PRCTICA # 5B

SIEMBRA Y ESTUDIO DE HONGOS

OBJETIVOS:

Manejar las tcnicas bsicas para el cultivo e identificacin de hongos.

Aplicar las tcnicas de tincin adecuadas para el estudio microscpico de hongos.

Aplicar adecuadamente los trminos microbiolgicos para hacer la descripcin colonial y microscpicade este
tipo de microorganismos.

Reconocer y describir las caractersticas morfolgicas y estructurales de hongos.
INTRODUCCIN:
Los hon gos s o n c l ul as euc ar i t i c as ( c on n c l e o y d ems o r g nel os membr a nos o
s : apa r at o de Gol gi , mitocondrias, retculo endoplasmtico, etc.), carecen de clorofila (son acloroflicos,
no realizan la fotosntesis, por l o que son hetertrofos y necesi tan un aporte de carbono y
ni trgeno fi j ado orgni camente), ti enen una paredcelular rgida bien definida de quitina; normalmente
son inmviles, no presentan tallos, ni races, ni hojas, ni
vasosc on duc t o r es c omo pr es e nt an l as pl an t as . Pu eden s er uni c e l ul ar es o mul t i c el
ul ar es y mi c r os c pi c as omacroscpi cas. Se reproducen asexual o sexual mente. Al
carecer de cl orofi l a, deben nutri rse a expensas demateria orgnica.En l a i ndus t r i a
f ar mac ut i c a c ada v e z t i ene n ms i mpo r t anc i a , y a que a p ar t i r de l os hong os s e
f abr i c an anti bi ti cos, drogas, toni fi cantes, etc. Son responsabl es de l a desi ntegraci n de l a
materi a orgni ca, y ensi mbi osi s con determi nados rbol es producen un mayor creci mi ento
de estos. Tambi n son causantes
dede t er mi nadas en f er med ades en l as pl a nt as , ( c o n de t er i or o de c os ec has ) , en a
ni mal es y human os . Po r c ons i gui e nt e , l os hon gos es t n nt i mamen t e r el ac i onado
s c on el s e r humano, r es u l t an do b enef ac t o r es y perjudiciales para la vida.Los hongos se
nutren de materi a vegetal vi va o muerta. Segn sea el substrato en el que se encuentren
sedividen en: Micorrzicos, Parsitos y Saprfitos.
o
Hongos Mi corri ci cos: Defi ne una rel aci n si mbi ti ca entre l as hi fas de ci ertos hongos y l as
races de l asplantas.
o
Hongos Saprfitos: Viven sobre materia orgnica en descomposicin, es decir sobre materia muerta,
(restosorgni cos de l a de pl antas y ani mal es que conti ene el suel o, partes muertas de l a
madera de un rbol oexcrementos de animales.)
o
Hongos Parsitos: Se alojan sobre algn ser vivo que los hospede, viviendo a expensas de ste sin
ofrecerleningn beneficio a cambio.Los hongos tienen habitats muy diversos , algunos son acuticos viviendo
principalmente en agua dulce , perotambi n se conocen unos cuantos mari nos ; l a mayora son
terrestres y habi tan en el suel o , sobre materi aorgni ca muerta (saprofi tos ) desempeando
una acti vi dad cruci al en l a mi neral i zaci n del carbono orgni co
,o t r os muc hos s on par s i t os d e v eg et al es , oc as i onan do l a ma y o r a de l as en f e r
med ades s i gni f i c at i v as econmicamente de plantas cultivadas , algunos son parasito de animales
incluyendo el hombre.Al cuerpo de lo hongos se les denomina talo y este puede ser unicelular , de forma
amiboideo u ovoide , ejemplo, las levaduras , o bien pueden ser pluricelulares con aspecto filamentoso ,
esponjoso o carnoso , a los filamentosse les conoce como mohos como ejemplo de los carnosos se tiene a las
setas y championes.Al gunos hongos presentan di morfi smo, es deci r baj o ci ertas ci rcunstanci as
ambi ental es se desarrol l an comol evaduras, en tanto que cuando se cambi a l a temperatura o
l a concentraci n o ti po de al gn nutri ente, sedesarrollan en forma filamentosa.En l as l evaduras
el tal o uni cel ul ar desempea l as funci ones vegetati vas reproducti vas, estas
se reproducenasexualmente por biparticin o por gemacin y en la reproduccin sexual dos clulas
levaduriformes se unen ycomo resultado forman ascosporas en algunas levaduras la gema o brote formado
queda adherido a la clulamadre, l os brotes sucesi vos dan l ugar a l a formaci n de un tal o de
transi ci n ( ni -pl uri cel ul ar ) denomi nadopseudomicelio.La mayora de los hongos tienen aspecto
filamentoso , a los filamentosos individuales se les denomina fas y alconjunto de hifas micelio , este por su
posicin puede ser profundo y areo , el primero se encuentra sumergido
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en el s us t r at o des empe ando l as f unc i ones de abs o r c i n y s os t n , t ambi n s e
l e c onoc e c omo mi c el i o vegetati vo . el mi cel i o areo emerge del sustrato donde
se desarrol l a , si endo este el que da l ugar al as hi fas ocuerpos fructferos formadoras de esporas
por lo que tambin se le conoce como micelio reproductivo en cadaespecie de hongo las hifas vegetativas ,
crecen , se ramifican y entretejen en forma mas o menos constante , loque determina la formacin
de colonias con caractersticas tpicas de la especie , por otra parte algunos hongosrizoides , haustorios ,
estolones y apresorios , en algunos otros hongos la hifas se agrupan y retuercen formandof i br as gr ues as
( f u n c ul os y r i z omo r f os ) o un mi c el i o c ompac t o y ap r et a do ( pl ec t enqui ma ) l as
hi f as reproducti vas pueden permanecer di ferenci adas ( espori angoforos , coni di oforos ) ,
al i gual que l as hi fasvegetativas las reproductivas se pueden agrupar en una estructura especializada
llamada cuerpo fructfero : enestos , la agrupacin de hifas puede quedar directamente expuesta al medio (
coremio ) o protegida dentro de unreceptcul o o contenedor ( pi cni dos , esporodoqui os ) o formar
parte de un cuerpo al tamente di ferenci ado( ascocarpos y basidiocarpos ).Cuando se compara a los
hongos con las bacterias , en general estos tienen requerimientos nutricionales muysimples, pero su
desarrollo es mas lento , por lo que requieren mayor tiempo de incubacin para su cultivo , ladi versi dad
mas notabl e l a presentan en sus propi edades morfol gi cas y en sus ci cl os sexual es si endo
estascaractersti cas l os cri teri os que se empl ean en l a i denti fi caci n y cl asi fi caci n de este
grupo l as caract ersti casestructural es i ncl uyen : ti po de tal o , morfol oga mi croscpi ca del
mi cel i o tanto areo como profundo . ti po dehifas diferenciacin y disposicin o agrupacin de las
mismas tipo de hifas reproductivas asexuales , estructura ymodo de formacin del cuerpo fructfero sexual ,
tipo de espora ( forma , tamao , aspecto externo , agrupacin ,tabi caci on , col or , movi l i dad , ti po y
numero de fl agel os ); compoci si on de l a pared cel ul ar , adems , eval uar otras
caractersti cas fi si ol gi cas y reacci ones metabl i cas especi al mente sobre azucares , de este
modo , el estudio de los hongos implica el examen microscpico , la observacin del aspecto macroscopico
de sus coloniasy la determinacin de sus propiedades fisiolgicas , especialmente su actividad frente a sus
diferentes azucares .Examen mi croscopi o , por l o regul ar , l os hongos se exami nan en
preparaci ones hmedas , para tomar unamuestra del micelio partir de un cultivo puro o de un tejido
enfermo , se utilizan asas rgidas y ligeramente planas ,se pueden emplear un trozo de cinta adhesiva
transparente ligeramente adherida al asa o un buen par de pinzas ,esta preparacin debe hacerse con mucho
cuidado para evitar que las esporas y otras estructuras se destruyan ,lo que se evita tomando un trozo de agar
con el desarrollo del hongo , la muestra se coloca en un portaobjetos ,s e c al i ent a l i ger ament e pa r a
di f und i r el a gar , s e c ol oc a u na g ot a de a z ul de l ac t o f enol y s e t apa c on
un cubreobj etos , exami nndose con l os obj eti vos de 10x y 40x , l a observaci n de hongos
tambi n se faci l i taagregando solucin de hidrxido de potasio del 10 al 20 % , esta tiene la propiedad
de aclararlos hacindose mastransparentes , quizs la preparaciones mas adecuadas resultan cuando ala
potasa o a una solucin salina se leagrega una pequea cantidad de eosina diluida , el examen microscpico
de las levaduras se facilita agregandoyodo a la preparacin hmeda , con lo que los grnulos de almidn se
tien de azul.En e l ai s l ami e nt o y c ul t i v o de l a ma y o r a de l os hongos
( pat genos o s a pr o f i t os ) s e apr o v ec han c i e r t as caractersti cas especi al es de l os
hongos, tal es como, su tol eranci a al ph aci do, su preferenci a por medi os decultivo con gran
cantidad de azcar fermentable, su resistencia a la penicilina y estreptomicina permite usar estosantibiticos,
los que al ser agregados a los medios de cultivo, reducen el numero de bacterias contaminantes.En
l a preparaci n de medi os de cul ti vos, l os mi col ogos, uti l i zan frecuenci as mezcl as de
vegetal es (agar-papa,agar-harina de maz, etc...) y otras substancias naturalesPa r a es t udi a r a l os
ho ngos s e di s pone de dos t i p os es p ec i al es de c ul t i v os ,
el c ul t i v o d e po r t a obj et os o microcultivo y el cultivo en cajas de petriLos microcultivos se pueden
observar directamente da a da, lo que permite hacer el seguimiento del desarrollodel hongo en estudio.Los
cul ti vos en pl aca se obti enen sembrando por pi cadura, el centro de l as caj as que conti enen
di ferentesmedios, a simple vista .el aspecto de las colonias es a veces tan caracterstico, que permite
identificar enseguidael tipo de hongo.
NVESTIGACIN:
H O N G O C A R C T E
R S T I C A S I M P O R
T A N C I A
Rhizopus
H o n g o f i l a m e n t o s o q u e p r e s e n t a esporangiforos sin
ramificar (de hasta 2 mm x20 m), de color pardo oscuro que nacen de
unnudo de r i z oi des b i en des a r r o l l ados . Es t n c a r a c t e r i z a d o s p o r u n mi c e l i o a
s e p t a d o , c e n o c t i c o , c o n s e p t o s e n l a b a s e d e l a s Son l os c aus a nt es
de l moh o ne gr o del pan. Las esporas de estos hongos
no sonabu ndan t es e n el ai r e l i b r e, aun que s ufrecuencia aumenta en lugares donde
hayhumedad y se acumula vegetacin muerta.La exposicin a concentraciones elevadas
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e s t r u c t u r a s r e p r o d u c t o r a s o s e p t o s secundari os. El nombre del
grupo provi ene del a p r e s e n c i a e n p a r t e d e s u c i c l o d e u n a zigospora
caracterstica. Pero en todo el grupot ambi n es mu y i mpo r t a nt e l a r ep r oduc c i n asexual,
incluso algunos sistemas clasificacinde p ar t es del g r up o, es t n bas a dos e n
es t o. C o l o n i a s d e c r e c i m i e n t o r p i d o ( c u b r e n prcticamente toda la superficie de
la placa entres das a 25 C) de aspecto consi stente, condenso mi cel i o
areo, al godonosas, al pri nci pi obl ancas, despus gri s oscuras (mi cel i o roj i zo, grisceo o
marrn). Se reconoce fcilmente por s u s e s p o l o n e s h i a l i n o s o p a r d u z c o s , s u s rizoides
numerosos y pardos y sus esporangiosnegros y lustrosos (brillantes).de esporangi osporas de
Rhizopus
s e h a descri to como causa de al veol i ti s
al rgi cae x t r n s e c a ( p u l m n d e s e r r a d o r ) e n s e r r e r as s uec as . Se ha obs e
r v ado una p e q u e a p r o p o r c i n d e p a c i e n t e s c o n reacti vi dad cutnea a
Rhizopus stolonifer
.Puede s er un pat geno opo r t un i s t a enp e r s o n a s i n mu n o s u p r i mi d a s y s e h a n d
escri to casos de mi cosi s ri nocerebral esen diabticos.
Alternaria
E l g n e r o
Alternaria
c o n t i n e e s p e c i e s cosmopol i tas que se encuentran en un
ampl i or a n g o d e m a t e r i a l e s y p r o d u c t o s . C o m o s a p r o b i a s p u e d e n d e t e
r i o r a r a l i me n t o s y f o r r a j e s , p r o d u c i e n d o c o m p u e s t o s bi ol g
i camente acti vos tal como mi cotoxi nas. Como patgenas reducen el rendimiento de
lasc o s e c h a s o a f e c t a n a l o s v e g e t a l e s almacenadosLas
caractersticas del crecimiento
constituyenuno de l os c r i t er i os pa r a l a c l as i f i c ac i n. El m i c e l i o a r e o e s g r i s v e r
d o s o c o n r e v e r s o negro parduzco. Muchas cepas de
A. infectoria
f or man es c as os c oni di os , t i enen un mi c el i o a l g o d o n o s o y e l r e v e r s o d e l a
c o l o n i a e s o b s c u r o e n e l c e n t r o r o d e a d o d e u n a n i l l o anaranjado plidoCausa
l a punta negra. Es necesari a unai d e n t i f i c a c i n p r e c i s a d e l a s e s p e c i e s porque
cada nombre entraa un conj untode caractersti cas ( preferenci as para el crecimiento,
patogenicidad, produccin deme t abol i t os s ec unda r i os ) qu e pe r mi t en predecir el comportamiento
del hongo. EnCzapek- Levadura
A. al ternata
y
A.infectoria
p r oduc en c o l oni as de t amao s i m i l a r ( 5 6 - 6 3 mm d e d i me t r o
e n 1 s ema na a 27 C) , c ha t as y l i ge r ame nt e algodonosas.
Phialophora
En el aga r d e l a de x t r os a de Sa bour aud, l as colonias son de crecimiento lento, inicialmenteen
forma de cpul a, ms adel ante l l egando aser planas, ante-como y olivaceous a negro
encol or. Mi croscpi co, l as cul turas demuestran atipo tpico de
Phialophora
ontogeny conidial conlos phialides bien formados, frasco-formados
oel pti cos que ti enen extensamente seal ar por m e d i o d e l u c e s d i s t i n t i v o , c
o l l a r e t t e s pi gmentados. Los coni di os son el i psoi dal es, av ec es l l ega ndo a s e r
t r unc a dos e n l a bas e , hyaline, sobre todo 3.0-5.0 x 1.5-3.0 um, pero aveces el l l egar a ser ms
grandes cuando sonviejos.El solo-celled phialoconidia se produce en(el ms j oven en l a base) l a
sucesi n y el agregado basi petal de cabezas fangosasen los pices del phialide.
GeotrichumCandidium
Car ac t e r s t i c as mi c r os c p i c as : Se obs e r v an Arthroconidia y los hyphae verdaderos
gruesos.B l a s t o c o n i d i a , l o s c o n i d i o p h o r e s y l o s pseudohyphae estn au
sentes. Arthroconi di a( m 6 - 1 2 x 3 -
6 ) e s u n i c e l u l a r , e n c a d e n a s , h y a l i ne , y r es u l t ad o de l a f r a gmen t ac i n de undiff
erentiated los hyphae por la fisin a
travsd e t a b i q u e s d o b l e s . S o n c u a l q u i e r rectangul ares en
forma o redondeados en l osextremos que se asemejan a la forma del barril.La formacin consecutiva del
arthroconidia y
laa u s e n c i a d e l a s c l u l a s v a c a s q u e h a c e n f r a g m e n t o s p a r a l a n z a r e l
a r t h r o c o n i d i a (clulas del disjunctor) son tpicas.
Geotrichum
es una l evadura encontradamundi al en suel o, agua, ai re, y l as aguasr es i dual es , as c omo
en l as pl an t as , l os cereales, y los productos lcteos. Tambinse encuentra en flora humana normal y
sea s l a d e l e s p u t o y d e l a s h e c e s . L a s t e n s i o n e s d e
Geotrichum
producenrpi damente el creci mi ento, bl anco, seco,pol v or i e nt o a l as c ol o ni as al go donos a
s , asemejndose al cristal de tierra. Cuandoest disturbada en la superficie, la coloniase convierte levadura-
como o fangoso. Lat emper at ur a pt i ma de l c r ec i mi e nt o es 25C. La mayora fi l tra no crece
en todosni no crece dbil en 37C.
Penicillium
el rgano especi al de reproducci n asexuada
Penicillium notatum
es el hongo del que se
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TABLA 3: PREPARACIONES PERMANENTES DE MICROCULTIVOS:DESARROLLO DE LOS HONGOS En
microcultivos (CARACTERSTICAS MACROSCPICAS)Algodonoso laxo con puntas negras; blanco lanoso.Algodonoso laxo,
amarillo al centro, blanco con puntos negros en las puntas.Algodonoso laxo aterciopelado, verde.Aterciopelado
verdeLanoso blanco; algodonoso compacto negro.Aterciopelado verde; algodonoso compacto amarillento.Amarillento
algodonoso laxo.
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DISCUSIN DE RESULTADOS:

Primero se prepararon los medios correspondientes para sembrar los hongos ya fuera en cajas petri o paramicrocultivos
para despus de que estos ya estuvieran listos se procediera a sembrar.

Se observaron las caractersticas de los mohos que haban contaminado tanto a cultivos como a frutas, pan,queso, etc.
Estas se describen en la primera tabla donde se observan las caractersticas visuales quepermiten saber que se
encuentran contaminados. As mismo, se realizaron preparaciones en fresco paraobservar sus caractersticas
microscpicas, que no se lograron observar muy claramente debido a que losmohos que se intentaban observar se
juntaban con restos de la comida y se difundan entre si sin permitir observar claramente las caractersticas de los
mohos como se muestra en los dibujos.

Se realiz la siguiente sesin y se cultivaron los hongos para despus observar sus caractersticas tantomacroscpicas
como microscpicas, que se pueden apreciar en la segunda tabla donde se describen lascaractersticas macroscpicas de
las colonias formadas de mohos y despus se muestran los dibujos de lasobservaciones microscpicas; en estas ya se
logra apreciar ms claramente algunas de las estructuras delos mohos y se lograron reconocer algunas de las partes de
los mohos e incluso a algunas especies.

En la ltima tabla se muestra el desarrollo de los hongos que se presenta en los microcultivos una vez listosy se puede
observar como cambian sus caractersticas a comparacin de las primeras observaciones debidoa que aqu ya se
desarrollaron sin la presencia de restos de comida. Se elaboraron preparaciones y seobserv al microscopio donde se
lograron apreciar claramente las estructuras de los diversos hongoscultivados, sus caractersticas y formas.
CONCLUSIONES:
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Por medio de esta prctica se lograron apreciar distintos tipos de mohos y hongo, se manejaron las tcnicas decultivo e
identificacin de hongos para su posterior estudio y de esta forma reconocer las caractersticasestructurales
y morfolgicas de los hongos y mohos; as mismo se puede concluir que los microcultivos son lamejor tcnica de siembra
si se desea observar las estructuras de los hongos de una forma ms clara y precisa yaque esta tcnica nos permiti
tener una mayor claridad de las formas que poseen los hongos y mohos. Por lotanto es muy importante conocer todas
estas tcnicas si se desea realizar un estudio adecuado de este tipo demicroorganismos.REFERENCIAS
o
http://www.micologia.net/micologia/hongos.htm
o
http://www.smb.org.mx/Memorias_Bioener2005/Orales/P45.pdf
o
http://www.unsa.edu.ar/matbib/hongos/07htextoalternaria.pdf
o
http://es.wikipedia.org/wiki/Penicillium_notatum
o
http://www.vc.ehu.es/plfarm/01.clpur.htm
o
http://es.wikipedia.org/wiki/Histoplasma_capsulatum
o
http://es.wikipedia.org/wiki/Amanita_muscaria
o
http://www.amanitacesarea.com/pleurotus-ostreatus.html