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Recebido 10 Novembro 2007; Aceito 18 Maro 2008

Revista Brasileira de Farmacognosia Brazilian Journal of Pharmacognosy 18(2): 213-216, Abr./Jun. 2008

Saulo R. Mariz,*,1 Maria S. T. Arajo,2 Gilberto S. Cerqueira,2 Washington C. Arajo,3 Jos C. Duarte,3 Margareth F. F. Melo Diniz,3 Isac A. Medeiros3
Departamento de Farmcia, Universidade Federal do Maranho, Rua 13 de maio, 506, Centro, 65010-6000 So Luis-MA, Brasil, 2 Hospital Universitrio Lauro Wanderley, Universidade Federal da Paraba, 58051-970 Joo Pessoa-PB, Brasil, 3 Laboratrio de Tecnologia Farmacutica Prof. Delby Medeiros, Universidade Federal da Paraba, 58051-970 Joo Pessoa-PB, Brasil
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RESUMO: A Jatropha gossypiifolia L. apesar de ser usada na medicina popular com nalidades diversas, uma espcie classicamente catalogada como txica. Este trabalho teve como objetivo a pesquisa de alteraes histopatolgicas em vsceras de ratos sob tratamento agudo com o extrato etanlico (EE) da Jatropha gossypiifolia L. Ratos Wistar foram tratados por via oral (gavagem) com doses nicas do extrato de at 5 g/kg e observados por 14 dias. Aps esse perodo, os animais foram sacricados por trao cervical e as vsceras foram coletadas. O corao, o fgado e o rim foram seccionados por inciso sagital e os pulmes submetidos perfuso via traquia, com soluo de formol a 10%. As seces teciduais foram processadas conforme os mtodos habituais, coradas pela hematoxilina-eosina e tricmico e observadas ao microscpio ptico. Apenas nos animais tratados com a maior dose do extrato (5 g/kg) foram observadas alteraes em fgado e pulmo evidenciadas por resposta inamatria e estimulao do sistema imunitrio. Estes resultados indicam uma toxicidade aguda oral relativamente baixa; entretanto, corroboram com os indcios de hepatotoxicidade j publicados, expondo ainda um potencial de toxicidade pulmonar do produto, o que ressalta a importncia de estudos toxicolgicos de longa durao com o EE da espcie Jatropha gossypiifolia L. Unitermos: Jatropha gossypiifolia, Euphrobiaceae, toxicidade aguda, estudo histopatolgico. ABSTRACT: Histopathological evaluation in rats after acute treatment with the ethanol extract from aerial parts of Jatropha gossypiifolia L. Jatropha gossypiifolia L. has been used in folk medicine in Brazil despite its classication as a toxic plant. The aim of this work was the assessment of histopathological a lterations in rats after acute treatment with the ethanol extract (EE) from Jatropha gossypiifolia L. Wistar rats were treated by gavage with single doses of EE until the limit dose of 5 g/kg (w.b.). 14 days after treatment the rats were sacriced and the viscera were collected. The hard, liver and kidney were sectioned by sagittal incision and the lung submitted to perfusion with phormol (10%). The histological sections were processed by the usual methods in hematoxilin-eosin and trichrome staining and were observed through optical microscopy. Only in treated rats with 5 g/kg (w.b.) we observed some alterations in the liver and lung that means inammatory response and immune activation. These results indicate a low oral acute toxicity, in relative terms, however, it was conrmed the hepatic toxicity already reported and showed the importance of long-term toxicological studies of the EE from Jatropha gossypiifolia L. Keywords: Jatropha gossypiifolia, Euphorbiaceae, acute toxicity, histopathological study.

INTRODUO A importncia das pesquisas com plantas medicinais em pases em desenvolvimento, como o Brasil, se d por diversos motivos dentre os quais destacamos o fato de que, apesar de sermos o pas com a maior biodiversidade vegetal do mundo, o crescimento de pesquisas nessa rea inferior a 10% ao ano. Tal fato diculta o uso racional de plantas medicinais e medicamentos toterpicos pela populao em geral,
* E-mail: sjmariz22@hotmail.com, Tel. +55-83-91073414

devido carncia de informaes adequadas sobre aspectos como eccia e segurana desses produtos. Isso ainda estimula a crescente excluso de espcies nativas da medicina e dos guias farmacuticos ociais (Brasil, 1998; Torres et al., 2005; Silva et al., 2006; Brando et al., 2006 & 2008). O objeto do presente trabalho mais um exemplo da importncia desse tipo de estudo. A espcie Jatropha gossypiifolia L., conhecida no Brasil como pio-roxo, entre outros nomes, usada popularmente
ISSN 0102-695X

Artigo
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Avaliao histopatolgica em ratos aps tratamento agudo com o extrato etanlico de partes areas de Jatropha gossypiifolia L.

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para o tratamento de vrias enfermidades (Pio-Corra, 1984; Mariz, 2007). Alguns desses usos tm sido respaldados por estudos qumicos e/ou farmacolgicos, entre os quais se pode destacar a recente demonstrao de um signicativo potencial hipotensor do extrato etanlico dessa espcie (Abreu et al., 2003). Poucos estudos tm sido realizados com produtos de Jatropha gossypiifolia L, usados na medicina popular, de modo a se conhecer melhor uma eventual toxicidade destes e se contribuir com a segurana na utilizao teraputica dessa espcie (Mariz, 2007). Assim, iniciou-se a avaliao da toxicidade do extrato etanlico de Jatropha gossypiifolia pelos estudos toxicolgicos agudos. Foi demonstrado que, apesar de apresentar baixa toxicidade aguda oral em ratos tratados com doses nicas de at 5 g/kg, o produto gerou efeitos txicos signicativos nos sistemas neurolgico, heptico e renal. Apesar de o extrato ter produzido mortalidade entre machos tratados com as doses de 4 g/kg (16,6%) e 5 g/kg (66,6%) e do 3 ao 10 dia aps o tratamento, o exame macroscpico das vsceras permitiu observar-se alteraes apenas em alguns rgos dos animais tratados com a maior dose experimental (5 g/kg) e que morreram ao longo do experimento (machos). Tais alteraes se constituram em mudanas na colorao e consistncia de corao, pulmo e fgado, fato que j ressaltava a importncia da realizao de exames histopatolgicos para uma melhor avaliao do potencial inamatrio e necrosante do produto (Mariz et al., 2006). O presente trabalho apresenta um estudo histopatolgico de vsceras de ratos aps tratamento agudo com o produto avaliado, realizado no apenas para atender as exigncias da resoluo 90 da Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria (Brasil, 2004), mas, principalmente, com o intuito de investigar a capacidade do extrato em produzir alteraes histolgicas em fgado, pulmo, rins e corao destes animais. MATERIAL E MTODOS As partes areas (folhas e caules) de J. gossypiifolia foram coletadas no municpio de Santa Rita (PB) no perodo de junho a agosto de 2004 e identicado pelo Herbrio Lauro Pires Xavier da Universidade Federal da Paraba (UFPB), onde se encontra um exemplar representativo da espcie registrado sob o cdigo: Agra & Gis 4192 (JPB). O extrato etanlico de J. gossypiifolia, produto avaliado nesse estudo, foi preparado de acordo com os mtodos habituais. Foram utilizados ratos Wistar albinos (Rattus novergicus) adultos. Os machos pesavam entre 250 g a 350 g e as fmeas (150 g - 250 g) eram nulparas e no grvidas. Os animais foram fornecidos pelo Biotrio Prof. Dr. Thomas George do Laboratrio de Tecnologia Farmacutica (LTF-UFPB), mantidos sob condies ambientais padronizadas e alimentados com rao e gua potvel vontade (Mariz et al., 2006; Mariz, 2007). Os protocolos experimentais obedeceram 214
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aos atuais preceitos ticos e tcnicos (Jacobson-Kram & Keller, 2001; Andersen et al., 2004; Brasil, 2004; Colgio Brasileiro de Experimentao Animal, 2004) tendo sido aprovados pelo Comit de tica em Pesquisa Animal (CEPA) do LTF-UFPB mediante certido 0105/06. Os animais foram tratados por gavagem inicialmente com a dose de 5 g/kg do EE de J. Gossypiifolia (n = 6 por dose e sexo) e posteriormente com 4 doses inferiores a 5 g/kg, a saber: 1,2 g/kg; 1,8 g/kg; 2,7 g/kg e 4,0 g/kg (n = 6 animais por dose e por sexo). Ao grupo controle com 12 animais (6 machos e 6 fmeas) administrou-se gua, veculo de ressuspenso do extrato. A coleta das vsceras (fgado, rins, corao e pulmes) ocorreu no dcimo quinto dia aps o tratamento e se deu pelo sacrifcio (trao cervical) de dois dos animais sobreviventes de cada grupo. Seccionou-se o corao, o fgado e os rins por inciso sagital e os pulmes foram submetidos perfuso via traquia com soluo de formol a 10%. As seces teciduais foram xadas em formalina tamponada e aps 24 horas, resseccionadas para processamento histopatolgico: desidratao com sries crescentes de lcool (70 a 100) seguida de diafanizao em xilol, impregnao e incluso em parana, segundo os mtodos habituais (Michalany, 1998). Em micrtomo, seccionou-se os fragmentos tissulares em espessura de 3,0 M com subseqente colorao por hematoxilinaeosina e tricmico, para exame microscpico. RESULTADOS E DISUSSO O exame histopatolgico das vsceras dos animais sobreviventes ao tratamento agudo com doses do EE de Jatropha gossypiifolia de at 5 g/kg, no detectou alteraes relevantes tanto nos animais do grupo controle quanto naqueles tratados com doses de at 4,0 g/ kg. Algumas alteraes pouco signicativas, que foram observadas em rgos dos animais tratados com a maior dose (5 g/kg) e que foram necropsiados, so descritas a seguir. O fgado de animais tratados com o produto avaliado apresentou arquitetura lobular com veias hepticas terminais de paredes nas, regularmente distribuidas, chamando a ateno a presena de moderada congesto venular associada a fenmenos de dilatao e congesto sinusoidais. No seio do lbulo, embora os hepatcitos tenham se apresentado na grande extenso do parnquima como elementos isomorfos, foram identicados raros e isolados focos de hepatocitlise, para os quais houve auxo inamatrio mononuclear. Essa leso era acompanhada de brose estromal mnima, perissinusoidal, em zona 3, expressa pela colorao do vermelho picrossirius. Os espaos portais e a interface portoparenquimatosa estavam destitudos de reao inamatria. Em machos, observou-se congesto venosa portal. Nos pulmes, o extrato avaliado na dose de

Avaliao histopatolgica em ratos aps tratamento agudo com o extrato etanlico de partes areas de Jatropha gossypiifolia L.

5 g/kg (v.o.) promoveu alargamento dos lbulos em decorrncia de processo inamatrio, observando-se, em adio, eroso de mucosa bronquiolar, associada exsudao linfocitria e neutrocitria. Em machos, essa exsudao tambm ocupou lumes das vias respiratrias bronquiolares. Septos conjuntivos interlobulares e interstcio peribronquiolar foram sede de agregados linfides no encapsulados. Os alvolos apresentaramse com paredes espessas em decorrncia de exsudao linfocitria e neutrocitria. Em fmeas, o espao areo luminar mostrava-se ora ocupado por edema (transudato), ora por importante exsudao inamatria mista. A rede vascular apresentou-se na e regularmente distribuda, encontrando-se congesta em machos. Nos rins, o produto estudado no promoveu alteraes histolgicas em ambos os sexos. A arquitetura lobular estava preservada com pirmides medulares recobertas por tecido cortical. A crtex apresentou glomrulos regularmente distribudos, cpsula de Bowman na, com espao de refrao artefatual alm de tufos capilares nos e mesngio delicado. Os tbulos contorcidos proximais e distais e o segmento do ducto coletor no evidenciaram particularidades histolgicas, do mesmo modo que as alas de Henle e ductos coletores da pirmide medular e o sistema pielocalicial e ainda, as colunas de Bertin da plvis renal. No foi observada reao inamatria tampouco brose no interstcio (matriz). As nicas alteraes dignas de nota foram a ocorrncia de congesto venosa que deve estar relacionada com os procedimentos tcnicos empregados para xao do rgo com formalina e a presena de um foco de adiponecrose no tecido adiposo perifrico representado pela presena de exsudao histioctica com padro xantomatoso. No corao dos animais tratados com o EE de Jatropha gossypiifolia, tambm no foram evidenciadas alteraes histopatolgicas em ambos os sexos. O epicrdio, revestido por clulas pavimentosas mesoteliais, exibia tecido broconjuntivo, laxo, com vasos e letes neurais, s vezes, em meio a tecido adiposo. O miocrdio representado por broclulas (rabdomicitos), anastomosantes, com estriaes transversais e ncleos nicos ou duplos, centralmente posicionados. O endocrdio possua endoltlio apoiado em delgada membrana basal e revestia cavidades e vlvulas cardacas. As vlvulas cardacas apresentaram poro central formada por tecido broconjuntivo denso e revestimento endotelial. Desse modo, pode-se armar que a avaliao histolgica em vsceras de ratos sob tratamento agudo com dose nica de 5 g/kg do extrato etanlico de J. gossypiifolia, realizada neste trabalho, constatou que em fgado e pulmes ocorreram agresses evidenciadas basicamente, por resposta inamatria e estimulao do sistema imunitrio. Esses efeitos, embora discretos, conrmam os indcios de hepatoxicidade j descritos anteriormente (Mariz et al., 2006), alm de acrescentarem a informao de que o potencial irritativo e inamatrio do

produto tambm pode ser observado no tecido pulmonar. Entretanto, cabe considerar que tais alteraes foram encontradas apenas nos animais tratados com a maior dose experimental (5 g/kg). Essa dose corresponde a 20 vezes a maior dose hipotensora do estudo de Abreu et al. (2003). Tal fato aponta para um signicado clnico pouco relevante desses dados que podem ser compreendidos mais como resultado de uma sobrecarga do produto avaliado do que como conseqncia de uma ao txica signicativa do extrato. De qualquer modo, diante dos indcios da possibilidade do produto promover alteraes histolgicas no fgado e pulmo, convm se realizar a avaliao toxicolgica crnica do extrato etanlico de partes areas (folhas e caule) da espcie em estudo. CONCLUSES O tratamento agudo de ratos Wistar com o extrato etanlico de partes areas de Jatropha gossypiifolia L promoveu alteraes histopatolgicas pouco signicativas e apenas em fgado e pulmo dos animais tratados com a maior dose experimental (5 g/ kg) e avaliados pelo presente estudo, conrmando relato anterior de que o produto possui toxicidade aguda oral relativamente baixa. Apesar das alteraes observadas terem ocorrido apenas em dose muito elevada, sugerese a continuidade dos estudos toxicolgicos mediante a avaliao da toxicidade crnica do produto. AGRADECIMENTOS Os autores agradecem Comisso de Aperfeioamento de Pessoal de Ensino Superior (CAPES) que, atravs do Programa de Qualicao Interinstitucional (PQI), nanciou esta pesquisa. REFERNCIAS
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Saulo R. Mariz, Maria S. T. Arajo, Gilberto S. Cerqueira, et al.

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