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Bioqumica do Sangue
Principais funes do sangue
1) Respirao transportar oxignio dos pulmes para os tecidos e
CO
2
dos tecidos para os pulmes
2) Nutrio transportar os nutrientes absorvidos
3) Excreo transportar dejetos metablicos para os rins,
pulmes pele e intestinos visando eliminao
Papel fundamental na manuteno da homeostasia
pulmes, pele e intestinos visando eliminao
4) Manuteno do equilbrio cido-bsico. Tampes: bicarbonato,
fosfato, proteinato, hemoglobinato
5) Regulao do balano hdrico
6) Regulao da temperatura corporal por distribuio do calor
corporal
7) Defesa contra infeco por ao dos leuccitos e anticorpos
circulantes
8) Transporte de hormnios e regulao metablica
9) Transporte dos metablitos
10) Coagulao
Composio do sangue
Plasma
- Protenas: Albumina, Globulinas
(imunoglobulinas), Fibrinognio
- gua
- Eletrlitos: Na
+
, K
+
, Ca
2+
, Cl
-
, HCO
3
-
...
Compostos orgnicos no proticos: - Compostos orgnicos no-proticos:
aminocidos, creatinina, uria, bilirrubina,
hormnios...
Elementos figurados
- Hemcias (5 x 10
6
/mm
3
), Leuccitos (~5-10 x
10
3
/mm
3
), Plaquetas (300 x 10
3
/mm
3
)
Leuccitos
Proteo contra infeces penetram nos tecidos circundantes
A maioria produzida na medula ssea, alguns no timo e outros
amadurecem no interior de diversos tecidos
Controlam sua prpria sntese atravs da liberao de peptdeos
sinalizadores
Trombcitos (plaquetas)
Formadas na medula ssea.
A sua principal funo a
formao de cogulos,
participando portanto do
processo de coagulao
sangunea sangunea.
A trombina converte o
fibrinognio, um fator da
coagulao solvel, em longos
filamentos insolveis de fibrina
que irradiam do aglomerado
de plaquetas e formam uma
rede que aprisiona mais
plaquetas e clulas
sangneas.
Hemcias
Clulas incomuns, uma vez que no tm ncleo
2,3 x 10
13
hemcias ~2,5 a 3,0 kg do peso corporal
Vel. de sntese ~2,3 x 10
6
cls/seg
No possui ncleo, mitocndria, lisossomos, ribossomos e complexo de
G l i C d 95% d t i t l l d Golgi. Cerca de 95% das protenas intracelulares corresponde
hemoglobina
Sintetiza ATP por meio da gliclise, o que ajuda as hemcias a
manterem o formato bicncavo e a regularem o transporte de ons
Durao normal de vida de 120 dias (menos de 1% substitudo
diariamente
So o produto final da eritropoese da medula ssea, que controlada
pela eritropoetina produzida pelos rins
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~85% da
sntese do
heme ocorre
aqui. O
restante
principalmente
nos
hepatcitos
72h
48h
Protenas do plasma
Adivinhem onde a maioria delas sintetizada?
A maioria glicosilada (albumina a principal exceo)
Principal mtodo de anlise a eletroforese (em laboratrios de anlises
clnicas utiliza-se principalmente a eletroforese em acetato de celulose)
Function Plasma Proteins
Antiproteases Antichymotrypsin
1
-Antitrypsin (
1
-antiproteinase)
2
-Macroglobulin
Antithrombin
Coagulao sangunea Various coagulation factors, fibrinogen
Enzimas Function in blood, eg, coagulation factors, cholinesterase
Leakage from cells or tissues, eg, aminotransferases
Hormnios Erythropoietin
1
Defesa imunolgica Immunoglobulins, complement proteins,
2
-microglobulin
Atuao nas respostas inflamatrias Acute phase response proteins (eg, C-reactive protein,
1
-acid glycoprotein [orosomucoid])
Oncofetal -Fetoprotein (AFP) marcador tumoral
Protenas de transporte ou ligao Albumin (various ligands, including bilirubin, free fatty acids, ions [Ca
2+
], metals [eg, Cu
2+
,
Zn
2+
], metheme, steroids, other hormones, and a variety of drugs)
Ceruloplasmin (contains Cu
2+
; albumin probably more important in physiologic transport of
Cu
2+
)
Corticosteroid-binding globulin (transcortin) (binds cortisol)
Haptoglobin (binds extracorpuscular hemoglobin)
Lipoproteins (chylomicrons, VLDL, LDL, HDL)
Hemopexin (binds heme)
Retinol-binding protein (binds retinol)
Sex hormone-binding globulin (binds testosterone, estradiol)
Thyroid-binding globulin (binds T
4
, T
3
)
Transferrin (transport iron)
Transthyretin (formerly prealbumin; binds T
4
and forms a complex with retinol-binding protein)
Protenas do plasma
Albumina
- Concentrao plasmtica:3,5 5,0 g/100mL
(maior quantidade no plasma)
- Sintetizada no fgado Sintetizada no fgado
- Principais funes: regular a presso onctica e
ligar e transportar hormnios, cidos graxos,
bilirrubina, metais, produtos txicos
- 5g/kg de peso corporal 40% na circulao
- Importncia no laboratrio de pesquisa
Protenas do plasma
Ceruloplasmina
- Protena transportadora do cobre (nutriente essencial
para a sntese do heme, desenvolvimento sseo e
funo nervosa)
Doena de Wilson: acmulo de cobre - Doena de Wilson: acmulo de cobre
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Protenas do plasma
Fibrinognio
- Fator 1 da coagulao
- nico dos fatores detectvel por mtodos
bioqumicos bioqumicos
- Constitudo por duas subunidades, cada uma
com 3 cadeias polipeptdicas (, e ) unidas
entre si por pontes dissulfeto
Protenas do plasma
Globulinas
- 1, 2, ,
- e - Sintetizadas no fgado
- Gamaglobulinas: sintetizadas pelas clulas g p
plasmticas
- Concentrao medida por mtodos
eletroforticos
- Aumento de globulinas: desordens inflamatrias
crnicas
Hemoglobina estrutura e funo
Principal protena transportadora de oxignio
Tetrmero de duas subunidades de -globina e
duas de -globina:
2

2
(adultos)
Tipos de hemoglobina
Hemoglobina adulta vs hemoglobina fetal e
embrionria -
2

2
Tipos de hemoglobina
Alteraes durante o desenvolvimento
Developmental pattern of the quaternary structure of fetal and newborn hemoglobins. (Reproduced, with
permission, from Ganong WF: Review of Medical Physiology, 20th ed. McGraw-Hill, 2001.)
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Tipos de hemoglobina
Hemoglobinas anormais mutaes que provocam alteraes na
estrutura (*) ou diminuio da sntese das cadeias polipeptdicas
(*) Estrutura instvel, afinidade por oxignio alterada ou oxidao
de Fe
2+
a Fe
3+
(metahemoglobina)
Hemoglobina S: substituio de um resduo de glutamato (radical
polar) por um resduo de valina (radical apolar) nas cadeias -
agregao em baixas PO
2
devido s ligaes hidrofbicas agregao em baixas PO
2
devido s ligaes hidrofbicas
Hemoglobina normal e anormal podem ser separadas por
eletroforese e cromatografia
Tipos de hemoglobina
Metahemoglobina: no liga oxignio. Colorao marrom de carnes
deterioradas; pacientes cianticos (alta concentrao de desoxi-
Hb)
Hemoglobinas instveis - 1) estrutura espacial distorcida devido
ruptura de elementos da estrutura terciria que interrompe a -
hlice (p.ex. substituio de um aminocido por prolina)
- 2) associao com o grupo heme torna-
se mais lbil (troca de um aminocido apolar por um polar) se mais lbil (troca de um aminocido apolar por um polar)
Por que a prolina
uma m-formadora de
-hlice?
O grupo heme
Grupo prosttico associado
hemoglobina e mioglobina,
contendo um on Fe
2+
em sua
estrutura
uma porfirina do tipo III
Porfirinas so compostos Porfirinas so compostos
cclicos resultantes da ligao
de quatro ncleos pirrlicos
atravs de pontes de metileno
(-HC=), contendo cadeias
laterais variveis
Hemoprotenas
Protenas que contm heme
Table 311. Examples of Some Important Human and Animal Hemoproteins.
1
Protein Function
Hemoglobin Transport of oxygen in blood
Myoglobin Storage of oxygen in muscle
Cytochrome c Involvement in electron transport chain
Cytochrome P450 Hydroxylation of xenobiotics
Catalase Degradation of hydrogen peroxide
Tryptophan pyrrolase Oxidation of tryptophan
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Porfirinas e pigmentos biliares
Compostos diretamente relacionados j que o heme
sintetizado a partir das porfirinas e ferro, enquanto os
produtos da sua decomposio so pigmentos biliares e
ferro
Biossntese do heme
Ocorre na maioria das clulas dos
mamferos, com exceo dos eritrcitos
maduros, que no possuem mitocndrias
~85%ocorre nas clulas precursoras ~85% ocorre nas clulas precursoras
eritrides da medula ssea e ~15% nos
hepatcitos
Heme sintetizado a partir de
Succinil-CoA e glicina
Mitocndria
Citosol
PBG
HMB
PBG
PBG
HMB
Porfirinognios so facilmente
auto-oxidveis em suas
respectivas porfirinas. Essa
reao catalizada pela luz e
pelas porfirinas j formadas
Todos os porfirinognios so incolores (no apresentam anis conjugados)...
... Mas todas as porfirinas so coloridas
Absorption spectrum of hematoporphyrin (0.01% solution in 5% HCl).
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Quando porfirinas dissolvidas em cidos minerais fortes ou em solventes
orgnicos so iluminadas com luz UV, elas emitem uma fluorescncia vermelha
intensa.
As duplas ligaes entre os anis pirrlicos so responsveis por esta
caracterstica.
Uma interessante aplicao das propriedades fotodinmicas das porfirinas o Uma interessante aplicao das propriedades fotodinmicas das porfirinas o
seu possvel uso no tratamento de certos tipos de cncer (fototerapia do cncer).
Em geral os tumores captam mais porfirinas que os tecidos normais.
Hematoporfirinas ou outro composto semelhante administrado ao paciente e o
tumor ento exposto a laser de argnio, que excita as porfirinas e produz efeito
txicos.
Regulao da
Biossntese do
heme
Porfirias
Grupo de distrbios causados por anormalidades da
biossntese do heme e podem ser genricas ou
adquiridas
Se a anormalidade ocorrer em uma etapa precoce p p
(antes da formao dos porfirinognios), haver
acmulo de ALA e PBG
Dor abdominal e sintomas neuropsiquitricos
Porfirias
Bloqueios enzimticos tardios provocam acmulo dos
porfirinognios, que sofrem oxidao.
400 nm: porfirinas excitadas ROS
Lise de lisossomos e outras organelas: leses cutneas
F t ibilid d d fi Fotossensibilidade e desfigurao grave
Rei George III (sc. XVIII): lobisomem ou vampiro???
Para saber mais:
A Vampire Story: Science, Folklore and
Beyond http://www.if.uj.edu.pl/Foton/92-
special%20issue/pdf/07%20wampiry.pdf
Porfirias
Biochemical causes of the major signs and symptoms of the porphyrias
Catabolismo do heme
Em condies fisiolgicas, seres humanos
adultos destroem 1 a 2 x 10
8
eritrcitos
por hora (em um dia, 6g de hemoglobina)
Destruio da hemoglobina: Destruio da hemoglobina:
decomposio em aminocidos
constituintes; ferro do heme tambm
reaproveitado; porfirina decomposta no
fgado, bao e medula ssea
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Catabolismo
do heme
Ocorre nas
mitocndrias,
atravs de um
Concentrao
normal ~17 M
complexo
denominado
heme oxigenase
Excretado
nas aves e
anfbios
Metabolismo
da bilirrubina
Conjugao da bilirrubina:
ligao desta ao cido ligao desta ao cido
glucornico, tornando-a polar
Structure of bilirubin diglucuronide (conjugated, "direct-reacting" Structure of bilirubin diglucuronide (conjugated, direct reacting
bilirubin). Glucuronic acid is attached via ester linkage to the two
propionic acid groups of bilirubin to form an acylglucuronide
Diagrammatic representation of the three major processes (uptake,
conjugation, and secretion) involved in the transfer of bilirubin from blood
to bile. Certain proteins of hepatocytes, such as ligandin (a member of the
glutathione S-transferase family of enzymes) and Y protein, bind
intracellular bilirubin and may prevent its efflux into the blood stream. The
process affected in a number of conditions causing jaundice is also shown.
Hiperbilirrubinemia causa Ictercia
Concentraes no sangue acima de 17,1 M (produo
em excesso ou impossibilidade de excreo). O
pigmento difunde-se para os tecidos, que ficam
amarelados.
Deteco de bilirrubina: reagente de Ehrlich
- Bilirrubina conjugada (direta): detectada sem adio de
metanol
Reao de van den Bergh (influncia do acaso na
cincia)
cido sulfanlico diazotado + bilirrubina azobilirrubina
(vermelha)
- Bilirrubina livre ou indireta (que no hidrossolvel):
detectada apenas com adio de metanol
Hiperbilirrubinemia
Hiperbilirrunemia de reteno produo excessiva
(bilirrubina livre)
Hiperbilirrunemia de regurgitao refluxo para a
corrente sangunea (obstruo do sistema biliar)
Bilirrubina livre (hidrofbica) pode atravessar a barreira ( ) p
hematoenceflica encefalopatia (ictercia nuclear)
Ictercia colrica: pigmentos biliares na urina
(regurgitao)
Ictercia acolrica: quantidades excessivas de bilirrubina
livre
Ictercias
Pr-hepticas (p.ex. anemia hemoltica)
Hepticas (p. ex. hepatite)
Ps-hepticas (p.ex. obstruo do ducto biliar)
Ictercia fisiolgica neonatal imaturidade do sistema de captao,
conjugao e secreo de bilirrubina
Fenobarbital