Experiencia de Laboratorio de Ciencias Naturales y Biologa

Observacin de la mitosis en clulas meristemticas

en la raz de la cebolla (Allium)
Introduccin

La divisin celular es el proceso por el que una clula origina dos clulas hijas cada una de las cuales
recibe la misma informacin gentica.
La clula eucariota, realiza dos funciones muy importantes esta es la regulacin y la reproduccin celular
ambas en el en el ncleo celular.
El ncleo contiene la mayor parte de la informacin hereditaria de la clula, es decir, las instrucciones
necesarias para el desarrollo y el metabolismo de las especies. El ncleo es el encargado de duplicar su
informacin gentica para transmitirla a las nuevas generaciones cuando la clula se reproduzca.
Estos procesos se manifiestan desde la formacin de una clula hasta su propia divisin en dos clulas
hijas, es lo que se denomina como ciclo celular. Este ciclo se divide en dos etapas principales: la interfase
y la divisin celular, de acuerdo con los sucesos que se presentan en la clula. La interfase se
caracteriza por una serie de procesos que implican la fabricacin activa de molculas tales como las
protenas y la duplicacin del DNA. Mientras que la divisin celular consta de la mitosis o cariocinesis en la
que ocurre la condensacin y separacin de los cromosomas y de la citocinesis o divisin citoplasma. La
mitosis es un proceso que ocurre en el ncleo de las clulas eucariticas y que precede inmediatamente a
la divisin celular, consistente en el reparto equitativo del material hereditario (ADN) caracterstico. La
mitosis se subdivide segn los cambios que

presente el ncleo y la morfologa que presenten los

cromosomas en: profase, metafase, anafase y telofase.

Objetivos:

Hacer una preparacin microscpica de clulas meristemticas de la raz de cebolla (Allium).

Diferenciar las etapas de la mitosis mediante una actividad experimental.

Materiales y equipos:

pices de cebolla.

Palillos de dientes

HCl diluido (3ml de HCI y 97ml de etanol

Lpiz, borrador, colores.

95 %)

Navajas o Bistur

Colorante Azul de Bromotimol

Mechero (vela)

Papel toalla

Portaobjetos y cubreobjetos

Aguja de diseccin.

Papel de lentes

Vidrio reloj

Microscopio

Agua destilada (agua lluvia)

Gotero

Procedimiento para la preparacin previa de la cebolla:

De cuatro a seis das antes de hacer la prctica se pone un bulbo de cebolla en un vaso de
precipitados (vaso qumico) lleno de agua, de tal manera que la parte
inferior del mismo est en contacto con el agua.

No permita que la cebolla caiga dentro del recipiente sino que quede
suspendida sobre el agua (si es necesario, inserte unos palillos de
dientes en forma de trpode en los lados de la cebolla para que la
sostengan).

Cuidar que el agua toque la base de la cebolla, pero el resto de la

cebolla no debe de estar sumergido en el agua, ya que se pudrira.

Se debe cambiar el agua del frasco por agua limpia, al menos dos veces, a los tres y cuatro das.
La raz de la cebolla debe de estar sumergida en agua hasta el momento de realizar la prctica.

Procedimientos:
Lea cuidadosamente las indicaciones

Con una navaja se corta el extremo de varias raicillas, procurando que su longitud sea de unos 2 a
3 mm., ya que es en esta zona de la raz es donde se encuentran las clulas en divisin.

Enjuague los pices de cebolla (fijados) en agua destilada (agua lluvia) por 30 segundos.

Coloque las races en un plato Petri que contenga unos 3mL de HCl 1% por 7 a 8 minutos, (esto se
hace para romper la pared celular).

Mientras transcurre el tiempo anterior, corte y conserve la porcin del pice de raz que posea un
tejido blanquecino (casi 2 a 3 mm del extremo de la raz) y deseche el resto.

Transferir los pices a agua destilada y dejarlos all 30 segundos (enjuague).

Coloque el tejido sobre un vidrio reloj e inmediatamente agregue dos gotas de Azul de Bromotimol
sobre ste.

Luego proceda a sostener el vidrio reloj que contiene la muestra con una pinza de metal para
calentar suavemente por 1 minuto, por medio de toques intermitentes sobre una vela (durante este
tiempo vigile que el tejido permanece humedecido con el colorante, no permita que hierva ni que se
seque; agregue ms colorante si es necesario). Esta etapa es opcional (el calentamiento intensifica
la tincin).

Luego coloque la muestra en el portaobjeto y lo cubre con el cubreobjetos; con el papel toalla
doblado elimine el exceso de colorante presione fuerte y cuidadosamente por medio de un borrador
de lpiz (esta tcnica se llama "extendido por aplastamiento" o "squach). Recuerde que mientras
est ms aplastado, las clulas se separarn ms unas de las otras y se encontrarn en el mismo
plano, distinguindose mejor las distintas etapas de mitosis.

Despus del aplastamiento, si es necesario, levante el cubreobjetos con la ayuda de una aguja de
diseccin y agregue una gota adicional de azul de bromotimol; coloque nuevamente el
cubreobjetos sobre la muestra.
2

Observe al microscopio (primero con el objetivo 10x localice el rea adecuada, luego pase a 40x
para observar con detalles).

Encuentre las cuatro etapas de la mitosis, adems observe la apariencia de las clulas que se
encuentran en interface (aquellas que no estn en mitosis). Realiza tus dibujos de lo observado y
discutan en grupo.

Resultados:
Profase. Dibuja dentro del crculo la fase de la mitosis.
Que se observa________________
_______________________________
______________________________
_______________________________
_______________________________
_______________________________
Aumento de______

Metafase. Dibuja dentro del crculo la fase de la mitosis.

Que se observa________________
_______________________________
______________________________
_______________________________
_______________________________
_______________________________

Aumento de______

Anafase. Dibuja dentro del crculo la fase de la mitosis

Que se observa________________
_______________________________
______________________________
_______________________________
_______________________________
_______________________________

Aumento de______

Telofase. Dibuja dentro del crculo la fase de la mitosis.

Que se observa________________
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______________________________
_______________________________
_______________________________
_______________________________
Aumento de______
3

Preguntas:
1. Explica las caractersticas de la mitosis:
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____________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________
2. Explica en qu etapa del ciclo celular se encontraban la mayora de las clulas observadas:
________________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________
3. Qu etapas de la mitosis lograste observar:
_______________________________________________________________________________
4. Por qu crees que se utilicen las partes en crecimiento en la cebolla para observar la mitosis:
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
Discusin:
En este experimento se utilizan materiales distintos con el propsito de conocer el uso del microscopio,
como tambin observar los pequeos organismos que forman parte de nuestra vida diaria.

Este experimento se llev a cabo por pasos establecidos y debido orden obteniendo resultados
satisfactorios.
En la profase, se observ lo siguiente_________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________________
En la metafase, se observ lo siguiente___________________________________________________
_____________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________
En la anafase, se observ lo siguiente____________________________________________________
_____________________________________________________________________________________.
_____________________________________________________________________________________
En telofase, se observ lo siguiente______________________________________________________
_____________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________

Conclusiones:
En base a los resultados podemos concluir que:
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Bibliografa:
Cornea, M. D.. Botnica General. Manual de laboratorio. 1975. Universidad de Panam, Panam.
Dyson, R.D. Principios de Biologa Celular. 1975. Editores Hay A. Roberta W. Fondo educativo
Interamericano.
Enosa. Manual de Prcticas de Microscopia. 1966. Madrid, Espaa.
Mendoza, R. Anguizola, C y Lay, O. Manual de laboratorio de Biologa General. Fundamentos de
Biologa. 1984
Iglesias, C. Norris, E y Anguizola, C. Manual de laboratorio de Zoologa General. Departamento de
Zoologa. 1985.
Madder, S.S. Inquiery into life. Laboratory Manual. 1983. 4ta. Edition. Sm C. Brow Publisher. U.S.A.