UNIMONTES UNIVERSIDADE ESTADUAL DE MONTES CLAROS

DISCIPLINA: BIOLOGIA DE VEGETAIS INFERIORES 1 BACHARELADO

ATUALIDADES 6 - PROF GRCIA OIAMA DOLABELA BICALHO ABRIL 2010


GODBICALHO UNIMONTES 1 BACHAREL/2010 BIOLOGIA DE VEGETAIS INFERIORES

BIOLOGIA MOLECULAR - FISH E PCR

HIBRIDIZAO IN SITU FLUORESCENTE FISH NA IDENTIFICAO DE
MICRORGANISMOS

A aplicao da BIOLOGIA MOLECULAR, principalmente pelas tcnicas de
Hibridizao in situ Fluorescente - FISH (Fluorescence in situ Hibridization), acopladas
ou no ao uso do confocal scanning laser microscopes, tm permitido, nos ltimos
anos, uma melhor percepo, por exemplo, da comunidade microbiolgica que
compe os reatores biolgicos de tratamento de esgotos.

Na sntese protica, no interior das clulas, a informao gentica encontra-se
armazenada nas seqncias nucleotdicas que compem as molculas do DNA
genmico. Esta informao inicialmente transcrita para uma seqncia de bases
chamada de RNA mensageiro (RNAm), sob a ao da enzima RNA polimerase, sendo
posteriormente traduzida numa seqncia de aminocidos que constituem uma
protena. As estruturas no interior da clula onde se processa a traduo e sntese de
protenas so os ribossomos, os quais so constitudos de protenas e outras
molculas de RNA denominados de RNA ribossomal (RNAr) (Lechner et al., 1994).

O ribossomo constitudo por duas subunidades ribossomais e cada uma destas
integra molculas de RNAr de diferentes tamanhos que podem ser definidos pelas
suas propriedades de sedimentao, designadas de unidades de Sveldberg (S).

Em ribossomos de clulas procariontes so encontradas as molculas RNAr 5S e
RNAr 23S que constituem a subunidade grande (LSU) e as molculas RNAr 16S que
constituem a subunidade pequena (SSU).

O RNA sintetizado a partir da cpia de regies especficas e bem delimitadas do
DNA. Os genes ribossomais do DNA possuem a informao gentica que codifica a
sntese de diferentes molculas de RNAr. Devido importncia celular da traduo do
RNAm em protenas ou ribossomos, provvel que a forma com que esse mecanismo
acontea tenha surgido uma nica vez na evoluo (sem sofrer alteraes). Dessa
forma, grande parte das seqncias de bases das unidades RNAr 5S, 16S e 23S
podem ser consideradas conservadas, assim como os genes que as codificam (Abreu,
2004). Segundo Woese (1987), a seqncia de gene DNAr 16S pode ser utilizada
como molcula relgio para o estudo da forma como os procariontes tm evoludo ao
longo do tempo.

Atualmente o RNAr e os seus genes correspondentes (DNAr) so utilizados como
marcas biolgicas da evoluo, devido as seguintes razes (Olsen et al., 1986):

1. O RNAr est presente no processo de sntese proteica e tem a mesma funo em
todos os organismos;

2. A estrutura do RNAr conservada sendo relativamente baixa a taxa de mutao
durante a evoluo quando comparado a outros genes;

3. Os RNAr e seus genes so facilmente acessveis pelas tcnicas de PCR
Polymerase Chain Reaction - e sequenciao;

4. As molculas RNAr 16S e RNAr 23S contm suficiente informao permitindo
comparaes significativas e satisfatrias;
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5. Acredita-se no ocorrer transferncia de genes de RNAr entre organismos; relaes
entre RNAr refletem relaes de evoluo.

BIBLIOGRAFIA

ABREU, A. A. V. Identificao de bactrias filamentosas em processos de lamas
activadas atravs da tcnica de Hibridizao in situ Fluorescncia (FISH). Dissertao.
Departamento de Engenharia Biolgica, Universidade do Minho, Portugal, 2004. 142p.

LECHNER, M., TELHADA, M. Expresso dos genes. Transcrio. In: AZEVEDO, C.
Biologia Celular. Ed. Lidel Edies Tcnicas, 1994. pp 159-172.

OLSEN, G. J.; LANE D. J.; GIOVANNONI, S. J.; STAHL, D. A. Microbial ecology and
evolution: A ribosomal RNA approach. 1986, Ann. Rev. Microbial. 40: 337-365.

Tese apresentada ao Programa de Ps-Graduao em Engenharia Ambiental da
UFSC, junho, 2005.

WOESE, C. R. Bacterial evolution. Microbiol, 1987. Rev. 51: 221-271.
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