Fase Preparatria: (Reaco 1 a 5) Fosforilao da glicose e
a sua converso a gliceraldedo 3-fosfato. So necessrios 2 ATPs para iniciar o processo. Gliclise Fase Payoff: (Reaco 6 a 10) Oxidao de gliceraldedo 3- -fosfato a piruvato e consequente formao de ATP e NADH. Ocorre ganho energtico.
Objectivos da Gliclise Produzir energia metablica sob a forma de ATP;
Produzir piruvato como produto final que ser metabolizado por uma de trs vias catablicas diferentes.
Reaco 1 Fosforilao da Glicose a Glicose 6-fosfato Ocorre a hidrlise do ATP que origina ADP e um grupo fosforilo (Pi). So duas reaces acopladas e exergnicas. O grupo fosforilo reage com a glicose originando glicose 6-fosfato. A reaco catalisada pela enzima hexocinase, uma quinase (enzimas que catalizam as transferncias do terminal fosforilo do ATP para um aceitador nucleoflico). Esta enzima pouco especfica para a glicose, actuando tambm noutras oses. Requer como cofactor o Mg 2+ para a sua actividade porque o substrato para esta enzima no o ATP 4- mas sim o complexo MgATP 2- .
Reaco 2 Converso da Glicose 6-Fosfato em Frutose 6-Fosfato A enzima fosfohexose-isomerase catalisa a isomerizao reversvel da glicose 6-fosfato, uma aldose, em frutose 6-fosfato, uma cetose. A reaco pode prosseguir em qualquer das direces devido ao baixo valor de energia livre. Do-se rearranjos no grupo carbonilo e hidroxilo dos carbonos 1 e 2 da glicose 6-fosfato.
Reaco 3 Fosforilao da Frutose 6-Fosfato em Frutose 1,6-Bisfosfato Ocorre a hidrlise do ATP que origina ADP e um grupo fosforilo (Pi). So duas reaces acopladas. A enzima fosfofrutocinase-1 catalisa a transferncia de um grupo fosforilo do ATP para a Frutose 6-Fosfato que origina Frutose 1,6-Bisfosfato, reaco irreversvel. Requer como cofactor Mg 2+ . o primeiro passo que caracteriza realmente a gliclise, porque at aqui a glicose 6-fosfato e a frutose 6-fosfato podiam ter outros destinos.
Reaco 4 Ciso da frutose 1,6 difosfato em trioses-fosfato A ciso da frutose 1,6-bisfosfato por aco da enzima aldolase origina duas trioses-fosfato: o gliceraldedo 3-fosfato, uma aldose, e a di-hidroxiacetona -fosfato, uma cetose. Trata-se de uma reaco reversvel, apesar da energia livre de Gibbs ser fortemente positiva no sentido da ciso da frutose.
Reaco 5 Interconverso das Trioses Fosfato O gliceraldedo 3-fosfato um composto pode ser degradado directamente nos passos seguintes da gliclise. A outra triose, a di-hidroxiacetona-fosfato no degradado nos passos seguintes da gliclise, por isso tem de ser convertida em gliceraldedo 3-fosfato pela triose-fosfato-isomerase. O mecanismo desta reaco similar ao da reaco 2. Esta reaco completa a Fase Preparatria da Gliclise.
Trabalho Realizado por: Ana Ferreira, n 58446 Catarina Palma, n 57786 Marta Meneses, n 58415 Grupo 4 MEBM IST 2007/2008 Reaco 6 A Oxidao do Gliceraldedo 3-Fosfato em 1,3-Bisfosfoglicerato Trata-se da primeira reaco da fase Payoff. Esta reaco ocorre atravs de uma srie de passos intermdios: O gliceraldedo 3-fosfato liga-se covalentemente enzima gliceraldedo-3-fosfato-desidrogenase; O grupo aldedo do gliceraldedo 3-fosfato reage com o grupo sufidrilo da enzima, dando origem a um tio semi-acetal (composto intermdio entre lcoois e steres); O tiosemi-acetal oxidado a tio-ster pelo NAD + , que se reduz a NADH; O NADH formado abandona o centro activo e substitudo por outra molcula de NAD + ; A ligao entre o tio-ster e a enzima tem uma energia livre padro muito elevada; Um grupo fosforilo quebra esta ligao formando um composto que conserva a energia livre desta ligao 1,3-Bisfosfoglicerato.
Reaco 7 Transferncia de um grupo fosforilo do 1,3- Bisfosfoglicerato para o ADP A enzima fosfoglicerato-cinase transfere o grupo fosforilo de alta energia do grupo carboxilo do 1,3- Bisfosfoglicerato para o ADP formando ATP e 3- fosfoglicerato. Nesta reaco ocorre uma fosforilao custa do substrato porque a energia libertada na hidrlise do grupo fosforilo imediatamente utilizada na sntese de um ATP, a partir do ADP.
Reaco 8 Converso de 3-Fosfoglicerato para 2- Fosfoglicerato A enzima fosfoglicerato-mutase catalisa a mudana do grupo fosforilo do C-2 para o C-3 do glicerato.O Mg2+ essencial para esta reaco. Esta reaco ocorre em dois passos: Pi (ligado enzima) Transfere C-2 do3-Fosfoglicerato
Origina 2,3-difosfoglicerato Transfere o grupo do C-3
para a enzima Origina 2-Fosfoglicerato Regenera enzima
Reaco 10 Transferncia do Grupo Fosforilo do Fosfoenolpiruvato para o ADP O ltimo passo da gliclise a transferncia de um grupo fosforilo do Fosfoenolpiruvato para o ADP, catalisado pela enzima piruvato-cinase o que requer o io K + e Mg 2+ ou Mn 2+ . Inicialmente, o piruvato aparece na sua forma enol, tautomerizando-se, na sua forma cetnica que predomina a pH 7, o piruvato. Ocorre novamente uma fosforilao custa do substrato, pois o grupo fosforilo imediatamente transferido para o ADP, formando ATP, onde se conserva a energia na ligao fosfoanidrido.
Rendimento Energtico da Gliclise
A gliclise tem um rendimento energtico de 4 ATPs na fase Payoff, mas como foram investidas 2 molculas de ATP na fase Preparatria, o rendimento total = 2 ATPs. Em meios aerbios, o piruvato metabolizado atravs do Ciclo de Krebs e fosforilao oxidativa tendo um rendimento total = 30 ATPs em aerobiose + 2 ATPs na gliclise = 32 ATPs. Em meios anaerbios, o piruvato metabolizado atravs da fermentao lctica, onde no produzido ATP. O rendimento final = 2 ATPs na gliclise.
Reaco 9 Desidratao de 2-Fosfoglicerato em Fosfoenolpiruvato A enzima enolase promove a remoo reversvel de uma molcula de gua de 2-fosfoglicerato para originar fosfoenolpiruvato. Apesar da energia livre de Gibbs ser relativamente baixa nesta reaco, a desidratao favorecida porque h uma elevada diferena no valor da energia livre de Gibbs da hidrlise dos grupos fosforilo do reagente e do produto.
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G Gl li ic co os se e 2 2 P Pi ir ru uv va at to os s F Fe er rm me en nt ta a o o L L c ct ti ic ca a R Re es sp pi ir ra a o o A Ae er r b bi ia a 2 Lactatos 6 6C CO O 2 2 + + 2 2H H 2 2 O O 2 ATPs 30 ATPs Destinos Finais do Piruvato Hexocinase OXIDAO DE OUTRAS HEXOSES
Na maior parte dos organismos, outras hexoses como a Frutose, a Manose e a Galactose, podem participar na gliclise, aps converso para o derivado fosforilado.
Frutose Msculos e rins: Frutose + ATP Frutose 6 fosfato + ADP
Fgado: Frutose + ATP Frutose 1 fosfato + ADP
Gliceraldedo Di-hidroxiacetona-fosfato
Gliceraldedo 3-fosfato Galactose (ocorre no Fgado): Galactose + ATP Galactose 1 fosfato + ADP
Glicose 1-fosfato
Glicose 6- Fosfato
Manose: Manose + ATP Manose 6 fosfato + ADP
Frutose 6 fosfato
REGULAO NO HORMONAL DA GLICLISE A gliclise processa-se no citosol e regulada por trs enzimas, que correspondem s enzimas que catalisam reaces unidireccionais.
ACTIVADORES INIBIDORES HEXOCINASES I,II E II ----- Glicose 6 - Fosfato HEXOCINASE IV ----- Protena especfica (dissociada pela glicose) FOSFOFRUTOCINASE - 1 AMP, ADP, e a frutose-2,6-bisfosfato (induz a produo de frutose-1,6-bisfosfato;no intermedirio da gliclise) ATP ,Frutose-1,6- bisfosfato e citrato PIRUVATO- CINASE Frutose 1-6-bisfosfato ATP, Acetil-CoA, cidos gordos de cadeia longa e a Alanina Frutocinase Galactocinase Hexocinase Frutose 1 fosfato aldolase Triose-fosfato isomerase Triose cinase Fosfoglicomutase Fosfomanose isomerase A oxidao destes monossacridos permite a obteno de energia a partir de molculas alternativas glicose, o que se revela extremamente vantajoso em situao de dfice de glicose.
RELAO NAD+/NADH necessria uma constante reoxidao do NADH, para evitar um bloqueio da oxidao do Gliceraledo 3-fosfato. Aerobiose Sistema Transportador de Electres Anaerobiose - Fermentao Lctica - Fermentao Alcolica - Formao do -glicerofosfato e do glicerol
VIA DAS FOSFOPENTOSES
Objectivos: - Produo de NADPH; - Obteno de ribose-5-fosfato necessrios sntese de cidos nucleicos. Sequncia:
Fase oxidante Fase no-oxidante
Produtos: - NADH: manuteno do ambiente redutor no interior da clula; elemento fundamental na biossntese redutora de cidos gordos e outras molculas, actuando como agente redutor. - Ribose-5-fosfato (fim da fase oxidante): percursor na sntese de nucletidos para a incorporao nos cidos nucleicos. - Frutose-6-fosfato e Gliceraldedo-3-fosfato (fim da fase no-oxidante): podem incorporar-se na via glicoltica, tanto no sentido da gliclise como no sentido da gliconeognese.
Regulao Hormonal: Regulao NADP + /NADPH:
Oxidao Reduo Isomerizao Descarboxilao Oxidante - Ocorre isomerizao da ribose-5-fosfato para xilulose-5-fosfato, atravs da fosfopentose-isomerase. - Ocorrem 2 transcetolisaes, mediadas pela enzima transcetolase, que consiste na transferncia de grupos com 2 tomos de Carbono. - Ocorre 1 transaldolisao, mediada pela enzima transaldolase, que consiste na transferncia de grupos com 3 tomos de Carbono. - I nsulina: Esta actua ao nvel da transcrio induzindo a sntese das desidrogenases da glicose- 6-fosfato e do 6-fosfogliconato; enquanto que o NADPH inibidor da desidrogenase da glicose-6- fosfato. O aumento da quantidade de insulina associada descida da concentrao do NADPH, provocada pela estimulao da sntese de cidos gordos, leva a que em casos de nveis de insulina elevados a via das fosfopentoses seja activada. Em casos de nveis de insulina baixos acontece o inverso a via das fosfopentoses inibida. - Factor mais importante na regulao da via. A fase no-oxidante apenas ocorre se a clula necessitar de NADPH e no precisar d ribose-5-fosfato. - Processo aerbio, visto que no existe nenhum mecanismo especfico (alm do sistema transportador de electres) que permita a reoxidao dos coenzimas reduzidos durante as reaces de oxidao.