Vacunas de Nueva Generacin

Del empirismo a la racionalidad

Tecnologas modernas: de Vacunas tradicionales a
nueva generacin
Vaccinologa:
Concepcin,
puesta a punto,
elaboracin,
control,
administracin y vigilancia
Desarrollo de vacunas
Manipulacin de ADN
Ingeniera de Protenas
Anticuerpos monoclonales
Objetivos a cumplir
Incremento en la seguridad:
Evita manipular microorganismos virulentos
Evita reversin de virulencia
Incremento eficacia:
Mayor especificidad
Incorporacin de adyuvantes intrnsecos
Ms inocuas
Manipulacin y medidas de bioseguridad
Mayor rendimiento del antgeno
Vacunas DIVA
Inactivadas
Vacunas a subunidades
- pptidos sintticos
- A partir de E. coli, levaduras o vegetales
Atenuadas
Vacunas delecionadas
- por mutagnesis
Vacunas vectores recombinantes
- Antgenos portados por vectores virales o bacterianos
Especiales
Vacunas a ADN
Tipos de vacunas
Mtodos de obtencin de sub unidades:
Convencionales
Purificadas a partir de cultivos de las bacterias o virus
Nuevas tecnologas
Protenas de fusin expresados: en bacterias,
levaduras , clulas de insectos infectadas por
baculovirus, en plantas
Pptidos sintticos o biosintticos
Toxoides por detoxificacin gentica
Cmo se seleccionan las subunidades?
Algunas estrategias: Estudio genmico o genomics
Cmo se seleccionan las subunidades?
Mapeo de epitopes B
Mapeo de epitopes B
Mapeo de epitopes T
Mapeo de epitopes T : ELISPOT
1- LP + pptidos 9 aa
Anti-IFN recombinante
2- Estmulos:
pptidos
PHA
medio
3- Cultivo 24 h
Anti-IFN r biotinilado
N de Clulas
Formadoras
de IFN
CULTIVO 10 das
Estreptavidina-
peroxidasa
4 Cloro-alfa
Naftol
4- Revelado
5- Conteo de
puntos
Identificacin de % de LT productores de IFN
gamma
Propiedades de vacunas a pptidos
Ventajas
seguridad
inocuidad
Desventajas
Baja inmunogenicidad,
requieren adyuvantes
potentes
Restriccin haplotpica
Requieren epitopes B y T
Posibilidad de Mimotopes
Vacunas a subunidades
producidas por recombinantes
Vacuna a
subunidades
Producida por
bacterias
recombinantes
Protenas de fusin producidas en E. coli:
Ventajas
bacterias de fcil
cultivo
rpido crecimiento
rendimiento de
produccin elevado
no se manipula el
agente patgeno
Desventajas
purificacin engorrosa
Riesgo de
desnaturalizacin
El plegamiento no
correcto puede cambiar
los epitopes
conformacionales
Ausencia de
glicosilacin
Ejemplos de vacunas veterinarias a subunidades
expresadas en plantas
Ventajas y desventajas
Tabaco: buen modelo de expresin de protenas, bajo costo de preservacin
(se mantiene por un buen periodo de tiempo), produce algunos compuestos
txicos.
Papa: fcil de manipular, fcil de propagar, almacenamiento por largos
periodos de tiempo sin refrigeracin. Necesita coccin previa que puede
desnaturalizar los antgenos y disminuir su inmunogenicidad.
Bananas: baratas, no necesita coccin, las protenas son estables. el rbol
tarda 2 o 3 aos en madurar y dar frutos. Una vez arrancada del rbol se
madura y estropean rpidamente.
Alfalfa: grandes cosechas varias veces al ao
Vacunas a genes deleteados o
insertados
J-5 E. coli
Common core
vaccine
Protein analyses of MDBK cells harvested after infection with BoHV-1 wild-type (wt)
Schnbken, BoHV-1wt 2204 (challenge virus), BoHV-1gE or BoHV-1gETK.
Lysates of infected and uninfected cells (MDBK) were separated by SDS-
PAGE, and Western blots were analysed with monoclonal antibody against
(a) glycoprotein E (94 kDa) and
(b) A monospecific rabbit-antiserum against TK (37 kDa).
Vacuna deletada
para herpes virus
bovino
Deleteada en
glicoproteina E gE
y en timidin kinasa
viral TK
Vacunas a vectores recombinantes
Vacuna a
vectores
recombinantes
Ejemplos de vacunas a vectores virales
Propiedades de vacunas a vectores
Ventajas
Permite llevar el Ag a
las diferentes zonas de
induccin
Permite lograr
respuestas inmunitarias
en mucosas,
sistmicas, humorales
y celulares
Administracin oral o
parenteral
Desventajas
Necesidad de confirmar
su no virulencia en
poblaciones
heterogneas de
animales.
Difciles de obtener
Canine Distemper-Adenovirus Type 2-Parainfluenza-Parvovirus Vaccine, Modified
Live Virus, Canarypox Vector RM Recombitek C4, Merial Ltd. USA, 1998-10-07
Canine Distemper-Adenovirus Type 2-Parainfluenza-Parvovirus Vaccine,
Modified Live Virus, Canarypox Vector, Leptospira Bacterin RM Recombitek C6,
Merial Ltd. USA, 1998-10-07
Equine Influenza Vaccine, Killed Virus, Purified Subunits
Equilis Equenza Intervet International B.V. NETH 2003-07-17
West Nile Virus Vaccine, Modified Live Virus, Canarypox Vector
Recombitek Equine West Nile Virus Merial Ltd. USA 2004-04-30
Feline Rhinotracheitis-Calici-Panleukopenia-Rabies Vaccine, Modified Live Virus,
Canarypox Vector
Purevax Feline 3/RabiesMerial Ltd. - USA2000-06-19
Rabies Vaccine, Live Canarypox Vector
Purevax Feline RabiesMerial Ltd. - USA 2000-03-30
Distemper Vaccine, Live Canarypox Vector
Purevax Ferret Distemper
Actinobacillus Pleuropneumoniae Subunit Vaccine
Pleuro-Star 4 Novartis Animal Health Canada Inc. - CAN 1997-02-14
Vacunas a ADN
Vacunas genticas
Ventajas
Fciles de manufacturar
No se inoculan
microorganismos vivos
El ADN es qumicamente
estable
Posible manipulacin de
la respuesta inmune
Respuesta inmunolgica
humoral y celular de larga
vida
Desventajas
Tolerancia
Integracin al genoma
Posibilidad de estmulo de
oncogenes
Anticuerpos anti-ADN
Antgenos proteicos o
mimotopes
vacunas a DNA
aprobadas
West Nile Virus para Equinos Lab. Fort Dodge (Powel
2004)
Haematopoietic Necrosis Virus del salmn Lab. Aqua
Health Canada Novartis (Lorenzen y col 2005)
Vacuna de melanoma oral para caninos Lab. Merial
(Bergman y col 2008)
Comparacin de la inmunizacin
con protenas o polinucletidos
LTCD4+ , CD8+ y LB Predominante LTCD4+
y LB
Respuesta celular
Msculo, piel Msculo, piel Sitios de inyeccin
Ambos, clase I y II Clase II Presentacin por
MHC
Si Solo por el adyuvante Liberacin lenta
siempre algunas Glicosilacin/
Estructura
conservadas
Clulas somticas del
husped
exgeno Origen del antgeno
DNA Protenas
Eficiencia de las vacunas de nueva generacin comparadas con la
tradicional
Diferentes esquemas de vacunacin Prime-boost
Diferentes formulaciones de
vacunas antirrbicas
Aplicaciones no clsicas
Control hormonal
Control de tejido adiposo
Anticuerpos enzimticos
Vacunas contra antgenos estomacales
del parsito
Inmunotecnologa