Microscopia e Mtodos de Colorao

INTRODUO: Material Primrdios da Microscopia:

Lente Aumento: cerca de 270 x

Microscpio de Mo Leewenhoeck ( 1676)

Microscopia e Mtodos de Colorao

INTRODUO: Primrdios da Microbiologia:

Microscpio ptico Pasteur (1860)

Microscopia e Mtodos de Colorao

MICROSCOPIO PTICO

1000 a 1500 x

At 5000 x

Microscopia e Mtodos de Colorao

MICROSCOPIA PTICA Partes do Microscpio ptico:

Microscopia e Mtodos de Colorao

MICROSCOPIA PTICA: Aumento de 1000 x no Microscpio ptico: Objetiva de Imerso:

Microscopia e Mtodos de Colorao

Microscopia e Mtodos de Colorao

MICROSCPIO ELETRNICO Desenvolvido em 1932

Microscopia e Mtodos de Colorao

MICROSCOPIA ELETRNICA:

ME Transmisso (MET)

10.000 x

Microscopia e Mtodos de Colorao

MICROSCOPIA ELETRNICA: ME Varredura (MEV) 200.000 x

Microscopia e Mtodos de Colorao

10

MTODOS DE COLORAO

Os Mtodos de Colorao Facilitam a Visualizao dos Microrganismos ao Microscpio ptico

Preparao a fresco de Leveduras

Preparao corada de Leveduras

Microscopia e Mtodos de Colorao

11

Mtodos Simples

Morfologia

1 corante. Ex: Azul de Metileno

Morfologia Mtodos Diferenciais Reao Tintorial

2 corantes. Ex: Cristal Violeta + Fucsina de Ziehl dil. Fucsina de Ziehl + Azul de Metileno

MTODO DE GRAM MTODO DE ZIEHL- NEELSEN

Microscopia e Mtodos de Colorao

12

Mtodo de Colorao de Gram: Parede Celular

Gram Positiva

Gram Negativa

Microscopia e Mtodos de Colorao

13

Mtodo de Colorao de Gram

Cristal Violeta 1 min.

Lugol 1 min.

Soluo de lcool Etlico 95% ou Acetona

Fucsina de Ziehl diluda 30 seg.

Corante

Mordente Gram Positiva Gram Negativa

Diferenciador Roxo Rosa

Corante

Microscopia e Mtodos de Colorao

14

Mtodo de Colorao de Gram

Microscopia e Mtodos de Colorao

15

Mtodo de Colorao de Gram:

Microscopia e Mtodos de Colorao

Mtodo de Colorao de Ziehl-Neelsen:

Soluo de Fucsina de Ziehl-Neelsen, fenicada, concentrada quente

Soluo lcool cida

Soluo de Azul de Metileno

Corante Interpretao do Resultado:

Descorante Reao Positiva = Vermelha Reao Negativa = Azul

Corante

BAAR

Microscopia e Mtodos de Colorao

Microscopia e Mtodos de Colorao

Mtodo de Colorao de Ziehl-Neelsen:

Globia

Microscopia e Mtodos de Colorao

FIM

Microscopia e Mtodos de Colorao Mtodos de Colorao Diferenciais :

Parede Celular das Micobactrias:

Polipeptdios (Ex.: tuberculina) Lipdios Livres (Ex.: fator corda, ceras, micosdios ) Camada Micolato Arabinogalactano Camada de Peptidioglicano Citoplasma Membrana Citoplasmtica cido D-glutmico - Ac. m-diaminopimlico e L-alanina D-arabinose e D-galactose cidos Miclicos

Microscopia e Mtodos de Colorao

MICROSCOPIA PTICA Partes do Microscpio ptico:

21

Microscopia e Mtodos de Colorao

MICROSCOPIA PTICA: Bacterioscopia ao Microscpio ptico:

22

Dimetro da clula bacteriana: 1 a 2 micrmetros 1 micrmetro = 1 m = 10-6 m Bactria 1-2 m = 1-2 x 10-6 m Microscpio ptico 1000 x (10-3)

Bactria = 10-3 m = 1 a 2 mm