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LABORATORIO BIOLOGIA

UNVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA UNAD PROGRAMA: PSICOLOGIA

DIANA MARCELA ANDRADE JAVIER FERNANDO CALDERON - 1085248556 WILEN ANDERSON CUASES MOLINA "AROL PARRA - 108525!66! VANESA RUI#108526!414

SAN JUAN DE PASTO

Laboratorio de Biologa

OCTUBRE 2012

Laboratorio de Biologa

LABORATORIO BIOLOGIA

UNVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA UNAD PROGRAMA: PSICOLOGIA

DIANA MARCELA ANDRADE JAVIER FERNANDO CALDERON - 1085248556 WILEN ANDERSON CUASES MOLINA "AROL PARRA - 108525!66! VANESA RUI#108526!414

TUTORA VERONICA ORTEGA

SAN JUAN DE PASTO OCTUBRE 2012


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Laboratorio de Biologa

CONTENIDO

INTRODUCCI$N

OBJETIVOS

MARCO TE$RICO

ELEMENTOS PARA EL DESARROLLO DEL LABORATORIO

PRACTICA 1% EL MICROSCOPIO

M&'()*')+&) , *-* +.(/0* P(.'/&'. ')1 -1 /()2) 30 +0(&43&') 560/(. 07

PRACTICA 2% OBSERVACION INICIAL DE CELULAS% -EL CORC8O P(.'/&'. ')1 '96-6.* 30 ')(':)

PRACTICA ;% ESTRUCTURA Y FUNCION DE LA CELULA TEJIDO VEGETAL

P(.'/&'. ')1 '0<)66. P(.'/&'. ')1 +.+. P(.'/&'. ')1 +6.1/. 30 E6)30.

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PRACTICA 4% ESTRUCTURA Y FUNCION DE LA CELULA TEJIDO ANIMAL - P(.'/&'. ')1 '96-6. 0*'.=)*. 0+&/06&.6 - T0>&3) *.1?-@10)

CONCLUSIONES

BIBLIOGRAFIA

INTRODUCCION

La Biologa se ha caracterizado por ser una de las ciencias ms antiguas y estudiadas en la historia de la humanidad, gracias a sus aportes en el estudio de los seres vivos, su naturaleza, origen y evolucin, han permitido ampliar el conocimiento de nuestro surgimiento y mantencin sobre este planeta, sin embargo sin la practica muchos de estas teoras y conocimientos quedaran en meras palabras y en el entredicho de la comunidad.

Es por ello que a travs de esta prctica de laboratorio pretendemos demostrar de manera sencilla pero concreta los hallazgos y di erencias entre las clulas animales y vegetales! para ello emplearemos el uso del instrumento ms usado por dcadas para este tipo de estudio "El #icroscopio$ al igual que otro tipo de elementos de cil acceso pero de gran utilidad para este tipo de e%ercicio. &or 'ltimo y no menos importante es preciso tener en cuenta las normas bsicas de bioseguridad que se deben poner en prctica a la hora de desarrollar cualquier tipo de prctica dentro del laboratorio.
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OBJETIVOS

(econocer las partes del microscopio y dar un uso adecuado del mismo.

(econocer, describir y comprender la estructura de las clulas )egetales y animales.

A%

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MARCO TEORICO

**********

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ELEMENTOS PARA EL DESARROLLO DEL LABORATORIO

+. -. /. 2. 3. 5. 7. 8.

Blusa , ranela .abn 0oalla peque1a o de manos Libreta de apuntes, lpiz, borrador, sacapuntas y lapicero 4o%as en blanco tama1o carta u o icio 6n trozo de papel peridico 0i%eras &apa, cebolla cabezona, ho%a de elodea 9se consigue en los lugares donde venden peceras arti iciales y peces: ;. &alillos de madera +<. =orcho de madera 9botella: ++. =uchillas 9#inora u otra marca:. +-. Lancetas 9para pinchar el dedo y sacar muestra de sangre, la venden en cualquier >armacia o ?roguera:. +/. =ubre ob%etos y &ortaob%etos. +2. #icroscopio

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PRACTICA 1% EL MICROSCOPIO

EL MICROSCOPIO Y SUS PARTES

@B.E0A)@BC +. Anvestigar e identi icar cada una de las partes que constituyen un microscopio -. #ane%ar adecuadamente el microscopio /. ?ibu%ar ob%etos tal como se ven a travs del microscopio 2. =omprobar las propiedades pticas que posee el microscopio

(EB6L0D?@ &(@=E?A#AEE0@C #A=(@B=@&A@C El =&'()*')+&) 9de microF, GHIJK, peque1o, y scopio, LIKMNO, observar: es un instrumento que permite observar ob%etos que son demasiado peque1os para ser vistos a simple vista. El tipo ms com'n y el primero que se invent es el microscopio ptico. Be trata de un instrumento ptico que contiene dos o ms lentes que permiten obtener una imagen aumentada del ob%eto y que unciona por re raccin.

Este instrumento consta de tres partes principales que son

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Estereoscopio ptico

En la imagen anterior podemos observar tres partes instrumento Base, Brazo, y ptica,

undamentales del

B.*0: Es el soporte del instrumento y cuenta con el control de encendido y apagado del mismo, adems de la parte lumnica y pinzas de su%ecin de las muestras. B(.2): corresponde a la parte mecnica del instrumento, contiene los tornillos macrometricos, los cuales sirven para acercarse o ale%arse de la muestra de estudio. $+/&'.: que contiene los oculares los cuales sirven para observar la muestra de estudio, adems de los tornillos micromreticos 9permiten de inir las muestras: y los ob%etivos 9lentes de di erentes aumentos que permiten mayor apreciacin de la muestra:.

P(.'/&'. ')1 -1 T()2) 30 P0(&43&') 5L0/(. 07

#D0E(ADLEBC - &orta y cubre ob%etos - &agina de un peridico - 0i%eras - Potero - Dgua

&(@=E?A#AEE0@C

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#@E0D.E 4Q#E?@ ?E 6ED LE0(D EE &LD=D &D(D @BBE()D( DL #A=(@B=@&A@. =on unas ti%eras corte del papel peridico, una letra "e$ 9impresa por un solo lado:! 9/ R / mm:, colquela en el centro del portaob%etos y con un gotero deposite una gota de agua. =oloque luego el cubreob%etos sobre el papel. &ara evitar que queden burbu%as, coloque el cubreob%etos de tal manera que orme un ngulo de 23S con el portaob%etos y d%elo caer lentamente.

(EB&@E?D LDB BAP6AEE0EB &(EP6E0DBC +. T=mo se en oca el microscopio al iniciar la observacinU Dl momento de iniciar la observacin se procede a ubicar el ob%eto a observar en la parte lumnica que se encuentra en la base y se su%eta con las pinzas, posteriormente con los oculares se procede a en ocar el ob%eto con la ayuda de los tornillos macro y micro mtricos! hasta lograr en el en oque deseado.

-. T=ul cree usted que es la uncin y utilidad del microscopioU Pracias a la invencin del microscopio se permitieron grandes avances en la ciencia ya que posibilito observar un mundo que a la vista pasa desapercibido, entre estos descubrimientos tenemos las estructuras celulares y sus organelos. &or la tanto podemos mencionar que la uncin de este instrumento es el de posibilitar la visin y estudio de estructuras microscpicas que permiten entender o comprender la comple%idad de la vida.

/. T=ules son los pasos para la elaboracin de un monta%e h'medoU


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En primer lugar se ubica el ob%eto a observar en el portaob%etos, posteriormente se aplica agua con ayuda de un gotero y seguidamente se utiliza el cubreob%etos.

2. ?escriba la imagen de la letra tal como la ve a travs del microscopio y como la ve a simple vista

2R por +<R

=omo podemos apreciar en la gra ica anterior una de las di erencias ms notorias que se pueden observar es el tama1o y el detalle de la letra en aumento, en comparacin a la visin normal que se tiene del mismo ob%eto. Ddems a mayor aumento se observa espacios entre las lneas de la tinta que con orma la letra, mientras que en un en oque normal 9sin aumento: el color de la letra es uni orme.

3. T=on qu ob%etivo se logra una imagen completa o un campo de visin ms grandeU =omo se menciono anteriormente el grupo de traba%o no conto con un microscopio, utilizamos un estereoscopio razn por la cual solo logramos hacer una ampliacin de la imagen de 2./V R +< V sin embargo con este tipo de aumento logramos obtener la imagen que se observa en el punto 2.

PRACTICA 2% OBSERVACI$N INICIAL DE CBLULAS% -EL CORC8O-

@B.E0A)@BC
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+. @bservar las clulas del corcho al microscopio como iniciacin al estudio de la estructura y uncin celular. -. 0ener presente las observaciones de las clulas del corcho para su posterior comparacin con otras clulas. #D0E(ADLEBC - =orcho de botella - Escalpelo 9bistur: =uchillas. - &orta y cubre ob%etos - Potero - Dgua &(@=E?A#AEE0@C 4aga varios cortes de corcho con cuidado para evitar lastimarse los dedos, procediendo de la siguiente maneraC 0ome el corcho con la mano izquierda, su%telo irmemente y proceda hacer rebanadas muy inas colocando el escalpelo cuchilla, un poco oblicuo a la super icie. Esco%a el corte ms ino o transparente que haya realizado y colquelo sobre el portaob%etos! adicione una gota de agua y cubra con el cubreob%etos procurando evitar la ormacin de burbu%as. (ealice observaciones en ob%etivos secos de 2V, +<V y 2<V y esquematice.

(EB&@E?D LDB BAP6AEE0EB &(EP6E0DBC +. T=ul es la importancia de la clula para el organismoU La importancia de la clula radica en que esta se encarga de realizar di erentes unciones que son de vital importancia para el normal uncionamiento del organismo, ya sean unicelulares o pluricelulares. ?entro de las unciones especi icas que realiza la clula seria la de reproduccin, sntesis de sustancias entre otras tendientes a mantener las unciones vitales del organismo.

-. T=mo son las clulasU Bus estructuras microscpicas compuestas por tres partes principales como lo sonC el citoplasma, membrana plasmtica y el n'cleo. ?ependiendo de que clula se trate poseen di erentes organelos, eRisten dos tipos de clulas Eucariotas y procariotas. =lula EucariotaC
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El material gentico esta disperso en el citoplasma =arente de organelos comoC mitocondrias, cloroplastos, entre otros. Bu divisin es por amitosis. Eo posee citoesqueleto. Estructuralmente son ms simples. Bon ms peque1as.

=lula &rocariotaC 0iene un n'cleo de inido. &osee organelos comoC mitocondrias, cloroplasto, entre otros. Bu divisin es por mitosis y meiosis. &osee citoesqueleto. Estructuralmente son ms comple%as. son ms grandes.

/. T=ree usted importante el estudio de la clulaU T&or quU Bi, ya que se puede identi icar dentro de su estructura la serie de organelos con los cuales estn compuestas. Ds mismo conocer los di erentes organismos microscpicos como pueden ser virus, bacterias, identi icar la orma de comportarse para la elaboracin de di erentes medicamentos y por ende combatirlos. &or otra parte identi icar dentro de ellas mal ormaciones, como cncer y en ermedades como anemia, diabetes, in ecciones urinarias entre otras.

2. T0odas las clulas tienen la misma ormaU Eo.

3. que

T=ul es la presentanU

orma

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2R por +<R ?e acuerdo a la observacin realizada de un corte de corcho a travs del estereoscopio, con un aumento de 92R por +<R: podemos concluir que sus clulas E@ presentan la misma orma, logramos observar que son ovaladas, circulares, alargadas e irregulares y de di erentes tama1os.

5. TWu estructuras observa dentro de ellasU En el monta%e del corcho se logra identi icar el citoplasma y la pared celular. 7. TWu parte de la clula evita que el agua penetre en ellaU En el caso del corcho, la pared celular evita la entrada de agua.

8. T=ree usted que estas clulas estn vivas o lo estuvieron alguna vezU Dlguna vez si estuvieron vivas ya que el corcho hacia parte de la corteza de un rbol llamado alcornoque, y al ser parte de este reciba los minerales necesarios para mantenerse vivas En el momento de hacer la prctica las clulas del corcho estaban muertas debido a que ueron ob%eto de un proceso para la abricacin del mismo.

?iscusinC 0eniendo como re erencia las observaciones de (obert 4ooXe y las observaciones que se logro realizar con la utilizacin del estereoscopio, se puede concluir que se observo unas celdas similares a las que visualizo 4ooXe. El primero en observar clulas empleando di erentes tipos de lentes ue 4ooXe, y tambin ue quien les dio el nombre de YclulasY 9palabra que proviene del latn, y que
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signi icaba YceldasY o YceldillasY: debido a la seme%anza que haba entre estas estructuras y las celdas de los panales de las abe%as. Esta orma caracterstica se deba a que 4ooXe estaba observando los restos celulares, es decir, =ZL6LDB #6E(0DB, que componan el corcho 9es decir, clulas vegetales muertas, que mantenan la orma geomtrica caracterstica de estas clulas:. (evisar esto lo quitamos o noU

PRACTICA ;% ESTRUCTURA Y FUNCION DE LA CELULA TEJIDO VEGETAL

@B.E0A)@BC +. Adenti icar las di erentes estructuras y organeros que posee una clula, con base en la capacidad de ampliacin del microscopio ptico. -. ?escribir las di erentes ormas y tama1os de las clulas /. Be1alar las di erencias eRistentes entre clulas animales y vegetales 2. ?eterminar la relacin que eRiste entre estructura y uncin #D0E(ADLEB - &orta y cubre ob%etos - &apa, cebolla cabezona, ho%a de elodea - Lugol, Dzul de metileno, Ba ranina, Bolucin salina, aceite de inmersin - &alillos - =uchillas. - Lancetas

0E.A?@B )EPE0DLEB

+. 0e%ido Epidermal en Bulbo de =ebolla &(@=E?A#AEE0@C F =orte con el bistur cuchilla, un pedazo de bulbo de cebolla, levante suavemente con una pinza una capa delgada y transparente de la parte interna. Este es el te%ido epidermal. F ?e esta capa corte con las ti%eras dos pedacitos de /F2 mm
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F &repare con uno de ellos un monta%e asC en una lmina portaob%etos coloque una gota de agua y con ayuda de una agu%a de diseccin eRtienda sobre ella una porcin de epidermis, teniendo cuidado que la cara eRterna quede hacia arriba y sin dobleces. F =ubra el preparado con una laminilla cubre ob%etos. F En otra lmina coloque una gota de lugol y luego la otra porcin de epidermis eRtendida, de%e actuar el colorante durante 3 minutos. F ERamine sus preparaciones con menor aumento 2V y luego con mayor aumento a +<V y 2<V. F(ealice dibu%os de sus observaciones

&(D=0A=D =@E &D&D =EB@LLD

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(EB&@E?D LDB BAP6AEE0EB &(EP6E0DBC +. @bserve y dibu%e con aumentos de 2V, +<V y 2<V. =lulas bulbo de =ebolla en agua

2R por +<R =lula bulbo de cebolla lugol

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-. TWu orma tienen las clulas de este te%idoU -.+ B6LB@ ?E =EB@LLD EE DP6DC La clulas poseen una orma rectangular ubicadas en bloque, similar a la a la estructura de una pared o muro! adems se identi ica la pared celular, su color es blanco con tonos en amarillo plido, adems en algunas clulas se puede identi icar el n'cleo, los dems organelos no son visibles.

-.- B6LB@ ?E =EB@LLD EE L6P@LC Be puede observar la estructura celular irregular y con una tendencia a tomar orma circular, el color de la muestra se torna en un tono cobrizo. Bu pared celular se hace ms visible y con un tinte ms oscuro, no se logra observar ning'n organelo.

/. TWu conclusiones puede sacar de la utilizacin de los di erentes aumentosU =omo se haba mencionado con anterioridad no se conto con di erentes aumentos al utilizar el estereoscopio, pero al i%ar la muestra y en ocarla se puede de inir que a mayor aumento se posibilita la observacin de mayor cantidad de detalles y partes de las clulas.

2. Dl hacer el monta%e con Lugol, Tqu sucede, qu organelos se coloreanU =abe mencionar que en ninguno de los dos monta%es se lograron observar organelos de manera de inida, sin embargo en la placa con el monta%e de Lugol se observa que las clulas se tornan color cobrizo, adems las clulas asumen una orma ovalada y se ensanchan o engloban en su interior, quizs por la absorcin del reactivo.
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3. TWu uncin cumple el te%ido epidermal y la pared celularU Es una capa impermeable y gruesa, y normalmente est ormada por una sola capa heterognea de clulas aplanadas, cuya uncin es proteger las clulas interiores, limitar la transpiracin, secretar algunas sustancias, almacenar otras, e intercambiar gases con el medio ambiente. La pared celular proporciona un recinto protector a la clula determinando la orma y el tama1o de la clula. D dems la rigidez de la pared permite crecer a la planta erguida hasta poder eRponer una mayor super icie a la luz solar.

2% CELULAS DEL PARENCUIMA EN CORTE TRANSVERSAL DE LA PAPA F0ome el bistur cuchilla y haga un corte transversal de la papa, este corte debe ser tan ino que la apariencia de la porcin que obtenga sea transparente F En%uague con agua el corte para sacar el eRceso de almidn contenido en las clulas de los te%idos de la papa F Elabore un monta%e h'medo F @bserve el aspecto de las clulas en peque1o aumento 2V, pase a mayor aumento +<V y 2<V, observe la pared celular F ?ibu%e dos o tres clulas que orman el parnquima de la papa identi ique las partes y se1lelas

PRACTICA CELULAS DE LA PAPA GRAFICAS PAPA EN PORTA OBJETOSA%

(EB&@E?D LDB BAP6AEE0EB &(EP6E0DBC +. TWu orma tienen las clulas de este te%idoU -. TWu uncin cumplenU /. TDl hacer el monta%e con Lugol, que sucedeU 2. TWu organelos se ti1enU T?e qu colorU 3. @bserve y dibu%e con todos los aumentos.
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;% TEJIDO EPIDERMAL Y PARENCUIMA CLOROFILICO EN 8OJA DE ELODEA F 0ome con una pinza una ramita de Elodea, corte con unas ti%eras una ho%ita F ERtindela sin invertirla sobre una gota de agua en una lmina portaob%etos y c'brala con cuidado con una laminilla F @bserve detenidamente a travs del microscopio con aumento 2V, +<V y 2<V F &onga atencin al movimiento del citoplasma dentro de la clula. F #ediante dibu%os y lechas con nombres se1ale las estructuras celulares que usted pudo observar. PRACTICA 8OJA DE ELODEA GRAFICA PLANTA DE ELODEA PORTA OBJETOSA

(EB&@E?D LDB BAP6AEE0EB &(EP6E0DBC +. TWu orma tienen estas clulasU -. TWu partes de la clula se observan con el ob%etivo +<RU /. TWu estructuras celulares se observan a mayor aumento 2<RU 2. TWu uncin cumplen los cloroplastosU 3. TWu es ciclsisU T&or qu se realizaU 5. En un dibu%o de una clula de Elodea indique mediante lechas la direccin del movimiento del citoplasma 7. TWu es presin de turgenciaU 8. TWu es smosisU ;. (ealice dibu%os del monta%e

PRACTICA 4% ESTRUCTURA Y FUNCION DE LA CELULA TEJIDO ANIMAL

4%1 CELULA ESCAMOSA EPITELIAL


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F =oloque una peque1a gota de solucin salina en el centro del portaob%etos. F =on un palillo raspe suavemente el interior de su me%illa, de aba%o hacia arriba. F =oloque el producto de este raspado en la gota de solucin salina. F =oloree con una gota de azul de metileno o sa ranina. =oloque el cubreob%etos. F @bserve al microscopio con peque1o aumento 2V y luego con mayor aumento +<V y 2<V. F Elabore un esquema de la observacin y denote las siguientes partes de la clulaC F #embrana nuclear. F #embrana celular. F E'cleo. F Euclolo. F =itoplasma.

.
CELULA S

(EB&@E?D LDB BAP6AEE0EB &(EP6E0DBC +. TWu orma tienen las clulas de este te%idoU En primer lugar es preciso mencionar que eRisten di erentes tipos de te%idos epiteliales en nuestro caso nos re erimos a un tipo de te%ido epitelial de revestimiento o pavimento el cual se caracteriza por tener una orma plana y achatada el cual sirve para brindar proteccin gracias a su orma y organizacin estructural.

-. TWu organelos se observan con el aumento 2V y +<VU


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?esa ortunadamente debido a que no contamos con la opcin de obtener ms aumento al momento de realizar las observaciones de la muestra no ue posible observar los organelos que con orman el te%ido epitelial, sin embargo al revisar la bibliogra a obtenemos los siguientes resultados a una ampliacin de +<V y 2<V*

=omo se observa en la gra ica anterior se hace visible las estructura de las clulas epiteliales cuya caracterstica principales es la de ser de orma plana, adems de observar con claridad el citoplasma y n'cleo celular.

/. TDl aplicar el colorante que clulas se di erencian me%orU Es notorio que al aplicar el colorante sobre la muestras se hacen visibles las clulas epiteliales de la boca, sin embargo y como se menciono anteriormente a pesar de ser visibles ba%o el microscopio aun no es posible distinguir y describir caractersticas ms particulares de este tipo de clulas. 2. T=ul es la uncin del te%ido epitelialU Las >6E=A@EEB ?EL 0E.A?@ E&A0ELADL sonC F (ecubrir super icies
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F 0apizar cavidades F &roteger contra da1os mecnicos F &roteger contra la descamacin y la deshidratacin F Evitar la entrada de microorganismos F Bensibilidad a estmulos F Becrecin

4%2 TEJIDO SANGUINEO

&repare dos lminas 9cubre y portaob%etos: limpias sin grasa. 6na lanceta desechable. =olorante de [right. ?esin ecte con un algodn humedecido en alcohol la punta del dedo anular o medio, de%e secar el alcohol y con la lanceta, haga una puncin en la yema de un dedo. =oloque una gota de sangre en una lmina. =oloque la segunda lmina en ngulo agudo sobre la primera, acrquela a la sangre y deslice suavemente en orma continua hasta ormar una capa o rotis delgado. ?e%e secar la preparacin al medio ambiente y una vez seca aplique sobre el rotis el colorante de [right de%e actuar durante / \ 2 minutos para i%ar la preparacin. Lave el eRceso de colorante con agua de la llave. ?e%e secar la lmina verticalmente. @bserve la preparacin con el ob%etivo de 2V, +<V y 2<V.

(EB&@E?D LDB BAP6AEE0EB &(EP6E0DBC si estn bien se1aladosU

Plbulos ro%os Plbulos blancos


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2R por +<R

+. TWu tipos di erentes de clulas aparecenU Plbulos ro%os y glbulos blancos. -. Esquematice dichas ormas. Esto si ser as o solo con el dibu%o de arriba bastaU

/. TEn cules de estas ormas celulares no encuentra n'cleoU En los glbulos ro%os y en las plaquetas.

2. TWu uncin cumple cada una de estas clulasU G64<-6)* ()>)* ) 0(&/()'&/)*C La uncin de los Plbulos (o%os es 0ransportar los gases respiratorios combinados con la 4emoglobina 94b: y los nutrientes. G64<-6)* <6.1')* ) 60-')'&/)*: Los leucocitos son los encargados de destruir los agentes in ecciosos y las clulas in ectadas, y tambin segregan sustancias protectoras como los anticuerpos, que combaten a las in ecciones. P6.D-0/.* ) /()=<)'&/)*: La uncin que realizan es producir la =oagulacin de la sangre.

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3. T=ules aparecen ms recuentementeU Los eritrocitos, 9tambin llamados glbulos ro%os o hemates:, son los elementos cuantitativamente ms numerosos de la sangre. La hemoglobina es uno de sus principales componentes, y su ob%etivo es transportar el oRgeno hacia los di erentes te%idos del cuerpo. E*/. +(0?-1/. 1) 6. 01/013@ =-, <&01E 0*+0() D-0 *0. .*@FFF

CONCLUSIONES

+.

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CIBERGRAFIA

://+:GG>)(?0('<&)+-1/.6.(?.%<6)?*+)/%')=G200!G12G0+&/06&)-+.H&=01/)*)-+6.1)%:/=6 ://+:GG<&)+-1/.6.(?.%<6)?*+)/%')=G2008G11G)<*0(H.'&1-30-'6-6.*-30-6.-=-')*.<-'.6%:/=6 ://+:GG0*%I&J&+03&.%)(?GI&J&GM&'()*')+&) ://+:GG0*%I&J&+03&.%)(?GI&J&GM&'()*')+&)KLC;LB;+/&') ://+:GG0*%I&J&+03&.%)(?GI&J&GT0>&3)K0+&3LC;LAM(=&') ://+:GGI0<*%-H&?)%0*G==0?&.*G?-&.3.K.K(0H0*/&=&01/)%+:+ ://+:GG0*%I&J&+03&.%)(?GI&J&GS.1?(0NG6%C;%B;<-6)*K()>)*


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