas que facilitan el procedimiento.

INTRODUCCIN La calidad de los resultados de los anlisis clnicos de muestras biolgicas de pacientes en unidad de cuidados intensivos peditricos y neonatales comienza con la solicitud del facultativo y una correcta obtencin de la muestra. Igual de importante es su manipulacin, conservacin, transporte y procesado. Una buena metodologa de trabajo por parte del personal de enfermera y el resto del equipo asegura la fiabilidad de los datos obtenidos reduciendo al mnimo errores que conllevan el rechazo de las muestras, repeticin de los anlisis y un perjuicio para el paciente disminuyendo la calidad del servicio, aumentando la exposicin del profesional y el gasto econmico. DEFINICIN Una vez obtenida la muestra, normas para la correcta manipulacin, conservacin y transporte para un correcto procesamiento en laboratorio. OBJETIVO Tratamiento adecuado de las muestras biolgicas para obtener un resultado fiable y de calidad de cara a la continuidad de los cuidados. NORMAS GENERALES PARA EL TRATAMIENTO DE MUESTRAS DE SANGRE Introduccin En la prctica clnica la sangre es la muestra biolgica ms solicitada para el anlisis por la gran cantidad de informacin que ofrece sobre la enfermedad. Se estudia de diversos mtodos y distintos objetivos.

Normas generales para tratamiento de muestras biolgicas

PRUEBAS PARA ESTUDIO HEMATOLGICO Y BIOQUMICO Introduccin Las pruebas ms frecuentes que se solicitan para el estudio hematolgico son: Hemograma o hematimetra: donde se van a cuantificar los diferentes grupos celulares de la sangre (hemates, leucocitos y plaquetas) otros parmetros relacionados con su cantidad, forma y contenido (hemoglobina, hematocrito, volumen corpuscular medio) Estudio de Coagulacin: que consta, adems de otros parmetros, de tiempo de protrombina (T.P.) que mide la integridad de la va extrnseca del sistema de coagulacin sangunea y el tiempo de tromboplastina activada (APTT) que mide la va intrnseca. Velocidad de sedimentacin globular (VSG) de la 1 y 2 hora: Se mide para detectar procesos inflamatorios o infecciosos. El estudio bioqumico de la sangre determina como estn las substancias concentradas en la parte lquida de la sangre (suero) Material La sangre debe ser recolectada en tubos de vidrio o plstico, preferiblemente cristal siliconado y barosilicatado irrompible, con sistema de vaco, estriles y hermticos. En otro tipo de estudios se utilizan lminas portaobjetos de vidrio o plstico comercial (extensiones para formula y recuento leucocitario, parsitos en sangre, biopsia de la medula sea). Es importante conocer si el bote debe llevar anticoagulante en polvo o lquido y seleccionar el apropiado para el estudio que se quiere realizar. Los ms utilizados son: EDTA (ETILENDIAMINO TETRACETATO) Anticoagulante lquido utilizado principalmente en el estudio de recuento de clulas. CITRATO DE SODIO Anticoagulante lquido, generalmente se utiliza en estudios de coagulacin. HEPARINA Su presentacin puede incluir concentraciones de sodio y litio. Normalmente la heparina con litio es utilizada para estudios bioqumicos y la sdica en recuento celular. OXALATO Anticoagulante en polvo utilizado sobre todo en determinacin de alcoholemia, estudios del metabolismo de la glucosa. Existen cdigos de colores estandarizados para las diferentes presentaciones comerciales de los tubos. TAPN ROJO CAPACIDAD 9 cc

Tubo seco sin anticoagulante, se obtiene suero tras retraccin del cogulo. Se utiliza para pruebas cruzadas en banco de sangre.

TAPN ROJO, MARRN, AMARILLO, CAPACIDAD 3,5 cc, 5 cc. TAPN AMARILLO MICROMETODO CAPACACIDAD 500 microlambdas. Tubo con gelosa, se centrifuga y se separa el suero de las clulas. Se utiliza para anlisis bioqumico de la sangre.

TAPN VIOLETA: CAPACIDAD 2 cc, 2,5 cc, 3cc. TAPN VIOLETA MICROMTODO CAPACIDAD 250, 500 microlambdas. Con anticoagulante EDTA. Se utiliza para hemograma.

TAPN VERDE O BLANCO Capacidad hasta 4 cc con anticoagulante heparina sdica. Se utiliza para cariotipo.

TAPN NEGRO Capacidad 1 +/- 0,2 ml con anticoagulante citrato, tubo de dos elementos utilizado para VSG.

No confundir con el modelo de tapn negro para pruebas de alcoholemia, capacidad 4 ml y con anticoagulante oxalato potsico y fluoruro sdico.

TAPN AZUL Capacidad 1.8 cc, 2.5 cc, 4 cc con anticoagulante citrato de sodio 3.8% se utiliza para estudio de coagulacin.

Normas generales La no consecucin de estas normas conlleva el rechazo de la muestra o la no realizacin de una o varias determinaciones. La muestra debe ir debidamente identificada con una etiqueta o escrita a mano y acompaada de una peticin escrita por el facultativo. Se rechaza si carece de identificacin o esta es errnea, tambin si no es remitida o llega sin volante al laboratorio. El tubo debe estar ntegro, sin fracturas o grietas, sin defectos, con vaco, dentro del periodo que indica la fecha de caducidad, con la cantidad adecuada de aditivo o anticoagulante. El tubo debe ser el indicado para el tipo de anlisis con el aditivo o anticoagulante adecuado. Por ejemplo un hemograma no se puede solicitar en un tubo con gelosa, no tiene anticoagulante. Volumen adecuado de sangre en el tubo. El volumen total extrado debe ser suficiente para realizar el anlisis en su totalidad. Para determinar un mayor nmero de parmetros bioqumicos se requiere ms cantidad de sangre. En extracciones peditricas se utilizan microtubos y los analizadores permiten realizar mltiples determinaciones con volmenes pequeos de sangre. La muestra insuficiente debe ser rechazada, pero tambin si se introduce ms cantidad de la adecuada, como ocurre en los tubos de estudio de coagulacin o hemograma si no se respeta la proporcin sangre anticoagulante La sangre debe mezclarse inmediatamente con el anticoagulante una vez que ha entrado en el tubo. Invertir suavemente varias veces o colocarlo en rotores para obtener muestras homogneas, nunca agitar enrgicamente. Cumplir las condiciones de preparacin del paciente ya que la ingesta de alimentos altera numerosos parmetros como la concentracin de glucosa, colesterol o cido rico. Hay estudios que requieren guardar ayuno. En el caso de los nios el tiempo de ayuno se relaciona con el peso y la talla y no debe prolongarse demasiado. A veces la muestra de ser obtenida en un intervalo de tiempo preciso debido a que el paciente toma alguna medicacin que altera el anlisis o hay alguna variacin biolgica que queremos evitar. Evitar la contaminacin de las muestras.

Las muestras contaminadas estn hemodiluidas o presentan substancias que pueden alterar los valores del anlisis. Esto puede ocurrir en diversas situaciones: o Pacientes sometidos a procedimientos teraputicos o diagnsticos antes de realizar la extraccin. P. Ej. Contrastes, quimioterapia, istopos radiactivos. o Pacientes portadores de catteres perifricos y que reciben una solucin IV y en los que se ha realizado una extraccin en el mismo brazo por encima del catter sin interrumpir la administracin y sin esperar al menos dos minutos. O cuando se extrae del mismo catter sin desechar sangre suficiente para lavar la va. Tambin ocurre con las vas centrales y en reservorios heparinizados. Por ello los estudios de coagulacin no deben extraerse del catter, porque incluso cantidades mnimas de heparina pueden alterar resultados. Lo ideal es que se extraigan individualmente mejor que como una parte de la extraccin para varias muestras. o En general y sobre todo con las muestras obtenidas por puncin capilar tener en cuenta si se ha utilizado povidona yodada, porque si la sangre est contaminada pueden encontrarse niveles falsos elevados de potasio, fsforo y cido rico. o Puede existir una contaminacin progresiva de la muestra de un tubo a otro cuando no se respeta el orden de llenado: Tubos o envases estriles para estudio bacteriolgico (Hemocultivos) si los hubiere. Tubos sin aditivos para anlisis del suero. Tubos con citrato para pruebas de coagulacin. Tubos con citrato para VSG. Tubos con EDTA. Resto de los tubos Transporte adecuado de la muestra. El tiempo excesivo o la temperatura inadecuada de la muestra hacen que se deteriore y sea rechazada o aporte datos errneos. Hay determinaciones que han de enviarse de forma inmediata para su anlisis o conservacin en el laboratorio hasta que este se realice, por ejemplo el amonio o las catecolaminas. Otras necesitan refrigerarse inmediatamente despus de la extraccin, por ejemplo la gastrina o actividad de renina. A veces es necesaria la congelacin de la muestra como en la determinacin de ACTH (hormona adenocorticotropa). Hay anlisis como los de las crioglobulinas o el de cido lctico donde la muestra necesita una temperatura de 37 y un transporte rpido al laboratorio.

Con la correcta conservacin y rpido transporte de la muestra se evita formacin de amoniaco, gliclisis, degradacin de las protenas, alteracin de las substancias por la luz y otros procesos que alteran los resultados. Hay otros factores relacionados con el rechazo de la muestra que aun siendo evitables dependen mas de la tcnica del profesional y de la propia muestra que de los protocolos. Muestra hemolizada. La hemlisis es la ruptura de los hemates que libera hemoglobina y otras substancias en el plasma y este adquiere un color entre rosa y rojo. Esto afecta a varias determinaciones por el aumento en el suero de la sustancia a medir por ejemplo sodio o potasio o tambin por interferencia ptica o qumica durante la fase analtica. Hay varias causas: o Relacionadas con la extraccin sangunea: Aguja demasiado fina, hay que elegir calibre 22G,20G. Se aspira demasiado fuerte durante la extraccin. Desplazar el embolo suavemente. Se fuerza el paso de la sangre al tubo a travs de la aguja. Es mejor quitar el tapn y dejar resbalar la sangre por las paredes del tubo. Evitar venas muy pinchadas para no extraer sangre de un hematoma. o Relacionadas con la manipulacin en el laboratorio. La muestra debe centrifugarse antes de que este completamente coagulada si el bote no contiene anticoagulante, como el tubo con gelosa. Hay que centrifugar las muestras a las revoluciones adecuadas y en aparatos bien calibrados. o Relacionados con el paciente: Reaccin antgeno anticuerpo, reaccin postransfusional, anemia hemoltica, enfermedades hepticas. Muestra coagulada. Debido a una extraccin difcil de larga duracin, por no mezclar la sangre en los tubos adecuadamente o por las caractersticas del paciente. Muestra con ictericia. La presencia de bilirrubina en la sangre puede alterar algunas determinaciones pero no se considera error dado que no esta relacionado con la extraccin o el tratamiento de la muestra. Muestra lipemica . Son las que tienen alto contenido en grasa y aspecto lechoso y se pueden presentar en pacientes que no han guardado el ayuno recomendado y con una

ingesta copiosa de alimentos. Tambin en muestras contaminadas de pacientes sometidos a nutricin parenteral. HEMOCULTIVOS Introduccin El cultivo de sangre es el estudio microbiolgico ms importante y utilizado para la determinacin del agente etiolgico de algunas patologas. En las bacteriemias intermitentes el momento idneo para la obtencin de la muestra es lo mas cerca posible del pico febril y despus de aparecer los sntomas como escalofros. Siempre que sea posible obtener la muestra antes de instaurar el tratamiento antibitico. En caso de bacteriemias resistentes al tratamiento como la endocarditis cualquier momento es adecuado para tomar la muestra. Material Los frascos disponibles para Hemocultivos en el servicio de microbiologa son: Pareja de frascos de uso habitual en adultos y nios grandes. Frasco aerobio volumen del inoculo 5 a 10 cc tapn azul. Frasco anaerobio volumen del inoculo 5 a 10 cc tapn rojo.

Frasco nico peditrico volumen del inoculo 1 a 4 cc tapn amarillo. A veces en nios pequeos neonatos, prematuros y lactantes es suficiente con 0.5 cc.

Normas generales El numero de muestras de sangre depende del cuadro clnico. En general se considera idneo la obtencin de tres hemocultivos seriados aerobio y anaerobio con un intervalo de 30 minutos entre las extracciones.

El volumen de sangre a cultivar y el intervalo entre tomas son un factor importante en la determinacin de microorganismos pero a veces estos sern menores por las caractersticas del paciente porque urge instaurar tratamiento antibitico. Inocularemos el volumen recomendado por el fabricante en cada tipo de frasco. Mantener asepsia estricta durante todo el proceso para que los resultados sean fiables, obteniendo cada muestra de lugares de venopuncin diferentes implicando a otro profesional sanitario si es necesario para que la tcnica sea lo ms estril posible. No extraer muestras de Hemocultivos de catteres intravenosos permanentes colocados con anterioridad mas de 48 horas pues existen muchas posibilidades de estn colonizados por bacterias y contaminan la muestra. Se puede obtener la muestra si la extraccin coincide con la insercin del catter con tcnica asptica. Si se obtiene la muestra con jeringa transferir la sangre a los frascos con la misma aguja de la venopuncin. Diferentes estudios demuestran que el cambio de aguja no disminuye la contaminacin de la muestra y aumenta el riesgo de pinchazo accidental. Tambin podemos utilizar el sistema de recogida directa por vaco de doble aguja que nos permite la introduccin de la sangre directamente en los frascos y al no existir manipulacin disminuye el riesgo de contaminacin. Examine los frascos de hemocultivo antes de usarlos por si presentan indicios de deterioro. Deseche aquel frasco en el que se observe turbidez, decoloracin, fugas, tapn hinchado o hundido y en general cualquier alteracin que nos haga sospechar de su buen estado. Desinfecte el tapn de caucho del bote de hemocultivo con antisptico povidona yodada, dilucin de clorhexidina o alcohol 70 y esperar a que se evapore para evitar la entrada en interior del frasco. No es necesario tapar los frascos con gasas y antisptico pues quedan sellados tras la extraccin de la aguja. Llenar los frascos suavemente haciendo resbalar la sangre para que no se produzca hemlisis pero sin demora para evitar que se coagule. Introducir la sangre atravesando el tapn con la aguja en posicin vertical primero el bote anaerobio y despus el aerobio, de forma que las burbujas de aire queden junto al embolo evitando as su paso al frasco. Remita la muestra al laboratorio de microbiologa acompaada de un volante debidamente cumplimentado por el facultativo con el nombre del paciente, servicio, fecha y hora de la extraccin, numero de orden de la muestra 1, 2 o 3 y si el paciente ya esta sometido a terapia antimicrobiana haga constar tipo de antibitico, dosis y hora de la ultima administracin. Identificar las muestras segn protocolo rotulando los frascos o con etiquetas adhesivas.

Utilizar el espacio disponible para la identificacin evitando escribir sobre el cdigo de barras o taparlo con las etiquetas. Esto impide su lectura y retrasa el procesamiento de la muestra. Adems hay sistemas que disponen de cdigos de barras duplicados adhesivos que se extraen de los frascos y se pegan en las peticiones para relacionarlas y que no haya confusin. Enviar al laboratorio de microbiologa lo antes posible para su procesamiento y cada vez que se obtiene una muestra. Si no se pudiera enviar en ese momento o hubiera que esperar las otras tomas seriadas proteger de la luz pues la deteccin de microorganismos en algunos casos es por fluorescencia y podra falsear los resultados. Las muestras deben conservarse incubando en una estufa a 35-38C. GASOMETRA ARTERIAL Introduccin Este anlisis tiene como objetivo medir los valores en condiciones prefijadas de parmetros sanguneos y gases presentes en sangre arterial. Esto ayuda a los profesionales sanitarios a valorar el estado respiratorio del paciente as como el estado de los rganos reguladores del organismo como los pulmones o los riones y el equilibrio cido-base. Los parmetros que se miden normalmente son pH, presin de O2, presin de CO2, concentracin de ion bicarbonato, saturacin de O2 y exceso de bases. El correcto tratamiento de la muestra y la consecucin de unos resultados fiables son de suma importancia ya que los limites tolerados fisiolgicamente son muy estrechos y cualquier desviacin debe ser corregida de inmediato con oxigenoterapia o terapia intravenosa.

Material El material de eleccin es el vidrio o cualquier estructura similar que impide la difusin de gases a travs de la jeringa. En neonatos, prematuros, lactantes y nios muy pequeos se utilizan mas los capilares de vidrio. El anticoagulante mas utilizado es la heparina sdica ya que el oxalato tiende a aumentar el pH y el citrato y EDTA tienden a disminuirlo. Con una cantidad mnima de heparina sdica se anticoagula proporcionalmente un mayor volumen de sangre con un mnimo efecto sobre los resultados de la gasometra, pero su exceso puede acidificar en gran medida la muestra y aumentar el pH. Este problema se corrige con jeringas de polmero plstico con aguja 22G, capacidad para 3 cc de sangre y como conservante 200 UI de heparina de litio en polvo. Estas jeringas estn disponibles en la mayora de los servicios hospitalarios y por ello las extracciones en jeringas de plstico estndar deben ser desechadas ya que tienen que prepararse con 0.1 cc de heparina sdica y esta operacin es delicada. La excesiva

dilucin y la difusin de gases a travs de la jeringa altera substancialmente los valores de la gasometra.

Normas generales Enviar la muestra correctamente identificada acompaada de una peticin rellenada por el facultativo segn el protocolo y especificando en que condiciones se haya el paciente en el momento de la extraccin: basal, oxigenoterapia, ventilacin mecnica, tipo y concentracin de O2 administrada. La presencia de burbujas de aire en la jeringa altera o invalida los resultados siendo estas muestras rechazadas por riesgo de avera del gasmetro. Si la muestra recin extrada con jeringa contiene aire hay que expulsarlo antes de 20 segundos y la jeringa debe quedar hermticamente cerrada con un tapn eliminando la aguja. Cuanto ms pequeas son las burbujas mayor ser la superficie de contacto con la sangre y como consecuencia, ms rpido vara la presin de O2. Durante la extraccin es importante dejar que el pulso contribuya al llenado de la jeringa ya que de este modo se reduce la presencia de aire. Para purgar la jeringa colquela en posicin vertical y golpela suavemente con el dedo empujando el embolo expulsando el aire y un poco de sangre que puede retirar con una gasa. Si la muestra se recoge con capilar heparinizado y contiene aire, este y la heparina sobrante sern desplazados al exterior por la sangre y despus se sellaran ambos extremos. Ha de admitirse el error incluso obviando el inherente al analizador de gases ya que desde los primeros momentos de la extraccin el aumento de unos valores y la disminucin de otros es inevitable. A esto debemos unir que en el medio hospitalario el transporte al laboratorio se demora tanto como para desconfiar de los resultados si las muestras no han sido conservadas a temperatura optima y transportadas convenientemente. Remita inmediatamente la muestra coordinando con el laboratorio para que no coincida el envo con el momento de la calibracin. La muestra obtenida en jeringa debe ser enviada para su anlisis antes de 15 minutos despus de su obtencin si va a permanecer a temperatura ambiente. A partir de 27 C los cambios en el pH son ostensibles. Si la muestra se obtiene en capilar el traslado debe ser inmediato a temperatura ambiente. Basta con sellar

los extremos con material tipo plastilina o llevarlo con guantes entre los dedos ndice y pulgar. Hay factores que se relacionan con el paciente que pueden causar resultados errneos en la medicin de gases. o Si no registramos o tenemos en cuenta las condiciones en que la muestra ha sido obtenida: cuando el nio se acaba de despertar o esta llorando, en cuyo caso hiperventila. o Cuando el paciente hipoventila o esta mal oxigenado porque ha dejado de recibir aporte de O2 por accidente, inmediatamente despus de la aspiracin de secreciones o durante el destete del respirador. o Cuando cambian las condiciones del paciente y esto no se refleja en la peticin: 20-30 minutos tras el inicio de la oxigenoterapia o un cambio en la concentracin de O2 y tras un cambio de parmetros de la ventilacin asistida. En nios muy pequeos, neonatos, prematuros y lactantes donde se obtiene una muestra de sangre capilar del taln este debe calentarse para que se arterialice la sangre. Es necesario tenerlo en cuenta porque los valores de gasometra pueden diferir de las muestras de sangre arterial de nios mayores. NORMAS GENERALES DE TRATAMIENTO DE MUESTRAS DE ORINA Introduccin La orina es uno de los fluidos resultantes del metabolismo y su anlisis aporta mucha informacin de forma rpida y econmica. Su obtencin es relativamente fcil, lo que hace que sea una prueba fundamental al alcance de cualquier servicio sanitario y est muy extendida. El estudio de la orina es muy til en el diagnstico de la enfermedad renal y del tracto urinario y en la deteccin de enfermedades metablicas o sistmicas no relacionadas directamente con el sistema urinario. Las muestras de orina se analizan de varias maneras y con diversos objetivos: Exmenes sistemticos de sustancias anormales y de sedimento, con tiras reactivas, urocultivos, triage de drogas de abuso y medicamentos y anlisis de orina 12-24 horas. Adems al ser una biopsia lquida de los tejidos del tracto urinario nos aporta datos anatomopatolgicos. ANLISIS SISTEMTICO DE ORINA Cuando obtenemos una muestra de orina primero realizamos un examen macroscpico directo del color, turbidez olor, que en algunos casos nos oriente sobre su composicin y alteracin. Esto se complementa con el anlisis sistemtico de orina, sustancias anormales y sedimento de orina, que consiste en la medicin por mtodos fsicos y qumicos de diferentes parmetros para diagnosticar la presencia de infecciones urinarias,

enfermedades renales y otras enfermedades generales que producen metabolitos en orina. Tambin para evaluar la funcin renal de las diferentes hormonas y situacin de la regulacin homeostsica. La orina normalmente est compuesta por urea, creatinina, sodio, potasio y cloro. El estudio de anormales detecta su exceso o no, y la presencia de otras como glucosa, hemoglobina, bilirrubina, leucocitos, cetonas, nitritos, protenas y densidad alta de solutos que determinan diversas alteraciones. El estudio del sedimento de orina se hace al microscopio una vez centrifugada. En la orina normal no deben aparecer bacterias, cilindros, cristales, grasas, hemates, leucocitos, clulas epiteliales, clulas tubulares renales. El hallazgo de estas substancias es patolgico. Material Envase de plstico irrompible, boca ancha, seco, limpio o estril, hermtico con tapn de rosca, capacidad 50 cc o tubos de boca estrecha capacidad 10 cc.

Tiras reactivas para anlisis de orina. Este mtodo nos permite un anlisis de algunos componentes de la orina rpido, sencillo y econmico a veces previo a otros ms especficos. Consiste en unas tiras reactivas que se sumergen en la orina y producen una reaccin qumica colorimtrica que describe la alteracin de las diferentes substancias. A veces es suficiente con unas gotas de orina y es ideal cuando la muestra es escasa. Este sistema tiene una fiabilidad del 99% a la hora de rastrear hemates, nitritos, aumento de la densidad, pH, glucosa, protenas, bilirrubina, hemoglobina y cuerpos cetnicos. Los leucocitos se leen a los dos minutos de iniciada la prueba.

Normas generales El recipiente de la muestra deber ir debidamente identificado y acompaado de la peticin rellenada por el facultativo. Las muestras deben estar libres de contaminacin fecal o de papel higinico. Si hay posibilidad de contaminacin con secrecin vaginal o menstruacin puede ser necesario taponar la vagina o posponer la prueba. La contaminacin por bacterias alcaliniza la orina y provoca turbidez y cambios de color y olor. Tener en cuenta que hay medicamentos como la rifampicina que modifican el color y olor de la orina y esto no debe ser tomado como anormal. El volumen de orina necesario depende del numero de pruebas que se van a realizar en el laboratorio. En general bastan 2 cc en nios pequeos pero es recomendable obtener un volumen superior a 15 cc. Si el volumen es inferior se puede hacer un examen con tiras reactivas. Entre 3 y 10 cc ya se puede centrifugar para estudiar el sedimento. En general una orina mas concentrada es preferible a una mas diluida para el anlisis, por tanto si el anlisis no es urgente la primera orina de la maana es la mas adecuada ya que el paciente no ha bebido agua durante las horas del sueo. Si la orina se recoge por miccin espontnea desechar el primer chorro y recoger la orina intermedia. Para recoger muestras de lactantes, neonatos, prematuros y nios pequeos que no controlan sus esfnteres se dispone de bolsas colectoras de orina con anillo adhesivo que rodea los genitales. Si no se obtiene la orina en 20-30 minutos, la bolsa se despega o se ensucia hay que cambiarla. Si estos mtodos son intiles la muestra se obtendr por sondaje vesical continuo o intermitente. A veces se utilizan tcnicas mas agresivas como la aspiracin suprapbica o cateterizacin ureteral. Si el exterior del recipiente se contamina limpiarlo para evitar la transferencia de grmenes a los dems. Realizar el anlisis durante los 15 minutos posteriores a la obtencin de la muestra ya que los eritrocitos, leucocitos y cilindros se descomponen cuando la muestra permanece varias horas a temperatura ambiente y varia la composicin de la orina. Por ello las muestras deben refrigerarse si no pueden estudiarse de

inmediato. Si se utilizan tiras reactivas es necesario que la orina este a temperatura ambiente, nunca refrigerada. A veces es necesario no exponer la muestra a la luz porque algunas substancias se alteran como la bilirrubina que disminuye. Cubrir el bote con papel de aluminio. ORINA DE 24 HORAS PARA ANLISIS CUANTITATIVO Introduccin La concentracin de la orina varia en un periodo de 24 horas y por ello solutos como hormonas, clulas, protenas y electrolitos aparecen en mayor o menor cantidad en determinadas horas del da dependiendo de la ingesta y actividad del paciente entre otros factores. La mejor manera de realizar un estudio fiable cuantitativo de estas substancias es analizar muestras recogidas durante 12-24 horas como en el caso de patologas nefrolgicas donde es necesario conocer la funcin renal y establecer que substancias se eliminan y como o en el estudio de la formacin de clculos renales. Material Recipientes de plstico con capacidad suficiente 1000-2000 cc, limpios, estriles y secos, hermticos con tapn de rosca, irrompibles, preferiblemente opacos. Tambin podemos cubrir con papel de aluminio si es preciso proteger la muestra de la luz.

Normas generales En el periodo de recogida unas horas antes hay que restringir la ingestin de lquidos y evitar la ingesta de alcohol, ciertos alimentos y frmacos. Se indica al paciente que vace la vejiga a las 8 de la maana al levantarse y deseche esta primera orina. Todas las dems muestras deben recogerse sin perder ninguna incluso la eliminada a las 8 de la maana del da siguiente cuando termina la prueba. Cada cantidad de orina eliminada se recoge en un recipiente pequeo limpio o estril y se vaca en el contenedor grande. A continuacin se mezcla la orina del contenedor con una varilla y se extrae una muestra de unos 50 cc que se enva al laboratorio previamente identificada y con un volante cumplimentado por el facultativo segn protocolo que indique adems el total de la orina recogida. En caso de orina perdida, extrada del contenedor o desechada por error y cuando se olvida recolectar parcial o totalmente alguna muestra debe ser registrado y debemos plantearnos iniciar de nuevo el estudio sobre todo en nios.

El transporte al laboratorio ser inmediato. Si no disponemos de conservante se guardara el frasco en el refrigerador hasta su traslado. Lo ideal es refrigerar a 4C en nevera todo el volumen de la muestra durante todo el periodo de recogida. Esto impedir la descomposicin bacteriana. La congelacin es til para retrasar la perdida de substancias labiles o cuando se quiera fraccionar la muestra para su estudio. Muchos protocolos necesitan que aadamos conservantes qumicos y agentes antibacterianos y antimicticos a los recipientes antes de comenzar la recogida. El fin de estos es asegurar la integridad de la muestra. Estas substancias disminuyen la oxidacin y el crecimiento bacteriano y evitan cambios en el pH mantenindolo cido. Los mas utilizados son el cido brico, benzoico, los fenoles, timol, tolueno, formol y compuesto de mercurio. Hay determinaciones que requieren instrucciones especiales para la recogida de orina de 24 horas, por ejemplo el cido 5-hidroxiindalactico donde no se pueden comer aguacates, ciruelas, nueces y berenjenas, no administrar jarabes para la tos que contengan guayacolato de glicerino y paracetamol 24 horas antes de la prueba y durante su obtencin. UROCULTIVO Introduccin El cultivo de orina es un anlisis para determinar si existe o no infeccin de orina y en caso que exista identificar con exactitud el germen responsable y cual es el antibitico mas adecuado. A veces la infeccin ya esta evidenciada por el anlisis de anormales con presencia de nitritos y de leucocitos y presencia de bacterias en el sedimento y el cultivo nos sirve de confirmacin. Consiste en sembrar la muestra de orina recogida con tcnica estril en un medio de cultivo y esperar a que crezcan las bacterias. No es una prueba inmediata y a veces hay que esperar das incluso semanas como el cultivo de Lowestein para el diagnostico de la tuberculosis. Con un buen recuento de colonias se confirma el cultivo positivo identificando exactamente el microorganismo y con el antibiograma sabemos cual es el antibitico al que no tiene resistencias y va a eliminarlo.

Material Envase de plstico irrompible, estril, de boca ancha, seco, hermtico con tapn de rosca y capacidad 50 cc.

Normas generales Identificar la muestra correctamente segn protocolo. Se debe acompaar de un volante debidamente rellenado por el facultativo. La muestra debe obtenerse antes de administrar tratamiento antibitico. Si ya se ha iniciado hacer constar en la peticin tipo, dosis y hora de la ultima toma. Utilizar siempre que sea posible la primera miccin de la maana porque las bacterias deben incubarse en la vejiga al menos 3-4 horas antes de obtener un recuento de colonias de calidad con significado diagnostico. Extremar la asepsia evitando la contaminacin fecal, vaginal, menstrual o partculas de papel higinico. Evitar en lo posible que la muestra tenga contacto con los genitales externos. Normalmente se encuentran bacterias en la porcin distal de la uretra y el perineo. Estos microorganismos son contaminantes de la orina. Lavar los genitales con agua y jabn sin utilizar antispticos de dentro a fuera. Desechar la primera parte de la miccin y recoger la orina que se emite a continuacin directamente en un frasco estril. No tocar el interior del frasco ni del tapn. En nios mayores la orina se recoge igual que en los adultos bajo supervisin del profesional. En nios pequeos, neonatos, prematuros, lactantes se utiliza una bolsa colectora de orina estril con anillo adhesivo que se coloca despus de lavar los genitales. Si no se consigue orina en 20-30 minutos, se despega la bolsa o se ensucia, hay que sustituirla por otra. Cuando las circunstancias no nos permiten obtener la orina por miccin espontnea recurriremos al sondaje vesical continuo o intermitente obteniendo la orina con tcnica asptica evitando llevar una infeccin donde antes no la haba. Si el sondaje es continuo y el catter vesical lleva instalado mas de 24 - 48 horas puede estar colonizado por mltiples cepas bacterianas y la prueba se falsea. La aspiracin de orina por puncin suprapbica evita que esta se contamine por los grmenes de la uretra y perineales, adems evita la contaminacin inherente al sondaje vesical. Esta indicada cuando hay dificultad para obtener la muestra, cuando hay sospecha de infeccin por anaerobios en pacientes peditricos y

cuando existe contaminacin o resultados dudosos despus de tres urocultivos realizados en las mejores condiciones. Enviar rpidamente la muestra al laboratorio ya que la orina es un excelente caldo de cultivo que favorece el desarrollo de los grmenes y falsea el recuento. Es necesario que el cultivo se realice dentro de la primera hora posterior a su recoleccin y si esto no es posible debe mantenerse la muestra refrigerada a 4 C hasta el momento de su procesamiento durante un periodo no superior a 24 horas. Nunca han de emplearse conservantes convencionales en las muestras para estudio bacteriolgico. DETECCIN DE DROGAS DE ABUSO Y MEDICAMENTOS EN ORINA. TRIAGE. Consiste en la deteccin en orina de sustancias especificas cuya presencia y continua eliminacin en el tiempo determina altas concentraciones de las mismas. En el paciente peditrico se puede presentar intoxicacin accidental y consumo voluntario o inducido de estas sustancias. El mtodo triage rastrea tetrahidrocarbaminol, cocana, barbitricos, benzodiacepinas, metadona, antidepresivos tricclicos, opiceos y anfetamina. Consiste en una placa con un deposito donde se mezcla la orina y los reactivos. Extendemos la muestra sobre un tampn donde aparece los nombres de las sustancias a determinar y un control positivo de la prueba. En unos minutos aparecer una lnea de positividad en la sustancia detectada y en el control.

MUESTRAS DE ORINA EN ANATOMA PATOLGICA. Consiste en el estudio de las clulas que se eliminan por la orina sobre todo aquellas malignas procedentes de tumores, lesiones o malformaciones de la va urinaria desde el rin hasta la vejiga y uretra. Se recoge la primera miccin matinal para obtener clulas frescas y cilindros durante tres das. NORMAS GENERALES DE TRATAMIENTO DE MUESTRAS DE HECES Introduccin El anlisis de las heces abarca el estudio macroscpico y microscpico de sustancias anormales, el coprocultivo para determinar presencia de microorganismos patgenos, el

estudio parasitolgico de las heces, sangre oculta y substancias anormales en heces de 24 horas. ESTUDIO COPROLGICO El examen macroscpico consiste en la observacin directa de las caractersticas de la muestra. Se examina la cantidad, color, olor, forma y consistencia as como fragmentos de fcula, grasas no digeridas, moco, pus, sangre, etc. que pueden variar segn la dieta, medicacin o proceso patolgico del paciente. Por ejemplo, en las hemorragias la sangre digerida produce heces pastosas negras malolientes llamadas melenas. El examen microscpico de las heces determina la presencia de sustancias como protenas de la carne y carbohidratos como el almidn por un defecto en la digestin o trnsito acelerado a travs del colon. Si aparecen leucocitos es muy til en el diagnostico diferencial de la diarrea de origen infeccioso. Tambin detecta pigmentos biliares anormales como la bilirrubina, enzimas como la tripsina, coproporfirinas y podemos determinar el pH. Material Envase estril o limpio capacidad 50 cc, boca ancha, de plstico irrompible, hermtico con tapn de rosca, con o sin medio de transporte. A veces es preciso que sea opaco para proteger de la luz o lo cubrimos con papel de aluminio. Depresor de madera.

Normas generales Envase correctamente identificado segn protocolo acompaado de peticin rellenada por el facultativo. Son suficientes cantidades pequeas de heces, en general 2.5cc de heces formadas o 15-30 cc de heces liquidas. La muestra se traslada al frasco con depresor o tira de cartn. Evitar la contaminacin con orina, sangre, agua o papel higinico. En nios pequeos aislar los genitales con bolsa colectora de orina. No llenar el envase demasiado. Liberar el gas aflojando la tapa. Evitar contaminar el exterior del envase con la muestra y vigilar perdidas, derrames o roturas durante el transporte.

Las muestras deben ser remitidas lo antes posible al laboratorio para su procesamiento en las 1-2 horas siguientes a la recogida y si esto no es posible guardar en nevera. En funcin del tipo de anlisis el paciente a veces deber seguir una dieta determinada y evitar o restringir algunos alimentos o frmacos previa consulta medica los das previos a la toma de la muestra. Solicite instrucciones al laboratorio. Tras la obtencin de la muestra reanudar la dieta habitual y el tratamiento. Evitar la ingestin de antidiarreicos o catrticos as como aceites minerales para lubricar las heces porque su composicin altera los resultados. Hay pruebas en las que se precisa proteger la muestra de la luz como en la determinacin de coproporfirinas y cubriremos el frasco con papel de aluminio. COPROCULTIVO Introduccin Estudio bacteriolgico de las heces cuyo objeto es evidenciar la existencia de un germen no habitual por microscopia directa o bien por cultivo especifico.

Material Envase estril de plstico irrompible, capacidad 50 cc, estril, de boca ancha y tapn de rosca, hermtico. Depresor de madera estril. Escobilln estril con medio de transporte.

Normas generales Envase correctamente identificado segn protocolo acompaado de peticin rellenada por el facultativo. Siempre que sea posible se tomaran las muestras antes de administrar cualquier tratamiento antibitico o antisptico intestinal. En caso contrario se har constar en la peticin tipo de antibitico, dosis y hora de la ltima toma. Tomar una pequea porcin de heces recin emitidas eligiendo, si las hay, las zonas mucosas, hemorrgicas o purulentas. No cultivar muestras de heces duras o compactas. Introducir la muestra con un depresor estril evitando tocar el interior del frasco o la tapa. Evitar la contaminacin con orina y otras substancias. En nios pequeos aislar los genitales con bolsa colectora de orina. No llenar el envase demasiado. Liberar el gas aflojando la tapa.

Evitar contaminar el exterior del frasco con la muestra y vigilar perdidas, derrames o roturas en el transporte. Si la muestra es tomada con escobilln este debe ser estril con medio de transporte. Se introducir a travs de la ampolla rectal apareciendo claramente manchado de heces. No es valido el simple frotado de la regin anal. Enviar siempre dos escobillones tomados adecuadamente. En estudios con muestras diarreicas no utilizar escobilln y enve un solo frasco. Una vez obtenida la muestra enviar inmediatamente al laboratorio de bacteriologa en las 1-2 horas siguientes. Si no es posible, conservar en nevera. Si se conserva mas de 4-5 horas en nevera pueden obtenerse falsos negativos como en la shigellosis y algunas salmonellas. Si se estn administrando antibiticos, el cultivo es negativo y el cuadro clnico no cede hay que suspender el tratamiento dos o tres das y volver a enviar una nueva muestra. Es frecuente que en algunas muestras no se asle el germen patgeno responsable por lo que deben enviarse al laboratorio tres muestras correspondientes a das distintos o al menos de tres deposiciones diferentes. ESTUDIO DE SANGRE EN HECES Introduccin La sangre procedente del estomago o de las partes altas del intestino suele llegar a las heces digerida recibiendo el nombre de sangre oculta o hemorragia oculta en heces. Este estudio es muy til cuando se sospecha hemorragia digestiva subclnica que no que no cursa visiblemente con melenas. Este anlisis consiste en el examen qumico del pigmento hemtico de las deposiciones con tintura de guayaco. Actualmente se comercializan test en tabletas, tiras de papel y otros soportes que utilizan la reaccin de guayaco. Seguir las instrucciones del fabricante. Existen otras pruebas como la de la bencidina y el piramidn que verifican la existencia de sangrado y su magnitud. Si la muestra se enva al laboratorio debe ir debidamente identificada acompaada del volante de la solicitud cumplimentado por el facultativo.

Material Envase estril o limpio, boca ancha, de plstico irrompible, boca ancha, capacidad 50 cc, hermtico con tapn de rosca. Depresor de madera. Normas generales Hay que tener al paciente tres das a dieta rigurosa libre de carne, embutidos y otros productos que contengan hemoglobina o un exceso de clorofila como los vegetales verdes tipo espinacas. Se puede comer carbohidratos como patatas, cebolla, arroz, leche y pan. Se debe suprimir la medicacin que contenga hierro, nitritos, bismuto o cobre.

Conviene repetir el examen varias veces en das distintos tanto para cerciorarse de la negatividad como para comprobar en su caso el carcter crnico de la hemorragia. Los resultados negativos no excluyen el sangrado ya que este puede ser intermitente por lo que se aconseja la recogida de tres muestras procedentes de tres movimientos intestinales distintos. ESTUDIO DE HECES DE 24 HORAS Introduccin Este estudio determina la excrecin fecal de una sustancia cualquiera en 24 horas, como el nitrgeno y las grasas fecales, que en exceso puede obedecer a un transito acelerado, dficit enzimtico, dficit de absorcin u obstruccin del conducto biliar. Con este estudio se pueden diagnosticar procesos como colitis ulcerosas y sndromes de mala absorcin.

Material Envase de plstico irrompible, capacidad 1000-2000 cc, hermtico con tapn de rosca, seco y limpio sin conservante.

Normas generales Muestra debidamente identificada segn protocolo acompaada de peticin rellenada por el facultativo. Se guardan todas las deposiciones que el paciente realice en un periodo de 24 horas. Remitir deposicin completa incluyendo sangre, moco, pus, etc. Esta cantidad de heces no se corresponde con la cantidad de comida ingerida en el mismo periodo de tiempo y que el aparato gastrointestinal no se vaca a voluntad. Por ello para que el estudio sea ms exacto se guardaran las heces durante tres das y se harn los clculos sobre la muestra completa dividiendo entre tres. La exactitud de este mtodo puede aumentarse haciendo ingerir al paciente un colorante de carmn o carbn vegetal antes del periodo de recogida empezando esta con la aparicin del colorante hasta que ya no aparezca en las heces. En general debe seguirse la alimentacin habitual siempre que contenga grasas, protenas y almidn. Si falta algn componente de la dieta debe aadirse para que

sea equilibrada. En otras determinaciones debern restringirse algunos alimentos o frmacos. Por ejemplo en la investigacin cuantitativa de grasa en heces el paciente deber llevar una dieta estricta durante seis das exenta de grasas exceptuando una yema de huevo cocida y tres cucharadas rasas de mantequilla al da en el nio. La muestra de heces de 24 horas se debe mantener refrigerada en nevera a 4 C durante todo el periodo de recogida. La muestra para determinacin de grasa en heces se mantendr congelada hasta su envo a laboratorio. El anlisis se realiza dentro de las 12 horas siguientes a la ultima deposicin. EXAMEN PARASICOLGICO DE LAS HECES Introduccin Los parsitos se alojan en el aparato digestivo sobre todo en el intestino y una porcin de ellos, las larvas o los huevos son eliminados con las heces, de ah la importancia de esta muestra en el estudio parasitolgico. Los parsitos mas frecuentes en las heces son de tres tipos: helmintos, gusanos tipo scaris o tenia. protozoos, como la giardia lambia y las amebas. oxiuros o lombrices, muy frecuentes en nios pequeos. Los signos de enfermedad por parsitos son muy variados por lo que el medico solicitar el estudio en base a la sospecha clnica y que la tcnica es diferente segn el parsito a estudiar. Es aconsejable realizar varios anlisis simultneamente para aumentar la fiabilidad. Primero realizamos el examen macroscpico de la muestra de heces en el cual observamos directamente parsitos enteros si los hubiere y la consistencia. A continuacin en el examen microscpico se buscan huevos de helmintos y quistes de protozoos mediante tcnicas de concentracin por flotacin o sedimentacin, tricroma, cuantificacin de huevos, tinciones permanentes, etc. Material Envase estril o limpio, de plstico irrompible, boca ancha, hermtico con tapn de rosca. A veces hay que aadir conservante o medio de transporte. Normas generales Muestra debidamente identificada acompaada de solicitud de estudio rellenada por el facultativo. La cantidad de parsito que se elimina en cada deposicin puede ser variable. Si estos no se encuentran en gran nmero en el intestino tambin sern escasos en las muestras, por ello no siempre que el resultado sea negativo se puede descartar la existencia de parsitos.

Normalmente para descartarlos debe repetirse el examen al menos tres veces en tres das distintos con intervalos entre tomas de unos cinco das. Si son todos negativos se puede afirmar que no hay parsitos. Tres das antes de la recogida someter al paciente a una dieta donde se eliminan o restringen los hidratos de carbono sobre todo vegetales y fculas. No tomar medicamentos a base de bismuto o carbn pues las muestras son muy opacas y no se analizan bien. Los medios de contraste como sales de bario y los antibiticos pueden disminuir la cantidad de parsitos en las heces sobre todo los protozoos. Las heces no deben calentarse porque se acelera la destruccin del parsito. Hay que mantenerlas a temperatura ambiente. La muestra debe enviarse inmediatamente al laboratorio. Si no es posible fijarla con un conservante tipo alcohol polivinlico o fenol a temperatura ambiente. Si las heces son diarreicas la muestra debe enviarse sin demora antes de que se enfre. Si las heces son pastosas o con huevos o larvas su envo no es tan urgente. En el caso de muestras de protozoos procesar antes de 30 minutos despus de la recogida. Si el paciente elimina gusanos enviar en un frasco con suero salino. En el caso de oxiuros tipo enterovirus vermicularis las hembras ponen los huevos en los pliegues perianales produciendo picor en la zona. Estos huevos no aparecen en las heces y su anlisis no sirve para el diagnstico. En estos casos realizamos el test de Graham que consiste en presionar con una cinta de celofn adhesivo sujeta por un depresor en la zona perianal sin sobrepasar el esfnter anal, a primera hora de la maana sin aseo previo y antes de defecar. NORMAS GENERALES DE TRATAMIENTO DE MUESTRAS DE ESPUTO Introduccin El esputo es una mezcla de secreciones pulmonares y bronquiales compuesta de plasma, mucina, agua y electrolitos y las partculas que se adhieren a su paso por la va area como los restos celulares, secreciones bronquiales y salivales y la flora bacteriana normal de la cavidad oral. Se expulsa con la tos profunda y puede infectarse, teirse de sangre o contener clulas anormales que puedan llevar al diagnostico de una patologa. El objetivo del examen de esputo es analizar la mucosidad a fin de realizar un estudio citolgico o de determinar la presencia de microorganismos patgenos en el cultivo o parasitosis.

EXAMEN MACROSCOPICO Y MICROSCPICO DEL ESPUTO Para el examen macroscpico del esputo la muestra debe transferirse a una placa de Petri esterilizada colocada sobre un fondo oscuro. Consiste en la observacin directa de la consistencia y aspecto. En las muestras normales el aspecto es claro y acuoso y cualquier opacidad procede de material celular.

Hay enfermedades especificas que presentan aspectos caractersticos, por ejemplo en el edema pulmonar el esputo es seroso, espumoso y teido de sangre y en los procesos neumnicos el color amarillo indica pus y clulas epiteliales. En los esputos normales y patolgicos no se detecta ningn olor pero en enfermedades como abscesos pulmonares y cuando hay pseudomonas aparecen olores ptridos. Una vez realizado el examen macroscpico todas las partculas sospechosas se transfieren a un portaobjetos limpio para su examen microscpico. Cualquier sustancia, clula o bacteria puede observarse mejor mediante tincin. El resto de la muestra se cultiva. CULTIVO DE ESPUTO El cultivo de esputo identifica el agente causante de las infecciones en las vas areas inferiores: traquea, bronquios y pulmn. Sirve para confirmar el diagnostico de infeccin, saber de que germen se trata y cual es el antibitico mas adecuado para su tratamiento. Es muy til cuando la infeccin no ha respondido al tratamiento inicialmente pautado, se esta convirtiendo en un proceso muy largo o se trata de pacientes inmunodeprimidos. Una vez obtenida la muestra realizaremos una serie de tcnicas dirigidas a detectar un germen determinado segn la sospecha clnica. Analizar el frotis de una muestra pequea de esputo al microscopio. Hacer una tincin de Gram para distinguir grmenes Gram + de los Gram lo cual supone una valiosa informacin sobre los antibiticos ms idneos en un principio. Hacer una tincin BAAR baciloscopia cido alcohol resistente especial para detectar micobacterias en especia el bacilo causante de la tuberculosis. Se recomienda recoger esputo seriado durante tres das consecutivos y refrigerar. El resto de la muestra se siembra en varios medios de cultivo segn el germen del que se sospeche con nutrientes suficientes a una temperatura adecuada y se deja incubar un tiempo variable. Despus se procede a su lectura en el microscopio. Se observa cada 24 horas y solo si al cabo de seis semanas no ha crecido nada se considera que es negativo. Esto quiere decir que el paciente puede estar varias semanas sin un resultado definitivo. Normalmente si hay grmenes suelen crecer y dar un resultado positivo, sin embargo a veces a pesar de que existen microorganismos el resultado es negativo. Esto se debe a que algunos son extremadamente sensibles y mueren en cuanto salen del organismo por lo que cuando se procede a la siembra en laboratorio ya es tarde y no crece nada. En otras ocasiones el resultado se demora de manera importante. Esto ocurre porque todos los grmenes no crecen con la misma velocidad y se requiere un numero determinado de ellos para que se detecte el positivo. A veces pueden necesitarse varias semanas para obtener un resultado. Lo normal son 7-15 das.

Cuando crece algn germen patgeno se realiza el antibiograma que consiste en exponer los grmenes a diversos antibiticos y ver a cuales son resistentes y cuales van a hacer que no crezca o lo haga mas lentamente. As sabemos que tratamiento es ms efectivo. Con el estudio parasitolgico del esputo podemos encontrar fases larvarias de scaris, estrongyloides, amebas, huevos de gusanos criptosporidium. Material Bote de plstico irrompible, boca ancha, capacidad mxima 50 cc, hermtico con tapn de rosca, estril, seco y desechable.

Puede estar adaptado a una sonda de aspiracin controlada y a una conexin de aspirador.

Placas de Petri.

Normas generales Muestra identificada correctamente con nombre completo del paciente, servicio, fecha y hora de la obtencin. Debe ir acompaada de una peticin rellenada por el facultativo segn protocolo, donde adems reflejaremos tipo de muestra y estudio que se solicita.

La muestra para cultivo debe obtenerse antes de iniciar tratamiento antibitico si es posible. En caso de haber comenzado se debe hacer constar en la peticin tipo de antibitico, dosis y hora de la ultima administracin. La colaboracin del paciente es esencial para obtener una muestra de calidad para el estudio. En los nios grandes que no colaboran se puede estimular la tos y poner el bote o una placa de Petri junto a la boca. En los nios pequeos, neonatos, prematuros y lactantes se opta por la recogida con aspiracin controlada. La recogida de la muestra se har con tcnica lo ms asptica posible sin tocar el interior del recipiente ni la parte interna de la tapa. El esputo se obtiene tras expectoracin profunda. En posicin erguida de pie o sentado hacer dos o tres respiraciones profundas y lentas que ayudan a provocar la tos. As se consigue obtener secreciones del tracto respiratorio inferior. Repetirlo tantas veces como sea necesario para obtener la cantidad deseada. Las muestras de esputo se contaminan con saliva, secreciones nasofaringeas, bacterias, alimentos, pasta de dientes, etc. La obtencin en ayunas y el preenjuague de la boca con agua sin antisptico eliminara la mayora de estos contaminantes sin afectar al resultado del anlisis. La recogida debe ser preferentemente matinal. Las secreciones bronquiales se acumulan durante el sueo por lo que puede ser ms sencillo para el paciente obtener la muestra a primera hora de la maana. Otro momento adecuado para hacerlo es tras la administracin de un broncodilatador o una sesin de clapping y drenaje postural. Si las mucosidades son escasas o densas y cuando no podemos obtener una expectoracin espontnea se puede inducir el esputo mediante el aumento del flujo de la secrecin bronquial y estimulacin de la tos. Se puede administrar jarabe expectorante sin antibitico y nebulizaciones de aerosoles de suero fisiolgico hipertnico estril a 37 C. Puede estar contraindicado administrar estos aerosoles a pacientes asmticos o con bronquitis porque hay riesgo de broncoespasmo. Si es imprescindible tomar la muestra de secreciones del la va respiratoria baja y los mtodos reseados no son efectivos existen diversas tcnicas ms agresivas encaminadas a la obtencin del esputo: aspiracin traqueal a travs de boca, nariz, tubo orotraqueal y traqueostomia, aspiracin a travs de broncoscopio, aspiracin transtraqueal y transtoracica. Estas muestras son mas apropiadas que las anteriores para identificar el agente etiolgico de la enfermedad porque se obtiene en condiciones de asepsia. Utilice estos mtodos cuando la infeccin no esta siendo controlada o cuando se sospeche infeccin por anaerobios, en pacientes difciles, agitados, comatosos o intubados. Tras la obtencin de la muestra debe remitirse inmediatamente al laboratorio. Si no fuese posible puede conservarse en frigorfico a 4 C durante varias horas

aunque no es aconsejable el cultivo de muestras mas all de las 24 horas despus de su recogida. NORMAS GENERALES DE TRATAMIENTO DE MUESTRAS DE LQUIDO CEFALORAQUIDEO (LCR) Introduccin El LCR baa el cerebro y la medula espinal y amortigua junto con las meninges los traumatismos que pueda sufrir este tejido. Es el vehculo de transporte de los nutrientes al cerebro, elimina los desechos y compensa los cambios en el volumen y presin de la sangre intracraneal. Cuando se produce cualquier alteracin tanto en las meninges como en el sistema nervioso central se liberan substancias o clulas anormales en el LCR de modo que obteniendo unas gotas podemos estudiar estas estructuras y generalmente aportan la informacin suficiente para llegar al diagnostico preciso de diversas patologas como infecciones menngeas, enfermedades desmielinizantes del sistema nervioso central y perifrico. Adems podemos medir la presin de salida del LCR muy til por ejemplo para confirmar hemorragia. El examen del LCR consiste en el estudio macroscpico, conteo de clulas, cultivo, estudio bioqumico con determinacin de protenas totales, cloruros y glutamina, estudio de hongos, serologa infecciosa, citologa, inmunofijacin. EXAMEN MACROSCOPICO DEL LCR El aspecto macroscpico del LCR es claro y transparente. El cambio de color y opacidad denotan alteraciones como presencia de leucocitos que enturbian la muestra, sangre mas o menos hemolizada que da un color rosado o ictrido por una hemorragia reciente o de varias horas de evolucin. Protenas y coagulacin espontnea son indicativas de obstruccin por encima de la zona de puncin. RECUENTO CELULAR DEL LCR El conteo de clulas del LCR es una prueba que mide la cantidad de hemates y leucocitos y puede ayudar a diagnosticar hemorragias, infecciones, tumores, inflamaciones, abscesos y muerte por infarto de un rea del sistema nervioso central. Si se encuentran hemates puede ser indicio de hemorragia pero tambin puede ser ocasionado por una puncin lumbar traumtica. Se procede al recuento de los hemates en los tres tubos y si estn en cantidad decreciente apoyan un origen puncional de la sangre. Tambin se hace un recuento leucocitario. Centrifugamos el LCR, extendemos el sedimento y lo teimos para el recuento celular diferencial que tambin nos ayuda en el diagnostico de la enfermedad. Un aumento de polinucleares sugiere enfermedad infecciosa bacteriana. Un aumento de las clulas mononucleadas sugiere una enfermedad viral, fngica o inmunolgica.

ANLISIS BIOQUMICO DE LCR El estudio bioqumico del LCR es complementario de los anteriores. Las variaciones en los niveles de diversas substancias orientan el diagnostico. Las protenas y la glucosa son los parmetros ms significativos sobre todo cuando se conoce su presencia en sangre. Por ejemplo en las enfermedades infecciosas bacterianas o por hongos los niveles de glucosa disminuyen y en las infecciones vricas y en las inmunolgicas varan muy poco. CULTIVO DE LCR Con el cultivo se pretende identificar los microorganismos causantes de infecciones del sistema nervioso. Cuando se sospecha una infeccin se llevan a cabo los siguientes estudios: Tincin especial de Gram para realizar una distincin inicial del germen Gram + o Gram - e instaurar el tratamiento antibitico ms idneo sobre todo en situaciones de urgencia. Tincin BAAR baciloscopia alcohol resistente y tincin de Ziehl para detectar micobacterias. Tincin de tinta china cuyo resultado positivo aporta informacin en el estudio de hongos. El resto de la muestra se siembra para su cultivo y al cabo de cierto tiempo se consigue afinar mas y llegar a saber no el grupo sino el germen concreto de que se trate. El crecimiento en el cultivo se observa cada 24 horas. El numero de grmenes que hay en una muestra extrada del organismo es escaso y esto hace que sea difcil verlos al microscopio. Por eso se siembra en varios medios de cultivo segn el germen del que se sospeche con nutrientes y temperatura adecuada un tiempo variable. Despus se procede a su lectura al microscopio. Normalmente si hay grmenes suelen crecer y dar un resultado positivo. Sin embargo a veces a pesar de existir grmenes el resultado es negativo porque algunos son extremadamente sensibles y mueren en cuanto salen del organismo. En muchas ocasiones el facultativo debe orientar la teraputica en base a la clnica, tiempo de evolucin y otros datos del LCR. Otras veces el resultado se demora mucho porque todos los grmenes no crecen a la misma velocidad y como se requiere un numero determinado para detectar resultados positivos pueden necesitarse a veces varias semanas. Lo habitual son 7-15 das. Despus realizaremos antibiograma. Material Tres tubos de plstico transparente esteriles, secos, irrompibles y desechables, hermticos con tapn de rosca, capacidad 10 cc.

Normas generales El mtodo ms comn para recolectar una muestra de LCR es por puncin lumbar con tcnica asptica y aguja espinal en el interespacio vertebral L3-L4 en nios grandes y L4-L5 en nios ms pequeos. En este nivel el espacio esta lleno de liquido y hay menos tejido nervioso siendo el riesgo de lesin menor. Si se presentan contraindicaciones como hernias medulares, deformidad o infeccin en la zona que imposibilitan la puncin o invalidan los resultados recurriremos a mtodos alternativos quirrgicos como la puncin cisternal o ventricular. Identificacin de los tubos rotulados o etiquetados con nombre, servicio, fecha y hora, tipo de muestra y numero de orden de extraccin 1, 2 o 3. Peticin rellenada por el facultativo segn protocolo. La muestra se obtendr antes de administrar tratamiento antibitico al paciente. Si existe tratamiento antibitico previo indicar en la peticin tipo, dosis y hora de la ultima administracin. El LCR se recoger con tcnica asptica por separado en tres tubos estriles para los distintos estudios. Evitar tocar el interior del tubo o del tapn. Tras la puncin se medir la presin de salida del LCR. Se obtendrn de 3 a 6 cc de liquido para evitar accidentes por descompresin. Cada bote se intentara llenar secuencialmente con al menos 1 cc. El tubo 1 se destinara preferentemente al examen bioqumico. El tubo 2 se enviara al servicio de anatoma patolgica para el examen citolgico. El tubo 3 necesariamente estril se enviara al laboratorio de microbiologa para su tincin, cultivo y antibiograma. Se procurara no llenar este tubo el primero ya que es ms fcil que este contaminado con grmenes de la piel o una mala tcnica asptica. El envo debe ser rpido y se deber sembrar y teir inmediatamente. Si esto no fuera posible hay que conservar la muestra hasta su procesamiento en estufa a 35-37 C. Nunca a temperatura ambiente ni refrigerada. Debemos evitar la perdida de viabilidad de los microorganismos sensibles a bajas temperaturas. Cuando el volumen de LCR obtenido sea pequeo y no sea suficiente para los tres tubos debemos establecer prioridades en el procesamiento en funcin del agente etiolgico ms probable en el cuadro clnico. Si se sospecha infeccin se enviara al laboratorio de microbiologa. Si se sospechan otros problemas se har estudio macroscpico, bioqumico, etc.

BIBLIOGRAFA CASTILLO DE LA ROSA, E.:Obtencin de muestras de esputo. Tcnicas y procedimientos en revista metas. Marzo 2000.n 23. Pginas 16 a 19. PRIETO MENCHEROS, S. AMICH OLIVERAS, S. SACUE MARTINEZ, M.L.:Laboratorio clnico. Principios Generales. Editorial interamericana. Mcgraw Hill. . Pginas 245 a 260. Ao 1993. R. MURRIA, P. SROBA YASHI, G. A. PFALLER, M. S. ROSHENTAL, K.:Microbiologa mdica, 2 Edicin Editorial Hardcourt Mosby ao 2000. Pginas 161-162-442-443-544. RUIZ GONZLEZ, M.D. MARTNEZ BARELLAS, MR. GONZALEZ CARRIN, P.: Enfermera del nio y del adolescente Editorial Difusin de avances de enfermera. Ao 2000 Pginas 629 a 636. CASTILLO DE LA ROSA, E. PARRA LEGUA, L.: Obtencin de una muestra de heces. Tcnicas y procedimientos en revista metas. Abril 2003 n 44. LOZA FERNNDEZ DE BOBADILLA, E. PLANES REIGA E RODRIGUGEZ CREIXEMS M.Procedimientos de microbiologa clnica. Recomendaciones de la sociedad espaola de enfermedades infecciosas y microbiologa clnica. Hemocultivos 2003. JUSTICIA DEL RIO, A. Errores en la toma de muestras para anlisis, en revisa metas. Septiembre 2003. Nmero 58, Pginas 27 a 31. MESA PREZ, CA: Muestras de gases sanguneos y tiempos para cuantificar valores exactos, en revista metas. Diciembre de 2000 Enero 2001. nmero 3 Pginas 41 a 43. LENO GONZLEZ, D: LENO GONZALEZ, JL. CASTRO ACEDO, M. LOZANO GERRERO, MJ, MARCOS HORTELANO, A.Extraccin de sangre arterial para gasometra en revista metas, noviembre 2003. n 60 Pginas 18 a 22.

Muestras biolgicas
ENVIADO POR MARIA LLCER EL 09/10/2008 A LAS 5:42

PROCEDIMIENTOS 1. 1.1 Medidas

DE

RECOGIDA

TRANSPORTE DE

DE

MUESTRAS

BIOLGICAS MUESTRAS

OBTENCIN generales para la

obtencin

de

muestras.

Se describen a continuacin los puntos bsicos para la obtencin de cualquier tipo de muestra:

Verificar el orden. Asegurarse de haber entendido cul es la prueba que se pide, por qu se orden y cul es su participacin en la obtencin de las muestras solicitadas. Repsese el procedimiento. Si la prueba ordenada es de rutina, este paso tal vez no sea necesario. Sin embargo, si la prueba o el procedimiento para obtener la muestra no resulta familiar, debe buscarse la informacin necesaria. Para ello, los hospitales tienen una gua para pruebas especficas de laboratorio para que las utilice el personal como referencia rpida. Obtngase el equipo. Puede necesitarse equipo para obtener la muestra (estuche para cateterismo, bandeja para puncin lumbar, etc.), uno o varios recipientes para la muestra (tubo de ensayo estril, jarra, papel absorbente) y equipo para observar la respuesta del paciente (equipo para presin arterial). Preprese al paciente psicolgicamente. Explquese lo que va a suceder exactamente, a tal grado que pueda animrsele a cooperar. Permtale expresar sus sentimientos y que haga preguntas. Preprese al paciente fsicamente. Segn el procedimiento que se vaya a efectuar, proporcionndole intimidad, ajustando la intensidad de la luz y ayudando a acomodarse y cubrirse. Lvese las manos.

Efectese el procedimiento o colabore en su ejecucin. Asegrese que es suficiente la cantidad de muestra, el recipiente adecuado, el momento oportuno y, por supuesto, el paciente indicado. Asegrese de no derramar material de la muestra fuera del recipiente. Evalense los resultados. Esto significa esencialmente que para efectuar la prueba se ha de verificar la muestra y la cantidad de la misma, y atender a la respuesta del paciente, tanto fsica como psicolgicamente, valorando si se trata de la adecuada. Cuidado del equipo y de la muestra. El cuidado del equipo depende del tipo utilizado, as como de las normas del hospital. Se debe determinar si la conservacin es a temperatura ambiente o refrigerada, si se ha de llevar de inmediato al laboratorio o si se ha de manejar de manera especial. El etiquetado debe ser completo y preciso. Se ha de incluir la siguiente informacin: Nombre Nmero Nombre Formato Lvese donde se indica de la de del identificacin del prueba a realizar adems las de otros y de paciente. cuarto. mdico. datos. manos.

nuevo

Registro de la informacin. En el expediente clnico debe registrarse da y hora, el procedimiento en s, y la respuesta emocional y psicolgica del paciente. Tambin debe incluirse cualquier medicamento o solucin utilizada en la realizacin de la prueba. Papel Orina. de enfermera en cada tipo de pruebas y manejo de la muestra.

Mediante Para Limpiar la perfectamente la obtencin vulva o el de pene con la jabn y

miccin. muestra: agua.

. Mantener los labios de la vulva separados durante la miccin para evitar la contaminacin de la orina. La parte inicial de la miccin se desecha en el urinario; la siguiente se depositar en un recipiente estril. Existen estuches desechables. No Con Para eliminar una la jeringa de orina 5 cc de estril, las con aguja sondas y una a torunda permita que el recipiente toque el cuerpo. sonda. permanencia: con alcohol.

Obtngase

Limpie perfectamente la entrada de la sonda con la torunda. Si no tiene entrada directa, limpie la porcin de la sonda entre el globito y el extremo de la insercin. Introducir la aguja en la porcin preparada de la sonda e interrumpir la orina. Si no hay orina en la sonda, se pinzar unos 15-30 minutos antes de proceder a la obtencin de la muestra. Retirar Deposite . Si la Por la la orina ltimo es de se para una la jeringa jeringa en el de un recipiente en debe ser la estril lugar tomada sonda. apropiado. seguro. limpia.

dispondr determinacin

equipo sistemtica

prueba

Si es para un cultivo o una prueba de sensibilidad deber ser estril. Si la muestra no se enva de inmediato al laboratorio debe de refrigerarse, excepto en casos especiales. Sangre. Dependiendo de la situacin, se puede preparar al paciente y ayudar al enfermero para la realizacin de la prueba. El procedimiento de realizacin es estril. Para anlisis qumico o de suero, o si el examen a realizar no va a ser de inmediato, se habr de refrigerar la muestra. Si la muestra es para un cultivo habr que incubarla. Heces. Por lo general son adecuadas las pequeas cantidades. Si las pruebas son para ovocitos, parsitos o amebas, envese de inmediato al laboratorio (mientras est a temperatura ambiente). Esputo. Ser necesario muchas veces ayudar a toser mediante ejercicios respiratorios. Para una citologa la prueba debe ser limpia. Para cultivo y sensibilidad, estril. La mejor hora para la recogida de la muestra es en la maana y se podr dejar a temperatura ambiente hasta su examen. GESTIN DE LOS RESIDUOS SANITARIOS

Como consecuencia de la gestin inadecuada de los residuos que durante mucho tiempo se ha estado llevando a cabo, hoy en da existe gran preocupacin por la degradacin del medioambiente. Esta preocupacin se traduce en un inters por los problemas de salud derivados de los factores ambientales. A partir de la declaracin de Alma-Ata (1978) se llegan a abordar los problemas de salud desde una perspectiva comunitaria, y se consolida el concepto de salud para todos en el ao 2000 adoptado por la OMS en la 30 Asamblea Mundial de la Salud. Dentro de los objetivos en materia de salud propuestos por la OMS se encuentran 8 objetivos referidos a la creacin de ambientes saludables y, dentro de estos, el Objetivo n 23, que hace referencia explcita a la proteccin contra los residuos y que nos dice: Antes de 1995 todos los estados miembros suprimirn los riesgos fundamentales para la salud, relacionado con la eliminacin de los residuos peligrosos. Ms tarde, en la Conferencia Internacional para la promocin de la salud (Otawa, 1986), destac la necesidad de crear ambientes favorables, mediante una atencin prioritaria a la proteccin del entorno y a la conservacin de los recursos naturales. Con todo ello, se manifestaba una aspiracin a garantizar la proteccin del medio y, por tanto, la salud individual y de la poblacin. Los residuos en general, incluyendo los que se crean tras una atencin enfermera, han ido aumentando considerablemente. Se estima que los residuos que generan los hospitales espaoles estn entre 2-5 Kg por cama y da. Este aumento se debe en gran medida a la masiva utilizacin de materiales desechables. El riesgo potencial para la salud derivado de una mala gestin de los residuos, as como una insuficiente legislacin, han manifestado la necesidad de establecer una normativa que permita gestionar los residuos generados, adaptndose a las disposiciones comunitarias. Respecto a los residuos generados por consultas privadas, la mayor parte pueden ser considerados como asimilables a los urbanos, y sto no representan riesgo especial para la salud. No obstante, existirn prcticas mdicas privadas que si generarn residuos considerados de riesgo, por lo que tendrn que acogerse a la normativa vigente. CLASIFICACIN Grupo DE LOS RESIDUOS SANITARIOS I.

Son aquellos que no presentan un riesgo ni actual ni potencial para la salud, pudiendo ser asimilables a los urbanos no especficos. Se incluyen todos los residuos generados en las actividades de comedores, jardinera, material de oficina y aquellos desechos procedentes de pacientes no infecciosos. Grupo II.

Residuos sanitarios no especficos que necesitan un control en el propio centro donde se hayan generado. Se trata de materiales de curas, vendas, yesos, material desechable de un solo uso y ropas de pacientes no infecciosos. La manipulacin de estos residuos representa un riesgo slo en el interior de los centros. Grupo III.

Son aquellos residuos sanitarios especficos o de riesgo, y que van a presentar un riesgo para la

salud laboral y pblica. Se adoptan unas medidas de prevencin en su manipulacin, recogida, almacenamiento, transporte, tratamiento y eliminacin posterior. Se incluyen los siguientes residuos: Sangre Agujas, Vacunas y bistures hemoderivados y vivas todo en el o forma material lquida. cortante. atenuadas.

Residuos infecciosos que proceden de pacientes con enfermedades de declaracin obligatoria. Grupo IV.

Precisan de un tratamiento especial, higinico y medioambiental, en su manipulacin, recogida, almacenamiento y transporte, ya sea en el centro donde se generan o fuera del mismo, a la vez que se recogen en una normativa especfica para su tratamiento y eliminacin. Se incluyen aqu: Residuos Residuos Medicamentos Aceites Residuos Residuos 4. con minerales contenidos y en citostticos. anatmicos. caducados. sintticos. metales. radiactivos. TRANSPORTE

Para llevar a cabo el transporte de los residuos generados es necesaria una correcta clasificacin tras su recogida. En los casos de los grupos II y III, stos sern recogidos en bolsas de plsticos con unas caractersticas especiales: Capacidad De De un una calibre galga mayor inferior o de calibre 400 para de el a 300 grupo III o para bien 100 el 2 Grupo bolsas de litros. II. 300.

Adems las bolsas o recipientes deben estar homologados para sus diferentes usos cumpliendo los siguientes requisitos: Hermetismo En Fabricados Cerradura Asepsia con y materiales de total difcil recipientes resistentes, apertura en rgidos de el e forma total. opacos. impermeables. accidental. exterior.

Con

un

volumen

que

no

sobrepase

los

70

litros.

Es preciso la identificacin del contenedor o recipiente de acuerdo con el tipo de residuo que contenga. Para los del grupo III se rotular con la expresin RESIDUOS DE RIESGO y para los del grupo IV MATERIAL CONTAMINADO QUMICAMENTE indicando tambin el tipo de residuo que contiene de forma especfica. Con los residuos de los grupos I y II no es necesario la rotulacin exterior del recipiente. Los residuos procedentes de las diferentes zonas y unidades se trasladarn a un almacn habilitado para el depsito de forma temporal de los mismos (no ms de 1 semana). 5. ELIMINACIN Y TRATAMIENTO DE LOS RESIDUOS

Los residuos que pertenezcan a los grupos I y II sern tratados y eliminados como residuos urbanos en vertederos controlados. Los del la grupo III se en podrn las tratar mediante 2 procedimientos los siguientes 900-1100 diferentes. requisitos: C

Mediante

incineracin de

instalaciones combustin

que cumplan de o

Temperatura Alimentacin Funcionamiento Sistema Recuperacin de

automtica

semiautomtica. continuado.

purificacin

de

los del

gases

de

combustin. calor.

Mediante la esterilizacin por vapor caliente a presin, en el autoclave, lo que permite su eliminacin posterior como residuo urbano. La eliminacin de los residuos del grupo IV se acoge a normativas especficas segn el tipo de residuo. Por ejemplo, los citostticos se incinerarn hasta garantizar su total destruccin. Desde Espaa os recuerda con cario Maria LLcer
Etiquetas: Salud

Sobre la investigacin con muestras biolgicas

9 de febrero de 2009.- La investigacin biomdica es una actividad profundamente

relacionada con la asistencia mdica y es una actividad imprescindible para el avance de la medicina.

Cada vez es ms evidente que esta investigacin se fundamenta en los progresos realizados en el campo de la biologa celular y molecular , en el conocimiento de los mecanismos genticos y en nuevas tcnicas desarrolladas por cientficos bsicos. En este contexto, adquiere especial relevancia la obtencin de muestras biolgicas (sangre, tejidos, clulas, etc.) para investigacin. Desde hace tiempo, muchos investigadores y laboratorios han ido almacenando muestras biolgicas con fines asistenciales (excedentes del proceso diagnstico, reservas para una posible revisin diagnstica, validacin de nuevas tcnicas diagnsticas) o excedentes de muestras obtenidas en un proyecto de investigacin anterior. Las exigencias ticas y legales establecidas por la Ley de Investigacin Biomdica que plantea la sociedad actual obligan a establecer procedimientos normalizados para el tratamiento de estas muestras biolgicas e informacin asociada, cumpliendo una serie de requisitos en el proceso de informacin y consentimiento por parte del donante, garantizando la calidad tcnica del proceso y la confidencialidad en lo que respecta a los datos asociados. La utilizacin de las muestras biolgicas supone un nuevo reto en el campo de la Biotica, debido a las implicaciones que puede tener la investigacin genmica. La transferencia entre instituciones nacionales e internacionales de este tipo de material, su uso sin nimo de lucro o el eventual empleo comercial de los avances derivados de este tipo de investigaciones (pruebas diagnsticas, tratamientos, etc.) son temas que debemos seguir analizando conjuntamente investigadores, instituciones y fundamentalmente los ciudadanos. Se trata de dotarnos democrticamente de un marco tico y legal de referencia moderno, vlido y transparente, que permita avanzar a la ciencia y respetar los derechos fundamentales de las personas.

Informar debidamente
Es importante informar debidamente y crear un estado de opinin y debate en el que la investigacin biomdica, como hasta ahora, sea valorada y apreciada por los ciudadanos espaoles. Una de las condiciones fundamentales para que esta investigacin sea apoyada, comprendida y respaldada por la sociedad es que siempre se lleva a cabo bajo los ms altos estndares ticos, de calidad y de seguridad posibles. Es necesario desarrollar lo antes posible la Ley de Investigacin Biomdica de tal modo que favorezca el uso tico y eficiente de las muestras biolgicas para investigacin,

evitando posiciones dogmticas y, al contrario, adoptando actitudes pragmticas al respecto. Espaa puede convertirse en un pas avanzado en este campo si nuestros representantes democrticos son capaces de comprender esta situacin y dar una respuesta adecuada a las necesidades de los ciudadanos y de la comunidad cientfica.

Antoni Trilla es jefe del Servicio de Medicina Preventiva y Epidemiologa del Hospital Clnic de Barcelona, profesor agregado de Salud Pblica en la Universidad de Barcelona e investigador asociado del Instituto de Investigaciones Biomdicas August Pi i Sunyer (IDIBAPS) y del Centro de Investigacin en Salud Internacional de Barcelona (CRESIB).

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