Conclusiones: Espermatozoides

Miren Mandiola
Coordinadora de laboratorios Grupo Hospitalario Quirn Directora de Laboratorio Hospital Quirn San Sebastin
SESIN 4. Espermatozoides: Aspectos prcticos en 2014 Mesa 8. La fragmentacin del DNA Mesa 9. Separacin de espermatozoides

Agust Garca Peir

(25) La fragmentacin del ADN en espermatozoides humanos

1. El COMETA alcalino es el ms sensible para determinar dao de cadena sencilla de ADN espermtico y est asociado a la capacidad de embarazar. TUNEL, SCD Y SCSA tambin la predicen bien. 2. La rotura de doble cadena, detectada con COMETA neutro, se asocia con riesgo de

aborto. Su origen podra relacionarse con actividad nucleasa dependiente de Ca y Mn.

3. Entre el 33% y el 50% de los eyaculados de donantes frtiles presentan un alto porcentaje de espermatozoides con roturas de doble cadena que podran suponer mayor riesgo o predisposicin de aborto. 4. Estudiar la fragmentacin del ADN espermtico para predecir capacidad de embarazo y riesgo de aborto.
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Roco Nez
(26) FISH y Fragmentacin de ADN: Aspectos prcticos
1. Existe relacin entre FISH alterado y fragmentacin alterada. 2. Realizar FISH en OAT severa, azoospermia no obstructiva, anomalas morfolgicas elevadas y fallo de implantacin o aborto de repeticin. Alterado DGP/semen de banco. 3. Verdadera utilidad: casos con porcentaje de alteraciones cromosmicas tan elevadas que la mejor opcin es emplear semen de donante. 4. Realizar estudio de fragmentacin en: fallo de implantacin o aborto de repeticin,

astenozoospermia severa, previo a donacin de ovocitos.

5. Si el ndice de fragmentacin es elevado: disminuir abstinencia sexual, minimizar tiempo incubacin en el procesado de muestras, repetir estudio y congelar muestra (variacin intraindividuo). Si el semen es normal u OAT moderada: usar MACS.
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Natalio Cruz
(27) Fragmentacin de ADN: Prevencin y tratamiento
1. Objetivo: Mejorar la calidad del gameto. 2. Efecto iceberg: dao oculto incompatible con adecuado desarrollo embrionario. 3. Mecanismos testiculares y post-testiculares. Causas mltiples. 4. Prevencin: operar varicocele, evitar temperaturas elevadas, txicos laborales o

ambientales, edad avanzada

5. Tratamiento si es posible (antioxidantes, diclofenaco, Zinc, DHA) y tambin tratamiento emprico y hbitos de vida (peso, tabaco, etc). 6. Disminuir abstinencia sexual, primera fraccin del eyaculado, procesado rpido de muestras y a T ambiente. 7. Dao post-testicular: biopsia en fresco si es posible.
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Susana Corts
(28) Opciones en la seleccin espermtica: PICSI, SPERM-SLOW, MACS,?
1. Para qu?: Diagnstico, tratamiento. Con qu?: Semen fresco o congelado. 2. Seleccin por movilidad disminuye fragmentacin: swim-up, gradientes (ventajosos para daos de cadena simple). 3. Morfologa: IMSI en OAT severa aumenta la implantacin, embarazo y RN.

4. Carga elctrica: Tcnicas no rutinarias.

5. Receptores moleculares: Anexina+gradientes, citometra de flujo (seguridad?), cido hialurnico (PICCSI, Sperm-slow). 6. Todas ellas ayudan a disminuir la fragmentacin del ADN espermtico. No se puede elegir una tcnica y aplicarla siempre, sino en funcin de cada muestra y sin olvidar las posibilidades de cada laboratorio.
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Carmen Anarte

(29) Importancia de la apoptosis: MACS ANEXINA V

1. Determinacin de apoptosis el da de la puncin en muestras capacitadas que se usarn para ICSI (apoptosis intratratamiento). Existe separacin manual y automatizada.

2. Punto de corte para muestra patolgica y usar columnas de Anexina: >15%.

3. Las columnas de Anexina no eliminan el 100% de los espermatozoides apoptticos en las muestras seminales. 4. Otras aplicaciones: en muestras congeladas, mejora de movilidad, fracaso de TRA, abortos de repeticin, fallos de implantacin, MAR test positivo, leucospermia, en un futuro para pacientes jvenes con problemas oncolgicos.

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Alberto Pacheco
(30) La citometra en el laboratorio mejora la tasa de hijo en casa?
1. Tras una primera seleccin por movilidad pasaremos a una seleccin ms especfica, imitando a la

fisiologa.
2. La citometra de flujo analiza nmero, morfologa, fenotipo, funcin espermtica, estrs oxidativo, fragmentacin, potencial de membrana mitocondrial. 3. Idealmente: citmetro analizador + separador.

4. Analizar a la vez clulas de distintas caractersticas: condensacin cromatina, aneuploidas, etc.

5. La mayora de las tcnicas usadas en citometra requieren un bajo tiempo de realizacin, por lo que se pueden usar antes de las TRA. 6. Permite aumentar el diagnstico seminal y por tanto el xito del tratamiento.

7. MACS para mejorar la fragmentacin de la muestra: > gestacin, < aborto.

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Conclusiones: Espermatozoides

Miren Mandiola
Coordinadora de laboratorios Grupo Hospitalario Quirn Directora de Laboratorio Hospital Quirn San Sebastin
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