MORFOFISIOLOGA IV GUIA DE TRABAJO PRCTICO Profesores Responsables: Ivn Ciriaco Guzmn Coordinador de Fisiologa Antony Elvis Chipana Ramos - Encargado de captulo Harold Crdova Del Castillo J ulio Huamn Olarte Nstor Manuel Lpez Avils Colaborador: Elvis Paul Molero Bautista
Lugar: Laboratorio de Fisiologa Campus Universitario de Pantanos de Villa
2013 II MORFOFISIOLOGIA IV - GUIA DE PRCTICAS I. INDICACIONES PRELIMINARES
- La tolerancia para el ingreso al laboratorio es de 5 minutos.
- Cada alumno deber llevar al inicio de la prctica:
o Mandil blanco (DE USO OBLIGATORIO)
o Guantes (ES OBLIGATORIO PARA TODOS LOS ALUMNOS TRAER SUS GUANTES)
o Material para toma de apuntes (CUADERNO, LA GUA, CALCULADORA Y LAPICEROS).
- El alumno deber conocer y respetar las normas de bioseguridad del laboratorio.
- Est terminantemente prohibido ingresar o ingerir alimentos, bebidas o fumar dentro del laboratorio y/o durante el desarrollo de la prctica.
- Se deben tomar las precauciones necesarias al coger un animal de experimentacin, as como materiales y/o reactivos, de esta manera evitaremos accidentes.
- Durante el desarrollo de las prcticas se debern de APAGAR LOS CELULARES, RADIOS U OTRO ARTEFACTO que distraiga la atencin del alumno o sus compaeros.
- El material ajeno a la prctica (mochilas, porttil u otros objetos) deben ser guardados en los casilleros por medidas de bioseguridad.
- LA EVALUACIN PRCTICA ES CONSTANTE, al inicio de cada laboratorio se evaluara al alumno.
- El estudiante deber haber ledo (LA PARTE TERICA Y PRCTICA EN LOS DISTINTAS FUENTES BIBLIOGRFICAS) los temas a tratar antes del inicio de clases.
- En los das de exposiciones (SEMINARIOS) el docente encargado elegir el orden de exposicin de los alumnos, esto quiere decir que todos los alumnos del grupo deben conocer el tema.
- Con respecto a los INFORMES DE PRCTICA, estos debern ser entregados al inicio de cada clase.
II. PROGRAMACIN CALENDARIZADA
Semana 1: Sumacin espacial y temporal del impulso nervioso. Semana 2: Evaluacin de la Sensibilidad Semana 3: Sentidos: gusto, olfato, visin y odo. Semana 4: La unin neuromuscular y bloqueantes de placa mioneural. Arco neural y reflejos Semana 5: Inhibicin de la va recurrente. Semana 6: Sistema nervioso autnomo.
Semana 9: Discusin de tema: Acromegalia y alteraciones del crecimiento Semana 10: Curva de tolerancia oral a la glucosa. Semana 11: Diabetes experimental. Semana 12: Discusin de tema: Incretinas y Diabetes Gestacional. Semana 13: Discusin de tema: Pubertad y Climaterio - Menopausia Semana 14: Accin de la oxitocina en tero de rata.
Semana 15: EXAMEN PRCTICO FINAL Semana 16: EXAMEN TERICO FINAL Semana 17: EXAMEN SUSTITUTORIO
NORMAS DE BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO.
La seguridad significa no accidentes, y las normas de bioseguridad deben ser respetadas y observadas para eliminar prcticas peligrosas y evitar riesgos innecesarios. Las medidas prcticas y regulaciones de seguridad recomendadas se resumen del siguiente modo:
SEGURIDAD EN EL LABORATORIO:
Usar mandil y lentes de proteccin segn indicacin del profesor. Informe inmediato de todas las mordeduras o araazos infligidos sobre su persona por el animal de experimentacin. Igualmente seale enseguida algn tipo de dao producido por el uso del material durante la prctica. Mantenga ordenada su rea de trabajo, con espacio suficiente para cada trabajo. No fume, ni coma, ni beba dentro del laboratorio. El material de vidrio que se quiebra debe ser barrido y retirado con escobilla y pala, y no recogerlo con los dedos. No maneje especies que no se les ha enseado a manejar. Tener conocimiento de todas las salidas de emergencia del rea de trabajo. Saber cmo y a quien notificar situaciones de emergencia. No distraerse en juegos o travesuras durante el trabajo. No intentar operar, reparar o desarmar maquinaria para lo cual no est calificado. Deben identificarse y evaluarse los peligros potenciales tales como mordidas, agentes qumicos de limpieza, alergenos y zoonosis, que son inherentes o intrnsecos al uso de los animales.
HIGIENE PERSONAL: Pngase uniforme limpio a su llegada. Guarde su ropa de calle en un casillero. Mantenga una apariencia aseada. Afitese diariamente, en caso de cabello largo tngalo amarrado. Mantenga sus manos limpias y con las uas cortas. No lleve objetos de uso personal. Lave sus manos con agua y jabn: Antes de comenzar a trabajar en una sala de animales. Despus de coger animales muertos o enfermos. Al salir del laboratorio.
IV. BIBLIOGRAFA RECOMENDADA 1. Fisiologa Cuarta Edicin. LINDA S. CONSTANZO. 2. Bases Fisiolgicas de la Prctica Mdica. West y Taylor. 3. Fisiologa Mdica. GUYTON A.C. 4. Fisiologa Mdica. GANONG W.F. 5. Fsica para las Ciencias de la Vida. Alan H. CROMER. 6. Fisiologa Humana. TRESGUERRES JAF. 7. Bioqumica. HARPER. 8. Principios de neurociencias. KANDEL.
SEMANA 1 SUMACIN ESPACIAL Y TEMPORAL DEL IMPULSO NERVIOSO
INTRODUCCIN SUMACIN ESPACIAL Y SUMACIN TEMPORAL
Se denomina sumacin espacial al fenmeno por el cual se produce una sumacin simultnea de los potenciales postsinpticos mediante la activacin o descarga de muchas terminales presinpticas situada en reas muy separadas de la membrana celular de la Neurona Postsinptica. Cuando el potencial de accin postsinptico excitador total o resultante sea lo bastante grande se alcanzar el umbral de descarga o activacin y aparecer espontneamente un potencial de accin en el segmento inicial del axn denominado Cono Axonal de la Neurona Postsinptica. Los potenciales postsinpticos sucesivos causados por descargas de una sola terminal presinptica si se producen con la rapidez suficiente, pueden sumarse y generar un Potencial de Accin como respuesta en el Cono Axonal de la Neurona Postsinptica. Este fenmeno de sumacin se conoce como sumacin temporal. En otras palabras se dice que cuando los impulsos resultantes de los estmulos llegan a travs de distintas neuronas este efecto se denomina sumacin espacial. Si dichos impulsos llegan como una estimulacin repetitiva procedente de una misma neurona, el fenmeno se conoce como sumacin temporal.
OBJETIVO 1. Demostrar algunas de las caractersticas de las acciones reflejas como: los fenmenos de oclusin y facilitacin, as como los de sumacin espacial y temporal.
MATERIALES Una preparacin espinal del sapo. Cuatro frascos conteniendo H 2 SO 4 a diferentes concentraciones: 0.1% - 0.3% - 0.5% - 1% Un frasco con suero fisiolgico PROCEDIMIENTO: SUMACIN TEMPORAL 1. En un sapo separe la mdula del encfalo con un estilete a travs de una puncin en la articulacin crneo-vertebral. 2. Luego destruya la porcin enceflica dirigiendo el estilete en direccin craneal dejando intacta solo la mdula (se dice entonces que se ha provocado un shock espinal). 3. Cuelgue al animal espinal en un soporte. 4. Espere hasta que el animal quede quieto. 5. Introduzca la punta del dedo largo de una pata en las soluciones de concentracin creciente de H 2 SO 4 que se encuentra en los frascos (0.1% - 0.3% - 0.5% - 1%); lavando posteriormente con suero fisiolgico la zona estimulada cada vez que se introduzca en el cido. 6. Observe la respuesta flexora con cada una de las concentraciones. 7. En todos los casos deben tomarse la precaucin de que el rea de piel que se sumerge en las diferentes concentraciones sea siempre la misma.
ESTMULO INTENSIDAD DE LA REACCIN (+/++++) H 2 SO 4 0.1%
H 2 SO 4 0.3%
H 2 SO 4 0.5%
H 2 SO 4 1%
SUMACIN ESPACIAL 1.- Introduzca la punta del dedo de la otra pata en las soluciones de cido empezando por el ms bajo hasta que se encuentre una respuesta dbil. Esta concentracin servir como el estmulo estndar. 2.- Introduzca cada vez mayores reas de piel del sapo; lavando con suero fisiolgico despus de cada estmulo. 3.- Observe la respuesta. Se debe tener en consideracin que el tiempo de contacto con el cido debe ser igual y el menor posible.
RESULTADOS
REA DE ESTIMULACIN INTENSIDAD DE LA REACCIN (+/++++) Contacto con un solo dedo de una pata
Contacto con el tercio distal de la pata
Contacto hasta la mitad de la pata
Contacto con toda la pata
DISCUSIN
CONCLUSIONES
SEMANA 2 EVALUACIN DE LA SENSIBILIDAD
FUNDAMENTO: El conocimiento del ambiente, la relacin entre el cuerpo y el medio, e incluso la percepcin del estado y situacin de varias partes del organismo, corren a cargo del sistema nervioso sensitivo. El gusto, el olfato, la audicin, la vista y el equilibrio han sido clasificados desde hace mucho como sentidos especiales y as van a ser estudiados en la prctica correspondiente, las informaciones recogidas por estos sentidos corren a travs de nervios craneales. Las sensaciones procedentes del resto del cuerpo se llaman sensaciones somticas.
Pueden provenir de receptores sensoriales dentro de la piel, o inmediatamente debajo de ella, que informan sobre temperatura, tacto y dolor en la superficie del cuerpo; se trata, pues, de sensaciones exteroceptivas. Otros receptores, situados en tendones, msculos, alrededor de las articulaciones y en las cpsulas articulares y en los tejidos por debajo de la piel, dan informacin acerca del estado de contraccin de los msculos, la situacin y la velocidad con que se mueven los brazos, piernas, dedos, y otras partes del cuerpo y las fuerzas o presiones que soportan. Estas sensaciones son de naturaleza propioceptiva. Tambin se recibe informacin de estructuras ms profundas, como hueso y tejido conectivo denso. Estas sensaciones son generalmente las de vibracin, dolor, presin profunda.
La percepcin de los rganos internos o sensacin visceral es transmitida por el sistema nervioso autnomo. En general estas sensaciones se interpretan como dolor o plenitud. Suelen iniciarse por distensin de una vscera o de sus envoltura, distensin de rganos huecos, o inflamacin.
Objetivo: Los estudiantes, trabajando en parejas y tenindose a s mismos como sujetos de experimentacin, mediante procedimientos sencillos, analizarn los diferentes tipos de sensibilidad interpretando los resultados desde el punto de vista clnico.
Procedimiento General: Deben trabajar juntos dos estudiantes, uno como sujeto experimentador y otro como examinado. Se invierten luego los papeles y se repiten los ejercicios.
EXPERIENCIA 1: TACTO
Material: 2 lpices de puntas largas y aguzadas por pareja de estudiantes. Reloj cronomtrico
Tiempo de Adaptacin: El sujeto cierra los ojos. Con la punta de un lpiz se mueve muy cuidadosamente un pelo del antebrazo del sujeto, y se mantienen en la nueva posicin. Se pide al sujeto que comunique cundo se da cuenta del desplazamiento del pelo, y cuando desaparece esta sensacin. Se mide la duracin de la percepcin y se anotan los datos en la hoja de resultados. Se repite el experimento con cinco pelos cuando menos, y se toma el tiempo medio de adaptacin. Localizacin del Tacto: El sujeto tambin cierra los ojos; y se vuelve a desplazar un pelo aislado con la punta del lpiz. Se dice al sujeto que intente tocar, con la punta de otro lpiz, la base del pelo que ha sido movido y el punto sealado por el sujeto. Se repite la prueba cinco veces y se establece el error medio para la localizacin en la zona estimulada.
EXPERIENCIA 2: TACTO DESCRIPTIVO
Material: Un comps de dos puntas por parte de estudiantes. Este se puede fabricar fijando con tela adhesiva una aguja hipodrmica, algo despuntada a un comps comn.
Procedimiento: El sujeto cierra los ojos. En distintos lugares de los dedos, las manos; los brazos y la espalda, se coloca el comps ligeramente abierto y tocando, en dos puntos separados, al sujeto. Se busca que distancia mnima discriminada debe haber entre las dos puntas para que el sujeto experimente dos sensaciones diferentes (dos hincadas).
El estudio se inicia poniendo las dos puntas del comps juntas, para que el sujeto experimente una sola sensacin, y luego se separan por una distancia mayor que la necesaria para la discriminacin para dos puntos. Se sigue la prueba con cambios sucesivos, alternativamente por encima y por debajo de la distancia mnima, hasta que una disminucin muy pequea de la separacin de las puntas tiene como resultado la sensacin de tacto en esa rea.
Se hacen cinco determinaciones de la distancia mnima para la discriminacin de dos puntos en cada una de las cuatro zonas establecidas para la experiencia. Se anotan los promedios sobre la hoja de resultados.
EXPERIENCIA 3: SENSACIN TERMOALGESICA Material: 2 varillas de aluminio de aproximadamente de 15 cm de longitud, por 0.5 de dimetro, ambas con uno de sus extremos adelgazados y terminado en una punta muy aguda y larga. Se puede fabricar limando y lijando el extremo de la varilla de aluminio. El otro extremo se asla con tela adhesiva. 2 vasos o recipientes de 500 ml de capacidad. Agua caliente y hielo.
Procedimiento: Se introducen los probadores trmicos fabricados en los recipientes, uno con agua caliente y el otro con agua y hielo picado. Cada varilla se pone en un vaso y se deja en l hasta que se encuentre en equilibrio trmico con el contenido del recipiente. Para realizar la prueba, tarda muy poco tiempo en equilibrarse con la temperatura del medio ambiente; por lo tanto, hay que devolverla al vaso correspondiente cuando no se utiliza. Se debe secar con papel absorbente la varilla cada vez que se extrae del vaso y se va a colocar sobre la piel del sujeto.Se traza un crculo de unos tres centmetros sobre la cara dorsal de una de las manos.
Se dice al sujeto que cierre los ojos. Con mucho cuidado se toca la piel dentro de la zona delimitada con uno de los probadores. Se toman los probadores caliente y fro al azar, y se buscan receptores al fro y al calor hasta explorara toda la zona dentro del crculo. Se sealan con puntos azules los lugares en donde el sujeto refiere sensaciones de calor y con puntos rojos los lugares donde las sensaciones son de fro. Varios sectores se estudian tanto con la varilla fra como con la caliente. Despus de estudiar la zona sealada, se anotan con puntos rojos y azules la situacin de los receptores al calor y al fro hallados en el examen, en el crculo de la hoja de resultados.
EXPERIENCIA 4: SENSACIONES PROPIOCEPTIVAS
Material: 2 vasos de material plstico o papel, muy pequeos (tipo copa o de cctel). Por cada pareja de alumnos. Unas 100 municiones de plomo similares de pequeo volumen (vas de rodaje, bolitas de metal o vidrio).
Procedimiento: Entre otras funciones, los receptores propioceptivos suministran al cerebro informacin que puede ser empleada para establecer juicios acerca de fuerzas, pesos y tamaos. Para demostrar la discriminacin de peso, se ponen las municiones en cada uno de los vasos. Se coloca un vaso en cada mano, sobre el dedo ndice (se puede fabricar al vaso una asa de pabilo para colgarlo), y se pide al sujeto que juzgue sus pesos relativos (igual, menor o mayor). Se quitan ambos vasos y se saca una municin de uno de ellos. Se vuelven a poner los vasos sobre los dedos ndices y se repite la pregunta.
Se siguen quitando o poniendo municiones, una por una, del mismo vaso, pero colocando al azar el vaso que tiene diez municiones sobre los ndices derecho e izquierdo, hasta estar convencido que el sujeto en verdad reconoci una diferencia de peso. Para ver si es as pueden quitarse los vasos, hacer ruido como si se fuesen cambiando pesas, y volver a ponerlos en donde estaban.
Despus de establecer cuantas municiones deben quitarse antes de reconocerse una diferencia, con vasos que no tenan en un principio diez municiones, se repite la prueba utilizando veinte, luego treinta, cuarenta y por fin cincuenta.
Los resultados se colocan en la grfica de la hoja de prctica. En las abcisas se pone el nmero de municiones que estaban en el vaso inicialmente y en las ordenadas el nmero de municiones que se fueron quitando. Analizar e interpretar el trazado obtenido.
NOTA: Los alumnos debern traer el material requerido para realizar la prctica, en las condiciones solicitadas.
SEMANA 3 SISTEMA NERVIOSO SENSORIAL VISIN, AUDICIN, GUSTO Y OLFATO
FUNDAMENTO El conocimiento del mundo exterior se ampla completamente por medio de receptores con funciones exclusivas, los cuales han formado rganos especiales, como una prolongacin del tejido nervioso central en la cabeza, manteniendo su conexin en el neuroeje de pares craneales. Por estas caractersticas, que diferencian a los rganos de los sentidos del resto de la sensibilidad somtica, denominndose Sistema Sensorial, y as van a ser estudiados en la presencia prctica.
VISIN El cerebro recibe la informacin del exterior y la interpreta en forma de imgenes. Todos los elementos constituyentes de nuestro mundo exterior o no a la luz. Esta funciona como un estmulo fsico que ingresa al interior del ojo, hasta la zona receptora que es la retina; quien se encarga de transformarlo en un impulso nervioso, trasladndose de esa forma a la corteza cerebral. El paso de la luz a travs del ojo es regulado por una especie de diafragma, que permite graduar, aumentar o disminuir, la cantidad de luz que ingresa al sistema ptico. Esta capacidad de controlar el ingreso de luz se logra por la accin de iris. La funcin de los lentes del ojo consiste en enfocar los rayos que provienen de los objetos iluminados, de tal modo que la retina quede estimulada por la combinacin de zonas claras y obscuras que desprenden la superficie de la imagen. Uno de los lentes, el cristalino, puede cambiar su distancia focal, o su dimetro entero posterior, para enfocar tanto los objetos cercanos, como los alejados. El poder de convergencia del cristalino (foto acomodacin) se logra por accin del msculo ciliar sobre el cristalino que es elstico.
MATERIAL Lmina con el grfico
PROCEDIMIENTO
Punto Ciego En la zona de la retina denominada disco ptico o punto ciego, las fibras nerviosas dejan la cavidad ocular para formar el nervio ptico y se ubica la entrada y salida de la circulacin retiniana del ojo. Esta zona no posee receptores y constituye por lo tanto, un punto ciego en el camino visual. La presencia del punto ciego no se advierte con frecuencia, posiblemente debido a que el cerebro rellena esta falta de informacin, adems las imgenes formadas en ambos ojos son especulares, por lo que se puede la zona ciega de un ojo con la imagen formada en el otro. Existen diversas formas de poner de manifiesto estas regiones ciegas de la retina.
Demostracin del punto ciego: mirar con el ojo derecho la cruz de la figura 1 fijamente, acercando el papel hasta unos 25 cm. Cuando desaparezca el crculo es que su imagen se ha formado en el punto ciego del ojo derecho. Este fenmeno tiene su base en el hecho de que la interpretacin de la forma, que se realiza en el cortex visual, no es lineal, sino participan miles de neuronas que realizan de manera simultnea representaciones visuales mltiples de una imagen sencilla.
AUDICIN FUNDAMENTO Las ondas que llegan al odo por el aire del conducto auditivo externo hasta llegar al tmpano. Al comprimir y descomprimir el aire, estas ondas mueven hacia fuera o hacia dentro al tmpano, este movimiento es transmitido por la cadena mecnica de huesecillos hasta la ventana oval, donde pone en movimiento el lquido contenido en el caracol (perilinfa). Por las caractersticas fsicas del caracol y del lquido que contiene, este movimiento de adelante atrs de lugar a fenmenos de resonancia. La localizacin del vientre de resonancia depende de la frecuencia propia del lquido oscilante. Quedan estimuladas las clulas de los receptores del rgano de corti cerca del punto resonante y transforman las oscilaciones del lquido en impulsos nerviosos que son transmitidos al cerebro. El tono del sonido percibido depende de la localizacin de los receptores estimulados, y su intensidad, del grado de deformacin de los cilios. Puesto que el movimiento relativo entre las clulas y el lquido del caracol producen la sensacin de sonido, tambin se pueden estimular las clulas ciliadas por vibraciones de las paredes seas del caracol.
Por ejemplo, las vibraciones de un diapasn pueden transmitirse por los huesos del crneo y estimular las clulas ciliadas, produciendo la sensacin de sonido sin que intervengan el tmpano ni los huesecillos. Por lo tanto, se puede distinguir una prdida de audicin por anomalas del caracol, del rgano de Corti o de las vas (sordera de conduccin). Si existe sordera nerviosa, las vibraciones del diapasn no se perciben como sonido, bien sea que el diapasn se ponga cerca del odo o que toque al crneo. Pero si la sordera se debe a trastornos de conduccin, las vibraciones a travs del crneo sern reconocidas como sonido.
Adems, cuando existen dificultades de conduccin area, y el diapasn se coloca en la parte media de la frente el sonido se percibe ms intensamente en el odo interno.
OBJETIVO En esta prctica el alumno actuara como sujeto observador y experimental simultneamente, y debe concentrar la atencin en la observacin de sus propias experiencias.
MATERIALES Diapasn c-256
PROCEDIMIENTO Prueba de Weber: Se hace vibrar el diapasn y se coloca sobre el vertex, el individuo con una audicin normal localizar el sonido enfrente de l, pero si padece sordera de transmisin en un odo, oir mejor por el odo defectuoso, ya que el ruido ambiental es percibido en menor medida por este odo, no interfiriendo en la percepcin del sonido del diapasn que le llega por la va sea. Prueba de Rinne: Se hace vibrar el diapasn y se mantiene enfrente del odo hasta que deja de orse, e inmediatamente, se coloca sobre la apfisis mastoidea, si el individuo padece de sordera de transmisin en ese odo, percibir el sonido del diapasn cuando se coloca sobre el hueso (Rinne negativo); si el odo es normal o tine sordera de percepcin no lo percibir (Rinne positivo)
SENTIDOS DEL GUSTO Y OLFATO FUNDAMENTO Tanto desde el punto de vista funcional como estructural, el gusto y el olfato tienen numerosos puntos en comn. Ambos son sensibles a estmulos qumicos (quimiorreceptores) y presentan por tanto la capacidad de detectar la presencia de sustancias (iones o molculas) disueltas en el medio ambiente. Mediante el olfato se detectan compuestos qumicos en fase gaseosa, mientras que mediante la degustacin (gusto) se detectan sustancias qumicas disueltas en un medio lquido. La quimiorrecepcin constituye la base de numerosas actividades del comportamiento animal, incluida la comunicacin interindividual; tambin esta relacionada con la bsqueda y captura de alimento, la evitacin de sustancias o ambientes nocivos y los mecanismos de atraccin.
OBJETIVO En esta prctica el alumno actuara como sujeto observador y experimental simultneamente y debe concentrar la atencin en la observacin de sus propias experiencias. MATERIALES Pipetas Pasteur Pinzas Sacarosa Acido actico Cloruro de sodio Quinina Papas, manzanas y cebollas Agua destilada PROCEDIMIENTO Localizacin de los receptores gustativos Se realiza un primer lavado de la boca con agua destilada y se deposita una gota de una solucin de sacarosa al 5% sobre diferentes zonas de la lengua donde se acumulan los receptores gustativos. Anotar la intensidad con que es percibido el sabor en las distintas areas. Enjuagar bien la boca con agua y repetir la experiencia depositando por medio de una pipeta Pasteur pequeas cantidades de una disolucin de acido actico al 1% a continuacin de una solucin de cloruro de sodio al 5% y finalmente de una disolucin de quinina al 0.05% Confusin olor sabor Para su comprobacin se realiza la experiencia con trozos de cebolla, patata y manzana, entre dos compaeros, uno cierra los ojos se tapa las fosas nasales y el otro introduce con unas pinzas, en ensayos sucesivos y de forma alternada un trozo de cada alimento, pidiendo que lo identifique, a continuacin se destapa las fosa nasales y se pide que de nuevo lo identifique
Area Sacarosa Ac. Acetico ClNa Sacarosa Quinina Punta de la lengua
Parte lateral Parte posterior
DISCUSIN Y CONCLUSIONES
SEMANA 4 LA UNIN NEUROMUSCULAR BLOQUEANTES DE LA PLACA MIONEURAL
INTRODUCCIN: BASES FISIOLGICAS DE LA TRANSMISIN NEUROMUSCULAR La finalidad del impulso nervioso en la membrana axonal de la Motoneurona es la de conseguir llegar a la fibra muscular y producir la contraccin de la misma. Para ello se realiza un ciclo de transformacin del impulso elctrico en qumico. La unin neuromuscular es la zona de contacto entre la fibra nerviosa terminal y la membrana especializada de la fibra muscular. El transmisor qumico es la acetilcolina (ACh), sintetizada en la terminacin nerviosa a partir de acetil-CoA y Colina por la enzima Colina-Acetiltransferasa y almacenada en las vesculas sinpticas en forma cuntica en cantidades de 5.000 a 10.000 molculas de ACh (1 quanto). Estas vesculas se agrupan en sitios especficos de la membrana presinptica denominados zonas activas. La llegada de un potencial de accin a la terminal nerviosa va a producir la apertura de los canales de calcio sensibles al voltaje con un aumento de la concentracin de este in en esta terminal, dando como resultado la liberacin de ms de 100 quantos de ACh que en condiciones normales permite suficiente nmero de uniones con el receptor para producir la aparicin del potencial de placa motora (PPM). La cantidad de quantos liberados va a depender fundamentalmente de las vesculas disponibles para liberacin inmediata y de la concentracin de Ca ++ . La amplitud del PPM en condiciones normales es suficiente para superar el valor umbral y desencadenar el potencial de accin que puede ser transmitido a lo largo de la membrana muscular y dar lugar a la contraccin. La apertura del receptor condiciona la aparicin del fenmeno llamado del "todo o nada" del Potencial de Accin, que quiere decir que cuando un nmero de receptores suficiente est abierto simultneamente, se supera el umbral de despolarizacin de la placa motora y se desencadena el potencial de accin que se propaga al resto de la membrana muscular. A los pocos segundos la ACh es hidrolizada por la Acetilcolinesterasa en cido actico y colina OBJETIVOS: 1. Estudiar los mecanismos locales a partir de las motoneuronas que permiten al sistema nervioso cumplir con su rol regulador de la contraccin muscular.
2.- Conocer los componentes en la transmisin neuromuscular. 3.- Detallar los componentes en la inhibicin recurrente.
MATERIALES: 01 sapo espinal Equipo de diseccin Solucin de Ringer a 30C Succinilcolina (Distensil R ) Cnula de vidrio 02 ligaduras 01 jeringa de tuberculina
PROCEDIMIENTO:
1. Con un estilete destruya la porcin enceflica dejando intacta slo la mdula, a esta forma se le llama preparacin espinal o sapo espinal. 2. Como se ha destruido los fascculos ascendentes, el sapo no siente dolor 3. Disecar y exponer el nervio citico en la cara posterior de ambos muslos teniendo cuidado de no lesionar la pequea arteria que acompaa al nervio. 4. Irrigue al nervio con la solucin Ringer. 5. En una de las patas separe el nervio de la arteria y haga una vigorosa ligadura doble alrededor de toda la pata dejando libre solamente al nervio. 6. Con el carrete de estimulacin aplique estmulos de poca intensidad a los nervios citicos por separado incrementando su amplitud progresivamente hasta obtener la contraccin muscular. 7. Luego se estimula directamente al msculo gastronemio a travs de una incisin que debe practicarse en la piel. 8. Observe si en ambos casos se produce contraccin muscular. 9. Inyecte Succinilcolina (Distensil R ) 1 mL en el saco linftico dorsal del sapo. 10. Luego de unos minutos estimule ambos nervios ciaticos son el carrete de estimulacin. Observar la respuesta.
RESULTADOS Miembro inferior del sapo Respuesta a la administracin de Succinilcolina Arteria Ligada
Arteria No Ligada
DISCUSIN CONCLUSIONES
ARCO NEURAL Y REFLEJOS
INTRODUCCIN Las acciones reflejas son respuestas adaptativas mediadas por el sistema nervioso, cuya finalidad bsica es salvaguardar la integridad del individuo y preservar la especie, teniendo como base estructural el arco reflejo. Los movimientos reflejos se realizan de modo involuntario, como resultado de un estimulo especifico y su respuesta es estereotipada; cada especie posee un patrimonio reflejo.
OBJETIVO 1. Describir las caractersticas de las acciones reflejas, tanto medulares como las no medulares. 2. Conocer la importancia clnica de la correcta evaluacin de los actos reflejos dentro del examen clnico neurolgico. MATERIALES Una preparacin de sapo descerebrado. Una preparacin espinal del sapo. Un carrete de estimulacin (de Runckfort). PROCEDIMIENTO:
SAPO DESCEREBRADO 1.- Con una tijera de tamao adecuado realice un corte en la cabeza del sapo inmediatamente por detrs de los globos oculares a travs de la comisura labial del animal. Manipule al sapo teniendo cuidado con sus secreciones irritantes. 2.- Evite la salida excesiva de sangre colocando una torunda de algodn sobre la zona del corte. 3.- Observe los reflejos que presenta el animal descerebrado segn la tabla adjunta y comprela cuando el animal estaba normal y del sapo espinal. SAPO ESPINAL 1. En un sapo identifique el punto de separacin entre el crneo y la medula, con la ayuda de un estilete haga una puncin y con movimientos hacia los lados separe la mdula del tronco enceflico. 2. Luego destruya la porcin enceflica dirigiendo el estilete en direccin craneal dejando intacta solo la mdula (se dice entonces que se ha provocado un shock espinal). 3. Observe los reflejos que presenta el sapo espinal segn la tabla adjunta y comprela cuando el animal que estaba normal y el sapo descerebrado.
REFLEJO VISCERAL 1.- Haga una incisin en el abdomen del sapo y exponga con mucho cuidado una porcin del intestino. 2.- Estimule varias veces con el carrete de induccin aumentando la intensidad de la corriente. 3.-Observe la respuesta.
RESULTADOS
Normal Descerebrado Espinal Postura Movimiento espontneo Respuesta a estmulo Movimiento respiratorio Reflejo de salto Reflejo de nado Respuesta a la rotacin Resp a la postura dorsal Reflejo de arrastre
LOS FENMENOS REFLEJOS - EL ARCO REFLEJO
FUNDAMENTO: Las acciones reflejas son respuestas adaptativas mediadas por el sistema nervioso, cuya funcin bsica es la de salvaguardar al individuo y preservar la especie. En estas respuestas no interviene la conciencia. Las acciones reflejas son respuestas automticas, inconscientes a la accin de un estmulo. El substrato anatmico, la base fsica, sobre el cual se realizan los actos reflejos se llama arco reflejo
Componentes de un arco reflejo: Receptor: Es la estructura encargada de captar el estmulo (recoger la informacin). Va aferente: Lleva la informacin hacia el sistema nervioso integrador. Generalmente son dendritas. Centro nervioso integrador: Recibe y procesa la informacin y elabora la respuesta. Puede ser la mdula espinal. El tronco enceflico y an la corteza cerebral. Va eferente: Transmite las rdenes desde el centro nervioso integrador hacia los efectores, generalmente son axones. Efector: Realizan las rdenes: Msculos o glndulas.
Clases de arcos reflejos: a) Arco reflejo monosinptico: La neurona aferente hace sinapsis directamente con la neurona eferente, no hay neurona intercalar. Ejemplo: Reflejos osteotendinosos.
b) Arco reflejo polisinptico. Entre la neurona aferente y la neurona eferente se intercalan una o ms neuronas intercalares. Ejemplo: Reflejo de flexin o de defensa
Objetivo: Estudiar los mecanismos que ocurren cuando frente a un estmulo determinado se produce una respuesta refleja.
Material: a. Un martillo de reflejos. b. Una linterna oftalmolgica.
Procedimiento:
a. Reflejos de estiramiento miotticos. Con el martillo de reflejos, percuta el tendn de insercin del cuadriceps crural en la tibia de uno de sus compaeros, observe la respuesta extensora de la pierna. Trate de obtener otros reflejos de estiramiento percutiendo el tendn del biceps, triceps, el tendn de Aquiles, etc. Obtenga los siguientes reflejos: Coracobraquial, bicipital, tricipital, cubitopronador , y estilorradial. As mismo el patelar, Aquleo y flexor de los dedos del pie. Intente obtener r. de Babinski.
b. Reflejos fotomotor y consensual. Utilice una linterna oftalmolgica para obtener el reflejo pupilar . FOTO ESTIMULACIN: El sujeto experimental permanece con los ojos abiertos en un ambiente de luz normal. El estudiante observa las pupilas y calcula su dimetro en milmetros. Luego alumbra directamente cada pupila con la linterna clnica y observa su reaccin volviendo a medir nuevamente el dimetro pupilar. Finalmente hace que el sujeto experimental permanezca con los ojos abiertos en un lugar de muy poca luz, repetir el procedimiento de las mediciones. Aprovechar este paso para iluminar uno solo de los ojos y ver lo que sucede en el ojo opuesto. Las experiencias hay que hacerlas por lo menos unas cinco veces, para luego sacar conclusiones. Resultados Explicar los resultados obtenidos en cada experimento realizado. Comentar la importancia de los reflejos cuyo centro integrador est a nivel cortical( R. Cremasteriano, r. Cutneo-abdominales, r. de Babinsky) Elaborar conclusiones y recomendaciones.
REFLEJO NIVEL MEDULAR INTENSIDAD DE LA RESPUESTA (+/++++) Bceps C5 Braquiorradial C6 Trceps C7 Rotuliano L3 Aquleo S1
SEMANA 5 INHIBICIN DE LA VA INHIBITORIA RECURRENTE
INTRODUCCIN La va inhibitoria recurrente es un mecanismo de feedback negativo que mejora la resolucin espacial de la accin neuronal. Esta va provee un mecanismo que asegura que el msculo no se contraiga por mucho tiempo. A nivel del primer nodo de Ranvier del axn de la Motoneurona Alfa se desprende una rama colateral que pasa medial y dorsalmente. Es la llamada rama recurrente porque regresa en la materia gris. Esta colateral recurrente forma sinapsis con interneuronas que se encuentran en la regin ventromedial del Asta anterior (conocidas como interneuronas de Renshaw); cuyos axones se proyectan hacia las Motoneuronas como sinapsis inhibitorias. Esta va acta entonces como una inhibicin de feedback. El neurotransmisor involucrado en esta sinapsis inhibitoria es la Glicina. La ESTRICININA es un antagonista competitivo selectivo de los receptores de Glicina bloqueando la sinapsis inhibitoria de las clulas de Renshaw sobre las Motoneuronas. Este efecto trae como consecuencia el aumento de los impulsos nerviosos sucesivos generados por la Motoneurona sin control que generan contracciones que se asemejan a las convulsiones por ttanos, epilepsia, sndrome febril y eclampsia severa. Existe una contraccin sostenida entre los msculos extensores y flexores, originando espasmo muscular que puede causar la muerte por el ahogo inducido por el espasmo larngeo.
OBJETIVO: 1. Detallar los componentes en la inhibicin recurrente
MATERIALES: Un sapo 01 jeringa descartable de 1cc Sulfato de Estricnina 1/1000
PROCEDIMIENTO:
1.- Inyecte en el saco linftico dorsal de un sapo normal sin manipular (por encima de la articulacin de la cadera) 1mL de sulfato de Estricnina al 1/1000 con una jeringa descartable. 2.- Observe la reaccin del animal.
RESULTADOS INHIBICIN DE LA VA INHIBITORIA RECURRENTE Reacciones frente a la administracin de estricnina 1.- .................................................................... 2.-.. 3.-.
DISCUSIN CONCLUSIONES
SEMANA 6 SISTEMA NERVIOSO VEGETATIVO
OBJETIVOS Reconocer el equilibrio fisiolgico basal que establecen las divisiones del SNA. Evaluar la intensidad de las modificaciones que se producen con la manipulacin de la divisin parasimptica. Monitorizar al animal bajo anestesia general. MATERIALES Un conejo Pentobarbital, Pilocarpina, Atropina Jeringas de 1cc y 5 cc
PROCEDIMIENTO 1. Pesar al CONEJO para administrar pentobarbital sdico intravenoso. 2. Rasurar una de las orejas del conejo, para evidenciar la vena marginal. Aplicar xilol. 3. Una vez anestesiado tomar frecuencia cardiaca y respiratoria y auscultar ruidos hidroaereos abdominales basales. 4. Controlar durante 5 minutos el volumen de flujo salival que espontneamente cae del hocico del animal. 5. Tomar la frecuencia cardiaca, respiratoria y auscultar ruidos hidroaereos abdominales. 6. Aplicar atropina solucin 0.5 mg/ml. 7. Controlar durante 5 minutos el volumen de flujo salival que espontneamente cae del hocico del animal. 8. Tomar la frecuencia cardiaca, respiratoria y auscultar ruidos hidroaereos abdominales. 9. Anotar los resultados.
ANIMAL CONEJO SALIVACIN BASAL DIAMETRO PUPILAR BASAL RHA BASALES EVACUACIN DE HECES ADMINISTRACIN DE PILOCARPNA SALIVACIN DIAMETRO PUPILAR RHA EVACUACIN DE HECES ADMINISTRACIN DE ATROPINA SALIVACIN DIAMETRO PUPILAR RHA EVACUACIN DE HECES
SEMANA 9 DISCUSIN DE TEMA 1. Acromegalia: Fisiologa de la hormona del crecimiento: Lugar de produccin Sntesis Mecanismos de secrecin Receptores de hormona del crecimiento y mecanismos de transduccin Efectos en los rganos diana Factores de crecimiento similares a la insulina (somatomedinas): donde se producen, caractersticas de sus receptores, mecanismos de transduccin Efectos en los rganos o tejidos diana Mecanismos de regulacin: Eje hipotlamo hipfisis. Definicin de acromegalia. Epidemiologa: Per y en el mundo. Fisiopatologa de acromegalia. Causas de la enfermedad. Signos y sntomas: Es importante explicar la causa de cada uno de los signos y sntomas ms importantes. Diagnstico de enfermedad. Tratamientos. Observaciones: La presentacin durar entre 60 min y 75 min como mximo. Es obligatorio que al final de la presentacin este anexado la bibliografa y dentro de esta la revisin de mnimo 5 artculos cientficos de mximo 5 aos de antigedad. Se presentar en un CD la presentacin en power point, una monografa y los 5 artculos cientficos en formato pdf. El CD se presentar el mismo da de la exposicin, de no hacerlo se le adjudicar la nota cero en los respectivos tems.
Criterios de Evaluacin: Disertacin: Presentacin de tipo oral que demuestra la capacidad y dominio del tema del alumno (FACTOR DE EVALUACIN 0.3) Presentacin en Power Point: Ayuda audiovisual que apoya el desarrollo de los temas (FACTOR DE EVALUACIN 0.2) Inters del Tema: Es el nfasis que el expositor pone al tema hacindolo ms interesante y motivador (FACTOR DE EVALUACIN 0.2) Monografa: Desarrollo en fsico del tema tratado (FACTOR DE EVALUACIN 0.3) SEMANA 10 CURVA DE TOLERANCIA ORAL A LA GLUCOSA Y CUERPOS CETNICOS
INTRODUCCIN
Los mecanismos fisiolgicos de regulacin de la glucosa tienen por un lado a varias hormonas entre ellas las hiperglicemiantes como las catecolaminas, glucagn, hormona de crecimiento, y cortisol; y por otro lado a la insulina como hipoglicemiante por excelencia. Esta regulacin tiene muchos factores asociados tanto a su incremento como a su disminucin, siendo uno de ellos el peso del paciente. A mayor peso del paciente la resistencia a la insulina ser ms alta por lo tanto los pacientes tendrn mayores dificultades para enfrentar una carga de glucosa. El test de tolerancia a la glucosa nos ayuda a conocer cmo reacciona el organismo frente a esa carga.
Por otro lado el proceso de ayuno activa los mecanismos de gluconeognesis los cuales hacen posible la degradacin de los triacilgliceroles, para ser transformados en cidos grasos y glicerol, siendo este ultimo componente materia prima para la formacin de glucosa no sin antes formar en sus pasos metablicos los cuerpos cetnicos (acetoacetato, beta-hidroxibutirato, acetona), los cuales no solo se incrementarn en sangre sino que sern excretados en mayor cantidad a nivel renal.
Materiales
30 tiras reactivas para hemoglucotest. 6 glucmetros. 30 tiras reactivas de orina. 6 envases de las tiras reactivas de orina. 30 lancetas. 1 paquete de algodn.
1 frasco de 500 ml de alcohol al 70%. 1 caja de guantes talla M. 20 Beaker para toma de muestra de orina. 15 paquetes de 75 gr. de glucosa anhidra.
Maniobras experimentales
1. Para el inicio de la prctica cada alumno deber traer en un papel cuadriculado el valor de su peso, talla y su ndice de masa corporal (IMC = Peso/Talla2). 2. Los alumnos debern de ingresar a la prctica con un tiempo de ayuno de 6 horas. 3. Al ingreso a la prctica debern medir por medio de un hemoglucotest su glicemia basal, anotndola en la Tabla 1. 4. Cada alumno adems se tomar una muestra de orina en un Beaker, y se realizar la prueba de tira reactiva. Teniendo en cuenta la presencia cualitativa de glucosa y cuerpos cetnicos, anotando el valor del resultado en la Tabla 2. 5. Se tomarn los tres valores ms altos de cada grupo y se les proceder a administrar una solucin de carga oral de glucosa (75 g de glucosa anhidra) en agua en un lapso de 5 minutos. La concentracin no debe superar los 250 g/L. 6. Los alumnos escogidos sern sometidos a pruebas de hemoglucotest a 1 y 2 horas. 7. Del total de casos que resulten positivos a cuerpos cetnicos, se escogern a tres y se les administrar Glucosa Anhidra, procediendo a medir una segunda muestra de orina a las 2 horas de la primera. Anotar los resultados en el cuadro. 8. Realizar la curva. CURVA DE TOLERANCIA ORAL A LA GLUCOSA Y CUERPOS CETNICOS
RESULTADOS
Valores de glicemia. Tabla 1
Presencia de glucosuria y cuerpos cetnicos en orina. Tabla 2
Interpreta los resultados
DISCUSIN Y CONCLUSIONES
SEMANA 11 DIABETES EXPERIMENTAL
INTRODUCCIN
La diabetes mellitus es una enfermedad cuyo trastorno bsico es reside en la incapacidad de la insulina para ejercer en forma adecuada sus efectos metablicos, lo que se traduce en alteraciones del metabolismo de los hidratos de carbono, protenas y grasas.
El organismo requiere de un suministro constante de energa; sin embargo, el ser humano slo consume alimentos a determinadas horas del da. Despus de la ingesta de nutrientes, estos se almacenan por accin de la insulina y luego en el ayuno son liberados de los depsitos, por aumento del glucagn, para mantener el gasto energtico.
En el organismo, la regulacin de la homeostasis de los nutrientes es funcin de las hormonas secretadas por los islotes de Langerhans. Estos detectan las disponibilidades y necesidades de energa, y responden liberando insulina para promover el anabolismo, y el almacenamiento de sustancias nutritivas cuando abundan. Por el contrario, si se requiere energa, los islotes secretan glucagn, hormona catablica, que moviliza y distribuye las sustancias nutritivas de los depsitos.
Los islotes de Langerhans se encuentran disperso en todo el pncreas, pero especialmente en la cola. El nmero de islotes vara ampliamente entre 100 000 y 2 500 000, los que en total corresponden al 1-2% del pncreas total. Estn formados fundamentalmente por 4 clulas: alfa, beta, delta, y F, cuya disposicin insular es constante y no dispuesta al azar. Las ubicadas hacia la periferia del islote son las alfa (16%), que contienen glucagn; inmediatamente hacia el interior se encuentran las clulas delta (8,5%), que producen somatostatina; en la parte central se encuentran las clulas beta (62%), que liberan insulina. Las F, tambin llamadas PP, localizadas en la periferia de los islotes y en la parte posterior e inferior de la cabeza del pncreas secretan el polipptido pancretico.
Figura 1. Islotes de Langerhans
Insulina
La insulina humana se sintetiza a partir de precursores secuenciales: primero se forma preproinsulina, constituida por 110 aminocidos (PM 11 500), con una vida media de un minuto, luego la preproinsulina da lugar a la proinsulina (PM 9 000). En el aparato de Golgi, por accin de una enzima convertasa, la proinsulina se transforma a insulina al perder el pptido C (PM 3 000); la insulina queda constituida por las cadenas A y B, de 21 y 30 aminocidos, respectivamente y un peso molecular de 6 000. A medida que se sintetiza la hormona se une al zinc, formando hexmeros almacenados como microcristales en grnulos.
Secrecin
El principal mecanismo de liberacin de la hormona de la clula beta es la exocitosis, que involucra el desplazamiento de los grnulos a travs del citoplasma hasta la membrana celular y su posterior entrega al espacio extracelular. El trfico de estas vesculas se explica por la accin de unas protenas de la familia de los Rab y su especificidad por la teora del los SNARE.
En el mecanismo de secrecin de la hormona participan diversos compuestos: nutrientes (glucosa, aminocidos), hormonas (GIP: polipptido gastrointestinal, GLP-1: pptido glucagn smil) y neurotransmisores (acetilcolina, colecistoquinina). A cada grupo de estmulos le corresponde un mecanismo receptor especfico; en el caso de los nutrientes lo ms probable es que sea una enzima del metabolismo de la glucosa, que al aumentar los cofactores reducidos NADH y NADPH, forman ATP. Para las hormonas sera el sistema adenil ciclasa que eleva los niveles de AMPc y para los neurotransmisores la fosfolipasa C, que da origen a diacilglicerol (DAG) y a inositoltrifosfato (IP3).
Los estmulos liberan insulina, inducen una despolarizacin de la membrana de la clula beta, la que se efecta en etapas:
Reduccin del eflujo celular de K+ con inicio de una lenta despolarizacin Apertura de los canales de Na+ con acumulacin de Na+ intracelular, reduccin de la salida de Ca2+ y una marcada disminucin de la relacin K+/Na+ Apertura de los canales de voltaje sensible a Ca2+, cuando la diferencia de potencial de membrana llega a 0 mV, lo que produce un aumento intracelular de Ca2+ y secrecin de insulina. Repolarizacin de la membrana (etapa final del proceso) la que se lleva a cabo por dos mecanismos: se abren los canales de K+ (ATP y Ca2+ sensibles) con participacin de la bomba Na+/K+. El AMPc y el IP3 favorecen la salida del Ca2+ mitocondrial hacia el citosol. Posteriormente, el grnulo de insulina se pone en contacto con la membrana celular y se produce la fusin.
El principal secretagogo de la insulina (sntesis y secrecin) es la concentracin de glucosa extracelular, la magnitud de la respuesta de la clula beta depende de la intensidad y duracin del estmulo de la glucosa. Adems, este hexmero tiene una accin permisiva para otros secretagogos.
En condiciones de normalidad existe una insulinemia basal de 5-12,5 uU/mL como respuesta a bajas concentraciones de glucosa circulante (60-100 mg/dL); con glicemias entre 100 y 150 mg/dL, el pncreas libera insulina en forma monofsica, rpida y breve, alcanzando hasta 100uUmL. Con niveles de glucosa de 150 a 200 mg/dL, la secrecin es bifsica, curva que se pone en evidencia con el estmulo de glucosa endovenosa; la primera fase rpida y breve, se debe a la interaccin entre glucosa y su trasportador, entregndose la insulina almacenada en los grnulos. La segunda fase, caracterizada por una elevacin lenta y mantenida de la insulinemia, se debera a la estimulacin intracelular provocada por los productos del metabolismo de la glucosa y estara relacionada con la biosntesis de la hormona.
Figura 2. Secrecin de insulina
Mecanismo de accin
La insulina es una de las principales hormonas reguladoras del metabolismo celular; a corto plazo, induce modificaciones en la actividad de enzimas y transportadores de membrana y, a largo plazo, provoca cambios en la sntesis de mltiples factores de naturaleza proteica.
Una vez entregada la insulina a la circulacin, sta acta en los tejidos perifricos, de naturaleza glicoproteica y estructura heterotetramrica. Estos se sintetizan como un precursor o pro-receptor, el que es glicosilado, formando dos unidades alfa (125-135 kD) que se encuentran ubicadas en la cara externa de la membrana celular y hacia el interior del citoplasma. El receptor de insulina es una tirosina quinasa, regulada por la propia hormona. Cuando se une a la insulina la subunidad alfa, se estimula la fosforilacin de los aminocidos tirosina, glicina y lisina de la subunidad beta; el ATP acta como donador de fosfato. Posteriormente ocurre la autofosforilacin del receptor, la que se produce a lo menos en cinco tirosinas de la porcin intracelular de la subunidad beta. La actividad tirosina-quinasa es esencial para las acciones insulnicas.
Los principales sustratos intracelulares de naturaleza proteica que participan en la transmisin de la seal insulnica son los llamados IRS (insulin receptor sustrate), molculas que son rpidamente fosforiladas despus de la activacin del receptor, participando y amplificando la seal. Luego se activan enzimas citoplasmticas, entre otras la fosfatidilinositol-3-quinasa (PIP3K), la que al fosforilarse activa finalmente a los transportadores de glucosa (cascada de fosforilaciones), los que por traslocacin permiten la entrada de glucosa desde el extracelular al intracelular.
El transporte de glucosa al interior de la clula se realiza mediante el proceso denominado difusin facilitada, que consiste en la traslocacin selectiva de una molcula a travs de la membrana celular en contra de su gradiente, y con la intervencin de una estructura glicoproteica conocida como trasportador GLUT. Como ltima etapa, para terminar la transmisin de la seal, se inactiva el receptor por un mecanismo de desfosforilacin, proceso en el que participa la protentirosinafosfatasa 1B.
18 ratas de 200 a 300 gramos de peso. 18 jaulas metablicas. 1 kg de aloxano. 1 caja de guantes talla M. 60 lancetas. 18 Beakers para toma de muestra de orina.
60 tiras reactivas para hemoglucotest. 6 glucmetros. 1 frasco mpula con 10 ml con 1 000 unidades de insulina humana isfana. 18 jeringas de tuberculina. 36 tiras reactivas de orina. 6 envases de las tiras reactivas de orina. 1 paquete de algodn. 1 frasco de 500 ml de alcohol al 70%.
Preparacin de los animales de experimentacin
Las ratas previo a la administracin de los frmacos, deben permanecer por 48 horas en ayunas; controlando su peso, glicemia y cuerpos cetnicos basales. Posterior al ayuno se realizan nuevamente estos controles. Antes de la prctica (2 horas) se debe hidratar a los animales (va cnula oral) con agua corriente.
Rata A sirve de control. Rata B se le administrar 48 horas antes de la prctica, una dosis de aloxano 200 mg/kg intraperitoneal. Rata C se le administrara 100 mg/kg de floricina dos horas previa a la prctica.
Procedimiento
1. Colocar los animales en las jaulas metablicas y colocar los frascos para recolectar la orina.
2. Observar las caractersticas fsicas y comportamiento de los animales.
3. Determinar en los tres animales la glucosa en sangre. La muestra se obtiene por medio de un corte en la cola tratando de exprimir hacia abajo y recolectar una gota de sangre haciendo caer sta directamente sobre la cinta
HaemoGlucotest, esperar por un minuto, limpiar y dar lectura a la cinta comparndola con el tubo y luego mediante el glucmetro.
4. Recolectar por separado las muestras de orina de las jaulas metablicas para el dosaje de glucosa. Introducir en cada frasco una glucocinta de aproximadamente 5 cm empaparla y transcurrido 1 minuto proceder a la lectura.
5. Para determinar los cuerpos cetnicos, sumergir la cinta de Uri-test en la orina recolectada, transcurrido 1 minuto proceder a la lectura.
6. Administrar Insulina 1 U.L por cada 100 g de peso va IP. Luego de 1 hora repetir los controles anteriores.
DIABETES EXPERIMENTAL
RESULTADOS
DISCUSIN Y CONCLUSIONES
SEMANA 12 DISCUSIN DE TEMA 1. Incretinas: Fisiologa de las Incretinas: Lugar de produccin Sntesis Mecanismos de secrecin Receptores y mecanismos de transduccin Efectos en los rganos diana - Mecanismos de regulacin. Definicin del efecto Incretina. GIP: Receptor del GIP - Mecanismos de accin - Inactivacin del GIP GIP y sus efectos en el adipocito. GLP-1: Receptor del GLP-1 - Mecanismos de accin - GLP-1 y SNC - GLP-1 y pncreas. Inhibidores de la DDP-4 Diabetes Mellitus e Incretinas.
Observaciones: La presentacin durar entre 30 min y 45 min como mximo. Es obligatorio que al final de la presentacin este anexado la bibliografa y dentro de esta la revisin de mnimo 5 artculos cientficos de mximo 5 aos de antigedad. Se presentar en un CD la presentacin en power point, una monografa y los 5 artculos cientficos en formato pdf. El CD se presentar el mismo da de la exposicin, de no hacerlo se le adjudicar la nota cero en los respectivos tems.
Criterios de Evaluacin: Disertacin: Presentacin de tipo oral que demuestra la capacidad y dominio del tema del alumno (FACTOR DE EVALUACIN 0.3) Presentacin en Power Point: Ayuda audiovisual que apoya el desarrollo de los temas (FACTOR DE EVALUACIN 0.2) Inters del Tema: Es el nfasis que el expositor pone al tema hacindolo ms interesante y motivador (FACTOR DE EVALUACIN 0.2) Monografa: Desarrollo en fsico del tema tratado (FACTOR DE EVALUACIN 0.3)
2. Diabetes gestacional: Definicin de Diabetes gestacional. Epidemiologa: Per y en el mundo. Cambios fisiolgicos normales en el embarazo. Factores de riesgo para diabetes gestacional. Sustancias implicadas en la resistencia a la insulina. Alteraciones celulares y resistencia a la insulina. Complicaciones materno-fetales asociadas con la diabetes mellitus gestacional: Explicar la fisiopatologa de dichas complicaciones. Diagnstico. Seguimiento. Tratamiento.
Observaciones: La presentacin durar entre 30 min y 45 min como mximo. Es obligatorio que al final de la presentacin este anexado la bibliografa y dentro de esta la revisin de mnimo 5 artculos cientficos de mximo 5 aos de antigedad. Se presentar en un CD la presentacin en power point, una monografa y los 5 artculos cientficos en formato pdf. El CD se presentar el mismo da de la exposicin, de no hacerlo se le adjudicar la nota cero en los respectivos tems.
Criterios de Evaluacin: Disertacin: Presentacin de tipo oral que demuestra la capacidad y dominio del tema del alumno (FACTOR DE EVALUACIN 0.3) Presentacin en Power Point: Ayuda audiovisual que apoya el desarrollo de los temas (FACTOR DE EVALUACIN 0.2) Inters del Tema: Es el nfasis que el expositor pone al tema hacindolo ms interesante y motivador (FACTOR DE EVALUACIN 0.2) Monografa: Desarrollo en fsico del tema tratado (FACTOR DE EVALUACIN 0.3)
SEMANA 13 DISCUSIN DE TEMA
1. Pubertad Definicin de pubertad Cambios hormonales: Eje hipotlamo - hipfisis - gnada Cambios somticos. Crecimiento puberal. Cambios de los caracteres sexuales secundarios. Factores que afectan la edad de inicio de la pubertad. Los mismos puntos se desarrollaran tanto para pubertad masculina como femenina.
Observaciones: La presentacin durar entre 30 min y 45 min como mximo. Es obligatorio que al final de la presentacin este anexado la bibliografa y dentro de esta la revisin de mnimo 5 artculos cientficos de mximo 5 aos de antigedad. Se presentar en un CD la presentacin en power point, una monografa y los 5 artculos cientficos en formato pdf. El CD se presentar el mismo da de la exposicin, de no hacerlo se le adjudicar la nota cero en los respectivos tems.
Criterios de Evaluacin: Disertacin: Presentacin de tipo oral que demuestra la capacidad y dominio del tema del alumno (FACTOR DE EVALUACIN 0.3) Presentacin en Power Point: Ayuda audiovisual que apoya el desarrollo de los temas (FACTOR DE EVALUACIN 0.2) Inters del Tema: Es el nfasis que el expositor pone al tema hacindolo ms interesante y motivador (FACTOR DE EVALUACIN 0.2) Monografa: Desarrollo en fsico del tema tratado (FACTOR DE EVALUACIN 0.3)
2. Climaterio y Menopausia Definicin de Climaterio y Menopausia. Epidemiologa: Per y en el mundo. Fisiologa el ciclo menstrual normal. Climaterio: Endocrinologa del climaterio. Efectos del hipoestrogenismo. Menopausia Posmenopausia. Cuadro Clnico: Sntomas vasomotores. Sntomas genitourinarios. Sntomas cardiovasculares. Sntomas osteomusculares. Sntomas neuropsiquitaricos. Modificaciones en la piel. Tratamiento.
Observaciones: La presentacin durar entre 30 min y 45 min como mximo. Es obligatorio que al final de la presentacin este anexado la bibliografa y dentro de esta la revisin de mnimo 5 artculos cientficos de mximo 5 aos de antigedad. Se presentar en un CD la presentacin en power point, una monografa y los 5 artculos cientficos en formato pdf. El CD se presentar el mismo da de la exposicin, de no hacerlo se le adjudicar la nota cero en los respectivos tems.
Criterios de Evaluacin: Disertacin: Presentacin de tipo oral que demuestra la capacidad y dominio del tema del alumno (FACTOR DE EVALUACIN 0.3) Presentacin en Power Point: Ayuda audiovisual que apoya el desarrollo de los temas (FACTOR DE EVALUACIN 0.2) Inters del Tema: Es el nfasis que el expositor pone al tema hacindolo ms interesante y motivador (FACTOR DE EVALUACIN 0.2) Monografa: Desarrollo en fsico del tema tratado (FACTOR DE EVALUACIN 0.3)
SEMANA 14 SISTEMA DE RGANOS AISLADOS Y REGULACIN HORMONAL OBJETIVOS: Aprendizaje y manejo de la diseccin de los animales, preparacin de soluciones fisiolgicas, utilizacin de balanzas y utilizacin del sistema de rganos aislados. Tomar datos y fijarlos dando as modelo experimental el cual ser discutido y tal vez modificado para poder realizar otros experimentos basados en las inquietudes cientficas de los alumnos.
INTRODUCCIN: Para el presente experimento ser bueno recordar algunas caractersticas del msculo liso uterino, el cual se caracteriza por tener un grado de actividad elctrica y contrctil espontnea; el tero tiene inervacin parasimptico y simptica, la primera es mediante los nervios pelvianos y la ltima a travs de las fibras postganglionares de los ganglios mesentricos inferiores e hipogstricos. El msculo liso uterino es susceptible a la influencia endocrina en especial al de los estrgenos y la oxitocina, por consiguiente la actividad espontnea y la respuesta a los estmulos neurolgicos hormonales y farmacolgicos aumentan en forma pronunciada en la pubertad y ms tarde vara con el ciclo ovulatorio. OXITOCINA: Es una hormona secretada por la hipfisis posterior, tiene efectos sobre la contraccin del msculo liso uterino, de aqu sus importancia durante el parto, esta hormona induce la contraccin del msculo liso cuando la membrana de la clula muscular uterina contiene suficientes receptores de excitacin, tambin cumple un papel en la lactancia donde acta contrayendo las clulas mioepiteliales que rodean las paredes externas de los alvolos y en este momento la succin del nio es eficaz obteniendo leche. RECEPTOR DE OXITOCINA: Justo antes del principio de la labor de parto, el miometrio uterino es extremadamente sensible a la oxitocina por el incremento en el nmero de sus receptores.
MATERIALES: Dos ratas hembra adulta por cada grupo. Solucin de Smith y Mc Closky. Oxitocina en ampollas. Adrenalina en ampollas. Acetilcolina en ampollas. Estrgenos en tabletas. Equipo de rgano aislado. Sevorane.
PROCEDIMIENTO Sacrifique a una rata hembra adulta no preada. Extraiga cuidadosamente el tero, mantenindolo en una placa Petri con una solucin de Smith y Mc Closky (solucin isotnica para tero) a una temperatura de alrededor de 38C. Coloque un cuerno uterino o un segmento del mismo aproximadamente 2 cm. Dentro de la copa de bao que contiene la solucin de Smith y Mc Closky a la temperatura constante de 38C y con oxigenacin mediante burbujeo permanente de aire, de tal manera que uno de sus extremos quede fijo a la base de la copa y el otro al transductor que transmitir la actividad motriz (contracciones y relajaciones) del rgano al sistema de captura de datos que en este caso es un registrador digital o la pantalla de un monitor de computadora para obtener los registros grficos). Despus de unos 10 a 15 minutos de estabilizacin del rgano, tome el registro basal de las contracciones uterinas: Altura o intensidad (mm) y frecuencia (contracciones/minuto). Luego proceda a registrar la actividad uterina bajo la accin sucesiva de cada una de las siguientes sustancias que sern aadidas al bao de la copa por instilacin: Acetilcolina, solucin 0.1 mg/mL; dosis: 1g/mL de bao. Adrenalina, solucin 0.1 mg/mL; dosis: 1g/mL de bao. Oxitocina, solucin 5 U.I./mL; dosis: 0.04g/mL de bao. Despus de registrar durante unos 5 minutos el efecto de cada droga, realice el lavado del rgano por tres veces, para lo cual drenar la solucin de la copa y la volver a llenar con un nuevo volumen de la solucin de Smith y Mc Closky. Antes de aadir la siguiente droga, espere que el rgano se estabilice y recupere su nivl basal.
NOTA: La solucin de Smith y Mc Closky tiene la siguiente composicin: NaCl (9.20 g), KCl (0.42 g), CaCl 2 (0.12 g), NaHCO 3 (0.50 g), NaH 2 PO 4 (0.08 g), glucosa (0.50 g), agua destilada (c.s.p.1000mL).