Observacin Microscpica de Protozoos:

1era Muestra: Entamoeba Histoltica

Cunto miden?
Trofozoito: tienen un dimetro de 10 - 60 m (rango ms frecuente 12-15 m)
Los quistes, infectantes, son esfricos y miden 10 - 15 m.

Cuntos ncleos tiene la etapa diagnostica?
Los quistes presentan, segn su grado de madurez, 1 a 4 ncleos y tras el
desenquistamiento, en la forma de trofozotos con 4 ncleos, que darn lugar a 8
trofozotos uninucleados. La multiplicacin se lleva a cabo por divisin binaria.

Cul es la etapa infecciosa?
Trofozoto, es el que produce la enfermedad, y el Quiste, que es la forma infectante,
fuera del organismo resiste las bajas temperaturas, y en medio hmedo sobrevive
desde semanas hasta meses.

Cul es la etapa responsable de los sntomas en los pacientes?
Trofozoito, es el que produce la enfermedad y por lo tanto genera los sntomas.

Qu diferencias hay entre E. Histolyitica y E. Dispar?
De acuerdo a evidencia inmunolgica, bioqumica y gentica, en 1993 Diamond y
Clark confirman la validez de Entamoeba dispar que describi como una especie
diferente a la E. histolytica, comensal y no patgena.

Cmo se diagnostica?
El diagnstico se logra mediante exmenes de laboratorio de la materia fecal
con microscopio ptico. En algunos casos se requiere tomar imgenes del hgado
con TAC, o deteccin del ADN del parsito mediante PCR o serologa con deteccin
de anticuerpos especficos.
El diagnstico definitivo se realiza con base en las manifestaciones
clnicas/observacin de quistes o trofozotos obtenidos de muestras fecales,
raspados o biopsias. El examen directo es necesario para la deteccin de trofozotos
en la fase de diarrea.











2nda Muestra: Tripanozoma Cruzy

Qu otro tejido puede infectar este parsito durante su ciclo de vida?
Durante los primeros 15 das puede presentarse el llamado "chagoma de
inoculacin", un ndulo subcutneo con adenitis regional en el sitio de la picadura;
en casos de inoculacin ocular, es posible identificar el "signo de Romaa", edema
bipalpebral unilateral, con adenitis retroauricular, caracterstico de la enfermedad,
aunque poco frecuente.
Complicaciones: miocarditis aguda o meningoencefalitis
Alrededor del 30% de los pacientes en fase indeterminada desarrollan la forma
crnica de la enfermedad, que se caracteriza fundamentalmente por compromiso
visceral irreversible: cardiomiopata chagsica, o de tubo digestivo, con la mayor
frecuencia en intestino o esofago

Qu enfermedad produce y cmo se puede diagnosticar?
Es el agente etiolgico de la enfermedad de Chagas.
El diagnstico etiolgico de la enfermedad de Chagas se basa en la evaluacin
clnica, epidemiologa y pruebas de laboratorio. Para el diagnstico de laboratorio,
los exmenes adecuados dependen de la etapa clnica del paciente.
En la etapa aguda los estudios se centran en la bsqueda y reconocimiento
del Trypanosoma cruzi en sangre (metodologa:
parasitolgica directa), porque en las etapas inciales de la enfermedad se
encuentran parasitemias importantes y a medida que transcurre la infeccin van
disminuyendo hasta hacerse mnimas y aleatorias. En las etapas crnicas
(inaparente o indeterminada y
sintomtica) las parasitemias son transitorias y por ello el diagnstico se realiza
fundamentalmente mediante el hallazgo de anticuerpos circulantes contra el T.
cruzi.

Qu vectores transmiten la infeccin?
Se transmite principalmente por triatminos de la familia Reduviidae, orden
Hemiptera (chinches o vinchuca)























3ra muestra: Balantidium Coli

Cunto miden?
El protozoario de mayor tamao que afecta al hombre, el trofozoito es de forma
ovalada con una longitud promedio de 50 a 200 micras y 40 a 50 micras de ancho.
El quiste es ms redondeado, con un dimetro de 40 a 60 micras, con
doble membrana gruesa, a travs de la cual puede observarse el parsito, a veces
con algn movimiento.

Cul es la etapa infecciosa?
El quiste es eliminado al exterior, resiste el medio ambiente y es infectante por va
oral y se destruye al salir del organismo.

Cmo se transmite al hombre?
El mecanismo de transmisin es directa y por contaminacin como en los otros
protozoarios intestinales, por contaminacin de alimentos, aguas, manos, etc., con
materias fecales que contengan quistes del parsito

Cul es la etapa del ciclo, responsable de la patologa de los pacientes?
Despus de ingerirlos, la membrana quistica se destruye y de cada quiste emerge un
trofozoito en el intestino. El habitad natural de Balantidium coli es el intestino
grueso del hombre, donde las clulas se alimentan de la pared intestinal o de
las bacterias y del moco como parsitos de la luz del coln. La infeccin persiste en
el intestino por la multiplicacin de los trofozoitos.

Cmo se diagnostica?
La balantidiasis requiere de un diagnstico clnico diferencial con entidades que
produzcan colitis a disentera, principalmente amebiasis tricocelalosis aguda,
disentera bacilar y colitis ulcerativa. El diagnstico se comprueba por el examen de
materias fecales al observar los trofozoitos mviles al examen directo,
principalmente en heces diarreicas, a los quistes en materias fecales no diarreicas,
en exmenes directos o por concentracin. La retrosigmoidoscopia permite
observar la lesin y obtener muestra para examen parasitolgico. Este parsito
crece bien en los medios de cultivo utilizados para E. hystolitica lo cual puede tener
utilidad para completar el diagnstico. Las coloraciones principalmente la de
hematoxilina frrica, sirve para hacer un estudio morfolgico ms detallado.










4ta Muestra: Trichonoma vaginalis

Cunto miden?
nicamente tiene un hospedador (monoxeno), es cosmopolita y tiene una
nica forma de vida en su ciclo vital, el trofozoito, ya que no
forma quistes. Mide de 7 a 23 m por 5 a 12 m de ancho

Cuntos nucleos tiene la etapa diagnostica?
El ncleo es grande, ovalado, excntrico y localizado hacia el extremo
anterior.

Cul es la patologa que provocan?
Trichomonas Vaginalis no puede vivir naturalmente sin estrecha asociacin
con el tejido vaginal. Pocos das despus de la llegada a la vagina, los
parsitos proliferan y provocan degeneracin y descamacin del epitelio
vaginal, con infiltracin leucocitaria y aumento de las secreciones
vaginales.El orificio uretral, las glndulas vestibulares y el cltoris se
observan intensamente inflamados. Cuando la infeccin aguda cambia al
estado crnico, se produce una atenuacin de los sntomas, las secreciones
pierden su aspecto purulento debido a la disminucin del numero de
parsitos y leucocitos, el aumento de clulas epiteliales y al establecimiento
de una flora bacteriana mixta.En el hombre, la infeccin es generalmente
asintomtica aunque puede provocar una uretritis o prostatitis irritativa

Cual es la forma de diagnosticarlo?
La confirmacin de la trichomonosis se efecta mediante tcnicas directas e
indirectas:
Tcnicas Directas
El frotis directo simple del exudado vaginal es el mtodo ms empleado; mediante l
se revela la presencia de Trichomonas, fcilmente demostrable por su morfologa y
movimientos caractersticos. En el hombre, las muestras de obtiene a partir de las
secreciones uretrales o del sedimento de la primera orina matinal

Tcnicas indirectas
Existen varias tcnicas para estudiar las respuestas inmunitarias a este parsito y se
ha demostrado la reactividad a antgeno de Trichomona vaginalis por
hemaglutinacin, fijacin de complementos, inmunofluorescencia indirecta y ELISA.








5ta muestra: Toxoplasma gondi
Cul es la etapa del ciclo responsable de la patologa en los pacientes?
Toxoplasma gondii invade la mayora de las clulas nucleadas y adopta
formas diferentes:
Ooquistes: Los felinos, hospederos definitivos, eliminan los ooquistes no
esporulados en heces fecales, infectantes al cabo de 1 - 5 das en medio
ambiente (suelo). Los ooquistes esporulados son ovoidales, miden 10 - 12 m
y contienen 2 esporoquistes, cada uno con cuatro esporozotos.

Taquizotos: formas replicativas, intracelulares. Se observan en la fase aguda
y son responsables de la diseminacin y la destruccin tisular. Miden 3 m x
6 m, de forma oval, con un extremo aguzado y el otro redondeado. Se
reproducen rpidamente por divisin binaria (endodiogenia) en vacuolas
parasitforas que forman en clulas nucleadas.
Son de importancia fundamental los micronemas, roptrias y grnulos densos
en la adhesin, invasin, formacin de la vacuola parasitfora y adquisicin
de nutrientes. La replicacin conduce a la lisis celular y a la diseminacin de
taquizotos a diferentes tejidos.

Bradizotos: formas contenidas en quistes tisulares, de reproduccin muy
lenta. Miden 1.5 m x 7.0 m y su morfologa es semejante a la de los
taquizotos. Existen mecanismos por los cuales entran en una etapa
"quiescente" (latente). Los quistes tisulares dan lugar a inmunidad no estril y
en condiciones de inmunocompromiso los bradizotos que contienen se
reactivan y diseminan como taquizotos.
Los quistes tisulares varan en forma y tamao. Los quistes jovenes
pueden medir 5 m de dimetro. Los quistes maduros miden en
promedio 70 m y contienen unos 1 000 bradizoitos, aunque los hay de
mayor tamao. Presentan una delgada membrana elstica, y pueden
persistir en tejidos durante el resto de la vida del hospedero. Se ubican
principalmente en cerebro, msculo esqueltico y cardaco.
Se considera que la forma de quiste tisular contribuye de manera
fundamental al xito de este parsito, ya que (1) sobrevive al paso
gastrointestinal, y permite la invasin del intestino delgado; (2) no se
ve afectado por la respuesta inmune y por los frmacos; (3) los
parsitos pueden persistir sin afectar a las clulas a lo largo de la vida
del hospedero; (4) los bradizotos en los quistes son infecciosos, lo que
contribuye a su diseminacin en la naturaleza (a travs de los animales
carnvoros).






Cmo se transmite a los humanos?
Transmisin.
El humano puede adquirir la infeccin a travs de:

- Ingesta de carne contaminada con quistes tisulares cruda/malcocida o su
manipulacin (la ms frecuente)
- Ingesta de agua/alimentos contaminados con ooquistes esporulados,
tambin debida a manipulacin inadecuada de las cajas de arena de gatos.
- Otros mecanismos de transmisin, son: Transmisin congnita
(transplacentaria), transplante de rganos, transfusin sangunea e
inoculacin accidental en laboratorios. (Carlier et al., 2012; Kamerkar &
Davis. 2012; Sullivan & Jeffers. 2011)

Cmo se diagnostica?
El diagnstico clnico se basa en gran medida en los resultados de pruebas
serolgicas que detecten anticuerpos especficos anti-T.gondii. Tanto las
especificidades como las sensibilidades de estas pruebas dependen
fundamentalmente de los antgenos utilizados. La mayor parte de los kits
comerciales estn basados en lisados de antgenos de Toxoplasma. En aos
recientes, varios estudios han demostrado la utilidad de emplear protenas
antignicas recombinantes. (Holec-Gasior L. 2013).
Serologa: Pueden llevarse a cabo tcnicas de hemaglutinacin,
inmunofluorescencia, ELISA y Western blot para la deteccin de IgM e IgA
(fase aguda), IgE, e IgG, asi como para determinar la avidez de IgG.

La tcnica de Sabin y Feldman es la prueba de referencia de IgG, realizada
en laboratorios laboratorio de referencia, entre ellos el ubicado en el CDC y la
OMS. Implica la manipulacin de parsitos vivos.

Exmenes de gabinete (Rx, tomografa computarizada, resonancia
magntica, ultrasonido, oftalmolgico).

PCR.
En pacientes inmunodeprimidos, con deficiencia inmune combinada,
celular y humoral, se recomienda el empleo de la bateria serolgica, imagenologa,
histopatologa y PCR.