Virologiafiocruz

| 125
Captulo 2
Virologia
Paulo Roberto Soares Stephens Maria Beatriz Siqueira Campos de Oliveira Flvia Coelho Ribeiro Leila Abboud Dias Carneiro
1. Introduo
Existem muitas controvrsias na comunidade cientfica a respeito do vrus ser ou no um ser vivo. Muitos autores consideram que a vida se originou do RNA, pois, a partir desta molcula so formadas novas quantidades dela mesma. Em 1960, o fsico alemo Manfred Eigen, ganhador de um prmio Nobel, descobriu que era possvel a replicao de RNA in vitro. O RNA, portanto, tornou-se um grande candidato condio de supermolcula da vida primitiva, capaz de se replicar e sofrer mutaes, albergando genes codificadores de enzimas e outras protenas. Essa molcula, denominada RNA de Eigen, muito semelhante ao vrus, pois se encontra na fronteira entre o qumico e o biolgico. Uma das hipteses da origem do vrus, denominada Teoria dos Elementos Subcelulares, de que o vrus seria proveniente de uma molcula de RNA. Uma outra hiptese defende que o vrus teria se originado de seres unicelulares de vida
126 | Conceitos e Mtodos para a Formao de Profissionais em Laboratrios de Sade
livre que, por uma perda progressiva de propriedades celulares, criou uma dependncia, tornando-o um parasita intracelular obrigatrio. Os que defendem que o vrus no um ser vivo partem do princpio de que ele no tem vida livre, pois sua replicao s possvel dentro de uma clula viva. Alm disso, alguns desses agentes possuem a capacidade de se cristalizar quando submetido a situaes adversas. Entretanto, os que o classificam como ser vivo se apoiam em duas caractersticas. A primeira se refere sua capacidade de replicao que os diferem de outros agentes, tais como as toxinas bacterianas; e a segunda, presena de uma estrutura protetora de seu material gentico, ausente nos plasmdeos (molcula de DNA circular). Apesar de terem a capacidade de se replicar, os vrus no possuem um aparato enzimtico suficiente para a replicao, necessitando, assim, da maquinria celular para completar o seu ciclo replicativo, o que o torna um parasita intracelular obrigatrio. Sua fragilidade aparente, por ser estritamente dependente da clula, descartada pela capacidade de controle e redirecionamento do metabolismo celular para o seu prprio benefcio. Apesar da baixa complexidade estrutural, pode causar grandes danos clula hospedeira, mesmo apresentando morfologicamente apenas o material gentico, um capsdeo e, em alguns vrus, um envelope. Algumas propriedades distinguem os vrus de outros microrganismos. A primeira est relacionada ao seu tamanho, o qual pode variar de 10 a 300 nm. Dessa forma, so considerados os menores microrganismos existentes, podendo ser visualizados apenas atravs da microscopia eletrnica. Para fins de comparao, lembramos que as bactrias e as hemcias possuem, em mdia, 10 a 15 vezes o tamanho dos vrus, o que possibilita a identificao destes por meio da microscopia tica.
Virologia | 127
A segunda propriedade se refere ao genoma viral, que pode ser DNA ou RNA, com exceo do Mimivrus (famlia: Mimiviridae), o qual apresenta em seu genoma os dois cidos nucleicos (DNA e RNA), descoberto em 2003, por pesquisadores da Universidade Mditerrane, em Marseille, Frana (LA SCOLA et al., 2003). O cido nucleico contm os genes responsveis pelas informaes genticas para a codificao de protenas com composio qumica bem definida, capazes de induzir respostas imunolgicas especficas. Esta especificidade uma das caractersticas virais, ou seja, quando somos acometidos por uma infeco viral, o nosso sistema imune produz anticorpos especficos, que podem ser identificados atravs do diagnstico sorolgico. O mecanismo de replicao viral favorece as frequentes mutaes, burlando, assim, o sistema imune. Outra importante propriedade dos vrus a sua natureza particulada, j que ele capaz de se replicar, formando seus componentes separadamente, sendo o cido nucleico uma das primeiras molculas a ser formada. Como mencionado anteriormente, o vrus precisa necessariamente de uma clula viva para realizar seu ciclo. Dessa forma, tratam-se de parasitas estritos, no possuindo atividade metablica fora das clulas hospedeiras. Estas clulas podem ser de animais, vegetais ou microrganismos . As propriedades fsico-qumicas dos vrus os tornam capazes de infectar o organismo atravs de receptores de membrana especficos, presentes nas clulas hospedeiras. O fato de o vrus apresentar tropismo celular vai influenciar no tipo de doena causada. Por exemplo, um vrus que possui afinidade por clulas do sistema imune compromete a sua funo. Assim, a interao vrus-hospedeiro a chave de muitos aspectos das doenas virais, tanto da transmisso quanto da capacidade de o vrus de se sobrepor s defesas do hospedeiro. Uma resposta imune exacerbada do hospedeiro pode, tambm, contribuir para causar maiores danos, agravando a enfermidade.
2. T Taxonomia axonomia Viral
Figura 1. Adaptado do livro Virologia Humana, autora Ledy do Horto dos Santos Oliveira
O International Committee on Taxonomy of Viruses (ICTV) vem aprimorando as normas de classificao viral passo a passo, estabelecendo, assim, uma taxonomia exclusiva para a organizao dos vrus. O mais importante de todo esse princpio que os vrus podem ser agrupados de acordo com as suas propriedades fsico, qumicas e biolgicas, assim como as das clulas que infectam. Dessa forma, os vrus podem ser classificados de acordo com o tipo de cido nucleico, simetria do capsdeo, presena ou ausncia do envelope, tamanho e sensibilidade s substncias qumicas. Quanto ao genoma dos vrus, este pode ser constitudo por fita simples (ss) ou dupla (ds), linear ou circular, de polaridade positiva ou negativa. As diferentes caractersticas do cido nucleico conduziro a variadas estratgias de
Virologia | 129
replicao. Alguns vrus so capazes de realizar recombinaes genticas e montagens incorretas de partculas virais, podendo produzir vrus provenientes de diferentes ancestrais. Certos vrus, como o HIV, tm seus cidos nucleicos incorporados ao genoma da clula hospedeira. Logo, atravs da taxonomia, no possvel associarmos uma espcie de vrus a um ancestral comum. Uma outra classificao viral foi definida por David Baltimore, em 1971, a fim de correlacionar as caractersticas do cido nucleico com as estratgias de replicao. Esta classificao no tem finalidade taxonmica, uma vez que o autor utiliza a j existente. Classificao de Baltimore:
Classe I - DNA de fita dupla - Ex: Adenovrus, Herpesvrus e
Poxvrus.
Classe II - DNA de fita simples positiva - Ex: Parvovrus Classe III - RNA de fita dupla - Ex: Reovrus, Birnavrus Classe IV - RNA de fita simples positiva - Ex: Picornavrus e Togavrus Classe V - RNA de fita simples negativa - Ex: Orthomixovrus e
Rhabdovrus
Classe VI - RNA de fita simples positiva, com DNA intermedirio no
ciclo biolgico do vrus - Ex: Retrovrus

Classe VII - DNA de fita dupla com RNA intermedirio - Ex.
Hepadnavrus
3. Estrutura viral
Basicamente os vrus so constitudos por dois componentes essenciais: a parte central, que recebe o nome de cerne, onde se encontra o genoma, e que pode ser DNA ou RNA (salvo exceo); associado a uma capa proteica denominada capsdeo, formando ambos o nucleocapsdeo.
Ao final da replicao, a prognie viral constituda por partculas completas (vrion), as quais so infecciosas, e por outras partculas incompletas e no infecciosas. Em alguns gneros, com o Poliovrus e o Adenovrus, os vrions consistem unicamente de nucleocapsdeo. J em outros gneros, como o Mixovrus, o Herpesvrus e o Poxvrus, os vrions so constitudos por uma membrana lipoproteica externa, o envelope. Muitos vrus adquirem o envelope durante sua sada da clula hospedeira, para onde levam parte da membrana celular. Os vrus possuem propriedades fsico-qumicas e biolgicas importantes na interao com a clula hospedeira. Entre elas, podemos destacar: massa molecular, pH, temperatura, estabilidade inica, densidade, suscetibilidade a agentes fsicos e qumicos, composio proteica (de carboidratos e de lipdios), natureza e afinidade antignica, tropismo, transmisso e patogenicidade. A partir do arranjo estrutural do nucleocapsdeo, os vrus apresentam as seguintes simetrias: icosadrica, helicoidal e complexa. Na forma icosadrica, o capsdeo est organizado como um polgono retangular. Nos vrtices dos tringulos so encontrados os capsmeros, classificados em Hexmeros, quando possuem seis lados, e em Pentmeros, quando constitudos por cinco lados. Dessa forma, os vrus icosadricos1 assemelham-se a cristais. O nmero e a arrumao dos capsmeros so teis na identificao desses vrus. Como exemplos destes vrus existem os Adenovrus, os Picornavrus, os Rinovrus, dentre outros. Nos vrus com morfologia helicoidal, o cido nucleico circundado por um capsdeo cilndrico como uma estrutura de hlice. Esta forma pode ser de dois tipos: helicoidal rgido, que se assemelha a bastonetes, e helicoidal frouxo, cujos nucleocapsdeos se dobram em forma de novelos, geralmente irregulares, assumindo um aspecto polimrfico. Exemplificando este grupo de vrus existem o Influenza e o vrus do Mosaico do Tabaco, dentre outros.
1
Figura geomtrica com vinte faces iguais.
Virologia | 131
A grande maioria dos vrus tem seus elementos organizados segundo as simetrias icosadrica ou helicoidal. Entretanto, alguns vrus, como o Poxvrus, apresentam uma organizao morfolgica mais complexa, pois podem apresentar duas cadeias peptdicas na constituio do capsdeo . Sua forma resulta da suborganizao de cada um dos componentes da partcula viral, como o caso dos bacterifagos. Estes ltimos agentes parasitam as bactrias, introduzindo nestas o material gentico. Para tanto, os bacterifagos possuem uma estrutura composta de cabea poligonal, cauda, bainha contrtil, placa basal e fibras (Figura 3). Existem tambm bacterifagos com estrutura icosadrica. A estrutura do genoma depende se o vrus RNA ou DNA, pois o DNA apresenta os nucleotdeos citosina, guanina, adenosina e timina, enquanto que o RNA possui a uracila no lugar da timina. O genoma de RNA ou DNA pode ser constitudo por uma nica fita (ss) ou por duas fitas (ds). Fitas positivas de RNA so fitas que contm o cdigo que ser traduzido pelos ribossomos. Fitas positivas de DNA so fitas que contm a mesma base sequencial do RNA mensageiro. Fita negativa de RNA ou DNA a fita com base sequencial complementar fita positiva. Concluindo, o vrus constitudo basicamente por duas estruturas: cido nucleico e capsdeo, sendo que, em alguns grupos, apresentam tambm o envelope ou envlucros. A funo do cido nucleico albergar a informao gentica (replicao viral) e a do capsdeo a proteo do genoma. Alm disso, esta estrutura a principal responsvel pela induo da resposta imune do hospedeiro. Em vrus envelopados, os lipdeos se apresentam na forma de fosfolipdeos, o que auxilia a entrada do vrus na clula hospedeira e confere uma maior proteo do microrganismo (Figura 2).
Figura 2. Estrutura viral Adaptao e arte grfica por Raphael dos Santos Stephens.
4. Ciclo viral
A replicao viral, que ocorre no interior da clula do hospedeiro, evolui seguindo as etapas de adsoro, penetrao, desnudamento, transcrio e traduo (sntese), maturao e liberao (Figura 3).
4.1. Adsoro
a ligao de uma molcula presente na superfcie da partcula viral com os receptores especficos da membrana celular do hospedeiro. Nos vrus envelopados, as estruturas de ligao geralmente se apresentam sob a forma de espculas, como nos Paramyxovrus e nos vrus sem envelope. A ligao clula-vrus geralmente est relacionada a um ou grupo de polipeptdeos estruturais, como acontece nos Papilomavrus. A presena ou ausncia de receptores celulares determina o tropismo viral, ou seja, o tipo de clula em que so capazes de ser replicados. Para haver a adsoro,
Virologia | 133
necessria uma ponte entre as protenas mediadas por ons livres de clcio e magnsio, uma vez que as protenas apresentam carga negativa. Outros fatores vo influenciar diretamente na adsoro do vrus na membrana celular, tais como, temperatura, pH e envoltrios com glicoprotenas.
4.2. Penetrao
a entrada do vrus na clula. Esta pode ser feita de duas maneiras: fuso e viropexia. A fuso quando a membrana celular e o envelope do vrus se fundem, permitindo a entrada deste no citosol da clula. No caso da famlia Paramixoviridae, a protena F catalisa a ligao da membrana com o envelope. A viropexia uma invaginao da membrana celular mediada por receptores e por protenas, denominadas clatrinas, que revestem a membrana internamente. Nos dois mecanismos existe uma dependncia em relao temperatura adequada, que fica em torno de 37C, em vrus que replicam em clulas de vertebrado.
4.3. Desnudamento
Neste processo, o capsdeo removido pela ao de enzimas celulares existentes nos lisossomos, expondo o genoma viral. Alm disso, se observa a fase de eclipse, onde no h aumento do nmero de partculas infecciosas na clula hospedeira. De uma maneira geral, o vrus que possui como cido nucleico o DNA faz sntese no ncleo, com exceo do Poxvrus, uma vez que precisa da enzima polimerase, encontrada no ncleo da clula. O vrus que possui como genoma o RNA faz a sntese viral no citoplasma, com exceo do vrus Influenza, pois j possui a enzima polimerase.
4.4. Sntese viral
A sntese viral compreende a formao das protenas estruturais e no estruturais a partir dos processos de transcrio2 e traduo3. Os vrus foram agrupados em sete classes propostas por Baltimore em 1971, de acordo com as caractersticas do cido nucleico e as estratgias de replicao. Nos vrus inseridos nas classes I, III, IV e V, o processo de traduo do RNA mensageiro ocorre no citoplasma da clula hospedeira. J nos vrus da classe II, este processo ocorre no ncleo. Em todas estas classes, o RNA mensageiro sintetizado vai se ligar aos ribossomas, codificando a sntese das protenas virais. As primeiras protenas a serem sintetizadas so chamadas de estruturais, pois vo formar a partcula viral. As tardias so as protenas no estruturais, que participam do processo de replicao viral. Na classe VI, os vrus de RNA realizam a transcrio reversa formando o DNA complementar (RNADNARNA), devido a presena da enzima transcriptase reversa (famlia Retroviridae). Os vrus da classe VII apresentam um RNA intermedirio de fita simples, maior do que o DNA de cadeia dupla que o originou (DNARNADNA). Resumindo, abaixo esto descritas as caractersticas principais de cada classe.
Classe I: Ocorre no citoplasma, independente do genoma celular,
que bloqueado.
Classe II: realizada no ncleo, simultaneamente sntese do genoma
celular.
Classe III: Processa-se no citoplasma; sendo, no incio, apenas umas
das fitas do cido nucleico copiada.

o processo de formao do RNA mensageiro a partir do DNA. o processo de converso de uma molcula, ou sequncia nucleotdica, em aminocidos, formando uma protena.
2 3
Virologia | 135
Classe IV: Ocorre no citoplasma, por meio de um processo comple-
xo, ainda pouco esclarecido.

Classe V: A fita simples de RNA serve de molde para a formao de
genoma viral e sntese de RNA mensageiro.

Classe VI: Pertence a essa classe a famlia Retroviridae, que possui uma
enzima chamada Transcriptase Reversa, responsvel pela sntese de DNA a partir de RNA.
Classe VII: Tem como exemplo a famlia Hepadnaviridae, cuja caracte-
rstica principal a formao de um RNA intermedirio.

4.5. Montagem e Maturao
Nessa fase, as protenas vo se agregando ao genoma, formando o nucleocapsdeo. Alguns vrus, como o Rotavrus, apresentam mais de um capsdeo. A maturao consiste na formao das partculas virais completas, ou vrions, que, em alguns casos, requerem a obteno do envoltrio lipdico ou envelope. Este processo, dependente de enzimas tanto do vrus quanto da clula hospedeira, podendo ocorrer no citoplasma ou no ncleo da clula. De uma forma geral, os vrus que possuem genoma constitudo de DNA condensam as suas partes no ncleo, enquanto os de RNA, no citoplasma.
4.6. Liberao
A sada do vrus da clula pode ocorrer por lise celular ou brotamento. Na lise celular (ciclo ltico), a quantidade de vrus produzida no interior da clula to grande que a clula se rompe, liberando novas partculas virais que vo entrar em outras clulas. Geralmente, os vrus no envelopados realizam este ciclo, ao passo que os envelopados saem da clula por brotamento. Neste caso, os nucleocapsdeos migram para a face interna da membrana celular e saem por brotamento, levando parte da membrana.
Figura 3. Replicao viral
Observao: Replicao dos bacterifagos Em relao aos bacterifagos, nos dois ciclos (ltico e lisognico), as fases de replicao so quase idnticas. Entretanto, no ciclo ltico, o vrus insere o seu material gentico na clula hospedeira, onde as funes normais desta so interrompidas pela insero do cido nucleico viral, produzindo tantas partculas virais que ao encher demasiadamente a clula, a arrebenta, liberando um grande nmero de novos vrus. Concluindo, no ciclo ltico h uma rpida replicao do genoma viral, montagem e liberao de
Virologia | 137
vrus completos, levando lise celular, ou seja, a clula infectada rompe-se e os novos vrus so liberados. No lisognico, o vrus insere seu cido nucleico na clula hospedeira, onde este torna-se parte do DNA da clula infectada e a clula continua com suas funes normais. Durante a mitose, o material gentico da clula com o do vrus incorporado sofrem duplicao, gerando clulas-filhas com o novo genoma. Logo, a clula infectada transmitir as informaes genticas virais sempre que passar por mitose e todas as clulas estaro infectadas tambm (Figura 4). Figura 4. Ciclo ltico e Lisognico
5. P atognese da infeco viral Patognese
A doena viral ocorre em consequncia da infeco viral em um hospedeiro, o qual pode apresentar ou no sinais e sintomas clnicos. Em muitos casos, a infeco viral no capaz de causar alteraes clnicas
visveis no indivduo, infeco inaparente ou subclnica. Entretanto, quando observamos alteraes clnicas no hospedeiro, chamamos de infeco sintomtica ou aparente. Algumas infeces virais podem causar o que chamamos de sndrome, que consiste em um grupo de sinais4 e sintomas5 especficos, caracterizando uma determinada infeco. Sendo assim, podemos considerar que um mesmo vrus pode causar sintomas clnicos diferentes. Alm disso, tambm possvel que diferentes vrus possam causar os mesmos sintomas (Tabela 1). Tabela 1- Correlao entre alguns sintomas clnicos da via respiratria e o agente viral
Sndromes Laringite/ gripe Principais sintomas Causas virais mais comuns Lactantes Crianas Parainfluenza, Influenza Parainfluenza, Influenza Raro Adenovrus, Vrus Coxsackie Influenza, Parainfluenza Rinovrus, Adenovrus Adultos Parainfluenza, Influenza Influenza, Adenovrus Raro Adenovrus, Vrus Coxsackie Influenza, Adenovrus Rinovrus, Coronavrus
Rouquido, tosse Parainfluenza, de cachorro Influenza Parainfluenza, Influenza Tosse, dispneia Vrus sincicial respiratrio, Parainfluenza Faringite Adenovrus, Herpes simples Vrus sincicial Tosse, dor respiratrio, torcica Influenza Obstruo nasal, Rinovrus, secreo nasal Adenovrus
Traqueobronquite Tosse Bronquiolite Faringite Pneumonia Resfriado comum
o que o mdico ou pessoas prximas ao paciente observam, como leses na pele, vmito, diarreia, etc. 5 o que o paciente relata. Como dor de cabea, dores no corpo, tontura, etc.
4
Virologia | 139
Os diferentes sinais e sintomas da doena viral observados em um hospedeiro so determinados por caractersticas especficas do agente, e tambm do hospedeiro, as quais so influenciadas por fatores genticos de ambos. A patognese viral refere-se interao de fatores virais e do hospedeiro, que levam produo de doena. Um vrus patognico tem que ser capaz de infectar e causar sinais da doena em um hospedeiro suscetvel. No processo da patognese viral podemos observar doenas mais severas ou mais brandas. Isso ocorre devido existncia de cepas virais mais ou menos virulentas, ou s diferentes respostas imunolgicas do hospedeiro. As respostas das clulas dos hospedeiros suscetveis s infeces virais podem ocorrer atravs de trs caminhos diferentes: ausncia de alteraes aparentes, efeito citoptico (CPE) seguido de morte e transformao celular (crescimento alterado). Em relao aos padres de doenas virais no hospedeiro, as infeces podem se apresentar das seguintes formas: localizada ou disseminada, sintomtica ou inaparente, aguda ou crnica. A persistncia de um agente viral, sem que o hospedeiro manifeste sintomas clnicos especficos, caracteriza o perodo de latncia (Figura 5).
Figura 5. Latncia viral
Na infeco localizada, a replicao viral permanece prxima ao stio de entrada do vrus. Exemplo: pele, tratos respiratrio e gastroentrico. Na infeco sistmica ou disseminada, o espalhamento do agente pelo organismo ocorre em vrias etapas, como entrada, disseminao para os linfonodos regionais, viremia primria e disseminao para rgos suscetveis. Aps a viremia secundria, os vrus so disseminados para outros rgos, como crebro, pulmo, pele, etc. (Figura 6). Existe uma predileo dos vrus para determinados rgos. Os vrus das hepatites, por exemplo, atingem principalmente o fgado. o que chamamos de tropismo viral.
Virologia | 141
Figura 6. Stios de entrada, viremia e disseminao viral
Como j dissemos anteriormente, nas infeces sintomticas, alm do diagnstico clnico, necessria tambm a realizao do diagnstico laboratorial, considerando que os sintomas clnicos sejam inespecficos para as doenas virais (perodo prodrmico). No indivduo assintomtico, muitas vezes, a infeco s confirmada aps exame laboratorial. Em gestantes, por exemplo, o Ministrio da Sade brasileiro recomenda que seja feito exame, a fim de avaliar a imunidade para a rubola e comprovar se a mulher j teve contato com o vrus anteriormente. A infeco aguda caracterizada pela presena de sintomas inespecficos, caractersticos das doenas virais, tais como febre, cefaleia e mialgia. Este
perodo o ideal para serem coletados espcimes clnicos necessrios para o diagnstico laboratorial, j que a fase onde existe uma maior carga viral no hospedeiro. Nas infeces crnicas, os vrus no so eliminados do organismo, permanecendo quase sempre em nveis baixos, acarretando ou no sintomas clnicos. Como exemplo desta infeco, temos os herpesvrus simples e o HIV, dentre outros.
6- Epidemiologia das infeces virais
De acordo com a Portaria no 2.259, de novembro de 2005, o Ministro da Sade, no uso de suas atribuies, aprovou a Resoluo 33/05 do Grupo Mercado Comum, intitulada Glossrio de terminologia de Vigilncia Epidemiolgica MERCOSUL que, entre outras providncias, conceitua termos para serem usados em Vigilncia Epidemiolgica. Quadro 1 - Sntese do glossrio da Portaria no 2.259, de novembro de 2005. Termos
Caso autctone Caso suspeito
Conceitos
Pessoa ou animal que tenha contrado uma doena em sua residncia (Pas) Pessoa ou animal cuja histria clnica, sintomas, sinais e possvel exposio a uma fonte de contaminao, sugere que pode ter, ou ir desenvolver uma doena infecciosa. Indicador que expressa a proporo da populao-alvo, que foi vacinada conforme as normas estabelecidas nas estratgias de vacinao. Comportamento das pessoas que aumenta a probabilidade de adquirir ou transmitir uma doena. Aes ou intervenes desenvolvidas com o objetivo de reduzir a morbidade e mortalidade de doenas ao mais baixo nvel possvel.
Cobertura vacinal
Comportamento de risco Controle de qualidade
Virologia | 143
Doena emergente/ Doena infecciosa recentemente conhecida, cuja incidncia esteja aumentando em um determinado local ou em uma pessoa reemergente especfica. Endemias Enzootia Epidemia a presena contnua de uma doena ou um agente infeccioso em uma rea geogrfica determinada. Presena contnua, ou prevalncia habitual, de uma doena ou agente infeccioso na populao animal de uma rea geogrfica. Manifestao de um nmero de casos de alguma doena, que excede claramente a incidncia prevista, em um perodo de tempo determinado, em uma coletividade ou regio. Cessao de toda transmisso de uma infeco pela extino artificial da espcie do agente em questo. A erradicao pressupe a ausncia completa do risco de reintroduo de uma doena, de forma que permita a suspenso de todas as medidas de preveno e controle. Um pequeno territrio, compreendendo uma ou vrias zonas, onde a circulao do agente causal se estabelece em um ecossistema por um tempo indefinidamente longo, sem a sua importao de outra regio. uma pessoa, animal, objeto ou substncia a partir da qual o agente infeccioso se transmite a um hospedeiro. Organismo simples ou complexo, incluindo o homem, que em circunstncias naturais permite a subsistncia ou o alojamento de um agente infeccioso. aquele em que o parasita chega sua maturidade ou passa por sua fase sexual. aquele no qual o parasita passa por sua etapa larvria ou assexual. Nmero de casos novos de uma doena em uma populao particular durante um perodo especfico de tempo.
Erradicao
Foco natural (nicho)
Fonte de infeco Hospedeiro
Hospedeiro definitivo Hospedeiro intermedirio Taxa de incidncia
Perodo de encubao Infestao
Intervalo de tempo entre a exposio efetiva do hospedeiro suscetvel a um agente biolgico, ou seus produtos txicos, e o incio de sinais e sintomas clnicos da doena neste hospedeiro. Entende-se por infestao de pessoas ou animais, o alojamento, o desenvolvimento e reproduo de artrpodes na superfcie do corpo ou na roupa. Os objetos ou locais infestados so aqueles que albergam ou servem de alojamento aos animais, especialmente artrpodes e roedores. Intervalo entre o incio da infeco e a possibilidade de deteco de anticorpos, atravs de tcnicas laboratoriais. Expressa a ocorrncia de uma doena em uma populao. Os indicadores so as taxas de incidncia e prevalncia. a medida de frequncia de bitos em uma populao durante um determinado perodo, normalmente um ano. Organismo que, vivendo normalmente como comensal ou de vida livre, passa a atuar como parasito. Geralmente coincidindo com uma diminuio da resistncia natural do hospedeiro. Epidemia que alcana grandes extenses geogrficas, de forma quase simultnea ou com deslocamento de um continente a outro. Capacidade de um agente biolgico de produzir doena em um hospedeiro suscetvel. Pessoa ou animal infectado que alberga um agente infeccioso especfico de uma doena, sem apresentar sintomas clnicos desta, e que constitui fonte potencial de infeco. Nmero de casos existentes em um determinado momento, em uma populao definida. Intervalo de tempo entre os primeiros sintomas da doena e o incio dos sinais ou sintomas caractersticos da doena a qual se pode estabelecer o diagnstico.
Janela imunolgica Morbidade Mortalidade Oportunista
Pandemias
Patogenicidade Portador
Taxa de prevalncia Perodo Prodrmico
Virologia | 145
Reservatrio de agentes infecciosos
Qualquer ser humano, animal, artrpode, solo, matria ou uma combinao deles, nos quais normalmente vive e se multiplica um agente infeccioso, do qual depende para a sua sobrevivncia, de maneira que possa ser transmitido a um hospedeiro suscetvel. Ocorrncia de dois ou mais casos de um evento de sade vinculados epidemiologicamente. Transferncia do agente etiolgico por meio de veculos animados ou inanimados. Para que a transmisso indireta possa ocorrer, essencial que os germes sejam capazes de sobreviver fora do organismo durante um certo tempo e que exista um veculo apto que leve os germes de um lugar para outro, de modo que permita a sobrevivncia do agente. Ser vivo (inseto ou outro animal) que assegura a transmisso de um agente infeccioso. Grau de patogenicidade de um agente infeccioso, indicado pelas taxas de letalidade ou por sua capacidade de invadir e lesar os tecidos do hspede, ou por ambos os parmetros. Infeco ou doena infecciosa transmissvel, em condies naturais, dos animais vertebrados para os humanos.
Surto Transmisso indireta
Vetor Virulncia
Zoonoses
A epidemiologia viral consiste na relao entre o agente viral e o meio ambiente, ou meio externo. Nesta interao, a maioria dos vrus no vivel no ambiente por longos perodos. Dessa forma, a transmisso de um vrus pode ser invivel devido sua inativao no ambiente. A epidemiologia a cincia que estuda as doenas em uma determinada populao. Alm disso, investiga os fatores envolvidos na manuteno e transmisso das infeces, sua dinmica e distribuio. A complexidade dessas interaes bastante varivel e pode envolver vrias espcies. Algumas infeces virais se mantm em uma populao atravs de uma cadeia de sucessivas infeces agudas entre o hospedeiro de uma nica espcie animal. Mas existem vrus que so capazes de infectar vrias espcies de hospedeiros.
A fonte de infeco (hospedeiro ou reservatrio) qualquer vertebrado que esteja infectado e seja capaz de transmitir o agente para outros suscetveis. Esses hospedeiros podem ser classificados como portadores ou doentes. Estes ltimos so os que manifestam os sinais clnicos da doena e so considerados epidemiologicamente de menor importncia, pois so facilmente reconhecidos e diagnosticados, permitindo a adoo de medidas de controle. Por outro lado, os portadores geralmente so assintomticos, transmitindo a doena por um maior perodo, por serem dificilmente identificados. Com relao aos indivduos portadores, podemos classific-los em: a) Portadores ativos. Podem se dividir em permanentes ou temporrios. Os permanentes excretam os vrus continuamente, como, por exemplo, os animais infectados com o vrus da diarreia bovina (BVDV); e os temporrios excretam o agente apenas por determinados perodos. b) Portadores prodmicos ou em perodo de incubao. Estes portadores, alm de disseminarem o vrus no ambiente ou a outros hospedeiros suscetveis, podem continuar disseminando o vrus aps a resoluo da doena clnica.
6.1. Cadeia de infeco
Para a manuteno do processo infeccioso so necessrios:

Penetrao e replicao do agente viral no hospedeiro. Produo da prognie vivel. Prognie deve ser excretada do hospedeiro a tempo, pela via adequa-
da e em quantidade suficiente para permitir sua transmisso a outros hospedeiros.

O agente viral deve resistir s adversidades do ambiente o tempo
necessrio para encontrar o hospedeiro suscetvel.
Virologia | 147
6.2. Interao vrus/hospedeiro
O encontro do vrus com o hospedeiro suscetvel torna possvel a infeco viral. Esta interao consiste das seguintes etapas:
Penetrao do agente viral, a qual deve ocorrer pela via adequada. Replicao nos tecidos e rgos-alvo. Resistncia resposta imune do hospedeiro. Produo da prognie viral. Nova excreo viral.
A transmisso de um agente viral pode ser direta, ou seja, de um hospedeiro para outro. Neste caso, as condies ambientais so menos relevantes. Entretanto, a transmisso pode ser tambm por contato indireto, atravs da manipulao de objetos contaminados ou artrpodos. Neste caso, as condies ambientais so mais importantes no processo de transmisso. Para que o agente viral excretado entre em um novo hospedeiro, a suscetibilidade do indivduo deve se sobrepor sua resistncia ao vrus. Na suscetibilidade esto associados vrios aspectos, como espcie, raa, sexo, idade, exposio prvia ao agente, estado nutricional e fisiolgico, e outros. Todos esses aspectos contribuiro para a suscetibilidade ou resistncia ao agente viral. A perpetuao de uma determinada infeco viral dependente do nmero de hospedeiros suscetveis. Caso isto no ocorra, o vrus pode ser extinto em uma dada populao.
6.3. Mecanismos de Transmisso
Para a entrada do vrus na clula, este deve, inicialmente, se adsorver ou se ligar a receptores existentes na superfcie das clulas do hospedeiro e, a partir da, penetrar. A maioria dos vrus entra no hospedeiro atravs das mucosas dos tratos respiratrio e gastrointestinal. Alguns vrus invadem o hospedeiro pelas mucosas urogenital e conjuntiva. Nesta primeira, temos como exemplo o vrus da imunodeficincia humana (HIV). Alguns vrus so introduzidos no
hospedeiro diretamente atravs do sangue, como o caso dos vrus da hepatite B e o prprio HIV (Quadro 2). Quadro 2- Principais vias de entrada dos vrus associados s infeces em humanos
Via de entrada Injeo Grupo de vrus
Retrovrus Hepadnavrus Herpesvrus Flavivrus Togavrus Rabdovrus
Produo de sintomas locais na porta de entrada
Vrus da imunodeficincia humana Hepatite B
Produo de infeco generalizada associada doena de rgos especficos
Picadas e mordidas Boca, trato intestinal
Vrus Epstein-Barr, citomegalovrus Muitas espcies, incluindo o vrus da febre amarela Muitas espcies, incluindo o vrus da dengue e das encefalites equinas Vrus da raiva
Reovrus
Picomavrus Herpesvrus Adenovrus Poxvrus Herpesvrus Papovarrus Coronavrus Paramixovrus Ortomixovrus Togavrus Picomavrus Poxvrus Herpesvrus Adenovrus
Rotavrus
Vrus Epstein-Barr, herpes vrus simples Algumas espcies Vrus do molusco contagioso, vrus orf Herpesvrus simples Papiloma vrus Maioria das espcies Citomegalovrus Vrus da parainfluenza, vrus Vrus da caxumba, vrus sincial respiratrio do sarampo Vrus da influenza Vrus da rubola Rinovrus Alguns enterovrus Vrus da varola (extinto) Vrus Eptein-Barr, herpesvrus simples Maioria das espcies Vrus da varicela Alguns enterovrus, incluindo poliovrus e vrus da hepatite A Citomegalovrus
Pele, traumatismo leve Vias respiratrias
Virologia | 149
6.3.1. Mucosa 6.3.1.1. Trato respiratrio
O trato respiratrio a principal via de entrada do vrus no organismo. Seus mecanismos de defesa compreendem: a presena de clulas epiteliais ciliadas, muco, anticorpos secretrios da classe A, clulas fagocitrias alveolares, dentre outros. Alguns desses mecanismos auxiliam na remoo de partculas estranhas. Muitas vezes, os vrus ultrapassam essas barreiras, principalmente quando h um imunocomprometimento. Inicialmente, esses agentes se replicam nas clulas epiteliais, produzindo uma infeco localizada, podendo ser disseminada, rapidamente, com o auxlio dos fludos locais. A infeco localizada no est, necessariamente, relacionada a uma doena mais amena, pois, em muitos casos, grandes reas do trato respiratrio podem estar acometidas, causando uma enfermidade severa. A excreo das partculas virais, por esta via para o ambiente, favorece a rpida disseminao viral entre os indivduos.
Exemplos dos vrus que causam infeco localizada no trato respiratrio:
Vrus da influenza, Vrus Parainfluenza, Rinovrus, Vrus Respiratrio Sincial e Adenovrus.

Exemplos de vrus que infectam atravs do trato respiratrio e causam infeco
disseminada: Vrus da Caxumba, Vrus do Sarampo e Vrus da Rubola.

6.3.1.2. Trato gastrointestinal
Nesta via a infeco dada principalmente pela ingesto de alimentos ou gua contaminados, podendo ocorrer tambm pelo compartilhamento de talheres e copos utilizados por pessoas infectadas. A via de entrada a orofaringe, onde esses agentes se concentram ou so transportados para o trato gastrointestinal. J a excreo viral feita pelas fezes, completando o ciclo oral-fecal.
O trato gastrointestinal, por sua vez, protegido contra os agentes infecciosos por imunoglobulinas secretoras (IgA), muco, cidos gstricos, sais biliares, enzimas proteolticas, dentre outros. Alm desses, o peristaltismo um importante mecanismo para manter o alimento e o agente em movimento, dificultando o estabelecimento da infeco. Em situaes extraordinrias, pode ocorrer o inverso, ou seja, um movimento antiperistltico, cuja funo a eliminao do microrganismo. Em geral, os vrus que causam infeco intestinal so cido-bile resistentes.
Exemplos dos vrus que causam infeco localizada na boca e orofaringe:
Vrus do Herpes Simplex, Vrus Epstein-Barr e Citomegalovrus.

Exemplos de vrus que infectam o trato gastrointestinal, produzindo
enterites: Rotavrus, Vrus Norwalk e Astrovrus.

Exemplos de vrus que infectam atravs do trato gastrointestinal e
causam infeco disseminada: Vrus da hepatite A, Vrus da Hepatite E e Poliovrus.

6.3.1.3. Trato gniturinrio
uma via de entrada para vrios tipos de vrus, principalmente os que utilizam via sexual. A contaminao dada pelas diversas formas de contato sexual entre indivduos e por instrumentos cirrgicos ginecolgicos e roupas ntimas contaminadas (fmites). O pH, a microbiota e o muco local constituem uma importante proteo desta via. Assim como nos tratos discutidos anteriormente, o vrus pode se alojar localmente ou disseminar para outras reas.
Exemplos dos vrus que causam infeco localizada no trato gnito-
urinrio: Vrus do Herpes simplex, Vrus do Papiloma.

Exemplos de vrus que infectam o trato gniturinrio, produzindo
infeces sistmicas: Citomegalovrus, Vrus de Hepatite B e C e HIV.
Virologia | 151
6.3.1.4. Conjuntiva
O acometimento da conjuntiva pode se dar por infeco dos olhos pelas mos ou objetos contaminados. Pode ser causada, na maior parte das vezes, por um Adenovrus, que normalmente causa o resfriado comum, permitindo a transmisso por gotculas de tosse e por espirros. Embora menos resistente que a pele, a conjuntiva constantemente lavada pela secreo lacrimal, que funciona como uma barreira bioqumica, contendo principalmente a lisozima6 IgA secretria. A conjuntiva ainda protegida fisicamente pelos clios e movimentos das plpebras, os quais auxiliam na manuteno da lubrificao dos olhos.
Exemplos dos vrus que infectam por meio da conjuntiva: Enterovrus e
Adenovrus.
6.3.2. Pele
Esta uma porta de entrada de vrios agentes microbianos. Apesar de a picada dos artrpodes e a contaminao via sangunea terem como primeiro acesso a pele, optamos por separ-los deste item para uma melhor compreenso do ciclo de transmisso viral. A infeco da pele possvel atravs do contato direto com leses de pessoas infectadas, mordida de animais vertebrados, objetos contaminados (ex: alicates) e a presena de soluo de continuidade, permitindo a penetrao do vrus. Sua proteo se deve ao epitlio estratificado da pele, pH, cidos graxos (gordura), secrees (suor), e os pelos que revestem a epiderme.
Exemplos dos vrus que causam leses cutneas localizadas: Papilomavrus,
Poxvrus.
6
Enzima microbicida
Exemplos de vrus transmitido por mordida de animal: Vrus da Raiva
(Rhabdovrus).
6.3.3. Sangue
A infeco do sangue pode ocorrer por meio de compartilhamento de seringas, transfuso sangunea e transplante de rgos. A proteo desta via, alm da pele e da mucosa (porta de entrada), o prprio sistema imunitrio, j que envolve componentes sanguneos (clulas, sistema complemento, imunoglobulinas, etc.) para o combate da infeco. Esta defesa pode ser burlada pelos vrus, atravs dos mecanismos de escape ou mesmo pelo fato de alguns vrus possurem tropismo por clulas do sistema imune.
Exemplos de vrus transmitidos por via iatrognica (agulhas, material
cirrgico): HIV, Vrus da Hepatite B e C.

6.3.4. Vetores
Alguns vrus, denominados Arbovrus, so transmitidos estritamente por vetores, como os mosquitos, os quais tm o papel de carre-los e transmiti-los, atravs da picada, para os hospedeiros vertebrados. Esses agentes so armazenados, podendo se replicar no interior dos artrpodes sem causar danos a estes.
Exemplos de vrus transmitidos por artrpodes: vrus da dengue e da
febre amarela.
6.3.5. Transmisso Vertical
Esta transmisso ocorre da me para o filho e pode ser, via placenta ou congnita, no momento do parto ou perinatal7, ou ainda pela exposio psparto, via amamentao.
7
sangue e secrees
Virologia | 153
Como barreiras de proteo, a me passa para seu filho, por via placentria, imunoglobulinas IgG e pela amamentao, em especial no colostro, IgA. O feto e o recm-nascido, por sua vez, produzem a IgM em resposta a uma infeco.
Exemplos de vrus transmitido por via placentria: vrus da rubola e
citomegalovrus.
7. Profilaxia
A profilaxia das doenas virais segue os mesmos princpios da de outras doenas infectoparasitrias, que englobam a implantao de polticas de sade pblica. Dentro desse contexto, a educao assume um papel fundamental, pois necessria a informao para a sociedade sobre o agente etiolgico, formas de transmisso, a sintomatologia e os fatores de risco para que haja um controle eficaz da doena. As doenas virais podem ser transmitidas de diversas maneiras, como comentado anteriormente. Dessa forma, aos vrus que so contrados por via oral, merecem que seja dada uma ateno especial no saneamento bsico, controle da gua e alimentos ingeridos e higiene de forma geral, principalmente das mos. Em relao transmisso por via respiratria, devem-se evitar ambientes fechados e, em casos de epidemias, pacientes infectados devem ser isolados e seus contactantes mantidos em monitoramento. Caso seja necessrio, devem ser realizados programas de preveno, como a distribuio de mscaras para a populao. Para vrus transmitidos via parenteral, a profilaxia enfoca os bancos de sangue, o cuidado no uso de material descartvel (luvas, agulhas, etc...) e instrumentos cirrgicos ou odontolgicos. As doenas sexualmente transmissveis (DST) abrangem as campanhas de uso de preservativos e de vacinao, quando existentes. E ainda, os vrus transmitidos por vetores tm como principal ponto profiltico o controle ou a erradicao destes insetos.
A imunizao do indivduo feita por meio da inoculao do prprio agente viral modificado (atenuado ou morto) ou parte deste. O tempo de imunidade, conferida pelas vacinas, varia de acordo com as caractersticas dos respectivos vrus, tornando necessria, em muitos casos, a reimunizao (reforo vacinal). A vacinao tem sido a forma mais eficaz de prevenir algumas doenas, as quais podem ser fatais em determinados indivduos. A infeco pelo vrus influenza em idosos, por exemplo, pode apresentar complicaes severas e at mesmo o bito. Desta forma, a vacinao em idosos, de um modo geral, ameniza a severidade da doena. Cada pas possui uma relao de vacinas em suas campanhas, de acordo com as doenas presentes em seu territrio. Desde o nascimento do beb at a terceira idade existe um programa de imunizao obrigatrio. Algumas vacinas so apenas necessrias em alguns casos como, por exemplo, em viagens para regies endmicas. Casos especiais devero ser avaliados, como os de alergias aos componentes das vacinas, os de gravidez e os de imunizao com vrus vivo, o qual no pode ser administrado em indivduos imunodeprimidos. Como vimos, vrias doenas podem ser prevenidas por vacina, evitando possveis complicaes e at mesmo o bito em determinadas classes de indivduos. Dentre estas vacinas, possvel prevenir vrias doenas, como febre amarela, hepatite B, sarampo, poliomielite e outras. Desde 1937, a Fiocruz (antigo Instituto Soroterpico de Manguinhos) desenvolve a tcnica da produo da vacina contra febre amarela, inoculando o vrus 17D em ovos de galinha embrionados (SPF). O tempo de imunidade conferida por esta vacina de 10 anos e contraindicada em indivduos com histrico de alergia s protenas do ovo e da galinha.
Virologia | 155
Figura 7. Produo de vacina contra febre amarela 1959 - Fiocruz (arquivo particular do Dr. Jos Fonseca da Cunha)
Outra doena prevenvel por vacina, principalmente para os profissionais da sade, a hepatite, causada pelo Vrus da hepatite B, que pode levar a um quadro severo, crnico e fatal. Alm disso, a hepatite B umas das principais causas de cncer de fgado. Assim, a vacina para combater esse vrus previne no apenas a hepatite B, mas tambm o desenvolvimento de cncer heptico. A produo dessa vacina baseia-se no emprego de fragmentos de antgeno s do Vrus da hepatite B (HbsAg), um importante imungeno, para a induo da formao de anticorpos, o que no representa um risco de causar a doena. Como tambm verificado anteriormente, para a febre amarela, a durao da imunizao, nesse caso, de 10 anos, conferida aps um correto esquema de vacinao (trs doses com intervalos de 1 a 3 meses). A vacina contra o sarampo produzida por Biomanguinhos, unidade da Fiocruz desde 1982, empregando a tecnologia fornecida pelo Instituto Biken por cooperao entre o Brasil e o Japo. Nesta vacina, o vrus inoculado em clulas denominadas fibroblastos de pinto, obtidas de embries de galinha com 10 a 11 dias de desenvolvimento, utilizando a cepa Biken CAM 70.
As campanhas de vacinao contra o sarampo em crianas menores de um ano permitiram uma reduo do nmero de casos a partir de 1992. A poliomielite foi considerada erradicada do Brasil, graas s contnuas campanhas de vacinao no nosso pas utilizando a vacina Sabin, coordenadas pela Organizao Mundial da Sade (OMS). Entretanto, o vrus ainda circula em diversos pontos do mundo, como em alguns pases da frica e da sia. Sabin a vacina utilizada em imunizaes de rotina no Brasil. Os principais alvos das campanhas so as crianas menores de 5 anos que recebem a vacina e comeam, ento, a eliminar os vrus junto com as fezes por cerca de um ms e meio, o que pode levar a uma vacinao secundria de outras pessoas. Os indivduos imunizados produzem anticorpos contra os trs sorotipos (1, 2 e 3). Atualmente, existem vrios tipos de vacinas, como as atenuadas, as inativadas, as de subunidades, as recombinantes e as de cido nucleico ou de DNA, ainda em fase de estudos clnicos. As atenuadas consistem na presena do agente viral vivo modificado, principalmente por passagens sucessivas do agente viral em culturas celulares, permitindo ao vrus a perda da capacidade patognica, mas mantendo sua capacidade replicativa. Esta vacina tem como principal vantagem a induo de excelente resposta imunolgica pelo hospedeiro. Mas, por outro lado, no deve ser usada por indivduos imunodeficientes, pois pode haver a reverso de vrus vacinal a selvagem nestes indivduos. Como exemplo desta vacina temos a Sabin, vacina oral contra a poliomielite. As vacinas inativadas so constitudas por vrus mortos por processos fsicos, como a temperatura, ou por processos qumicos, como o formaldedo. A vantagem desta vacina que pode ser utilizada em qualquer indivduo, pois no h a possibilidade de reverso do vrus vacinal a selvagem. No entanto, a desvantagem que a resposta imunolgica no to boa. A vacina contra a raiva exemplifica esta categoria de vacinas. As vacinas de subunidades consistem de fragmentos do agente viral, os quais so molculas importantes na induo de anticorpos protetores como,
Virologia | 157
por exemplo, a vacina contra a influenza, que consiste das hemaglutininas e neuraminidases do vrus. A grande vantagem destas vacinas no expor o indivduo ao agente viral como um todo. As vacinas atenuadas so as mais antigas, surgiram h mais de 200 anos, marcando o incio da imunologia como cincia. Estas vacinas foram desenvolvidas por um pesquisador ingls chamado Edward Jenner, o qual utilizou o vrus da vaccnia para imunizaes contra a varola, doena epidmica, responsvel pela morte de milhes de pessoas. O chamado vrus vaccnia, causava leses em bovinos e Jenner observou que ordenhadores raramente tinham varola. Ele teve a ideia de coletar o vrus de animais e us-lo, com sucesso, para vacinar pessoas contra a varola. A varola considerada a nica doena mundialmente erradicada, pois no existe mais a circulao desse vrus, graas s campanhas de vacinao. A Organizao Mundial da Sade declarou a varola como erradicada no mundo no dia 8 de maio de 1980. Da mesma forma, havia uma previso de erradicao da poliomielite at o ano de 2002. Mas, apesar do intenso esforo de todos os pases, isso ainda no aconteceu. Com a introduo da biologia molecular, foi possvel a fabricao de vacinas recombinantes, as quais apresentam pequenos peptdeos originados de alguma protena viral. A obteno destas molculas s possvel atravs da tecnologia da recombinao gnica. A vacina contra a hepatite B, atualmente usada no Brasil, segue esta tecnologia de fabricao. Ainda em fase de estudos pr-clnicos e clnicos, as vacinas de DNA podero ser a sada para prevenir algumas doenas virais, as quais so causadas por vrus de alta capacidade de mutao e alto grau de virulncia, como o Vrus da Imunodeficincia Humana (HIV).
8. T Tratamento ratamento
O controle de algumas doenas virais atravs da quimioterapia foi uma grande conquista das ltimas dcadas. Devido caracterstica peculiar dos vrus, que a de agir como um parasita intracelular obrigatrio, durante muito tempo achou-se que seria impossvel o desenvolvimento de drogas contra estes agentes. Mas a identificao de enzimas produzidas por estes prprios agentes, e que os possibilitam replicar no interior das clulas, impulsionou os estudos de drogas capazes de inibir tais enzimas, de modo a no danificar as clulas do hospedeiro. Considerando que todas as fases do ciclo de replicao viral requerem a participao de uma enzima, o bloqueio de qualquer uma das referidas fases acarretaria na no formao da partcula infecciosa. Tais etapas do ciclo de replicao viral incluem: adsoro, desnudamento, sntese, maturao e liberao da prognie viral da clula hospedeira. As drogas antivirais podem atuar interferindo em qualquer uma das etapas da replicao viral, como a adeso clula, a penetrao, a eliminao do envoltrio viral para liberar seu material gentico e a produo de novas partculas virais por parte da clula. Como os vrus somente replicam no interior das clulas e utilizam as mesmas vias metablicas que as clulas sadias, as drogas antivirais so frequentemente mais txicas para as clulas humanas que os antibiticos. Um outro problema das drogas antivirais que o vrus pode desenvolver rapidamente resistncia a elas mesmas. Na tabela a seguir, encontram-se algumas drogas antivirais, os vrus suscetveis e os seus respectivos stios-alvos.
Virologia | 159
Quadro 4. Mecanismos bsicos de ao de drogas antivirais

Drogas antivirais Saquinavir Indinavir Azatavir Ritonavir Nelfinavir Amprenavir Lopinavir Tipranavir Darunavir Enfuvitide Antiherpticos Aciclovir Cidofovir Docosanol Famciclovir Foscarnet Formivirsen Ganciclovir Idoxuridina Penciclovir Antiinfluenza Amantadina Oseltamivir Rimantadina Zanamivir Peramivir Antihepatite Adefovir Lamivudina Entricitabina Outros Imiquimod Interferons Ribavirina
A N T I R E T R O V I R
A I S
Inibidores de proteases
Inibidores de fuso Inibidores de transcriptase reserva
Zidovudina Trifluridina
Anlogo de No anlogo nucleotdeo de nucleosdeo
Didadosina Estavudina Zalcitabina Lamivudina Entricitabina Abacavir Neviparina Efavirenz Delavirdina Tenofovir Adefovir
Brivudina Valaciclovir Valganciclovir Vidarabina
Anlogo de nucleosdeo
Mecanismos gerais de ao dos antivirais:

Amantadina (1966) e Rimantadina (1993): inibem a penetrao da
partcula viral no hospedeiro, bloqueiam a desencapsulao do genoma viral e a sua subsequente transferncia para a clula hospedeira.
Zanamivir e Oseltamivir: inibidores da neuraminidase. Paramivir: impede a liberao de novos vrus da clula infectada. Aciclovir, Valaciclovir, Penciclovir e Fanciclovir: Inibio competitiva
da DNA polimerase. O trifosfato de Aciclovir incorporado no DNA viral, impedindo o alongamento da cadeia de DNA. No caso do Valaciclovir, este convertido em Aciclovir quando ingerido. J o Penciclovir apresenta potncia cem vezes menor que o Aciclovir.
Ganciclovir e Valganciclovir: atuam na terminao da cadeia por
fosforilao, at a forma GCV monofosfato na posio 3. A repetio de cadeia redundante, a no ser que seja realmente necessria.
Cidofovir: atua na terminao da cadeia por fosforilao, at a forma
difosfato, e na incorporao na posio 3.

Foscarnet: inibe a DNA polimerase, a RNA polimerase e a
transcriptase reversa.
Fomivirsem: complementar sequncia de bases, hibridiza-se e blo-
queia a expresso (translao) do RNAm do CMV, inibindo a sntese de protenas e a replicao viral.
Interferons: liga-se a receptores de superfcie em clulas infectadas,
inibindo a transcrio e a traduo de RNAm viral.

Imiquimod: indutor tpico de citocinas que potencializa a produo
de alfa-interferon, o qual apresenta efeito antiviral, antiproliferativo e antiangiognico.
Virologia | 161
9. Diagnstico Laboratorial
Os diferentes mtodos de diagnstico dos vrus permitem a identificao da morfologia e das protenas, alm do cido nucleico. Muitas vezes necessrio utilizar mais de um mtodo, a fim de se ter uma melhor definio diagnstica, j que existem diferentes vrus que apresentam morfologia semelhante. Desta forma, o diagnstico no pode ser baseado apenas neste aspecto morfolgico outros aspectos devero ser considerados para um diagnstico preciso. Com a utilizao de animais de laboratrio e das culturas de clulas, possvel isolar e identificar estes agentes. Devido dificuldade do isolamento de um vrus a partir de espcimes clnicos (secrees diversas, urina, fezes, lquido cefalorraquidiano, pele, lquido pleural, saliva, soro, etc.), os ensaios sorolgicos so uma alternativa e permitem a avaliao indireta do vrus, pela deteco de anticorpos especficos, tanto na fase aguda da doena, quanto na de convalescena. A realizao dos ensaios laboratoriais para o diagnstico viral deve obedecer a todas as normas de Biossegurana e boas prticas de paboratrio (ver captulo 1 do volume 1).
9.1. Isolamento dos vrus
Os vrus, ao contrrio de outros microrganismos, s se replicam em clulas vivas. Desse modo, seu isolamento apenas possvel quando se utiliza um hospedeiro vivo, como a cultura de clulas, os animais de laboratrio e os ovos embrionados.
9.1.1. Cultura de clulas
As clulas de mamferos foram cultivadas pela primeira vez em laboratrio h pouco mais de 70 anos. Em meados do sculo XX, um grupo de pesquisadores isolou o Poliovrus em cultura de clulas. A partir da, uma
infinidade de famlias virais foi isolada e identificada, sendo algumas destas no associadas s doenas da poca (ver detalhes no captulo 4 do volume 2). Por meio da microscopia tica, a presena do vrus identificada de forma indireta, atravs de alteraes morfolgicas na clula, denominadas efeito citoptico (CPE).
9.1.2. Animais de laboratrio
Esse mtodo no muito utilizado atualmente por dois motivos principais: o primeiro, pela dificuldade de aprovao do uso pelo Comit de tica de Animais de Laboratrio e de Biossegurana, que sugere, quando vivel, a utilizao de outros mtodos; o segundo, pelo tempo demandado para o desenvolvimento da doena no animal. Na maioria das vezes no possvel reproduzir a doena humana em animais, sendo difcil a correlao com a encontrada em humanos. (ver captulo 4 do volume 1).
9.1.3. Ovos Embrionados
Os ovos utilizados para o cultivo de alguns vrus so os de galinha embrionados, como SPF (Specific Pathogen Free). A escolha destes se deve a cinco critrios:
Disponibilidade do material. Facilidade de crescimento e manipulao, uma vez que no necess-
rio cuidado com manejo e alimentao.

Meio constante com composio qualitativa, possuindo grande con-
centrao de nutrientes.
Ausncia da produo de anticorpos pelo embrio (livre de patgenos); Meio estril, enquanto o ovo estiver fechado.
Virologia | 163
Neste hospedeiro, existem diferentes stios para a inoculao do vrus (saco alantide, cavidade amnitica, membrana corio-alantoide e gema). A escolha de um deles dependente do tropismo viral. A confirmao da infeco baseada na presena de membrana (efeito citoptico), deformao e morte do embrio. Os procedimentos que devem ser seguidos para a realizao desta tcnica so:
Manuteno do ovo de galinha embrionado SPF em estufa a 37 graus
Celsius, com umidade de 55% e sob constante movimento, simulando a situao real (chocadeira mecnica).
Antes da inoculao indispensvel a inspeo dos ovos, atravs do
ovoscpio8. Todos os embries devem estar vivos.

Em mdia, o material suspeito inoculado de 6 a 8 dias aps a
inspeo dos ovos.

Escolher a regio para a inoculao de acordo com o tropismo do
vrus, sendo:
Regio Saco alantoide Cavidade amnitiva Membrana corioalantoide Saco vitelino Inoculao de Vrus da gripe e da caxumba Vrus da encefalite Vrus da herpes, varola e sarampo Vrus da raiva
Equipamento de iluminao utilizado para visualizar o interior do ovo.
Figura 8. Esquema do ovo embrionado de galinha - desenhado por Raphael dos Santos Stephens.
9.2. Identificao direta e indireta dos vrus
O diagnstico pode ser feito pela deteco direta do vrus, ou por parte dele, como as protenas e o cido nucleico. Assim como possvel fazermos o diagnstico indireto, identificando alteraes causadas pelo agente ou pelos anticorpos gerados devido presena dos vrus.
9.2.1. Microscopia eletrnica (ME)
A ME utiliza o microscpio eletrnico, o qual emite feixes de eltrons sobre o material, de modo que a visualizao do objeto seja possvel. Este mtodo se subdivide em microscopia eletrnica de varredura e de transmisso. Os eltrons transmitidos, parcialmente absorvidos pelo objeto, servem para formar a imagem no microscpio eletrnico de transmisso. Na microscopia de varredura so produzidas imagens de alta resoluo a partir da superfcie de uma amostra, demonstrando uma aparncia tridimensional caracterstica, que so teis para avaliar a estrutura superficial de uma determinada partcula (ver captulo 1 do volume 2).
Virologia | 165
9.2.2. Ensaios imunolgicos
A resposta imune tem papel fundamental na defesa contra agentes infecciosos e constitui o principal impedimento para a ocorrncia de infeces disseminadas, habitualmente associadas com um alto ndice de mortalidade. Os mtodos mais empregados para o diagnstico virolgico, devido sua praticidade e seu baixo custo em relao aos outros, so os que se baseiam na interao de alguns antgenos virais com anticorpos especficos. Os anticorpos e os antgenos virais podem ser dosados a partir de secrees seromucosas, como urina, fezes, lquido cefaloraquidiano, tecidos, soro, etc. A quantidade e as caractersticas dos anticorpos e antgenos obtidos so determinadas utilizandose ensaios. Estes ensaios so designados de sorolgicos, pois inicialmente utilizou-se soro para a realizao de tais mtodos. Algumas modalidades destes mtodos so: neutralizao, precipitao, aglutinao, imunocitologia e imunoenzimticas (ver captulo 1 do volume 4).
9.2.2.1. Neutralizao de vrus com anticorpos
Em nvel celular, as alteraes nas clulas infectadas por vrus variam de morfolgicas a de crescimento, como arredondamento celular, presena de incluses, rompimento e fuses celulares. As tcnicas de neutralizao com anticorpos se baseiam na infeco viral em cultura de clulas e o bloqueio da replicao viral por anticorpos neutralizantes. Este mtodo mede a capacidade dos anticorpos, presente nas amostras de soro do paciente, em neutralizar os vrus, ou seja, reduzir ou eliminar o efeito citoptico produzido pelos vrus nas clulas infectadas. A soroneutralizao um ensaio que permite a titulao dos anticorpos para determinados vrus, presentes no sangue do paciente.
9.2.2.2. Precipitao
As reaes de precipitao podem ser realizadas em meio lquido ou gelatinoso. Existem duas modalidades desta reao:
A) Imunodifuso Radial Simples No gel de agarose que recobre uma lmina de vidro, o soro especfico incorporado e, em orifcios feitos no gel, so adicionadas diferentes concentraes do antgeno. Durante a incubao, ocorre a difuso do antgeno na agarose, com a formao de complexos antgeno-anticorpo. Os complexos precipitam e formam um halo ao redor do orifcio. Esta reao visualizada pela colorao do gel aps o trmino da reao. B) Imunodifuso Dupla Introduzem-se anticorpos e antgenos em diferentes zonas de um gel de agar. Durante a incubao, ocorre a difuso do anticorpo em direo ao antgeno, ou vice-versa. Ocorre ento a formao de complexos antgenoanticorpo insolveis, que precipitam e iro formar linhas entre os orifcios. a formao da linha de precipitao (identidade) que indica a presena de anticorpos ou antgenos especficos.
9.2.2.3. Inibio de Hemaglutinao
Esta metodologia se baseia na propriedade de certos vrus em aglutinar hemcias. A reao consiste em reagir diluies dos soros do pacientes com um antgeno hemaglutinante, previamente titulado. Havendo anticorpos na amostra, estes iro inibir a hemaglutinao. Caso contrrio, o vrus ir aglutinar as hemcias.
9.2.2.4. Imuno-histoqumica
uma tcnica que permite localizar componentes tissulares in situ de forma direta ou indireta, e est baseada na conjugao de marcadores (fluorocromos, enzimas, dentre outras) a molculas de imunoglobulina, a fim de se visualizar a reao antgeno-anticorpo.
Virologia | 167
A) Imunoperoxidase Tcnica que utiliza como marcador a enzima peroxidase, originando uma molcula visvel ao microscpio ptico. Esta tcnica muito utilizada para o diagnstico de HPV. B) Imunofluorescncia Tcnica que utiliza como marcadores compostos como a fluorescena e a rodamina, que ao serem expostos luz Ultravioleta do microscpio de fluorescncia, emitem uma fluorescncia que visvel aos nossos olhos. Esta tcnica muito utilizada para o diagnstico de vrias doenas virais como Citomegalovrus e HIV.
9.2.2.5. Ensaio imunoenzimtico
A) Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay ELISA Este um dos principais mtodos utilizados para o diagnstico de doenas virais, permitindo a deteco de anticorpos especficos no soro ou plasma sanguneo. Este ensaio baseia-se na reao antgeno-anticorpo, onde uma das duas molculas marcada com uma enzima como, por exemplo, a peroxidase. Neste ensaio inclui-se tambm uma substncia cromognica e um substrato especfico para a enzima. A positividade do resultado est relacionada presena de cor, significando que houve reao de um antgeno. A intensidade da cor permite uma anlise quantitativa do resultado. B) Immunoblotting um mtodo utilizado para determinar a quantidade relativa e o peso molecular de uma protena presente em uma mistura de protenas ou de outras molculas. A mistura primeiramente submetida a uma separao analtica, geralmente por eletroforese em gel de poliacrilamida
(SDS-PAGE), de modo que as molculas sero separadas de acordo com os seus pesos moleculares. O espectro de protenas separadas ento transferido do gel para uma membrana suporte, por ao de capilaridade ou eletricidade (eletroblotting), de modo que a membrana adquira uma rplica do espectro das molculas. A posio do antgeno proteico na membrana pode, ento, ser detectado pelo acoplamento de um anticorpo marcado, especfico para aquela protena. Este mtodo pode ser usado como confirmatrio para o HIV.
9.3 Ensaios Moleculares
9.3.1- PCR (reao em cadeia da polimerase)
Praticamente qualquer microrganismo pode ser pesquisado pela tcnica da PCR. Agentes como vrus, bactrias, fungos e protozorios podem ser identificados nos mais diferentes tipos de amostras e lquidos biolgicos. A capacidade de amplificar muitas vezes o cido nucleico viral permite que, atravs desta tcnica, uma pequena quantidade de partculas virais sejam detectadas. A reao em cadeia da polimerase (PCR) uma tcnica razoavelmente rpida, com elevado grau de sensibilidade e especificidade, utilizando quantidades mnimas de DNA ou RNA. Para esta reao so necessrias algumas enzimas como a DNA polimerase, enzima responsvel pela replicao, uma regio especfica do cido nucleico pesquisado (Primer), nucleotdeos, dentre outros reagentes, alm de equipamentos, como o termociclador.
9.3.2. Hibridizao
Tendo-se em vista que os vrus possuem cido nucleico, o emprego de tcnicas que sejam capazes de detectar esta molcula viral faz-se importante. A hibridizao de fitas de DNA de diferentes fontes forma a base de um conjunto de tcnicas essenciais prtica moderna da gentica molecular. possvel se detectar uma sequncia especfica de DNA ou gene alvo, hibridizando aquela regio alvo
Virologia | 169
com uma sequncia complementar de bases (sonda), usualmente marcada com alguma molcula. O processo de hibridizao molecular pode ocorrer entre duas fitas de DNA /RNA ou entre uma de DNA e outra de RNA. As tcnicas de hibridizao podem variar para se detectar uma molcula de RNA especfico em vez de uma de DNA, o que permitiria verificar se um gene em particular se encontra ativo ou inativo. A Sonda um segmento conhecido de DNA ou de RNA, obtido por clonagem molecular ou sntese qumica, que complementar a uma sequncia de interesse e que contm uma marcao (radioistopo ou marcador qumico), a qual permite a sua visualizao e o acompanhamento da reao. Esse processo altamente especfico e controlvel, e a sensibilidade dos mtodos por sonda pode ser aumentada pela amplificao especfica de algumas sequncias virais por PCR.
10. Caractersticas das principais famlias
A disseminao viral em humanos decorre de milhares de anos, caracterizando a relao mais ntima do homem com outros seres no contexto ambiental. Os vrus tm dimenses em nanmetros, apresentam simplicidade estrutural e dependncia pela clula hospedeira. Por este fato, mantm-se a ideia de que so parasitas intracelulares obrigatrios e tambm so capazes de alterar parcialmente o DNA da clula hospedeira. Os vrus infectam diferentes espcies de hospedeiros; os que infectam animais, principalmente, so, agrupados de acordo com a estrutura de seu genoma e, assim, classificados em famlias (Quadro 1). Os critrios dessa classificao envolvem a natureza do cido nucleico, o que possibilita vrios mecanismos de replicao. Esse processo, assim como a natureza das infeces que causam, tem contribudo com a organizao das caractersticas das famlias virais. A grande maioria dos vrus que infectam vertebrados apresenta o RNA como cido nucleico devido a esse tipo de cido apresentar uma alta taxa mutagnica, que durante a sua evoluo resultou em uma grande diversidade
viral. Por esses vrus serem menos especficos do que os de DNA, infectam uma variedade maior de espcies animais, acarretando vrias zoonoses. Quadro 5. Classificao dos vrus em famlias, com base em algumas de suas propriedades
Genoma e caractersticas fsicas
cido Nucleico DNA Simetria do capsdeo Icosadrica Envelope Natureza fsica dos acdos nucleicos fs Famlia viral
Ausente
Presente
RNA
Complexa Desconhecida ou complexa Icosadrica Ausente Desconhecida ou complexa Icosadrica Helicoidal Presente Ausente Presente
Parvoviridae Papillomaviridae Polyomaviridae Adenoviridae fd Herpesviridae Iridoviridae Poxviridae fd / fs, circular Hepadnaviridae Coronaviridae fs Flaviviridae fs, segmentado Arenaviridae Caliciviridae fs Togaviridae Picornaviridade fd Birnaviridae Retroviridae fs
Astroviridade fs, linear Reoviridae fd, segmentado Orthomyxoviridade Paramyxoviridade fs Rhabdoviridae Filoviridae fs, segmentado Bunyaviridae
fs: fita simples; fd: fita dupla
Virologia | 171
10.1. Parvoviridae
A famlia Parvoviridae engloba os menores vrus DNA existentes, considerando que o prefixo parvo deriva do latim e significa pequeno. Esta famlia est dividida em duas subfamlias: Parvovirinae e Densovirinae (BERNS et al., 1996). A primeira infecta vertebrados e a segunda, invertebrados, principalmente insetos. A subfamlia Densovirinae est dividida em trs gneros: Densovrus, Interavrus e Brevidensovrus. J a subfamlia Parvovirinae constitui-se de outros trs gneros: Parvovrus, Erytrovrus e Dependovrus. O Parvovrus responsvel por infeces de vrios animais, incluindo ces, raposas, sunos e outros. O Erytrovrus, antes descrito como Parvovrus B19, recebeu este nome por seu tropismo pelas clulas eritropoieticas. Este o mais estudado, por estar associado, em humanos, a doenas como o eritema infeccioso, a artropatia e a crise aplstica 9. Alm dos problemas causados na gestao, como o aborto espontneo e a hidropsia fetal 10. Alm disso, a infeco por esses vrus causam efeitos citotxicos e a inibio da eritropoiese O Dependovrus pertence ao grupo vrus Adenoassociado, pois precisam de um vrus auxiliar para uma fase especfica do ciclo (replicao do DNA), seja ele um Adenovrus ou um Herpesvrus. O vrion constitudo por um genoma de DNA linear de fita simples, o qual apresenta de trs a quatro genes. A partcula viral tem um capsdeo com simetria icosadrica, desprovido de envelope. Os Parvovrus no podem induzir a sntese de DNA na clula hospedeira e requerem a diviso celular para a sua replicao. Devido a isso, seus efeitos patognicos esto relacionados a um estgio particular da diferenciao celular. Tais efeitos so mais evidentes no desenvolvimento fetal, especificamente no epitlio intestinal e no sistema hematopoietico.
Evento agudo, transitrio, que complica a anemia hemoltica crnica, caracterizado por uma parada transitria da eritropoiese e uma ausncia de precursores de eritrcitos na medula ssea (Oliveira 1994). 10 caracterizada pelo acmulo anormal de lquidos nos tecidos ou em determinadas cavidades do corpo.
9
A disseminao do vrus ocorre pelas fezes, urina, saliva, secrees nasais e provavelmente por contato com fluidos genitais. Os Parvovrus no se replicam adequadamente em cultura de clulas, por isso, geralmente no se consegue detectar seu efeitos citopticos. Alm disso, no so patognicos na maioria dos hospedeiros adultos. Entretanto, em jovens de algumas espcies, os Parvovrus podem causar drsticos efeitos patognicos.
10.2. Papillomaviridae
At o sexto relatrio de 1995, do ICTV, os gneros Papillomavirus e Polyomavirus pertenciam famlia Papovaviridae. No stimo relatrio foi criada a famlia Papillomaviridae, sendo includo o gnero Papillomavirus. O nome papilomavrus deriva da combinao dos termos papila, de origem latina, diminutivo de papula, projeo ou salincia em forma de mamilo; e oma, de origem grega, que representa as tumoraes ou os entumescimentos. Os vrus desta famlia apresentam capsdeo no envelopado, com simetria icosadrica, com dimetro de 40 a 55 nm e com 72 capsmeros. O genoma representa 10-13% do peso do vrion e alberga uma fita dupla de DNA circular, no segmentado, com 5.300 a 8.000 nucleotdeos; sendo a guanina e a citosina responsveis por 40-50% do contedo. Os vrus dessa famla infectam vertebrados, mais especificamente mamferos, incluindo o homem. A famlia Papillomaviridae constituda pelos 16 gneros, incluindo centenas de tipos virais. Os gneros definidos pelo ICTV so: Alphapapillomavirus , Betapapillomavirus , Gammapapillomavirus , Deltapapillomavirus , Epsilonpapillomavirus , Zetapapillomavirus , Etapapillomavirus , Thetapapillomavirus , Iotapapillomavirus , Kappapapillomavirus , Lambdapapillomavirus , Mupapillomavirus , Nupapillomavirus , Xipapillomavirus, Omikronpapillomavirus e Pipapillomavirus.
Virologia | 173
As espcies de Papilomavrus tm a nomenclatura de acordo com o grupo de seres que elas infectam: Bovine papillomavirus (BPV), Canine papillomavirus, Cottonnail rabbit papillomavirus, Deer papillomavirus, European elk papillomavirus, Human papillomavirus e Ovine papillomavirus. O Papilomavrus humano (HPV) o mais conhecido, sendo o causador de tumores benignos e malignos de pele e das mucosas. O desenvolvimento desses tumores depende de vrios fatores, como tabagismo, alcoolismo, mltiplos parceiros sexuais, incio precoce da vida sexual e gravidez, principalmente antes dos 18 anos. Pertencem ao gnero Papillomavirus e espcie Human papillomavirus. So ainda classificados em gentipos, de acordo com as sequncias do gene L1. O HPV uma das causas de Doenas Sexualmente Transmissveis (DST). A transmisso do HPV ocorre, na maioria dos casos, pelo contato sexual, no precisando necessariamente haver a penetrao, mas apenas com um contato ntimo. Outras formas de contgio, menos frequentes, podem ocorrer pelo uso de instrumentos ginecolgicos no esterilizados, compartilhamento de roupas ntimas contaminadas, dentre outros. Aps a entrada do vrus no organismo, inicia-se o perodo de incubao, que varia de trs semanas a oito meses. Em alguns casos, no ocorrem sintomas da doena (portador assintomtico) e em outros pode levar a neoplasias. O diagnstico pode ser feito atravs dos exames clnico e laboratorial, como Papanicolaou11, Colposcopia12 e bipsia das leses suspeitas. Os mtodos moleculares, como a PCR, so os mais adequados para a caracterizao dos sorotipos virais. O tratamento feito atravs de cauterizao das leses e em casos mais graves recomenda-se a retirada cirrgica da rea afetada.
Exame ginecolgico que consiste na coleta de material do colo uterino para exame em laboratrio por microscopia. 12 Exame clnico onde o mdico avalia as alteraes, usando uma lente de aumento.
11
Para a preveno, o uso da camisinha o mais adequado, uma vez que outros preservativos no so eficazes. Uma consulta anual pode minimizar as consequncias da infeco por HPV.
10.3. Polyomaviridae
O prefixo desta famlia deriva do grego, onde poli significa muito e oma, tumores. Apesar do significado do nome, os Polyomavrus no costumam produzir tumores nos seus hospedeiros naturais. Os vrus desta famlia apresentam em seu genoma o DNA, o qual circular e de fita dupla, sendo associado s histonas ( H2a, H2b, H3 e H4), obtidas do hospedeiro. O vrion com simetria helicoidal, no apresenta envelope e infecta principalmente mamferos, especialmente humanos. A famlia Polyomaviridae contm apenas um gnero, o Polyomavrus. A replicao do vrus ocorre no ncleo e os vrions so liberados por lise celular. Os Polyomavrus humanos, BKV e JCV so membros do gnero Polyomavrus. As infeces primrias por estes vrus ocorrem principalmente na infncia e so geralmente assintomticas. Os vrus podem persistir aps a infeco primria na forma latente em vrios rgos, especialmente nos rins. Em pacientes com deficincia imunolgica, principalmente pela AIDS, esses vrus podem ser reativados e causar algumas doenas. A reativao do BKV acarreta doenas do trato urinrio, como a cistite hemorrgica e outras nefrites, enquanto a reativao do JCV leva a leucoencefalopatia multifocal progressiva. Aproximadamente 80% dos adultos do mundo inteiro mostram evidncia sorolgica para a infeco por JCV, mas, na sua maioria, sem nenhuma manifestao clnica ou histrica de doena. A maioria das pessoas soropositivas apresentam histrico de infeco na infncia. A via de transmisso no tem sido muito bem definida, mas sugerida a transmisso pela gua e alimentos contaminados.
Virologia | 175
Da mesma forma, estima-se que 80% dos adultos de todos os continentes apresentem sorologia positiva para BKV, mas no h evidncias de que o BKV cause doena na populao imunocompetente. Neste tipo de infeco, as vias de transmisso tambm ainda no esto bem definidas, embora tambm haja a possibilidade de transmisso pela gua e alimento contaminados. importante ressaltar que o BKV estvel na gua durante vrias semanas, aumentando, assim, as chances de transmisso por esse meio. Estudos mostram que o BKV est associado a doenas que afetam os rins, pulmes, olhos, fgado e crebro. No entanto, h fortes evidncias da associao do BKV com cistites hemorrgicas e nefrites. Alm disso, o vrus tem mostrado uma relao com doenas renais em pacientes transplantados e com a rejeio a enxertos de 2% a 5%.
10.4. Adenoviridae
Os Adenovrus foram descobertos em 1953 por Wallace Rowe e cols, que isolaram o vrus da adenoide, por isso o nome Adenovrus. Em 1962, John Trentin e sua equipe mostraram que o Adenovrus humano do tipo 12 causava cncer em hamsters jovens. Esta foi a primeira demonstrao de uma atividade oncognica desencadeada por um vrus que infecta humanos. Desde ento, os Adenovrus tm sido ligados induo de alguns cnceres. Alm disso, estudos experimentais com os vrus dessa famlia vm contribuindo com descobertas no campo da biologia molecular das clulas eucariticas, pela facilidade da sua replicao em culturas in vitro. A famlia adenoviridae infecta apenas os vertebrados, principalmente o homem, e classifica-se em quatro gneros: AviAdenovrus, MastAdenovrus, AtAdenovrus e SiAdenovrus, os quais infectam os seguintes grupos de hospedeiros:
AviAdenovrus - aves. MastAdenovrus - mamferos.
AtAdenovrus - rpteis, aves e mamfero. SiAdenovrus - anfbios e aves.
O ICTV est estudando um novo gnero que infecta uma espcie de peixe, mas que ainda no foi definida. As seis espcies virais existentes nessa famlia so classificadas de acordo com as caractersticas: molecular, fsico-qumica e imunolgica, o que permite a separao em seis espcies distribudas de A a F (Quadro7). No gnero MastAdenovrus foram descritos at o momento 51 sorotipos que causam infeces em humanos. Quadro 7. Espcie e sorotipos com seus respectivos locais de infeco. Adaptado de Santos, 2008
Espcie Sorotipos Local de infeco Trato gastrointestinal Trato urinrio, pulmes Trato respiratrio Conjuntitiva, trato gastrointestinal Potencial oncognico Tumorigenicidade Transformao in vivo de clulas Elevada Fraca + +
A B
12, 18, 31 3, 7, 11, 14, 16, 21, 34, 35, 50 1, 2, 5, 6 8-10, 13, 15, 17, 19, 20, 22-23, 33, 36-39, 4249, 51 4 40, 41
C D
Nenhuma Nenhuma
+ +
E F
Trato respiratrio, conjutiva Trato gastrointestinal
Nenhuma Nenhuma
+ +
Virologia | 177
O genoma de DNA de dupla fita no segmentado contm aproximadamente 30 genes. O capsdeo icosadrico tem de 80 a 110 nm de dimetro, com 252 capsmeros, dos quais 12 so pentgonos ( pentons) e 240 hexgonos (hexons). As espcies so caracterizadas pela presena de antgenos especficos encontrados no capsmero hexagonal. O vrion possui uma longa projeo que se estende do vrtice at cada um dos 12 capsmeros pentagonais. A projeo de hemaglutinina antigenicamente distinta em cada sorotipo. Dessa forma, possvel se determinar o tipo especfico de vrus utilizando-se um teste de inibio da hemaglutinao. A transmisso pode ocorrer por contgio direto ou indireto, seja pela via oralfecal, atravs da gua e alimentos contaminados, seja pelos aerossis, alm das secrees oculares e respiratrias. A replicao viral ocorre no epitlio das vias respiratrias superiores, na conjuntiva e tambm no epitlio intestinal. Aps a sua adeso clula hospedeira, o vrus sofre desnudamento e seu DNA migra para o ncleo. Os genes precoces so transcritos pela RNA polimerase DNA-dependente da clula. O RNA mensageiro (RNAm) precoce transcreve as futuras protenas no estruturais no citoplasma. O RNAm tardio transcreve as futuras protenas estruturais. Finalmente, a partcula viral montada no ncleo e o vrus liberado por lise da clula hospedeira. Os Adenovrus apresentam distribuio mundial, com caractersticas endmicas na maior parte das regies. Alguns surtos em locais de contato estrito, como no caso de alojamentos, foram relatados. As infeces podem ocorrer em todas as estaes do ano, apresentando ocorrncia maior no final do inverno, na primavera e no incio do vero. No inverno, os Adenovrus tm sido responsveis por 25% de hospitalizao por febre e doenas do trato respiratrio inferior em recrutas militares. A maioria das infeces branda, sendo os casos fatais e de sequelas associados aos pacientes imunocomprometidos. Estima-se que essa infeco seja responsvel por 2% a 5% de todas as infeces respiratrias, ocorrendo em todas as faixas etrias, com predominncia na infncia.
10.5. Herpesviridae
O nome da famlia vem de um verbo grego herpein, que significa rastejamento. O nome se refere ao fato de os membros da famlia causarem infeces latentes recorrentes com progresso lenta. A famlia Herpesviridae representada por vrus que infectam os vertebrados, incluindo aves, peixes e vrios mamferos, principalmente humanos. Apresentam uma grande importncia mdica por estarem envolvidos em muitas doenas. Essa famlia possui uma grande variao de vrus, devido ampla ocorrncia e diversidade, e classificada em 3 subfamlias: Alphaherpesvirus, Bethaherpesvrus e Gammaherpesvirus. A subfamlia Alphaherpesvirus inclui os gneros vrus Herpes Simplex 1 e 2 (HSV-1 e HSV-2), responsveis, respectivamente, pela infeco da mucosa labial e genital e so vulgarmente conhecidos como Herpes. Essa subfamlia inclui tambm o Vrus da Varicela-zoster (HHV-3, Human Herpesvirus3), cuja doena conhecida como catapora. A segunda subfamlia compreende o Citomegalovirus (ou HCMV, Human Cytomegalovirus, ou HHV-5, Human Herpesvirus-5), que causa um tipo de mononucleose infecciosa, os Herpesvirus 6 e 7 (HHV-6 e HHV-7, Human Herpesvirus-6 e 7), responsveis pela doena infantil infecciosa rosola. A ltima subfamlia tem como representantes o vrus Epstein-Barr (EBV)-4, agente etiolgico da infeco popularmente conhecida como doena do beijo ou mononucleose infecciosa, alm de estar envolvido na patognese de alguns tumores, como o linfoma de Burkitt e o carcinoma nasofaringeal e o Herpesvirus-8 (HHV-8, Human Herpesvirus-8, ou KSHV), associado ao sarcoma de Kaposi. Esta famlia agrupa vrus que apresentam tamanho mdio de 120 a 200 nm de dimetro, com fita dupla de DNA. Geneticamente a segunda famlia mais complexa de vrus, pois existem 160 genes em cada espcie. O vrion icosadrico com 162 capsmeros, envelopado, apresentando morfologia que vai de esfrica at pleomrfica. O genoma no segmentado e contm fita dupla de DNA com 120 mil a 220 mil nucleotdeos, dos quais 35-75% so
Virologia | 179
guanina e citosina. O genoma viral codifica protenas estruturais e no estruturais localizadas no envelope e no capsdeo. Os lipdios virais so derivados das membranas nuclear e celular da clula hospedeira. Como descritos anteriormente, os gneros so acompanhados por nmeros e esto associados a diferentes patologias, entretanto, eles possuem como caracterstica principal, o fato de desenvolverem no hospedeiro, infeco crnica, mantendo-se latentes por longos perodos dentro da clula, sem destru-la. So vrus extremamente infecciosos, porm com prognstico geralmente benigno. Estima-se que 97% da populao mundial j tenha tido contato com esse vrus e uma grande parte no apresentou nenhum sintoma. Alguns vrus desta famlia podem apresentar neurotropismo, levando ao desenvolvimento de encefalites; outros so linfotrpicos, isto , possuem afinidade pelos linfcitos, o que poder desencadear distrbios do sistema imunitrio, inclusive, tornando-se um problema de sade pblica, por causar infeces graves em pacientes imunodeficientes, por exemplo, com AIDS. Quadro 8. Patologia, transmisso e diagnstico
Vrus Patologia Transmisso Diagnstico
Herpes simplex 1 e 2 Gengivoestomatite e Herpes labial (HSV1); Herpes genital (HSV2); Conjuntivite, queratite e encefalite herptica, principalmente em doentes imunodeprimidos, e Herpes neonatal Varicella-zoster - VZV3 Vesculas cutneas nas reas central e laterais do corpo
Contato direto com Pesquisa de a mucosa lesionada antgeno (mtodos moleculares e sorolgicos)
Contato direto com Isolamento em as leses e aerossis cultura celular, imunofluorescencia indireta e PCR
Epstein-Barr EBV4
Mononucleose infecciosa, Doena linforreticular progressiva, Leucoplasia de clulas em cabeleira, Linfoma de Burkitt, Carcinoma nasofaringeo
Contato direto com Mtodos sorolgico a saliva e molecular
Citomegalovrus - Infeco congnita, CMV5 causando nascimento prematuros e malformaes no feto.
Contato com secrees e sangue infectados
Isolamento em cultura celular, sorologia e diagnstico molecular Mtodos sorolgicos e molecular
Contato ou por Vrus HH6, HH7 e HH6,HH7 Exantema sbito aerossis HH8 HH8- Sarcoma de Kaposi, Linfoma de clulas B e Doena de Castleman
10.6. Iridoviridae
O prefixo derivado de ris, deusa grega do arco-ris, uma vez que alguns componentes desta famlia apresentam iridescncia, um fenmeno tico que faz certos tipos de surpefcies refletirem as cores do arco-ris. Esta famlia est dividida em cinco gneros: Chloriridovirus, Iridovirus, Lymphocystivirus, Megalocytivirus e Ranavirus. Os dois primeiros so parasitas estritos de invertebrados, apesar do Iridovirus j ter sido relatado em lagartos. Os gneros Lymphocystivirus e Megalocytivirus j foram encontrados em peixes e o Ranavrus em anfbios, rpteis e, recentemente, foi relatada a infeco em leopardos, provenientes da Etipia.
Virologia | 181
Os vrus dessa famlia apresentam de 140 a 303 kb, o genoma DNA de fita dupla, apresentando de 150 mil a 280 mil nt, e simetria icosadrica. Em relao ao envelope, ele pode estar ausente ou presente, dependendo da maneira de como o vrus sai da clula (lise ou brotamento). O gnero Iridovrus entra na clula hospedeira atravs de viropexia (endocitose). A importncia desta famlia est muito ligada ao fato de causar doenas em uma variedade de peixes comercialmente importantes e de ser uma das famlias virais mais prevalentes em insetos.
10.7. Poxviridae
O prefixo Pox de Poxviridae de origem inglesa e significa vesculas, as quais caracterizam a infeco por esses vrus. Esta famlia divide-se em duas subfamlias, Chordopoxvirinae e Entomopoxvirinae . A primeira compreende os gneros: Orthopoxvirus (espcie: Vaccinia vrus), causador da varola bovina ( cowpox) e da varola humana (smallpox); Parapoxvirus (espcie: Orf vrus); Avipoxvirus (espcie: Fowlpox vrus); Capripoxvirus (espcie: Sheeppox vrus ); Leporipoxvirus ( espcie: Myxoma vrus) ; Suipoxvirus (espcie: Swinepox vrus); Molluscipoxvirus (espcie: Molluscum contagiosum vrus); Yatapoxvirus (espcie: Yaba monkey tumor vrus). E a segunda subfamlia engloba os Gneros: Entomopoxvirus A (espcie: Melolontha melolontha entomopoxvirus) ; Entomopoxvirus B (espcie: Amsacta moorei entomopoxvirus) ; Entomopoxvirus C (espcie: Chironomus luridus entomopoxvirus). Os membros dessa famlia so considerados um dos maiores e mais complexos vrus que infectam animais. Apesar disso, esses vrus apresentam
aparncia e constituio bioqumica primitivas. Somente a transcrio e replicao do DNA, que ocorrem no citoplasma da clula, que usam as enzimas codificadas pelo vrus. Esses vrus infectam tanto vertebrados quanto invertebrados artrpodes. O vrion apresenta envelope tubular ou globular com protenas estruturais, so geralmente ovoides, pleomrficos, e medem de 160 a 190 nm de dimetro ou altura. O genoma de DNA no segmentado e apresenta fita dupla contendo aproximadamente de 130 mil a 375 mil nucleotdeos, dos quais 20% (nos Entomopoxvrus) e 35% a 64% (nos demais) so constitudos por guanina e citosina. O prottipo dessa famlia o Vrus Vaccinia, o qual foi usado com sucesso como vacina e, graas as Campanhas de Vacinao na dcada de 1970 (sculo XX), foi possvel erradicar o vrus da varola. O vrus vaccinia penetra nas clulas, principalmente por fuso celular, mas ainda no se conhece o receptor responsvel pela ligao do vrus clula. Outra espcie de Poxvirus, Molluscum contagiosum virus (MCV), conhecida por infectar especificamente humanos. Esta causa uma infeco na pele e na mucosa (pequenas vesculas), normalmente benigna. A transmisso ocorre por meio do contato com o local infectado e caracterstica da primeira infncia. No adulto, j foi encontrada na regio genital, por isso, tem sido considerada causadora de Doena Sexualmente Transmissvel (DST). O diagnstico feito atravs da clnica, mas quando h dvidas, o material das vesculas submetido aos ensaios histolgicos.
Virologia | 183
Figura 9. Microcospia eletrnica do Poxivrus - Foto cedida pela Dra Monika Barth/IOC do Laboratrio de Morfologia e Morfognese Viral - IOC/Fiocruz.
10.8. Hepadnavridae
O nome Hepadnaviridae derivado da palavra latina hepa, que significa fgado. Esses vrus recebem esse nome devido s infeces que causam neste rgo. Esta famlia pequena, possuindo dois gneros: Orthohepadnavrus, que infectam mamferos, e Avihepadnavrus, que infectam aves. O primeiro gnero inclui as espcies: Woodchuck hepatitis virus (HWV), Ground squirrel hepatitis vrus (GSHV), Woolly monkey hepatitis virus (WMHV) e Hepatitis B virus (HBV). Estes infectam, respectivamente, marmotas, esquilos, macacos e o homem. Dentre os membros dessa famlia, o vrus da hepatite B tem grande importncia para humanos, sendo responsvel por milhes de casos crnicos no mundo inteiro. O vrion do HBV (partcula Dane) possui envelope, morfologia esfrica, simetria icosadrica e mede entre 40 a 48 nm de dimetro. O genoma contm uma molcula de DNA circular, segmentado, de fita dupla, com 3.020 a 3.320 nucleotdeos. O acido nucleico codifica os
antgenos: HBsAg, HBeAg, HBcAg e HBxAg. Outra caracterstica da espcie HBV apresentar partculas filamentosas, as quais so incompletas e, portanto, no infecciosas. Durante o curso da infeco pelo HBV, os antgenos e anticorpos virais (marcadores sorolgicos) so passveis de ser detectados no sangue do indivduo. Cada um desses marcadores apresenta um significado clnico. No incio da infeco pelo HBV, o primeiro marcador sorolgico a ser detectado o HBsAg, pois na fase aguda da doena seus ttulos so elevados. Este mesmo antgeno tende a desaparecer na evoluo normal para a cura e, quando persiste aps esse perodo, a evoluo geralmente crnica. O segundo o HBeAg, que normalmente indica alto grau de replicao viral. No caso de evoluo normal, o anti-HBe produzido. O terceiro o anti-HBc IgM, na fase aguda, e, em seguida, o anti-HBc IgG, em nveis gradativos, o qual persiste para a vida toda, podendo indicar que o indivduo teve pelo menos um episdio de infeco pelo HBV. O anti-HBs indica recuperao da infeco e imunidade contra o HBV. Para a deteco desses marcadores, o mtodo mais utilizado o Ensaio Imunoenzimtico (ELISA). Entretanto, podem ser realizadas tcnicas moleculares de deteco do DNA viral, como a Hibridizao, o branched-DNA, ou b-DNA Chiron, e a PCR. Alm disso, existem outros marcadores sorolgicos da infeco pelo HBV, como o AgHBx e o anti-HBx, mas estes so pouco utilizados nos exames de rotina, ficando seu uso voltado para pesquisa. A transmisso do HBV pode ocorrer pelo sangue contaminado (atravs das vias sexual, transplacentria e perinatal), por compartilhamento de seringas e agulhas contaminadas, por transfuso de sangue ou hemoderivados, ou ainda por acidentes com material biolgico. As consequncias da infeco pelo HBV so muito variveis, podendo o indivduo infectado ser um portador assintomtico. Pode ainda apresentar quadros clnicos que resultem na hepatite fulminante ou apresentar a forma crnica, que pode desencadear
Virologia | 185
a cirrose ou o carcinoma de fgado. A forma aguda da doena caracterizada por um longo perodo de incubao de 45 a 120 dias, com sintomas mais comuns de anorexia, nuseas e vmitos. A ictercia geralmente acontece aps uma semana de infeco, assim como a urina escura, a pele plida e os altos nveis de bilirrubina e transaminases, embora aproximadamente 50% dos casos sejam anictricos. A infeco pelo HBV pode, no entanto, ser prevenida por vacinas. As primeiras vacinas eram derivadas de plasma de pacientes com infeco crnica, com o HBsAg inativado por mtodos fsico-qumicos. Atualmente se utilizam vacinas desenvolvidas pela tecnologia do DNA recombinante.
10.9. Coronaviridae
Esta famlia pertence ordem Nidovirales, e apresenta dois gneros: Coronavrus e Torovrus. Os primeiros isolados dos Coronavrus foram o vrus da bronquite infecciosa, em 1930, o vrus da hepatite de camundongo e o da gastroenterite de porcos, em 1940. Estes dois gneros apresentam similar organizao genmica e uma estratgia de replicao. Entretanto, existem diferenas na morfologia do vrion entre os dois gneros. Os Coronavrus so divididos em trs grupos sorolgicos. O I e o II tm sido isolados em mamferos, enquanto o III, em aves. O sorogrupo II representado pelos prottipos HCoV-229E e HCoV-NL63, dentre outros, e o Grupo III representado pelos prottipos MHV, OC43 e HKU1, SARS-CoV. O SARS-CoV (Coronavrus associado a Sndrome Respiratria Aguda Severa) relacionado, apesar de distante, com todos os outros coronavrus sequenciados. A partcula completa, ou vrion, apresenta-se com morfologia esfrica, envelopada e com cerca de 100 a 160 nm de dimetro. O genoma alberga um RNA de fita simples, polaridade positiva e com tamanho de aproximadamente 32 Kb.
Dentre as protenas estruturais do vrion existem as espculas de glicoprotenas, que so receptores de ligao e especificidade. Estes realizam a fuso com a membrana da clula hospedeira, a protena de membrana, a hemaglutinina e a protena do nucleocapsdeo, que uma pequena protena de envelope. A maioria dos Coronavrus replica-se inicialmente nos tratos respiratrio e entrico. Em contraste com a grande maioria dos vrus deste gnero, a infeco do trato respiratrio inferior pelo SARs-CoV resulta em srias complicaes, requerendo muitas vezes que o paciente seja internado. Uma extensa epidemia, evidenciada inicialmente na China e depois na Europa, Amrica do Norte e em outras partes da sia, foi devido a este vrus, e ocorreu entre os anos de 2002 e 2003, levando morte milhares de pessoas. Esta infeco caracterizada por febre acima de 38 graus Celsius, acompanhada de dor de cabea e outros sintomas. Os sintomas respiratrios so usualmente amenos no incio, mas aps poucos dias, o paciente desenvolve tosse seca e produtiva, apresentando dispneia. A transmisso do Coronavrus ocorre principalmente atravs de aerossis de secrees nasais. Para o diagnstico laboratorial utiliza-se, principalmente, a imunomicroscopia eletrnica e a sorologia. At o momento, no existem vacinas no mercado capazes de prevenir esta infeco, mas vrias vacinas se encontram em estudos clnicos, e podem ser promissoras.
10.10. Flavivridae
O prefixo flavi vem do grego e significa amarelo, uma vez que os sinais clnicos associados a esse vrus podem levar colarao amarelada, que aparece na pele e nos olhos do paciente. A famlia Flaviviridae composta por trs gneros: Hepacivirus, Pestivirus e Flavivirus. O primeiro gnero tem como unica espcie, at hoje identificada, o Virus da Hepatite C. O segundo, agrupa os vrus que infectam mamferos no humanos, com destaque para os
Virologia | 187
vrus da diarreia bovina e o vrus da peste suna. O ltimo, de acordo com o VIII Relatrio do Comit Internacional em Taxonomia Viral (ICTV), agrupa aproximadamente 50 espcies de vrus de difcil identificao morfolgica e taxonmica, dividindo o gnero em 10 grupos, antigenicamente relacionados. Entre eles, o virus da Febre Amarela, o grupo do Dengue virus (DENV), o grupo do Mammalian Tick-borne virus (TBEV), o grupo do Aroa virus (AROAV) e o grupo do Japanese encephalitis virus (JEV). Os vrus desta famlia possuem como cido nucleico o RNA de cadeia linear simples, polaridade positiva e comprimento mdio entre 9,5 a 12,3 kd. Apresentam capsdeo icosadrico, o que lhes confere um aspecto esfrico, recoberto pelo envelope. E as partculas virais possuem um dimetro com cerca de 40 a 60 nm. Os representantes dessa famlia so considerados Arbovrus, pois possuem artrpodes como vetor. A palavra arbovrus de origem inglesa, arthropodborne virus, que significa vrus carregado por um artrpode. Os vrus ficam, ento, armazenados no vetor e por vezes proliferam, sem causar danos. Duas espcies dessa famlia representam um grande problema de Sade Pblica no Brasil, o Virus da Dengue e o Vrus da Febre Amarela. Em relao a dengue foram notificados no Brasil, no perodo de 1981 a 2006, 4.243.049 casos, incluindo 5.817 casos de dengue hemorrgico/sndrome de choque dengue (FHD/SCD), perfazendo um total de 338 mortes. Segundo dados do Laboratrio de Flavivrus do IOC/Fiocruz (2007), embora a doena tenha afetado todas as regies brasileiras, o maior nmero de casos foi relatado no Nordeste e no Sudeste. Os Virus da Dengue (DENV) 1 e 4 foram isolados pela primeira vez na regio amaznica do Brasil, em 1981 e 1982. A doena se tornou um problema de sade pblica nacional no estado do Rio de Janeiro, em 1986 e 1990, com circulao de DENV-2 e 1, respectivamente. A introduo do DENV-3 em 2000, tambm no estado do Rio de Janeiro, levou a uma epidemia com 288.245 casos notificados de
dengue e 91 bitos. Cepas de vrus identificados em 2002, durante a epidemia, mostrou que o DENV-3 se expandiu para novas reas, algo que merece uma avaliao mais aprofundada. A febre amarela uma doena infecciosa, que se mantm endmica nas florestas tropicais das Amricas e frica. A transmisso para humanos (ciclo urbano) s possvel pela picada de insetos hematfagos da famlia Culicidae, em especial do gnero Aedes. O ciclo silvestre deste vrus se mantm em macacos, que atuam como hospedeiros amplificadores, e insetos do gnero Haemagogus e Sabethes, que atuam como vetores. Em torno de 90% dos casos, a doena se apresenta de forma benigna, evoluindo para a cura, enquanto em 10% apresentam complicaes, podendo ocorrer o bito em torno de 50% desses casos. Os mtodos de diagnstico incluem o ELISA (IgM), a Cultura de Clulas (isolamento viral), a Imuno-histoqumica e a PCR. A zoonose (ciclo silvestre) dificilmente ser erradicada, mas a doena em humanos (ciclo urbano) prevenvel mediante a vacinao com a cepa 17D do vrus amarlico (ver tem 7 deste captulo).
10.11. Arenavridae
Os membros da famlia Arenaviridae (do grego, arena, que significa areia) esto associados a diferentes espcies de roedores (reservatrios naturais). Esses vrus so esfricos, envelopados e apresentam um dimetro mdio de 110 a 130 nm. O cido nucleico composto por duas fitas de RNA circular, segmentado e envolto por protena NP do nucleocapsdeo. Esses vrus apresentam carter zoontico e possuem elevado poder infectante, pois devido s suas caractersticas serem semelhantes as da clula hospedeira, atravessam facilmente a membrana plasmtica. Causam febres hemorrgicas severas, com extravasamento capilar e alteraes hemorrgicas, levando elevada taxa de mortalidade.
Virologia | 189
Essa famlia dividida em dois gneros: Arenovrus do novo mundo e Arenovrus do velho mundo. Dentre os causadores de doenas em humanos esto:
Lassa virus Febre de Lassa (frica) - Velho mundo; Junin virus Febre hemorrgica Argentina, reservatrio: Callomys
musculinus Novo mundo;

Machupo virus Febre hemorrgica da Bolvia, reservatrio: Callomys
callosus - Novo mundo;

Guanarito virus Febre hemorrgica da Venezuela - Novo mundo; Sabia Febre hemorrgica do Brasil - Novo mundo.
A transmisso ocorre pelo contato direto com a pele ou quando o indivduo entra em contato com as excrees, ou material contaminado por elas, de roedores infectados. Pode ocorrer, ainda, por picada de artrpode infectado. Os sinais clnicos dessa infeco esto associados, principalmente, a febres com extravasamento capilar e alteraes hemorrgicas, as quais podem culminar com o agravamento do processo, levando a uma sndrome vascular, a hepatite, ou ainda a uma doena neurolgica. A febre de Lassa iniciada como uma gripe que se torna severa posteriormente. Como medida de preveno, deve-se procurar reduzir a populao de roedores nos reservatrios, evitar contato com as fezes desses animais e tomar medidas de higiene. O paciente infectado deve ser submetido ao isolamento respiratrio e a droga frequentemente empregada a Ribavirina, via intravenosa. O diagnstico realizado por isolamento viral em camundongo ou em cultura de clulas, alm disso, podem ser empregados mtodos moleculares e sorolgicos (deteco de IgM especficas).
10.12. Caliciviridae
Os integrantes desta famlia so de grande importncia como causadores das gastroenterites humanas. So quatro os gneros desta famlia: Lagovrus e Vesivrus, que acometem apenas hospedeiros animais e so representados, respectivamente, pelos vrus da doena hemorrgica do coelho e vrus do exantema vesicular de sunos. E Norovrus e Sapovrus, que acometem humanos e animais e so representados, respectivamente, pelos Vrus Norwalk e Vrus do tipo Sapporo. O vrion que representa esta famlia desprovido de envelope, apresenta estrutura icosadrica e o seu capsdeo, com dimenso entre 27 a 40 nm, tem uma depresso em forma de taa. Por isso que o prefixo da famlia recebeu a designao de calici. O genoma de aproximadamente 8,3Kb, constitui-se de RNA, fita simples, linear, no segmentado e com polaridade negativa. A Histria dos Norovrus iniciou-se em 1929, quando Zahorsky props o nome de doena do vmito do inverno, a fim de descrever as epidemias de gastroenterites virais. Em 1968, O Center Disease Control (CDC) investigou uma epidemia causada pela doena do vmito ocorrida em uma escola de Norwalk, nos Estados Unidos, onde aproximadamente 50% dos alunos e professores desenvolveram gastroenterite. As partculas virais das fezes dos voluntrios infectados foram identificadas pela imunomicroscopia eletrnica. Os Norovrus apresentam cinco grupos genmicos. Dentre eles, o I, II e IV esto envolvidos nas infeces em humanos. O estudo destes agentes um grande desafio, haja visto que no existe nenhum modelo animal pequeno que reproduza a doena clnica, e nem culturas de clulas sucetveis. A prevalncia deste vrus bastante elevada em vrios pases e, nos EUA, ocorrem cerca de vinte e trs milhes de infeces por ano, durante todo o ano, principalmente nos meses mais frios. Mais de 70% das epidemias de gastroenterites esto associadas a este agente. A transmisso deste vrus se d por via oral-fecal e sua infecciosidade est associada a baixas
Virologia | 191
doses, seja nas fezes ou no vmito. A diarreia pelo Norovrus considerada comum em viajantes. O perodo de incubao do vrus dura de 24 a 48 horas, podendo variar de 18 a 72 horas. Os sintomas gastrointestinais mais comuns so: nuseas, vmitos, dor abdominal e diarreia (4 a 8 evacuaes dirias). J os sintomas sistmicos so, principalmente, mialgia, dor de cabea, febre acima de 38 graus Celcius, etc. A imunidade ao vrus no duradoura, de um modo geral especfica, ou seja, acarreta pouca reao cruzada. O mtodo laboratorial mais eficaz para o diagnstico deste vrus a PCR, capaz de detectar o vrus em amostras clnicas de fezes e vmitos ou em amostras ambientais (alimentos e gua). A microscopia eletrnica mais usada para identificar partculas virais nas fezes. Alm disso, os mtodos sorolgicos tambm so usados para detectar os anticorpos especficos. O tratamento e o controle desta infeco devem visar a higiene adequada das mos, dos alimentos e dos locais onde existam indivduos infectados, j que doses baixas so suficientes para uma transmisso eficiente. At o momento, no existem vacinas no mercado para prevenir esta infeco, mas algumas vacinas encontram-se em estudos clnicos.
10.13. Togavridae
O prefixo desta famlia vem do latim toga, que significa capote, uma vez que estes vrus, ao serem visualizados no microscpio eletrnico, apresentam morfologia em forma de capote. Esta famlia est dividida em dois gneros: o Alphavrus e o Rubivrus, os quais so responsveis por vrias doenas, tais como encefalite equina, rubola, dentre outras. O vrion consiste de envelope, capsdeo icosadrico, e mede cerca de 40 nm de dimetro. O seu genoma possui uma fita simples de RNA linear, no segmentado, com polaridade positiva, e apresenta de 9.700 a 11.800 nucleotdeos. A estabilidade do vrus sob condies in vitro ocorre em pH
alcalino, entretanto, so sensveis aos solventes orgnicos e detergentes que solubilizam as lipoprotenas do envelope. A espcie Rubella vrus, do gnero Rubivrus, responsvel por uma das doenas exantemticas da infncia, a rubola. Esta doena apresenta caracterstica sazonal, ocorrendo principalmente na primavera, e transmitida por contato direto com aerossis de indivduos infectados. A transmisso do vrus da rubola durante os trs primeiros meses da gestao de extrema gravidade, j que esse vrus tem a capacidade de atravessar a placenta e infectar o embrio, causando a Sndrome da Rubola Congnita, que caracterizada por aborto, parto prematuro, anomalias congnitas e morte fetal. O perodo de incubao de duas a trs semanas e a transmisso se d uma semana antes do aparecimento do exantema. A doena geralmente tem evoluo benigna e mais da metade dos infectados so assintomticos. As manifestaes clnicas mais comuns so: febre de at 38 graus Celsius, aumento dos linfonodos do pescoo, e exantemas cutneos, inicialmente na face, passando para outras partes do corpo. Esta doena de difcil diagnstico clnico por se assemelhar as outras doenas exantemticas. O mtodo de diagnstico mais usado o ELISA, o qual permite a deteco de anticorpos especficos. Na Campanha de Vacinao Brasileira, de 2008, foram disponibilizadas vacinas para indivduos de 20 a 39 anos, de ambos os sexos.
10.14. Picornaviridae
Os vrus pertencentes famlia Picornaviridae foram uns dos primeiros a ser reconhecidos, pois estudos mostraram que muitas das doenas causadas por eles j tinham histrico no passado. Uma importante caracterstica desta famlia a sua diversidade, uma vez que existem mais de 200 sorotipos definidos neste grupo. O prefixo pico derivado do grego, pequeno, e essa nomenclatura foi atribuda a esta famlia por apresentarem os menores vrus RNA, quando comparados grande maioria de vrus que contm esse cido nucleico.
Virologia | 193
A classificao dessa famlia baseada nas propriedades antignicas. A famlia compreende atualmente oito gneros: Enterovrus, Cardiovrus, Aphtovrus, Hepatovrus, Parechovrus, Erbovrus, Kobuvrus e Teschovrus. Essa famlia contm vrus que infectam vrios tipos de vertebrados, incluindo o homem, e causam doenas de grande importncia mdica, como febre aftosa, poliomelite, hepatite A e rinovirore. Essa famlia apresenta os vrus RNA de fita simples, linear no segmentado e de polaridade positiva. Os vrions consistem de um capsdeo no envelopado, com simetria icosadrica, dimetro de 27 a 30 nm e 12 capsmeros. O genoma completo apresenta de 7.000 a 8.500 nucleotdeos e o vrus apresenta replicao citoplasmtica. Dentre as doenas causadas por vrus desta famlia, a Hepatite A tem sido mostrada como uma das doenas mais antigas da humanidade. de extrema gravidade em pases em desenvolvimento, j que a disseminao do vrus, pela gua ou pelos alimentos, envolve as condies sanitrias e de higiene pessoal (ciclo oral-fecal). Uma vez na corrente sangunea, esse vrus pode atingir os hepatcitos, desencadeando um processo infeccioso (hepatite), que poder levar ao aparecimento de sintomas clnicos importantes para o aparelho digestivo. A hepatite A segue um curso de manifestaes clnicas geralmente nos primeiros trinta dias da infeco, apresentando perfis variados, sendo as formas crnicas muito raras. A infeco compreende desde o estado de portador (assintomtico) at o sintomtico, que apresenta ictercia. No perodo prodrmico, uma minoria de indivduos infectados relata sintomas clssicos, como febre, dores musculares, cansao, mal-estar, inapetncia, nuseas e vmitos. medida que a ictercia vai surgindo, os sintomas e sinais prodrmicos podem desaparecer. Neste perodo, tambm pode ocorrer de as fezes ficarem amarelo-esbranquiadas e a urina, escura.
O diagnstico laboratorial realizado pela pesquisa de anticorpos no soro dos indivduos suspeitos. Nveis de IgM anti-HAV podem ser detectados at uns quatro meses, principalmente pelo mtodo ELISA. Como em toda doena viral, os pacientes infectados devem ter uma boa alimentao e repouso. A preveno da hepatite A envolve principalmente as medidas de responsabilidade das esferas governamentais, tais como o saneamento bsico, campanhas de vacinao e informativas sobre a doena e sua preveno. Alguns cuidados pessoais podem ser tomados a fim de evitar a transmisso. So eles: higiene pessoal e alimentar (lavagem e clorao), clorao ou fervura da gua para a inativao do vrus. Existem no mercado, vacinas licenciadas disponveis para indivduos acima de dois anos de idade. Esta vacina ainda no est inserida em Campanhas Nacionais de Imunizao, entretanto, o Ministrio da Sade disponibiliza esta vacina para alguns Centros de Sade.
10.15. Birnaviridae
O nome da famlia Birnaviridae tem o prefixo dividido em duas partes. A primeira tem como origem a palavra grega bi que significa dois e a segunda se refere sigla RNA (cido Ribonucleico), que constitui o genoma do vrion. Dessa forma, esses vrus apresentam dois segmentos de fita dupla de RNA linear. Esta famlia subdivide-se nos gneros Aquabirnavirus, Avibirnavirus e Entomobirnavirus. Nesses gneros esto includos o Vrus da necrose pancretica infecciosa (IPNV), que infecta peixes, o Vrus da doena infecciosa da bursa (IBDV) e outros vrus, que infectam galinhas, patos e perus. Os vrus so esfricos de 70 nm de dimetro, com capsdeo no envelopado, apresentando simetria icosadrica, composto por 132 capsmeros. O genoma completo tem de 5.880 a 6.400 nucleotdeos e representa 9,7% do peso do vrion.
Virologia | 195
Dentre as doenas causadas por vrus dessa famlia, o IBDV tem uma grande importncia, devido ao prejuzo que causa nas indstrias avcolas do mundo inteiro. O IBDV produz uma doena contagiosa, denominada Doena de Gumboro que acomete galinhas, desencadeando uma imunodeficincia secundria pela destruio da Bursa de Fabricius. Essa doena apresenta as formas clnicas e subclnicas com um perodo de incubao bem pequeno, j que as aves comeam a apresentar sinais clnicos de 2 a 3 dias aps a exposio. Os efeitos dos vrus nas aves envolvem a destruio de clulas de rgos do sistema imunolgico, como a Bursa de Fabricius, tonsilas cecais, bao e outros rgos linfoides. Estudos demonstram que uma regio do gene viral pode ser detectada em vrus isolados da Bursa de Fabricius pela tcnica de PCR/RFLP. Ainda no se tem uma determinao especfica para o controle do IBDV em aves, pois a vacina de vrus vivo de baixa passagem no recomendada, j que o vrus vacinal mantm as caractersticas do vrus selvagem e assim pode desencadear a doena. Outro vrus importante dessa famlia o IPNV, que infecta vrias espcies de peixes, como o salmo e a truta, alm de infectar tambm moluscos e crustceos. A mortalidade das espcies suscetveis est relacionada com o padro de virulncia da cepa viral, assim como a idade ou condies fsicas delas. O vrus tem sido encontrado em leuccitos e macrfagos presentes nos rins e bao dessas espcies. Estudos relacionados sua replicao nesses locais tm sido associados disseminao da doena nas espcies propensas infeco em pases da Europa, sia, Amrica do Norte e Amrica do Sul. A transmisso do IPNV tem sido mais registrada por contato direto dentro de uma mesma espcie, embora j tenha sido encontrado em ovas de algumas espcies de peixes, representando mais de 90% de mortalidade nos alevinos. Nos salmondeos, a doena causa uma gastroenterite aguda e destruio do pncreas (necrose focal), principalmente nos indivduos jovens, j que nos sobreviventes, at seis meses aps a infeco, o perfil inaparente ou
subclnico. Mesmo assim, os principais aspectos de patogenicidade desta doena ainda no esto bem esclarecidos, dificultando, dessa forma, o controle e a preveno por vacinas. O diagnstico laboratorial desta infeco tem sido feito atravs do isolamento do vrus em cultura de clulas de linhagens susceptveis, como a Chinook salmon embryo (CHSE-214), a Rainbow trout gonad (RTG-2) e a Bluegill fry (BF-2). Uma vez isolado, a identificao do vrus normalmente realizada por tcnicas como o teste de neutralizao por anticorpos monoclonais e policlonais, a imunoperoxidase e o ELISA.
10.16. Retroviridae
Esta famlia est dividida em duas Subfamlias: Orthoretrovirinae e Spumaretrovirinae, as quais apresentam os seguintes gneros: Alpharetrovirus, Betaretrovirus, Deltaretrovirus, Epsilonretrovirus, Gammaretrovirus, Lentivirus, Spumaretrovirus, sendo este ltimo da Subfamlia Spumaretrovirinae. Os vrus da famlia Retroviridae apresentam uma gama de hospedeiros, como smios, bovinos, aves, mamferos e, inclusive, humanos. O nome desta famlia se deve presena da enzima Transcriptase Reversa, responsvel pela transcrio reversa do vrus, possibilitando a formao de um DNA complementar, o qual pode ser incorporado ao DNA da clula hospedeira. Dentre as doenas causadas pelos membros da famlia Retroviridae, a Sndrome da Imunodeficincia Adquirida (AIDS) a mais importante, haja vista que a mesma leva a grandes ndices de morbidade e mortalidade em humanos de todo o mundo. A AIDS foi reconhecida em 1981, a partir da investigao clnica e laboratorial em pacientes homossexuais do sexo masculino, residentes na cidade de Nova York, nos Estados Unidos. Estes indivduos apresentavam grande incidncia de Sarcoma de Kaposi e pneumonia (causada pelo Pneumocystis carini), que so quadros clnicos caractersticos de imunodeficincia. Os casos de AIDS tambm foram relatados em outros grupos de indivduos, como os hemoflicos e os usurios de
Virologia | 197
drogas intravenosas, os quais apresentavam infeces graves causadas por microrganismos oportunistas. Um aumento considervel do nmero de casos da doena em vrios grupos de indivduos, que no homossexuais, foi observado nos Estados Unidos aps 1982. Desta forma, a doena avanou de forma alarmante para outras cidades de todo o mundo. Atualmente, segundo dados da Organizao Mundial da Sade, existem aproximadamente mais de 40 milhes de infectados no mundo. A classificao do Vrus da Imunodeficincia Humana (HIV) bastante complexa, constituindo Tipos, Subtipos, Grupos, alm de formas recombinantes. Os tipos so: HIV-1 e HIV-2. O Tipo 1 encontrado em todo o mundo, enquanto que o Tipo 2 limitado frica Ocidental e a algumas regies da Europa. Os Subtipos identificados so: M, N e O, os quais so baseados, principalmente, nas diferenas genticas das protenas do envelope, do capsdeo. O Subtipo M rene onze Subtipos: A1, A2, B, C, F1, F2, G, H, J e K, os quais apresentam formas recombinantes, como do CFR01 ao CFR12. A partcula completa do HIV-1 envelopada e apresenta forma esfrica, com cerca de 110 nm de dimetro. O genoma constitui-se de RNA de fita simples, de polaridade positiva, no segmentado. Dentre as protenas estruturais mais importantes do vrion existem: Glicoprotena (gp) 120 - inserida no envelope e com a funo de se ligar ao receptor CD4 presentes no linfcitos e macrfagos, que so as clulas-alvo do HIV; gp41 - inserida no envelope e com a funo de se ligar aos correceptores CCR5 e CXR4 D4, presentes nos linfcitos e macrfagos. A ausncia desta ligao impede a entrada do HIV na clula hospedeira; Protena (p) 17 - presente na matriz, associada a membrana e adjacente ao nucleocapsdeo;
p6, a p7 e a p24 - localizadas no nucleocapsdeo, sendo que as p6 e p7 so associadas ao RNA genmico. J dentre as protenas no estruturais existem:
p66/51 (transcriptase reversa) - responsvel pela transcrio reversa,
formando o DNA complementar; a p32 (integrase) permite a integrao do DNA complementar viral ao DNA da clula hospedeira e a p11 (protease) inibe as proteases da clula hospedeira. A infeco pelo HIV crnica, ou seja, uma vez tendo infectado o indivduo, o vrus vai persistir por toda a vida. A infeco evolui lentamente atravs de vrios estgios especficos. No incio da infeco, durante aproximadamente dois meses, o indivduo apresenta elevados ttulos de vrus no sangue e queda de clulas CD4, caracterizando a fase aguda da doena. Nesta fase, surgem os sintomas inespecficos, que so, principalmente, febre, dor de garganta e dor de cabea. Logo aps, surgem os anticorpos no sangue, observando-se a queda dos ttulos virais e a progresso da doena para a fase conhecida como assintomtica, a qual pode durar, aproximadamente, de oito a dez anos. A doena progride ento para a fase conhecida como sintomtica, caracterizada pela presena de sintomas especficos da doena, associados aos microrganismos oportunistas. Nesta fase, observamos um aumento da carga viral no sangue e a queda das clulas CD4 e consideramos o indivduo com AIDS. Caso no haja um controle rpido e eficaz, o indivduo pode chegar ao bito. O diagnstico laboratorial da doena deve ser feito aps o terceiro ms da possibilidade de contgio e baseado na deteco de anticorpos no sangue, pela tcnica ELISA. O resultado positivo confirmado por outros mtodos como a Imunofluorescncia e o Western Blot. O monitoramento da doena deve ser feito pela dosagem da carga viral e das clulas CD4, presen-
Virologia | 199
tes no sangue do indivduo, atravs dos mtodos moleculares, como a PCR e a Citometria de Fluxo. Atualmente, no mundo, o tratamento da doena baseado em uma combinao de agentes antirretrovirais, denominada Highly Active Anti-Retroviral Therapy (HART). Estas drogas possuem a capacidade de inibir vrias etapas do ciclo de replicao do vrus, como fuso, transcrio reversa, integrao e protease. Os pacientes, quando submetidos a este tratamento, e de um modo geral, tm uma reduo considervel da carga viral no sangue; consequentemente, as infeces oportunistas ocorrem de forma menos frequente. A forma de preveno da doena se d evitando principalmente o contato com sangue, secrees genitais, como smen, dentre outras secrees biolgicas. O uso de preservativos durante as relaes sexuais a forma mais eficaz de prevenir a transmisso sexual desta doena. At o momento, nenhuma vacina encontra-se disponvel no mercado, mas vrios estudos relacionados a esta rea encontramse em andamento.
10.17. Astroviridae
O prefixo astro vem do grego e significa estrela, fazendo uma aluso ao aspecto morfolgico desses vrus, que se assemelham a estrelas com cinco a seis pontas. Esta famlia est dividida em dois gneros: Mamastrovirus e Avastrovirus. O primeiro inclui as seguintes espcies: Bovine astroviru, Feline astrovirus, Human astrovirus, Ovine astrovirus, Porcine astrovirus e Mink astrovirus. O segundo tem como representante as espcies: Chicken astrovirus, Duck astrovirus e Turkey astrovirus. Os membros dessa famlia infectam aves e mamferos, inclusive o homem. Essa famlia possui genoma RNA de fita simples linear, no segmentado, de polaridade positiva, capsdeo icosadrico e ausncia de envelope. O tamanho do genoma varia entre menos de cinco at mais de 20 kb. A entrada do vrus na clula hospedeira feita por endocitose, mediada por receptores de membrana.
Esses vrus acometem crianas e adultos e so descritos como importantes enteropatgenos. As principais manifestaes clnicas da infeco por esses vrus incluem o comprometimento gastrointestinal, tais como, diarreia, nusea, vmito, febre e dor abdominal. Alguns estudos mostram que a durao dos sintomas pode levar de trs a quatro dias. Quadros mais severos podem levar a desidratao e ao bito, principalmente em pacientes imunodeprimidos. Os mtodos de diagnstico mais empregados para a deteco desses vrus so: Microscopia eletrnica, ELISA, Imunofluorescncia e a PCR. No existe ainda tratamento antiviral ou vacinas, entretanto, como o ciclo se faz por transmisso oral-fecal importante o saneamento bsico e medidas profilticas, quanto a higiene pessoal e cuidados com a gua e alimentos ingeridos.
10.18. Reoviridae
O prefixo desta famlia se refere a sigla formada por trs letras (REO): R - respiratrio, E - entrico e O - orfo. Esta designao foi devido ao primeiro Reovirus ter sido isolado dos tratos respiratrio e entrico de animais e humanos, os quais no apresentavam sintomas especficos de nenhuma doena, por isso rfo. Esta famlia uma das mais complexas, consistindo de nove gneros, como Orthoreovirus, Orbivrus, Coltvrus, Rotavrus, Aquareovrus, Cypovrus, Phytoreovrus, Fijivrus e Oryzavrus; os quais infectam vrias espcies, como os mamferos, aves, rpteis, anfbios, peixes, invertebrados e plantas. Dentre os gneros da famlia Reoviridae, o Rotavrus de extrema importncia em humanos, pois responsvel por quase um milho de mortes por gastroenterite em crianas de todo o mundo, principalmente em pases em desenvolvimento. A mortalidade de crianas abaixo de dois anos de idade apresenta como maior causa viral a infeco pelo Rotavrus, ficando atrs ape-
Virologia | 201
nas dos vrus causadores de infeces respiratrias. Esta infeco raramente acomete indivduos adultos e, quando ocorre, geralmente so mais amenas. O vrion apresenta morfologia esfrica, medindo cerca de 80 nm de dimetro, desprovido de envelope e com trs capsdeos, apresentando simetria icosadrica. O genoma de 15 a 27 kb, possui cido nucleico de RNA linear, fita dupla, com cerca de 11 a 12 segmentos e com polaridade positiva. As enzimas requeridas para a transcrio da fita dupla de RNA esto presentes no prprio vrus. Dentre as protenas estruturais, a VP7 (glicoprotena ou protena G) e a VP4 (protease clivada ou protena P) compem o capsdeo externo e definem o sorotipo viral, alm de estarem relacionadas com a induo da reposta imunolgica protetora. O capsdeo interno composto pela VP6, a qual, de acordo com sua especificidade antignica, permite a classificao dos Rotavrus em sete distintos grupos, designados de A-G. Somente os grupos A, B e C foram identificados em humanos. Os Reovrus replicam-se totalmente no citoplasma celular das microvilosidades do intestino delgado, gerando corpos de incluso no citoplasma das mesmas. Este vrus apresenta uma protena no estrutural, a NSP4, que uma enterotoxina responsvel pela descamao das clulas intestinais na luz do intestino, acarretando uma grande liberao de vrus nas fezes. Esta excreo viral pode durar cerca de dois a doze dias. A diarreia causada pelo Rotavrus devido alterao na absoro de sdio e glicose, j que as clulas destrudas so substitudas por clulas imaturas da cripta, as quais so incapazes de fazer absoro. Os sintomas tpicos da infeco pelo Rotavrus so: diarreia, febre, dor abdominal e vmito, resultando em desidratao. Os pacientes que apresentam a doena mais branda permanecem com os sintomas durante aproximadamente trs a oito dias, recuperando-se totalmente aps este perodo.
Em adultos, a doena bastante rara, todavia j ocorreram epidemias nestes indivduos devido ao grupo B. O tratamento da gastroenterite pelo Rotavrus deve ser a reposio hdrica e eletroltica oral ou parenteral nos casos mais graves. A preveno da doena pode ser feita atravs de vacina e tambm por medidas de saneamento bsico. Atualmente, existe uma vacina oral, a qual administrada em duas doses. O diagnstico laboratorial baseia-se na evidenciao dos vrus presentes nas fezes de indivduos infectados recentemente. Para o referido diagnstico, utilizam-se os seguintes mtodos: Imunomicroscopia eletrnica, imunodifuso ou ELISA. Outras tcnicas usadas so: a Eletroforese do cido nuclico viral e tambm a Reao em Cadeia da Polimerase (PCR).
10.19. Orthomyxoviridae
Esta famlia est inserida na ordem Mononegavirales e inclui agentes virais associados s infeces do trato respiratrio, sendo os mais frequentes agentes causadores de quadros sintomticos em humanos. A famlia Orthomyxoviridae constituda de cinco gneros, os Influenzavirus A, B e C, os Isavirus e os Thogotovirus. Os trs primeiros gneros apresentam os agentes causadores da influenza em vertebrados, como aves, humanos e outros mamferos. Os Isavrus infectam o Salmo e os Thogotovrus infectam vertebrados e invertebrados, como os insetos. (Quadro 1) Os gneros Influenzavirus A, B e C so identificados por diferenas antignicas na nucleoprotena e na protena de matriz, infectando os seguintes vertebrados:
Influenza A Humanos, outros mamferos e aves. Responsveis por
todas as pandemias de influenza.

Influenza B Principalmente humanos. Influenza C Humanos e porcos.
Virologia | 203
Quadro 8 gneros Influenzavrus A, B e C e suas respectivas espcies e sorotipos ou subtipos.

Gneros Influenzavrus A Espcies Vrus influenza A Sorotipos ou subtipos H1N1, H1N2, H2N2, H3N1, H3N2,H3N8, H5N1, H5N2, H5N3, H5N8, H5N9, H7N1, H7N2, H7N3, H7N4, H7N7, H9N2, H10N7
Influenzavrus B Influenzavrus C Isavrus Thogavrus
Vrus influenza B Vrus influenza C Vrus da anemia infecciosa do salmo Vrus Thogoto Vrus Dhori
Vrus Batken, Vrus Dhori
Os vrions associados famlia Orthomyxoviridae so esfricos, pleomrficos, com nucleocapsdeo medindo cerca de 80 a 120 nm de dimetro, envelopados, e apresentam no seu genoma um RNA de fita simples, com polaridade negativa e com 13,6 Kb. A estrutura viral constituda de nove protenas, incluindo a hemaglutinina (HA) e a neuraminidase (NA). No que se referem aos influenzavrus tipos A e B, os seus RNA apresentam oito segmentos, enquanto o influenza C apresenta apenas sete segmentos. Na constituio proteica do Influenzavrus esto presentes as seguintes protenas estruturais e no estruturais:
Polimerases (PB1, PB2 e PA). Neuraminidase, a qual catalisa a reao de remoo de resduos de
cido silico da clula hospedeira, permitindo a entrada do vrus atravs da mucosa.
Hemaglutinina (HA), que permite a ligao do vrus (adsoro) aos
resduos de cido silico na membrana da clula hospedeira, mediando a fuso viral com o endosoma.
Protena do nucleocapsdeo (NP). Protenas de matriz (M1 e M2). A M1 prov a rigidez e a M2 est
relacionada ao canal inico, presente somente no influenza A.

Protenas no-estruturais (NS).
Dentre as protenas mencionadas, a hemaglutinina e a neuraminidase apresentam propriedades importantes, como a que est relacionada a sua habilidade de alterao devido a mutaes e recombinaes gnicas, sem alterao da sua funo. As recombinaes gnicas ocorrem devido ao genoma ser segmentado. Esses processos acarretam o drift e o shift antignicos. Os drifts so mutaes menores no genoma viral, levando a epidemias anuais. J o shift so as mutaes mais extensas, levando possibilidade de pandemias. Estas grandes mutaes acarretaram grandes epidemias e pandemias na histria da humanidade, onde milhes de indivduos morreram. Como exemplo, a Gripe Espanhola de 1918, causada pelo vrus H1N1, com mais de vinte milhes de mortes no mundo; a Gripe de Hong Kong, de 1968-69, causada pelo vrus H3N2, com mais de 30 mil mortes nos Estados Unidos; a Gripe Asitica, de 195758, causada pelo vrus H2N2, dentre outras ocorrncias, inclusive recentemente, em 2009, a Gripe A, inicialmente chamada Gripe Suna, que ocorreu primeiramente no Mxico e posteriormente em outros pases, inclusive no Brasil. A nomenclatura do Influenzavrus baseada nos seguintes aspectos: tipo de vrus (A ou B), local de isolamento do vrus, designao da linhagem, ano de isolamento, subtipo de hemaglutinina e neuraminidase, por exemplo: A/Texas/1/77/H3N2.
Virologia | 205
As manifestaes clnicas clssicas da infeco causada pelo Influenzavrus geralmente surgem de forma abrupta e so, principalmente, febre alta, dor de cabea, calafrios, dores musculares, tosse seca, dentre outro sintomas. Geralmente, a febre e os sintomas sistmicos persistem por trs dias. J os sintomas respiratrios duram de trs a quatro dias. Desta forma, a fase aguda da doena dura aproximadamente de quatro a oito dias, seguida do perodo de convalescena de uma a duas semanas. A infeco pelo Influenzavrus pode ter como consequncia a pneumonia, a miosite e complicaes neurolgicas, as quais so evidenciadas principalmente em idosos, imunodeficientes e outros indivduos com alteraes cardacas e pulmonares. O diagnstico laboratorial baseia-se principalmente no isolamento viral (em cultura de clulas), na identificao dos antgenos virais e do cido nucleico. A maioria dos mtodos de diagnstico requerem como material clnico a secreo de nasofaringe, obtida por aspirao ou por swab. Para a preveno e tratamento desta infeco podem ser usados, respectivamente, vacinas de vrus inativados e drogas, como o cloridrato de amantadina e seu anlago, a rimantadina (Quadro 4).
10.20. Paramyxoviridae
O termo myxo vem do grego, que significa mucosas, e identifica a especificidade dos Paramyxovrus aos mucopolissacardeos e glicoprotenas presentes nos receptores de superfcie das clulas. Os vrus deste grupo podem acometer humanos e muitos animais, como artrpodes e vertebrados. A famlia Paramixoviridae possui os gneros: Morbilivrus, Paramixovrus e Pneumovrus; sendo o primeiro destes o mais conhecido dos que infectam humanos, o qual causador do sarampo. Os Paramixovrus tm como representante o vrus da Parainfluenza e os Pneumovrus so representados pelo vrus da caxumba. Como caractersticas importantes, os vrus deste grupo apresen-
tam a aglutinao de hemcias em mamferos e aves, alm da atividade da enzima neuraminidase. A forma do vrus completamente irregular, variando de esfricos a filamentosos com dimetro de 150 a 300 nm, sendo considerados pleomrficos. O envelope apresenta projees na superfcie, com espculas distintas de hemaglutinina e neuraminidase. O capsdeo alongado e exibe simetria helicoidal, sendo o nucleocapsdeo filamentoso e com extenso que varia de 600 a 800 nm, dependendo do gnero. Os vrions so compostos de 30% de lipdios em relao ao seu peso e os mesmos esto localizados no envelope. Os vrions so sensveis ao tratamento com solventes lipdicos, detergentes no inicos, formaldedo, agentes oxidantes e calor. As protenas constituem aproximadamente de 75 a 80% do peso da partcula, sendo estas estruturais e no estruturais, codificadas pelo genoma viral. Os carboidratos representados pelas glicoprotenas so encontrados no vrion e constituem 6% do seu peso seco. Os membros desta famlia contm no genoma uma molcula de RNA, de fita simples, linear, com polaridade negativa. Os vrions medem de 150 a 200 nm de dimetro e de 1.000 a 10.000 nm em extenso. Esses vrus se ligam a receptores especficos localizados na superfcie da membrana celular e entram na clula hospedeira via fuso do envelope viral, com a superfcie da clula em um ambiente de pH neutro. Durante o seu ciclo biolgico, os vrions tm uma fase extracelular e o capsdeo viral envelopado, maturando-se naturalmente atravs da adeso com a clula hospedeira. A replicao do genoma ocorre de maneira similar aos outros vrus RNA, que possuem polaridade negativa. A transcrio, a sntese de protenas e a replicao do genoma ocorrem no citoplasma da clula hospedeira. As glicoprotenas virais so sintetizadas e processadas como as glicoprotenas da clula. Os vrions maduros ligam-se membrana plasmtica hospedeira e saem da clula.
Virologia | 207
Das doenas causadas por vrus desta famlia, o sarampo constitui uma das mais estudadas e importantes. Esta doena pode causar trs formas de encefalite: 1) infeco direta dos neurnios; 2) encefalite ps-infeco, que se acredita ser mediada imunologicamente; e 3) panencefalite esclerosante subaguda (SSPE), causada por uma variante defectiva do vrus durante a fase aguda da doena. O Vrus SSPE age lentamente e causa sintomas e efeitos citopticos em neurnios, muitos anos aps a fase aguda da doena. O desenvolvimento de um programa efetivo de vacinao tornou o sarampo uma doena rara nos Estados Unidos. Em reas sem um bom programa de vacinao, a epidemia se mostra cclica, repetindo ciclos epidmicos de 1 a 3 anos, quando j se tem um nmero acumulado de pessoas suscetveis. Atualmente, existem algumas vacinas no mercado que so capazes de proteger apenas contra alguns sorotipos virais, sendo isso, uma grande limitao desta forma de preveno. Outra desvantagem o elevado custo.
10.21. Rhabdoviridae
O prefixo desta famlia vem do grego rhbdos, que significa formato de basto. A famlia Rhabidoviridae infecta uma variedade de hospedeiros, incluindo artrpodes, o grupo dos vertebrados e vegetais. Existem aproximadamente 200 espcies de Rabdovrus reconhecidas pelo ICTV. Entretanto, poucas so bem caracterizadas e associadas a gneros. A complexidade genmica e de transcrio, mostradas por esses vrus, indicam a grande diversidade da famlia. Os gneros de importncia em animais so:
Vesiculovirus (Vesicular stomatitis virus, VSV) Lyssavirus (Rabies virus, vrus da raiva) Ephemerovirus (Bovine ephemeral fever virus) Novirhabdovirus (Infectious hemathopoietic necrosis virus )
O genoma contm apenas uma fita de RNA, no segmentado e de polaridade negativa, exceto em 5% dos membros dessa famlia. O genoma completo tem de 11 mil a 15 mil nucleotdeos. O peso da partcula viral constitudo por aproximadamente 65% a 75% de protenas e o restante de lipdeos totais, sendo 50% a 60% de fosfolipdeos e 30% a 40% de esteris e fosfolipdeos. Outro componente importante das partculas virais so os carboidratos, que constituem 3% da sua composio. A semelhana entre a composio dos lipdeos virais e da membrana plasmtica eles sugere que tenham sido originados da clula hospedeira. O vrion desta famlia apresenta o envelope e o nucleocapsdeo medindo de 45 a 100 nm de dimetro. As projees da superfcie so densamente dispersas com espculas. O capsdeo de simetria helicoidal. A infeco por Vesiculovirus acarreta a formao de ppulas, as quais progridem para vesculas, e quando estas se rompem pode ocorrer infeco secundria, agravando o processo. Com o vrus da raiva (Lyssavirus), o desenvolvimento dos sinais clnicos em humanos podem ser divididos em trs fases gerais: perodo prodrmico, fase neurolgica aguda (agitao, hipersalivao e paralisia) e a fase de coma, precedendo a morte. Em casos em que a hiperatividade predominante, a doena classificada como raiva furiosa. Naqueles em que a paralisia predominante, chamada raiva paraltica. Na infeco por Ephemerovirus, o primeiro sinal clnico a febre, em torno de 40 a 42C, progredindo para quadros de anorexia, depresso e fraqueza muscular. O diagnstico laboratorial post mortem do vrus da raiva dever ser realizado com espcimens clnico do sistema nervoso central (SNC), pelas tcnicas de Imunofluorescncia ou Imuno-histoqumica para a deteco do antgeno viral. Para o diagnstico de Vesiculovirus, utilizam-se amostras de fluido vesicular ou do epitlio da leso para o isolamento viral em culturas de clulas, em animais de laboratrio ou em ovos embrionados. Outros mtodos, como Imunofluorescncia e a neutralizao viral, tambm podero ser utilizados
Virologia | 209
para o diagnstico. E ainda, para a deteco de Ephemerovirus, empregam-se as tcnicas sorolgicas ELISA ou neutralizao viral. Como preveno da infeco por Lyssavirus humano (raiva) indicada a profilaxia ps-exposio (soroterapia).
10.22. Filoviridae
Os vrus desta famlia so taxonomicamente classificados na ordem Mononegavirales. O Gnero Marburgvrus foi descrito em 1967, na Alemanha, aps seu isolamento, a partir de 31 pessoas infectadas; e o gnero Ebolavrus foi descrito em 1976, na frica subsaariana. Nesta famlia, os vrus possuem capsdeo viral envelopado, com simetria helicoidal. O genoma de RNA de fita simples linear, no segmentado e possui polaridade negativa, constituindo 1,1% do peso da partcula. Os vrions desta famlia so filamentosos e pleomrficos, medindo 80 nm de dimetro, podendo chegar a 1.400 nm em extenso. O gnero Marburgvirus apresenta a nica espcie Lake Victoria Marburgvirus, responsvel pela febre hemorrgica de Marburg e o gnero Ebolavrus apresenta quatro espcies: Zaire ebolavirus (EBOV-Z), Sudan ebolavirus (EBO-S), Reston ebolavirus (EBOV-R) e Ivore Coast ebolavirus (EBOV-IC). Causa a febre sbita, dor muscular, dor de cabea e leses orais. As enfermidades causadas por esses vrus induzem grandes processos hemorrgicos em humanos e em primatas no humanos, causando, dentre outros sintomas graves, diarreia, erupes cutneas, hemorragias, interna e externa, e vmito com sangue, alm de petquias, sintomas que podem levar ao choque hipovolmico e bito em poucos dias. A transmisso viral pode ocorrer atravs de vrios fludos orgnicos, como sangue, fezes, suor, saliva, vmito, smen e outras secrees, principalmente sanguinolentas. O perodo de incubao ocorre de 2 a 21 dias. O
diagnstico laboratorial consiste em analisar amostras, como saliva, urina e outros fludos, pelas tcnicas ELISA e Imunofluorescncia, alm de mtodos moleculares. Para controle e preveno dessas infeces, devem ser tomadas medidas, como o adequado isolamento do paciente, esterilizao de materiais que entraram em contato com as amostras, ou mesmo com o paciente infectado, utilizao de equipamentos de proteo individual especial pelos profissionais de sade e dos contactantes (ver captulo 1 do volume 1). Ainda no existe vacina e terapia antiviral especfica, por isso, o tratamento para essas infeces paliativo, ou seja, a busca da reduo do quadro hemorrgico, a hidratao hdrica e eletroltica parenteral e oral.
10.23. Bunyaviridae
A famlia Bunyaviridae consiste em mais de 300 sorotipos que infectam vertebrados, invertebrados e vegetais. Os gneros definidos nessa famlia so: Nairovirus, Phlebovirus, Hantavirus, Orthobunyavirus e Tospovirus. Esses vrus so transmitidos por mosquitos, flebotomneos e carrapatos, com exceo do gnero Hantavirus, que infecta roedores e so transmitidos por inalao de aerossis dos dejetos destes animais . Os membros desta famlia so conhecidos por causarem infeces graves no homem, dentre as quais destacamos: a febre do Vale Rift, a febre hemorrgica do Congo e da Crimia e a encefalite da Califrnia. Os vrus pertencentes a esta famlia so vrus de RNA circular de fita simples, trissegmentado, sendo dois segmentos de polaridade negativa e um de polaridade positiva. O virion carrega, tambm, uma enzima, polimerase (cap-dependente), denominada L. As extremidades dos segmentos de RNA servem como stio de reconhecimento para a polimerase. O vrion apresenta simetria helicoidal, possui envelope e exibe um tamanho de 90 a 100 nm de dimetro. provvel que o mecanismo de viropexia ocorra
Virologia | 211
durante a entrada do vrus na clula, subsequentemente observado o desnudamento parcial do capsdeo e a partir da a transcrio e traduo das protenas virais no citoplasma. Os vrus migram para a regio interna da membrana celular e finalmente saem da clula por pinocitose (brotamento), carreando parte da bicamada lipdica da clula hospedeira, para formar, assim, seu envelope. O vrus mais conhecido desta famlia o Vrus Hantaan, o qual pertence ao gnero Hantavrus. Este vrus infecta roedores e causa diferentes doenas, como a febre hemorrgica, com sndrome renal, na sia e na Europa, e a sndrome pulmonar e cardiovascular, que ocorre nas Amricas. A Sndrome pulmonar caracterizada por extravasamento de lquidos do compartimento intravascular para o interstcio pulmonar, podendo levar a grave insuficincia respiratria. Esses vrus so transmitidos ao homem por inalao de aerossis disseminados pelos excrementos e saliva de roedores infectados, mas foi descrita tambm a possibilidade de contgio direto ou indireto entre humanos. O primeiro caso registrado no Brasil ocorreu na dcada de 1980, no estado do Par. Em 1993, trs casos graves, inclusive um deles com bito, aconteceram no estado de So Paulo, em Juquitiba. O nmero de casos associados a este vrus tem aumentado, disseminando-se para o sul do pas, tendo, como quadros clnicos, caractersticas da sndrome pulmonar cardiovascular. Alguns desses casos mostraram evoluo de uma grave pneumonia intersticial nos dois pulmes, com febre intensa e insuficincia respiratria. A confirmao dos casos pelo diagnstico laboratorial pode ser evidenciada pela Reao em Cadeia da Polimerase precedida de uma Transcrio Reversa (RT-PCR), assim como a deteco de anticorpos IgM especficos no soro, atravs do ELISA. O incio da doena caracterizado pelos seguintes sintomas clnicos: dispneia, insuficincia respiratria grave, calafrios, nuseas, vmitos e, em alguns casos, diarreia e dores abdominais. Como esses sintomas
podem ocorrer em diversas sndromes, importante que se realize o mtodo ELISA na pesquisa de anticorpos IgM, a fim de caracterizar a fase aguda da doena. Para evitar a propagao dessa doena, deve-se orientar as pessoas que moram na zona rural ou em qualquer outro lugar de risco sobre a possibilidade de os roedores silvestres (subfamlia Sigmodontinae) serem reservatrios dos vrus. Outro cuidado importante deve ser dispensado aos profissionais de sade, uma vez que j foram relatados alguns casos de mdicos e funcionrios contaminados por pacientes ou fmites. O tratamento da sndrome pulmonar e cardiovascular baseia-se na oxigenao, ventilao dos pulmes e controle da presso arterial. Por esse motivo, pacientes com esse quadro necessitam de uma internao em unidade de terapia intensiva (UTI). Estudos sugerem que drogas antivirais, como a Ribavarina, possam reduzir a gravidade do quadro clnico do paciente gravemente acometido.
11. Viroides e P rons Prons 11.1. Viroides
O conceito de viroide foi proposto por Diener em 1971, quando estudava a doena do tubrculo da batata, onde detectou RNA nos ncleos das clulas vegetais doentes. O viroide uma partcula infecciosa de RNA menor que os vrus, apresentando, ainda, outras diferentes caractersticas: Consiste em apenas uma molcula de RNA circular com baixo peso, no apresenta capsdeo e envelope, no produz protenas, pode ser copiado apenas no ncleo da clula hospedeira e, para a sua deteco, necessria a identificao de sequncias de nucleotdeos do RNA, diferindo dos vrus, por no ser possvel a sua visualizao em tecidos infectados sem a utilizao dessas tcnicas.
Virologia | 213
Os viroides so classificados na taxonomia moderna em famlias, gneros e espcies, segundo suas caractersticas biolgicas e moleculares. E constituem os menores e menos complexos fitopatgenos conhecidos. Ainda no est claro como os viroides causam doena, mas devem utilizar protenas celulares para efetivar seu ciclo infeccioso. A morte celular pode ocorrer devido alterao do metabolismo, pois este interfere na capacidade de as clulas processarem o RNA mensageiro, impedindo, assim, a produo de protenas celulares.
11.2. Prons
Os prons so partculas proteicas infecciosas, extremamente pequenas, resultantes de protenas normais modificadas por mutao, nomeada por Stanley Prusiner, em 1982. Diferente de outras protenas que aparecem em membranas plasmticas de muitas clulas, os prons se ligam a estas membranas internamente formando fibrilas que, como no podem ser organizadas corretamente, formam agregados que, por sua vez, ao longo do tempo, acabam por matar as clulas. Desde 1920, vrias doenas tm sido atribudas a esse agente infeccioso, algumas delas acometem o ser humano e causam degenerao mental, outras esto relacionadas a infeces de caprinos e bovinos, como a encefalopatia e a doena da vaca louca, respectivamente. Vrios aspectos da infeco por prons ainda no esto elucidados, entre eles a forma como uma doena causada por pron se propaga. O Prmio Nobel de Medicina, de 1987, foi dado a Prusiner por seu estudo, onde ele identifica as cinco caractersticas desse agente infeccioso:
no so inativados pelo calor a 90 oC; o tratamento com radiao no tem efeito nas infeces por prons,
nem formol;
resistem s enzimas que digerem DNA ou RNA;
so destrudos por agentes qumicos, como o fenol, a ureia e hidrxido
de sdio 1M, responsveis pela desnaturao de protenas;

possuem pareamento direto de aminocidos.
Atualmente, sabe-se que a inativao dos prons s possvel em autoclave, temperatura de 130o C.
nicos 12. Vrus Oncog Oncognicos
So vrus com capacidade de modificar o acido nucleico, formando associao estvel com o genoma da clula hospedeira, mudando a sua estrutura e a funo no organismo. Os oncogenes so fragmentos de DNA de vrus tumorais que causam a diviso descontrolada da clula hospedeira, j o protooncogene similar ao oncogene, mas formado a partir da captura de genes extras da clula hospedeira por alguns vrus RNA tumorais. A maioria dos vrus oncognicos codifica a informao para divises ilimitadas, pois so mutantes que contm delees ou substituies. Essas mutaes alteram o material codificado por estes genes. A maioria dos vrus tumorais conhecidos at o momento so vrus DNA, tais como o vrus de Epstein-Barr (EBV), o Papilomavrus humanos (HPV) e o Vrus da hepatite B (HBV); entretanto, alguns vrus RNA esto associados a cnceres, como, por exemplo, o HTLV-1 e o HIV.
Referncias Bibliogrficas
AMERICAN Academy of Pediatrics. Adenovirus Infections. In: PETER G.(Ed.), 1997 Red Book. Report of the Committee on Infectious Diseases. 24.ed. Elk Grove Village, I.L: American Academy of Pediatrics, 1997. ANTONSSON, A. et al. The ubiquity and impressive genomic diversity of human nature of these viruses. J. Virol,v. 74 , n. 24, p.11.636-11.641, 2000. BENETKA, V. et al. First report of an iridovirus (Genus Ranavirus) infection in a Leopard tortoise (Geochelone pardalis pardalis).Vet. Med. Austria / Wien. Tierrztl. Mschr, v. 94, p.243-248, 2007.
Virologia | 215
BERNARD, H. U.; CHAN, S. Y.; DELIUS, H. Evolution of papillomaviruses. Curr. Top. Microbiol. Immunol. v. 186, p.34-53, 1994. BERNS, K. I.; FIELDS, B. N.; KNIPE, D. M.; HOWLEY, P . M. Parvoviridae: the viruses and their replication. Fields Virology. Philadelphia: Lippincott-Raven Publishers, 1996. BEST, S. M. et al.. Caspase cleavage of the nonstructural protein NS1 mediates replication of Aleutian mink disease parvovirus. J. Virol, v. 77, p.5.305-5.312, 2003. BLACK, J. G. Microbiologia: Fundamentos e perspectivas. 4. ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2002. KNIPE, D. M; HOWLEY, P . M. (Ed.). Fields Virology. 4. ed. Philadelphia: Lippincott, Williams and Wilkins, 2001. BOFILL-MAS, S. et al. Potential transmission of human polyomaviruses through the gastrointestinal tract after exposure to virions or viral DNA. J. Virol., v. 75, n. 21, p. 10.290-10.299, 2001. CMARA, G. N. N. L. et al. Os papilomavrus humanos HPV: histrico, morfologia e ciclo biolgico. Universitas Cincias da Sade, v. 01, n. 01, p.149-158, 2003. CANN, A. J. Principles of molecular virology. 4. ed. San Diego: Academic Press, 2001. CARVALHO, W. B. Acute bronchiolitis, an updated review. Rev Assoc Med Bras,v. 54, n. 1, p.10, 2008. CAVANAGH, D. et al. Coronaviruses from pheasants (Phasianus colchicus) are genetically closely related to coronaviruses of domestic fowl (infectious bronchitis virus) and turkeys . Avian. Pathology, v. 31, p. 81-93, 2002. CHANTLER, J. ; WOLINSKY, J. S. ; TINGLE, A. (). Rubella virus. In: KNIPE, D.M.; HOWLEY, P.M. (Eds.). Fields Virolog. 4. ed. Philadelphia: Lippincott, Williams and Wilkins, 2001. CHEN, W. et al. A novel influenza A virus mitochondrial protein that induces cell death. Nat. Med., v. 12, p. 1.306-1.312, 2001. CLAUS, M. P . et al.. Anlise filogentica de papilomavrus bovino associado com leses cutneas em rebanhos do estado do Paran. Pesq. Vet. Bras. v. 27, n. 7, p. 314-318, 2007. COLE, C. N. ; CONZEN, S. D. Polyomaviridae: The viruses and their replication. In: KNIPE, D. M. ; HOWLEY, P . M. (Eds.). Fields Virology. 4. ed. Philadelphia: Lippincott Williams and Wilkins, 2001. CONWAY, M. J. ; MEYERS, C. Replication and Assembly of Human Papillomaviruses. J . Dent. Res., v. 88, n. 4, p.307-317, 2009.
DAVISON, A. J. Evolution of the herpesviruses. Vet. Microbiol., v. 86, n. 69-88, 2002. DE CLERCQ, E. Antiviral drugs in current clinical use. J. Clin. Virol., v. 30, p.115133, 2004. ______. Antiviral drug Discovery and development: Where chemistry meets with biomedicine. Antiviral Res, v. 67, p.56-75, 2005. DESROSIERS, R. C. Nonhuman lentiviruses. In: KNIPE, D. M. ; HOWLEY, ; P . M. (Eds.). Fields Virolog. 4. ed. Philadelphia: Lippincott Williams and Wilkins, 2001. DIMMACK, N. .J. ; EASTON, A. J.; LEPPARD, K. Introduction to modern virology. 6. ed. Oxford, UK: Blackwell Publishing, 2007. DOPAZO, C. P. ; BARJA, J. L. Diagnosis and identification of IPNV in salmonids by molecular methods. In: CAREY, O. C.(Ed.). Molecular diagnosis of salmonid disease,. v. 2, p. 23-47, 2002. EIRAS, M. et al. Virides e virusides: relquias do mundo de RNA. Fitopatol. Bras.v. 31, n. 3, 2006. FERREIRA, A. W. ; VILA, S. L. M. Diagnstico laboratorial das principais doenas infecciosas e auto-imunes. 2. ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2001. FERREIRA, W. F. C. ; SOUSA, J. C. F. Microbiologia. Lisboa: Lidel, 2002. FIGUEIREDO L.T.M. Febres hemorrgicas por vrus no Brasil. Rev. Soc. Bras. Med. Trop., v. 39, n. 2, p. 203-210, 2006. _____. Vrus brasileiros da famlia Bunyaviridae. Medicina, Ribeiro Preto, v. 32, p. 154-158, 1999. FIELDS, B. N. ; KNIPE, D. M. ; HOWLEY, P . M. Fields Virology. 5. ed. Philadelphia: Lippincott-Raven Pub, 2002. _____. Fields Virology.. Philadelphia: Lippincott-Raven Pub, 2006. FLINT, S. J. et al. Principles of Virology: Molecular Biology, Pathogenesis, and Control. Washington: ASM, 2000. FLORES, E. F. Virologia Veterinria. Editora da UFSM, 2007. _____. et al. Viroidae. In: FAUQUET, CM. et al. Virus Taxonomy, Eighth Report of the International Committee on Taxonomy of Viruses. London: Elsevier Academic Press, 2005. FORSLUND, O. et al. A broad range of human papillomavirus types detected with a general PCR method suitable for analysis of cutaneous tumours and normal skin . J. Gen. Virol., v. 80, p. 2437-2443, 1999.
Virologia | 217
FOY, H. M. Adenoviruses. In: EVANS, A. ; KASLOW, R. (Ed.). Viral Infections in Humans: epidemiology and control. 4. ed. New York: Plenum, 1997. GAO, G. P. et al. Novel adeno-associated viruses from rhesus monkeys as vectors for human gene therapy. Proc. Natl. Acad. Sci., USA, v. 99, p. 11854-11859, 2002. GUBALA, A.J. et al. Genomic characterisation of Wongabel virus reveals novel genes within the Rhabdoviridae. irology, 376; v. 1, n. 20, p. 13-23, 2008. HORWITZ, M. S. Adenoviruses. In: FIELDS B. N. ; KNIPE D. M. ; HOWLEY P. M. (Ed.). Fields Virology. 3. ed. Philadelphia: Lippincott-Raven, 1995. ICTVdB Management 00.001. Adenoviridae. In: ICTVdB . The Universal Virus Database, version 3. BCHEN-OSMOND, C. (Ed.). New York, USA: Columbia University, 2006. _____. Management 00.017. Arenaviridae. In: ICTVdB. The Universal Virus Database, version 3. BCHEN-OSMOND, C. (Ed.). New York, USA: Columbia University, 2006. ______. Management 00.005. Astroviridae. In: ICTVdB. The Universal Virus Database, version 3. BCHEN-OSMOND, C. (Ed.). New York, USA: Columbia University, 2006. ______. Management 00.009. Birnaviridae. In: ICTVdB - The Universal Virus Database, version 3. BCHEN-OSMOND, C. (Ed.). New York, USA: Columbia University, 2006. ______. Management 00.011. Bunyaviridae. In: ICTVdB - The Universal Virus Database, version 3. BCHEN-OSMOND, C. (Ed.). New York, USA: Columbia University, 2006. ______. Management 00.012. Caliciviridae. In: ICTVdB - The Universal Virus Database, version 3. Bchen-Osmond, C. (Ed.). New York, USA;Columbia University, 2006. ______. Management 03.019. Coronaviridae. In: ICTVdB - The Universal Virus Database, version 3. Bchen-Osmond, C. (Ed.). New York, USA; Columbia University, 2006. ______. Management 01.025. Filoviridae. In: ICTVdB - The Universal Virus Database, version 3. Bchen-Osmond, C. (Ed.). New York, USA.; Columbia University, 2006. ______. Management 00.026. Flaviviridae. In: ICTVdB - The Universal Virus Database, version 3. Bchen-Osmond, C. (Ed.); New York, USA; Columbia University, 2006. ______. Management 00.030. Hepadnaviridae. In: ICTVdB - The Universal Virus Database, version 4. Bchen-Osmond, C. (Ed.); New York, USA; Columbia University, 2006.
______. Management 00.031. Herpesviridae. In: ICTVdB - The Universal Virus Database, version 3. Bchen-Osmond, C. (Ed.); New York, USA; Columbia University, 2006.
______. Management 00.036. Iridoviridae. In: ICTVdB - The Universal Virus Database, version 3. Bchen-Osmond, C. (Ed.); New York, USA; Columbia University, 2003.
______. Management 00.046. Orthomyxoviridae. In: ICTVdB - The Universal Virus Database, version 3. Bchen-Osmond, C. (Ed.); New York, USA; Columbia University, 2006. ______. Management. 00.099. Papillomaviridae. In: ICTVdB - The Universal Virus Database, version 3. Bchen-Osmond, C. (Ed.); New York, USA; Columbia University, 2006. ______. Management 01.048. Paramyxoviridae. In: ICTVdB - The Universal Virus Database, version 3. Bchen-Osmond, C. (Ed.); New York, USA; Columbia University, 2006. ______. Management. 00.050. Parvoviridae. In: ICTVdB - The Universal Virus Database, version 3. Bchen-Osmond, C. (Ed.); New York, USA; Columbia University, 2006. ______. Management 00.052. Picornaviridae. In: ICTVdB - The Universal Virus Database, version 3. Bchen-Osmond, C. (Ed.); New York, USA; Columbia University, 2006. ______. Management. 00.047. Polyomaviridae. In: ICTVdB - The Universal Virus Database, version 3. Bchen-Osmond, C. (Ed.); New York, USA; Columbia University, 2006. ______. Management 00.058. Poxviridae. In: ICTVdB - The Universal Virus Database, version 4. Bchen-Osmond, C. (Ed.); New York, USA; Columbia University, 2006. ______. Management 01.062. Rhabdoviridae. In: ICTVdB - The Universal Virus Database, version 3. Bchen-Osmond, C. (Ed.); New York, USA; Columbia University, 2006. ______. Management 00.060. Reoviridae. In: ICTVdB - The Universal Virus Database, version 3. Bchen-Osmond, C. (Ed.); New York, USA; Columbia University, 2006. ______. Management 00.061. Retroviridae. In: ICTVdB - The Universal Virus Database, version 3. Bchen-Osmond, C. (Ed.); New York, USA; Columbia University, 2006. ______. Management 00.073. Togaviridae. In: ICTVdB - The Universal Virus Database, version 3. Bchen-Osmond, C. (Ed.); New York, USA; Columbia University, 2006. JAWETZ, E.; MELNICK, J. L.; ADELBERG, E.A. Microbiologia Medica. 22. ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2005.
Virologia | 219
KUHN, R. J. et al. Structure of Dengue virus: Implications for flavivirus organization, maturation, and fusion. Cell, v. 108, p. 717-725, 2002. LA SCOLA, B. et al. A giant virus in amoebae. Science, . 28; v. 299, n. 5615, p. 2033, 2003. LITTER, E. ; OBERG, B. Achievements and challenges in antiviral drugs. Antiviral Chem. Chemother, v.16, p.155-168, 2005. _____. The past, present and future of antiviral drug discovery. Drugs, v.7, n.12, p. 1104-1112, 2004. LOPEZ, S. ; ARIAS, C. F. Multistep entry of rotavirus into cells: a Versaillesque dance. Trends Microbiol, v. 12, p. 271-278. MADIGAN, M. T. Microbiologia de Brock. 10.ed. So Paulo: Prentice Hall, 2004. MORALES, J. C. Tcnicas de diagnstico em virologia. Madri: Ediciones Diaz de Santos, 1993. MURPHY, F. A. et al. The Classification and Nomenclature of Viruses. Sixth Report of the International Committee on Taxonomy of Viruses. Archives of Virology, Nova Iorque: Springer Verlag, 1995. MURRAY, P . R. ; ROSEHTHAL, K.S. ; PFALLER, M.A. Medical Microbiology. 9. ed. Washington, DC: ASM Press, 2007. OLIVEIRA, L. H. S. Virologia Humana. 1. ed. Rio de Janeiro: Cultura Mdica, 1994. PARASHAR, U. D. Rotavirus and severe childhood diarrhea. Emerg. Infect. Dis., v. 12, p.304-306. RAMOS, E.et al. The decade of polyomavirus BK-associated nephropathy: state of affairs. Transplantation,. 15; v. 87, n. 5, p. 621-630, 2009. ROBINSON, J. L.. Prevention of congenital rubella syndrome - what makes sense in 2006? Epidemiol. Rev. , v. 28, p. 81-7, 2006. RODRIGUES, C. A. Deteco e caracterizao molecular do poliomavrus em transplantados,Dissertao (Mestrado) Aveiro: Universidade de Aveiro, 2006. ROSENBERG, H. F. ; DYER, K. D. ; DOMACHOWSKE, J. B. Respiratory viruses and eosinophils: exploring the connections. Antiviral Res, v. 83, n. 1, p.1-9, Epub, 2009,16. ROTTINGHAUS, S. T. ; WHITLEY, R. J. Current non-AID antiviral chemotherapy. Ther, v. 5, n. 2, p. 217-230, 2007. RYAN KJ RAY, C. G. Sherris Medical Microbiology: an Introduction to Infectious Diseases. New York: McGraw-Hill, 2004.
SANTOS, N. S. O. ; ROMANOS, M. T. V. ; WIGG, M. D. Introduo Virologia Humana. 2. ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan , 2008. SPECTER, S. ; HODINKA, R. L. ; YOUNG, S. A. Clinical Virology Manual. 3. ed. ASM Press: Washington, 2000. STRAUSS, E. G. ; STRAUSS, J. H. Viruses and human disease. San Diego: Academic Press, 2002. TRABULSI, L. R. Microbiologia. 3. ed. So Paulo: Atheneu, 2002. VAN REGENMORTEL, M. H. V. et al. Virus Taxonomy: The Classification and Nomenclature of Viruses. The Seventh Report of the International Committee on Taxonomy of Viruses. San Diego. Academic Press, 2000. WAGNER, E. K. ; HEWLETT, M. J. Basic Virology, 2004. WENGLER, G. The regulation of disassembly of alphavirus cores. Arch. Virol., v. 154, n. 3, p. 381-90.

Virologiafiocruz

Uploaded by

Document Information

Original Title

Copyright

Available Formats

Share this document

Share or Embed Document

Sharing Options

Did you find this document useful?

Is this content inappropriate?

Copyright:

Available Formats

Virologiafiocruz

Uploaded by

Copyright:

Available Formats

| 125

126 | Conceitos e Mtodos para a Formao de Profissionais em Laboratrios de Sade

128 | Conceitos e Mtodos para a Formao de Profissionais em Laboratrios de Sade

2. T Taxonomia axonomia Viral

ciclo biolgico do vrus - Ex: Retrovrus

130 | Conceitos e Mtodos para a Formao de Profissionais em Laboratrios de Sade

Figura geomtrica com vinte faces iguais.

132 | Conceitos e Mtodos para a Formao de Profissionais em Laboratrios de Sade

134 | Conceitos e Mtodos para a Formao de Profissionais em Laboratrios de Sade

4.4. Sntese viral

das fitas do cido nucleico copiada.

Classe IV: Ocorre no citoplasma, por meio de um processo comple-

xo, ainda pouco esclarecido.

genoma viral e sntese de RNA mensageiro.

rstica principal a formao de um RNA intermedirio.

136 | Conceitos e Mtodos para a Formao de Profissionais em Laboratrios de Sade

Figura 3. Replicao viral

5. P atognese da infeco viral Patognese

138 | Conceitos e Mtodos para a Formao de Profissionais em Laboratrios de Sade

Traqueobronquite Tosse Bronquiolite Faringite Pneumonia Resfriado comum

140 | Conceitos e Mtodos para a Formao de Profissionais em Laboratrios de Sade

Figura 5. Latncia viral

Figura 6. Stios de entrada, viremia e disseminao viral

142 | Conceitos e Mtodos para a Formao de Profissionais em Laboratrios de Sade

Comportamento de risco Controle de qualidade

Foco natural (nicho)

Fonte de infeco Hospedeiro

Hospedeiro definitivo Hospedeiro intermedirio Taxa de incidncia

144 | Conceitos e Mtodos para a Formao de Profissionais em Laboratrios de Sade

Perodo de encubao Infestao

Janela imunolgica Morbidade Mortalidade Oportunista

Taxa de prevalncia Perodo Prodrmico

Reservatrio de agentes infecciosos

Surto Transmisso indireta

146 | Conceitos e Mtodos para a Formao de Profissionais em Laboratrios de Sade

Para a manuteno do processo infeccioso so necessrios:

da e em quantidade suficiente para permitir sua transmisso a outros hospedeiros.

necessrio para encontrar o hospedeiro suscetvel.

6.2. Interao vrus/hospedeiro

148 | Conceitos e Mtodos para a Formao de Profissionais em Laboratrios de Sade

Produo de sintomas locais na porta de entrada

Vrus da imunodeficincia humana Hepatite B

Produo de infeco generalizada associada doena de rgos especficos

Picadas e mordidas Boca, trato intestinal

Pele, traumatismo leve Vias respiratrias

6.3.1. Mucosa 6.3.1.1. Trato respiratrio

Vrus da influenza, Vrus Parainfluenza, Rinovrus, Vrus Respiratrio Sincial e Adenovrus.

disseminada: Vrus da Caxumba, Vrus do Sarampo e Vrus da Rubola.

150 | Conceitos e Mtodos para a Formao de Profissionais em Laboratrios de Sade

Vrus do Herpes Simplex, Vrus Epstein-Barr e Citomegalovrus.

enterites: Rotavrus, Vrus Norwalk e Astrovrus.

causam infeco disseminada: Vrus da hepatite A, Vrus da Hepatite E e Poliovrus.

urinrio: Vrus do Herpes simplex, Vrus do Papiloma.

infeces sistmicas: Citomegalovrus, Vrus de Hepatite B e C e HIV.

152 | Conceitos e Mtodos para a Formao de Profissionais em Laboratrios de Sade

Exemplos de vrus transmitido por mordida de animal: Vrus da Raiva

cirrgico): HIV, Vrus da Hepatite B e C.

154 | Conceitos e Mtodos para a Formao de Profissionais em Laboratrios de Sade

156 | Conceitos e Mtodos para a Formao de Profissionais em Laboratrios de Sade

158 | Conceitos e Mtodos para a Formao de Profissionais em Laboratrios de Sade

Quadro 4. Mecanismos bsicos de ao de drogas antivirais

Inibidores de fuso Inibidores de transcriptase reserva

Anlogo de No anlogo nucleotdeo de nucleosdeo