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16 DE MARZO DE 2013
INTRODUCCION _____________________________________________________________________4 JUSTIFICACION _____________________________________________________________________5 Lepra Indeterminada ______________________________________________________________7 Lepra Tuberculoide ________________________________________________________________7 Lepra Lepromatosa ________________________________________________________________8 Lepra Borderline O Lepra Dimorfa: ___________________________________________________8 DIAGNOSTICO DE LA LEPRA ___________________________________________________________9 Caso Confirmado De Lepra __________________________________________________________9 Condiciones Clnicas _______________________________________________________________9 Condiciones De Laboratorio _________________________________________________________9 TRATAMIENTO DE LA LEPRA ________________________________________________________ 11 OBJETIVOS _______________________________________________________________________ 12 Objetivo General ________________________________________________________________ 12 Objetivo Especfico. _____________________________________________________________ 12 BACILOSCOPIA ____________________________________________________________________ 13 Importancia De La Bacteriologa ___________________________________________________ 13 Baciloscopia ____________________________________________________________________ 14 Lbulo De La Oreja ______________________________________________________________ 18 Lesin Cutnea _________________________________________________________________ 21 Mucosa Nasal __________________________________________________________________ 22 Tincin Del Frotis _______________________________________________________________ 24 Tcnica de Ziehl-Neelsen _________________________________________________________ 25 Procedimiento _________________________________________________________________ 26 Lectura e interpretacin de resultados ______________________________________________ 29 ndice Bacteriolgico ____________________________________________________________ 30
ndice Morfolgico (IM) _________________________________________________________________ 32 Mantenimiento Del Microscopio __________________________________________________________ 33
Variante De Las Tcnicas De Ziehl-Neelsen Y De Fite Faraco ____________________________________ 39 Procedimiento ________________________________________________________________________ 40 Resultados:___________________________________________________________________________ 40
Formato Informe Mensual De Actividades De Lepra ___________________________________ 59 Informe Mensual De Actividades De Lepra (Instructivo de llenado) _______________________ 60 BIOSEGURIDAD ___________________________________________________________________ 62 Medidas De Proteccin Para El Paciente ____________________________________________ 63 Toma, Manejo Y Transporte De La Muestra __________________________________________ 63 Manejo De Residuos Biolgico-Infecciosos ___________________________________________ 64 Separacin Y Envasado De Residuos Peligrosos Biolgico Infecciosos _____________________ 64 CONTROL DE CALIDAD _____________________________________________________________ 65 Objetivos ______________________________________________________________________ 65 Metodologa ___________________________________________________________________ 66
Control De Calidad Interno ______________________________________________________________ 66 Control De Calidad Externo ______________________________________________________________ 66
Formato de Solicitud De Evaluacin De Baciloscopias __________________________________ 67 Solicitud De Evaluacin De Baciloscopia (Instructivo para el llenado) _____________________ 68 Formato Solicitud De Evaluacin De Histopatologa Para Lepra __________________________ 70 Formulario De Evaluacin Para Histopatologa Para Lepra (Instructivo para el llenado) _______ 71
Griselda Arzate U.
Griselda Arzate U.
INTRODUCCION
La Lepra es conocida desde el mundo antiguo, ya se haca referencia a ella en los textos bblicos como por ejemplo en el Antiguo Testamento en el libro Levtico (13,1) "El Seor dijo a Moiss y a Aarn: cuando aparezca en la piel de una persona una hinchazn, una erupcin o una mancha lustrosa, que hacen previsible un caso de lepra, la persona ser llevada al sacerdote Aarn o a uno de sus hijos, los sacerdotes, el cual examinar la afeccin. Si en la zona afectada el vello se ha puesto blanco, y aquella aparece ms hundida que el resto de la piel, es un caso de lepra...". Este relato bblico quiz no haga referencia directa a la lepra como es conocida actualmente, pero si hace referencia a ciertas enfermedades de la piel que en algunas ocasiones pueda haber sido la enfermedad de Hansen. A lo largo de la historia la lepra recibi numerosas denominaciones tales como: elefantiasis, leontiasis, lepra leonina, lepra, mal rojo de Cayena, Enfermedad de Crimea, Mal de San Lzaro. En la Europa Medieval era claro el mandato religioso de aislar y segregar a todo enfermo de lepra, el diagnstico de dicha enfermedad era causa de divorcio y de prdida de todos los bienes posedos por el enfermo y la total exclusin de la vida social. A finales de este perodo aparecieron las leproseras que alimentaban an ms el aislamiento y el miedo a los leprosos, en toda Europa se abrieron ms de 15.000 de estos establecimientos. En 1873 el mdico noruego Gerhard Armauer Hansen (1841- 1912) descubri el bacilo productor de la lepra. La investigacin an contina en la actualidad, recientemente Stewart Cole, de la Unidad de Gentica Molecular Bacteriana del Instituto Pasteur, en colaboracin con el Centro Sanger, en Reino Unido, ha obtenido el genoma completo del bacilo de la lepra. La secuenciacin del bacilo de la lepra se haba convertido en una prioridad dentro de la bsqueda del remedio contra esta enfermedad, contrada cada ao por 720.000 nuevas personas, segn datos de la OMS, y que padecen 2 millones en todo el mundo. La comparacin entre M. tuberculosis y M. leprae, que acaba de iniciarse, podra servir para hallar los factores de crecimiento que se encuentran ausentes en el bacilo de la lepra, pero no as en el de la tuberculosis, lo que sera til para el desarrollo de una vacuna. Los genes que no presenta M. tuberculosis, pero s M. leprae tambin pueden determinar nuevas pruebas dermatolgicas de diagnstico. La lepra es una enfermedad transmisible, con repercusiones fsicas y psicolgicas graves por el estigma social que la acompaa. Desde el uso de la poliquimioterapia (PQT) y las estrategias de eliminacin, se ha logrado una paulatina reduccin en el nmero de casos registrados, por lo que se demuestra como factible su control. La lepra afecta principalmente a personas mayores de 15 aos y se maniesta en la edad productiva, en ambos gneros, con predominio en hombres (2:1); el perodo de incubacin promedio es de 5 aos en un rango cuyo lmite superior puede llegar a los 40 aos. Para el control de la lepra se requiere un abordaje integral que proporcione equidad y accesibilidad, as como mantener la calidad de la atencin, con base en las acciones de vigilancia epidemiolgica, la promocin de la salud, el fortalecimiento de la red de laboratorios de lepra y la coordinacin interinstitucional en todos los rdenes de gobierno. La prevencin y control de la lepra constituyen un reto para los responsables de la salud pblica del pas, debido a la permanencia de la transmisin y la existencia de poblacin susceptible, de ah la relevancia de las acciones de promocin de la salud para mejorar entre la poblacin el conocimiento de las caractersticas de la enfermedad y la percepcin que se tiene de la misma.
Griselda Arzate U.
JUSTIFICACION
La lepra es una de las enfermedades del hombre que ha sido reconocida por antiguas culturas desde el ao 1 400 a.C. Esta revisin engloba el conocimiento actual de factores intrnsecos que influyen en la resistencia a la infeccin por Mycobacterium leprae, en la regulacin de la variedad de manifestaciones clnicas y patolgicas y en la respuesta inmune dentro del amplio espectro de la enfermedad, desde el polo tuberculoide (paucibacilar), hasta el lepromatoso (multibacilar). Se discuten la especificidad, la sensibilidad y la utilidad de los mtodos disponibles de diagnstico para la identificacin y la clasificacin de los bacilos cido-alcohol resistentes; la deteccin de antgenos especficos en la piel, en las mucosas de la nasofaringe, en la orina y el suero, as como en la medicin de anticuerpos especficos y la respuesta intradrmica a extractos de bacilos. Hasta el momento, la nica medida efectiva de control que ha disminuido sustancialmente el nmero de casos registrados es la poliquimioterapia (PQT). Se concluye que la eliminacin de la lepra en el continente americano es factible de alcanzar, siempre que los sistemas nacionales de salud mantengan el compromiso de identificar, registrar y tratar todos los casos diagnosticados. Se proponen estrategias en relacin con los esquemas efectivos de tratamiento, la evaluacin de los programas de PQT, las actividades de coordinacin y armonizacin con otros programas de salud pblica y el desarrollo de investigacin operacional. La lepra es una enfermedad infecciosa crnica producida por M. leprae. Esencialmente es una enfermedad de los nervios perifricos, pero tambin afecta la piel y otros rganos (mucosas, ojos, testculos, tracto respiratorio alto, msculos y huesos). En la prctica sanitarista los casos de lepra se definen como: personas que tienen signos clnicos de lepra, con o sin confirmacin bacteriolgica o serolgica del diagnstico, y todas ellas necesitan tratamiento. Son considerados como signos clnicos cardinales de lepra los siguientes: a) lesin cutnea nica o mltiple (hipopigmentada o eritematosa), no tpica de alguna otra enfermedad cutnea; b) prdida de sensibilidad (trmica, dolorosa y/o del tacto) con o sin lesin cutnea, y c) troncos nerviosos o nervios cutneos engrosados. Son considerados equivalentes de los signos cardinales: a. La presencia de bacilos cido-alcohol resistentes en frotis o biopsias de piel. b. La evidencia histopatolgica definida de lepra, confirmada por un dermatlogo con experiencia en la enfermedad. Se consideran como sospechosos de lepra los casos donde se encuentra apenas uno de los signos cardinales (o equivalente) de los anteriormente mencionados. Se definen como lepra incipiente cuando estn presentes dos signos cardinales (o equivalentes), representados por un nmero limitado de lesiones, en ausencia de discapacidades. El de lepra avanzada se define cuando las lesiones son extensas y/o hay discapacidades. Para comprender mejor las bases, la disponibilidad y la factibilidad de utilizacin de los mtodos disponibles para el diagnstico de la lepra, conviene revisar algunos aspectos del conocimiento actual sobre la respuesta inmune del hospedero, el espectro clnico de la enfermedad y los genes y antgenos del bacilo. A nivel mundial, los casos reportados en el ao 2002 fueron: frica 48.248, Amrica 39.939, Mediterrneo oriental 4.665, Sudeste Asitico 520.632, Pacfico Occidental 7.154, Europa 34. Estos son datos reportados por 110 pases-OMS). En Amrica Latina los pases ms afectados segn reportes del ao 2002 fueron: Brasil con 38.365, Argentina 389, Mxico 309 y Repblica Dominicana 205.
Griselda Arzate U.
La tendencia descendente de la prevalencia por lepra en Mxico alienta a redoblar esfuerzos para el control de la transmisin de lepra en el pas La informacin de 2006 registra 243 casos nuevos con una tasa de deteccin de 0.23 casos por 100 mil habitantes, de los cuales 26% son paucibacilares y 74% multibacilares, de stos 5.8% presentan discapacidad grave. El total de casos prevalentes es de 702; el 94% de todos ellos (661), reciben tratamiento con PQT. Respecto a la distribucin geogrca de casos registrados en el pas, 10 estados concentran el 76% de la prevalencia nacional: Sinaloa (107), Nuevo Len (73), Michoacn (71), Jalisco (59), Nayarit (58), Tamaulipas (40), Sonora (35), Guerrero (34), Colima (28) y Guanajuato (27). Mycobacterium Leprae se presenta como un bacilo recto o ligeramente incurvado. Es no esporulado, inmvil y no capsulado. Aunque es grampositivo es difcil, al igual que M. tuberculosis, ponerlo de manifiesto por este mtodo. Cuando se tie con mtodo de Ziehl-Neelsen, se visualiza como un bacilo rojo sobre fondo azul, cido-alcohol-resistente, pudindolo hacer de forma uniforme o presentar grnulos con mayor tamao que el dimetro promedio de la clula. Los bacilos que toman la coloracin cido-alcohol-resistente de manera uniforme son clulas viables y sanas mientras que es probable que los que presentan granulaciones en rosario no sean viables. La cido-alcohol-resistencia de M. leprae puede ser eliminada por medio de la extraccin preliminar con piridina, una propiedad til para diferenciar a este microorganismo de la mayor parte de las otras micobacterias. Puede emplearse tambin para visualizarlo la fluorescencia con auramina o naranja de acridina. Sin embargo a diferencia de otras micobacterias no se colorea en negro Sudn III y posee actividad fenolsica M. leprae presenta una triple cubierta rica en polisacridos externos y en peptidoglicano basal que forma la pared que rodea al citoplasma. Peptidoglicano arabinogalactanos y micolatos contribuyen significativamente a la integridad estructural de la pared. En cambio otros, glicolpidos, glicopeptidolpidos y trehalosa que contienen lipooligosacridos se han encontrado que son componentes activos de las micobacterias. La ms notable de las molculas de glicolpidos asociados a la pared celular de M. leprae es el glicolpido fenlico I (PGL-I), con un trisacarido especial que ha demostrado ser especie especfico e inmunognico durante la infeccin de M. leprae. La presencia de glicina en vez de alanina en la pared le dota de fragilidad y crecimiento aberrante. El citoplasma posee una estructura central con cidos nucleicos y ribosomas. M. leprae se desarrolla lentamente y tiene un tiempo de generacin de 1 da. Se comporta como un parsito intracelular obligado. Hasta el presente no se ha conseguido su cultivo en medios de laboratorios. M. leprae posee varios antgenos de superficie y citoplasmticos, algunos de los cuales son comunes a otras micobacterias y nocardias.
Lepra Paucibacilar
Lepra Multibacilar
Lepra indeterminada Lepra tuberculoide Lepra dimorfa tuberculoide con baciloscopa negativa Lepra con baciloscopa negativa Lepra dimorfa Lepra dimorfa lepromatosa Lepra lepromatosa Lepra con baciloscopa positiva
CLASIFICACIN
Griselda Arzate U.
Lepra Indeterminada
Es la fase de comienzo de la enfermedad, sin tratamiento puede evolucionar hacia la lepra tuberculoide, dimorfa o lepromatosa. La reaccin a la lepromina es variable y la baciloscopa de la lesin es negativa, aunque en algunas ocasiones tras la bsqueda prolongada puede encontrarse algn bacilo suelto en cortes histolgicos, donde adems aparece una inflamacin banal sin caracteres de especificidad. En definitiva, es una forma muy poco estable y el pronstico es bueno con un tratamiento adecuado. Se manifiesta por mculas hipocrmicas, eritemato-hipocrmicas o eritematosas, son de tamao y forma variables. Se localizan con mayor frecuencia en nalgas, espalda, muslos, brazos, excepcionalmente en palmas de las manos, plantas de los pies y cuero cabelludo. Pueden ser nicas o mltiples. Las mculas se manifiestan por hipoestesia ms o menos definida. A dems de las alteraciones sensitivas tambin pueden presentar trastornos vasomotores, alopeca ligera o total. Nunca se produce la afeccin de los troncos nerviosos. Diagnstico Diferencial Pitiriasis Vericolor, Pitiriasis Alba, Neurofibromatosis, Dermatitis Seborreica, - Dermatosis solar hipocromiante, Vitligo, Hipocromas residuales, Nevus acrmico o despigmentado, Esclerodermia en placas o Morfea, Pinta.
Lepra Tuberculoide
Es una forma "benigna" de la enfermedad. Afecta solo la piel y los nervios. Reaccin de Mitsuda positiva, tiene una estructura histolgica caracterstica, formada por granulomas epitelioides. El nmero de troncos nerviosos daados es escaso y asimtrico, pero sin tratamiento puede dejar graves secuelas. En las lesiones se encuentran escasos y nulos bacilos debido a la gran capacidad de defensa del paciente en estos casos. En conclusin: Baciloscopa negativa, Mitsuda positiva, en ocasiones tendencia a la regresin. En piel un nmero escaso de lesiones, asimtricas, perfecta delimitacin de las lesiones, tendencia a la curacin en su parte central. Se localizan con preferencia en nalgas, muslos, piernas, brazos, antebrazos, tronco, regiones lumbares. Las lesiones en piel corresponden a: mculas, ppulas y ndulos. Existe alteracin neurolgica en todas las lesiones, en primer lugar se evidencia la anestesia trmica y posteriormente la dolorosa, pudiendo existir tambin hipoestesia o anestesia al tacto. Las lesiones pueden presentar alopeca total, disminucin de la sudoracin, lo que puede acabar en una anhidrosis completa. Diagnstico Diferencial Dermatofitosis, Lupus eritematoso discoide y subagudo, Psoriasis, Dermatitis seborreica, Sarcoidosis, Sarcoma de Kaposi, Granuloma anular, Liquen plano anular, Esclerodermia en placa, Sfilis, Alopecia areata, Tuberculosis cutnea, Leishmaniosis, Cromomicosis, Esporotricosis, Blastomicosis sudamericana, Enfermedad de Jorge Lobo o lobomicosis, Toxicodermias.
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Lepra Lepromatosa
Se caracteriza por una reaccin a la lepromina negativa. Esta falta de reaccin a la enfermedad es la que determina en esta forma clnica la diseminacin de los bacilos a parte de la piel y los nervios a los rganos internos. El nmero de micobacterias en estos pacientes es importante, por lo tanto la baciloscopa es positiva. En la piel las lesiones son numerosas, simtricas, mal delimitadas, de localizacin y extensin variables. Las lesiones presentan cuatro formas: Ndulos o lepromas, mculas, infiltraciones y lceras. Los lepromas constituyen las lesiones tpicas de la enfermedad, aunque no son tan frecuentes. Hay alopeca, la barba puede faltar parcial o totalmente, el vello puede faltar por completo en el trax y tambin a nivel del pubis. En los brazos, muslos, antebrazos, piernas y el dorso de las manos hay escasez o ausencia total del vello. En las uas, adems de grandes alteraciones trficas de reabsorcin, podemos encontrar una prdida de brillo y una disminucin del crecimiento. La sudacin est suprimida por completo o casi por completo en las reas de infiltracin, las mculas y los lepromas; adems, se constata su ausencia en grandes zonas del cuerpo coincidiendo con anestesias de origen troncular. Diagnstico Diferencial Sfilis, Toxicodermias, Eritema nudoso, Leishmaniosis anrgica, Enfermedad de Jorge Lobo o lobomicosis, Lupus eritematoso sistmico, Xantomas, Neurofibromatosis, Lipomatosis, Linfomas cutneos, Leucmides, Ictiosis, Alteraciones hereditarias o adquiridas de las cejas.
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DIAGNOSTICO DE LA LEPRA
Puede considerarse caso sospechoso a las personas que presenten algunas de las siguientes manifestaciones: Sintomticos de piel (SP). Persona con cualquier tipo de lesin cutnea, anestsicas o hipoestsicas, hipopigmentadas o rojizas, bien delimitadas o con brotes difusos, no congnita, diferente a cicatriz; sea o no su motivo de consulta, de larga duracin y que no haya respondido a tratamientos previos. Sintomtico de sistema nervioso perifrico (SSNP). Personas con reas corporales hipo o anestsicas o con problemas motores distales, de las manos, los pies o los prpados. Toda persona que presente una o ms de las siguientes seales: manchas hipocrmicas o eritematohipocrmicas, con o sin disminucin de la sudoracin y con o sin alopecia localizada, con alteracin de la sensibilidad; reas cutneas con anestesia, hipoestesia o parestesias; placas eritematosas de lmites ntidos con alteracin de la sensibilidad; lesiones eritematosas planas con centro claro o placas infiltradas, con alteracin de la sensibilidad; placas eritematosas infiltradas de bordes difusos, con alteracin de la sensibilidad; tubrculos y ndulos; prdida extensa de sensibilidad en las manos o en los pies; uno o ms troncos nerviosos perifricos engrosados, con prdida de la sensibilidad y de la motricidad en su distribucin correspondiente, sin lesiones cutneas; nervios dolorosos espontneamente o a la palpacin; ulceras indoloras en las manos o en los pies.
Condiciones Clnicas
Lesiones cutneas eritematosas o hipocrmicas, con prdida de la sensibilidad trmica y/ o dolorosa o tctil; engrosamiento, dolor espontneo o a la palpacin de uno o varios troncos nerviosos perifricos, asociados con signos de afeccin neural: prdida sensitiva, disminucin de la fuerza muscular o parlisis en el territorio y msculos por ellos inervados.
Condiciones De Laboratorio
Identificacin de bacilos cido-alcohol resistentes en los frotis de moco y linfa; demostracin en las biopsias de infiltrados inflamatorios que lesionan o destruyen los nervios, independiente de la presencia o no de bacilos en la muestra. El estudio clnico se debe realizar con las metodologas dermatolgica y neurolgica con una exploracin fsica completa.
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La baciloscopia se debe realizar en todos los casos que se estudien por primera vez y consiste en obtener frotis del lbulo de la oreja, de una lesin cutnea y, cuando se considere necesario, de la mucosa nasal. En los casos multibacilares el diagnstico se debe confirmar con baciloscopia positiva y en los paucibacilares por los estudios clnico-epidemiolgicos. El estudio histopatolgico se debe realizar en todos los casos que se estudien por primera vez y consiste en obtener una biopsia de piel de una lesin activa en la que no exista infeccin agregada, que incluya tejido celular subcutneo. La leprominorreaccin se debe realizar para la clasificacin de casos dimorfos e indeterminados y tomar la decisin del tipo de tratamiento que requieren; esta prueba intradrmica indica el estado inmunolgico de una persona y el polo al que se definirn. Estudio epidemiolgico, para identificar la existencia o no de asociacin con otros casos de lepra o con rea endmica. Evaluacin de discapacidades, desde la primera entrevista y cada 6 meses, o antes si es necesario, hasta concluir la vigilancia postratamiento, se debe evaluar en cada paciente el grado de discapacidad, para adecuar las medidas de prevencin, tratamiento y rehabilitacin. Las discapacidades por lepra en ojos, manos y pies se califican por grados, de acuerdo a los siguientes criterios: a. Grado 0: No hay discapacidad. b. Grado 1: Hay trastornos de la sensibilidad, sin alteracin visible en las estructuras; la funcin visual no est gravemente afectada. c. Grado 2: Hay deficiencias en la funcin y estructura neuromusculoesqueltica o deficiencia grave en la funcin visual y del globo ocular. El grado ms alto que resulte de la evaluacin ser considerado como la discapacidad general del enfermo.
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TRATAMIENTO DE LA LEPRA
Los frmacos que se deben utilizar en el tratamiento de la lepra se denominan de primera lnea y son rifampicina, clofazimina y dapsona. La PQT la prescribe el personal de salud debidamente capacitado. Los frmacos que se deben utilizar en casos con persistencia de lesiones despus del retratamiento para lepra se denominan de segunda lnea y son ofloxacina o minociclina. Los prescribe el personal de salud especializado debidamente capacitado. El tratamiento regular de la lepra para los casos multibacilares comprende como mnimo 12 dosis mensuales supervisadas de rifampicina, clofazimina y dapsona y 324 dosis autoadministradas una cada da de clofazimina y dapsona de acuerdo a las especificaciones del Cuadro 2. Al concluir los 12 meses de tratamiento (o ms segn el caso) los enfermos deben ser evaluados. El tratamiento para casos paucibacilares comprende como mnimo 6 dosis mensuales supervisadas de rifampicina y dapsona y 162 dosis autoadministradas, una cada da o hasta la desaparicin de las lesiones dermatolgicas. En casos con manifestaciones neurolgicas, para evitar que stas empeoren se deben administrar simultneamente con la PQT de 10 a 25 mg diarios de prednisona durante uno o dos meses, bajo estricto control mdico. Los estados reaccinales pueden presentarse en cualquier fase de la evolucin de la enfermedad, inclusive despus de concluido el tratamiento y deben recibir atencin inmediata. La reaccin tipo I, cuando es de reversa, se presenta en los primeros meses de terapia en los casos BT, consiste en una agudizacin de las lesiones preexistentes y neuropata. La reaccin de degradacin ocurre en los casos BL no tratados o en los que han interrumpido el tratamiento. En ellos las lesiones empeoran y pueden aparecer nuevas, con aspecto menos tuberculoide. La reaccin tipo II se presenta en los casos lepromatosos y se caracteriza por periodos agudos denominados reaccin leprosa, manifestados por sndrome febril, cefalea, malestar general, artralgias y neuritis de varios nervios, todo este cuadro acompaado por alguno de los tres sndromes cutneos: eritema nudoso, eritema polimorfo o eritema necrosante. El manejo del paciente con cualquier tipo de estado reaccional es el siguiente: a. Descartar la ingesta de alimentos y medicamentos que contengan yodo o bromo y la presencia de focos infecciosos agregados, dar tratamiento con antibiticos y sintomticos e iniciar o continuar PQT. b. Si no ha recibido PQT, iniciarla y dar tratamiento para la reaccin. c. Si est en tratamiento con PQT, debe continuarlo y dar tratamiento para la reaccin. d. Si concluy PQT con curacin clnica y bacteriolgica, dar tratamiento para la reaccin y valorar si requiere reinicio de tratamiento. e. El tratamiento debe ser de acuerdo al tipo de reaccin y de forma inmediata. f. Si la reaccin no cede al tratamiento, el paciente debe ser valorado por un especialista.
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OBJETIVOS
Objetivo General
Describir las tcnicas de laboratorio de manera simplificada para el diagnstico de la lepra y los procedimientos bsicos para el buen funcionamiento de los laboratorios de la red.
Objetivo Especfico.
Estandarizar las tcnicas y procedimientos de laboratorio para el diagnstico de lepra en el Sector Salud.
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BACILOSCOPIA
Importancia De La Bacteriologa
El laboratorio juega un papel fundamental en el diagnstico y tratamiento de los pacientes de lepra. El diagnstico bacteriolgico, baciloscopia e histopatologa, permite confirmar y clasificar los casos en multibacilares o paucibacilares. Durante el tratamiento la bacteriologa apoya la evaluacin del paciente hasta su curacin. Inicialmente la importancia radica en el momento en que se realiza la primera baciloscopia y la histopatologa a todo caso probable de lepra. Estos estudios determinan el grado de infectividad (presencia o ausencia de bacilos) del paciente, as como el tipo de tratamiento que debe recibir. Los casos multibacilares requieren un seguimiento mediante una baciloscopia semestral y al final del tratamiento. En los que al terminar el periodo de tratamiento establecido continan positivos a la bacteriologa, el mdico tratante evaluar el estado clnico y decidir su manejo. Al finalizar el tratamiento a todos los casos se les realizar un estudio histopatolgico que confirme su curacin.
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Baciloscopia
La bsqueda de bacilos cido-alcohol resistentes en forma directa en frotis teidos de productos clnicos de sujetos con sospecha de lepra es una herramienta de gran utilidad para el diagnstico y control de la lepra. Este examen comprende: la toma de la muestra, la elaboracin y tincin del frotis y la lectura e informe de los resultados. 1. Material requerido a) b) c) d) e) f) g) h) i) j) k) l) m) n) o) Mechero Bunsen o lmpara de alcohol Cerillos o encendedor Alcohol Algodn Gradilla Guantes Pinzas Lpiz o pluma Lpiz diamante Mango de bistur n 3 Navaja para bistur Laminillas de vidrio (portaobjetos) 76 X 26 mm Pinzas curvas de ramas largas Tubo de hule para pinzas Hisopo
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2. Toma de muestra La muestra por analizar es la base fundamental en todo procedimiento y la baciloscopia no es la excepcin. Para que los resultados sean tiles es necesario disponer de una buena muestra y los requerimientos para obtener una buena muestra son: Provenir del sitio correcto. Contener cantidad suficiente del material a examinar
Requisitos: Transportarla adecuadamente Conservar en lugar fresco y seco Existen diferentes tipos de muestras, las ms importantes son las obtenidas del lbulo de la oreja y de una lesin cutnea. En los casos en los cuales no haya lesin activa o se dificulte su toma, se har de la mucosa nasal. A. IDENTIFICACIN Y REGISTRO DE LA MUESTRA. Asignar el nmero correspondiente en la libreta de registro.
Escribir este nmero en el formato de solicitud as como tambin, con la ayuda del lpiz diamante, en el extremo de la laminilla.
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B. SELECCIN DEL REA PARA LA TOMA DE MUESTRA En las figuras 1 y 2 se muestran los sitios para hacer toma de muestra. Se tomarn las muestras en el orden ya descrito, esto es, primeramente lbulo de la oreja y de lesin cutnea por ser los sitios de mayor probabilidad de encontrar el bacilo y causar menos molestias al paciente; las muestras de la mucosa nasal se tomarn como segunda opcin.
Limpiar la laminilla con algodn humedecido con alcohol. Posteriormente evitar el contacto con los dedos.
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Colocar la laminilla con la marca hacia arriba, dejarla en la mesa donde sea fcil de alcanzar. Encender la lmpara de alcohol o mechero de Bunsen.
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Lbulo De La Oreja
Pedir al paciente que se siente y explicar el procedimiento para evitar que se preocupe o moleste. El sitio para la toma de muestra es el borde inferior del lbulo de la oreja
Limpiar el sitio donde se tomar la muestra con algodn y alcohol. Dejar que seque antes de hacer el corte.
Presionar la piel haciendo un pliegue con los dedos en el borde del lbulo, aplicando suficiente presin hasta producir isquemia. En caso necesario auxliese con las pinzas curvas de ramas largas protegidas con tubo de hule sin usar el seguro de estas. Las pinzas no son recomendables porque la fuerza de presin puede ser excesiva y no es detectable ni por el tomador de la muestra ni por el paciente, causando algn dao en el sitio
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Con el bistur estril hacer un corte de aproximadamente 5 mm de largo en el borde del lbulo y por lo menos 2 mm de profundidad de la dermis.
Despus del corte girar el bistur hacia la derecha y raspar con l para obtener tejido desde esa orilla hasta el principio del corte, sin dejar de presionar durante todo el proceso.
Transferir la muestra a la laminilla colocndola en el extremo ms cercano al nmero de identificacin y extenderla en forma circular, para facilitar la lectura del frotis. Realizarlo como se muestra en la figura. El frotis se hace de 5-7 mm de dimetro aproximadamente. La muestra tiene una apariencia de incolora a rosa la mayora de las veces.
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Realizar la limpieza de la hoja del bistur antes del siguiente corte. Limpiar el bistur con algodn humedecido en alcohol. Pasar la navaja sobre la flama, sin que se ponga al rojo. Dejar enfriar el bistur cuidando que no lo toquen.
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Lesin Cutnea
La muestra se toma de acuerdo al tipo de lesin: Ndulos. Tomar la muestra del centro. Manchas. Tomar la muestra de la orilla. Placas. Tomar la muestra de la orilla.
Hacer el corte como se ha descrito previamente. Transferir el material hacia la laminilla colocndola en la parte central y extenderla.
Repetir la limpieza del bistur cada vez que se tome muestra de la misma persona.
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Mucosa Nasal
En los casos que no es posible tomar la muestra de lesin activa, se debe obtener de la mucosa nasal.
Para tomar la muestra de la mucosa nasal se indica al paciente que se limpie la nariz para no obtener moco nasal. Se frota con un hisopo la parte anterior y posterior del tabique nasal. Se recomienda que el algodn del hisopo est bien compactado.
Con la muestra obtenida se realiza el extendido sobre la laminilla en el extremo opuesto al del nmero de identificacin. Dejar secar los frotis a temperatura ambiente sobre la gradilla o la mesa de trabajo (10-15 minutos aproximadamente).
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Despus del secado, los frotis estn listos para ser fijados.
Pasar la laminilla tres veces sobre la flama. La temperatura de la laminilla debe ser soportable al tacto. La laminilla est lista para enviarse al laboratorio o ser teida en ese lugar. Llene el formulario para solicitud de baciloscopia, conservando una copia. En caso de ser necesario el traslado de la muestra se procede como sigue: Envolver la laminilla con una hoja de papel y colocarla en una caja para transporte, anexar la solicitud en un sobre. Enviar al laboratorio lo antes posible.
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Tcnica de Ziehl-Neelsen
Esta tcnica se basa en tres etapas que son: coloracin, decoloracin y coloracin de contraste. Preparacin de reactivos: a) Fucsina fenicada: se prepara con solucin de fucsina bsica y fenol acuoso. Preparacin de fucsina bsica contiene: Fucsina bsica 3g Alcohol etlico de 96 100 ml Disolver por agitacin en un matraz aforado, agregando lentamente el alcohol Preparacin del fenol acuoso: Fenol en cristales 5g Calentar en bao Mara hasta fundir completamente el fenol y enfriar. Adicionar a la solucin de fucsina bsica el fenol fundido. Agitar y agregar agua destilada hasta completar 1 L. Dejar reposar 24 horas y filtrar. Filtrar una vez por semana.
b) Solucin decolorante (alcohol-cido) La solucin decolorante contiene: cido clorhdrico Alcohol etlico de 96
30 ml 970 ml
Dejar escurrir lentamente el cido clorhdrico por las paredes del matraz que contiene el alcohol. Agitar suavemente.
1g 100 ml
Disolver por agitacin y agregar agua destilada hasta completar 1000 ml y filtrar.
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Procedimiento Para efectuar la coloracin del frotis, colocar las laminillas en el puente de tincin con el frotis hacia arriba y el nmero hacia el tcnico. Es conveniente que la varilla ms cercana al tcnico est
ligeramente levantada, para evitar que el colorante cubra la numeracin del portaobjetos. Las laminillas no deben tocarse entre s.
Se cubre la superficie del extendido con fucsina fenicada previamente filtrada, evitar que el colorante se derrame.
Con un hisopo o con la ayuda de unas pinzas tomar una torunda humedecida en alcohol y encenderla. Calentar suavemente por debajo de las laminillas cubiertas con fucsina, hasta que se produzca emisin de vapores blanquecinos visibles; dejar de calentar y repetir la operacin por dos veces ms. NO HERVIR! ya que la laminilla se tornara caf y no se observaran los bacilos. Evitar que la laminilla se seque, adicionando constantemente el colorante. Si no se realizara as, la fucsina sera difcil de eliminar.
La operacin de calentar tres veces hasta la emisin de vapores toma unos 5 minutos, que es el tiempo adecuado de contacto entre el extendido y el colorante.
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Enjuagar las laminillas para eliminar la fucsina, inclinndolas hacia adelante y con un flujo suave de agua. Se gira la laminilla para lavar la cara inferior, eliminando as la fucsina que ha escurrido.
Se cubre el extendido con alcohol-cido para realizar la decoloracin. Las laminillas se toman con unas pinzas o con los dedos pulgar e ndice y con un suave movimiento de vaivn se arrastra la fucsina. El contacto no debe exceder de 1 minuto.
Se elimina el alcohol-cido lavando la laminilla con agua a baja presin. Cuando las partes ms gruesas del extendido adquieren un color rosado se considera que el extendido se ha decolorado. Ya que se ha decolorado se procede a la coloracin de contraste, para lo cual, se cubre la superficie del extendido con azul de metileno por 1 minuto.
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Se lavan la laminillas con agua a baja presin para eliminar el colorante, tanto por la superficie como por la cara inferior. Con un pedazo de algodn humedecido con alcohol cido se limpian las laminillas por la cara inferior, para eliminar completamente los residuos de colorantes adheridos al vidrio. CUIDADO! cercirese de no limpiar la cara en la cual se encuentra el extendido.
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Se observa al microscopio con objetivo de inmersin y deben examinar por lo menos 100 campos.
Notar la presencia de eritrocitos, leucocitos, clulas de tejido, etc. Buscar bacilos teidos de rojo, de los cuales se encuentran como slidos, fragmentados o granulosos.
El resultado puede hacerse en forma cuantitativa y cualitativa por medio de los ndices bacteriolgico y morfolgico (OMS, Gua Anti Leprosa, Ginebra 1980).
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ndice Bacteriolgico
Es un ndice cuantitativo que indica el nmero de los bacilos, incluye tanto vivos o viables (uniformemente coloreados), como los muertos o no viables (fragmentados o granulosos). Segn la escala logartmica de Ridley, que vara de 1 a 6 cruces, y est basada en el nmero de bacilos observados por campo microscpico. NDICE BACTERIOLGICO BACILOS POR CAMPO Negativo 1+ 2+ 3+ 4+ 5+ 6+ + + No hay Bacilos en 100 campos 1 10 bacilos en 100 campos 1 10 bacilos en 10 campos 1 10 bacilos en cada campo 10 100 bacilos en cada campo 100 1000 bacilos en cada campo Ms de 1000 bacilos en cada campo Bacilos aislados Bacilos en globias
Algunas veces los bacilos se encuentran agrupados en globias de diferentes tamaos. Globia Grande: contiene aproximadamente 100 bacilos. Globia Mediana: contiene aproximadamente 60 bacilos. Globia pequea: contiene aproximadamente 30 bacilos.
Representacin Esquemtica Del ndice Bacteriolgico (IB) De Los Frotis Cutneos Y Frotis De Secreciones Nasales, Segn La Escala Logartmica De Ridley. Examinar la laminilla sistemticamente como se muestra en la figura: Ejemplo IB NEGATIVO Ningn bacilo en 100 campos
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IB 2+ 1- 10 bacilos en 10 campos
Examinar 25 campos
Examinar 25 campos
Examinar 25 campos
1
Examinar 25 campos
En el microscopio pueden aparecer slidos, fragmentados o granulosos. En la lectura de los frotis o biopsias, aparecen teidos individualmente, en grupos o en masas compactas conocidas por el nombre de globias. Las globias estn rodeadas de una membrana limitante y pueden contener 30 o ms bacilos.
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Cuando se realiza la toma del frotis en diferentes reas, el ndice bacteriolgico se calcula sumando el ndice de cada zona examinada, dividiendo el total por el nmero de campos examinados:
5 + 4 + 4 13 = = 4.3 4 + 3 3
Ejemplo:
Se reporta de la siguiente manera: 70% de solidos (viables) 30% fragmentados y/o granulosos (no viables) Este ndice es cualitativo e indica el porcentaje de bacilos viables; se basa en el hecho de que el bacilo modifica su forma, su tincin, su aspecto y conformacin, debido a los cambios biolgicos o efectos del tratamiento. En este ltimo caso, disminuye el nmero de globias, posteriormente se fragmentan los bacilos y se hacen granulosos hasta que desaparecen.
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Estos bacilos aparecen en tres formas diferentes: a. Slido, en forma de bastn, derecho o curvo con bordes redondeados, lisos y regulares; adems de tomar una coloracin fuerte y uniforme, son bacilos vivos e infectantes. b. Fragmentado, son bacilos menos teidos o interrumpidos en su tincin en uno o ms puntos, son formas muertas. c. Granuloso, los bacilos consisten de grnulos pequeos hasta que desaparecen, son formas muertas. Bacilos Leprosos:
Vivos (Viables) Muertos Muertos
Fragmentados
Granulosos
Se requiere baciloscopia de control (IB) en multibacilares cada 6 meses hasta concluir el tratamiento, y en los paucibacilares se recomiendan una baciloscopia al inicio y otra al final. El IM se recomienda cuando hay duda en la eficacia del tratamiento.
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Despus de usar el microscopio debe ser cubierto con una funda de plstico o guardar en su estuche para evitar la exposicin al polvo.
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LA BIOPSIA
La biopsia que es el examen microscpico de una muestra de tejido tomada de un ser vivo, es el mtodo ms comnmente empleado para la confirmacin y clasificacin de la lepra. Es de valor esencial en las investigaciones y de gran beneficio para la educacin de los leprlogos. El diagnstico histolgico tiene ventaja sobre el diagnstico clnico en que asegura la clasificacin y con ello el pronstico, es comn que la imagen histolgica anteceda a las manifestaciones clnicas. La correlacin entre los cuadros clnicos y las imgenes histopatolgicas es indispensable en el estudio de todo caso de lepra.
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Con bistur: Incisin de 10 mm de longitud por 6 mm de grosor y en profundidad hasta el tejido celular subcutneo. Las incisiones con el bistur deben hacerse verticales, perpendiculares a la superficie y llegar hasta la hipodermis, as las muestras sern semejantes a las tomadas con sacabocados y facilitar su separacin. Evitar hacer el corte en cua porque con este tipo de incisin se obtienen muestras piramidales de base amplia y vrtice estrecho. Tambin, se recomienda que la incisin sobre la superficie cutnea se efecte por cortes rectos en forma de hexgono, este tipo de corte, en lugar del fusiforme, disminuye el nmero de puntos de sutura para cerrar la herida y sufre menos tensin. Se debe evitar pinzar el tejido extrado, para levantarlo se puede usar la aguja con la que se infiltr el anestsico.
Una muestra de piel sin tejido celular subcutneo, es una muestra inadecuada. La cicatrizacin es mejor en las heridas en las que se ha llegado hasta el tejido celular subcutneo, incluso, si no se sutura granula ms rpidamente porque el tejido celular subcutneo est ricamente vascularizado.
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7. Si la muestra fue tomada con bistur, colocar el tejido sobre un cartoncillo cuadrado de 15 mm por lado, poner la hipodermis en contacto con el cartn durante 30 a 60 segundos para que se adhiera a l, ya adherido, sumergir el cartoncillo con la pieza dentro del fijador. Si se omite el paso de adherir el tejido al cartn, la muestra se deforma y dificulta obtener cortes histolgicos aceptables.
8. Si el tejido fue tomado con un sacabocado no es necesario adherirlo al cartoncillo, porque no se deforma, al separar el cilindro de tejido, inmediatamente sumergirlo a la solucin fijadora. 9. Una vez tomada la muestra debe sumergirse en el fijador que contiene el frasco previamente rotulado. El fijador ms usual es el formol al 10% que se prepara con una parte de formol comercial y nueve partes de agua de la llave, sin embargo, se prefiere el formol amortiguado porque se obtienen mejores tinciones y menos artefactos en los cortes histolgicos. El formol amortiguado se prepara de la siguiente manera: Formol comercial Fosfato de sodio monobsico monohidratado Fosfato de sodio dibsico anhidro Agua destilada
El volumen del fijador se considera en cantidad adecuada cuando el lquido es 20 veces el volumen del tejido a fijar. Nunca dejar la muestra en agua o solucin fisiolgica, porque se descompone el tejido. Si no hay formol, fijar en alcohol absoluto. 10. Cerrar bien el frasco para impedir se derrame la solucin fijadora, empacar debidamente protegiendo el frasco. 11. Enviar junto con la muestra la solicitud del estudio histopatolgico, anotar todos los datos especificados en el formulario, para ser utilizados en la correlacin clnico-patolgica para el diagnstico y en estudios de investigacin.
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1 ml 99 ml
0.5 g 2 ml 5 ml 50 ml
Fundir los cristales de fenol en un recipiente de vidrio, dentro de la estufa de cultivo durante 10 a 15 minutos. Triturar en un mortero la fucsina con el fenol hasta obtener una pasta semilquida, aadir el alcohol, mezclar bien y terminar aadiendo el agua. Filtrar antes de usarse.
Hematoxilina de Harris xido de mercurio (rojo).. Cristales de hematoxilina. Alcohol absoluto Alumbre de amonio o potasio. Agua destilada..
Disolver en el alcohol, el alumbre en el agua con ayuda del calor, quitar del calor y mezclar las dos soluciones, calentar a ebullicin tan rpido como sea posible, quitar del calor y agregar el xido de mercurio lentamente. Recalentar hasta que la solucin tome color prpura oscuro, remover del calor inmediatamente y enfriar el recipiente en agua fra. La solucin puede usarse al enfriar. La adicin de 2 a 4 ml de cido actico glacial por 100 ml de solucin aumenta la precisin de la tincin nuclear.
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Solucin De Trabajo De Amarillo Metanilo Amarillo metanilo. 0.25 g cido actico glacial 0.25 ml Agua destilada 100 ml Disolver el amarillo metanilo en el agua destilada, aadir el cido actico glacial.
Procedimiento
1. Desparafinar con una mezcla de xilol-aceite de cacahuate, dos cambios de 12 minutos cada uno. 2. Escurrir, secar con papel filtro, limpiar. El aceite residual evita el encogimiento del corte. 3. Teir con la solucin de carbol fucsina de Ziehl-Neelsen durante 10-15 minutos calentando con lmpara de alcohol hasta emisin de vapores. Entre la solucin y el corte poner papel filtro para evitar precipitados, mantener la laminilla completamente cubierta con la solucin colorante, filtrar la solucin antes de usarse. 4. Lavar con agua de la llave. 5. Diferenciar con solucin acuosa de alcohol-cido al 1% cada laminilla, hasta que los cortes tomen color rosa, alrededor de 1 minuto. 6. Lavar con agua de la llave y agua destilada. 7. Teir con hematoxilina de Harris durante un minuto. 8. Lavar con agua de la llave por 5 a 10 minutos, pasar por agua destilada. 9. Teir con la solucin de amarillo metanilo durante dos minutos. 10. Lavado rpido con agua destilada. 11. Deshidratar con dos pasos rpidos de alcohol de 96, seguidos de dos cambios de alcohol absoluto. 12. Aclarar con un paso rpido por una mezcla a partes iguales de alcohol absoluto-xilol y finalmente dos cambios rpidos de xilol. 13. Montar en resina.
Resultados:
Bacilos acidorresistentes Ncleos Fondo rojos cafs amarillo
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LEPRA TUBERCULOIDE (TT). Granulomas tuberculoides de clulas epitelioides y clulas gigantes polinucleadas tipo Langhans rodeados por linfocitos. El infiltrado puede erosionar el estrato basal de la epidermis e invadir y destruir anexos epidrmicos y nervios. No hay bacilos acidorresistentes.
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LEPRA GRUPO DIMORFO Lepra Dimorfa Tuberculoide (BT). Granulomas tuberculoides de clulas epitelioides y numerosas clulas gigantes polinucleadas tipo Langhans, rodeados por linfocitos, el infiltrado no hace contacto con la epidermis. Los anexos epidrmicos y los nervios estn rodeados por el infiltrado. Con frecuencia se observan escasos bacilos en los nervios o en el infiltrado.
Lepra Dimorfa (BB) Granuloma tubercuolide de clulas epitelioides difuso con escasos linfocitos dispersos, generalmente no hay clulas gigantes. Siempre hay moderada cantidad de bacilos acidorresistentes. Lepra Dimorfa Lepromatosa (BL) Granulomas de histiocitos, con tendencia a mostrarse como clulas epitelioides y/o como clulas espumosas; presencia de abundantes linfocitos y de bacilos acidorresistentes.
LEPRA LEPROMATOSA (LL) Granulomas densos compuestos por clulas grandes de citoplasma espumoso y escasos linfocitos. Abundante cantidad de bacilos aislados o en globias.
Las clulas ms importantes del infiltrado inflamatorio y que interesan para la clasificacin son histiocitos (clulas epitelioides y clulas espumosas) y linfocitos. Las estructuras en donde es frecuente observar bacilos acidorresistentes son: nervios, msculos piloerectores, histiocitos del infiltrado y entre las fibras colgenas de la dermis subyacente al estrato basal de la epidermis.
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Limitaciones De La Biopsia
La persona que toma una muestra para biopsia puede no hacerlo adecuadamente, ya sea porque la lesin elegida no es representativa de la enfermedad, o porque la muestra fue insuficiente en su tamao y con eso ser parte del fracaso de este recurso diagnstico. El patlogo informa solamente sobre lo que encuentre en la muestra que reciba y si esa muestra no es representativa del padecimiento o es insuficiente en su tamao, su examen no suministra informacin precisa. Por eso es conveniente cuidar de que la muestra que se tome para su examen histopatolgico sea la adecuada. En ocasiones no es posible hacer un diagnstico definitivo porque los hallazgos micros- cpicos nicamente pueden ser sugestivos del diagnstico o ser enteramente inespecficos, sin embargo, cuando hay in-especificidad, la correlacin histolgica con la clnica, inmunologa y bacteriologa, puede ayudar a establecer el diagnstico. Muchos pacientes no lepromatosos en tratamiento pueden perder rpidamente los caracteres histolgicos ms importantes, la lesin clnica se resuelve y la imagen microscpica se hace inespecfica. En algunos casos el valor histolgico del estudio es el de eliminar posibles casos de lepra. Otra limitacin es la informacin clnica insuficiente que impide la correlacin clnico- patolgica.
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Formularios E Instructivos
Las solicitudes para los estudios de baciloscopia e histopatologa debern ser llenadas y requisitadas por el mdico, despus de haber realizado el diagnstico diferencial (lepra), y por el responsable del laboratorio para la informacin de los resultados. Los formularios para solicitud e informe del resultado del examen baciloscpico o histopatolgico estn divididos en dos partes. La primera se llena en la unidad solicitante y la segunda en el laboratorio. Este documento se elabora en original y dos copias, el original y una copia se enva al laboratorio junto con la muestra y la otra copia se conserva en la unidad de salud. En el laboratorio se registra la recepcin de la muestra en la Libreta de Laboratorio. Una vez procesada la muestra se registra el resultado en la misma libreta y se transcribe al original de la solicitud y a la copia; el original se enva a la unidad solicitante y la copia se conserva en el archivo del laboratorio. El laboratorio al final del mes enva un informe del nmero de estudios realizados utilizando el formulario Informe Mensual de Actividades de Lepra. Los datos de estos formularios deben registrarse a mquina o con letra de molde (legible). Verificar que los datos contenidos sean los correctos y completos. Evitar rezagos en el envo de resultados.
Los estudios baciloscpico e histopatolgico son obligatorios en todos los enfermos que se estudien por primera vez. El examen microscpico directo o baciloscopia es la tcnica fundamental en toda investigacin bacteriolgica en lepra, tanto para el diagnstico como para el control del tratamiento. El estudio histolgico nos proporciona datos para confirmar el diagnstico de lepra, establecer la clasificacin clnica y para evaluar la evolucin del padecimiento.
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DATOS DEL SOLICITANTE: - Unidad de salud: Nombre del centro de salud, clnica, hospital, etc. Institucin: Escribir el nombre o siglas de la Institucin: S.S.A., I.M.S.S., I.S.S.S.T.E., etc. Localidad: Anotar el nombre de la localidad en la que se ubique el domicilio de la unidad de salud que ofrece el servicio. Municipio: Al que pertenece la localidad. Estado: Entidad federativa a la que pertenece el municipio. Diagnstico clnico: Marcar con una X el diagnstico del enfermo. Estudio para: Marcar con una X si el estudio es para diagnstico o para control.
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DATOS CLNICOS - Tiempo de evolucin del padecimiento: Anotar el tiempo que tiene la enfermedad a partir de su inicio. Antecedentes importantes: Especificar si es lepra familiar y aquellos antecedentes que el mdico considere de inters. Tratamiento: Marcar con una X el tipo de tratamiento. Sitio de toma de la muestra: Se marcar con una X el tipo de lesin de donde proviene la muestra Nombre y firma de quien tom la muestra: Se anotar el nombre y firma de la persona que toma la o las muestras, registrando tambin la fecha de la toma. Nombre y firma de quien solicita el estudio: Se anotar el nombre y la firma del mdico solicitante del estudio y la fecha de la misma.
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No. DE LAB.
F. DE RECEP.
NOMBRE
DOMICILIO
UNIDAD SOLICITANTE
RESULTADOS LO *
IB IM
DX
L.C **
IB
IM
OBSERVACIONES
* L.O. = Lbulo De La Oreja ** L.C. = Lesin Cutnea *** M.N. = Mucosa Nasal
IB IM A I
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LO (Lbulo De La Oreja) LC (Lesin Cutnea) MN (Mucosa Nasal) Anotar una N si es negativo Si es positivo, el nmero de cruces correspondiente a la escala de Ridley. Ejemplo: 3+, 1+, 6+; si aparecen Globias, encerrar las cruces del IB en un crculo. En las columnas IM, anotar el valor porcentual que corresponda al ndice morfolgico.
Calidad: Anotar una X en la columna A si la muestra es adecuada o en la columna I si es inadecuada. Observaciones: Se anotar las pertinentes en cada caso.
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Datos del laboratorio: En el lado derecho, anotar los datos completos de la unidad de salud como sigue: 53
Expediente: Anotar el nmero designado por la unidad de salud solicitante. Institucin: Escribir las siglas de la institucin. Localidad: En donde se ubica la institucin solicitante. Municipio: En donde se ubica la institucin solicitante. Estado: Al que pertenece el municipio de la institucin solicitante. Fecha de solicitud: Anotar da, mes y ao en que se elabora la solicitud. Fecha de recepcin: En el laboratorio se anotar el da, mes y ao en que se recibe la muestra. Diagnstico clnico: Marcar con una "X", el diagnstico clnico del enfermo. Estudio para:
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Marcar con una X si el estudio es para diagnstico o para control. Datos clnicos. Tiempo de evolucin del padecimiento: Anotar el tiempo transcurrido desde la aparicin de los signos y sntomas de la enfermedad actual hasta el momento en que se establece el diagnstico de lepra. Antecedentes importantes: Especificar si es lepra familiar y aquellos antecedentes que el mdico considere de inters. Topografa: Sealar con una "X" la topografa correspondiente: Localizada: Si la presencia de lesiones se limita a un segmento del cuerpo humano. Diseminada: Si existen lesiones en dos o ms segmentos. Generalizada: Si hay lesiones en los todos los segmentos. Nmero de lesiones: Indicar la cantidad de lesiones que presenta el paciente: - 0 = No hay lesin - 1 = Una lesin - 2 = De 2 a 5 lesiones - 3 = Cinco o ms lesiones. Segmentos afectados: Poner una "X" en el segmento o segmentos con lesiones. Morfologa de las lesiones: Indicar con una "X" el tipo de lesin o lesiones que presente el enfermo. As mismo, especificar la coloracin de ellas, si existen lesiones con distinta coloracin o si existe infiltracin difusa, marcar cada espacio correspondiente. Descripcin complementaria: Describir todos aquellos signos y sntomas que el mdico solicitante considere sean de importancia para el diagnstico del padecimiento. Fecha y resultado de la ltima baciloscopia: Anotar el da, mes y ao en que se efectu la ltima baciloscopia del enfermo as como el resultado en nmero de cruces.
Tratamiento.
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Monoterapia: Escribir sobre la lnea el nombre del medicamento, ejemplo: DDS, Rifampicina, etc. PQT: Poner una "X" si est en tratamiento con el esquema de la OMS. Otro esquema: Especificar los medicamentos prescritos para la lepra. Sin tratamiento: Poner una "X" si el enfermo no ha iniciado tratamiento especfico para la lepra. Inicio: Anotar la fecha de inicio del tratamiento. Trmino: Anotar la fecha slo en el caso de que el tratamiento haya llegado a su fin. Observaciones: Anotar, si anteriormente se ha efectuado otro estudio para lepra, el resultado, el nmero del estudio, el laboratorio e institucin que lo efectu; si ha recibido tratamiento en otra poca; y otros datos que considere el solicitante pertinentes. Lesin de la que se tom la muestra de tejido: Escribir el tipo de lesin (mancha, placa redonda o anular, ndulo, eritematosa, hipopigmentada, hiperpigmentada, de color normal, anestsica) o si se tom muestra de piel con apariencia normal. Regin de donde se tom la muestra de tejido: Especificar la regin anatmica en la que se ubica la lesin o el sitio de la piel elegida para tomar el fragmento de tejido, ejemplo: cara anterior del antebrazo, regin escapular, interescapular, lumbar, gltea, etc. Fecha de toma: Anotar el da, mes y ao en que se obtuvo la muestra. Nombre y firma de la persona que solicita el estudio: Anotar nombre(s) apellido paterno y apellido materno y la firma de la persona que solicita el estudio.
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REVERSO (Es llenado por el laboratorio que efecta el estudio histopatolgico) Nmero de registro de laboratorio: Se anota el nmero con que fue registrado en la Libreta del Laboratorio, iniciando cada ao nueva numeracin. Descripcin histopatolgica: Anotar la descripcin somera de los hallazgos microscpicos en los cortes examinados de la muestra recibida. Diagnstico histopatolgico: Registrar el diagnstico basado en los hallazgos microscpicos y su correlacin con los datos clnicos. Observaciones: Anotar las observaciones pertinentes a cada caso, ejemplo: muestra fijada en formol concentrado, muestra sin fijacin, frasco roto y muestra suelta, no se recibi la muestra, los datos solicitados no fueron reportados, si es necesario tomar otra muestra, etc. Nombre y firma del mdico que realiz el estudio: Se anota en forma clara el nombre(s) y apellidos, agregando la firma. Fecha del estudio: Anotar el da, mes y ao en que se emite el resultado.
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BACILOSCOPIA
RESULTADO HISTOLOGICO
OBSERVACIONES
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Diagnstico Clnico: Se registra el diagnstico clnico preliminar establecido por el mdico que atiende al enfermo. - Tratamiento: En la primera columna titulada "TIPO" se escribe DDS, PQT, Otro esquema o Sin tratamiento. En la segunda columna titulada "INICIO" se escribe la fecha de inicio del tratamiento que tiene o tuvo. En la tercera columna titulada "FIN", se escribe la fecha en la que termin el tratamiento. Baciloscopia: Se registra la fecha y el nmero de cruces de la ltima baciloscopia del enfermo. Resultado histolgico: Se anota el diagnstico del laboratorio de patologa. Fecha de entrega del resultado: Se registra la fecha en la que entreg el laboratorio el resultado del estudio histopatolgico. Observaciones: Se anotan las observaciones pertinentes en cada caso.
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Control De Tratamiento. Anotar el nmero de baciloscopas positivas, negativas y el total realizado en el mes. Total: Anotar la suma de los totales de baciloscopas de diagnstico y de control realizadas en el mes. Estudios histopatolgicos Diagnstico: Anotar en cuadro correspondiente a la clasificacin de lepra el nmero de estudios de diagnstico realizados en el mes que se informa y anotar el total. Control: Anotar los estudios realizados para control de tratamiento en el cuadro respectivo: con actividad y sin actividad. Sumar ambos para registrarlos en el total. Total: Anotar la suma de los estudios de diagnstico y de control realizados. Relacin de casos nuevos confirmados: Anotar el nmero de laboratorio, nombre completo del paciente, edad en aos cumplidos en la columna correspondiente al sexo del paciente, domicilio y/o datos que permitan localizar al paciente rpidamente, la fecha del diagnstico bacteriolgico, resultado de la baciloscopa y/o la histopatologa y nombre y localidad de la unidad que solicit el estudio. Elabor el informe: Nombre y firma del responsable del rea de micobacterias. Fecha: Registrar la fecha en que se elabor el informe. Director de la unidad: Nombre y firma del director de la unidad de salud que informa
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BIOSEGURIDAD
La bioseguridad se define como el manejo tcnico adecuado de los procedimientos de operacin cuya eficiencia refleja el entrenamiento del personal, adems de significar la proteccin individual. Las medidas de bioseguridad en el laboratorio de bacteriologa, se consideran como un conjunto de prcticas realizadas sistemticamente por personal consiente y bien adiestrado. La principal medida de bioseguridad, es la realizacin meticulosa de cada tcnica o procedimiento. Ni el mejor equipo puede sustituir el orden y cuidado con que se trabaje. Aunque no se han reportado casos de lepra como resultado del manejo de muestras de tejido y otros materiales clnicos de origen humano o animal, en su manejo se deben seguir las siguientes PRECAUCIONES UNIVERSALES DE SEGURIDAD para la proteccin del personal: El diseo del laboratorio debe permitir una limpieza fcil. El lugar de trabajo deber ser amplio, con buena iluminacin y aislado de otras reas. Deber contar con instalaciones de gas, hidrulica y elctrica en buen estado. El acceso debe ser restringido. No se debe barrer o encerar el piso, se deber limpiar con trapo hmedo. Uso de bata de tela o desechable, la cual deber permanecer en el rea de trabajo. Uso de guantes y respiradores (cubre bocas). No ingerir alimentos y bebidas dentro del laboratorio. No utilizar cosmticos ni utensilios personales en el rea de trabajo. No fumar. No tocarse los ojos ni la boca sin haberse lavado previamente las manos. Desinfectar las mesas de trabajo con solucin de fenol al 5% antes y despus de cada sesin. Evitar el manejo de muestras, cuando se tengan cortadas o heridas en las manos. Lavado frecuente de manos con suficiente agua, jabn, y cepillo quirrgico. Tener cuidadosa manipulacin de objetos punzocortantes y de vidrio. Realizar adecuada esterilizacin, desinfeccin y disposicin del material con autoclave o fenol al 5%. Se deber contar con autoclave u olla de presin con manmetro y vlvula de seguridad. El equipo deber manejarse con precaucin. Al terminar la sesin de trabajo guardar el equipo de reactivos utilizados.
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El manejo y transporte inadecuado de las muestras y frotis puede afectar el resultado final.
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ESTADO FISICO
Slidos
ENVASADO
Bolsa De Plstico
COLOR
Rojo
Los recipientes de los residuos peligrosos punzocortantes deben ser rgidos, color rojo debiendo estar etiquetados con la leyenda que indique Peligro residuos punzocortantes biolgico-infecciosos y con el smbolo universal de riesgo biolgico. Los residuos peligrosos biolgico-infecciosos deben ser tratados por mtodos fsicos o qumicos.
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CONTROL DE CALIDAD
Objetivos
Garantizar la exactitud, precisin y oportunidad del diagnstico bacteriolgico e histopatolgico de lepra. Establecer los requisitos que deben satisfacerse para acreditar la calidad de los laboratorios que realizan diagnstico de lepra. Proporcionar al personal operativo los elementos tcnicos para asegurar la calidad en el diagnstico y en el seguimiento de los enfermos de lepra.
Los requerimientos mnimos para el aseguramiento de la calidad del laboratorio en el diagnstico bacteriolgico e histopatolgico de lepra. A) Administrativos. Se debe contar con: Formularios: Solicitud de baciloscopia. Solicitud de estudio histopatolgico. Solicitud de evaluacin de baciloscopas. Solicitud de evaluacin de histopatologa. Libreta del laboratorio de baciloscopia. Libreta del laboratorio de patologa. Manuales: Procedimientos Operativos para el Control de Lepra. Procedimientos de Laboratorio de Lepra. B) Recursos Humanos. Del responsable. El laboratorio debe ser dirigido por un profesional capaz de asumir las responsabilidades cientficas, tecnolgicas y administrativas que se requieran. Del laboratorio. Debe existir suficiente personal calificado con capacitacin, experiencia y educacin continua documentada, para conducir y ejecutar las tcnicas bacteriolgicas e histopatolgicas para el diagnstico de lepra. C) Recursos Materiales y Tecnolgicos. El laboratorio debe contar con espacio, equipo y abastecimientos suficientes y adecuados para realizar el volumen de trabajo requerido por su nivel de atencin con ptima confiabilidad, seguridad y oportunidad.
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Metodologa
Todo laboratorio deber contar con un control de calidad interno y otro externo.
Las instituciones del Sector Salud deben proporcionar los recursos necesarios para la correcta operacin de sus laboratorios.
Al finalizar la visita se dejar por escrito un informe preliminar del resultado obtenido, as como los problemas observados y las recomendaciones para solucionarlos. Posteriormente se enviar el informe definitivo al director de la unidad de salud y al jefe del laboratorio. Supervisin Indirecta: Consiste en el envo peridico de lminas del laboratorio supervisado al laboratorio supervisor para su relectura y establecimiento de concordancia en los resultados. Se enviarn todas las lminas positivas y 10 % de las lminas negativas en baciloscopia y en caso de que se realicen estudios histopatolgicos, enviar el 10% de sus laminillas. En ambos casos las laminillas deben ir acompaadas de la solicitud correspondiente.
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supervisor como negativa o cuando el supervisado la reporte negativa y el supervisor como positiva. La discordancia en nmero de cruces se considera menor y solamente que se presente en forma constante, se sugerir dar capacitacin al laboratorista. El laboratorio supervisor anotar ah el resultado, as como las recomendaciones que considere necesarias.
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