Cromatografia Gasosa (CG) e

Cromatografia Lquida de Alta

Eficincia (CLAE)
CROMATOGRAFIA
Histrico
M. TSWEET (1903): Separao de misturas de
pigmentos vegetais em colunas recheadas com
adsorventes slidos e solventes variados.
ter de
petrleo
CaCO
3
mistura de
pigmentos
pigmentos
separados
Cromatografia =
kroma cor! " graph escrever!
(grego)
CROMATOGRAFIA
Princpio Bsico
Separao de misturas por interao di#erencial dos seus
componentes entre uma FASE ESTACIONRIA (l$%uido ou
slido) e uma FASE MVEL (l$%uido ou g&s).
CROMATOGRAFIA
Modalidades e Classificao
FM = Lquido
FM = Gs
'romatogra#ia
($%uida
Cromatografia
Gasosa (CG)
)m '* a +)
pode ser:
Slida
Lquida
'romatogra#ia
*&s,Slido ('*S)
'romatogra#ia
*&s,($%uido ('*()

Introduo

Cromatografia: mtodo de searao dos comonentes de uma

mistura! reali"ada atra#s da distri$uio destes comonentes
entre duas fases que esto em contato direto%

&ma das fases ermanece estacionria enquanto a outra move-

se atra#s dela%

'urante a assagem da fase mvel so$re a fase estacionria

os comonentes da mistura so distri$udos entre duas fases e
cada um dos comonentes seleti#amente retido ela fase
estacion(ria! resultando em migra)es diferenciais destes
comonentes%
Escie A
(*olar)
Escie +
(*ouco *olar)
,uorte ,-lido com
.ase Estacion(ria
*olar
,uerfcie da
coluna
A e + so Arrastados
or um ,ol#ente
(g(s ou lquido)
A Escie +
*assa ela
Coluna
A Escie A .ica
/etida na Coluna e ,ai
'eois de +

Entre os mtodos modernos de an(lise! a cromatografia ocua um

lugar de destaque facilidade em efetuar a searao!
identificao e quantificao das escies qumicas! so"in0a ou
em con1unto com outras tcnicas instrumentais! como
esectrofotometria I2 ou esectrometria de massas%

Exemplos de Aplicaes da Cromatografia:

*ermite searar e identificar comostos org3nicos o$tidos a artir

de e4tratos #egetais! como os alcal-ides de uso medicinal%

*ermite searar e identificar os comonentes resentes na

gasolina (an(lise da gasolina)%

*ermite identificar drogas resentes em fluidos org3nicos

(e4ame anti5doing)%

*ermite analisar e quantificar rincios ati#os em f(rmacos%

etc6

Em 7umica Am$iental: an(lise qualitati#a e quantitati#a de

comostos org3nicos oluentes na (gua (esticidas! comostos
clorados! 0er$icidas! fungicidas)% oluio do ar (aldedos!
cetonas! 0idrocar$onetos! comostos arom(ticos)% oluio do
solo%

8a ind9stria de alimentos: an(lise dos constituintes dos

alimentos: lideos e car$o0idratos! #itaminas! amino(cidos%
esquisa de oluentes em alimentos%

Classificao dos Mtodos Cromatogrficos

,o classificados de dois modos:

a) no meio fsico no qual as fases estacion(ria e m-#el entram

em contato: cromatografia em coluna e cromatografia planar;

Cromatografia em coluna: a fase estacion(ria mantida dentro

de um tu$o estreito atra#s do qual a fase m-#el forada a
assar so$ resso%

Cromatografia planar: a fase estacion(ria suortada so$re

uma suerfcie lana ou nos interstcios de um ael% neste
caso! a fase m-#el mo#e5se or ao de cailaridade ou so$ a
influncia da gra#idade%
$) nos tios de fase m-#el e estacion(ria e nos tios de equil$rio
en#ol#idos na transferncia de solutos entre as fases%

8este caso! ode5se classificar a cromatografia em:

cromatografia lquida, cromatografia gasosa e cromatografia com
fluido supercrtico.

Eluio Cromatogr(fica em Colunas:

A eluio en#ol#e a la#agem de uma escie atra#s da coluna

or adio contnua de no#os #olumes de sol#ente%
CROMATOGRAFIA GASOSA
Histrico
Prs!tm!t"
-endas de e%uipamentos e acessrios para '* nos )./
estimadas em mais de .S0 120.000.000 (3004).
#$%&
#$'&
#$(&
)CGS* r+,im!tar
CGL -ro-osta (Marti! S.!g)
Separao de cidos orgni-cos por
CGL: primeiro cro-matgrafo (Martin e
James)
Primiro /+i-am!to 0omr10ia2 (Griffi!
3 Gorg)
4t0tor -or 4!si,a, , G5s
(Marti! 6ams)
4t0tor -or Io!i7a89o m C:ama
(M0Wi22ia! 4;ar)
4t0tor -or Ca-t+ra , E2tro!s (Lo<2o0=
Li-s=.)
Co2+!as Ca-i2ars (Go2a.)

8a cromatografia gasosa (CG) gases ou su$st3ncias #olatili"(#eis so

searados $aseando5se na diferente distri$uio dos comonentes da
amostra entre uma fase estacion(ria (s-lida ou lquida) e uma fase
m-#el (gasosa)%

A amostra! atra#s de um sistema de in1eo! introdu"ida em uma

coluna contendo a fase estacion(ria%

: uso de temeraturas con#enientes no local de in1eo da amostra e da

coluna ossi$ilita a #aori"ao destas su$st3ncias! que! de acordo com
suas roriedades e as da fase estacion(ria! so retidas or temos
determinados e c0egam ; sada da coluna em temos diferentes%

: uso de um detector adequado na sada da coluna torna oss#el a

deteco e quantificao destas su$st3ncias%
'iagrama de um Cromat-grafo Gasoso
.orno da Coluna A$erto

A tcnica usada na CG a eluio feita or um flu4o de

um g(s inerte (g(s de arraste)! que atua como fase m-#el% este
g(s normalmente o <e! 8
=
ou <
=
%

A fase m-#el no interage com o analito% sua funo

transortar o analito atra#s da coluna%

<( dois tios de cromatografia gasosa: cromatografia g(s5

s-lido (G,C) e cromatografia g(s5lquido (GLC)%
Escie A
(*olar)
Escie +
(*ouco *olar)
,uorte ,-lido:
.ase Estacion(ria
*olar
,uerfcie da
coluna
A e + so Arrastados
or um ,ol#ente
(g(s <e! 8
=
)
A Escie A .ica
/etida na Coluna e ,ai
'eois de +
A Escie +
*assa ela
Coluna
Escie A
(*olar)
Escie +
(*ouco *olar)
,uorte ,-lido /eco$erto or
uma .ase Estacion(ria
Lquida *olar
,uerfcie da
coluna
A e + so Arrastados
or um ,ol#ente
(g(s <e! 8
=
)
A Escie A .ica
/etida na Coluna e ,ai
'eois de +
*rincio de .uncionamento da
*rincio de .uncionamento da
Cromatografia G(s5lquido
Cromatografia G(s5lquido

Como a escie A fica retida or mais temo

na coluna do que a escie + + c0ega
rimeiro ao detector e deois c0ega a escie
A gerado o cromatograma com os icos
equi#alentes ;s escies A e +%

Cromatograma Intensidade do sinal 4

temo de reteno das escies na coluna
cromatogr(fica%
,inal
do
'etector
>emo
to t
?
t
=
t
@
t
A
t
B
>emo de
,ada da
Escie +
>emo de
,ada da
Escie A
Cromatograma de *esticidas Clorados

Coluna Cromatogrfica

A coluna cromatogr(fica um tu$o longo! contendo

a fase estacion(ria% este tu$o ode ser de co$re! ao
ino4! alumnio! #idro! slica fundida! teflon! etc6

As colunas odem ser classificadas em rec0eadas

(analticas e rearati#as) e cailares%

Colunas cailares: feitas de slica fundida (,i:

=
) e
reco$ertas com oliimida (l(stico que resiste at
@BC
o
C)%

As colunas cailares de arede reco$erta: formada or um filme de

esessura de C!? a B m de fase estacion(ria lquida na arede interna da
coluna%

.ases estacion(rias lquidas comuns: $aseadas na regra Dsemel0ante

dissol#e semel0anteE %

Exemplo: Car$oFa4 (oli(etilenoglicol) (G C<

=
C<
=
G : G )n

Colunas rec0eadas: usam um suorte s-lido so as terras diatom(ceas! o

teflon e as esferas de #idro%

Atualmente! as colunas rec0eadas so construdas de ao ino4 ou #idro%

,o 9teis ara seara)es rearati#as! quando necess(ria uma grande

quantidade de fase estacion(ria ou ara searar gases que so ouco
retidos%
Coluna Cromatogr(fica
Colunas Cromatogr(ficas
A eficincia de uma coluna cromatogr(fica medida em termos
de n9mero de ratos te-ricos%

&m rato te-rico corresonde a uma etaa de equil$rio da

su$st3ncia entre a fase estacion(ria e fase m-#el%

7uanto maior o n9mero de ratos te-ricos maior ser( a

eficincia (icos mais estreitos) na an(lise%

E4emlo:

Coluna com filme esesso de C!=B G C!@= mm n9mero de

ratos te-ricos: A6CCC ratos H m

Algumas caractersticas fsicas de uma coluna

cromatogr(fica:
Parmetro Parmetro Recheada Analtica Recheada Analtica Capilar Capilar
Dimetro Interno (mm) Dimetro Interno (mm) 1 4 1 4 0,15 0,75 0,15 0,75
Comprimento (m) Comprimento (m) 1 1 10 100 10 100
Prato! "e#rico! por metro Prato! "e#rico! por metro $%400 $%400 %000 %000
&!pe!!'ra do (ilme &!pe!!'ra do (ilme
l)'ido ( l)'ido ( m) m)
5 5 0,5 $ 0,5 $
*ol'me da amo!tra ( *ol'me da amo!tra ( +) +) 0,$ $0 0,$ $0 0,001 0,5 0,001 0,5

.ase estacion(ria:

.ase estacion(ria s-lida: na cromatografia g(s5s-lido um s-lido

finamente di#idido funciona como fase estacion(ria%

A searao $aseia5se na adsoro fsica e qumica das

su$st3ncias resentes na amostra neste s-lido e nas suas
#olatilidades%

E4emlos:

.ase estacion(ria: olmeros orosos%

Alicao: gases e comostos aolares ou olares de cadeia

curta%

.ase Estacion(ria Lquida:

&m lquido ouco #ol(til! reco$rindo um suorte s-lido!

funciona como fase estacion(ria%

:s suortes mais utili"ados so terras diatom(ceas: slica

microamorfa com equenas quantidades de alumina e -4idos
met(licos como imure"as%

E4emlo:

.ase estacion(ria lquida: Car$oFa4: olietilenoglicol

*olaridade: olar

Alicao: (lcoois! teres! glic-is! sol#entes

>emeratura de oerao: IC at ==C

o
C

Aplicaes da Cromatografia asosa !s-"#$uido%

*ara a reali"ao de seara)es analticas: alicao sistemas

$ioqumicos! comle4os organo5met(licos ou org3nicos%

*ara reali"ar uma an(lise comleta: neste caso! temos ou

#olumes de reteno so emregados ara identificao
qualitati#a% alturas ou (reas de icos fornecem informa)es
quantitati#as%

*ara an(lises qualitati#as! a cromatografia g(s5lquido ode

fornecer mais informa)es 9teis! quando o cromat-grafo a g(s
conectado a um esectrJmetro de massa! infra#ermel0o e
/K86

8a an(lise qualitati#a comara5se o temo ou #olume de reteno

de um adro com o da amostra% se um comosto con0ecido ossuir o
mesmo temo de reteno que um dado comosto da amostra! ode5
se tratar da mesma su$st3ncia%

8a an(lise quantitati#a fa"5se a integrao dos sinais (icos) ara

transformar a intensidade do sinal emitido elo detector em uma
medida relacionada com a quantidade da su$st3ncia analisada na
amostra medida da (rea do ico%

/elao entre a (rea do ico e concentrao #(rios mtodos%

Cali$rao e4terna: comara a (rea da su$st3ncia a ser quantificada na

amostra com as (reas o$tidas desta mesma su$st3ncia em solu)es
adro de concentra)es con0ecidas gr(fico (rea 4 concentrao%
to t
?
t
=
t
@
t
A
t
B
>emo
,inal
do
'etector
Ktodos ara /eali"ao de An(lise 7uantitati#a
C(lculo da (rea do ico Cali$rao e4terna
Calcula5se a
Lrea do ico

Com a (rea do ico determinada! constroi5se

uma cur#a de cali$rao (rea do ico 4
concentrao lin0a reta%

Comara5se a (rea da su$st3ncia a ser

quantificada na amostra com as (reas o$tidas
desta mesma su$st3ncia em solu)es adro
de concentra)es con0ecidas%
Concentrao
Lrea
C?
C4 C@
A?
A4
A@
Ktodo da Cali$rao E4terna

,istemas de 'eteco em Cromatografia Gasosa:

As su$st3ncias resentes na amostra assam atra#s da coluna!

onde so searadas! e c0egam ao sistema de deteco%

E4istem #(rios sistemas de deteco%

'e#e5se escol0er o detector que mel0or se adata ao tio de

an(lise a ser reali"ada%

Algumas caractersticas imortantes na escol0a do detector:

seleti#idade: os detectores odem resonder a todas as

su$st3ncias! medindo a #ariao da comosio do g(s de arraste
que sai da coluna%

E4istem detectores que so uni#ersais e outros esecficos ara

uma classe de su$st3ncias%

,ensi$ilidade: mudana na resosta do detector em funo

da quantidade detectada%

quantidade mnima detect(#el: alguns detectores

conseguem detectar quantidades de su$st3ncia na fai4a de
icogramas (?C
5?=
g) ou menos! e outros aenas ?C
5M
g%

'etector or ioni"ao em c0ama (.I' G .lame Ioni"ation

'etector):

Kuito utili"ado alta sensi$ilidade e resosta uni#ersal%

&rinc#pio de funcionamento:

: g(s de arraste c0ega ao detector e uma c0ama rodu"ida

ela com$usto de ar e 0idrognio queima e ioni"a algumas
das molculas resentes nesta corrente gasosa%

7uando estas molculas so queimadas estes ons formados

so coletados or um eletrodo%

A quantidade de ons formados roorcional ; concentrao

da escie em estudo%

7uantidade mnima detect(#el: = 4 ?C

5?=
g (alcanos)%
'etector de Ioni"ao de C0ama
C0ama: g(s <
=
N :
=
(=CC
o
C)
>emo de resosta: ? ms
,eleti#idade: comostos
org3nicos

:utros tios de detectores: conduti#idade

trmica (>C' G t0ermal conducti#itO
detector)! catura de eltrons (EC' G
eletron cature detector)! termiJnico!
detector de nitrognio5f-sforo (8*')%

Amostras em CG:

,-lidas: odem ser dissol#idas em lquidos e in1etadas no

cromat-grafo%

Lquidas: odem ser diludas! concentradas e in1etadas #ia

seringa no CG%

*ode5se disor no aarel0o de um in1etor autom(tico

minimi"a os erros que odem ocorrer na in1eo manual%

Gases: odem ser introdu"idas no CG usando seringa

aroriada%

7uantidades de amostra ara an(lise:

Lquidos: seringas de ?C nL at ?C L% sistemas de in1eo

autom(tica: atra#s de sistemas de #(l#ulas C!= L at ?
mL%

Gases: seringas de ?C L at =B mL%

In1etores autom(ticos: C!=BC at ?C mL%

>emo de an(lise: menos de ? minuto at ? ou = 0oras%

Kuitas an(lises duram de =C a IC minutos%

*reciso das an(lises: deende do tio de in1eo! coluna e detector

utili"ado de C!@P a menos de @P%

,ensi$ilidade e limite de deteco: deende do rocesso de in1eo e

do sistema de deteco%

.ai4as de artes or tril0o ou nanogramas or litro at gHL%

A Cromatografia gasosa ode ser utili"ada em con1unto com outras

tcnicas analticas: CG5esectroscoia de I2 or transformada de
.ourier: CG5.>I/

CG5esectrometria de massa (mass esectrometrO): CG5K,%

:& CG5.>I/5K,%
*ara a determinao e confirmao das caractersticas estruturais dos
comostos em an(lise%

Custos da CG:

Cromat-grafo: at &,Q ?CC6CCC!CC%

Colunas: &,Q @CC a ?6CCC!CC%

Aplicaes em 'u#mica Am(iental: determinao de $en"eno!

tolueno! 4ileno! esticidas! 0er$icidas! inseticidas
organofosforados! dio4inas! furanos! 0idrocar$onetos
arom(ticos olinucleares! fen-is! comostos #ol(teis no solo! ar
e (gua%

As Emresas <* e ,0imad"u ossui cat(logo esecfico ara

alica)es da CG na (rea am$iental%
Cromatografia Lquida de Alta Eficincia
(CLAE)
ou
<*LC:
(<ig05*erformance Liquid C0omatogra0O)

*rincio da tcnica: a CLAE utili"a uma resso alta

ara forar a assagem do sol#ente elas colunas
contendo artculas muito finas que roorcionam
seara)es muito eficientes%

: sistema CLAE consiste de um sistema de

distri$uio do sol#ente! uma #(l#ula de in1eo de
amostra! uma coluna de alta resso! um detector e
um comutador ara monitorar o sistema e
aresentar os resultados%
/eser#at-rio da .ase
m-#el (lquido)
+om$a de
Alta *resso
2(l#ula ara
In1eo da
amostra
Coluna
'etector
/egistrador
Kedidor
de
resso
Esquema de um Cromat-grafo CLAE

Em CLAE e4istem cinco tios diferentes de fases

estacion(rias! que imlicam em cinco mecanismos
diferentes de reali"ar a CLAE mediante a troca de
coluna e fase m-#el oss#el utili"ar cada um
deles%

Cromatografia lquido5s-lido ou or adsoro%

cromatografia lquido5lquido ou or artio%
cromatografia lquida em fase ligada! cromatografia
or e4cluso! cromatografia or troca iJnica%

Colunas em CLAE:

Comrimento: ?C G BC cm%

'i3metro interno:

Coluna analtica: @ a B mm%

Coluna rearati#a: ?C mm%

A caacidade da coluna determinada elo seu comrimento!

di3metro e material de rec0eio

.ases estacion(rias em CLAE:

A fase estacion(ria em CLAE de#e ser aqueles que em um

menor temo oss#el reten0am uma m(4ima caacidade de
amostra! do a mel0or resoluo na searao da mistura e so
de f(cil introduo na coluna%

,-lidos ; $ase de slica: rec0eios mais usados%

,-lidos semi5rgidos: artculas orosas de oliestireno

entrecru"ado com di#inil$en"eno%

,-lidos no rgidos: agarose ou de4trose%

E4emlo: fase estacion(ria ara CLAE lquido5s-lido G

adsoro:

E4emlo: fase estacion(ria ara CLAE lquido5s-lido G

adsoro:

>io: slica

8ome: C0roms0ere

.ornecedor: C0rom*acR

'i3metro da artcula: B m

>aman0o do oro: ?= nm

2olume do oro: C!S mLHg

Lrea da suerfcie: ?IC m

=
H g

Caractersticas da fase m-#el em CLAE:

,er de alto grau de ure"a ou de f(cil urificao%

'issol#er a amostra sem decomor os seus comonentes%

8o decomor ou dissol#er a fase estacion(ria%

>er $ai4a #iscosidade%

,er comat#el com o tio de detector utili"ado%

>er olaridade adequada ara ermitir uma searao

con#eniente dos comonentes da amostra%

2antagens e Limita)es da CLAE:

2antagens:

Kenor temo de an(lise%

Alta resoluo: oss#el a an(lise de misturas comle4as (como a urina

0umana): du"entos comostos odem ser detectados%

/esultados quantitati#os: an(lises quantitati#as so de f(cil e4ecuo e

grande reciso% des#ios relati#os inferiores a C!BP%

+oa ,ensi$ilidade: detectores que ermitem medidas de ?C

5T
g% com
detectores esecficos foram o$tidos resultados de ?C
5?=
g%

2ersatilidade: a mais imortante das #antagens da CLAE%

ode ser alicada tanto ara comostos org3nicos quanto
inorg3nicos% as amostras odem ser lquidas ou s-lidas%
iJnicas ou co#alentes% gases no odem ser determinados or
CLAE%

Automati"ao: todo o rocesso ode ser automati"ado! deste

a in1eo da amostra at a integrao dos icos%

Limita)es da CLAE:

Alto custo da instrumentao: sistemas mais simles custam

de &,Q S6CCC a &,Q =C6CCC! sistemas mais sofisticados!
automati"ados e com #(rios detectores odem assar de
&,Q BC6CCC%

Alto custo de oerao: custo ele#ado das fases m-#eis de alto grau de
ure"a! das fases estacion(rias ou colunas rontas! de reosio
eri-dica de comonentes sofisticados%

'ifcil an(lise qualitati#a: a CLAE no um mtodo muito $om de

identificao qualitati#a! ois a comarao dos temos de reteno
no um mtodo seguro de identificao% ode5se confirmar a
identidade da su$st3ncia com outras tcnicas! como esectrometria de
massas (K,)! I2 ou /K8%

.alta de detector uni#ersal sens#el: ainda no se dis)e de um

detector que se1a uni#ersal e sens#el% o detector de ndice de refrao
uni#ersal mas no tem sensi$ilidade satisfat-ria% o detector or
ultra#ioleta sens#el! mas s- resonde aos comonentes que
a$sor#em energia eletromagntica no selecionado

8ecessidade de e4erincia na oerao do cromat-grafo de CLAE:

*ara se o$ter o m(4imo de aro#eitamento de um sistema de CLAE

necess(rio treinamento adequado e longo: mnimo I meses ( na
cromatografia gasosa: @ meses)%

'etectores ara CLAE: detector or a$sor$3ncia no &252is% detector

or ndice de refrao% detector or fluorescncia%

'etector or a$sor$3ncia no ultra#ioleta e no #is#el:

,e $aseia na a$sor$3ncia da lu" or arte da amostra ao assar or

atra#s dela qualquer radiao eletromagntica%

'ois tios: detector de comrimento de onda #ari(#el

(esectrofotJmetro): mais caro% oeram na fai4a de ?TC a MCC nm% so
mais seleti#os e sens#eis! ois um ode ser escol0ido ara o
comosto de interesse a$sor#e mais intensamente%

'etector de comrimento de onda fi4o: mais $arato% odem

tra$al0ar com em =BA nm e =MC nm%

Caractersticas do 'etector &252is:

7uantidade mnima detect(#el (gHmL): =4?C

5?C
a ?C
5T
%

2olume da cela: ? G =C L%

,ensi$ilidade ; temeratura: $ai4a

,ens#el ; #a"o da fase m-#el: $ai4a

Alica)es: comostos que a$sor#em no selecionado%

Alica)es da CLAE:

Kedidas de n#eis de amino(cidos! (cidos nuclicos e rotenas em

amostras fisiol-gicas%

Kedidas de drogas ati#as! $iorodutos sintticos ou rodutos de

degradao em dosagens farmacuticas%

Kedidas de n#eis de oluentes! como esticidas ou inseticidas%

Konitoramento de amostras am$ientais%

*urificao de comostos de misturas%

Controle de qualidade%

,earao de olmeros

Amostras em CLAE:

7uantidade: ? G ?CC L (geralmente B G ?C L)%

>emo de an(lise: B minutos a = 0oras (geralmente ?C G =B min6)%

>cnicas comlementares:

A CLAE ode ser utili"ada em con1unto com a Esectrometria

de Kassa (K,)! Infr#ermel0o(I/) ou /esson3ncia Kagntica
8uclear (/K8) ara se o$ter informa)es so$re a estrutura
molecular do comosto em estudo%
.IK

,em sol#ente

*equenas massas

An(lise r(ida
'es#antagens da CG
U
,omente comostos #ol(teis e est(#eis
termicamente6
O Cromatgrafo a Gs
#
>
?
%
(
'
1 , 5eservatrio de *&s e 'ontroles de -a6o 7 8resso.
> 1 I!@tor (Va-ori7a,or) , Amostra.
? 1 Co2+!a Cromatogr5fi0a For!o ,a Co2+!a.
% 1 4t0tor.
2 , )letr9nica de :ratamento (/mpli#icao) de Sinal.
; , 5egistro de Sinal (5egistrador ou 'omputador).
Observao: em vermelho: emperaura !o"rolada
INSTRUMENTAO
Gs de Arraste
+ase <vel em '*: NAO interage com a amos,
tra , apenas a carrega atrav=s da coluna. /ssim = usualmente re#erida como GS 4E GS 4E
ARRASTE ARRASTE
R/+isitos:
INERTE >o deve reagir com a amostra? #ase estacion&ria ou super#$cies do
instrumento.
PBRO @eve ser isento de impure6as %ue possam degradar a #ase estacion&ria.
Impre!as t"picas em gases e ses efeitos:
oAida 7 hidroli6a algumas +)
incompat$veis com @')
C
>
OD O
>
:i,ro0arEo!tos
ru$do no sinal de @B'
INSTRUMENTAO
Gs de Arraste
R/+isitos:
CBSTO *ases de alt$ssima pure6a podem ser muito caros.
COMPATFVEL COM 4ETECTOR 'ada detector demanda um g&s de arraste espec$#ico
para melhor #uncionamento.
Se#eo de Gases de $rraste em %no do &etector:
C D C
>
4CT
4IC
N
>
D C
>
4CE
N
>
(SS)D Ar G 'H CC
%
C
B
S
T
O
PBREIA
A
J
C
A = 99?992 C (4.2)
J = 99?999 C (2.0)
C = 99?9999 C (;.0)
INSTRUMENTAO
Alimentao de Gs de Arraste
'omponentes necess&rios D linha de g&s:
0o!tro2a,ors , <a79o K -rss9o , g5s
,is-ositi<os -ara -+rifi0a89o , g5s ()tra-s*)
#
>
?
%
'
(
1 , 'ilindro de *&s
3 , 5egulador de 8resso 8rim&rio
3 , E:rapsF para eliminar impure6as do g&s
4 , 5egulador de 8resso Secund&rio
2 , 5egulador de -a6o ('ontrolador @i#erencial de +luAo)
; , <edidor de -a6o (5otGmetro)
#oa: $ubos e
%o"e&'es: (o
)"o& ou %obre
INSTRUMENTAO
Dispositivos de Injeo de Amostra
Hs dispositivos para inIeo (IN6ETORES ou VAPORIIA4ORES) devem prover
meios de introduo I'S($'()'*$ da amostra na coluna cromatogr&#ica
In+eo instantnea:
In+eo #enta:
t L &
t L M
t L &
t L M
INSTRUMENTAO
Injetor on!col"mn# Convencional
#
>
?
%
1 , Septo (silicone)
3 , /limentao de g&s de arraste)
3 , Jloco met&lico a%uecido
4 , 8onta da coluna cromatogr&#ica
INSTRUMENTAO
Injeo on!col"mn# de l$"idos
# > ?
# 1 Po!ta ,a ag+2:a ,a mi0rosri!ga N i!tro,+7i,a !o i!O0io ,a 0o2+!a.
> 1 Amostra i!@ta,a <a-ori7a,a i!sta!tP!am!t !o i!O0io ,a
0o2+!a.
? 1 )P2+g* , <a-or , amostra for8a,o -2o g5s , arrast a f2+ir -2a
0o2+!a.
INSTRUMENTAO
Par%metros de Injeo
TEMPERATBRA 4O IN6ETOR @eve ser su#icientemente elevada para %ue a amostra
vapori6e,se imediatamente? mas sem decomposio
*egra Geral: T
i!@
L '&
o
C acima da temperatura de eKulio do componente menos
vol&til
VOLBME IN6ETA4O @epende do tipo de coluna e do estado #$sico da amostra
'H(.>/
$mostras
Gasosas
$mostras
L",idas
empa!oada
= +,- mm .
/
0
1
23
0?1 ml ... 20 m( 0?3 ( ... 30 (
!apilar
= 4,-5 mm
0?001 ml ... 0?1 m( 0?01 ( ... 3 (
S#idos: con-enciona#mente se disso#-e em m so#-ente
ade,ado e in+eta-se a so#o
INSTRUMENTAO
Microsserin&as para Injeo
LFQBI4OS 'apacidades t$picas: 1 (? 2 ( e 10 (
RmEo2o
0or-o (-irM)
ag+2:a (i!oM ?#()
Microseringa de ./ L"
Microseringa de . L (seo amp#iada)"
0or-o
g+ia
RmEo2o (fio , a8o
so2,a,o ao g+ia)
ag+2:a
INSTRUMENTAO
Col"nas' Defini(es Bsicas
EMPACOTA4A
L ? a ( mm
L L &D' m a ' m
0ec1eada com s#ido p#-eri!ado
(%* s#ida o %* #",ida depositada
so2re as part"c#as do rec1eio)
CAPILAR
L &D# a &D' mm
L L ' m a #&& m
3aredes internas reco2ertas com
m fi#me fino (frao de m) de %*
#",ida o s#ida
INSTRUMENTAO
)emperat"ra da Col"na
/l=m da interao com a +)? o tempo %ue um analito demora para percorrer a coluna
depende de sua PRESSAO 4E VAPOR (-
&
).
-
&
L f
Estr+t+ra /+Omi0a
,o a!a2ito
Tm-rat+ra
,a 0o2+!a
Tm-rat+ra
,a
0o2+!a
Prss9o
,
<a-or
V2o0i,a,
,
migra89o
(#(L)$O 6L7) M()S *(8)9(M6#$6 .M6#O*
*6$6#:;O3
INSTRUMENTAO
)emperat"ra da Col"na
T
E
M
P
E
R
A
T
B
R
A

4
A

C
O
L
B
N
A
CONTROLE CONFIVEL 4A TEMPERATBRA 4A COLBNA S ESSENCIAL PARA
OJTER JOA SEPARATAO EM CG
INSTRUMENTAO
*orno da Col"na
Cara0trOsti0as 4s@5<is , +m For!o"
AMPLA FAIUA 4E TEMPERATBRA 4E BSO 8elo me"os de $
ambie"e
a<
144
o
%= Sisemas !riog>"i!os .$ ? $
ambie"e
3 podem ser "e!essrios em !asos
espe!iais=
TEMPERATBRA IN4EPEN4ENTE 4OS 4EMAIS M4BLOS #o deve
ser a@eado pela emperaura do i"Aeor e dee!or=
TEMPERATBRA BNIFORME EM SEB INTERIOR Sisemas de ve"ilao
i"er"a muio e@i!ie"es para ma"er a emperaura homog>"ea em odo
@or"o=
INSTRUMENTAO
*orno da Col"na
Cara0trOsti0as 4s@5<is , +m For!o"
FCIL ACESSO V COLBNA ( operao de ro!a de !olu"a pode ser
@reque"e=
AQBECIMENTO E ESFRIAMENTO RPI4O )mpora"e a"o em a"lises
de roi"a e dura"e o dese"volvime"o de meodologias a"ali!as "ovas=
TEMPERATBRA ESTVEL E REPRO4BTFVEL
( emperaura deve ser ma"ida !om e&aido e pre!iso de B 4,/C%=
6m !romagra@os moder"os .depois de /DE43,
o !o"role de emperaura do @or"o < oalme"e operado por mi!ropro!essadores=
INSTRUMENTAO
Pro&ramao +inear de )emperat"ra
Misuras !omple&as .!o"siui"es !om volailidades muio di@ere"es3
separadas ISOTERMICAMENTE:
T
COL
JAIUA"
1 Com-o!!ts mais <o25tis s9o
s-ara,os
1 Com-o!!ts m!os <o25tis
,moram a 2+irD sai!,o 0omo -i0os
ma2 ,fi!i,os
T
COL
ALTA"
1 Com-o!!ts mais <o25tis !9o s9o
s-ara,os
1 Com-o!!ts m!os <o25tis 2+m
mais ra-i,am!t
Picos largos
Picos empilhados
MESMA AMOSTRA
INSTRUMENTAO
Pro&ramao +inear de )emperat"ra
( emperaura do @or"o pode ser variada li"earme"e dura"e a
separao:
'onsegue,se Koa separao dos
componentes da amostra em
menor tempo
:)<8H
:
)
<
8
)
5
/
:
.
5
/
t
INI
t
FIM
T
INI
T
FIM
R
3armetros de ma programao de temperatra:
T
INI
Tm-rat+ra I!i0ia2
T
FIM
Tm-rat+ra Fi!a2
t
INI
Tm-o IsotNrmi0o I!i0ia2
t
FIM
Tm-o Fi!a2 ,o Programa
R V2o0i,a, , A/+0im!to
INSTRUMENTAO
Pro&ramao +inear de )emperat"ra
8ossveis problemas asso!iados F 8L$:
VARIATWES 4E VAIAO 4O GS 4E ARRASTE ( vis!osidade de
um gs aume"a !om a emperaura=
viscosidade va6o
4ERIVA ()4RIFT*) NA LINCA 4E JASE 9evido ao aume"o de
volailiGao de F6 lquida
INSTRUMENTAO
Detectores
@ispositivos %ue eAaminam continuamente o material eluido? gerando sinal %uando da
pas,sagem de suKstGncias %ue no o g&s de arraste
Gr@i!o Si"al & $empo = C04M$(4G0$M$
)dealme"e: !ada subsH"!ia separada apare!e
!omo um 8)%O "o !romaograma=
INSTRUMENTAO
Detectores
Mais )mpora"es:
4ETECTOR POR CAPTBRA 4E ELSTRONS (4CE OB EC4)
Supresso de !orre"e !ausada pela absoro de el<ro"s por eluaos
alame"e elero@li!os=
4ETECTOR POR CON4BTIVI4A4E TSRMICA (4CT OB TC4)
Iariao da !o"duividade <rmi!a do gs de arrase=
4ETECTOR POR IONIIATAO EM CCAMA (4IC OB FI4) Jo"s gerados
dura"e a queima dos eluaos em uma !hama de K
-
L ar=
REGISTRO
4E
SINAL
/>/(L*B'H
Rgistra,ors UX
@B*B:/(
I!tgra,ors
Com-+ta,ors